הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר מחקר

חתימות של MicroRNA וחלבונים מטבוליים של רכיבי תזונה בתסמונת השחלה הפוליציסטית והקשרים שלהן לעמידות לאינסולין ולדלקת

87 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/71928

⸱

8 בספטמבר 2026

 , 
1Department of Gynecology, Ganzhou Municipal Hospital of Traditional Chinese Medicine, 2Department of Gynecology, Ganzhou Women and Children's Health Care Hospital

במאמר זה

סיכום

מחקר מקרה-ביקורת רטרוספקטיבי זה העריך את רמות ה-miR-146a, miR-642a, miR-2861 ומדדים מטבוליים בסרום של נשים עם תסמונת השחלה פוליציסטית. נצפו שינויים מתואמים ב-miRNAs, אדיפוקינים, עמידות לאינסולין, דלקת וטסטוסטרון, בעוד שמודל ביומרקרים משולב הראה ביצועי הבחנה חזקים יותר מאשר מדדים בודדים.

תקציר

תסמונת השחלה הפוליציסטית (PCOS) היא הפרעה אנדוקרינית ומטבולית שכיחה בנשים בגיל הפוריות, אך הקשרים בין microRNAs (miRNAs) במחזור הדם לבין חלבונים הקשורים לתזונה אינם מובנים במלואם. מחקר זה בחן את הקשרים בין miR-146a, miR-642a ו-miR-2861 בסרום לבין סמנים מטבוליים ודלקתיים ב-PCOS. המחקר כלל 62 נשים עם PCOS ו-71 ביקורות בריאות. רמות ה-miR-146a, miR-642a ו-miR-2861 בסרום נמדדו באמצעות quantitative real-time PCR, ובו//במקביל נבחנו גם adiponectin (ADPN), leptin (LEP), retinol-binding protein 4 (RBP4), homeostasis model assessment of insulin resistance (HOMA-IR), interleukin-6 (IL-6) וטסטוסטרון (T). תיקוף מתודולוגי העריך תנאי עיבוד דגימות, דיוק הבדיקה וההסכמה בין שיטות אנליטיות. בהשוואה לקבוצת הביקורת, נשים עם PCOS הראו ביטוי מוגבר של miR-146a וביטוי מופחת של miR-642a ו-miR-2861. רמות ה-ADPN היו נמוכות, בעוד שרמות ה-LEP, RBP4, HOMA-IR, IL-6 ו-T היו גבוהות. נמצא מתאם שלילי בין miR-146a ל-ADPN ומתאם חיובי עם LEP, RBP4, HOMA-IR, IL-6 ו-T. נמצא מתאם שלילי בין miR-642a ל-RBP4, HOMA-IR ו-IL-6, בעוד ש-miR-2861 נמצא במתאם חיובי עם ADPN. התיקוף המתודולוגי הראה יציבות בדיקה, דיוק והסכמה מקובלים בין השיטות. המודל ששילב את שלושת ה-miRNAs עם ADPN, LEP, RBP4, HOMA-IR, IL-6 ו-T השיג שטח תחת העקום (AUC) של 0.929, עם רגישות של 82.26% וסגוליות של 94.37%. ממצאים אלו מדגימים שינויים מתואמים ב-miRNAs במחזור הדם ובסמנים מטבוליים ב-PCOS ותומכים בהערכה נוספת של הפוטנציאל האבחנתי המשולב שלהם.

מבוא

תסמונת השחלות הפוליציסטיות (PCOS) היא ההפרעה האנדוקרינית והמטבולית השכיחה ביותר בקרב נשים בגיל הפוריות. השכיחות הגלובלית שלה מוערכת בטווח של 6% עד 20%. לכ-70% מהנשים הלוקות בתסמונת יש עמידות לאינסולין, ויותר ממחציתן סובלות מעודף משקל או מהשמנה1. PCOS עלולה להוביל לליקויים בביוץ, לאי-פריון, לסוכרת מסוג 2, למחלות קרדיווסקולריות ולסיבוכים ארוכי טווח אחרים, ובכך להשפיע באופן משמעותי על הבריאות הרבייתית ועל איכות החיים2. אף שהפתוגנזה של התסמונת לא הובהרה במלואה, מקובל להניח כי PCOS מערבת מספר גורמים, ביניהם נטייה גנטית, דלקת כרונית בדרגה נמוכה, חריגויות במסלולי איתות של אינסולין ושיבוש של המיקרו-סביבה השחלתית המקומית. על רקע זה, לזיהוי סממנים מולקולריים ספציפיים המשקפים את התקדמות המחלה יש ערך ברור לצורך אבחון מוקדם והתערבות מדויקת ב-PCOS3,4.

MiRNAs הם סוג של RNA לא מקודד באורך של כ-22 נוקלאוטידים. מולקולות אלו מווסתות את ביטוי הגנים לאחר השעתוק, בין אם על ידי קידום פירוק ה-mRNA ובין אם על ידי עיכוב התרגום. לפיכך, מולקולות אלו חיוניות לתהליכים תאיים רבים, כולל צמיחה של תאים, דיפרנציאציה, תגובות לדלקת וויסות מטבולי5,6. מחקרים קודמים הראו הפרה אופיינית בביטוי של miR-146a, miR-642a ו-miR-2861 בסרום של חולות PCOS. ביטוי יתר (Upregulation) של miR-146a עשוי לתווך תגובות דלקתיות כרוניות באמצעות ויסות ממוקד של מסלול ה-TLR4/NF-κB7, בעוד שביטוי מופחת של miR-642a ו-miR-2861 נמצא קשור באופן הדוק לעמידות לאינסולין ולליקוי בתפקוד תאי הגרנולוזה בשחלה8,9. ADPN, LEP ו-RBP4, שהם חלבונים הקשורים לתזונה, ממלאים תפקיד מכריע בוויסות האיזון המטבולי. שינויים ברמותיהם יכולים להשפיע ישירות על אופן עיבוד הליפידים, על רגישות הגוף לאינסולין ועל מצב הדלקת. דבר זה נחשב לחלק מרכזי בבסיס המולקולרי של הבעיות המטבוליות הנצפות ב-PCOS10,11. עם זאת, מרבית המחקרים שפורסמו בחנו את ה-miRNAs או את החלבונים הקשורים לתזונה בנפרד ביחס ל-PCOS12,13, והקשר המולקולרי בין השניים טרם הובהר באופן שיטתי.

במחקר זה, מדדנו את רמות הביטוי של שלושה miRNAs וששסמנים ביולוגיים מרכזיים בחולות עם PCOS, ניתחנו את המתאמים בין סמנים אלה ואת הקשרים שלהם למדדים ביוכימיים קליניים, ובחנו darüber אם miRNAs עשויים להשתתף בתהליך הפתולוגי של PCOS באמצעות קשרים עם חלבונים הקשורים לתזונה. ממצאי מחקר זה עשויים להעשיר את ההבנה הנוכחית של הבסיס המולקולרי של PCOS, לספק מטרות פוטנציאליות לטיפולים המכוונים לוויסות תזונתי ומטבולי, ולהציע ראיות מעבדתיות לסריקה מוקדמת, ניטור יעילות וניהול מותאם אישית של PCOS.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

הצהרת אתיקה
המחקר נערך בהתאם להצהרת הלסינקי ואושר על ידי ועדת האתיקה הרפואית של בית החולים לרפואה סינית מסורתית בגאנז'ו (מספר אישור GZSZYYKYLL20240092, תאריך: 2024-12-20).

כל החומרים, الريאגנטים, ערכות הבדיקה והציוד שנעשה בהם שימוש בפרוטוקול זה מפורטים בטבלת החומרים.

מבנה המחקר
מחקר מקרה-ביקורת רטרוספקטיבי זה כלל 62 מטופלות עם PCOS שאובחנו במרפאת הגינקולוגיה של בית החולים לרפואה סינית מסורתית בגנז'ו (Ganzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine) בין יוני 2024 לאוגוסט 2025, ו-71 נשים בריאות בגיל הפוריות שנבדקו במרכז לניהול בריאות של בית החולים באותה תקופה. קבוצת הביקורת נבחרה כדי להשיג השוואה ברמת הקבוצה מבחינת גיל; BMI לא שימש כמשתנה התאמה והוערך כמאפיין בסיס.

נשואי המחקר
קריטריוני הכללה: קריטריוני ההכללה לקבוצת ה-PCOS היו כדלקמן: (1) גיל >18 שנים; (2) אבחנה של PCOS לפי קריטריוני רוטרדם המעודכנים המאושרים על ידי ההנחיות הבינלאומיות מבוססות-הראיות לשנת 2023, הדורשים לפחות שניים משלושת המאפיינים הבאים לאחר שלילת הפרעות קשורות: אוליגו-אוביולציה או אנוביולציה, המוגדרים כמחזורי הדם ארוכים מ-35 ימים או פחות משמונה מחזורים בשנה; היפראנדרוגניזם קליני ו/או היפראנדרוגניזם ביוכימי, כאשר היפראנדרוגניזם ביוכימי מוגדר כריכוז T כולל בסרום מעל הגבול העליון של טווח הייחוס הספציפי לבדיקה; ומורפולוגיה שחלתית פוליציסטית, המוגדרת כ-20 זקיקים לפחות בשחלה אחת או נפח שחלה של לפחות 10 mL כאשר ספירה מלאה של הזקיקים לא הייתה אפשרית14; (3) רשומות רפואיות אלקטרוניות מלאות; (4) ללא טיפול הורמונלי חליפי, תרופות להורדת סוכר או תרופות מדכאות חיסון במהלך 3 החודשים הקודמים; ו-(5) זמינות של דגימת סרום בצום שנאספה בעת הגיוס ואוחסנה בבנק הביולוגי המוסדי.

קריטריוני ההכללה עבור קבוצת הביקורת היו כדלקמן: (1) הגעה לבדיקה רפואית במהלך אותה תקופה; (2) מחזורי חודש סדירים; (3) מורפולוגיה שחלית תקינה בבדיקת אולטרסאונד טרנס-וגינלי; (4) היעדר היסטוריה של הפרעות אנדוקריניות, מחלות גינקולוגיות, אי-פוריות, או תפקוד כבדי או כלייתי לקוי בעל משמעות קלינית; ו-(5) זמינות של דגימת סרום בצום שנאספה ביום הבדיקה ואוחסנה בבנק הביולוגי המוסדי.

קריטריוני ההדרה היו כדלקמן: (1) אנדומטריוזיס, שרירנים ברחם, גידולי שחלה, מחלה דלקתית של האגן, או הפרעות גינקולוגיות אחרות; (2) תפקוד לקוי של בלוטת התריס, תסמונת קושינג, היפרפרולקטינמיה, היפרפלזיה אדרנלית מולדת, או הפרעה אנדוקרינית אחרת שעלולה להסביר תפקוד בייצול לקוי או היפראנדרוגניזם; (3) תפקוד לקוי חמור של הלב, הכבד, הכליות או הריאות, גידולים ממאירים, מחלות אוטואימוניות, או הפרעות המטולוגיות; (4) הריון, לידה או הפלה במהלך 6 החודשים שקדמו לבדיקה; (5) שימוש בגלוקוקורטיקואידים, בשפיריות פה או בתרופות אחרות המשפיעות על מטבוליזם של גלוקוז או ליפידים במהלך 3 החודשים שקדמו לבדיקה; (6) הפרעות פסיכיאטריות או ליקוי קוגניטיבי; (7) מידע קליני חסר; ו-(8) המוליזה חמורה של הסרום, שהוגדרה כריכוז המוגלובין >2.0 g/L, ליפמיה, צהבת, יותר ממחזור אחד של הקפאה-הפשרה, או אחסון דגימה שהופסק. תפקוד לקוי של בלוטת התריס, היפרפרולקטינמיה, והיפרפלזיה אדרנלית מולדת לא קלאסית נשללו באמצעות מדידות של הורמון מעורר בלוטת התריס (TSH), פרולקטין בסרום ו-17-hydroxyprogesterone, בהתאמה; הורמון מעורר זקיקים (FSH) נבחן במידת הצורך, בעוד שתסמונת קושינג או גידול באדרנל נבחנו כאשר הדבר ה indicato קלינית. אותו הליך פרה-אנליטי הוחל על כל הדגימות הקליניות, ואף דגימה שנכללה בניתוח הראשוני לא עברה יותר ממחזור אחד של הקפאה-הפשרה.

איסוף ואחסון דגימות סרום
דם ורידי מצומם (10 mL) נאסף בבוקר למבחנות ללא נוגדי קרישה, הושאר להקריש בטמפרטורת החדר למשך 30 דקות, וסובב בצנטריפוגה במהירות של 1,505 x g למשך 15 דקות בטמפרטורה של 4 °C. הסרום חולק לאליקוואטות של 200 µL ואוחסן בטמפרטורה של −80 °C עד לניתוח. אותו הליך פרה-אנליטי הוחל על כל הדגימות הקליניות, ושום דגימה שנכללה בניתוח הראשוני לא עברה יותר ממחזור אחד של הקפאה-הפשרה.

הכנת דגימות עבור תיקוף מתודולוגי
עשר דגימות סרום מאוחדות (pooled) ממתנדבים בריאים שימשו להערכת ההשפעות של מהירות סבב במערך צנטריפוגה (1,505, 3,000, ו-4,000 x g למשך 15 min), תדירות הקפאה-הפשרה (0, 1, 3, ו-5 מחזורים), טמפרטורת אחסון (4 °C, −20 °C, ו-−80 °C למשך 7 ימים), משך האחסון (1, 3, 6, ו-12 חודשים ב-−80 °C), והמוליזה (המוגלובין בריכוז של <0.1, 0.1–0.5, ו-0.5–2.0 g/L).

בדיקות מעבדה
כל בדיקות המעבדה בוצעו על ידי אותו טכנאי מיומן תחת תנאים סביבתיים סטנדרטיים ובהתאם לנוהלי עבודה שהוגדרו מראש. כמות ה-miRNAs בסרום נקבעה באמצעות qRT-PCR; רמות של ADPN, LEP ו-RBP4 נמדדו באמצעות sandwich ELISA; רמות של T ו-IL-6 נמדדו באמצעות בדיקות אימונו-כימילומינצנציה; ומשתנים של מטבוליזם של גלוקוז התקבלו באמצעות שיטות מעבדה אוטומטיות שגרתיות.

כימות miRNA בסרום באמצעות qRT-PCR
RNA כולל הופק מ-200 µL של סרום באמצעות ריאגנט TRIzol. נתוני ריכוז RNA ספקטרופוטומטריים ונתוני טוהר A260/A280 לא היו זמינים עבור דגימות ה-RNA המאוחסנות מהסרום. לפיכך, קביעות תקינות הבדיקה של ה-qRT-PCR הוערכה על סמך נוכחותו של שיא בודד וספציפי בעקומת ההמסה והתאמה בין שלושה שיכורים טכניים. לאחר הפרדת פאזות באמצעות כלורופורם, שקיעה באיזופרופנול ושתי שטיפות עם 75% ethanol, משקע ה-RNA הומס במים נקיים מאנזימים. מערכת התגובה בנפח 20 µL הכילה 4 µL של 5x buffer, 1 µL של reverse transcriptase, 1 µL של 10 µM stem-loop primer, ו-5 µL של תבנית RNA. תנאי התגובה היו 16 °C למשך 30 min, 42 °C למשך 30 min, ו-85 °C למשך 5 s. תוצרי השעתוק ההפוך אוחסנו ב-−20 °C. PCR כמותי בוצע באמצעות ערכה של TaKaRa SYBR Premix Ex Taq II. כל תגובה בנפח 20 µL הכילה 10 µL של 2× SYBR mixture, 0.8 µL של כל אחד מהפריימרים הקדמי והאחורי (10 µM), ו-2 µL של תבנית cDNA. האמפליפיקציה בוצעה במערכת real-time PCR מדגם Applied Biosystems 7500 תחת התנאים הבאים: דה-נטורציה מוקדמת ב-95 °C למשך 30 s; 40 מחזורים של 95 °C למשך 5 s ו-60 °C למשך 30 s; לאחר מכן בוצע ניתוח עקומת המסה כדי לאשר את ספציפיות האמפליפיקציה. U6 snRNA שימש כגן ייחוס פנימי, ורמות ביטוי יחסיות של miR-146a, miR-642a, ו-miR-2861 חושבו באמצעות שיטת 2-ΔΔCt. כל דגימה נבדקה בשלוש חזרות. רצפי כל הפריימרים שנעשה בהם שימוש במחקר זה מפורטים ב-Table 1.

זיהוי סמני חלבון בסרום
ריכוזי ADPN, LEP ו-RBP4 בסרום נמדדו באמצעות ELISA מסוג כריך כפול-נוגדנים (double-antibody sandwich ELISA) תוך שימוש בערכות Human Total ADPN/Acrp30 Quantikine ELISA Kit (רגישות אנליטית, 0.891 ng/mL; טווח בדיקה, 3.9–250 ng/mL), Human Leptin Quantikine ELISA Kit (רגישות אנליטית, 7.8 pg/mL; טווח בדיקה, 15.6–1,000 pg/mL), ו-Human RBP4 Quantikine ELISA Kit (רגישות אנליטית, 0.628 ng/mL; טווח בדיקה, 1.56–100 ng/mL), בהתאמה. כל בדיקה הייתה ספציפית לאנליט האנושי המתאים, ודגימות הסרום דוללו בהתאם להוראות היצרן. הבליעה נמדדה באורכי גל של 450 nm, והריכוזים חושבו באמצעות עקומות סטנדרט לוגיסטיות בעלות ארבעה פרמטרים. ערכי ה-CV התוך-בדיקתיים (intra-assay) או הבין-בדיקתיים (inter-assay) היו 2.5% או 3.2% עבור ADPN, 2.7% או 3.4% עבור LEP, ו-2.6% או 3.3% עבור RBP4.

מדידת T
רמות T בסרום נמדדו באמצעות בדיקת אימונסורבנציה כימילומינצית אלקטרונית (electrochemiluminescence immunoassay) באמצעות אנליזר אימונסורבנציה אוטומטי Roche Cobas e601.

מדידות של חילוף גלוקוז ומדדים דלקתיים
ערכים של גלוקוז בפלזמה בצום, אינסולין בצום ו-HbA1c נלקחו מרשומות מעבדה קליניות שגרתיות מאותו היום, ולא מהמנות סרום מאושרות ששימשו לבדיקות miRNA וחלבונים מטבוליים. גלוקוז בפלזמה בצום נמדד בשיטת glucose oxidase, אינסולין בצום נמדד בשיטת immunoturbidimetry, ו-HbA1c נמדד בשיטת כרומטוגרפיה נוזלית בעת עוצמה גבוהה (high-performance liquid chromatography). מדד HOMA-IR חושב לפי הנוסחה: [גלוקוז בפלזמה בצום (mmol/L) × אינסולין בצום (mIU/L)]/22.5. רמות IL-6 בסרום נמדדו בשיטת chemiluminescence immunoassay.

תיקוף מתודולוגי
השוואות של שיטות חלופיות בוצעו כדי לקבוע אם המדידות הראשוניות היו עמידות gegenüber לפלטפורמת הבדיקה, והן לא שימשו ליצירת התוצאות המרכזיות בין הקבוצות. רמות הביטוי של שלושת ה-miRNAs וחמישה סממנים ביוכימיים נמדדו תחת תנאי העיבוד השונים המתוארים לעיל, ומקדם השונות עבור כל מדד חושב לפי הנוסחה: CV = (standard deviation/mean) x 100%. CV <15% נחשב למקובל להערכת יציבות תוצאות הבדיקה תחת תנאי עיבוד ואחסון שונים של הדגימות. דיוק תוך-יומי הוערך על ידי מדידה חוזרת של אותה דגימת סרום מאוחדת 10 פעמים ביום אחד, בעוד שדיוק בין-יומי נקבע ממדידות שבוצעו פעם ביום במשך חמישה ימים רצופים. עבור כל מדד, חושבו הממוצע, סטיית התקן וה-CV המתאים. לבדיקת הסכמה אנליטית, חמישה אנליטים ביוכימיים—ADPN, LEP, RBP4, IL-6, ו-T—נמדדו בדגימות התיקוף באמצעות הבדיקה הראשונית ופלטפורמה של בדיקה אימונולוגית מבוססת כימילומינצנציה של Roche. ניתוח Bland–Altman שימש לחישוב גבולות ההסכמה של 95%. בדיקת ה-qRT-PCR הראשונית שימשה לכל מדידות ה-miRNA הקליניות, בעוד שערכת ה-miScript SYBR Green PCR Kit שימשה רק כשיטה אורתוגונלית בניסוי ההסכמה האנליטית; מקדמי מתאם של Pearson חושבו בין שתי מערכות ה-qRT-PCR.

ניתוח סטטיסטי
ניתוח הנתונים בוצע באמצעות תוכנה סטטיסטית. כל המשתנים הרציפים נבחנו תחילה לבדיקת נורמליות באמצעות מבחן Shapiro-Wilk. נתונים בעלי התפלגות נורמלית מוצגים כממוצע ± סטיית תקן. השוואות בין שתי קבוצות בוצעו באמצעות מבחן t למדגמים בלתי תלויים, בעוד שהשוואות בין קבוצות מרובות בוצעו באמצעות ניתוח שונות חד-גורמי (one-way ANOVA), ולאחריו מבחן LSD-t להשוואות זוגיות. נתונים שאינם תואמים להתפלגות נורמלית מוצגים כחציון (טווח בין-רבעוני) [M (P25, P75)]. השוואות בין שתי קבוצות בוצעו במקרה זה באמצעות מבחן Mann-Whitney U, והשוואות בין קבוצות מרובות באמצעות מבחן Kruskal-Wallis H. נתונים קטגוריאליים הוצגו כשכיחויות ואחוזים. השתמשנו ב- χ2 מבחן או מבחן מדויק של פישר (Fisher’s exact test) להשוואה בין הקבוצות. מתאמים בין משתנים הוערכו באמצעות ניתוח מתאמים של פירסון (Pearson correlation analysis) או ניתוח מתאמי דרג של ספירמן (Spearman rank correlation analysis) בהתאם להתפלגות הנתונים. כניתוח גשש, מתאמי פירסון בין כל miRNA לבין ששת הסמנים המטבוליים חזרו בקרב נבדקים שאינם חובשים השמנה (BMI <28 ק"ג/מ'2) ואובסיים (BMI ≥28 ק"ג/מ"ר)2תתי-קבוצות של PCOS. מקדמי המתאם הושוו באמצעות התמרת r-to-z של פישר (Fisher), והתוצאות בין תתי-הקבוצות p הערכים הותאמו באמצעות הליך שיעור התגליות השגויות של Benjamini–Hochberg. הערכנו את הביצועים האבחנתיים באמצעות עקומות מאפייני תגובה (ROC) והשטח תחת העקומה (AUC). בנוסף, ניתחנו זיהוי משולב באמצעות מודל רגרסיה לוגיסטית. כל הבדיקות היו דו-צדדיות, ו- p < ערך של 0.05 נחשב למשמעותי מבחינה סטטיסטית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

מאפייני בסיס של אוכלוסיית המחקר
במחקר זה נכללו סך הכל 62 מטופלות עם PCOS ו-71 ביקורות בריאות. שתי הקבוצות היו דומות בגיל, בהרכב האתני ובמאפייני בסיס אחרים (p > 0.05). לעומת זאת, המחזורים החודשיים היו ארוכים באופן מובהק בקבוצת ה-PCOS מאשר בקבוצת הביקורת (p < 0.001), ממצא העולה בקנה אחד עם התצוגה הקלינית הטיפוסית של PCOS (טבלה 2).

רמות ביטוי של miRNA בסרום
ניתוח miRNA בסרום חשף הבדל ברור בפרופילי הביטוי בין ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

באמצעות בדיקות ביוכימיות סטנדרטיות של סרום ו-qRT-PCR, מחקר זה ניתח דגימות סרום מ-62 מטופלות עם PCOS ו-71 ביקורות בריאות. מצאנו דפוס אופייני של ביטוי לא תקין של miRNA ושל חלבונים הקשורים לתזונה ב-PCOS, יחד עם קשרים פוסט-טרנסקריפציונליים משמעותיים בין השניים. כל הניסויים עברו תיקוף מתודולוגי קפדני. הדיוק, היציבות וההסכמה הבין-שיטתית של מערכת הזיהוי עמדו כולן בסטנדרטים המצופים ממעבדה באיכות גבוהה, דבר התומך באמינותם של הממצאים הנוכחיים.

הסימנים הביוכימיים המאפיינים את PCOS כוללים דלקת כרונית בדרג...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים כי אין ניגודי עניינים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מקפיא בטמפרטורה נמוכה במיוחד של -80 °CThermo Fisher (USA)Forma 900אחסון לטווח ארוך בטמפרטורה נמוכה של דגימות סרום
ערכת ELISA ל-Adiponectin (ADPN)R&D Systems (USA)DY1065זיהוי כמותי של ריכוז ADPN בסרום
מנתח ביוכימי אוטומטיBeckman Coulter (USA)AU5800זיהוי גלוקוז בדם בצום, אינסולין והמוגלובין גליקטי
קורא מיקרופלט אוטומטיTecan (Switzerland)Infinite M200 Proמדידת בליעה ב-450 nm עבור ניסויי ELISA
ערכה לזיהוי גלוקוז בדםBeckman Coulter (USA)A11A01זיהוי גלוקוז בצום בסרום בשיטת גלוקוז אוקסידאז
מנתח אימונו-סבון כימילומנסי Cobas e601Roche (Germany)Cobas e601זיהוי אלקטרו-כימילומנסי של טסטוסטרון ו-IL-6 בסרום
מבחנה לקריו-שימור ללא אנזימיםAxygen (USA)MCT-150-Cחלוקה למנות של דגימות סרום, אחסון בטמפרטורה נמוכה במיוחד של -80 °C
פיפטת Eppendorf Research plusEppendorf (Germany)Research plus 0.5-1,000 μLשאיבת סרום, פיפטינג של RNA/ריאגנטים, חלוקת דגימות למנות
ערכה להמוגלובין גליקטי (HbA1c)Beckman Coulter (USA)A11A03זיהוי HbA1c בסרום באמצעות כרומטוגרפיית נוזלים בעת יעילות גבוהה (HPLC)
ערכה לזיהוי IL-6Roche (Germany)5200057190כימות של אינטרלוקין-6 בסרום
ערכה לזיהוי אינסוליןBeckman Coulter (USA)A11A02זיהוי אינסולין בצום בסרום בשיטת אימונו-טורבידמטריה
ערכת ELISA ל-Leptin (LEP)R&D Systems (USA)DY398זיהוי כמותי של ריכוז LEP בסרום
צנטריפוגה מהירה בטמפרטורה נמוכהXiangyi Instrument (China)TDZ5-WSצנטריפוגציה של דגימות בכוחות צנטריפוגליים מוגדרים
ערכת miScript SYBR Green PCRQiagen (Germany)218073אימות עקביות מתודולוגית לזיהוי miRNA
ערכת PrimeScript RT לטרנסקריפציה הפוכהTaKaRa (Japan)RR036Aטרנסקריפציה הפוכה של miRNA להסנתזה של cDNA
מכשיר PCR כמותי פלואורסצנטי בזמן אמתApplied Biosystems (USA)7500הגברה של miRNA ב-qRT-PCR וזיהוי פלואורסצנטי
ערכת ELISA לחלבון קושר רטינול 4 (RBP4)R&D Systems (USA)DY6005זיהוי כמותי של ריכוז RBP4 בסרום
תוכנת הסטטיסטיקה SPSSIBM (USA)25מבחן נורמליות של נתונים, השוואה בין קבוצות, קורלציה וניתוח ROC
ערכת SYBR Premix Ex Taq IITaKaRa (Japan)RR420Aהגברה של miRNA ב-PCR כמותי פלואורסצנטי
ערכה לזיהוי טסטוסטרון (T)Roche (Germany)5200067190כימות של רמות טסטוסטרון בסרום
ריאגנט TRIzol להפקת RNA כוללInvitrogen (USA)15596026הפקת RNA כולל מדגימות סרום
מבחונת איסוף דם בוואקום ללא נוגדי קרישהBD Biosciences (USA)367812איסוף דם מווריד המרפק בצום להפרדת סרום

מקורות

  1. Stener-Victorin E, et al. Polycystic ovary syndrome. Nat Rev Dis Primers. 2024;10(1):27.
  2. Dokras A, Luque-Ramírez M, Escobar-Morreale HF. Polycystic ovary syndrome: origins and implications: Long-term health outcomes in polycystic ovary syndrome. Reproduction. 2025;170(2):e250118.
  3. Ma YC, Law KS, Wang WS, Chang HM. Phenotypic variations in polycystic ovary syndrome: metabolic risks and emerging biomarkers. J Endocrinol. 2025;267(1):e250226.
  4. Nandi A, Singh K, Sharma K. Advancement in early diagnosis of polycystic ovary syndrome: biomarker-driven innovative diagnostic sensor. Mikrochim Acta. 2025;192(5):331.
  5. Qu J, Lin Z. Autophagy regulation by crosstalk between miRNAs and ubiquitination system. Int J Mol Sci. 2021;22(21):11912.
  6. Bell-Hensley A, Das S, McAlinden A. The miR-181 family: wide-ranging pathophysiological effects on cell fate and function. J Cell Physiol. 2023;238(4):698-713.
  7. Wei R, et al. Qingfei Litan decoction alleviated Klebsiella pneumoniae-induced pneumonia by targeting the TLR4/MyD88/NF-κB axis via miR-146a-5p. J Ethnopharmacol. 2025;349:119947.
  8. Beveridge DJ, et al. The tumor suppressor miR-642a-5p targets Wilms tumor 1 gene and cell-cycle progression in prostate cancer. Sci Rep. 2021;11(1):18003.
  9. Yu K, Cui S, Xue T. LncRNA MIR22HG is downregulated in adenomyosis and upregulates miR-2861 through demethylation to inhibit endometrial cell proliferation. J Obstet Gynaecol Res. 2021;47(5):1837-1845.
  10. Orszulak D, et al. Adipokines as biochemical marker of polycystic ovary syndrome in adolescents - review. Front Endocrinol (Lausanne). 2025;16:1475465.
  11. Koleva-Tyutyundzhieva D, Ilieva-Gerova M, Deneva T, Orbetzova M. Metabolic and inflammatory adipokine profiles in PCOS: a focus on adiposity, insulin resistance, and atherogenic risk. Int J Mol Sci. 2025;26(19):9702.
  12. Dymanowska I, et al. MicroRNAs as biomarkers for metabolic disorders in polycystic ovary syndrome (PCOS): a review. Med Sci Monit. 2024;30:e946480.
  13. Ramaswamy P, et al. Circulating cell-free microRNAs in women with polycystic ovary syndrome: advancing towards biomarker discovery and therapeutic targets. Reprod Sci. 2025;32(7):2137-2179.
  14. Teede HJ, et al. Recommendations from the 2023 international evidence-based guideline for the assessment and management of polycystic ovary syndrome. J Clin Endocrinol Metab. 2023;108(10):2447-2469.
  15. Szukiewicz D, Trojanowski S, Kociszewska A, Szewczyk G. Modulation of the inflammatory response in polycystic ovary syndrome (PCOS): searching for epigenetic factors. Int J Mol Sci. 2022;23(23):14663.
  16. Kim JJ. Obesity and polycystic ovary syndrome. J Obes Metab Syndr. 2024;33(4):289-301.
  17. Gu X, Wang L, Liu S, Shan T. Adipose tissue adipokines and lipokines: functions and regulatory mechanism in skeletal muscle development and homeostasis. Metabolism. 2023;139:155379.
  18. Abdalla MMI. Therapeutic potential of adiponectin in prediabetes: strategies, challenges, and future directions. Ther Adv Endocrinol Metab. 2024;15:20420188231222371.
  19. Yang Q, et al. Serum retinol binding protein 4 contributes to insulin resistance in obesity and type 2 diabetes. Nature. 2005;436(7049):356-362.
  20. Ost A, et al. Retinol-binding protein-4 attenuates insulin-induced phosphorylation of IRS1 and ERK1/2 in primary human adipocytes. FASEB J. 2007;21(13):3696-3704.
  21. Zhu F, et al. MiR-146a alleviates inflammatory bowel disease in mice through systematic regulation of multiple genetic networks. Front Immunol. 2024;15:1366319.
  22. Aydin S, et al. An overview of ELISA: a review and update on best laboratory practices for quantifying peptides and proteins in biological fluids. J Int Med Res. 2025;53(2):3000605251315913.
  23. Candia J, et al. Effects of in vitro hemolysis and repeated freeze-thaw cycles in protein abundance quantification using the SomaScan and Olink assays. J Proteome Res. 2025;24(5):2517-2528.
  24. Liang X, et al. Quality assessment from biobank plasma and serum specimens: a systematic review. PeerJ. 2025;13:e20122.
  25. Singh I, Moar K, Maurya PK. Diagnostic and prognostic biomarkers in polycystic ovary syndrome. Clin Chim Acta. 2025;576:120425.
  26. Hadi S, et al. Extracellular fluid miRNAs in PCOS. Clin Chim Acta. 2025;576:120404.
  27. Insenser M, et al. Validation of circulating microRNAs miR-142-3p and miR-598-3p in women with polycystic ovary syndrome as potential diagnostic markers. Hum Reprod. 2023;38(5):951-960.
  28. Schofield LC, Dialpuri JS, Murshudov GN, Agirre J. Post-translational modifications in the Protein Data Bank. Acta Crystallogr D Struct Biol. 2024;80(Pt 9):647-660.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

חתימות של microRNAסממנים דלקתייםחלבונים של מטבוליזם של רכיבי תזונהmicroRNAs בסרוםPCR כמותי בזמן אמתרמות adiponectinרמות leptinחלבון קושר רטינול
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.