מאמר שיטה

השראה מכויילת חוט של היצרות שופכן סגמנטליות בעכברים באמצעות לפרוטומיה בקו האמצע

235 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/70726

⸱

17 באפריל 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Urology and Urosurgery, University Medical Center Mannheim, Medical Faculty of the University of Heidelberg, 2Department of General, Visceral, and Transplantation Surgery, Heidelberg University Hospital, 3Division of Intelligent Systems and Robotics in Urology (ISRU), German Cancer Research Center (DKFZ) Heidelberg, 4DKFZ Hector Cancer Institute at the University Medical Center Mannheim, 5Department of Urology, University Hospital Leipzig, 6Department of Plastic Surgery and Hand Surgery, TUM University Hospital Munich, 7ORSI Academy

במאמר זה

סיכום

פרוטוקול זה מתאר מודל עכברוש שניתן לשחזור להשראת היצרות שופכה סגמנטליות מדורגות באמצעות קישור חלקי מכויל בחוט באמצעות לפרוטומיה אמצעית. קשירת 6-0 סביב השופכן וחוט כיול מתכתי יוצרים לומן שאריתי מוגדר, המאפשר אישור תפקודי מיידי של חומרת החסימה.

תקציר

היצרות שופכן נותרות אתגר מרכזי באורולוגיה שחזורית ויכולות להיגרם מפציעה יאטרוגנית, דלקת כרונית, טראומה, אנומליות מולדות או קרינה. נגעים אלו מובילים לעיתים קרובות לאורופתיה חסימתית מתקדמת ולאובדן תפקוד הכליה. למרות ההתקדמות בטכניקות אנדוסקופיות וכירורגיות, היצרות שופכן עדיין מאתגרות לטיפול, והשפעות השיפוץ שלהן על הפרנכימה הכלייתית ממשיכות להיות נושא מחקר מתמשך, מה שמדגיש את הצורך במודלים פרה-קליניים חזקים. מחקר זה קובע מודל עכברוש שניתן לשחזור לאינדוקציה מבוקרת של דרגות שונות של היצרות שופכניות סגמנטליות באמצעות קשירה חלקית מכויילת בחוט באמצעות לפרוטומיה בקו האמצע. הפרוטוקול מאפשר התכווצות סגמנטלית, שאינה טרנסקטית של השופכן, במטרה להתקרב להיצרות פיברוטית ברמה פונקציונלית ואנטומית, תוך מזעור נזק איסכמי ברור ושמירה על יכולת הרקמה המאקרוסקופית עם רצף שופכן. על ידי מתן פלטפורמה ניסיונית אמינה עם שונות נמוכה בין בעלי חיים ובין מנתחים, גישה זו תומכת במחקר תרגומי במנגנונים ביומולקולריים, ביומטריה, שיטות דימות וטכניקות שחזור למחלת היצרות שופכן.

מבוא

היצרות שופכן הן נפוצות יחסית ומהוות אתגר משמעותי באורולוגיה. הם מדווחים עד 4.9% מהחולים לאחר ניתוח אנדוסקופי למחלת אבנים 1,2,3, עם שכיחות גבוהות אף בקרב אוכלוסיות בסיכון גבוה, כגון מקבלי השתלת כליה, שבהן עד 7% עלולים להיותמושפעים 4. למרות שרבים מההיצרות נגרמות מפציעות כירורגיות או מהתערבויות רפואיות, גורמים שאינם איטרוגניים מהווים גם חלק חשוב. אלה כוללים דלקת כרונית, דלקות בדרכי השתן, טראומה פיזית, חריגות מולדות וטיפול קרינתי 5,6. כל אחת מהאטיולוגיות הללו עלולה בסופו של דבר לגרום לחסימת שתן, זיהומים חוזרים, כאבים, יצירת אבנים, ואם לא מטופלים - לאובדן בלתי הפיך של תפקוד הכליה. מטופלים מושפעים חווים לעיתים תחלואה וירידה באיכות החיים, כפי שמודגם הן בקבוצות מוסדיות והן בסקירות שיטתיות 5,7,8. הנטל לטווח הארוך הוא משמעותי; בקבוצה רב-מוסדית של מטופלים עם היצרות שופכן לאחר ניתוח אבן שופנית, נדרשה ניתוח נפרקטומיה של הצד הפגוע ב-25% מהמקרים, מה שמדגיש את המחלה המשמעותיתשל מצב זה.

נטל קליני זה מדגיש את הצורך במודלים פרה-קליניים חזקים שיכולים לאפשר מחקר על תהליכים ביומולקולריים נלווים ולהנחות אופטימיזציה של הטיפול. שיטות הטיפול הנפוצות ביותר הן שיטות אנדוסקופיות, כגון הרחבה או חתך בלייזר, וכן סטנטינג, כאשר שחזור כירורגי שמור למקרים מורכביםיותר 10. למרות שיפור בתוצאות מוקדמות, החזרה והרתנוזיס נותרות בעייתיות. שיעורי החזרה המדווחים לאחר ההתערבות נעים בין 11% ל-40%, ורבים מהמטופלים זקוקים למספר ניתוחים או להתקנת סטנט לטווח ארוך לצורך הקלה עמידה והגנה על האיברים11,12. הצלחת הטיפול מושפעת מאתר ההיצרות, אורך, אטיולוגיה ופרטי טיפולים קודמים; מספר סקירות עדכניות ומחקרים גדולים מדגישים את הצורך בטכניקות משופרות ובהבנה מכנית עמוקהיותר 4,5,13.

מחקר תרגומי יעיל דורש מודלים ניסיוניים המשחזרים מקרוב את המנגנונים הפיברוטיים, התכונות ההיסטופתולוגיות, ההקשר האנטומי ותהליכי הכליה במעלה הזרם של מחלת היצרות שופכן בבני אדם. מתוכם, מודלים של מכרסמים הפכו לפלטפורמות אמינות לחקר פיברוזיס שופכתי ואובדן תפקוד כלייתי ולהערכת התערבויות אנטי-פיברוטיות ואסטרטגיות שיקום 6,14,15,16,17. הבסיס הפתופיזיולוגי למודלים אלו הונח על ידי שבלייה ואח', שסקרו אסטרטגיות שונות של חסימת שופכן, תוך התמקדות בחסימת שופכן חד-צדדית (UUO) כמודל שניתן לשחזור של פיברוזיס בין-תאי כלייתי ונפרופתיה חסימתית בעכברים6.

בהתבסס על יסוד זה, מודלים עכשוויים שיפרו את רמת ודפוס המכשולים. וורומן ואחרים הציגו גישה טכנית בטוחה באמצעות אלקטרופורציה בלתי הפיכה לגרימת חסימת שתן חד-צדדית חלקית עם צלקות כליות. באופן דומה, צ'ן ואחרים פיתחו מודל הפיך של UUO המאפשר מחקר דינמי של רגרסיית פיברוזיסבתנאים המודינמיים משתנים. נאן ואח' וח'טר ואחרים הבהירו עוד את המפלים המולקולריים שמניעים את התקדמות פיברוזיס השופכה ואת המודולציה הטיפולית בחסימה חלקית16,17.

מודלים מוקדמים שהסתמכו על קשירת שופכה מלאה, כריתה סגמנטלית, קבירה בשריר הפסואס או פגיעה תרמית גרמו לעיתים קרובות לדרגות חסימה לא מבוקרות ולא סטנדרטיות, איסכמיה נרחבת ונמק, מה שהוביל לניוון פרנכימלי כלייתי חמור במקום חסימה מדורגת. גישות אלו, כפי שתוארו על ידי שבלייה ואחרים ות'ורנהיל ואחרים, סיפקו תובנות מכניות חשובות לגבי נפרופתיה חסימתית, אך לא סיכמו את ההיצרות הפיברוטית המקומית האופיינית למחלת היצרות שופכנית קלינית שפירה 6,18. עדיין אין מודלים פשוטים וסטנדרטיים של מכרסמים שמייצרים היצרות סגמנטים מכויילים, שאינם חותכים, עם שמירה על חיוניות רקמה ודרגות מוגדרות של חסימת שתן בכליות.

כדי לטפל בפער זה, מחקר זה קובע פרוטוקול כירורגי סטנדרטי להשראה מבוקרת של היצרות חלקיות בשופכן בעכברים. המודל תוכנן להיות ניתן לשחזור, מדויק אנטומית ורסטילי לשימוש במחקר פרה-קליני הכולל אורולוגיה שחזורית, הערכת הדמיה תוך ניתוחית ויישומים בהנדסת רקמות. על ידי מזעור שונות בין מפעילים ושכפול היצרות פיברוטית רלוונטית קלינית, מודל זה מציע פלטפורמה תרגומית לקידום הבנה מכנית ולהאצת פיתוח טיפולי למחלת היצרות שופכן.

בשימוש מעשי, ניתן להתאים את רמת החסימה על ידי בחירת קוטר חוט הכיול המתאים לשאלת המחקר. קוטרים גדולים יותר (למשל, 0.65 מ"מ) מדמים חסימה חלקית קלה עם זרימת שתן כמעט פיזיולוגית, בעוד שקוטרים קטנים יותר (0.30–0.20 מ"מ) מדמים חסימה בדרגה גבוהה עם הפחתת זרימה משמעותית. יתרה מזאת, גישה כירורגית זו יכולה להיות מיושמת כמודל סופי אקוטי לחקר שינויים הדינמיים ותפקודיים מיידיים, או מותאמת לניסויי הישרדות לחקר עיצוב רקמות כרוני, התקדמות פיברוזיס והסתגלות כלייתית ארוכת טווח.

במודל זה, חסימה חלקית מושגת על ידי קשירת רצועת 6-0 סביב השופכן יחד עם חוט כיול מתכתי בקוטר מוגדר, ולאחר מכן הסרת החוט, ומשאירה לומן שאריתי התואם לגודל החוט. עיצוב זה מאפשר היצרות מדורגת, מבוקרת גיאומטרית, שניתן לקשר ישירות לזרימת השתן הפונקציונלית של הכליה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל פעילויות בעלי החיים המתוארות כאן התבצעו במתקנים מוסמכים ואושרו על ידי ועדת הטיפול והשימוש בבעלי חיים המוסדית (IACUC) של המועצה האזורית באדן-וירטמברג בקרלסרוהה, גרמניה. בעלי החיים הניסיוניים טופלו בהתאם לפרוטוקולים מוסדיים ובהתאם לחקיקה הגרמנית המסדירה את רווחת בעלי החיים, וכן להנחיות שנקבעו על ידי מועצת הקהילה האירופית (2010/63/EU) והנחיות מחקר בעלי חיים: דיווח על ניסויים בחיים (ARRIVE). זכרי חולדות ספרג דולי (משקל ממוצע: 400 גרם) שימשו לאחר תקופת הסתגלות של 7 ימים במתקן בעלי החיים בתנאים סטנדרטיים. החומרים והציוד בהם משתמשים מופיעים בטבלת החומרים.

1. הרדמה ומשכך כאבים

  1. השרה של הרדמה באמצעות איזופלוראן 4% נפח המסופק ב-100% חמצן דרך תא השראה בקצב זרימה של 5 ליטר לדקה.
  2. לאחר אובדן רפלקס היישרון, ניתן זריקה תת-עורית של 100 מ"ג/ק"ג קטמין (תמיסה של 10%; כ-0.35 מ"ל) ו-4 מ"ג/ק"ג קסילאזין (דילול של 1:10 של תמיסה של 2%; כ-0.75 מ"ל) להרדמה דיסוציאטיבית, הרדמה דיסוציאטיבית, הקלה בכאבים והרדמה.
  3. בדוק עומק ההרדמה על ידי היעדר תגובה לגירוי צביטה חזק של האצבע באמצעות מלקחיים.
  4. מרחו משחה עינית על שתי העיניים כדי למנוע ייבוש בקרנית.
  5. השגת הקלה נוספת לכאבים באמצעות הזרקה תת-עורית של 5 מ"ג/ק"ג קרפרופן (דילול 1:10 של תמיסה של 5%; כ-0.35 מ"ל).
  6. שמרו על הרדמה עם תוספת של איזופלוראן 4% נפח באמצעות מסכת פנים יילודים לפי הצורך לאורך כל ההליך.
  7. שמרו על טמפרטורת גוף של 36.5–37.5 מעלות צלזיוס באמצעות כרית חימום מבוקרת תרמוסטטית לאורך כל ההליך.

2. אתר הפעלה והכנת מכשירים

  1. הכינו את שולחן הניקוי עם כל הכלים הנדרשים, כולל מלקחיים להכנה א-טראומטית, מהדקי אוברהולט קהה, מספריים להכנה, קשרות מונופילמנט 6-0 שאינן נספיחות, חוטי כיול מתכת (סגסוגת עם משטח אלקטרופוליש וקצוות ללא קבר; 0.65, 0.55, 0.30, 0.20 מ"מ בקוטר; עיקור (אוטוקלב) לפני השימוש), משטחי צמר גפן לחות, מטליות גזה, מזרק 1 מ"ל עם מחט משולבת של 30 גרם, מתילן כחול (תמיסה של 0.5%, לא מדוללת), תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית (0.9% NaCl), וצינורות קפילריים.
  2. התקן את החיה על מכשיר הניתוח לחשיפה למכרסמים כפי שתואר בדיווחים קודמים19,20.
  3. לגלח את אזור הגישה לבטן ולבצע סקרסים משולשים לסירוגין עם 70% אתנול ופובידון-יוד או כלורהקסידין במעגלים קונצנטריים מאתר החתך החוצה. חזור על זה שלוש פעמים.
  4. כסו את החיה בוילונות סטריליים, והשאירו רק את שדה הניתוח חשוף.
  5. לטפל בחומרי הרדמה נדיפים, גזים וצבעים כימיים בהתאם לתקנות הבטיחות הביולוגית המוסדית, תוך שימוש במערכות פינוי גז מתאימות, ציוד מגן ומיכלי פינוי חדים מאושרים.

3. גישה כירורגית באמצעות לפרוטומיה בקו האמצע

  1. בצע חתך עור בטני חציוני של כ-3 ס"מ באמצעות מספריים דקים.
  2. חתכו את הלינאה אלבה לאורך הקו האמצעי כדי להגיע לחלל הפריטונאלי.
  3. השתמשו בווים להכנת ודחסים לחים כדי למשוך את דופן הבטן ולחשוף את הרטרופריטונאום.

4. זיהוי והנעת שופכן שמאלי

  1. זהה את הכליה ואת החלל הרטרופריטוניאלי והנע בעדינות את השומן הרטרופריטוניאלי הסובב באמצעות דיסקציה קהה עם מלקחיים ומקלשי כותנה לחים (איור 1A).
  2. דקור את האגן הכלייתי דרך הפרנכימה הכלייתית עם מחט עדינה של 30 גרם (איור 1B).
  3. הזרקו 0.01–0.2 מ"ל של מתילן כחול לא מדולל כדי להקל על זיהוי ויזואלי של השופכן (איור 1B.5).
  4. צפו בהפרדה הדרגתית של צבע כדי לעקוב ויזואלית אחרי מסלול השופכון מהאגן הכלייתי לכיוון שלפוחית השתן (איור 1B.6–10).
  5. הפרדו בעדינות את רקמת החיבור והרקמה השומנית הסובבת מהשופכן המסומן בצבע באמצעות מלקחיים עדינים ומקלדות כותנה לחות בתנועת פריטה (איור 1C). הימנעו מאחיזה ישירה, דחיסה או אחיזה מופרזת בדופן השופכה כדי למנוע קרעים או פיסטולות. הנע את השופכן עד שניתן יהיה לעקוב אחריו ברציפות מהאגן הכלייתי לכיוון צומת הווסיקורטרל (איור 1D).

figure-protocol-1
איור 1: זיהוי והנעת שופכן שמאלי בעזרת צבע . החץ הירוק מציג את אתר ההזרקה לכלייה. החץ האפור מתאר את השופכן התמים. החץ הכחול מציג שופכן מסומן בצבע. הקופסה השחורה מציגה אזור שהוגדל לאחר מכן. (א) חשיפה רטרופריטוניאלית שמאלית לאחר לפרוטומיה בקו האמצע. (ב) סימון שופכן בסיוע צבע. (ג) ניתוח קהה מניע את השופכן מהרקמה הסובבת. (ד) שופכן שמאלי חשוף לחלוטין מאגן הכליה למפגש הווסיקורטרלי. (ה) איור סכמטי של השלבים המתוארים, כולל מזרק ומתילן כחול. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

5. קשירה חלקית מכויילת דיסטלית של השופכן השמאלי באמצעות חוט מתכת

  1. הרימו קטע ממונע של השופכן הדיסטלי באמצעות מלקחיים אטראומטיים מבלי ללחוץ על השופכן (איור 2A.1–2).
  2. העבירו תפר מונופילמנט 6-0 מתחת לשופכן באמצעות מלקחיים קהים (איור 2A.3).
  3. יש להניח חוט כיול מתכתי בקוטר הרצוי (0.65, 0.55, 0.30 או 0.20 מ"מ) במקביל לשופכן בתוך לולאת הליגטורה (איור 2B.1–6).
  4. הדק את הקשורה בהדרגה באמצעות קשר מחליק עם מספר זריקות לולאה באותו כיוון עד שרתועת התפר מסתגלת בחוזקה לקומפלקס השופכן-חוט מבלי להתרופף, מה שדורש לפחות 4 הטלות עם תנועות אצבעות קופצות איטיות כדי לאפשר תפר להתיישב בין ההטלה.
    הערה: מתח התפירה צריך להיות מעט מתחת לחוזק השבירה של המתיחה, שהוא 5–7 ניוטון עבור תפר 6-0 שאינו נספג, ולכן מומלץ להשתמש ב-3 ניוטון. זה מתורגם למשקל משיכה של כ-306 גרם וניתן למדוד אותו באמצעות משקל קפיץ או דומה לעוצמה הדיגיטלית כאשר מחזיקים טלפון סלולרי רגיל עם שתי אצבעות באחיזת לחיצה דחופה. ההיבט המרכזי הוא שהתפר סגור לחלוטין לקומפלקס השופכן-חוט, ויש כל כך הרבה זריקות לולאה שהן לא משתחררות לפני שהזריקות הנעילות מתחילות. בגלל האופי השברירי של תפרי 6-0, אין "הדוק מדי" כי התפר יישבר לפני שיהיה צמוד מדי לרקמת השופכן להתדרדר. כעת אבטח את הקשר עם 3 זריקות לולאת נעילה נגדית כדי למנוע קשרי אוויר (איור 2B.7–10).
  5. משכו בזהירות את חוט הכיול בתנועה איטית וישרה כדי למנוע פגיעות גזירה בדופן השופכן, והשאירו לומן שופכון שיורתי סטנדרטי התואם לקוטר החוט (איור 2C.1–5). משטח החוט המלוטש מפחית חיכוך במהלך ההסרה ומפחית את הסיכון לנזק לרקמות.

figure-protocol-2
איור 2: קישור חלקי מכויל דיסטלי של השופכן השמאלי באמצעות חוט מתכת. (א) שופכן דיסטלי מבודד ומורם עם קליפסי אוברהולט; תפר 6-0 הונח מתחת. (ב) חוט כיול ממוקם במקביל לשופכן בתוך הליגטורה והקשירה באמצעות קשר מחליק. (C) משיכת חוט, שמשאירת לומן שאריתי סטנדרטי. (D) איור סכמטי של השלבים המתוארים עם השופכן (כחול), חוט כיול (אפור) וקשורה (שחור). אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

6. זיהוי והנעה של השופכן הימני

  1. חזור על השלבים באנלוגיה לצד הנגדי (איור 3).

figure-protocol-3
איור 3: זיהוי והנעת שופכן ימין בעזרת צבע . (א) חשיפה רטרופריטוניאלית ימין עם סימון שופכן בעזרת צבע. (ב) ניתוק קהה שמניע את השופכן מהרקמה הסובבת. (ג) איור סכמטי של השלבים המתוארים. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

7. קשירה פרוקסימלית מלאה של השופכן הימני באמצעות קשר מחליק ללא חוט

  1. הרימו קטע נייד של השופכן הפרוקסימלי באמצעות מלקחיים אטראומטיים מבלי ללחוץ על השופכן (איור 4A.1–3).
  2. העבירו תפר מונופילמנט לא נספג בקוטר 6-0 מתחת לשופכן באמצעות מלקחיים קהים (איור 4A.4,5).
  3. הדק את הליגטורה בהדרגה באמצעות קשר מחליק עם מספר זריקות לולאה באותו כיוון עד שרצועה התפירה קושרת היטב את השופכן מבלי להתרופף, כפי שתואר לעיל. לאחר מכן, מאובטחים עם זריקות לולאת נעילה נגדית כדי להשיג סגירת לומינל כמעט מלאה (איור 4B.1–4).

figure-protocol-4
איור 4: קשירת שופכן פרוקסימלית מלאה של השופכן הימני באמצעות קשר מחליק ללא חוט. (א) שופכן פרוקסימלי מבודד ומורם באמצעות קליפסי אוברהולט; תפר 6-0 הונח מתחת. (ב) קשירה מלאה ללא חוט באמצעות קשר מחליק. (ג) איור סכמטי של השלבים המתוארים. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

8. אימות פונקציונלי של חסימה חלקית ומלאה של שופכן

  1. לאימות חסימה חלקית בצד השמאלי, מזריקים 0.2 מ"ל מתילן כחול לא מדולל באופן שקופ לאגן הכליה באמצעות מזרק וצפו במילוי מוקדם של השופכן הדיסטלי לאתר הקישור (איור 5A.1–3).
  2. הזרקו 1.0 מ"ל סליין לאגן הכלייתי כדי לנקות בהדרגה את אות הצבע על ידי שטיפה ואישור המשך פטנטיות שופכן (איור 5A.3). כדי להגדיל עוד יותר את הוודאות לגבי חסימת שופכונית לא שלמה, יש להמשיך בהזרקה עד שנפח שלפוחית השתן עובר וניתן לראות זרימת נוזל נראית לעין מהשופכה (איור 5A.4–5).
  3. לאימות חסימה מלאה בצד ימין, יש להזריק 0.2 מ"ל מתילן כחול לא מדולל באופן שקופ לאגן הכלייתי ולאשר היעדר מעבר צבע דיסטלי (איור 5B.1,2).
  4. זהה הרחבת קליבר שופכון פרוקסימלית במעלה הזרם מאתר הקשיכה כאינדיקטור לחסימת זרימה מלאה (איור 5B.3).
  5. לאימות נוסף מעבר לשימושיות של מודל בעלי החיים, חתיכו את שני השופניות למרחק ומקמו את קצות השופכן הפתוחים סמוכים ישירות לנימי זכוכית למדידות איסוף שתן (איור 5C).
  6. לצורך אימות מודל זה, יש לכמת את ייצור השתן לכל כליה במשך תקופה של 30 דקות בתנאים פיזיולוגיים ולאחר קשירה חלקית באמצעות חוטי כיול בקוטר 0.65, 0.55, 0.30 ו-0.20 מ"מ (איור 5C.2).

figure-protocol-5
איור 5: אימות תפקודי של חסימה חלקית ומלאה של שופכן. (א) חסימה חלקית: צבע הצבע ושטיפת מי מלח מראים מילוי שופכן מרוחק וזרימת שופכה, מה שמעיד על שארית פטנטיות. (ב) חסימה כמעט מלאה: היעדר צבע דיסטלי, עם שופכן פרוקסימלי נפוח במעלה הזרם של הקליטה. (ג) איסוף נימי נפח שתן חד-צדדי מעל 30 דקות לכל כליה מראה ירידה מדורגת בתפוקת השתן מתנאים פיזיולוגיים ועד לסתימה מלאה. (ד) מדידות מיקרוסקופיות של (1) קוטר קשירה, (2) קוטר שופכן חיצוני, (3) קוטר שופכן פנימי, ו-(4) עובי דופן השופכן. כוכבות מציינות רמות מובהקות חקרניות. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

9. שלבים סופיים ושיקולים

  1. סגור את דופן הבטן בשכבות מרובות בתנאים סטריליים כפי שתואר בדוחות קודמים 19,20,21.
  2. לאחר הניתוח, יש לצפות בכל בעל חיים ברציפות עד שהוא חוזר לשכיב את עצם החזה ולניידות ספונטנית. החזירו את בעלי החיים רק לאחר שהם ערניים לחלוטין ומסוגלים לתנועה מתואמת. מתן משכך כאבים לאחר ניתוח עם קרפרופן תת-עורי במינון 5 מ"ג/ק"ג פעמיים ביום במשך 48 שעות ודא שהצוות הווטרינרי מבצע הערכות קליניות יומיות למעקב אחר ההחלמה ולזיהוי סיבוכים פוטנציאליים.
  3. תעד רווחת בעלי חיים באמצעות מערכות ניקוד סטנדרטיות כמו סולם Grimace של עכברוש22 וציון מצב גוף23. נקודות סיום הומניות כוללות ציון Grimace של עכברוש ≥ 6 או ציון מצב גוף של 1 למרות משככי כאבים מספקים. הפסיקו חיות שמציגות ממצאים אלו, כמו גם כאלה שמראים זיהום פצע לאחר ניתוח או התפרקות בדופן הבטן, מיד בהתאם לסטנדרטים המוסדיים של טיפול.
  4. לניסויים שאינם הישרדותיים או להפסקה לאחר מעקב, יש להמתים את החיה באמצעות כריתת לב חדה בהרדמה עמוקה או באמצעות פריקה צווארית (בהתאם לפרוטוקולים שאושרו על ידי המוסד). באופן אופציונלי, לכרות את הכליות והשופכן באחד לצורך בדיקה אנטומית מאוחרת, ניתוח ביומולקולר או הדמיה היסטופתולוגית.
  5. להשליך גופות בעלי חיים, רקמות שנכרתו, חדות ותמיסות כימיות שנותרו בהתאם להנחיות מוסדות לבעלי חיים ולבטיחות ביולוגית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

טכניקת הקשירה המכויילת יצרה הפחתה תלויה בקוטר בזרימת השתן בכל קבוצות הניסוי. זרימת השתן הוערכה בסך הכל ב-14 חולדות שהשתמשו בשתי הכליות, מה שהוביל למדידות מ-5 איברים לכל גובה חסימה חלקית (0.65, 0.55, 0.30 ו-0.20 מ"מ קוטרים). בנוסף, נכללו 4 בעלי חיים שקיבלו טיפול ב-Sham בצד אחד (השופכן הונע, וקשורה קשר אוויר רפוי וללא חוט) וחסימה מלאה בצד השני (חסימה ללא חוט לצורך חסימה מלאה) לצורכי אימות. ייצור השתן נמדד על ידי איסוף שתן מגדם השופכה החתוך לנימי זכוכית במשך תקופה של 30 דקות לכל כליה (

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מחקר זה קובע שיטה ניתנת לשחזור לגרימת היצרות שופכן חד-צדדיות בעכברים באמצעות לפרוטומיה בקו האמצע וקשירה חלקית מכוילת, מה שמוביל להיצרות שופכון סגמנטליות עם שמירה על יכולת הרקמה המאקרוסקופית המזכירה פונקציונלית ואנטומית היצרות שופכניות שפירות בבני אדם.

קלינית, מחלת היצרות שופכן נותרה גורם מרכזי לחסימת דרכי עליונות ותחלואה כליות, עם אובדן תפקודי ממושך, לעיתים קרובות לאחר פציעה יטרוגנית, טראומה אודלקת.

למרות שפו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

לא הוכרזו ניגודי עניינים. לא התקבל מימון ספציפי. שימוש בבעלי חיים שאושר על ידי המועצה האזורית של באדן-וירטמברג (IACUC 35-9185.81/G-62/23).

תודות

המחברים מודים בהכרת תודה על שירות אחסון הנתונים SDS@hd הנתמך על ידי משרד המדע, המחקר והאמנויות של באדן-וירטמברג (MWK) וקרן המחקר הגרמנית (DFG) באמצעות מענקים INST 35/1314-1 FUGG ו-INST 35/1503-1 FUGG. יתרה מזאת, המחברים מודים בהכרת תודה על התמיכה של NCT (המרכז הלאומי למחלות גידול בהיידלברג, גרמניה) דרך תוכנית הפוסט-דוקטורט המובנית ותוכנית האונקולוגיה הכירורגית. אנו גם מכירים בתמיכה באמצעות כספי המדינה שאושרה על ידי הפרלמנט המדינתי של באדן-וירטמברג לברית החדשנות בקמפוס בריאות + מדעי החיים היידלברג מנהיים מתוכנית הפוסט-דוקטורט המובנית לאלכסנדר סטודייה-פישר: בינה מלאכותית בבריאות (AIH) - שיתוף פעולה של DKFZ, EMBL, אוניברסיטת היידלברג, בית החולים האוניברסיטאי של מאניים, המכון המרכזי לבריאות הנפש, ומכון מקס פלאנק למחקר רפואי. בנוסף, אנו מודים על התמיכה דרך מכון הסרטן הקטור DKFZ במרכז הרפואי האוניברסיטאי במנהיים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מלקחי הכנה א-טראומטייםאסקולאפFB395RDE BAKEY ATRAUMATA מלקחיים אטראומטיים, ישר
מהדקי אוברהולט קהיםאסקולאפBJ012Rהכנת BABY-MIXTER וקליגטורה, כפוף, 180 מ"מ
קנולהBD (בקטון, דיקינסון)301300BD Microlance 3 קנולה 20 G
צינורות נימיםסיגמא אולדריץ'P1174צינור מיקרו-נימים, מכויל 100 ומיקרו; L
קרפרופןCP פארמה115קרפרופן 0.5% (5% עם 50 מ"ג/מ"ל מדולל 1:10) (קרפרוסול&רג;)
החלפות כותנהאמזוןASIN: B0FPDB8ZGSכותנה לא סטרילית החלפות וול
(אוטוקלאב לניסויי הישרדות)
מוטות קיבועחברת legefirm‎ 500343896מזלגות כיוון המשמשים כמוטות קיבוע מתכתיים בצורת Y
החלפות גזהמדרולASIN: B09164D1JGהחלפות גזה סטרילית
כרית חימוםרויאל גארדינירIP67רפידת חימום רויאל גרדינר בגודל S, 20 וואט
איזופלוראןטיפול נמרץ פירמלPZN / EAN 09714675 / 4150097146757100% איזופלורן 250 מ"ל
מאדה איזופלוראןUNO ROESTVASTSTAAL BV180000002מאדה איזופלוראן
תמיסת נתרן כלוריד איזוטוניתב. בראוןASIN: B007PZJOQ4תמיסת נתרן כלוריד 0.9%
קטמיןCP פארמה1202קטמין 10% (100 מ"ג/מ"ל)
חוט כיול מתכת
(קוטר 0.20 מ"מ)		קווארקזמןASIN: B0DCZBT4LWחוט מתכת Cr20Ni80-Nichrom
(קוטר 0.20 מ"מ)
חוט כיול מתכת
(קוטר 0.30 מ"מ)		רייהר4006166052859כבל מתכת Cr20Ni80-Nichrom
(קוטר 0.30 מ"מ)
חוט כיול מתכת
(קוטר 0.55 מ"מ)		סקייפרוUPC: 792138793816כבל מתכת Cr20Ni80-Nichrom
(קוטר 0.55 מ"מ)
חוט כיול מתכת
(קוטר 0.65 מ"מ)		טוויפאסין: B07WFWNNRMחוט מתכת Cr20Ni80-Nichrom
(קוטר 0.65 מ"מ)
מתילן כחול 0.5%פרופפארםPZN / EAN 10179678 / 4150101796787מתילתיוניום כלוריד פרובבלו 5 מ"ג/מ"ל בבקבוקונים של 10 מ"ל
ליגטורות מונופילמנט 6-0 שאינן נספגותCOVIDIENVP-889-Xתפר כירורגי מונופילמנט מפוליפרופילן שאינו נספג; המחט ניתנת להסרה
משחת עינייםBayer Vital GmbH15786815% דקספנתנול
צינור פרפוזור מפלסטיקמ. שילינג GmbHS702NC150צינור חיבור COEX 150 ס"מ
מכין מספרייםאסקולאפBC177Rמספריים להכנת JAMESON, מעוקם, דגם עדין, קהה/קהה, 150 מ"מ (6")
פלטת פלדהמאשיננבאו פלד GmbHC010206לוח מגולוון, 40 על 50 ס"מ, עובי 4.0 מ"מ
מזרק עם מחט משולבתBLPRKOTBL2509L3yici08מזרק 1 מ"ל עם מחט משולבת של 30 גרם
זילזיןCP פארמה1206זילזין 0.2% (2% עם 20 מ"ג/מ"ל מדולל 1:10) (Xylavet)

מקורות

  1. Moretto, S., et al. Ureteral stricture rate after endoscopic treatments for urolithiasis and related risk factors: systematic review and meta-analysis. World J Urol. 42 (1), 234(2024).
  2. Sahin, C., et al. Ureteral stricture formation after endoscopic removal of obstructing stones: could it be predicted with well-assessed radiological parameters. Urolithiasis. 52 (1), 34(2024).
  3. Sunaryo, P. L., et al. Ureteral strictures following ureteroscopy for kidney stone disease: A population-based assessment. J Urol. 208 (6), 1268-1275 (2022).
  4. Minkovich, M., et al. Ureteral strictures post-kidney transplantation: Trends, impact on patient outcomes, and clinical management. Can Urol Assoc J. 15 (10), E524-E530 (2021).
  5. Rosenfeld, J., et al. A review of complications after ureteral reconstruction. Asian J Urol. 11 (3), 348-356 (2024).
  6. Chevalier, R. L., Forbes, M. S., Thornhill, B. A. Ureteral obstruction as a model of renal interstitial fibrosis and obstructive nephropathy. Kidney Int. 75 (11), 1145-1152 (2009).
  7. Reicherz, A., et al. Ureteral obstruction promotes ureteral inflammation and fibrosis. Eur Urol Focus. 9 (2), 371-380 (2023).
  8. Li, Z., et al. Health-related quality of life (HRQoL), anxiety and depression in patients with ureteral stricture: A multi-institutional study. World J Urol. 41 (1), 275-281 (2023).
  9. May, P. C., et al. The morbidity of ureteral strictures in patients with prior ureteroscopic stone surgery: multi-institutional outcomes. J Endourol. 32 (4), 309-314 (2018).
  10. Contreras, P., et al. Ureteral stricture: Endoscopic management. Eur Urol Focus. 11 (5), 730-732 (2025).
  11. Su, B., et al. Long-term outcomes of Allium ureteral stent as a treatment for ureteral obstruction. Sci Rep. 14 (1), 21958(2024).
  12. Kowalski, F., et al. Endourological treatment of ureteral strictures with the use of self-expanding stents: Is it possible to completely cure the stricture endoscopically? a retrospective study with two-year follow-up. World J Urol. 43 (1), 201(2025).
  13. Bourillon, A., et al. Robotic upper urinary tract reconstruction for ureteral stricture: A single-center series. J Robot Surg. 19 (1), 573(2025).
  14. Vroomen, L., et al. A new intrasurgical technique to safely and reproducibly induce partial unilateral urinary obstruction and renal scarring in a rat model. Int Urol Nephrol. 52 (7), 1209-1218 (2020).
  15. Chen, T., Zhang, Z., Lai, C. Improvement of the reversible unilateral ureteral obstruction model. Ren Fail. 47 (1), 2454721(2025).
  16. Nan, Q. Y., et al. Pathogenesis and management of renal fibrosis induced by unilateral ureteral obstruction. Kidney Res Clin Pract. 43 (5), 586-599 (2024).
  17. Khater, Y., Barakat, N., Shokeir, A., Samy, A., Karrouf, G. Renal fibrosis progression following partial unilateral ureteral obstruction: mechanisms and therapeutic insights. World J Urol. 43 (1), 229(2025).
  18. Thornhill, B. A., Burt, L. E., Chen, C., Forbes, M. S., Chevalier, R. L. Variable chronic partial ureteral obstruction in the neonatal rat: A new model of ureteropelvic junction obstruction. Kidney Int. 67 (1), 42-52 (2005).
  19. Studier-Fischer, A., et al. Endotracheal intubation via tracheotomy and subsequent thoracotomy in rats for non-survival applications. J Vis Exp. (205), e66684(2024).
  20. Studier-Fischer, A., et al. Controlled reversible visceral arterial ischemia, venous congestion and combined malperfusion via midline laparotomy in rats. J Vis Exp. (209), e67171(2024).
  21. Studier-Fischer, A., et al. 5/6 nephrectomy using sharp bipolectomy via midline laparotomy in rats. J Vis Exp. (218), e67322(2025).
  22. Sotocinal, S. G., et al. The rat grimace scale: A partially automated method for quantifying pain in the laboratory rat via facial expressions. Mol Pain. 7, 55(2011).
  23. Hickman, D. L., Swan, M. Use of a body condition score technique to assess health status in a rat model of polycystic kidney disease. J Am Assoc Lab Anim Sci. 49 (2), 155-159 (2010).
  24. Gild, P., et al. Adult iatrogenic ureteral injury and stricture-incidence and treatment strategies. Asian J Urol. 5 (2), 101-106 (2018).
  25. Luo, J., et al. marrow mesenchymal stem cells reduce ureteral stricture formation in a rat model via the paracrine effect of extracellular vesicles. J Cell Mol Med. 22 (9), 4449-4459 (2018).
  26. Maruschke, M., et al. Development of a rat model for investigation of experimental splinted uretero-ureterostomy, ureteral stenting and stenosis. In Vivo. 27 (2), 245-249 (2013).
  27. Demirhan, K., Saglam, H. S., Cimen, H. I., Elcin, B., Cokluk, E. Effect of the location and severity of partial ureteral obstruction on urinary system stone disease formation. Sci Rep. 15 (1), 11560(2025).
  28. Wen, J. G., Chen, Y., Frøkiaer, J., Jørgensen, T. M., Djurhuus, J. C. Experimental partial unilateral ureter obstruction I pressure flow relationship in a rat model with mild and severe acute ureter obstruction. J Urol. 160 (4), 1567-1571 (1998).
  29. Li, P., et al. An immature murine model of reversible unilateral ureteral obstruction. J Vis Exp. (218), e67238(2025).
  30. Martínez-Klimova, E., Aparicio-Trejo, O. E., Tapia, E., Pedraza-Chaverri, J. Unilateral ureteral obstruction as a model to investigate fibrosis-attenuating treatments. Biomolecules. 9 (4), 141(2019).
  31. Mohammadi, A., et al. Effects of the surgical ligation of the ureter in different locations on the kidney over time in the rat model. Adv Urol. 2024, 6611081(2024).
  32. Narváez Barros, A., et al. Reversal unilateral ureteral obstruction: A mice experimental model. Nephron. 142 (2), 125-134 (2019).
  33. Nakazawa, R., et al. Renal replacement strategies: dual benefits of hydrogen gas inhalation and hydrogen-enriched dialysate. Med Gas Res. 15 (3), 444-445 (2025).
  34. Cheng, J., Shi, M., Sun, X., Lu, H. Therapeutic effect of hydrogen and its mechanisms in kidney disease treatment. Med Gas Res. 14 (2), 48-53 (2024).
  35. Liu, B., et al. Hyperbaric oxygen therapy for male infertility: a systematic review and meta-analysis on improving sperm quality and fertility outcomes. Med Gas Res. 15 (4), 529-534 (2025).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים