פרוטוקול זה מאפשר הכנה ואפיון של ננו-חלקיקי פולי (חומצה לקטית-קו-גליקולית) מצופים ממברנה-מקרופאג' עם ממקרופאגים מתואמים CD47 ואינטגרין α4/β1 ליישומים ממוקדים של אספקת תרופות.
Method Article
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 7-אמינואקטינומיצין D (7-AAD) | תרמו פישר סיינטיפיק (ארה"ב) | A1310 | צבע היתכנות לציטומטריית זרימה להבחנה בין חיים לחיים ומתים |
| אלקסה פלואר 488 נגד ארנב לעזים IgG | תרמו פישר סיינטיפיק (ארה"ב) | A-11008 | נוגדן משני לצביעת אימונופלואורסצנציה CD68 |
| נוגדן CD47 נגד עכבר | אבקאם (ארה"ב) | AB214453 | משמש לניתוח כתם מערבי לאימות ביטוי CD47 |
| אינטגרין אנטי-עכבר ואלפא; 4 נוגדנים (B-2) | ביוטכנולוגיה של סנטה קרוז (ארה"ב) | SC-376334 | משמש לניתוח כתם מערבי לאימות אינטגרין ואלפא; 4 ביטוי |
| אינטגרין אנטי-עכבר ובטא; נוגדן אחד (A-4) | ביוטכנולוגיה של סנטה קרוז (ארה"ב) | SC-374429 | משמש לניתוח ווסטרן בלוט לאימות אינטגרין ובטא; 1 ביטוי |
| עכברים ApoE-/- | מעבדת ג'קסון (ארה"ב) | לא זמין | משמש למודל טרשת עורקים בחיים |
| ערכת בדיקות BCA | תרמו פישר סיינטיפיק (ארה"ב) | 23225 | משמש לקביעת ריכוז החלבון |
| לוח סיליקון שחור | לא זמין | לא זמין | שימש להרכבת אאורטה להדמיה אקס-ויבו |
| פלסמיד CD47 (pcDNA3.1(+)) | Generay Biotech (סין) | G0177361-1 | מכיל גן Cd47 של עכבר לביטוי יתר |
| קולכיצין | סיגמא-אולדריץ' (ארה"ב) | C9754 | מטען טיפולי בננו-חלקיקים |
| מיקרוסקופ סורק לייזר קונפוקלי | לייקה מיקרוסיסטמס | TCS SP8 | משמש להדמיה פלואורסצנצית וניתוח קו-לוקליזציה |
| בופר ציטראט (pH 6.0) | תרמו פישר סיינטיפיק (ארה"ב) | לא זמין | משמש לשחזור אנטיגנים בצביעת אימונופלואורסצנציה |
| צינורות דיאליזה (MWCO 3,500 Da) | סיגמא-אולדריץ' (ארה"ב) | PURD35030 | משמש לטיהור ננו-חלקיקים |
| דימתיל סולפוקסיד (DMSO) | סיגמא-אולדריץ' (ארה"ב) | D2447 | ממס להכנת ננו-חלקיקים |
| DiI (1,1&פריים;-דיוקטדציל-3,3,3&3&פריים;,3&פריים;-טטרמתילינדוקרבוציאנין פרכלוראט) | ביוטיים (סין) | C1036 | תיוג פלואורסצנטי של ליבת ננו-חלקיקים |
| DiO (3,3′-דיוקטדצילוקסקרבוציאנין פרכלוראט) | ביוטיים (סין) | C1038 | תיוג פלואורסצנטי של ממברנת מקרופאגים |
| DiR | ביוטיים (סין) | Y239280 | משמש לדימות פלואורסצנציה בתוך הגוף |
| DAPI | תרמו פישר סיינטיפיק (ארה"ב) | D3571 | נגד גרעיני להדמיית פלואורסצנציה |
| דולבקו' s Modified Eagle Medium (DMEM) | תרמו פישר סיינטיפיק (ארה"ב) | 11965092 | מדיום תרבית תאים |
| מנתח פיזור אור דינמי (Zetasizer Nano ZS) | מלוורן אנליטיקה (בריטניה) | לא זמין | משמש למדידות פיזור אור דינמי (DLS) של גודל ננו-חלקיקים, PDI ופוטנציאל זטה |
| ערכת ELISA | R& D Systems (ארה"ב) | תלוי בציטוקין המטרה | משמש לכימות ציטוקינים דלקתיים |
| אנדותלין-1 (ET-1) | סיגמא-אולדריץ' (ארה"ב) | E7764 | משמש לגירוי אינטגרין ואלפא; 4/β 1 ביטוי |
| סרום בקר עוברי (FBS) | גיבקו (תרמו פישר סיינטיפיק, ארה"ב) | 10091148 | תוסף למדיום תרבית תאים |
| ציטומטר זרימה | BD ביוסיינסס (ארה"ב) | FACSCalibur | משמש לרכישת אותות פלואורסצנציה |
| תוכנת ניתוח ציטומטריית זרימה (FlowJo v10.8.1) | BD ביוסיינסס (ארה"ב) | לא זמין | משמש לניתוח נתוני ציטומטריית זרימה |
| תאי אנדותל של ורידי הטבור האנושיים (HUVECs) | פוהנג ביוטכנולוגיות (סין) | FH1122 | משמש לבדיקות מיקוד במבחנה |
| תוכנת ניתוח תמונות (ImageJ) | המכונים הלאומיים לבריאות (ארה"ב) | לא זמין | משמש לניתוח תמונה כמותי |
| מערכת הדמיה בגוף | פרקיןאלמר (ארה"ב) | IVIS לומינה III | משמש להדמיית פלואורסצנציה של כל הגוף |
| איזופרופנול (60%) | סיגמא-אולדריץ' (ארה"ב) | 34863 | משמש להבדלה במהלך צביעת Oil Red O |
| ליפופקטמין 3000 | תרמו פישר סיינטיפיק (ארה"ב) | L3000001 | תגובת טרנספקציה |
| ערבוב מגנטי ומוט ערבוב | לא זמין | לא זמין | משמש להכנת ננו-חלקיקים |
| מסון' ערכת כתמים טריכרום | אבקאם (ארה"ב) | AB150686 | משמש לצביעת קולגן |
| מיני אקסטרודר | Avanti Polar Lipids (ארה"ב) | 610000 | משמש לאקסטרוזיה של ממברנה |
| קו התאים Murine RAW 264.7 | פוהנג ביוטכנולוגיות (סין) | FH0328 | מקור המקרופאגים |
| קו תאי השריר החלק של העכברים | פוהנג ביוטכנולוגיות (סין) | FH-Y063 | משמש להערכת בטיחות |
| שמן אדום O | סיגמא-אולדריץ' (ארה"ב) | O0625 | משמש לצביעת שומנים |
| אופטי-MEM | תרמו פישר סיינטיפיק (ארה"ב) | 31985062 | מדיום סרום מופחת לטרנספקציה |
| ליפופרוטאין מחומצן בצפיפות נמוכה (Ox-LDL) | יייואן ביוטכנולוגיות (סין) | YB-002 | משמש להשראת יצירת תאי קצף |
| פניצילין– סטרפטומיצין | תרמו פישר סיינטיפיק (ארה"ב) | 15140122 | תוסף אנטיביוטי לתרבות תאים |
| פנילמתילסולפוניל פלואוריד (PMSF) | סיגמא-אולדריץ' (ארה"ב) | 78830 | מעכב פרוטאז |
| סליין ממוגן בפוספט (PBS) | תרמו פישר סיינטיפיק (ארה"ב) | 10010023 | בופר שטיפה ודילול |
| פולי (חומצה לקטית-קו-גליקולית) (PLGA, 50:50; MW 90,000) | ביוטכנולוגיה מיילון של דאליאן (סין) | MB5649-1 | פולימר לייצור ננו-חלקיקים |
| מסנני ממברנה מפוליקרבונט (200 ננומטר, 400 ננומטר) | ווטמן (בריטניה) | 800282 | משמש לאקסטרוזיה |
| כלוריד אשלגן (KCl) | סיגמא-אולדריץ' (ארה"ב) | P9333 | רכיב בבופר הליזה |
| מגיב P3000 | תרמו פישר סיינטיפיק (ארה"ב) | L3000001 | משפר טרנספקציה |
| מיקרוטום סיבובי | Leica Biosystems (גרמניה) | RM2235 | משמש לחתך פרפינים |
| משאבת מזרק | מכונות הרווארד (ארה"ב) | 70-3007 | משמש להיווצרות ננו-חלקיקים מבוקרת |
| מיקרוסקופ אלקטרונים להעברת חשמל (TEM) | תרמו פישר סיינטיפיק (ארה"ב) | טאלוס F200S | משמש להדמיית ננו-חלקיקים |
| טריס-HCl | סיגמא-אולדריץ' (ארה"ב) | T2663 | רכיב מאגר |
| פקטור נמק הגידול אלפא (TNF-α) | R& D Systems (ארה"ב) | 410-MT | משמש להפעלת תאי אנדותל |
| מים אולטרה-טהורים | מילי-קיו (מרק, ארה"ב) | ZMQSV0T01 | משמש להכנת ננו-חלקיקים ודיאליזה |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission