מחקר זה מעריך את השפעות שלבי המחזור החודשי על שחרור גורמי גדילה מפיברין עשיר בטסיות (PRF).
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר מחקר
מחקר זה מעריך את השפעות שלבי המחזור החודשי על שחרור גורמי גדילה מפיברין עשיר בטסיות (PRF).
פיברין עשיר בטסיות (PRF) נמצא בשימוש נרחב בניתוחי שיניים לפרוצדורות רגנרטיביות; עם זאת, שונות בתוכן הביולוגי שלה נותרה מגבלה מרכזית לסטנדרטיזציה. מחקר זה נועד ליישם תהליך ניסויי מבוקר היטב להערכת האופן שבו שלבי המחזור החודשי משפיעים על שחרור גורמי גדילה מ-PRF. דגימות דם ורידי נאספו מ-21 מתנדבות בריאות בשלושה שלבי מחזור מוגדרים מראש (מחזור: ימים 1–5; זקיקים: ימים 6–14; לוטאלי: ימים 15–28), כאשר כל האיסוף בוצע בתוך חלון זמן קבוע (11:00–11:30 בבוקר) כדי למזער את השונות הצירקדית. לכל שלב הוקצו צינורות נפרדים לספירת דם מלאה, ניתוח הורמונלי (אסטרוגן, פרוגסטרון, הורמון מגרה זקיקים [FSH], והורמון לוטאיניזציה [LH]), והכנת PRF. PRF יוצר בצנטריפוגה מיידית בתנאים סטנדרטיים (708 × גרם ל-12 דקות; רוטור בזווית קבועה, 40 °; רדיוס 88 מ"מ; ללא נוגד קרישה). הקרישים אומתו מקרוסקופית (מבנה הומוגני, אלסטי), הופרדו בקפידה משכבת תאי הדם האדומים, ונשקלו בנפרד. כדי לתקן את שחרור גורמי הגדילה, כל קריש דוגר במדיום RPMI-1640 באמצעות יחס מבוסס משקל (1 גרם PRF: 1 מ"ל מדיום), ולאחר מכן דגירה מבוקרת ב-37 מעלות צלזיוס עם ערבוב אורביטלי (100 סל"ד). סופרנטנטים נאספו ואוחסו בטמפרטורה של -80°C לפני הניתוח. גורמי גדילה (IGF-1, PDGF, FGF-2, VEGF ו-TGF-β1) נמדדו באמצעות בדיקת אימונוסורבנט מקושרת באנזים (ELISA) בתנאי בדיקה אחידים. במסגרת הפרוטוקול הסטנדרטי הזה, רמות FGF-2 היו גבוהות משמעותית בשלב הזקיקי בהשוואה לשלב המחזור והלוטאלי. נצפה מתאם חיובי בינוני בין רמות FGF-2 לרמות האסטרוגן בשלב זה, בעוד שלא נמצאו הבדלים מובהקים סטטיסטית עבור גורמי גדילה אחרים. ממצאים אלו מצביעים על כך ששלב המחזור החודשי עשוי לתרום לשונות בפרופילי גורמי גדילה שמקורם ב-PRF. הפרוטוקול המתואר מספק מסגרת ניתנת לשחזור למזעור שונות טרום-אנליטית ואנליטית במחקרי PRF. ההשלכות הקליניות של הבדלים הקשורים לשלבים דורשות חקירה נוספת במחקרים המשלבים קבוצות גדולות יותר ותוצאות טיפול.
היסטורית, השימוש בריכוזי טסיות התחיל עם פיתוח דבקי פיברין והתפתח לפורמולציות שונות ופרוטוקולי הכנה. פיברין עשיר בטסיות (PRF), שהוצג לראשונה על ידי Choukroun ואחרים בשנת 2001, הוא ריכוז טסיות דור שני הנפוץ ברפואת שיניים1. ביוחומר אוטולוגי זה מתקבל באמצעות צנטריפוגציה ללא נוגדי קרישה ויוצר מטריצת פיברין מועשרת בטסיות, לויקוציטים ורכיבים חיסוניים במחזור2. רשת הפיברינים פועלת כפיגום שמאפשר שחרור הדרגתי של גורמי גדילה החיוניים לתיקון והתחדשות רקמות3.
טסיות ממלאות תפקיד מרכזי בריפוי פצעים ובהמוסטזיס על ידי שחרור ציטוקינים וגורמי גדילה עם הפעלה4. ב-PRF, תהליך זה מוביל לשחרור מתמשך של מתווכים מרכזיים, כולל גורם גדילה אנדותליאלי וסקולרי (VEGF), גורם גדילה פיברובלסטים-2 (FGF-2), גורם גדילה שמקורו בטסיות (PDGF), גורם גדילה דמוי אינסולין (IGF) ופקטור גדילה טרנספורמטיבי-בטא1 (TGF-β1). למרות השימוש הקליני הנרחב, הממצאים בנוגע ליעילות הרגנרטיבית של PRF נותרו לא עקביים במחקרים 3,6. מקור מרכזי לשונות הוא ההטרוגניות של תכשירים של PRF, המושפעת הן מגורמים טכניים והן מגורמים ביולוגיים.
מבחינה מתודולוגית, הבדלים בפרוטוקולי הצנטריפוגציה (למשל, כוח צנטריפוגלי יחסי, משך, סוג רוטור), חומרי צינורות וטיפול לאחר איסוף יכולים לשנות משמעותית את ארכיטקטורת PRF ואת התפוצה התאית7. בנוסף, שונות אנליטית — כגון חוסר סטנדרטיזציה בעיבוד קרישי דם, אסטרטגיות נרמול לא עקביות והבדלים בתנאי הדגירה לפני ELISA — עלולות להוביל לפערים משמעותיים ברמות גורמי הגדילה המדווחים8. אי-עקביות אלו מגבילות את ההשוואה בין המחקרים ומפחיתות את אמינות התרגום של מחקר PRF.
שונות ביולוגית מסבכת עוד יותר את הפרשנות. מספר גורמים הקשורים למטופל, כולל גיל, מין, ספירת טסיות, רוחב התפלגות טסיות (PDW) ונפח טסיות ממוצע (MPV), ידועים כמשפיעים על הרכב PRF9. יתרה מזאת, השפעות הורמונליות, גנטיות וסביבתיות עשויות לווסת את התנהגות הטסיות ואת שחרור הציטוקינים10. ישנן ראיות ישירות ועקיפות לכך שהורמוני מין משפיעים על ביולוגיית טסיות11. אסטרוגן, במיוחד, הוכח כמגביר את תגובת הטסיות לאגוניסטים פיזיולוגיים ומגביר את ההצטברות המושרה על ידי תרומבינים דרך מסלולים מתווכים על ידי קולטנים12. כאשר רמות האסטרוגן משתנות לאורך המחזור החודשי, תפקוד הטסיות והתפוקים הביולוגיים הנלווים עשויים להשתנות בהתאם13. עם זאת, הספרות נותרה לא עקבית, כאשר מחקרים מסוימים דיווחו על הפעלה מוגברת של טסיות ואחרים הראו השפעות ניטרליות או מעכבות14.
בהינתן השונות הטכנית והביולוגית המשולבת הזו, יש צורך ברור בזרימות עבודה מבוקריות מתודולוגית שממזערות הטיה טרום-אנליטית ואנליטית בעת הערכת גורמי גדילה שמקורם ב-PRF. בניגוד למחקרים קודמים רבים שהסתמכו על דגימה בנקודת זמן יחידה, טיפול לא תקני בקריש דם או כימות לא מנורמל של גורמי גדילה לא מנורמלים, המחקר הנוכחי עושה שימוש בפרוטוקול איסוף דם ספציפי לשלב ומבוקר זמן, פרמטרי צנטריפוגציה קבועים, ונירמול מבוסס משקל של קרישי PRF לפני הדגירה וניתוח ELISA8. גישה זו נועדה לשפר את השכפול ולאפשר השוואה אמינה יותר של שחרור גורמי גדילה בין מצבים פיזיולוגיים.
גישות חלופיות למחקר PRF כוללות שימוש בנוסחאות מתקדמות כגון PRF7 מתקדם ו-PRF15 בהזרקה, מערכות צנטריפוגציהאופקיות 7, או השתלה ישירה בממברנה ללא ניתוח אקס ויבו. בעוד ששיטות אלו עשויות לשפר את התפוקה התאית או את היישום הקליני, הן לעיתים קרובות מוסיפות שונות נוספת בכימות גורמי גדילה או מגבילות את היכולת לבודד השפעות ביולוגיות ספציפיות. לעומת זאת, זרימת העבודה הנוכחית נותנת עדיפות לסטנדרטיזציה אנליטית והשוואות מבוקרות, מה שהופך אותה למתאימה במיוחד לחקירת שינויים פיזיולוגיים כגון תנודות הורמונליות.
הפרוטוקול המוצע מתאים ביותר למחקרים ניסיוניים מבוקרים או תרגומיים שמטרתם לכמת את שחרור גורמי הגדילה בתנאים סטנדרטיים. ייתכן שזה פחות ישים בסביבות המתמקדות אך ורק בתוצאות קליניות, בהכנה מפושטת ליד הכיסא, או במחקרים שבהם נדרשת הגשת PRF מיידית ללא עיבוד. חוקרים צריכים לשקול לאמץ תהליך עבודה זה כאשר המטרה העיקרית היא להפחית שונות ולשפר את השחזור של מדידות הקשורות ל-PRF.
לכן, מטרת המחקר הנוכחי הייתה להעריך את המתאם בין רמות ההורמונים בשלבי מחזור חודשי שונים לבין שחרור גורמי גדילה מ-PRF באמצעות מסגרת מתודולוגית סטנדרטית וניתנת לשחזור.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
מחקר זה נערך במחלקה לפריודונטולוגיה, הפקולטה לרפואת שיניים, אוניברסיטת צ'וקורובה, אדנה, טורקיה, בהשתתפות 21 מתנדבות נשים. כל המשתתפים קיבלו מידע מפורט על מטרת המחקר, עיצובו ונהלי המחקר, והסכמה מדעת בכתב התקבלה לפני הכללה. פרוטוקול המחקר נבדק ואושר על ידי ועדת האתיקה של הפקולטה לרפואה של אוניברסיטת צ'וקורובה (אישור מס' 125/56, מתאריך 16.09.2022). כל ההליכים בוצעו בהתאם לעקרונות הצהרת הלסינקי למחקר הכולל נבדקים אנושיים.
כל ההליכים הכוללים דם אנושי, כולל אמצעי זהירות ביובטיחותיים וטיפול וסילוק פסולת ביולוגית וכימית, בוצעו בהתאם להנחיות הבטיחות הביולוגית כפי שנקבעו על ידי המרכזים לבקרת מחלות ומניעתן והמכון הלאומי לבריאות16. הצוות השתמש בציוד מגן אישי מתאים (PPE) כגון כפפות, חלוק מעבדה, משקפי מגן. כל הטיפול בדגימות בוצע באזורים מעבדיתיים ייעודיים כדי למנוע זיהום וחשיפה. פסולת ביולוגית (שאריות דם, שאריות PRF, צרכנים) הושלכה בהתאם לפרוטוקול ניהול הפסולת הרפואית של אוניברסיטת צ'וקורובה ולתקנות הפסולת הביו-רפואית הלאומיות. החפצים החדים הונחו במיכלים עמידים לניקובים; הפסולת הנוזלית חוטאה כימית לפני ההשלכה והפסולת הביולוגית המוצקה עברה אוטוקלב לפני ההשלכה המורשית.
בחירת משתתפים
אנשים שעמדו בקריטריונים הבאים נכללו במחקר: היעדר מחלה מערכתית כלשהי, מחזור חודשי רגיל של 27–30 ימים ובין גיל 18–25
אנשים שעמדו בקריטריונים הבאים הוצאו מהמחקר: נוכחות מחלה מערכתית, מחזור חודשי לא סדיר, שימוש בכל תרופה או הכנה הורמונלית, נוכחות של הפרעות אנדוקריניות או דימומים והיסטוריה של דימום מופרז במהלך הווסת
איסוף דם והקצאת קבוצות
הימים הראשונים של מחזור המחזור של כל משתתף שימשו לבניית פרוטוקול תזמון. בהתבסס על סיווגים פיזיולוגיים מקובלים, המחזור חולק לשלושה שלבים: ימים 1–5 כשלב הווסת (הקשור לנשירת רירית הרחם), ימים 6–14 כשלב הזקיקים (המאופיין בעלייה ברמות אסטרוגן והתפתחות זקיקים), וימים 15–28 כשלב הלוטאלי (המסומן בהפרשה מוגברת של פרוגסטרון לאחר ביוץ)12,13. נאספו דגימות דם מכל משתתף במהלך השלבים המתאימים. במהלך מחזור אחד, נאספו בסך הכל תשע צינורות דם לכל נבדק: שלוש לספירת דם מלאה (אחת לכל שלב), שלוש לניתוח הורמוני מין (אסטרוגן, פרוגסטרון, הורמון לוטאיניזציה (LH), הורמון מגרה זקיקים (FSH), ושלוש להכנת PRF וניתוח גורמי גדילה מבוסס ELISA. כל דגימות הדם נאספו בין 11:00 ל-11:30 בבוקר באותו זמן מדי יום כדי למזער שונות ביולוגית. דגימות דם ורידיות נאספו מהווריד האנטקוביטלי באמצעות מערכת איסוף דם סטרילית מבוססת ואקום ומחטי פרפר במשקל 21G כדי להבטיח דגימה אטראומטית. הדם נאסף ישירות לצינורות זכוכית סטריליים בנפח 10 מ"ל ללא נוגדי קרישה (צינורות PRF), בהתאם לפרוטוקולי הכנת PRF הסטנדרטיים. כדי למזער שונות טרום-אנליטית, כל הדגימות נאספו על ידי אותה אחות מוסמכת בתנאים סטנדרטיים.
מיד לאחר האיסוף, הצינורות טופלו בעדינות ללא ערבוב והועברו לצנטריפוגה בתוך 60–90 שניות כדי למנוע קרישה מוקדמת ולהבטיח פולימריזציה עקבית של פיברין. הצינורות ממוקמו באופן סימטרי בתוך הרוטור כדי לשמור על איזון ולמנוע שונות הקשורה לרעידות במהלך הצנטריפוגה. לא נעשה שימוש בתוספים או נוגדי קרישה בכל שלב של ההליך.
כתוצאה מכך, הוקמו שלוש קבוצות מחקר: קבוצה 1: דגימות מהשלב החודשי, קבוצה 2: דגימות מהשלב הזקיקי, וקבוצה 3: דגימות מהשלב הלוטאלי
שלבי הכנת PRF:
דגימות הדם צונטרו מיד ללא נוגדי קרישה באמצעות צנטריפוגה על ספסל המצוידת ברוטור בזווית קבועה (40 °; רדיוס: 88 מ"מ). הצנטריפוגה בוצעה בתנאים סטנדרטיים בטמפרטורה של 708 × גרם למשך 12 דקות בטמפרטורת החדר (22°C–24°C). ערכי כוח צנטריפוגלי יחסי (RCF) חושבו באמצעות הנוסחה הסטנדרטית (RCF = 1.118 × 10⁻5 × r ×g2), תוך התחשבות ברדיוס הרוטור (88 מ"מ), בהתאם לפרוטוקולי PRF הקבועים שתוארו על ידי Choukroun ואחרים.17 ומחקרי תקינה 1,3,18. לאחר הצנטריפוגה, זוהו שלוש השכבות המובחנות: שכבת תאי דם אדומים תחתונה, שכבת פלזמה עליונה דלה בטסיות, וקריש PRF ביניים. קריש ה-PRF הוסר בעדינות באמצעות פינצטה סטרילית, כדי למנוע הפרעה בממשק האריתרוציטים. רכיבי תאי הדם האדומים שנותרו נחתכו בקפידה באמצעות מספריים סטריליים.
קרישי PRF הוערכו מקרוסקופית עבור משטח חלק והומוגני, מבנה גלילי אלסטי, ועקביות צפופה ומוצקה בהתאם לקריטריונים מוגדריםמראש 19,20. קרישי דם שלא עמדו בקריטריונים אלו הושלכו, ונאספו דגימות דם חדשות בעת הצורך. כל הדגימות עובדו בתנאים סטנדרטיים והוקפאו בטמפרטורה של מינוס 80°C בתוך 30 דקות מהאיסוף, כדי למזער את התדרדרות הפרוטאוליטית. הדגימות נשמרו למשך זמן מבוקר ואחיד (עד 4 שבועות) לפני ניתוח אצווה כדי להפחית שונות בין בדיקות ולהבטיח השוואה בין מדידות גורמי הגידול.
שלבי ניתוח ELISA של גורם גדילה (ELISA):
קרישי PRF הופרדו בזהירות מחלק תאי הדם האדומים בתנאים אספטיים באמצעות מספריים כירורגיים סטריליים ונשקלו בנפרד באמצעות איזון אנליטי מכויל. תווך תרבית RPMI-1640 נוסף לכל דגימה ביחס קבוע המבוסס על משקל הקריש (1 גרם PRF: 1 מ"ל מדיום) כדי לאחד את הפקת גורמי הגדילה ולמזער שונות הקשורה להבדלים במסת הקריש. הדגימות נדגרו בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס על שייקר אורביטלי בעומק של 100 × גרם כדי להקל על דיפוזיה הומוגנית של גורמי גדילה מסיסים מטריצת PRF אל תווך התרבית. לאחר הדגירה, הסופרנטנטים נאספו ואוחסו בטמפרטורה של -80°C עד לניתוח.
ריכוזי גורמי גדילה, כולל גורם גדילה דמוי אינסולין-1 (IGF-1), גורם גדילה שמקורו בטסיות (PDGF), פקטור גדילה פיברובלסטים-2 (FGF-2), גורם גדילה אנדותליאלי וסקולרי (VEGF) ופקטור גדילה טרנספורמטיבי-β1 (TGF-β1), נמדדו באמצעות ערכות ELISA, הזמינות מסחרית לבדיקות אימונונורבנט מקושרות באנזימים (ELISA). הערכות הבאות שימשו: ערכת ELISA אנושית IGF-1, ערכת ELISA PDGF אנושית, ערכת FGF-2 אנושית ELISA, ערכת VEGF אנושית ELISA, וערכת ELISA אנושית TGF-β1. כל הדגימות והתקנים נותחו בשכפול, והספיגה נמדדה ב-450 ננומטר באמצעות קורא מיקרופלט. עקומות כיול נוצרו באמצעות רגרסיה לוגיסטית בעלת ארבעה פרמטרים (4-PL) לקביעת ריכוזי אנליטים5.
מדרגות ELISA
דילול הדגימה נקבע בהתאם לטווח הריכוז הצפוי ולהוראות היצרן לכל ערכת ELISA. דגימות שציפו שייכנסו לטווח העקומה הסטנדרטי נותחו ללא דילול. כאשר קריאות ראשוניות או ריכוזי אנליטים צפויים עלו על הגבול העליון של העקומה הסטנדרטית, הדגימות דוללו באמצעות מדלל הדגימה שסופק בערכה ונותחו מחדש. הריכוזים הסופיים חושבו על ידי הכפלת הערכים הנמדדים בגורם הדילול המתאים.
תקנים (100 מיקרוליטר), שהוכנו בדילול סדרתי לפי הוראות ערכת FineTest, ודגימות לא מדוללות או מדוללות כראוי, נוספו לכל באר של מיקרופלטה מצופה מראש של 96 בארות. הפלטה הודגמה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 90 דקות כדי לאפשר קשירת אנטיגן. כל הדגימות והתקנים נותחו בשכפול. לאחר הדגירה, הנוזל הוסר ללא שטיפה, ונוספו 100 מיקרוליטר של תמיסת נוגדנים לזיהוי מסומנת בביוטין לכל באר. הצלחת נדגרה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 60 דקות. לאחר הדגירה, הבארות נשאבו ונשטפו שלוש פעמים באמצעות 350 מיקרוליטר של בופר שטיפה 1× לכל באר. בופר השטיפה נשאר בבארות למשך כדקה אחת בכל מחזור שטיפה כדי להבטיח הסרה מספקת של רכיבים לא קשורים. לאחר מכן נוספו 100 מיקרוליטר תמיסת עבודה קונוגטיבית של פרוקסידאז חזרת (HRP)–סטרפטאוידין לכל באר, והצלחת הודגרה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות. הבארות נשטפו חמש פעמים באמצעות 350 מיקרוליטר של בופר שטיפה לכל באר כדי למזער אותות רקע. לאחר מכן, נוספו 90 מיקרוליטר תמיסת מצע טטרמתילבנזידין (TMB) לכל באר, והצלחת הודגרה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 10–20 דקות בחושך כדי לאפשר התפתחות צבע, בזמן שהתגובה הייתה במעקב חזותי. התגובה האנזימטית הסתיימה על ידי הוספת 50 מיקרוליטר של תמיסת העצירה שסופקה עם הערכה לכל באר, מה שגרם לשינוי צבע מכחול לצהוב.
הספיגה נמדדה ב-450 ננומטר באמצעות קורא מיקרופלטה תוך 5 דקות לאחר הוספת תמיסת העצירה. נוצרה עקומה סטנדרטית באמצעות הריכוזים הידועים שסופקו בערכה, והעקומה הותאמה באמצעות מודל רגרסיה לוגיסטי בן ארבעה פרמטרים (4-PL). ריכוזי המדגם חושבו בהתאם ותוקנו לכל גורמי דילול.
ניתוח סטטיסטי
משתנים מספריים סוכמו כסטיית תקן ממוצעת ± עבור נתונים מבולגנים נורמלית, וכחציון עם ערכים מינימליים–מקסימליים כאשר הנחות הנורמליות לא התקיימו. משתנים קטגוריים הוצגו כתדירויות ואחוזים. נורמליות הנתונים המספריים הוערכה באמצעות מבחן שפירו–וילק. להשוואות של מדידות מספריות חוזרות שהתקבלו מאותם פרטים בנקודות זמן שונות, יושם ניתוח מדידות חוזרות של שונות (ANOVA) כאשר ההנחות הפרמטריות התקיימו; אחרת, נעשה שימוש במבחן פרידמן. הוערכו מתאמים בין משתנים מספריים שאינם מתפלגים נורמלית באמצעות מקדם המתאם של ספירמן. ניתוחים סטטיסטיים בוצעו באמצעות תוכנה סטטיסטית (IBM SPSS Statistics גרסה 26.0), וערך p דו-צדדי < 0.05 נחשב מובהק סטטיסטית.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
לא נצפו נתונים חסרים, שכן כל המשתתפים השלימו דגימה בכל שלושת שלבי הווסת. פרמטרי ספירת הדם המלאים היו בטווחי ייחוס פיזיולוגיים לכל הדגימות, ותמכו בעקביות באיכות הדגימה ובאמינות הכנת PRF.
הערכת פרמטרי הדם לאורך שלבי הווסת
השוואה של פרמטרים המטולוגיים בין שלבי מחזור מוצגת בטבלה 1. ספירות תאי דם לבנים (WBC) הראו שונות מובהקת סטטיסטית בין שלבים (p < 0.05), כאשר ערכים גבוהים יותר נצפו בשלבי הזקיק...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחזור החודשי הוא תהליך פיזיולוגי מורכב המנוהל על ידי תנודות הורמונליות שמניעות שינויים במערכות שונות בגוף הנשי. במחקר זה חקרנו את תכולת ה-PRF שנלקחה מדגימות דם שנאספו בשלבים שונים במחזור החודשי וניתחנו את רמות גורמי הגדילה בתוך PRF זה.
מחזור הווסת חולק לשלושה שלבים בהתבסס על סיווגים פיזיולוגיים מקובלים: שלב הווסת (הקשור לנשירת רירית הרחם), שלב הזקיקים (המאופיין בעלייה ברמות אסטרוגן והתפתחות זקיקים), ושלב הלוטאלי (המסומן בהפרשה מוגברת של פרוגסטרון לאחר ביוץ)
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
למחברים אין מה לחשוף. תוכנת הבינה המלאכותית ChatGPT שימשה לעריכת שפה.
המחברים מבקשים להודות למחלקה לביוכימיה בפקולטה לרפואה של אוניברסיטת קוקורובה על תמיכתם בביצוע ניתוח ELISA.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| איזון אנליטי | איזון מדויק (קריאות 0.001 גרם) | סארטוריוס | אנטריס |
| צינורות איסוף דם | צינורות זכוכית, ללא נוגד קרישה (10 מ"ל) | BD | מערכת ואקוטיינר |
| צנטריפוגה | צנטריפוגה על שולחן | הטיץ' | יוניברסל 320R |
| ערכת ELISA – FGF | ערכת ELISA של FGF אנושית | FineTest | EH0541 |
| ערכת ELISA – IGF-1 | ערכת ELISA אנושית IGF-1 | FineTest | ER0030 |
| ערכת ELISA – PDGF | ערכת ELISA של PDGF אנושית | FineTest | ER1240 |
| ערכת ELISA – TGF-&בטא; 1 | Human TGF - ובטא; ערכת ELISA אחת | FineTest | EH0287 |
| ערכת ELISA – VEGF | ערכת ELISA אנושית VEGF | FineTest | EH0327 |
| HRP– קונגוגאט סטרפטאווידין | ריאגנט ELISA (כלול בערכה) | FineTest | כלול בערכה |
| חממה | אינקובטור מבוקר טמפרטורה (37 &g; C) | ממרט | — |
| צינורות מיקרוצנטריפוגה | צינורות סטריליים (1.5&nd; 2 מ"ל) | אפנדורף | — |
| קורא מיקרופלט | קורא ספיגה 450 ננומטר | ביו-טק | ELx800 |
| מחט | מחט חד-פעמית סטרילית 21G | BD | — |
| מתנער מסלולי | שייקר מתכוונן (100 סל"ד) | איקה | בקרת KS 3000 i |
| ציוד מגן אישי | כפפות, חלוק מעבדה, משקפי מגן | מגוון | — |
| RPMI-1640 בינוני | מדיום תרבית תאים | גיבקו (תרמו פישר סיינטיפיק) | 11875-093 |
| תוכנת ניתוח סטטיסטי | תוכנת ניתוח נתונים (גרסה 26.0) | IBM | סטטיסטיקות SPSS |
| פתרון עצירה | ריאגנט עצירת ELISA | FineTest | כלול בערכה |
| מצע TMB | מצע כרומוגני ל-ELISA | FineTest | כלול בערכה |
| בופר שטיפה | בופר שטיפה ELISA (1×) | FineTest | כלול בערכה |