הערכה מדורגת לפי גיל של Saccharomyces boulardii בניסוי ילדים מבוקר אקראי ומחקר תצפיתי של מבוגרים על דלקת מעיים זיהומית

סיכום

פרוטוקול זה מעריך את היעילות הקלינית והבטיחות הספציפית לגיל של Saccharomyces boulardii כטיפול נוסף לדלקת מעיים זיהומית, באמצעות ניסוי מבוקר אקראי בילדים ומחקר תצפיתי אמיתי במבוגרים.

תקציר

דלקת מעיים מדבקת נותרה נטל בריאותי עולמי משמעותי, במיוחד בקרב ילדים מתחת לגיל חמש. Saccharomyces boulardii (S. boulardii), שמרים פרוביוטיים, נחקר רבות בשל תפקידו בהפחתת שלשולים; עם זאת, השוואות ישירות של השפעותיו בין קבוצות גיל מוגבלות. מחקר זה נועד להעריך ולהשוות את היעילות והבטיחות של S. boulardii בחולים ילדים ומבוגרים עם דלקת מעיים זיהומית. ניסוי כפול-סמיות, אקראי ומבוקר פלצבו נערך ב-186 ילדים עם שלשולים חריפים, בעוד שמחקר תצפיתי רטרוספקטיבי כלל 270 מטופלים מבוגרים. כל המשתתפים קיבלו טיפול התייבשות סטנדרטי; קבוצות ההתערבות קיבלו גם את S. boulardii. התוצאה העיקרית הייתה משך השלשול. תוצאות משניות כללו תדירות צואה, משך האשפוז, שיעור הישנות ותופעות לוואי. בחולים ילדים, S. boulardii הפחיתה משמעותית את משך השלשול (2.1 לעומת 3.9 ימים במקרים חיוביים לרוטאווירוס), אשפוז בבית החולים (3.2 לעומת 4.8 ימים), ותדירות הצואה (4.2 לעומת 6.7 צואה ליום) בהשוואה לפלצבו (כל ה-p < 0.05). במטופלים בוגרים, S. boulardii היה קשור למשך שלשול קצר יותר (2.7 לעומת 5.4 ימים), ירידה באשפוז (3.6 לעומת 5.2 ימים), שיעורי פתרון תסמינים גבוהים יותר (77.8% לעומת 15.8%), והישנות נמוכה יותר (8.1% לעומת 21.7%; כל ה-p < 0.01). תופעות הלוואי היו קלות וניתנות להשוואה בין קבוצות. נראה כי S. boulardii הוא טיפול נוסף בטוח ויעיל לדלקת מעיים זיהומית, עם הבדלים בתוצאות הקליניות הקשורים לגיל. נראה כי S. boulardii הוא טיפול בטוח ויעיל לטיפול בדלקת מעיים זיהומית הן באוכלוסיות ילדים והן באוכלוסיית מבוגרים. בכל קבוצה נצפו שיפורים בתוצאות הקליניות, כולל משך השלשול, אשפוז והישנות השלשולים. ההבדלים שנצפו בין קבוצות ילדים ומבוגרים הם תיאוריים ומשקפים ניתוחים נפרדים שנערכו תחת עיצובים שונים של מחקרים; לכן, לא בוצעו השוואות סטטיסטיות ישירות בין קבוצות גיל.

מבוא

דלקת מעיים זיהומית היא מצב דלקתי במעי הדק הנגרם על ידי פתוגנים חיידקיים, ויראליים או טפיליים, ומהווה נטל בריאותי עולמי משמעותי המשפיע הן על ילדים והן על מבוגרים. ההעברה מתרחשת בדרך כלל דרך מזון או מים מזוהמים ובאמצעות התפשטות מאדם לאדם, מה שהופך את המחלה למדבקת מאוד ^1,2. ילדים מתחת לגיל 5 מושפעים באופן לא פרופורציונלי, כאשר דלקת מעי זיהומית תורמת משמעותית לתחלואה ולתמותה^{במדינות בעלות} הכנסה נמוכה ובינונית^. לפי ארגון הבריאות העולמי, מחלות שלשול גורמות לכ-525,000 מקרי מוות מדי שנה בקרב ילדים מתחת לגיל 5, במיוחד במדינות בעלות הכנסה נמוכה ובינונית. רוטה-וירוס ונורו-וירוס הם הגורמים הוויראליים השכיחים ביותר לדלקת מעיים זיהומית^ברחבי העולם. מקרים חמורים או ממושכים עלולים להופיע עם סיבוכים כגון דלקת, צואה מדממת ודיכוי חיסון⁶.

פרוביוטיקה כמו Saccharomyces boulardii מפעילות השפעות טיפוליות באמצעות מנגנונים הכוללים עיכוב היצמדות פתוגן, ויסות תגובות החיסון של המארח, והפחתת דלקת במעי. השפעות אלו תורמות להגנה מוגברת על המארח ולהחלמה קלינית מהירה^{יותר 5,6}. עם חלוף הזמן, המודעות לפרוביוטיקה כאמצעי טיפולי ומספר הניסויים הקליניים האקראיים עלתה משמעותית^ב-7. למרות שדלקת מעיים זיהומית פוגעת הן בילדים והן במבוגרים, הופעת המחלה ותוצאותיה משתנות באופן ניכר, כאשר האטיולוגיה הוויראלית דומיננטית אצל ילדים וזיהומים חיידקיים או מעורבים נפוצים יותר בקרב מבוגרים ^7,8,9. הבחנות אלו מצביעות על כך שהתגובות הטיפוליות עשויות להשתנות לפי גיל ודורשות הערכה השוואתית.

רוטה-וירוס נותר הגורם המוביל לדלקת גסטרואנטריטיס חריפה חמורה בתינוקות וילדים קטנים ברחבי העולם. התסמינים הקליניים נעים משלשול קל ומגביל את עצמו ועד התייבשות חמורה שדורשת אשפוז⁷. ההעברה מתרחשת בעיקר דרך הדרך הצואה-אוראלית, ישירות או דרך מזון ומים מזוהמים⁸. לפי ארגון הבריאות העולמי, מחלות שלשול גורמות לכ-525,000 מקרי מוות מדי שנה בקרב ילדים מתחת לגיל 5, במיוחד במדינות בעלות הכנסה נמוכה ובינונית ^3,9,10. וירוסי רוטה-וירוס תוארו לראשונה בשנת 1973 ברירית התריסריון של שישה תינוקות עם גסטרואנטריטיס חריפה וכיום נחשבים לגורמים השכיחים ביותר למחלה¹¹. זיהום ברוטה וירוס מתרחש גם אצל ילדים וגם במבוגרים ובדרך כלל גורם לתסמינים קלים¹². נתונים מהודו מהווים כ-20% מהמקרים¹³. זיהום רוטוירוס נפוץ ביותר בתינוקות, עם שיעור אשפוז של כ-40%¹⁴. לפי הסטטיסטיקות הנוכחיות, הודו אחראית ל-23% ממקרי המוות משלשול^ב-15. בהודו, זיהום רוטה וירוס משפיע על כ-11.37 מיליון ילדים בגילאי <5^ו-16. ההעברה מתרחשת דרך הדרך הצואה-אוראלית, ישירות ועקיפין, דרך מזון ומים מזוהמים¹⁷. ההופעה הקלינית נעה בין זיהום תת-קליני למחלה קשה¹⁸. תקופת הדגירה היא כ-24–72 שעות, והמחלה בדרך כלל חולפת תוך 3–7 ימים^ו-19 ימים.

נורו-וירוס הוא הגורם השכיח ביותר להתפרצויות גסטרואנטריטיס חריפות בכל קבוצות הגיל, והוא נפוץ במיוחד באוכלוסיות בוגרות^{בגיל 20}. מאופיין בהקאות חריפות ושלשול מימי, זיהום בנורו-וירוס מדבק מאוד ודורש מינון זיהומי נמוך מאוד. ההעברה מתרחשת דרך דרכי צואה-אוראליות, משטחים מזוהמים, מזון, מים וחלקיקים באירוסול במהלך הקאה²¹. אחרי רוטה וירוס, הוא נחשב לגורם השני השכיח ביותר למחלות בעולם. זיהום בנורו-וירוס זוהה לראשונה בשנת 1968,²². וירוס זה מדבק מאוד ומועבר דרך דרכי צואה-פה דרך מזון ומים מזוהמים, בדומה לזיהום ברוטה וירוס אצל ילדים צעירים ותינוקות²³. שכיחות נורו-וירוס היא הגבוהה ביותר בילדים צעירים במדינות בעלות הכנסה נמוכה²⁴. הוא מתגלה לעיתים קרובות בדגימות צואה ומהווה גורם מרכזי להתפרצויות ספורדיות²⁵. טבלאות 1 וטבלה 2 מסכמות את ההבדלים האפידמיולוגיים והקליניים בין זיהומי רוטה-וירוס לנורוירוס. התפרצויות יכולות להתפשט במהירות בסביבות קליניות כמו מרפאות ובתי אבות בשל רמת ההדבקה הגבוהה ומינון זיהומי^{נמוך 26}. לפי סקירות ספרות ונתונים עדכניים, כ-185,000 מקרים של דלקת גסטרואנטריטיס מתרחשים ברחבי העולם, מתוכם 18% מיוחסים לנורו-וירוס²⁷. הנתונים מהודו נותרו מוגבלים, במיוחד באזורים הצפון-מזרחיים. השכיחות של זיהום נורו-וירוס בהודו נעה בין 1.4% ל-44%, כאשר מחקר עדכני מקולקטה דיווח על כ-6% בקרב ילדים מתחת לגיל 5^ו-28.

S.No	מאפיין	רוטה-וירוס	נורו-וירוס
1.	גיל ממוצע של זיהום	34.74 חודשים	29.65 חודשים
2.	חומרת התסמינים	חמור יותר עם הידרציה גבוהה יותר	פחות חמור, יותר הקאות
3.	שכיחות חום	גבוה יותר (44.3%)	נמוך יותר (45%)
4.	משך התסמינים	ארוך יותר	קצר יותר
5.	זיהומים משותפים	לעיתים קרובות עם פתוגנים חיידקיים	פחות נפוץ, ללא השפעה משמעותית

טבלה 1: השוואה בין רוטה-וירוס לנורו-וירוס בילדים. ניתנת סקירה השוואתית של המאפיינים הקליניים והאפידמיולוגיים של זיהומי רוטה וירוס ונורו-וירוס בילדים. משתנים כוללים גיל ממוצע, חומרת התסמינים, שכיחות החום, משך המחלה ותדירות ההדבקה המשותפת.

S.No	מאפיין	רוטה-וירוס	נורו-וירוס
1.	וירולוגיה	וירוס RNA דו-גדילי	וירוס RNA חד-גדילי
2.	נפוץ במבוגרים	פחות נפוצה, בדרך כלל קלה או ללא תסמינים	סיבה נפוצה ומובילה לדלקת גסטרואנטריטיס במבוגרים
3.	שידור	נתיב צואה-אורלי, דרך מזון/מים, משטחים	נתיב צואה-אורלי, מדבק מאוד דרך אוויר, מזון ומים
4.	מינון זיהומי	בינוני	נמוך מאוד (10-100 חלקיקי ויראליים עלולים לגרום לזיהום)
5.	תקופת הדגירה	1-3 ימים	12-48 שעות
6.	משך המחלה	3-8 ימים	1-3 ימים
7.	תסמינים נפוצים	שלשולים מימיים, הקאות, חום, כאבי בטן	הקאות חריפות, שלשולים מימיים, בחילה, התכווצויות
8.	חומרה במבוגרים	קל עד בינוני, חמור יותר במערכת החיסון המוחלשת	לעיתים קרובות מגביל את עצמו אך עלול לגרום להתפרצויות אצל מבוגרים.
9.	חיסון	זמין (אוראלי, מחולש חיים) אך לא בשימוש אצל מבוגרים	אין כרגע חיסון זמין

טבלה 2: השוואה בין נורו-וירוס לרוטה-וירוס במבוגרים. מאפיינים וירולוגיים, דפוסי העברה, ביטויים קליניים וחומרת המחלה של זיהומי רוטה-וירוס ונורו-וירוס באוכלוסיות בוגרות מתוארים.

Saccharomyces boulardii משמש קלינית מאז אמצע המאה ה-20 ונתמך על ידי מספר ניסויים מבוקרים אקראיים ומטא-אנליזות המדגימות את יעילותו בדלקת גסטרואנטריטיס חריפה²⁹. היתרונות המדווחים כוללים הפחתת משך השלשול, ירידה בתדירות הצואה, שהייה קצרה יותר בבית החולים ופרופיל בטיחות חיובי בקרב ילדים ומבוגרים בגיל³⁰. זהו פרוביוטיקה מבוססת שמרים וזמינה באופן נרחב כתוסף תזונה³¹. ניסויים קליניים גדולים ומבוקרי פלצבו הבהירו עוד יותר את מנגנוני הפעולה שלו ותמכו בפיתוח יישומים טיפוליים חדשים³².

היעילות של S. boulardii בהפחתת משך וחומרת השלשול מבוססת היטב. עם זאת, מחקרים אלו מוגבלים בדרך כלל לאוכלוסיות ילדים או מבוגרים, כאשר מעטים משווים תוצאות ישירות בין קבוצות גיל^28–32. בהינתן ההבדלים בגורמים האטיולוגיים, בתגובות החיסוניות ובתוצאות הקליניות בין ילדים למבוגרים, הערכת תגובות טיפוליות ספציפיות לגיל היא קריטית. בהשוואה לפרוביוטיקה חיידקית כמו Lactobacillus spp., ל-S. boulardii יש יתרונות, כולל עמידות לאנטיביוטיקה ויציבות רבה יותר במערכת העיכול. לכן, אף ש-S. boulardii מוכר כטיפול משלים יעיל, התלות בגיל של יתרונותיה הטיפוליים נותרה לא ברורה.

S. boulardii נמצא בשימוש מאז 1950 באירופה והוערך בניסויים קליניים רבים³³. מספר הנחיות קליניות תומכות בבטיחות וביעילות של פרוביוטיקה בטיפול בדלקת גסטרואנטריטיס חריפה. S. boulardii היא אחת הפרוביוטיקות הנפוצות ביותר בפרקטיקה קלינית ומומלצת על ידי מומחים קליניים שונים³⁴. הוא משמש באופן נרחב למניעה וטיפול בשלשולים, כולל זיהומי רוטה וירוס ונורו-וירוס בילדים^{בני 35}. מחקרים קליניים הראו כי הוא מפחית את משך השלשול בזיהום באנטריטיס חריפה וברוטה-וירוס, עם פרופיל בטיחות חיובי^{ותופעות} לוואי מינימליות. מטא-אנליזה שכללה 1,282 מטופלים בכל קבוצה הראתה כי מטופלים ילדים הראו הקלה מהירה יותר של התסמינים לעומת מטופלים מבוגרים, בעוד שמטופלים מבוגרים הראו שיעורי הישנות נמוכים יותר. בנוסף, מחקרים ממערב אפריקה דיווחו על שיפור קליני בילדים עם שלשול חריף לאחר טיפול ב-S. boulardii, כולל נרמול תדירות הצואה ביום השני של הטיפול³². הזן גם הוכיח יעילות בזיהום ברוטה וירוס על ידי הפחתת תדירות הצואה וקיצור משך המחלה בתינוקות בהשוואה לקבוצת הביקורת 20,21,22,23,24. מחקרים אחרים דיווחו על ירידה בשכיחות הזיהום ברוטה וירוס בקרב יילודים מאושפזים, מה שמדגיש^את הפוטנציאל המונע שלו. S. boulardii נחשב לאפשרות טיפול בטוחה בילדים30. מנגנוני פעולה מוצעים כוללים עיכוב רעלים חיידקיים, השפעות אנטי-דלקתיות וגירוי רירית המעי 26,29,35.

הגישה הכפולה אומצה כדי לאזן בין קפדנות מתודולוגית ליישום מעשי. ניסוי מבוקר אקראי היה אפשרי במטופלים ילדים, בעוד שמגבלות אתיות ומעשיות דרשו עיצוב תצפיתי רטרוספקטיבי במבוגרים. השוואות בין קבוצות הן לכן חקרניות ותיאוריות.

כדי להתמודד עם הזמינות המוגבלת של מחקרים שהשוו ישירות תגובות ספציפיות לגיל ל-S. boulardii, אומצה גישה דו-עיצובית. ניסוי מבוקר אקראי נערך במטופלים ילדים, בעוד שעיצוב תצפיתי רטרוספקטיבי שימש במבוגרים בשל מגבלות אתיות ומעשיות. חשוב לציין ששתי הקבוצות נותחו באופן עצמאי. כל הבדלים שנצפו בין תוצאות ילדים למבוגרים מוצגים באופן תיאורי ואינם מיועדים להשוואה סטטיסטית ישירה או לפרשנות אינפרנציאלית.

פרוטוקול

כל ההליכים שכללו משתתפים אנושיים בוצעו בהתאם לסטנדרטים אתיים מוסדיים ולאומיים. הניסוי המבוקר האקראי לילדים אושר על ידי ועדת האתיקה של בית החולים הרבין הרביעי, הרבין, סין (מספר אישור: KY2026-06). הסכמה מדעת בכתב התקבלה מההורים או האפוטרופוסים החוקיים של כל משתתפי הילדים לפני ההרשמה. מחקר הקבוצה התצפיתית הרטרוספקטיבית למבוגרים אושר על ידי ועדת האתיקה של בית החולים הרביעי בהרבין, הרבין, סין (מס' אישור: KY2026-06), עם ויתור מדעת בשל אופיו הרטרוספקטיבי של המחקר.

1. עיצוב המחקר וזיהוי קבוצות

1. זיהוי אוכלוסיית המחקר
   1. שלף רשומות רפואיות של חולים ילדים ומבוגרים שאובחנו עם דלקת מעיים זיהומית חריפה בין ינואר 2020 לינואר 2022. זוהו בסך הכול 186 מטופלים ילדים; 10 הוצאו מהנתונים בשל נתונים לא שלמים, מה שהוביל לניתוח של 176 משתתפים.
   2. אשר דלקת מעיים זיהומית באמצעות הערכה קלינית ובדיקות צואה. אסוף דגימות צואה טריות במיכלי צואה סטריליים בתוך 24 שעות מהקבלה. בצע בדיקת רוטה-וירוס באמצעות בדיקת אימונוכרומטוגרפיה אנטיגן מהיר לצואה בהתאם להוראות היצרן.
2. הגדרת סמלי מחקר
   1. ניתוח קבוצות ילדים ומבוגרים באופן עצמאי בשל הבדלים בעיצוב המחקר (מחקר מבוקר אקראי לעומת מחקר תצפיתי רטרוספקטיבי). אין לבצע בדיקות סטטיסטיות להשוואת תוצאות בין קבוצות גיל. פרש כל השוואות בין קבוצות באופן תיאורי בלבד.
   2. הקצו מטופלי ילדים לקבוצת ההתערבות (S. boulardii) או לקבוצת הפלצבו באמצעות לוח זמנים אקראי.
   3. שיוך מטופלים בוגרים לקבוצת ההתערבות אם קיבלו S. boulardii כחלק מטיפול קליני שגרתי.
   4. זהה קבוצת ביקורת בוגרת היסטורית שהתאמה 1:1 לפי גיל, מין ואבחנה שלא קיבלה S. boulardii.
      הערה: מאגרי נתונים של ילדים ומבוגרים מנותחים בנפרד ואינם מאוגדים לצורך השוואה סטטיסטית.

2. קריטריוני זכאות המשתתפים

1. קריטריוני הכללה
   1. קבוצת ילדים: קבל הסכמה בכתב מדעת מהורים או אפוטרופוסים חוקיים לפני ההרשמה. כלול ילדים בגילאי 6–48 חודשים שאושפזו עם שלשול זיהומי חריף שאושר על ידי היסטוריה קלינית ובדיקת צואה. אשר את תחילת השלשול בתוך 72 שעות לפני האשפוז. ודאו שהמשתתפים יכולים לסבול טיפול בהחזרת נוזלים דרך הפה והם יציבים מבחינה רפואית.
   2. קבוצה בוגרת: כוללים מטופלים ≥18 שנים עם ≥3 צואה לא מעוצבת ב-24 השעות האחרונות ומשך התסמינים ≤5 ימים. אשר את האטיולוגיה של ההדבקה, למעט Clostridioides difficile. קבל ויתור על הסכמה מדעת בשל אופיו הרטרואקטיבי של המחקר.
2. קריטריוני החרגה
   1. יש להחריג מטופלים פדיאטריים עם תת-תזונה חמורה (ציון Z משקל לגובה < −3), דם גולמי בצואה, מצב הנקה בלעדית, או שימוש אנטיביוטי אחרון בתוך 14 יום.
   2. יש להוציא משתתפים עם מחלת מערכת העיכול הכרונית, חוסר חיסוני או מחלה מערכתית חמורה.
   3. להוציא מטופלים בוגרים עם ניתוח מעי קודם, טיפול מדכא חיסון, שימוש לאחרונה בפרוביוטיקה בתוך שבועיים, או חוסר יכולת לתת הסכמה.
      הערה: איסוף הנתונים עשוי להיות מושהה לאחר זיהוי הקוהורטים ולהתחדש לפני ניתוח סטטיסטי.

3. קביעת גודל המדגם

1. חישוב גודל מדגם ילדים
   1. הגדר אלפא על 0.05 והספק על 80%. חשב את גודל המדגם כדי לזהות הפרש ממוצע של 1.5 ימים במהלך השלשול עם סטיית תקן של 2.0 ימים.
   2. הגדלת גודל המדגם ב-10% כדי להתחשב באפשרות לנשירה מהלימודים, מה שמוביל ל-90 משתתפים בכל קבוצה.
2. קביעת גודל המדגם של מבוגרים
   1. להעריך מינימום של 250 משתתפים בכל קבוצה כדי לזהות הבדל של 15% בפתרון התסמינים.
   2. לכלול 270 מבוגרים הן בקבוצות התערבות והן בקבוצות ביקורת היסטוריות כדי להבטיח עוצמה סטטיסטית מספקת.

4. הליכי התערבות ובקרה

1. ניתן לתת Saccharomyces boulardii במינון של 250 מ"ג פעמיים ביום (פעמיים ביום) במשך 5 ימים באמצעות נוסחאות שקיות אוראליות. יש להמיס את תכולת השקית במים או בחלב בטמפרטורת החדר לפני ההמנה. ניתן את ההכנה דרך הפה לאחר ההאכלה כדי לשפר את הסבילות. לספק טיפול החזרה אורלי סטנדרטי (ORT) במקביל לפי הנחיות ארגון הבריאות^העולמי 23,24,25.
   1. השתמש בנוסחאות מסחריות המכילות Saccharomyces boulardii או זנים מקבילים שאושרו לשימוש קליני.
   2. המיס את תוכן השקית במים או בחלב בטמפרטורת החדר מיד לפני מתן הפה.
2. קבוצת ביקורת ילדים
   1. מתן שקיות פלצבו המכילים מלטודקסטרין אינרטי (250 מ"ג לשקיק) דרך הפה פעמיים ביום (פעמיים ביום) במשך 5 ימים, בהתאם ללוח הזמנים של קבוצת ההתערבות. יש להמיס את הפלצבו במים או בחלב לפני המתן ולתת אותו לאחר האכלה. ודאו ששקיות הפלצבו זהות במראה, בטעם, במשקל ובאריזה לשקיות Saccharomyces boulardii כדי לשמור על עיוורון.
   2. ספק טיפול החזרה אוראלי סטנדרטי.
   3. ספק הידרציה דרך הפה באמצעות מלחי התייבשות אוראליים בעלי אוסולריות נמוכה של ארגון הבריאות העולמי. למטופלים הזקוקים להידרציה תוך-ורידית, ניתן לתמיסת נתרן כלוריד 0.9% או תמיסת לקטט רינגר בהתאם לחומרת ההתייבשות והערכת הרופא. קבוצת התערבות למבוגרים
3. קבוצת התערבות למבוגרים
   1. זהה מטופלים בוגרים שקיבלו S. boulardii כחלק מטיפול קליני שגרתי. תעד טיפולים מקבילים, כולל הידרציה דרך הפה או תוך ורידי וטיפול אנטיביוטי.
4. קבוצת ביקורת מבוגרת
   1. זיהוי מטופלים בוגרים תואמים שקיבלו טיפול תומך סטנדרטי ללא S. boulardii. בצע התאמות על בסיס גיל, מין ואבחנה. יש להכיר בכך שגורמים מבלבלים פוטנציאליים, כולל שימוש באנטיביוטיקה, מחלות נלוות וחומרת המחלה, ייתכן שלא נשלטו במלואם.
   2. רשום פרטי טיפול מתוך רשומות רפואיות אלקטרוניות.
5. הערכה וטיפול במשתנים מבלבלים בקבוצה הבוגרת
   1. חילוץ נתונים על משתנים מבלבלים פוטנציאליים מרשומות רפואיות אלקטרוניות, כולל שימוש באנטיביוטיקה (סוג ומשך), חומרת המחלה הבסיסית (תדירות שלשולים, התייבשות, וצורך בנוזלים תוך-ורידיים), מחלות נלוות (למשל, סוכרת ומחלות גסטרואנטסטינליות כרוניות), ומשך התסמינים לפני הקבלה.
   2. השווה את מאפייני הבסיס בין קבוצות ההתערבות לקבוצת הביקורת כדי להעריך את האיזון לאחר ההתאמה.
   3. לבצע ניתוחים שכבתיים המבוססים על גורמים מרכזיים, כולל טיפול משותף באנטיביוטיקה (כן/לא) וחומרת המחלה (קלה לעומת בינונית).
   4. בצע ניתוח רגרסיה לוגיסטית רב-משתנית להערכת הקשר בין השימוש ב-Saccharomyces boulardii לבין תוצאות קליניות (למשל, פתרון וחזרת תסמינים) תוך התאמה לגורמים מבלבלים שזוהו.
   5. דווח על יחס סיכויים מותאם (aOR) עם רווחי סמך של 95% (CI).
   6. יש להכיר בכך שהבלבול השאריתי עשוי להימשך בשל אופיו הרטרוספקטיבי של המחקר.

5. עיוורון ואקראיות

1. אקראיות ילדים
   1. יצר את רצף האקראיות של ילדים באמצעות תוכנה סטטיסטית עם אקראיות בלוקים. שמור על הסתרת הקצאה באמצעות מעטפות אטומות וממוספרות ברצף, שהוכנו על ידי רוקח עצמאי.
2. עיוורון
   1. חוקרים עיוורים, מטפלים ומעריכי תוצאות להקצאת קבוצות בניסוי הילדים. אנליסטים עיוורים להקצאת טיפולים במהלך ניתוח סטטיסטי עבור שתי הקבוצה.
      הערה: אין לבצע עיוורון בקבוצת המבוגרים הרטרוספקטיבית.
      אזהרה: לטפל בדגימות ביולוגיות באמצעות פרוטוקולי בטיחות ביולוגית מתאימים. לבש ציוד מגן אישי (כפפות, חלוק מעבדה, מסכה). להשליך חומרים מזוהמים בהתאם להנחיות הפסולת הביו-רפואית המוסדית.

6. הערכת תוצאות

1. תוצאה ראשונית
   1. מדדו את משך השלשול כמספר הימים מהמינון הראשון של ההתערבות ועד הצואה האחרונה שלא נוצרה, ואחריה 24 שעות ללא שלשולים.
2. תוצאות משניות אצל מטופלים ילדים
   1. תעד את תדירות הצואה כל 24 שעות עד לרזולון. מדדו את משך האשפוז בימים.
   2. רישום שכיחות הקאות במהלך הטיפול. הערכו ריפוי קליני עד היום החמישי. תעד את כל האירועים השליליים.
3. תוצאות משניות במטופלים מבוגרים
   1. העריכו את פתרון התסמינים עד היום השביעי. רישום חזרה של שלשול בתוך 14 ימים.
   2. מדדו את משך השהייה בבית החולים. הערך את השפעת טיפול אנטיביוטי נלווי. תעד תופעות לוואי מתוך רשומות רפואיות אלקטרוניות.
4. הערכת אבחון
   1. אספו דגימות צואה טריות לפני מתן פרוביוטיקה או פלצבו כאשר הדבר אפשרי.
   2. בדקו דגימות צואה לילדים לאיתור רוטה-וירוס באמצעות בדיקת אנטיגן אימונוכרומטוגרפית מהירה. רשמו את התוצאה כחיובית לרוטאווירוס או כשלילית לרוטוירוס.
   3. למטופלים מבוגרים, יש להוציא תוצאות בדיקות צואה, אבחון קליני וקטגוריית פתוגן מרשומות רפואיות אלקטרוניות.

7. ניתוח סטטיסטי

1. ניתוח נתוני ילדים
   1. בצע ניתוח סטטיסטי באמצעות תוכנות סטטיסטיות.
   2. ביטוי משתנים רציפים כסטיית תקן ממוצעת ± (SD). הערכת נורמליות של משתנים רציפים באמצעות מבחן שפירו–וילק. ניתחו נתונים שאינם מבוזרים נורמלית באמצעות מבחן מאן–וויטני U.
   3. השוו משתנים רציפים באמצעות מבחן t מדגם עצמאי. השוו משתנים קטגוריים באמצעות מבחן חי-ריבוע או מבחן פישר המדויק במידת הצורך.
2. ניתוח נתונים למבוגרים
   1. הצג משתנים קטגוריים כתדירויות ואחוזים. חשב יחסי סיכויים (OR) עם רווחי ביטחון של 95% (CI). בצע השוואות באמצעות מבחן חי-ריבוע.
   2. בצע ניתוח רגרסיה לוגיסטית רב-משתנית כדי להתמודד עם גורמים מבלבלים פוטנציאליים, כולל שימוש באנטיביוטיקה, חומרת מחלה בסיסית ותחלואה נלווה.
   3. דווח על יחס סיכויים מותאם (aOR) עם רווחי סמך של 95% (CI).
   4. ביצעו ניתוחי תת-קבוצות המדורגים לפי סטטוס טיפול משותף באנטיביוטיקה.
   5. נתייחס ל-p < 0.05 כמובהק סטטיסטית.
3. סף משמעות
   1. הגדר מובהקות סטטיסטית כ-p < 0.05. הנתונים החסרים טופלו באמצעות ניתוח מקרה מלא. דווח על הערכות אפקט עם טווחי ביטחון של 95% כאשר רלוונטי.

תוצאות

טבלה 3 מסכמת את מאפייני הבסיס הדמוגרפיים והקליניים של משתתפי הילדים (n = 176). הגיל הממוצע של ילדים שקיבלו S. boulardii היה 23.0 ±-12.3 חודשים, לעומת 21.2 ±-11.8 חודשים בקבוצת הפלצבו. התפלגות המינים הייתה דומה בין הקבוצות (S. boulardii: 47 זכרים/43 נקבות; פלצבו: 51 זכרים/35 נקבות). ניתוח כי-ריבוע של התפלגות המינים לא הראה הבדל מובהק סטטיסטית (χ² = 0.63, p = 0.428), מה שמאשר שהקבוצות היו תואמות היטב מבחינה דמוגרפית. מאפייני הבסיס היו דומים בין...

דיון

חשוב לציין, תוצאות מקבוצות ילדים ומבוגרים לא צריכות להיות משוואות ישירות. המחקר הפדיאטרי היה ניסוי מבוקר אקראי, בעוד שקבוצת המבוגרים הייתה קבוצה תצפיתית רטרוספקטיבית. לכן, כל הבדלים שנצפו בין קבוצות הם תיאוריים ועשויים לשקף הבדלים בעיצוב המחקר, מאפייני האוכלוסייה או אטיולוגיית המחלה הבסיסית, ולא השפעות טיפול השוואתיות אמיתיות. המחקר מוצג בפורמט פרוטוקול מובנה כדי לשפר את השחזוריות והשקיפות של המתודולוגיה. פרוטוקול זה מספק מסגרת להערכת התערבויות פרוביוטיות בקבוצות גיל שונות, הן בתנאים מבו...

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
מחשב עם תוכנה סטטיסטית	IBM; קרן R למחשוב סטטיסטי	SPSS v25.0; R v4.3.1	תוכנה סטטיסטית מורשית מטרה: ניתוח נתונים
אקונורם	בייג'ינג האנמי פארמה בע"מ, בייג'ינג	CNCM I-745	זנים מסחריים מטרה: NA
מערכת רשומות רפואיות אלקטרוניות	מערכת מידע לבתי חולים	מערכת מוסדית	מאגר נתונים דיגיטלי מאובטח של מטופלים מטרה: חילוץ נתונים (קבוצה מבוגרת)
Florastor	ביוקודקס, צרפת	(S. boulardii CNCM I-745)	זנים מסחריים מטרה: NA
IBM SPSS סטטיסטיקה גרסה 25.0	IBM Corp., ארמונק, ניו יורק, ארה"ב	גרסה 25.0	משמש לניתוח סטטיסטי, כולל מבחני חי-ריבוע, חישוב יחס סיכויים ובדיקות מובהקות
נוזל תוך-ורידי (0.9% נתרן כלורי)	Baxter Healthcare / פרזניוס קבי	לפי ספק	תמיסת מלח איזוטונית סטרילית מטרה: הידרציה תוך-ורידית
מלחי התייבשות דרך הפה (ORS)	נוסח ארגון הבריאות העולמי	שקית ORS תקנית של ארגון הבריאות העולמי	ORS עם אוסמולריות נמוכה (Na + 75 mmol/L) הידרציה תוך-ורידית מטרה: טיפול בהחזרת מים דרך הפה
ציוד מגן אישי (PPE)	3M / שווה ערך	כפפות, מסכות, חלוקי מעבדה	ציוד מגן חד-פעמי מטרה: עמידה בדרישות בטיחות ביולוגית
שקי פלצבו (מלטודקסטרין)	בייג'ינג חאנמי פארמה בע"מ, בייג'ינג, סין.	מוכנים בהתאמה אישית	250 מ״ג לשקית, זהה במראה ל-Active drug מטרה: התערבות בקרה
תוכנת R גרסה 4.3.1	קרן R למחשוב סטטיסטי, וינה, אוסטריה	גרסה 4.3.1	משמש לניתוח סטטיסטי, ניתוח תת-קבוצות ומודלים של רגרסיה רב-משתנית
תוכנת אקראיות	תוכנת R / GraphPad Prism	v4.3.1 / v10	אקראיות בלוקים שנוצרה במחשב מטרה: רצף הקצאה
ערכת בדיקה מהירה לאנטיגן רוטה-וירוס	אבוט דיאגנוסטיקה / חיישן ביולוגי SD	SD BIOLINE רוטה/אדנו	בדיקה אימונוכרומטוגרפית מטרה: זיהוי רוטה-וירוס
שקי Saccharomyces boulardii CNCM I-745	[בייג'ינג Hanmi Pharmaceutical Co., בע"מ, בייג'ינג, סין.	[הכנס קטלוג/קוד מוצר]	250 מ"ג שמרי פרוביוטיקה ליופיליים לכל שקיק<בר/> מטרה: התערבות
מיכל איסוף צואה (סטרילי)	תרמו פישר סיינטיפיק / שווה ערך	מיכל סטרילי בנפח 120 מ"ל	עמיד לדליפות, סטרילי מטרה: איסוף דגימות צואה
מיכל/שקית להובלת צואה	מדעי הביולוגיה / שווה ערך	ערכת הובלת דגימות	העברה המסומנת כביוסכנה ואטומה