מאמר שיטה

אלקטרואקפונקטורה בסיוע איזופלורן במודל עכברים של אוליגואסטנוזוספרמיה

DOI:

10.3791/71878

⸱

16 ביוני 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Ningxia Medical University School of Traditional Chinese Medicine, 2Medical College of Acu-Moxi and Rehabilitation, Guangzhou University of Chinese Medicine, 3Key Laboratory of Dryness Syndrome in Chinese Medicine, Ministry of Education, Ningxia Regional Key Laboratory of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine for Prevention and Treatment of Regional High Incidence Disease, Ningxia Medical University

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול זה מפרט את הקמת מודל אוליגואסטנוזוספרמיה מושרה על ידי אדנין בעכברים ואת מתן האלקטרואקפונקטורה ב-CV3, CV4, ST36 ו-SP6 תחת הרדמה איזופלורנית. התוצאות אומתו באמצעות ניתוח זרע בסיוע מחשב לספירה ותנועתיות, לצד היסטולוגיה של אשכים עם צביעת המטוקסילין ואאוזין.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אוליגואסטנוזוספרמיה היא אחת הצורות הנפוצות ביותר של תפקוד רבייתי גברי. במחקרי מכרסמים, מתן אלקטרואקפונקטורה (EA) בעקביות לאורך מפגשים חוזרים מהווה אתגר טכני, במיוחד בשילוב נקודות דיקור בקו הבטן האמצעי והגפיים האחוריות, שבהן מגע יציב עם האלקטרודות הוא קריטי. ז'ונגג'י (CV3), גואניואן (CV4), זוסאנלי (ST36) וסאנינג'יאו (SP6) נבחרו משום שנקודות אלו משמשות לעיתים קרובות בפרוטוקולי דיקור לבעיות פוריות וחריגות בזרע, ותצורת קו האמצע של הבטן והגפה האחורית מתאימה להתאמה סטנדרטית של אלקטרודות. דוח זה מתאר פרוטוקול מעשי להקמת מודל עכברושים מושרה על ידי אדנין של אוליגואסטנוזוספרמיה ולמתן EA בסיוע איזופלוראן עם גירוי זוגי של CV3–CV4 ו-ST36–SP6. זכרים של חולדות ספרג-דולי קיבלו אדנין בטיפול יומי במשך 28 ימים כדי לגרום לפגיעה רבייתית. לאחר מכן, EA ניתנה מדי יום במשך 28 ימים תחת הרדמה שאיפה, תוך שימוש ב-3% איזופלורן לאינדוקציה ו-1.5% לתחזוקת המסכה, כדי לאפשר מיקום מחט יציב וחיבור אלקטרודות (CV3–CV4 ו-ST36–SP6) עם פרמטרי גירוי מוגדרים (2 הרץ, 1.5 מיליאמפר, 30 דקות). השפעות הטיפול הוערכו באמצעות ניתוח זרע בסיוע מחשב לספירת הזרע ותנועתיות, בתוספת היסטולוגיה של המטוקסילין ואאוזין (HE) באשך. תוצאות מייצגות מצביעות על כך שחשיפה לאדנין הפחיתה את ספירת הזרע ותנועתיותם והפריעה לארכיטקטורת הצינורות הזמיניפריים, בעוד ש-EA הייתה קשורה להחלמה חלקית הן בפרמטרי הזרע והן במורפולוגיית האשכים. פרוטוקול זה מספק הפניה זמינה למחקרים הדורשים מתן EA עקבי ואימות זרע/היסטולוגיה במודל עכברוש של אוליגואסטנוזוספרמיה.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

גורמים גבריים תורמים משמעותית לאי פוריות, ומהווים כמחצית מכלל הזוגות העקרים, כאשר חריגות במספר הזרע ובתנועתיות הן בין הממצאים הקליניים הנפוציםביותר 1,2. אוליגואסטנוזוספרמיה, המאופיינת בריכוז הזרע בירידה ופגיעה בתנועתיות, היא אחת הצורות הנפוצות ביותר של תפקוד רבייתי גברי 3,4. למרות זמינות טכניקות רבייה מסייעת וטיפולים רפואיים אמפיריים, אסטרטגיות יעילות לשיפור איכות הזרע נותרות מוגבלות, מה שמדגיש את הצורך במחקר קדם-קליני נוסף 5,6,7. צרכים קליניים ותרגומיים אלו מניעים פיתוח תהליכי עבודה ניסיוניים שחוזרים לחקר ליקוי רבייתי גברי בתנאים מבוקרים.

התערבויות בדיקור נחקרו עבור חריגות בזרע ואי פוריות גברית הן בהקשרים קליניים והן בהקשרים ניסיוניים8. למרות שמחקרים קליניים מצביעים על יתרונות פוטנציאליים לפרמטרים מסוימים של זרע, העיצוב, פרוטוקולי ההתערבות ומדדי התוצאה שלהם משתנים מאוד9. אלקטרואקפונקטורה (EA) מתאימה במיוחד למחקר מעבדה משום שהיא מציעה פרמטרי גירוי מבוקרים וויסות אחיד יותר מאשר דיקור ידני, שמקל על הערכת שינויים הקשורים לטיפול בתוצאות רבייה מדידות 10,11,12. יתרון פרוצדורלי זה הופך את EA למתאים במיוחד לתהליכים פרה-קליניים מובנים במחקר רבייה גברי.

מודלים של בעלי חיים הם מרכזיים להערכה כזו, אך בחירת מודלים נותרה סוגיה מתודולוגית מרכזית במחקר על אוליגואסטנוזוספרמיה. סקירה שיטתית עדכנית ציינה כי שיטות מידולינג מושרות בבוסולפאן שנויים במחלוקת ומפגינות הטרוגניות משמעותית במדדי ההערכה, מה שמדגיש את הצורך בהליכים ברורים יותר ובקריאות עקביות יותר13. מודלים מבוססי אדנין מספקים גישה ניסויית מעשית משום שגוואג' אדנין יכול לגרום לפגיעה רבייתית בעכברים, כולל הפחתת נקודות קצה הקשורות לזרע ונזק היסטולוגי ברקמת האשכים14,15. בעבודתנו הקודמת, מודל עכברוש אוליגואסטנוזוספרמיה מושרה על ידי אדנין טופל ב-EA במערך נקודות דיקור מוח-כליה של Shu-Mu (Epangsanxian, BL23, GB25 ו-KI3), לצד מצבים ללא נקודות דיקור ושליטה חיובית בתרופות, עם מדדי תוצאה מורחבים שכללו מקדמי איברים ורמות הורמוני סרום שגודלו על ידי ELISA16. בהתבסס על בסיס ניסויי זה ובהכרה בהטרוגניות בבחירת נקודות דיור, עיצוב בקרה, פרמטרי גירוי ומדדי תוצאה במחקרי EA קיימים, הפרוטוקול הנוכחי תוכנן לחדד ולהרחיב את זרימת העבודה המתודולוגית למתן EA יציב.

בהתאם לכך, הפרוטוקול הנוכחי מתמקד במתן מידע, ומתייחס לשני משתנים מעשיים קריטיים למפגשי EA חוזרים במכרסמים. ראשית, כדי למנוע הזזת מחטים ומגע אלקטרודות לסירוגין הנגרם מתנועת בעלי חיים ואחיזה בחוטי עופרת, אנו מתארים הליך מתוחזק על ידי איזופלוראן שמייצב את המיקום במהלך הגירוי ומבטיח מגע אמין עם האלקטרודות לאורך כל המפגשים; זה חשוב במיוחד כאשר משלבים נקודות אמצע בטן עם נקודות גפיים אחוריות. שנית, בהתבסס על סקירות קודמות וניתוחי מרשם בנקודות דיקור 9,17, שזיהו את CV4, SP6, ST36 ו-CV3 כנקודות אבק רבייה נפוצות בפרוטוקולי אי-פוריות והפרעות זרע, בחרנו CV3, CV4, ST36 ו-SP6 ויישומנו גירוי זוגי על CV3-CV4 ו-ST36-SP6. תצורה זו, המשלבת את קו האמצע של הבטן והגפיים האחוריות, מסטנדרטית את חיבורי האלקטרודות, מפחיתה שונות הנגרמת מחיבור עופרת לא יציב, ותומכת במתן EA ניתן לשחזור במהלך טיפולים חוזרים. כדי לשמור על היקף מוכוון פרוטוקול ולמנוע שכפול מודולים אנדוקריניים, מכניים או בקרה חיובית שדווחו בעבר, אימות התוצאה מוגבל למערכת קריאה ראשונית של זרע ואשך. סט זה כולל ניתוח זרע בסיוע מחשב וצביעת HE באשכים, המספקים לאישור השראה פנוטיפית מוצלחת ושינויים בטיפול בזרימת עבודה זו.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל נהלי בעלי החיים עמדו בהנחיות המוסדיות לטיפול ושימוש בבעלי חיים במעבדה ואושרו על ידי ועדת האתיקה של אוניברסיטת נינגשיה לרפואה (אישור מס' IACUC-NYLAC-2021-130). זכרים של חולדות ספרג-דולי, בגיל 8 שבועות ומשקל 180–220 גרם, נאספו ממרכז בעלי החיים הניסיוניים של אוניברסיטת נינגשיה לרפואה (רישיון מס' SYXK (נינג) 2020-0001). בעלי החיים אוחסנו בתנאי מעבדה סטנדרטיים בטמפרטורה של 22–24 מעלות צלזיוס ולחות יחסית של 52%–56% עם מחזור אור של 12 שעות ו-12 שעות חושך, והייתה להם גישה חופשית למזון ולמים.

1. הכנת בעלי חיים, שיוך קבוצתי והקמת מודל מושרה על ידי אדנין

  1. הסתגל לחולדות במשך 7 ימים לפני הניסוי ועקוב אחרי מצבן הכללי מדי יום.
  2. לאחר ההסתגלות, הקצו לתשעה חולדות מספרי זיהוי ייחודיים והקצו אותם באקראי ביחס של 1:1:1 לשלוש קבוצות באמצעות רצף אקראי שנוצר במחשב: קבוצת ביקורת (n = 3), קבוצת מודל (n = 3), וקבוצת EA (n = 3). השתמשו בכל חולדה כיחידת הניסוי, וכללו את כל בעלי החיים והדגימות בניתוח הסופי אלא אם כן מתקיימים קריטריונים מוגדרים מראש.
  3. שמרו על החוקרים המבצעים ניתוח זרע בסיוע מחשב והערכה היסטולוגית עיוורים להקצאת קבוצות.
    הערה: החוקרים שמספקים EA אינם יכולים להיות עיוורים כי ההתערבות כוללת הליכים נראים לעין ספציפיים לקבוצה.
  4. הכינו 20 מ"ג/מ"ל תסעיף אדנין בתמיסת מלח רגילה המכילה 0.5% (עם גומי) גומי ערבי כסוכן משהה, וערבבו היטב לפני ובמהלך השקיעה כדי למנוע שקיעה.
  5. ניתן לתת תמלח רגיל לקבוצת הביקורת ואת הדבקת אדנין לקבוצות המודל וה-EA באמצעות גאבאז' של 10 מ"ל/ק"ג, השווה ערך ל-1 מ"ל/100 גרם משקל גוף, פעם ביום במשך 28 ימים רצופים. השתמש במינון אדנין של 200 מ"ג/ק"ג/יום.
  6. תעד את משקל הגוף והמצב הכללי לאורך תקופת הדוגמנות.
    הערה: אדנין ניתן כתלייה ונוטה להצטבר למשקעים במהלך הטיפול. שמור על ערבוב רציף במהלך הגאבג' כדי למזער משקעים, שעלולים לגרום לאי-עקביות במינון ולחסימה של מחט הגוואג'. אם מתרחשת סתימה, תלה מחדש את התמיסה היטב והחלף את מחט הגאבג' לפני שממשיכים.

2. הרדמה איזופלורנית למתן אלקטרואקפונקטורה (איור 1)

  1. הכינו מערכת הרדמה איזופלורנית עם תא השראה, מסכת אף וכרית חימום.
  2. השרה הרדמה עם איזופלורן 3% בתא ההשראה עד שהפעילות הספונטנית תפחת משמעותית.
  3. העבר את העכברוש לכרית החימום במצב שכיבה, ושמור על הרדמה עם 1.5% איזופלוראן באמצעות מסכת אף לאורך כל ה-EA.
  4. אשר הרדמה מספקת על ידי הפחתת תנועה ספונטנית ואובדן רפלקס המצמוץ תוך שמירה על נשימה סדירה.

3. נאמנות ובקרת איכות בהעברת גירוי

  1. השתמשו בכרית חימום כדי לשמור על טמפרטורת הגוף לאורך כל המפגש ולהפחית שונות פיזיולוגית עקב היפותרמיה.
  2. יש להפעיל הגדרות הרדמה עקביות בכל בעלי החיים והמפגשים, תוך שימוש ב-3% איזופלורן לאינדוקציה ו-1.5% איזופלורן לתחזוקה. שמרו על עומק ההרדמה ברמה המינימלית הנדרשת כדי למנוע קושי תוך שמירה על נשימה סדירה.
  3. הכנס מחטי דיקור חד-פעמיות סטריליות (0.25 מ"מ × 13 מ"מ) אנכית בנקודות הדיקור הנבחרות. הכנס את המחטים לעומקים של כ-2 מ"מ ב-CV3 ו-CV4, 7 מ"מ ב-ST36, ו-5 מ"מ ב-SP6.
  4. לאחר הכנסת המחט וחיבור האלקטרודה, יש לוודא ויזואלית שכל מחט נשארת יציבה, ללא התרופפות נראית עקב נשימה או תנועת גפה. אם מתרחשת הזזה, החזר את המחט אנכית לעומק המקורי ווודא את מגע האלקטרודה היציב לפני חידוש הגירוי.
  5. קצו את חוטי האלקטרודה קרוב לקצה הפרוקסימלי של ידית המחט, ואז נתבעו ואבטחו אותם כדי למזער את האחיזה, שכן משקל עופרת ומשיכה הם גורמים נפוצים להיפרדות.
  6. אשר גירוי יעיל על ידי צפייה ברעד שריר מקומי קל בנקודת האקו, ללא תנועה גסה של הגוף. אם אין רעד, בדוק שוב ואשר שוב את מגע האלקטרודות ואת מיקום המחט.
  7. בצע בדיקה סטנדרטית אחת באמצע האימון בדקה 15. במידת הצורך, לכוון מחדש את המחטים ולאשר רעד מקומי קל לפני שממשיכים להפחית את השונות במתן הגירוי בין בעלי חיים.
    הערה: בעת חיבור מכשיר ה-EA, חבר את הכבלים לקצה הפרוקסימלי של ידית המחט כדי להפחית את האחיזה ממשקל הכבל. במידת הצורך, אבטח את העופרת ו/או המחט עם סרט דבק כדי למנוע ניתוק במהלך המפגש.

4. טיפול באלקטרוקפונקטורה (איור 2)

  1. התחל את EA ביום שאחרי תקופת ה-28 ימים של אדנין גאבג', ומתן אותו פעם ביום במשך 28 ימים רצופים.
  2. בהרדמה איזופלורנית, חשפו את הבטן התחתונה והגפיים האחוריות, ואתרו את ג'ונגג'י (CV3), גואניואן (CV4), זוסאנלי (ST36) וסאנינג'יאו (SP6) באמצעות סימני ציון אנטומיים על פני השטח.
  3. הכנס מחטי דיקור חד-פעמיות סטריליות (0.25 מ"מ × 13 מ"מ) אנכית לעומקים של 2 מ"מ ב-CV3 ו-CV4, 7 מ"מ ב-ST36, ו-5 מ"מ ב-SP6.
  4. חבר זוג אלקטרודות אחד ל-CV3 ו-CV4, וחבר את הזוג השני ל-ST36 ו-SP6.
  5. ספק גירוי חשמלי ב-2 הרץ ו-1.5 mA למשך 30 דקות. השתמשו בפרמטרים אלו כדי להתאים לאלו ששימשו בעבר באוליגואסטנוזוספרמיה16 שנגרמה על ידי אדנין.
  6. יישם את בדיקות בקרת האיכות המפורטות בסעיף 3, כולל בדיקה אחת באמצע המפגש ב-15 דקות.
    הערה: אתר נקודות דיקור בעכברים בהתייחס ל-Experimental Acupuncture and Moxibustion Science18, נספח II ("נקודות דיקור נפוצות בבעלי חיים ניסיוניים" של יונג טאנג), יחד עם נקודות ציון אנטומיות השוואתיות. מכיוון שנקודות דיקור בעכברים מייצגות אזורים אנטומיים בדידים ולא נקודות גאומטריות קבועות, יש להשתמש במיקום גוף עקבי, נקודות ייחוס אנטומיות קבועות ומדידות משטח מבוססות מילימטר בין בעלי חיים ומפגשים. מקמו את ג'ונגג'י (CV3) בקו האמצע הגחוני בגובה של כ-33 מ"מ זנב למרכז הטבור. מקמו את גואניואן (CV4) בקו האמצע הגחוני כ-25 מ"מ בזנב למרכז הטבור, סמוך לעורקים השטחיים התת-עוריים של דופן הבטן. מקם את זוסנלי (ST36) בצד האחורי של הברך, כ-3 מ"מ רחוק מהראש הפיבולרי. למקם את סאנינג'יאו (SP6) בצד המדיאלי של הגפה האחורית, כ-10 מ"מ קרוב לקצה הפטיש המדיאלי. הפעילו את אותם מקומות, מיקום גוף, זווית החדרה ועומק החדרה באופן עקבי על כל בעלי החיים ומפגשי הטיפול.

5. איסוף דגימות

  1. צם את העכברים במשך 24 שעות אחרי סשן ה-EA האחרון.
  2. השרה הרדמה עמוקה באמצעות הזרקה תוך-פריטוניאלית של 2% פנטוברביטל נתרן במינון 2 מ"ל/ק"ג לפני איסוף הרקמות. אשר הרדמה עמוקה על ידי היעדר רפלקס גמילה מהדוושה ותנועה ספונטנית.
  3. הורד את העכבר על ידי כריתת הרדמה עמוקה, בהתאם לפרוטוקולים שאושרו על ידי המוסד.
  4. חשפו מיד את איברי הרבייה באופן אספטי. לבודד קאודה אפידידימיס אחד לניתוח זרע ולהסיר אשך אחד לבדיקה היסטולוגית.
  5. תקבע את האשך ב-4% פאראפורמלדהיד למשך לפחות 24 שעות לפני עיבוד היסטולוגי.

6. ניתוח זרע

  1. הסר את השומן שמסביב מאפידידימיס הזנב, ומניח מיד את הרקמה ב-2 מ"ל של תמלח רגיל שחומם מראש ל-37 מעלות צלזיוס.
  2. דגרו את הרקמה באמבט מים של 37 מעלות צלזיוס למשך 5 דקות, טחנו אותה עם מספריים עיניים, סיננו את המתלים דרך מסך של 200 רשתות, וערבבו בעדינות את הסינון.
  3. טעין 10 מיקרו-ליטר אליקו של תליית הזרע לתא ספירה מחומם מראש, ונתח את ספירת הזרע ותנועתיותיו באמצעות מערכת ניתוח זרע ממוחשבת (CASA).
  4. השתמש באותו סוג תא, תנאי חימום והגדרות רכישה לכל הדגימות בתוך הניסוי הנתון.

7. בדיקה היסטולוגית של רקמת אשכים

  1. תקבע את רקמת האשכים ב-4% פאראפורמלדהיד למשך מינימום של 24 שעות. חתוך את אזור היעד והניח אותו בקלטות מסומנות.
  2. ייבשו את הדגימות באמצעות סדרת אתנול מדורגת, נקוו אותן בקסילן, חדרו בהן פרפין, הטמיעו אותן וחתכו אותן ב-4 מיקרון.
  3. צף את החלקים באמבט מים של 40 מעלות צלזיוס, התקן אותם על מגלשות, וייבש אותם בתנור של 60 מעלות צלזיוס.
  4. לצביעת המטוקסילין ואאוזין, להסיר שעווה מהחלקים מקסילן, להרטיב אותם מחדש באמצעות אתנול מדורג, לצבוע אותם בהמטוקסילין ל-5–10 דקות ובאאוזין למשך 1–5 דקות, ואז ייבוש, מנקה ולהתקין אותם.
  5. בחן את ארגון הצינורות הזרעיים ואת סידור תאי הזרע תחת הגדרות הגדלה עקביות בכל הקבוצות.

8. הערכת הקמת מודל ושינויים הקשורים לטיפול

  1. אשר את הקמת המודל על ידי ירידה במספר הזרע ובתנועתיות, יחד עם מבנה צינורות זמיני לא מסודר, ביחס לקבוצת הביקורת.
  2. אשר שינויים הקשורים לטיפול על ידי עלייה בספירת הזרע ובתנועתיות, יחד עם שיקום חלקי של מורפולוגיית הצינורות הזמיניפריים, בקבוצת ה-EA ביחס לקבוצת המודל.
  3. הגדר מראש דגימות עם פגיעה טכנית, כגון כאלה עם עיכוב בעיבוד זרע, כשל בטעינה בתא, או קטעים באיכות נמוכה שאינם קשורים למידול, כקריטריונים להחריג. תעד כל חריגות במהלך הניתוח.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ניתוח זרע (איור 3)
תליות זרע אפידידימיות נותחו באמצעות מערכת ניתוח זרע בסיוע מחשב לכימות את מספר הזרע ותנועתיותו. במאגר הנתונים המייצג הזה, מתן אדנין הפחית משמעותית את שני הפרמטרים יחסית לקבוצת הביקורת, מה שאישר הצלחת הקמת המודל. התערבות EA העלתה לאחר מכן את ספירת הזרע ואת תנועתיות הזרע בהשוואה לקבוצת המודל (איור 3). ANOVA חד-כיווני הצביע על השפעות קבוצתיות משמעותיות עבור ספירת הזרע (F = 78.39, P < 0.001) ותנועתיות זרע (F = 374.81, P < 0.001). השוו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בהתחשב באטיולוגיה הרב-גורמית של אוליגואסטנוזוספרמיה וביעילות המוגבלת של טיפולים פרמקולוגיים זמינים, דיקור סיני ו-EA זכו לתשומת לב כהתערבויות חוזרות ולא פרמקולוגיות19. הספרות הקלינית והפרה-קלינית הקיימת מציעה מספר מנגנונים סבירים שבאמצעותם דיקור סיני או EA עשויים להשפיע על תפקוד הרבייה הגברי, כולל ויסות נוירואנדוקריני, שיפור זרימת המיקרו-זרימה של איברי הרבייה, והפחתת לחץ חמצוני ותגובות דלקתיות הפוגעות ביצירת הזרע20. מנגנונים מוצעים אלו מציעי...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים שאין אינטרסים פיננסיים או לא פיננסיים מתחרים.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי קרן המדע האזורית של הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין לשנת 2024 (82460972) וקרן המדע האזורית של הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין לשנת 2022 (82260967); תוכנית המחקר והפיתוח המרכזית של אזור נינגשיה הוי האוטונומי לשנת 2022 (2022BEG02040); פרויקט בניית תחום ברמה ראשונה של בית הספר לרפואה סינית מסורתית, אוניברסיטת נינגשיה לרפואה (ZY0019110305); תוכנית המחקר והפיתוח המרכזית של מחוז יאנצ'י לשנת 2023 (2023YCYDCT003); ותוכנית מיוחדת למדע וטכנולוגיה לטובת העם של אזור נינגשיה הוי האוטונומי (2024CMG03054).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
אדניןBeijing Solarbio Science & Technology Co.Ltd.A8330
CASA מערכת לניתוח זרע ממוחשבNanning Songjing Tianlun Biotechnology Co.,Ltd.VICOS-SPERM
צנטריפוגהSartoriusA-14C
נוזל הפרדהShanghai Biyuntian Biotechnology Co.,LtdC0163M
מחטי אקופונקטורה חד פעמיות סטריליותמותג Hanyi0.25 mm ´ 13 mm
מכונת ייבושLeicaHI1220
גירוי חשמליChangzhou Yingdi Electronic Medical Device Co., LtdKWD-808I
מאזניים אלקטרונייםHangzhou Youheng Weighing Equipment Co.,LtdHLD-6002
תמיסת צביעה Eosin YLanke BiotechBS248
תמיסת צביעת המטוקסיליןZhuhai Beso Biotechnology Co. LTDBA-4041
איזופלורןRWD Life Science Co., Ltd.R510-22-10
מיקרוטוםLeicaRM2255
בלזם נייטרליBeijing Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co.,LtdZli-9555
מכונת הטבעת פרפיןLeicaHistoCore Arcadia H
חולדות SDמרכז בעלי החיים של אוניברסיטת הרפואה של נינגשיהגיל 8 שבועות, זכר, 180-220 גרם
סורק שקופיותLeicaAperio LV1
מכונת הרדמה לחיות קטנותRWD Life Science Co., Ltd.R500
מתנד וורטקסHaimen Qilin Bell Instrument Manufacturing Co.,LtdQL-902
משטח חימוםDongguan Hongda Electronics Co., Ltd.45W-80X28CM

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Björndahl, L., et al. The sixth edition of the WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen: ensuring quality and standardization in basic examination of human ejaculates. Fertil Steril. 117 (2), 246-251 (2022).
  2. Agarwal, A., et al. Male infertility. Lancet. 397 (10271), 319-333 (2021).
  3. Abu-Halima, M., et al. Sperm motility annotated genes: are they associated with impaired fecundity? Cells. 12 (9), 21(2023).
  4. Li, S. L., et al. Mechanisms of traditional Chinese medicine in regulating Nrf2-related signaling pathways for the treatment of oligoasthenozoospermia: a review. J Ethnopharmacol. 360, 21(2026).
  5. Pathak, U. I., Gabrielsen, J. S., Lipshultz, L. Cutting-edge evaluation of male infertility. Urol Clin North Am. 47 (2), 129(2020).
  6. Kimmins, S., et al. Frequency, morbidity and equity - the case for increased research on male fertility. Nat Rev Urol. 21 (2), 102-124 (2024).
  7. Assidi, M. Infertility in men: advances towards a comprehensive and integrative strategy for precision theranostics. Cells. 11 (10), 29(2022).
  8. Feng, J. X., et al. The efficacy and mechanism of acupuncture in the treatment of male infertility: a literature review. Front Endocrinol. 13, 14(2022).
  9. You, F., Ruan, L. G., Zeng, L., Zhang, Y. Efficacy and safety of acupuncture for the treatment of oligoasthenozoospermia: a systematic review. Andrologia. 52 (1), 9(2020).
  10. Wei, J. Q., et al. Bibliometric and visualized analysis of electroacupuncture in the past 10 years. Complement Ther Med. 69, 10(2022).
  11. Yu, Y., et al. Effects and mechanism of action of transcutaneous electrical acupuncture point stimulation in patients with abnormal semen parameters. Acupunct Med. 37 (1), 25-32 (2019).
  12. Jia, W., Wang, C. A., Yin, Y. Acupuncture for oligospermia and asthenozoospermia: a systematic review and meta-analysis. Medicine. 100 (48), 8(2021).
  13. Pu, R. Y., et al. Modeling methods for busulfan-induced oligospermia and asthenozoospermia in mice: a systematic review and meta-analysis. J Assist Reprod Genet. 40 (1), 19-32 (2023).
  14. Yu, Z. Z., Chen, J., Shou, P. Q., Feng, L. Effects of micronutrients on the reproduction of infertility rat model induced by adenine. Int J Clin Exp Med. 7 (9), 2754-2762 (2014).
  15. Zhu, C. Z., et al. Short-term oral gavage administration of adenine induces a model of fibrotic kidney disease in rats. J Pharmacol Toxicol Methods. 94, 34-43 (2018).
  16. Li, K. Y., et al. Mechanism of Shu-Mu brain-kidney acupoint in treating oligoasthenospermia in rats via the hypothalamic-pituitary-testicular axis. J Vis Exp. (219), e67912(2025).
  17. Liu, J., et al. Exploration of acupoint compatibility patterns in acupuncture treatment for infertility based on data mining. Int J Womens Health. 18, 15(2026).
  18. Tang, Y. Experimental Acupuncture and Moxibustion Science. , Shanghai Science and Technology Press. Shanghai. (2021).
  19. Wang, Z., et al. Efficacy and safety of nonpharmacological strategies for the treatment of oligoasthenozoospermia: a systematic review and Bayesian network meta-analysis. Eur J Med Res. 28 (1), 16(2023).
  20. He, Y., et al. Acupuncture treatment of male infertility: a systematic review. Zhonghua Nan Ke Xue. 21 (7), 637-645 (2015).
  21. Napadow, V., et al. Effects of electroacupuncture versus manual acupuncture on the human brain as measured by fMRI. Hum Brain Mapp. 24 (3), 193-205 (2005).
  22. Grimm, H., et al. Advancing the 3Rs: innovation, implementation, ethics and society. Front Vet Sci. 10, 13(2023).
  23. Rinwa, P., Eriksson, M., Cotgreave, I., Backberg, M. 3R-refinement principles: elevating rodent well-being and research quality. Lab Anim Res. 40 (1), 11(2024).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Oligoasthenozoospermia ModelElectroacupuncture ProtocolIsoflurane AnesthesiaRat Reproductive DysfunctionAdenine Induced ModelSperm MotilitySperm CountAcupuncture AcupointsSemen AnalysisTesticular Histology

מאמרים קשורים