הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הערכות של חמצון והזרמת כלי דם במודלים פרה-קליניים של סרטן וריפוי פצעים באמצעות OS-DCE OAI

286 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/70689

⸱

7 באפריל 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Medical Physics, University of Wisconsin, 2University of Texas MD Anderson Cancer Center

במאמר זה

סיכום

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לביצוע הדמיה אופטואקוסטית מופרזת בקונטרסט דינמי (OS-DCE OAI) להערכת מודלים פרה-קליניים של סרטן וריפוי פצעים. OS OAI יכול לצלם אוקסי-המוגלובין ודאוקסיהמוגלובין, תוך מיפוי חמצון רקמות. DCE-OAI יכול לצלם את הפרמקוקינטיקה של חומר ניגוד חיצוני, ובכך למפות את הפרפוזיה הוסקולרית.

תקציר

הדמיה אופטואקוסטית רגישה לחמצן (OS OAI) והדמיה אופטואקוסטית משופרת בניגודיות דינמית (DCE OAI) מספקות קריאות משלימות ולא פולשניות של פיזיולוגיית הרקמות. OS OAI מנצל גילוי רב-ספקטרלי של אוקסי-המוגלובין אנדוגני ודיאוקסיהמוגלובין ליצירת מפות של רוויית חמצן בדם (%sO₂), בעוד ש-DCE OAI עוקב אחר הפרמקוקינטיקה הקיימת של סופג אינפרא-אדום קרוב כדי לכמת את הפרפוזיה והחדירות הוסקולרית. מטרת הפרוטוקול היא להציג תהליך OAI מאוחד של OS-DCE המאפשר הערכה סימולטנית של חמצון ופרפוזיה בשני מסגרות פרה-קליניות נפוצות: גידולי סרטן השד אורתוטופיים ופצעים עוריים בעובי מלא.

בפרוטוקול זה הדגמנו OAI של מודלים של עכברים של סרטן השד או פצע חתך. עבור OS OAI, סריקות רב-ספקטרליות מרובות פרוסות נרכשות ב-700–875 ננומטר כדי לאפשר פירוק ספקטרלי והערכה של %sO₂. עבור DCE OAI, רכישות חוזרות ברזולוציה זמנית של ≤5 שניות מתבצעות לפני ואחרי הזרקת בולוס תוך-ורידי של אינדוציאנין גרין (ICG), באמצעות דגימה רב-ספקטרלית ב-700-875 ננומטר או דגימה באורך גל יחיד ב-800 ננומטר ליצירת עקומות משרעת זמן לעומת אות OA. פיתוח מודלים של בעלי חיים, ההכנה להדמיית OA, רכישות OAI של OS ו-DCE, וניתוחים למדידת מאפייני חמצון ופרפוזיה וסקולרית מפורטים, יחד עם הנחיות מרכזיות לפתרון תקלות לתפקודי תנועה, סופגים שטחיים והזרקות כושלות.

יחד, פרוטוקול OS-DCE OAI מספק דיוקן תפקודי משולב של היפוקסיה והובלת כלי דם, שיכול לזהות שינויים פיזיולוגיים בגידולים ובפצעים לפני מדידות אנטומיות גסות. OS-DCE OAI ניתן להסתגל בקלות למודלים של מחלות אחרות.

מבוא

הדמיה אופטואקוסטית (OAI), המכונה גם הדמיה פוטואקוסטית או טומוגרפיה אופטואקוסטית רב-ספקטרלית, היא שיטה יחסית חדשה שמחברת עירור אופטי עם גילוי אולטרסאונד (US) כדי לאפשר הדמיית רקמות עמוקות 1,2. ב-OAI, פולסי לייזר ננו-שניות קצרים מעוררים כרומופורים אנדוגניים כמו אוקסי-המוגלובין ודאוקסי-המוגלובין, ומייצרים התרחבות תרמואלסטית מקומית וגלים אקוסטיים רחבי פס המזוהים על ידי טרנסדיוסרים אמריקאיים. אותות אלו מאפשרים ל-OAI להפיק תמונות עם ניגודיות אופטית ברזולוציה מרחבית דמוית אולטרסאונד, תוך השגת עומק ראייה בקנה מידה סנטימטר ב-vivo. כאשר נתונים נאספים באורכי גל שונים ומנותחים באמצעות פירוק ספקטרלי, OAI רגיש לחמצן (OS) יכול להעריך ריכוזים יחסיים של אוקסי-המוגלובין ודאוקסהמוגלובין ובכך להסיק רוויית חמצן ברקמה (%sO₂)2. רוויית חמצן בדם מספקת הערכה פונקציונלית של הפיזיולוגיה המיקרווסקולרית שקשה לגשת אליה באופן לא פולשני בשיטות אחרות.

פרפוזיה וסקולרית שימושית גם להערכות פיזיולוגיה מיקרווסקולרית. פרפוזיה כלי דם מייצגת שילוב של זרימת כלי דם, חדירות ושטח פנים כלי דם3. כדי לכמת את הפרפוזיה, ניתן להשתמש ב-OAI עם חומר ניגוד חיצוני לביצוע DCE OAI (DCE OAI). בגישה זו, הדמיה טמפורלית לפני, במהלך ואחרי הזרקת חומר הניגוד עוקבת אחרי הפרמקוקינטיקה (PK) של החומר. ניתן למודל תוצאות אלו כדי למדוד את קצב השטיפה (NK trans) ממחלקת הפלזמה בדם אל המחלקה החוץ-תאית של הגידול, ואת קצב השטיפה (kep) מהמחיצה החוץ-תאית של הגידול לתא הפלזמה. פיתחנו שיטת מידול PK שמונעת את הבעיה הידועה לשמצה של שטף האור (כלומר, פיזור וספיגה ברקמות הגורמות לאנרגיית קרינה משתנה דרך הרקמה)4. השיטה שלנו מנרמלת את השינוי באות OAI הדינמי מ-0% (לפני הזרקה מוקדמת) ל-100% (הגברה מקסימלית) ואז משתמשת במשוואות דיפרנציאליות להערכת קצבהשטיפה של הטרנס NK ואתה-k ep. מחקרים אחרים של DCE OAI השתמשו בשיטות מידול PK סטנדרטיות הסובלות מההנחה העיקרית ששטף האור אחיד בכל הרקמה 5,6.

תוצאות DCE OAI יכולות לשמש גם להערכת שיעורי השטיפה על ידי ביצוע מדידות אמפיריות של שיפור האות המקסימלי (MSE), זמן לשיא (TTP) להגיע ל-MSE, שיפוע (בדרך כלל להזרקה ל-TTP), ושטח התחלתי מתחת לעקומה (IAUC; שוב בדרך כלל להזרקה ל-TTP לאחר ההזרקה)7. יש לציין שאם ה-TTP מתרחש מאוחר יותר בעקומת ה-PK, ניתן לקחת את השיפוע או IAUC במהלך החלק הליניארי של העקומה או מזמן ההזרקה ועד דקה לאחר ההזרקה. הראינו שמדידות אמפיריות יכולות להיות שימושיות גם בעת הערכת טיפולים הניתנים למודלים של גידולים או בעת הערכת ריפוי פצעים 8,9. מחקרים נוספים הראו גם ערך בשימוש במדידות אמפיריות להערכת חדירות כלי הדם של הגידול ופיברוזיס בכבד10,11. צורת עקומת PK יכולה לשמש גם לסיווג איכותי של פרפוזיה וסקולרית בגידול כגבוה או נמוך 12,13,14.

בנוסף, אות ה-OAI בנקודת זמן אחת לאחר ההזרקה יכול לשמש כהערכה אמפירית של פרפוזיה, הידועה כ-OAI ENHANCED CONTRAST NON-DYNAMIC (CE OAI)15. תמונת CE OA שמציגה גידול או פצע בהיר היא פשוטה ומאוד ויזואלית, ובכל זאת משמשת לעיתים קרובות רק להערכה איכותית של פרפוזיה גבוהה לעומת נמוכה. באופן כללי, השינוי הדינמי באותות OAI לאחר TTP אינו מנותח כדי להעריך אמפירית את הפרפוזיה הוסקולרית בגידולים. עם זאת, כפי שמוצג למטה, שיעורי השטיפה בפצעים הם מהירים מאוד, ולכן NKtrans, TTP, שיפוע ו-IAUC קשים למדידה. לכן, השתמשנו בשיפוע הליניארי או האקספוננציאלי של שלב השטיפה כמדד אמפירי לפרפוזיה וסקולרית בפצעים9.

רוב סוכני OAI סופגים בטווח אורכי הגל של אינפרא-אדום קרוב (NIR), שיכול לחדור עמוק יותר לרקמות16,17. עם זאת, ספיגת מים באורכי גל הגבוהים מ-900 ננומטר מגבילה את טווח אורכי הגל השימושי של OAI בחיים ל-700–900 ננומטר ברוב היישומים2. אינדוציאנין גרין (ICG) הוא סוכן OAI פרוטוטיפי של DCE משום שהוא מציע ספיגת NIR חזקה ב-780–800 ננומטר, מייצר אות OAI חזק יחסית, ויש לו תאימות ביולוגית טובה עם אישור FDA לשימוש קליני. תכונות אלו מאפשרות ניגודיות תוך-כלי וקימורי PK ניתנים לפרשנות.

פיתחנו פרוטוקול משולב OS-DCE OAI להערכת חמצון ופרפוזיה וסקולרית במודלים פרה-קליניים של גידולים מוצקים ופצעים 8,9. החלק של מערכת ההפעלה בפרוטוקול זה יכול להעריך חמצון בפרוסות הדמיה מרובות שיכולות לכסות נפחי גידול ופצע שלמים במודלים של עכברים. החלק של DCE בפרוטוקול שלנו כולל אפשרות לצלם פרוסה אחת של הגידול או הפצע באמצעות מספר אורכי גל לייזר (משפרים את דיוק זיהוי חומר הניגוד), או לצלם עד 5 פרוסות באורך גל לייזר אחד (לשיפור הכיסוי המרחבי). השתמשנו ב-OS-DCE OAI כדי לעקוב אחר השינוי בחמצון ובפרפוזיה וסקולרית לאחר טיפול במודל גידול באמצעות רדיותרפיה או עם קומברטסטטין A4 פוספט, חומר מפריע לכלי דם 4,8. השתמשנו גם ב-OS-DCE OAI כדי לעקוב אחרי ריפוי פצעים9. DCE OAI מעניק ל-OAI את היכולת לעקוב אחר התקדמות באמצעות פרפוזיה וסקולרית שניתן ליישם על מגוון מחלות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

בצע את כל ההליכים באישור ועדת טיפול ושימוש בבעלי חיים מוסדית (IACUC) של המוסד שלך. כל ההליכים בפרוטוקול שלהלן אושרו על ידי ה-IACUC של המוסד שלנו.

1. הרדמה (לפרוצדורות הבאות)

  1. השרה הרדמה. בהתחלה יש לשרות ולשמור על הרדמה עם 5% איזופלוראן בגז נשא חמצן 100% עד שהעכבר כבר לא ער.
  2. לשמור על הרדמה. המשך להרדים את העכבר עם 1.5–2% איזופלוראן בגז נשא חמצן 100%. בדוק את היעדר רפלקס הפדלים.
  3. שמור על נורמית. הקפידו לשמור על בעלי החיים על משטח חם ולעקוב אחרי הטמפרטורה לאורך כל תקופת ההרדמה.
    הערה: (נקודת הפסקה) יש לעבור להשתלת גידול או להיווצרות פצע לאחר שבעל חיים מורדם לחלוטין.

2. הכנת המודל

הערה: כל עבודת התאים צריכה להתבצע בארון בטיחות ביולוגית כדי להימנע מחשיפה וזיהום פוטנציאלי.

  1. הקמת מודל גידול אורתוטופי 4T1 (איור 1).
    1. הכינו תאים על קרח: החזירו תאי 4T1 ב-PBS קר בריכוז של 2 ×-107 תאים למ"ל.
    2. ערבב תאים עם מטריצה: שלבו את תליית התא 1:1 (v/v) עם הידרוג'ל ביולוגי קר מאוד בעל מטריצה חוץ-תאית עשירה. השילוב אמור להניב תמיסה של תאים ב-1 ×10 7 תאים/מ"ל.
    3. טעין את המזרק: טען את תערובת התאים לתוך מזרק מעבדה סטרילי בנפח שלא עולה על 1.0 מ"ל. הגבל את הנפח ל-100 מיקרוליטר לכל הזרקה (1 × 106 תאים). כאופציה, חממו בעדינות את המזרק ל-30 מעלות צלזיוס, מה שהופך את ההידרוג'ל הביולוגי למעט צמיגי ונשמר בקצב גבוה יותר באתר ההזרקה.
      זהירות: שים לב שהמזרקים חדים והימנעו מכיסוי מחדש.
    4. הרדימו את העכבר כפי שמתואר בסעיף 1.
    5. הסר פרווה אם קיים: הסר את אזור כרית השד. השמיטו את השלב הזה אם משתמשים בעכברים עירומים אתימיים.
    6. מקם את המחט והזריק: עקר את כרית השומן המפשעתי הרביעית. הכנס את המחט עם הקצה העליון והזריק 100 מיקרול לאט לתוך כרית השומן כדי למנוע ריפלוקס.
    7. להחזיר את החיה מהרדמה: החזיר את העכבר לכלוב מחומם ולעקוב אחר העכבר עד שהוא יוכל ללכת.
    8. אפשרו לגידול לגדול: אפשרו 8-10 ימים עד שגידולי 4T1 יגיעו לקוטר מינימלי של 0.3 ס"מ לפני ההדמיה.
      הערה: ניתן גם לצלם גידולים בקוטר גדול יותר. קוטר הגידול ניתן למדידה באמצעות קליפר ורנייר מכויל. גידולים העולים על הקוטר המקסימלי המאושר על ידי ה-IACUC (או ועדה מוסדית מקבילה) צריכים להיות מוותרים. עקבו אחרי הזרקה אורטופית והתאימו את מספר/נפח התאים לפרוטוקול ההשתלה הרצוי.
  2. יצירת פצע כריתה בעכבר (איור 2)
    1. הכינו את שדה הניתוח: חטאו את אזור העבודה והכלים.
    2. הרדימו את העכבר כפי שמתואר בסעיף 1.
    3. להסיר פרווה אם קיים: להסיר את האזור הגב. השמיטו את השלב הזה אם משתמשים בעכברים עירומים אתימיים.
    4. לתת הקלה לכאבים: אבטח את העכבר על משטח ניתוחי סטרילי. הזרקו בופרנורפין 0.05–0.1 מ"ג/ק"ג תת-עורית (SC) באזור הגב.
    5. חיטא את אזור הפצע: חיטא את העור הגבי עם פובידון-יוד ואחר כך 70% אתנול.
    6. צור פצע כריתה: השתמש במכה ביופסיה בקוטר 6 מ"מ כדי לתאר את המקום. כריתת העור והפאניקולוס קרנוסוס כדי ליצור פגם בעובי מלא.
    7. הנח את סד הסיליקון:
      1. מרכזי סד סיליקון בצורת סופגנייה סביב הפצע. ודאו שהקוטר הפנימי של הסדק גדול ב-2–4 מ"מ מקוטר הפצע, ורוחב הסד הוא ~5 מ"מ.
      2. חתוך סד סיליקון בצורת סופגנייה ממשטח סיליקון. השתמש בחומר תפר שקוף לתפירת הסד במקום. אם צריך, השתמש בשכבת דבק דקה להשבת הטבעת.
        הערה: חומרי תפר פיגמנטיים עלולים לספוג אור NIR ולכן אין להשתמש בהם.
    8. תפרו את הסדק: הניחו שמונה תפרים מופרעים במרווחים שווים כדי לקבע את הסד לעור הסובב ללא חניק.
    9. הניחו תחבושת חסימה: כסו את הפצע והסד בתחבושת חסימה כדי להגן על המיטה ולתקן את סביבת הפצע.
    10. להחזיר את החיה מהרדמה: החזיר את העכבר לכלוב מחומם ולעקוב אחר העכבר עד שהוא יוכל ללכת.
    11. אפשרו לבעל החיים להחלים: המשיכו בטיפול והערכות יומיות לפי תכנון המחקר או עד שהפצע יחלים לחלוטין.
    12. החלף את התחבושת בכל יום: החלף תחבושת חסימה מדי יום לאחר הדמיה או צילום כדי להגביל זיהום ולשמור על סטריליות.
      הערה: (שלב קריטי) סד את הפצע כדי לדכא את ההתכווצות ולקדם החזרת אפיתליאליזציה, מה שמשפר את הרלוונטיות התרגומית לריפוי האנושי. (נקודת הפסקה) לאחר מריחת התחבושת, עצרו עד להערכה או למפגש ההדמיה הבא המתוכנן.

3. פרוטוקולי רכישה של OS-DCE OAI

  1. הכינו עכבר ואת חומר הניגוד לסריקת ה-OAI.
    1. הכין את חומר הניגוד.
      1. הכינו תמיסה של 1.62 מ"מ של חומר הניגוד ICG במים סטריליים. סנן את התמיסה עם מסנן מזרק של 0.3 מיקרון. מלאו מזרק מעבדה סטרילי ב-100 מיקרומיקרו-ליטר של תמיסה זו.
        הערה: מינון זה הוא 162 ננומול או 125.5 מיקרומיקרוגרם בהתבסס על משקל מולקולרי של 775 גרם למול של ICG. המינון הוא 6.28 מ"ג/ק"ג ממשקל גוף העכבר, בהתחשב בכך שעכבר שוקל כ-20 גרם. מינון מקביל לבעלי חיים גדול פי 12.3 ממינון מקביל אנושי(18). לכן, המינון המקביל לאדם הוא 0.51 מ"ג/ק"ג ממשקל גוף האדם. המינון המקסימלי הסובל לבני אדם הוא 2 מ"ג/ק"ג19. לכן, המינון בו נעשה שימוש במחקר הפרה-קליני הזה הוא בערך רבע מהמינון המקסימלי הנסבל בבני אדם.
    2. הכינו את סורק ה-OAI.
      1. מלא את מיכל ההדמיה במים מזוקקים ומיוננים. כוון את טמפרטורת המיכל ל-36 מעלות צלזיוס לעכבר עם משקל גוף של <25 גרם.
        הערה: טמפרטורת המיכל הזו תשמור על טמפרטורת הגוף המרכזית קרובה ל-37 מעלות צלזיוס כי העכבר עטוף בשקית פלסטיק בעריסה. טמפרטורת המיכל צריכה להיות מכוונת ל-35 מעלות צלזיוס לעכבר גדול עם משקל גוף של >25 גרם כדי למנוע התחממות יתר על המידה, משום שלעכבר גדול יותר יש רקמת שומן תת-עורית המשמשת כשכבת בידוד.
    3. הרדימו את העכבר כפי שמתואר בסעיף 1. לשארית פרוטוקול הרכישה, יש לוודא שהעכבר נשאר מורדם עם 1.5–2% איזופלוראן ב-100% גז נשא חמצן.
    4. אם מבצעים DCE OAI, יש להוסיף גישה ורידית.
      1. שטוף קטטר וריד זנב במשקל 27 גרם עם סליין הפאריניזי. הכנס את הקטטר לווריד זנב צדדי וקבע את הקטטר כדי למנוע את יציאתו מהוריד הזנבי (איור 3A). ודא שאין בועות אוויר.
        הערה: (שלב קריטי) השתמשו במי מלח הפריטיני לשמירה על פטנטיות הקטטר.
      2. בנוסף, יש להכין מזרק מעבדה סטרילי בנפח שלא עולה על 500 מיקרוליטר שיכול להתחבר לקטטר. ודא שהמזרקה מכילה 100 מיקרוליטר של 2.14 מילימטר ICG (~322 ננומול; ~16 מיקרומול/ק"ג לעכבר של 20 גרם).
    5. כסו את העכבר וערסל בג'ל אולטרסאונד (איור 3B).
      1. מרחו שכבה דקה של ג'ל אולטרסאונד שקוף על הגידול או אזור הפצע (איור 3C). בנוסף, מרחו ג'ל אולטרסאונד על העריסה כדי ליצור אטימה בין העריסה לאזור הגידול או הפצע.
        הערה: יש להסיר בועות אוויר. כאופציה, ג'ל האולטרסאונד עשוי להיות בצנטריפוגה כדי להסיר אוויר לפני השימוש בג'ל. כמו כן, השתמשו במינימום ג'ל אולטרסאונד כדי למנוע בועות שיכולות להיווצר בשכבות ג'ל עבות.
    6. הנח את העכבר בעריסה (איור 3D): עיין בהוראות היצרן עבור הכלי. הניחו את העכבר במחזיק כאשר האף של העכבר נמצא בחוזקה בתוך חרוט האף. השתמש באזיקים כדי להחזיק את הידיים והרגליים של העכבר. השתמש בלולאת השן כדי לייצב את הראש.
      1. (אופציונלי) השתמש בעריסה עם קונוס אף של עכברוש כשאתה מדמיין עכבר. חרוט האף של העכברוש מרים את ראש העכבר מתחתית העריסה, מה שיכול למנוע טביעה מקרית אם כמות קטנה של מים דולפת לתוך העריסה.
    7. הנח את העכבר והעריסה בכלי ה-OAI. עיין בהוראות היצרן לגבי הכלי.
      1. שימו לב לכל דליפה בעריסת העכבר. אם יש דליפות, הסר את העכבר והעריסה מהכלי וסגר מחדש את העכבר בעריסה כדי למנוע טביעות מקריות.
      2. אם רוצים DCE OAI, חבר את הקטטר למזרק באמצעות חומר הניגוד.
    8. איזון העכבר לפני ההדמיה: יש לאפשר 10 דקות לייצוב הפיזיולוגיה של העכבר במיכל המים החמים לפני קבלת תמונה (איור 3E).
    9. מיקום העכבר ביחס לממיר ה-OAI:
      1. הזז את העכבר או את מתמר ה-OAI לפי הוראות היצרן כך שהגידול או הפצע ימוקמו בסט התמונה הרב-פרוסים.
      2. אופטימיזציה של מהירות הקול עבור סט התמונה. השלים את השלב הזה בזמן שהעכבר מאוזן לפני ההדמיה (שלב 3.1.7).
      3. (שלב קריטי) שמרו על מיקום אחיד של בעלי חיים/מיקום חיתוך לכל העכברים ובכל נקודות זמן כדי להבטיח תוצאות קפדניות
  2. הגדר את פרמטרי OAI של מערכת ההפעלה.
    1. בחר את פרמטרי פרוסת התמונה כך שמספר פרוסות יודגמו כך שיכסו את כל אזור הגידול או הפצע בעובי פרוסה של 1 מ"מ.
    2. בחר את אורכי הגל של הספיגה. ל-OS OAI, בחר באורכי גלי בליעה של 700, 730, 760, 800, 850 ו-875 ננומטר.
    3. השתמש בממוצע אותות: בחר פרמטרים לקבלת 10 ממוצעים לכל אורך גל לפני קבלת אורך הגל הבא, ולפני המעבר לפרוסה הבאה של הדמיה. ה-10 ממוצעים לאורך גל מגדילים את האות לרעש של כל פרוסת תמונה.
    4. קבע את מספר החזרות:
      1. הגדר את מספר החזרות כפי שמוצג בטבלה 1 כדי לשמור על זמן רכישה כולל של כ-2 דקות. למשתמשי כלי עם קצב חזרה של 10 הרץ, זמן הרכישה הכולל הוא 6.0 שניות לכל פרוסת תמונה.
      2. העברת העכבר לפרוסה הבאה ואז חזרה למצב החתך הראשון דורשת בממוצע 0.2 שניות, כך שכל פרוסה דורשת 6.2 שניות.
      3. בצע מינימום 3 חזרות כדי להבטיח יציבות מדידה. זמן רכישה כולל הארוך מ-2 דקות מקובל אם רוצים חזרות נוספות.
  3. רכוש תמונות OA של מערכת ההפעלה (OS).
  4. הגדר את פרמטרי ה-OAI של DCE.
    1. הגדר פרמטרי רכישה של DCE OAI עבור פרוטוקול הדמיה חד-פרוססי עם מספר אורכי גל.
      1. מקם את פרוסות ההדמיה. בחרו ≤5 פרוסות הדמיה שממוקמות במרכז הגידול או באזור הפצע בעובי פרוסה של 1 מ"מ.
      2. בחר את אורך הגל האופטימלי לסוכן הניגוד. לירוק אינדוציאנין בסביבה חי , הגדר את אורך הגל ל-800 ננומטר.
      3. הגדר את מספר הממוצעים והחזרות כפי שמוצג בטבלה 2. המלצות אלו ישמרו רזולוציה זמנית ≤ 5 שניות וזמן רכישה כולל של 11.0–11.2 דקות למשתמשי מכשיר OAI, שיש לו קצב חזרה של 10 הרץ.
        הערה: משתמשים במכשירים אחרים עם קצב חזרה שונה צריכים להתאים את מספר הממוצעים כדי לשמור על רזולוציה זמנית של ≤ 5 שניות לכל סט תמונה.
    2. כחלופה לשלב 3.4.1, הגדר את פרמטרי רכישת ה-OAI של DCE עבור פרוטוקול הדמיה רב-פרוסות עם אורך גל יחיד.
      1. מקם את פרוסות ההדמיה. בחר ≤ 5 פרוסות הדמיה שממוקמות במרכז הגידול או באזור הפצע בעובי חתך של 1 מ"מ.
      2. בחר את אורך הגל האופטימלי לסוכן הניגוד. לירוק אינדוציאנין בסביבה חי , הגדר את אורך הגל ל-800 ננומטר.
      3. הגדר את מספר הממוצעים והחזרות כפי שמוצג בטבלה 2. המלצות אלו ישמרו רזולוציה זמנית ≤ 5 שניות וזמן רכישה כולל של 11.0–11.2 דקות למשתמשי מכשיר OAI, שיש לו קצב חזרה של 10 הרץ.
        הערה: משתמשים במכשירים אחרים עם קצב חזרה שונה צריכים להתאים את מספר הממוצעים כדי לשמור על רזולוציית זמן של ≤ 5 שניות לכל סט תמונות.
  5. רכוש את תמונות DCE OA.
    1. הקלט תמונות בסיסיות: התחילו ברכישה ואספו 12 מערכי תמונות (~1 דקה).
    2. הזרקת חומר הניגוד: נתן 100 מיקרולטר דרך הקטטר תוך המשך הרכישה.
      הערה: הזרקת הבולוס צריכה להיות עקבית במשך כ-10–15 שניות כדי למנוע הצטברות לחץ בקטטר בווריד הזנב השביר. עקביות זו ניתנת לשליטה באמצעות לחץ עקבי על בוכנת המזרק במהלך הזרקה ידנית, או באמצעות מזרק אוטומטי. חשוב לציין שקצב ההזרקה של 10–15 שניות מקל על אספקת החומר הראשונית לגידול, במקום ליצור קפיצות קינטיות במעבר ראשון בעקומת ה-PK הנגרמות על ידי זמני הזרקה מהירים יותר, מה שמשפר את מידול ה-PK וניתוחי המדידות האמפיריות.
      1. (שלב קריטי) הימנעו מדליפה של חומרי ניגוד מכלי הדם לרקמות הסובבות באתר ההזרקה כדי לשמור על תזמון מדויק של הבולוס.
    3. המשך בהדמיה: רכש את 128 מערכות התמונות הנותרות ל-10.2 דקות לאחר ההזרקה כדי ללכוד את הקינטיקה של שטיפה ושטיפה.
    4. מעקב אחר תהליך ההדמיה כדי לוודא שהתמונות נלקחו: עקב אחרי קצב הנשימה של העכבר כדי לוודא שהפיזיולוגיה של העכבר יציבה במהלך הסריקות.
    5. הסר את העכבר והעריסה מהכלי: הסר את העכבר מהעריסה. תן לעכבר להתאושש מההרדמה. החזירו את העכבר לכלוב מחומם ועקוב אחרי העכבר עד שהוא יוכל ללכת.
      הערה: השתמשו בתוכנה המתאימה ועיינו בהוראות היצרן לגבי כלי ה-OAI. השלבים הבאים מתארים שלבי שחזור וניתוח עבור מכשיר OAI המשתמש בתוכנת viewMSOT v4.0, וב-Matlab R2019b או גרסה חדשה יותר של תוכנת Matlab.

4. ניתוח תוצאות OS-DCE OAI

  1. לשחזר את תמונות ה-OA.
    1. בחר פרמטרי שחזור תמונה: הגדר שחזור תמונה לשימוש בשיטת הקרנה אחורית מסוננת עם מסנן פס 50 קילוהרץ–6.5 מגה-הרץ ואפשר תיקון אוטומטי של אנרגיית פולס לפולס.
    2. שחזור כל התמונות: השגת תמונות בכל אורכי הגל של הלייזר, כל מיקומי פרוסות התמונה וכל נקודות הזמן. נפח נתונים זה עשוי לדרוש זמן משמעותי לשחזור התמונה.
  2. נתח תמונות OA של מערכת הפעלה.
    1. פירוק כרומופורים: מבצעים פירוק ספקטרלי ליצירת מפות פרמטריות של אוקסהמוגלובין (HbO2), דאוקסיהמוגלובין (Hb), המוגלובין הכולל (כאשר HbT = HbO2 + Hb), ו-%sO2 (כאשר %sO 2 = HbO2/HbT).
    2. הגדר החזר השקעה:
      1. צייר ידנית ROI שמייצג את הגידול או הפצע בכל פרוסת תמונה. קבע תשואה שמרנית שנוטה להוציא פיקסלים מהיקף הגידול או היקף הפצע במקום לכלול פיקסלים לרקמה תקינה בשוליים.
      2. כחלופה, צייר ידנית ROI אחד שמייצג את שפת הגידול ו-ROI שני שמייצג את ליבת הגידול. שפת הגידול יכולה להיות בעלת כלי דם גדולים יותר מליבת הגידול, מה שמאפשר ניתוח תת-אזורי פוטנציאלי שימושי.
        הערה: למרות שניתן למשוך ROI נוסף של תת-אזורים של גידול או פצעים, או להעריך ערכי פיקסל שלHbO 2, Hb, HbT או %sO2 (ללא צורך בתשואה על החזר), אזורים קטנים אלה בעלי יחס אות לרעש נמוך יותר, מה שמוביל למדידות לא מדויקות.
      3. שמרו על מיקומי התשואה עקביים בכל התמונות בכל אורך גל ונקודת זמן.
    3. חשב פרמטרים ממוצעים לכל הגידול.
      1. חשב את הערך הממוצע שלHbO 2, Hb, HbT ו-%sO2 בתשואה על ה-ROI של הגידול או ROI הפצע עבור כל פרוסת הדמיה וכל נקודת זמן.
      2. עבור OAI OS מרובה פרוסות, חשב את הערך הממוצע שלHbO 2, Hb, HbT ו-%sO2 מכל פרוסות ההדמיה כדי לקבל ערך ממוצע יחיד לכל פרמטר עבור כל הגידול או הפצע.
    4. העריך את יציבות הפרמטרים. שרטט את ערך %sO2 עבור כל חזרה (ראה שלב 3.2.4). העריך האם ערך ה-%sO 2 השתנה ביותר מ-10% במהלך הסריקות, מה שמעיד על מדידה לא יציבה זמנית.
  3. נתח תמונות OA של DCE.
    1. הפרדת כרומופורים בתמונות DCE OA רב-אורכי גל: בצע פירוק ספקטרלי ליצירת מפות פרמטריות שלHbO 2, Hb וסוכן הניגודיות. שלב זה אינו נחוץ עבור DCE OAI באורך גל יחיד.
    2. הגדר תשואה על ההשקעה.
      1. צייר ידנית ROI שמייצג את הגידול או הפצע בכל פרוסת תמונה. קבע תשואה שמרנית שנוטה להוציא פיקסלים מהיקף הגידול או היקף הפצע במקום לכלול פיקסלים לרקמה תקינה בשוליים.
      2. כחלופה, צייר ידנית ROI אחד שמייצג את שפת הגידול ו-ROI שני שמייצג את ליבת הגידול. שפת הגידול יכולה להיות בעלת כלי דם גדולים יותר מליבת הגידול, מה שמאפשר ניתוח תת-אזורי פוטנציאלי שימושי.
        הערה: למרות שניתן למשוך תשואה נוספת לתת-אזורים של הגידול, או להעריך את ערכי הפיקסל של חומר הניגוד (ללא צורך בתשואה על השקעה), אזורים קטנים אלה בעלי אות לרעש נמוך יותר, מה שמוביל למדידות לא מדויקות.
      3. שמרו על מיקומי התשואה עקביים בכל התמונות בכל אורך גל ונקודת זמן.
    3. חלץ עקומות PK מתמונות DCE OA.
      1. עבור ה-ROI בכל פרוסת תמונה, ייצא את נקודות הזמן לעומת אות ICG הממוצע (מ-DCE OAI רב-אורכי גל) או אות OAI באורך גל יחיד שנבחר (עבור DCE OAI באורך גל יחיד).
      2. חשב את האות הממוצע לכל פרוסות התמונה. גרף של האות הממוצע לאורך הגידול או הפצע לעומת הזמן נקרא עקומת PK.
      3. העבר את האות הממוצע לכל פרוסות התמונה בכל נקודת זמן לתוכנית מחשב שיכולה להעריך את הפרמטרים האמפיריים המפורטים להלן. לדוגמה, Microsoft Excel ו-Graphpad Prism יכולים לבצע ניתוחים פשוטים של גרפים.
    4. חשב פרמטרים אמפיריים כפי שמתואר בשלבים 4.3.5–4.3.11.
    5. נרמול עקומת ה-PK: קבעו את הערך הממוצע של נקודות הזמן לפני ההזרקה, הידועים כאות קו הבסיס. חסר את ערך האות הבסיסי מכל ערכי האות לאחר ההזרקה.
    6. קביעת שיפור האות המקסימלי (MSE): זהה את ערך האות הגבוה ביותר לאחר ההזרקה בעקומת PK.
    7. קביעת זמן לשיא (TTP): זהה את ערך נקודת הזמן של ה-MSE.
    8. חשב את השיפוע ההתחלתי של עקומת PK.
      1. השגת השיפוע ההתחלתי הזה מזמן ההזרקה הראשונית ל-TTP. חלופה נוספת היא לחשב את השיפוע בדקה אחת לאחר ההזרקה אם צורת העקומה תלולה מדי או אם ה-TTP מאוחר מדי.
      2. בתרחיש זה, יש לצלם את תמונות ההזרקה המוקדמת למשך דקה אחת, ולחשב את השיפוע הזה מהדקה 1.0 לדקה 2.0 על עקומת ה-PK.
    9. חישוב שטח ההתחלה מתחת לעקומה (IAUC): חשב את הערך הממוצע של ערכי האות מזמן ההזרקה הראשונית ל-TTP על עקומת ה-PK.
    10. חשב קצב אמפירי של שלב השטיפה.
      1. עבור החלק של עקומת PK מדקה אחת לאחר TTP ועד לנקודת הזמן האחרונה, יש להתאים חלק זה של העקומה לקו ישר או פונקציה מונוספוננציאלית שמתדרדרת עם איבר סט קבוע.
      2. השתמשו בשיפוע של הקו הישר או בקבוע הדעיכה האקספוננציאלית כמדד אמפירי לקצב PK של שלב השטיפה.
    11. חשב OAI משופר בניגודיות.
      1. בחר נקודת זמן ארוכה יותר מ-TTP. קבעו את ערך האות בנקודת זמן זו כמדד לשיפור הניגודיות.
        הערה: נקודת הזמן ב-10 דקות לאחר ההזרקה נבחרת לעיתים קרובות, אך ניתן לבחור נקודות זמן נוספות לפי הצורך.
      2. כחלופה, חשב את האות הממוצע מ-TTP לנקודת הזמן שנבחרה, את האות הממוצע מ-TTP לנקודת הזמן האחרונה, או טווח אחר של נקודות זמן לפי הצורך.
      3. יש לשים לב שהאות הממוצע שקול לשטח שמתחת לעקומת ה-PK עבור שתי נקודות הזמן הללו, מה שמוכר טכנית כמדד לעוצמת האות ולא כמדד למשרעת האות.
    12. בצע מידול PK כפי שמתואר בשלבים 4.3.13–4.3.20.
      הערה: השלבים הבאים מנתחים תמונות DCE OA שנרשמו באמצעות מכשיר inVision OAI. כלי OAI אחרים עשויים להפיק תמונות בפורמט נתונים שונה. השלבים הבאים עדיין ניתנים לניתוח תמונות DCE OA באמצעות מכשירי OAI אחרים, אם פורמט הנתונים מהמכשירים האחרים יכול להיות מועבר ל-MatLab ופורמט הנתונים מותאם לקבצי הנתונים לדוגמה שסופקו בחבילת התוכנה.
    13. הורד את התוכנה.
      1. ל-DCE OAI רב-אורכי גל, הורידו OE-DCE_MSOT_Matlab ממאגר CAMEL-MartyPagel ב-Github, או https://github.com/CAMEL-MartyPagel/OE-DCE_MSOT_Matlab.
      2. עבור DCE OAI באורך גל יחיד, הורידו את DCE-MSOT_SingleWavelength_Matlab ממאגר CAMEL-MartyPagel ב-Github, או https://github.com/CAMEL-MartyPagel/DCE_MSOT_SingleWavelength_Matlab.
      3. פתח את הקובץ הדחוס. פתח את קובץ ה-SOP בתיקיית המסמכים ופעל לפי ההליך הסטנדרטי להתקנה ושימוש בתוכנה.
    14. ארגן את רכיבי התוכנה לתיקיות שונות. שמרו את קבצי התוכנה הבאים בתיקייה אחת:
      קוד ראשי: run_MSOT_nonneg.m
      קודי משנה: run_DCE_MSOT_MSP.m ; run_OE_MSOT_AK_nonneg.m
      קודים נוספים: Negative_pixel_count.m ; Voxel_count.מ; ROI_modification
      תיקייה בשם: com.itheramedical.msotlib_beta_rev723_20221128_M2022b
      הנתונים יוצאו מ-ViewMSOT לאחר שחזור והפרת ספקטרל.
    15. השיק את התוכנית ב-MatLab.
      1. לחצו פעמיים על run_MSOT_nonneg.m כדי להתחיל את התוכנית ב-Matlab. לחץ על כפתור "רץ" בראש חלון Matlab. הקוד עשוי לדווח על שגיאה run_OE_MSOT_AK_nonneg שאינה נמצאת בתיקייה הנוכחית או בנתיב MATLAB.
      2. כדי לתקן את השגיאה, הקליד addpath ואז הכניס את מיקום הקובץ במרכאות (למשל addpath 'C:\Users\yourname\Documents\Non negative analysis') לפני הרצת הקוד.
    16. בחרו את סוג הניתוח: הזינו את N לניתוח OE, ו-Y לניתוח DCE.
      הערה: התוכנית מסוגלת לנתח תמונות OA משופר בחמצן (OE), המורכבות משילוב של מפות %sO 2 שנאספו עם גז נשימה של 21% O2 (אוויר רפואי) או גז נשימה 100% O2 , שאינו משמש למחקרי OAI של OS-DCE המתוארים בפרוטוקול זה.
    17. בחר את הנתונים:
      1. בחר את התיקייה שמכילה את קבצי ה-OAI של DCE. בחר בתיקיית הסריקה הראשית ולא בתיקיית המשנה של ה-MSP.
      2. ואז אמת את שם הסריקה. לבסוף, בחר את התיקייה לשמירת הנתונים שנבדקו.
    18. נכנס 3 למספר הכרומופורים. הכרומופורים הם Hb,HbO 2, וסוכן הניגוד.
      הערה: התוכנית תוכננה לאפשר ניתוח DCE OAI של כרומופורים מרובים המוזרקים יחד למודל העכבר, במידת הצורך. עם זאת, פרוטוקול ה-OAI של DCE בפרוטוקול זה משתמש רק בכרומופור אחד.
    19. משוך את ה-ROI כפי שמתואר בשלבים 4.3.19.1–4.3.19.4.
      1. שרטט את ה-ROI של כלי הדם שישמש כפונקציית הקלט העורקי לניתוח: תופיע תמונה בגווני אפור של הסריקה. עקבו ידנית אחרי התשואה שמייצג את כלי הדם.
        הערה: התקרב על ידי לחיצה על זכוכית המגדלת עם סימן פלוס ממש מעל הפינה הימנית העליונה של התמונה. לחץ שוב על זכוכית המגדלת כדי לחזור למצב למשוך את התשואה (ROI). הווריד הנבוב התחתון ליד עמוד השדרה ניתן לזהות לעיתים קרובות ולהשתמש בו כ-AIF.
      2. שרטט את תשואה הגידול: תופיע תמונה בגווני אפור של הסריקה. עקבו אחרי התשואה שמייצג את כל הגידול, את שפת הגידול או את ליבת הגידול. כדי לנתח יותר מ-ROI אחד, חזור על כל תהליך מידול PK (שלב 4.3.12) לקבלת ROI נוסף.
      3. משוך את תשואה ה-ROI של אזור שריר: אל תשתמש בתשואה זו בחישוב ה-OAI של DCE. השתמש בתשואה על השריר לניתוח DCE OAI באמצעות מודל אזור ייחוס ליניארי, שאינו בשימוש בדוח זה. שלב זה עדיין חייב להתבצע כדי שהתוכנית תוכל להמשיך.
      4. וודא שה-ROI נלקח נכון. המידול של עקומת PK יתחיל.
    20. המחישו את תוצאות ה-OAI של DCE שנותחו.
      1. כדי לטעון נתוני DCE שנותחו, גש לשורת הדפדפן ובחר DCE_MSOT_MSP.
      2. בחלון הפקודה, הזן 'ניקוי הכל'.
        הערה: לשונית התיקיות הנוכחית מלאה כעת בנתוני DCE OAI שנותחו, הכוללים:
        Average_signal_Wavelength_ICG.mat: לחצו פעמיים על זה כדי לראות את הערכים המסומנים שלNK trans ו-kep עבור ROI הגידול. הפרמטרים הקינטיים מסודרים בשלוש דרכים:
        NK trans_avg: הממוצע שלNK (NK) מחושב עבור כל פיקסל.
        _avg_signalטרנס NK: ערךטרנס יחיד של NK מחושב לאחר ממוצע האותות לכל הגידול
        _nzהעברת NK: העברת NK_avg מחושבת רק בערכי פיקסלים שאינו אפס.
        באופן דומה, ערכיk ep יכולים להיות מוצגים.
        NKtrans.fig: מציג את מפת_avg ה-NK trans מונחת על גבי תמונה בגווני אפור.
        kep.fig: מציג את מפתk ep_avg המונחת על תמונה בגווני אפור.
        Maps_Wavelength_ICG.mat: צריך לטעון את זה כדי להמחיש מפותNK טרנס אחרות או kep . לאחר טעינת מטריצה זו, השתמשו ב"קוד החפיפה" (הכלול בנפרד) כדי להציג את הפרמטר הרצוי.
        Muscle_Average_signal_Wavelength_ICG.mat ו-Muscle_Maps_Wavelength_ICG.mat: מציגים פרמטרים ל-ROIs בשרירים.
        אות מנורמל עבור ICG.fig: מציין את האות הממוצע של ICG לאורך זמן בשלושת ה-ROIs, מנורמל לאות המקסימלי.
        אות עבור ICG.fig: מציין את האות הממוצע של ICG לאורך זמן בשלושת ה-ROIs.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

אות OAI יכול ליצור מפות של רוויית חמצן בגידולים ובפצעים
לאחר רכישה ושחזור של מאגרי נתונים רב-ספקטרליים של OAI, ניתן להגדיר אזורי עניין (ROIs) בתוך גידולים או מיטות פצעים כדי לכמת את עוצמת האות באורכי גל שונים. לאחר מכן מוחלים אלגוריתמים של פירוק ספקטרלי להפרדת תרומות של אוקסיהמוגלובין (HbO2) ודאוקסיהמוגלובין (Hb) מהאות האופטואקוסטי המורכב. עיבוד זה מאפשר יצירת מפות כמותיות שלHbO 2, Hb, סך ההמוגלובין (HbT) ורוויית חמצן בדם (%sO2) (

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

עקומות DCE OAI PK עלולות להיות מושפעות ממגוון ארטיפקטים שמפחיתים את אמינות ניתוח PK. מלכודת נפוצה היא נוכחות פצעים שטחיים, גלדים או דם יבש בתוך שדה ההדמיה, שיכולים לגרום לספיגה חזקה ולא ספציפית על פני העור ולהסתיר אותות עמוקים יותר (איור 8). בעת שרישום ROI בתוך הגידול, יש להיזהר להימנע מהכללת מבנים שטחיים אלו כדי להבטיח שהעקומות המוקצות ישקפו דינמיקת ניגודיות תוך-גידולית ולא ארטיפקטים של פני השטח.

הגישה לכלי הדם ואיכות ההזרקה הן ג...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין ניגודי עניינים בנוגע לעבודה זו.

תודות

המחברים רוצים להודות לד"ר ניל ברטון מ-iThera Medical, GmbH, על הייעוץ. עבודה זו מומנה על ידי מענק NRSA של UW-Madison Radiology (2T32CA009206-46), מענק ITPT Radiological Radiology Infantee Pilot Pilot, תוכנית פרס המדע הקליני והתרגומי (CTSA), המרכז הלאומי לקידום מדעי התרגום (NCATS), מענקים UL1TR002373 ו-TL1TR002375, NIH R43 CA265603, NIH R01 EB034261, NIH R21 EB037731, ופרס Falk Catalyst מקרן Falk Medical Research Trust.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מחט 20 Gאקסל INT26417מחט היפודרמית; 20G x 1 אינץ', משמש להכנת תמיסות הפארין
תאי 4T1ATCCCRL-2539קו תאי סרטן השד משולש שלילי
אנטי-אנטי (100x)גיבקו15240-062קוקטייל אנטיביוטי
אגרוף ביופסיהIntegra 33-36פונץ' ביופסיה חד-פעמי בקוטר 6 מ"מ  
מים בדרגת תרבית תאיםקורנינג25-055-CV500 מ"ל; נבדק ל-USP sater סטרילי למפרטי Inection 
פתרון מטריצת קולגןקורנינג354262מטריצת קולגן להזרקת גידול והזרקה
אתנולמעבדת דיקון2701חומר חיטוי כללי
סיכה לעיניים Optixcare 50-218-844220 גרם / 0.70 אונקיה; לשימוש בעלי חיים בלבד 
גזה  פישרברנד22-415-468פד גזה מכותנה; 3" x 3" (7.6 x 7.6 ס"מ); 12-פליי
כפפותVWR76457-130כפפות בדיקת ניטריל
הפאריןמיית'ילNDC71288-402-1010,000 יחידות USP ל-10 מ"ל, 1000 יחידות USP למילילטר; 10 מ"ל בקבוקון רב-מנה
אינדוציאנין ירוקTCII0535חומר ניגוד אופטואקוסטי
איזופלוראןאיזוספיר17033-091-25חומר הרדמה לשאיפה לא דליק ובלתי מתפוצץ לשימוש בסוסים וכלבים; 250 מ"ל 
סרט מעבדהParafilm PM-9922" x 250'; ליבה בקוטר 1"
מסיר שיער ברימ גוף של נייר נאירLL4038קרם דפיליאטורי; חמאת קקאו עשירה וחמאת קקאו ויטמין E
Needle טרומוNN2732R27G x 1 1/4" (6.40 מ"מ x 32 מ"מ); R.W. Reg. Bevel 
מכונת הדמיה אופטואקוסטיתiTheraMedical MSOT בחזון 512סורק אופטואקוסטי
PBS, פעם אחתקורנינג 21-040-CV500 מ"ל; סליין מפופר בפוספט ללא סידן ומגנזיום  
RPMIקורנינג 10-040-CVמדיה לתרבות תאים
סלייןהוספירהNDC0409-4888-0210 מ"ל מנה אחת; הזרקת כלוריד נתרן של 0.9%, ייחודי
סטופרiTheraMedical 4135333השתמשתי להקליט דקות ושניות 
מזרקיםקרדינל הלת'1188128012מזרק אינסולין של 1 מ"ל; U-100 אינסולין בלבד; 27G x 1/2" (0.35 x 12.7 מ"מ)
חבישת פצעים שקופהטגאדרם1624Wסגנון מסגרת לסרט שקוף; 2 3/8" x 2 3/4" (6 ס"מ x 7 ס"מ)
פינצטהTermo Electron 7626משמש למשיכת עור לאחור בעת הזרקת תאים לעכברים
ג'ל אולטרסאונדEcoVue283חבילת 32 גרם, ללא פרפילן גליקול, מסיס במים, פרבן וללא צבע
תפרים לא צבועיםאתיקוןVR493חיתוך 18 אינץ'; P-3 3/8 13 מ"מ; תפר סינתטי לא צבוע וקלוע, לא ייחודי
משטח חימוםרפטי תרם UTH120VAC 60Hz 8W משתמשים בהם לחמם בעלי חיים תחת הרדמה;  
האם סדיםגרייס ביו-לאבס476684סיליקון שקוף, 14 מ"מ OD x 10 מ"מ ID, עובי 0.5 עם אתרי תפרים 
קליפים לפצעיםרפלקס 7203-1000מערכת סגירת עור רפלקס, 7 מ"מ, סטי מנירוסטה

מקורות

  1. Wang, L. V., Hu, S. Photoacoustic tomography: In vivo imaging from organelles to organs. Science. 335 (6075), 1458-1462 (2012).
  2. Ntziachristos, V., Razansky, D. Molecular imaging by means of multispectral optoacoustic tomography (MSOT). Chem Rev. 110 (5), 2783-2794 (2010).
  3. Sourbron, S. P., Buckley, D. L. Classic models for dynamic contrast-enhanced MRI. NMR Biomed. 26 (8), 1004-1027 (2013).
  4. Hupple, C. W., et al. A light-fluence-independent method for the quantitative analysis of dynamic contrast-enhanced multispectral optoacoustic tomography (DCE MSOT). Photoacoustics. 10, 54-64 (2018).
  5. Xiao, T. G., et al. Applying dynamic contrast-enhanced MSOT imaging to intratumoral pharmacokinetic modeling. Photoacoustics. 11, 28-35 (2018).
  6. Han, Z., et al. Dynamic 2-deoxy-D-glucose-enhanced multispectral optoacoustic tomography for assessing metabolism and vascular hemodynamics of breast cancer. Photoacoustics. 32, 100531(2023).
  7. Pickles, M. D., Manton, D. J., Lowry, M., Turnbull, L. W. Prognostic value of pre-treatment DCE-MRI parameters in predicting disease-free and overall survival for breast cancer patients undergoing neoadjuvant therapy. Eur J Radiol. 71 (3), 498-505 (2009).
  8. Goel, S., et al. Evaluations of radiotherapy in small animal models of pancreatic cancer with oxygen-enhanced–dynamic contrast-enhanced multispectral optoacoustic tomography (OE-DCE MSOT). Photons Plus Ultrasound: Imaging and Sensing 2023, 12379, (2023).
  9. Yang, E., et al. Evaluations of a cutaneous wound healing model using oxygen-enhanced dynamic contrast-enhanced photoacoustic imaging (OE-DCE PAI). Mol Imaging Biol. 26 (6), 995-1004 (2024).
  10. Longo, D. L., et al. Water-soluble melanin derivatives for dynamic contrast-enhanced photoacoustic imaging of tumor vasculature and response to antiangiogenic therapy. Adv Healthcare Mater. 6 (1), 1600550(2017).
  11. Ermolayev, V., Dean-Ben, X. L., Mandal, S., Ntziachristos, V., Razansky, D. Simultaneous visualization of tumour oxygenation, neovascularization and contrast agent perfusion by real-time three-dimensional optoacoustic tomography. Molec Imaging. 26, 1843-1851 (2016).
  12. Chen, Z., et al. Concurrent fluorescence and volumetric optoacoustic tomography of nanoagent perfusion and bio-distribution in solid tumors. Biomed Opt Express. 10 (10), 5093-5102 (2019).
  13. Taruttis, A., Morscher, S., Burton, N. C., Razansky, D., Ntziachristos, V. Fast multispectral optoacoustic tomography (MSOT) for dynamic imaging of pharmacokinetics and biodistribution in multiple organs. PLoS One. 7 (1), e30491(2012).
  14. Tomaszewski, M. R., Gehrung, M., Joseph, J., Quiros-Gonzalez, I., Disselhorst, J. A., et al. Oxygen-enhanced and dynamic contrast-enhanced optoacoustic tomography provide surrogate biomarkers of tumor vascular function, hypoxia, and necrosis. Cancer Res. 78 (20), 5980-5991 (2018).
  15. Choi, W., Park, B., Choi, S., Oh, D., Kim, J., et al. Recent advances in contrast-enhanced photoacoustic imaging: and practical challenges. Chem Rev. 123 (11), 7379-7419 (2023).
  16. Weber, J., Beard, P. C., Bohndiek, S. E. Contrast agents for molecular photoacoustic imaging. Nat Methods. 13 (8), 639-650 (2016).
  17. Fu, Q. R., Zhu, R., Song, J. B., Yang, H. H., Chen, X. Y. Photoacoustic imaging: Contrast agents and their biomedical applications. Adv Materials. 31 (6), 1805875(2019).
  18. Nair, A. B., Jacob, S. A simple practice guide for dose conversion between animals and human. J Basic Clin Pharm. 7 (2), 27-31 (2016).
  19. Alander, J. T., et al. A review of indocyanine green fluorescent imaging in surgery. Int J Biomed Imaging. 2012, 940585(2012).
  20. Xia, J., Chen, W. Y., Maslov, K., Anastasio, M. A., Wang, L. H. V. Retrospective respiration-gated whole-body photoacoustic computed tomography of mice. J Biomed Opt. 19 (1), 016003(2014).
  21. Liu, S., Wang, T., Zheng, X., Zhu, Y., Tian, C. On the imaging depth limit of photoacoustic tomography in the visible and first near-infrared windows. Optics Express. 32 (1), 5460-5480 (2024).
  22. Oraevsky, A., Clingman, B., Zalev, J., Stavros, A., Yang, W., et al. Clinical optoacoustic imaging combined with ultrasound for coregistered functional and anatomical mapping of breast tumors. Photoacoustics. 12, 30-45 (2018).
  23. Cox, B., Laufer, J. G., Arridge, S. R., Beard, P. C. Quantitative spectroscopic photoacoustic imaging: a review. J Biomed Opt. 17 (6), 061202(2012).
  24. Khodaverdi, A., et al. Two photoacoustic spectral coloring compensation techniques adapted to the context of human in-vivo oxygenation measurements. Biomed Optics Express. 16 (6), 2217-2231 (2025).
  25. Reinhart, M. B., Huntington, C. R., Blair, L. J., Heniford, B. T., Augenstein, V. A. Indocyanine green: Historical context, current applications, and future considerations. Surg Innov. 23 (2), 166-175 (2016).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

הערכות של חמצון והזרמת כלי דם במודלים פרה-קליניים של סרטן וריפוי פצעים באמצעות OS-DCE OAI
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.