מאמר שיטה

מכשיר דיקור מכני לעירור רטט הדיר במחזוריות של נקודות דיקור בחולדות

56 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/72266

⸱

25 באוגוסט 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1KM Science Research Division, Korea Institute of Oriental Medicine, 2Department of Acupuncture, Moxibustion and Acupoint, College of Korean Medicine, Daegu Haany University, Daegu, 3Department of Physiology, Yonsei University College of Medicine

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

פרוטוקול זה מתאר שיטה סטנדרטית לדיקור מכני המשתמשת במכשיר סטימולציה רטטני המעניק גירוי מחט הדיקור הניתן לשחזור בנקודת הדיקור HT7 בחולדות. שיטה זו, אשר תוקפה במודל של פעילות מוטורית המושרית על ידי קוקאין, מספקת פלטפורמה כמותית וניתנת לשחזור לחקירת המנגנונים הנוירופיזיולוגיים הפריפריים והמרכזיים העומדים בבסיס ההשפעות המתווכות על ידי דיקור.

תקציר

למרות שדיקור סיני ידני נמצא בשימוש נרחב במחקר ניסיוני וקליני, יישומו מוגבל בשל יכולת שחזור נמוכה הנובעת משונות תלוית-מבצע במניפולציה של המחט. כדי להתגבר על מגבלה זו, פותח מכשיר דיקור מכני (MAI) למתן גירוי רטט מבוקר באמצעות מחט דיקור מוחדרת ללא שימוש בזרם חשמלי. מאמר זה מציג פרוטוקול סטנדרטי להחלת גירוי MAI בנקודת הדיקור HT7 בחולדות, כולל הכנת החיות, איתור נקודת הדיקור, החדרת המחט, הגדרת פרמטרי הגירוי והערכה התנהגותית. מחקרי תיקוף מייצגים הראו כי גירוי MAI ב-HT7 הפחית פעילות מוטורית המושרית על ידי קוקאין והפעיל באופן מועדף מסלולי סיבי A הקשורים לקולטנים מכניים. מחקרים נוספים אישרו את מעורבותם של סיבים תחושתיים פריפריאליים של העצב האולנרי, מסלול העמוד השדרני האחורי (dorsal column pathway) ומעגלי תגמול מזולמביים בתיווך השפעות אלו. התוצאות המייצגות המוצגות במאמר זה מבוססות על מחקרי תיקוף שפורסמו בעבר תוך שימוש בפלטפורמת ה-MAI. פרוטוקול זה מספק שיטה כמותית וניתנת לשחזור לחקר המנגנונים הנוירופיזיולוגיים של גירוי דיקור במודלים ניסיוניים של בעלי חיים.

מבוא

דיקור סיני ידני הוא שיטת גירוי מסורתית מבוססת מחטים, המספקת קלט מכני דינמי לרקמות פריפריאליות באמצעות מניפולציה ישירה של המחט, והוא נמצא בשימוש נרחב הן בהקשרים קליניים והן בהקשרים ניסויים1,2. בניגוד לדיקור חשמלי (EA), דיקור ידני מייצר גירוי מכני מורכב, הכולל דפורמציה של רקמות והפעלה של מכנורצפטורים פריפריאליים, וזאת באמצעות מניפולציה פיזית של המחט המוחדרת2. רכיבים מכניים אלו נחשבים לתורמים חשובים לאפקטים הפיזיולוגיים האופייניים של הדיקור, והם נתפסים ככאלה המפעילים מסלולים סומטוסנסוריים אפרנטיים באופן השונה מגירוי חשמלי3,4.

על אף הרלוונטיות הפיזיולוגית והשימוש הנרחב, היישום הניסויי של דיקור ידני נותר מוגבל בשל יכולת שחזור נמוכה2. ההשפעות הטיפוליות של דיקור ידני תלויות במידה רבה בגורמים התלויים במפעיל, כולל טכניקות מניפולציה של המחטים, עוצמת הגירוי, התדירות והמשך, אשר עשויים להשתנות באופן משמעותי בין מטפלים ובין תנאים ניסיוניים שונים1. שונות זו מהווה מכשול מרכזי עבור מחקרים מכניסטיים המנסים לבסס קשרים סיבתיים בין גירוי הדיקור לבין תוצאות נוירופיזיולוגיות.

כדי להתגבר על מגבלות אלו, נעשה שימוש נרחב ב-EA כשיטה חלופית, מאחר שהיא מאפשרת בקרה מדויקת של פרמטרי גרייה כגון תדר, אמפליטודה ומשך זמן. עם זאת, EA מביאה עמה קלט חשמלי שעשוי לגייס מסלולים עצביים השונים מאלה המופעלים על ידי דיקור ידני5. כתוצאה מכך, נותר קושי לבודד ולהעריך את התרומה הספציפית של גרייה מכנית, המהווה מרכיב בסיסי של דיקור ידני מסורתי. לפיכך, קיים צורך בשיטה הניתנת לשחזור המסוגלת לספק גרייה מכנית מבוקרת ללא גורמים חשמליים מערבבים עבור מחקרים מכניסטיים של דיקור.

כדי להתגבר על מגבלה זו, פותח בשנת 2013 מכשיר דיקור מכני (MAI) לשחזור של גרייה מכנית מבוססת רטט, תוך מתן אפשרות לבקרה כמותית על פרמטרי הגרייה3,5. מכשיר זה מעניק גרייה רטטית מבוקרת ישירות למחט דיקור מוחדרת, ובכך סטנדרטיזציה של הקלט המכני המופעל על הרקמה. באמצעות גישה זו, מחקרים קודמים הדגימו כי דיקור מכני ממתן מעגלים עצביים סומטוסנסוריים, קשורים לתגמול ואוטונומיים במגוון מודלים ניסויים4,6,7,8. לדוגמה, גרייה מכנית בנקודות דיקור HT7 החלישה תגובות התנהגותיות מושרות על ידי קוקאין ותלות באלכוהול באמצעות מודולציה של מעגלי דופמין מזולמביים, נתיבי אופיואידים אנדוגניים ומסלולי ממסר סומטוסנסוריים6,7. בנוסף, גרייה מכנית וחשמלית משולבת שהופעלה על נקודות נוירוגניות דיכאה יתר לחץ דם באמצעות מנגנונים מתווכי אופיואידים באזורי אוטונומיים מרכזיים5. יחד, כ-30 מחקרים שהשתמשו בפלטפורמה זו תרמו להבנה המכניסטית של דיקור בהתמכרויות, בבקרה אוטונומית ובתנאים ניסויים אחרים.

בניגוד למערכות גירוי כלליות המבוססות על רעידה בלבד, פרוטוקול זה מספק זרימת עבודה משולבת לדיקור מכני מבוסס רעידה, לא חשמלי ומצומד למחט, בחולדות ערות. הוא משלב הרכבת מכשיר, צימוד מחט-מנוע, סטנדרטיזציה של עומק ההחדרה, כיול מבוסס תאומה (accelerometer), מיקום נקודות דיקור ותיקוף התנהגותי מייצג באמצעות גירוי HT7 במודל של פעילות מוטורית מושרית על ידי קוקאין בחולדות. לפיכך, מאמר זה מספק פרוטוקול ניסויי הדיר עבור גירוי דיקור מכני מבוקר, ולא מציג מכשיר טיפולי חדש.

הפלט הסטנדרטי והנשלט כמותית של ה-MAI עשוי לספק פלטפורמה שימושית לשילוב עתידי עם גישות אנליטיות מבוססות נתונים. מכיוון שניתן להגדיר ולשחזר במדויק פרמטרים של גרייה, כגון תדר רטט, תאוצה, עומק החדירה ומשך הגרייה, משתנים אלו יכולים לשמש כקלטים מובנים עבור מידול חישובי. מחקרים אחרונים הראו כי גישות של למידת מכונה, למידה עמוקה ולמידה בהעברה יכולות לשפר את חילוץ המאפיינים, סיווג האותות, זיהוי התבניות ואופטימיזציה של תמונות ביו-רפואיות מורכבות ומערכי נתונים של אותות מבוססי רטט9,10,11,12. גישות דומות עשויות להיתכנך ליישום במחקרי דיקור מבוססי MAI על ידי שילוב פרמטרי הגרייה עם נתונים התנהגותיים, נוירופיזיולוגיים ונתוני פלט רטט, כדי לתמוך בניתוח אותות, סיווג התנהגותי, אופטימיזציה של פרמטרי הגרייה וניבוי תגובות הקשורות לדיקור. לפיכך, מחקרים עתידיים שישלבו גרייה מבוססת MAI עם מתודולוגיות של למידת מכונה עשויים לשפר עוד יותר את הדיוק, את השחזוריות ואת הפרשנות המכניסטית של מחקר הדיקור.

חשוב לציין כי נתוני התיקוף המייצגים המוצגים במאמר זה שוחזרו, הותאמו או סוכמו ממחקרים שפורסמו בעבר תוך שימוש בפלטפורמת ה-MAI. המטרה העיקרית של מאמר זה אינה לדווח על ממצאים ניסיוניים חדשים, אלא לספק פרוטוקול מפורט, שלב אחר שלב, ליישום הניתן לשחזור של גירוי דיקור מכני סטנדרטי במודלים של בעלי חיים ניסיוניים.

פרוטוקול

כל פרוטוקולי בעלי החיים המתוארים במאמר זה אושרו על ידי ועדות הרعاية והשימוש בבעלי חיים מוסדיות (IACUCs) של אוניברסיטת Daegu Haany (DHU2012-008, DHU2022-12) והפקולטה לרפואה של אוניברסיטת Yonsei (# 2023-0006), ובוצעו בהתאם למדריך של המכוניים הלאומיים לבריאות (National Institutes of Health) לטיפול ושימוש בבעלי חיים במעבדה.

1. הכנת מכשיר הדיקור המכני

  1. הרכיבו את מכשיר הדיקור המכני (MAI) (איור 1).
    1. הכינו מכשיר דיקור מכני (MAI) המורכב מיחידת בקרה בהתאמה אישית וממרט רטט מכני המחובר למחט דיקור (איור 1D). השתמשו ביחידת הבקרה כדי לכוון את עוצמת הגירוי, תדירות הרטט ומשך הגירוי3,4,13.
    2. השתמשו במחט דיקור סטרילית בעלת קוטר של 0.10 mm, גוף מחט באורך 10 mm וידית באורך 10 mm. קבעו פקק גומי לגוף המחט במרחק של 3 mm מקצה המחט כדי להבטיח עומק החדרה אחיד.
    3. חברו את מנוע הרטט למחט הדיקור באמצעות מחבר יציב מסוג קליפס. ודאו שהמחט אינה מחליקה במהלך הרטט ושהפקק נותר מקובע במהלך הגירוי.
  2. הגדירו את פרמטרי הגירוי.
    1. קבעו את תנאי הגירוי לרטיטה רציפה בתדירות של 85 Hz ובתאוצה של 1.3 m/s2 למשך 20 s, דבר המייצר גלי תאוצה יציבים במהלך הגירוי (איור 1E).
      ​הערה: ניסויי תיקוף קודמים13 הראו כי דיקור ידני ייצר תדירויות רטט של כ-70–90 Hz וערכי תאוצה ממוצעים של כ-1.3 m/s2 (איור 1A,B). על בסיס מדידות אלו, ה-MAI הוגדר לספק גירוי רטט בתדירות 85 Hz ותאוצה של 1.3 m/s2, המקורבים מאוד למאפיינים המכניים של דיקור ידני תוך אספקת פלט יציב וניתן לשחזור. משך הגירוי של 20 s נבחר מתוך מחקרי אופטימיזציה של פרמטרים שפורסמו בעבר13 במודל של פעילות מוטורית מושרית קוקאין בחולדה, שבו הושוו משכי גירוי ועוצמות תאוצה שונות כדי לזהות תנאי גירוי יעיל וסובל. בפרוטוקול זה, "תדירות" מתייחסת לרכיב התדירות הדומיננטי של רטט קצה המחט כפי שנמדד מאות רטט (accelerometer). ערך זה משקף את הרטט המועבר לקצה המחט במהלך מניפולציה ידנית של נקישת הידית, ולא את הקצב האיטי יותר של תנועות יד חזרתיות על ידי המפעיל.
    2. הפעילו את תנאי ה-85 Hz, 1.3 m/s2 כדי לייצר תבנית רטט יציבה וניתנת לשחזור, הדומה למניפולציה ידנית של המחט (איור 1E).
  3. תקפו את פלט הרטט.
    1. כדי לתקף פלט רטט יציב, חברו בחוזקה את קצה המחט למד התאוצה כך שרטט מכני מהמנוע יועבר ישירות מהמחט לחיישן.
    2. הקליטו את אות התאוצה במהלך תקופת הגירוי באמצעות מערכת רכישת נתונים ונחלו את האות באמצעות LabVIEW או תוכנה מקבילה.
    3. הגדירו את ערך התאוצה כתאוצת קצה-מחט יציבה שנמדדה בשלב הפלטו של הגירוי לאחר התגובה החולפת הראשונית, וחשבו את תדירות הרטט הדומיננטית מאות התאוצה.
    4. בצעו כיול לפני כל סשן ניסויי ובכל פעם שהמנוע, המחבר, המחט או החיבור בין המחט למנוע מוחלפים או מכווננים.
    5. המשיכו לניסויי בעלי חיים רק כאשר התדירות הדומיננטית והתאוצה הנמדדות נשארות יציבות במהלך שלב הפלטו ונמצאות בטווח קביל של פרמטרי הגירוי המתוכננים, כגון כ-±10% מ-85 Hz ו-1.3 m/s2.
      הערה: עקומות תאוצה מייצגות שנוצרו במהלך דיקור ידני וגירוי MAI מוצגות באיור 1B,E.

2. הכנת בעלי חיים ומודל של פעילות מוטורית מושראת על ידי קוקאין

  1. הכנת בעלי החיים למספר הניסוי.
    1. השתמשו בחולדות זכרים מסוג Sprague-Dawley השוקלות 270–320 g עבור ניסויי פעילות מוטורית המושרית על ידי קוקאין3,4,5. שכן את בעלי החיים תחת מחזור אור/חושך של 12 שעות עם גישה חופשית למזון ומים.
    2. שבצו 6–8 בעלי חיים לכל קבוצת ניסוי, אלא אם צוין אחרת.
  2. הרגלת בעלי החיים.
    1. הרגילו כל חולדה לנהלי הניסוי יום אחד לפני הבדיקה. בצעו טיפול עדין ומניפולציה של דיקור מדמה ללא החדרת מחטים למשך 2–3 min.
    2. מקמו את בעלי החיים בתא לפעילות מוטורית למשך 90 min כדי להפחית תגובות התנהגותיות הקשורות ללחץ במהלך נהלי גרייה במצב ערות.
    3. לפני ניסוי הדיקור, הרגילו את החולדות מדי יום לתפיסה ביד ולריסון ידני קל למשך זמן זהה למשך פרוצדורת הדיקור המתוכננת.
    4. במהלך הגרייה, החזיקו בעדינות את בעל החיים ביד כדי לייצב את הגוף והגפה הקדמית ללא הפעלת לחץ מופרז. רסנו קלות בעלי חיים מקבוצת הבקרה ללא דיקור באותו אופן ולמשך אותו זמן, אך ללא החדרת מחטים, כדי לשלוט בהשפעות כלליות של לחץ עקב קיבוע.
      הערה: על המבצעים להיות מאומנים בביצוע ריסון, החדרת מחטים וגרייה באופן עקבי.
    5. במידה ונצפו התנגדויות מתמשכות, קולות, ניסיונות בריחה או תגובות לחץ מופרזות אחרות, הפסיקו את הפרוצדורה והעניקו הרגלה נוספת לפני הבדיקה.
      הערה: בצעו את כל נהלי גריית הדיקור בבעלי חיים ערים תחת ריסון ידני קל.

3. איתור נקודות דיקור

  1. אתר את נקודות הדיקור HT7 ו-LI5.
    1. אתר את נקודות הדיקור באמצעות שיטת ההעתקה (transpositional method), שבה מיקום נקודת הדיקור באדם ממופה לאתר האנטומי המקביל בבעל החיים.
    2. זהה את HT7 (Shenmen) בקפל הרוחבי של מפרק כף הרגל הקדמית, באופן רדיאלי לגיד של שריר flexor carpi ulnaris3,4,5,8.
      ​הערה: מיקום זה תואם אנטומית לאזור תעלת ה-ulnar/תעלת גיום (Guyon’s canal) סמוך לעצב האולנרי. לעומת זאת, LI5 ממוקמת בקצה הרדיאלי של הצד הדורסלי של מפרק כף היד, בין הגידים של שריר extensor pollicis ושריר extensor pollicis brevis. LI5 ממוקמת בצד הנגדי ל-HT7 ובמרחק של כ-5 mm ממנה (איור 1F). נקודות ציון אנטומיות אלו שימשו להבטחת לוקליזציה הניתנת לשחזור של נקודות הדיקור14.
  2. אתר את נקודות הדיקור המשמשות כביקורת.
    1. השתמש ב-LI5 כנקודת ביקורת סמוכה במפרק כף היד. אתר את LI5 במרחק של כ-5 mm מ-HT7, סמוך לקצה הדיסטלי של ה-radius, בין הגידים של שרירי palmaris longus ו-flexor carpi radialis.

4. פרוצדורת גירוי מכני

  1. בצעו ניסויי פעילות מוטורית.
    1. הניחו את החולדה בתא השטח הפתוח (open-field chamber) והמתינו 60 min להסתגלות. רשמו את הפעילות המוטורית הבסיסית במשך 30 min.
    2. הזריקו קוקאין באופן תוך-peritoneal במינון של 15 mg/kg כדי להשרות הפעלה מוטורית3,4,5. הגבילו בעדינות את בעל החיים 1 min לאחר הזרקת הקוקאין.
    3. כדי להמקיס את עומק ההחדרה, רכבו פקק גומי על גוף המחט בנקודה המרוחקת 3 mm מקצה המחט (איור 1D). ודאו שהפקק מהודק היטב כדי שיישאר יציב במהלך ההחדרה והרטט.
    4. במהלך החדרת המחט, התקדמו עם המחט עד שהפקק יבוא במגע עדין עם פני העור, תוך הימנעות מדחיסה מוגברת של העור שעלולה לשנות את עומק ההחדרה האפקטיבי.
  2. הפעילו גירוי מכני.
    1. הפעילו גירוי רטט רציף ב-85 Hz ו-1.3 m/s2 למשך 20 s, תנאי הגירוי המיטביים שזוהו בניסויי תיקוף הפרמטרים (איור 2A–C). השאירו את המחט במקומה למשך 1 min לאחר ההחדרה, ולאחר מכן הוציאו אותה.
    2. המשיכו ברישום הפעילות המוטורית עד 60 min לאחר הזרקת הקוקאין. נתחו את הפעילות המוטורית במרווחי זמן של 10-min או כמרחק כולל שעבר במשך 60 min (איור 1C).
    3. הפעילו גירוי למשך 20-s כתנאי סטנדרטי, כיוון שמשך זמן זה הפיק עיכוב חסון של הפעילות המוטורית המושרה על ידי קוקאין בניסויי תיקוף קודמים (איור 2A–C).
      הערה: גירוי רציף של 40-s השרא דפוסי התנהגות דמויי לחץ (stress), כולל קולקול ותגובות הימנעות, ולכן הוא הוּסר מתנאי הגירוי הסטנדרטיים.
  3. בצעו ניסויי תיקוף של פרמטרי הגירוי.
    1. השוו משכי גירוי של 0 s, 10 s, 20 s ו-40 s או השוו הגדרות תאוצה שונות, כגון 0.7 ו-1.3 m/s2, כדי לתקף את פרמטרי הגירוי (איור 2).
    2. הפעילו גירוי ב-50-Hz כתנאי המוטה למסמני מייסנר (Meissner-corpuscle) וגירוי ב-200-Hz כתנאי המוטה למסמני פצ'יני (Pacinian-corpuscle) עבור ניסויי קשרי מכנורצפטורים, כפי שתואר קודם לכן4,8.

5. רכישת נתונים וניתוח סטטיסטי

  1. מדדו את הפעילות המוטורית באמצעות מערכת מעקב וידאו עילית. מקמו את בעלי החיים בתא שטח פתוח ריבועי (40 cm × 40 cm × 45 cm) וכמתו את מרחק הנסיעה הכולל באמצעות תוכנת מעקב וידאו.
  2. הקליטו עקומות תאוצה-זמן מפלט מד התאוצה במהלך ניסויי כיול הרעידות. דווחו על התדר הדומיננטי, אמפליטודת התאוצה ומשך הרעידה היציבה (איור 1D,E).
  3. העריכו את התפלגות הנתונים לבדיקת נורמליות לפני ביצוע ניתוח סטטיסטי פרמטרי. כאשר הנתונים עמדו בהנחות הנורמליות, נותחו הבדלי הקבוצות באמצעות ניתוח שונות (ANOVA) חד-כיווני או דו-כיווני, ולאחריו השוואות post hoc מתאימות.
  4. בצעו את המעקב והניתוח ההתנהגותי על ידי חוקרים שאינם מודעים להקצאת קבוצות הניסוי, במידת האפשר.
  5. הציגו נתונים התנהגותיים ופיזיולוגיים כממוצע ± SEM. נתחו את הפעילות המוטורית באמצעות ניתוח שונות למדידות חוזרות (ANOVA) חד-כיווני או דו-כיווני, ולאחריו מבחן post hoc של Tukey.
    הערה: גדלי המדגמים נבחרו על בסיס מחקרים קודמים שהשתמשו באותו מודל של פעילות מוטורית מושרית קוקאין בחולדות ובאותו פרוטוקול של גירוי דיקור מכני. כדי להבטיח עוצמה סטטיסטית מספיקה, נעשה שימוש ב-6–8 חולדות לקבוצה. בעלי חיים הוצאו מהניתוח רק כאשר התרחשו בעיות טכניות או פרוצדורליות שהוגדרו מראש, כולל מיקום שגוי של נקודת הדיקור, תקלה במכשיר, פלט רעידות לא יציב במהלך הכיול או כשל במעקב הווידאו.

תוצאות

תיקוף של גירוי מכני הדיר

תצורת המכשיר המייצגת ותיקוף פלט הרעידות המוצגים ב-איור 1 הופקו עבור כתב יד זה, בעוד שטווחים כמותיים של ייחוס עבור פרמטרי רעידות הנגזרים מדיקור סיני ידני סוכמו ממחקרי תיקוף קודמים.

ה-MAI תוקף על ידי השוואה בין הפלט המכני שנוצר במהלך מניפולציה של דיקור ידנית לבין זה שנוצר על ידי גרייה מונחית מכשיר (איור 1מניפולציה ידנית של מחט דיקור יצרה שיאי תאוצה פתאומיים ולא סדירים בקצה המחט, עם שונות ניכרת בין המפעילים13במחקר התיקוף המקורי, ערכי התאוצה נעו בין 0.1 m/s2 ל-2.9 מ'/שנייה2, עם ערך ממוצע של כ-1.3 m/s2, ותדרי תנודה דומיננטיים של כ-70–90 הרץ זוהו במהלך מניפולציה ידנית של המחט (איור 1A,B)3,13.

על בסיס מדידות אלו, ה-MAI הוגדר כדי לספק גרייה רטטית הניתנת לשחזור בתדר של 85 Hz ותאוצה של 1.3 m/s2. תחת תנאים אלו, המכשיר ייצר גלי תאוצה יציבים ורציפים במהלך הגרייה, מה שהדגים שניתן להמיר רט מחט דמוי-ידני לקלט מכני ניתן למדידה ולשחזור (איור 1D,E).

תצפית זו מהווה תיקוף מכני ישיר של פלט המכשיר, ולא פרשנות התנהגותית או מכניסטית. ממצאים אלו מתקפים את יכולתה של פלטפורמת ה-MAI להגדיר סטנדרט לגירוי דיקור סיני מכני, תוך שמירה על מאפייני רעידה הדומים לאלה של מניפולציית דיקור ידנית.

תיקוף התנהגותי במודל של פעילות מוטורית מושרית על ידי קוקאין

הנתונים ההתנהגותיים המוצגים ב-איור 2 מוצגים כנתוני תיקוף מייצגים ממחקרי MAI קודמים שהשתמשו במודל של פעילות מוטורית בהשראת קוקאין בחולדה, אלא אם צוין אחרת במקרא האיור.

היעילות הביולוגית של הפרוטוקול הוערכה באמצעות מודל של פעילות מוטורית מושרית על ידי קוקאין (איור 2). מתן קוקאין הגביר באופן ניכר את הפעילות המוטורית, בעוד שגירוי MAI ב-HT7 הקטין באופן משמעותי את התנועתיות-יתרה המושרית על ידי קוקאין4,5,7,8,13. ניסויים אלו בוצעו בדרך כלל עם 6–8 חולדות לקבוצה, והמובהקות הסטטיסטית נקבעה באמצעות השוואות מבוססות ANOVA כפי שדווח במחקרים המקוריים. ההשפעה המעכבת הייתה תלויה במשך הגירוי, והייתה החזקה ביותר לאחר 20 s של גירוי ב-85 Hz ו-1.3 m/s2 (איור 2A–C).

ניסויי אופטימיזציה של פרמטרי הגירוי הוכיחו עוד כי ההשפעה המעכבת הייתה תלויה בעוצמת הגירוי ובמיקום נקודת הדיקור. גירוי מכני שניתן ב-HT7 הפחית באופן משמעותי תגובות מוטוריות מושראות על ידי קוקאין, בעוד שגירוי של נקודת הבקרה הסמוכה LI5 תחת תנאים זהים לא הצליח לדכא את הפעילות המוטורית4,13. לפיכך, התצפית ההתנהגותית הישירה הייתה שגירוי של HT7 הפחית פעילות מוטורית מושראת על ידי קוקאין, בעוד שגירוי של LI5 לא הפיק את אותה השפעה מעכבת תחת תנאי גירוי תואמים (איור 2D,E). ממצאים אלו מעידים כי ההשפעה ההתנהגותית הייתה ספציפית לנקודת הדיקור ולא הייתה תוצאה לא ספציפית של הגבלה או גירוי של שורש כף היד.

ראיות תיקוף קודמות למסלולים ההיקפיים והמרכזיים המעורבים בגירוי MAI

התוצאות בחלק זה מסוכמות מתוך מחקרי תיקוף מכניסטיים קודמים. ניסויי תיקוף פריפריים ומרכזיים תמכו עוד יותר בספציפיות של פרוטוקול ה-MAI (איור 3). ההשפעה העיכובית של גרייה ב-HT7 הופחתה באופן משמעותי על ידי הזרקת חומר אלחוש מקומי ובוטלה על ידי חיתוך של העצב האולנרי (ulnar nerve transection), מה שמעיד על כך שסיגנלינג תחושתי (afferent) פריפרי פעיל של העצב האולנרי נחוץ להשפעות ההתנהגותיות של גרייה באמצעות דיקור מכני3,13. לעומת זאת, חיתוך של העצב הרדיאלי או המדיאני לא ביטל את ההשפעה העיכובית של גרייה ב-HT7, מה שתומך בספציפיות האנטומית של הנתיב התחושתי האולנרי. ניסויים אלו בוצעו עם גדלי קבוצות שדווחו במחקרים המקוריים, בדרך כלל 6–8 חולדות לקבוצה, אלא אם צוין אחרת.

הקלטות מייצגות הדגימו כי גרייה של MAI הפעילה באופן מועדף נתיבים של סיבי A מיאליניים גדולים הקשורים למכנורצפטורים, כולל גופי פצ'יני ומייסנר, בעוד שתגובות חלשות יחסית נצפו בנתיבים נוציצפטיביים של סיבי C/Aδ5,13. קביעה זו מתייחסת לתצפיות אלקטרופיזיולוגיות ישירות של תגובות אפרנטיות. הפרשנות לפיה תגובות אלו משקפות איתות הקשורה למכנורצפטורים מוצגת כהסקה ברמת הנתיב, המבוססת על מחקרי תיקוף קודמים. בנוסף, גרייה מכנית של העצב האולנרי הפעילה את נתיב העמוד הסורגי–גרעין הקונאט (dorsal column–cuneate nucleus), ושיבוש של נתיב זה מנע את ההשפעה העיכובית על תגובות מוטוריות המושרות על ידי קוקאין3. מחקרים עוקבים הדגימו עוד מעורבות של ההיפותלמוס הלטרלי, נתיב הקורטקס הפרה-פרונטלי המדיאלי-הבנולה הלטרלית, הגרעין הטגמנטלי הרוסטרו-מדיאלי ומסלולים דופמינרגיים מזולימביים בדיכוי של תגובות התנהגותיות הקשורות לקוקאין המתווך על ידי MAI (איור 4)3,4,7,8,13,15. מחקרים אלו של נתיבים מרכזיים כללו גישות של שיבוש או עיכוב נתיבים, כגון נגעי אלקטרוליזה, נגעי כימיים המושרים על ידי חומצה איבוטנית ועיכוב אופטוגנטי מתווך על ידי הלורודופסין, כדי לבחון האם מעגלים אלו נדרשים להשפעות ההתנהגותיות של גריית HT7. מכיוון שניסויים אלו כוללים מניפולציות מורכבות ברמת המעגל, הם מסוכמים כאן כראיות תיקוף קודמות ולא מוצגים כפרוצדורות ניסיוניות שלב-אחר-שלב.

בסיכומה, תוצאות מייצגות אלו מדגימות כי גירוי מבוס MAI מספק פרוטוקול דיקור מכני הניתן לשחזור ולכימות, המסוגל להפעיל מסלולי מכנורצפטורים פריפריים מוגדרים ולמנול מעגלים עצביים ותגובות התנהגותיות הקשורים לתגמול.

הסדרת דיקור, גרפי עוצמה, מכשיר רטט, תרשים תגובה לקוקאין, נקודות דיקור במכרסמים.
איור 1פיתוח ותיקוף של מכשיר הדיקור המכני (MAI). (A(איור סכמתי המראה שונות במניפולציה של דיקור ידני בין מפעילים שונים.)B(B) עקומות תאוצה מייצגות שהופקו במהלך מניפולציה של דיקור ידני. (C) השפעת דיקור ידני בנקודה HT7 שבוצע על ידי ארבעה מפעילים שונים על פעילות מוטורית המושרית על ידי קוקאין, המדגימה שונות בין-מפעילים בהשפעות ההתנהגותיות של גרייה ידנית.ד'תמונה עם כיתוב של ה-MAI המורכב, המציגה את המחט, תפס התניפה, מנוע הרעידה ופקק הגומי המשמש לסטנדרטיזציה של עומק החדירה (3 מ"מ).E) צורת גל תאוצה מייצגת שנוצרה על ידי ה-MAI בתדר של 85 Hz ובמהירות של 1.3 m/s2, המדגימה גירוי מכני יציב וניתן לשחזור. (F) תמונות מייצגות המראות את המיקומים האנטומיים של HT7 ו-LI5 בכף רגלה הקדמית של חולדה. נקודות אדומות מצביעות על מיקומי נקודות הדיקור ששימשו להחדרת המחט. נקודה HT7 זוהתה בקו הקימט הרחב של פרק כף היד סמוך לגיד ה-flexor carpi ulnaris, בעוד שנקודה LI5 זוהתה בצד הרדיאלי של גב פרק כף היד, בין הגידים extensor pollicis ו-extensor pollicis brevis, ובכך סיפקו נקודות ייחוס אנטומיות הניתנות לשחזור לצורך איתור נקודות הדיקור. איור זה הותאם באישור מ-Kim et al.13. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של דמות זו.

תגובת תנועה לקוקאין; גרפים של סדרות זמן (A-C) מראים השפעות לאחר מתן קוקאין; מפות חום (D) מציגות דפוסי תנועה; גרף (E) משווה את המרחק שעוברו; ניתוח השפעת דיקור סיני.
איור 2אופטימיזציה של פרמטרי סטימולציה מכנית במודל של פעילות מוטורית המושרה על ידי קוקאין. (א–גהשפעות משך הגירוי, עוצמת הגירוי ועומק החדרת המחט על פעילות מוטורית המושרית על ידי קוקאין.Aהוחל גירוי HT7-MAI למשך 0, 10, 20 או 40 שניות בתדר של 85 Hz ובמהירות של 1.3 m/s2. (Bהחלה גירוי HT7-MAI למשך 20 שניות בעוצמות האצה שונות.Cהפעלה של HT7-MAI בוצעה בעומקי החדרת מחט שונים.ד'עקבות תנועה מייצגות במהלך בדיקת פעילות ਲੋקומוטורית לאחר הזרקת תמיסת סלין, קוקאין, קוקאין בתוספת גרייה של HT7, או קוקאין בתוספת גרייה של LI5.הגירוי דיקור מכני ב-HT7, אך לא ב-LI5, שהוענק בתדר של 85 Hz ובמהירות של 1.3 m/s2 במשך 20 שניות, הפחתה משמעותית של העלייה בפעילות מוטורית המושרית על ידי קוקאין. הנתונים מוצגים כממוצע ± טעות סטנדרטית של הממוצע (SEM). *p < 0.05 לעומת ביקורת שטופלה בקוקאין. דמות זו הותאמה באישור מ-Kim et al.13. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מורחבת של דמות זו.

תרשים תגובה חושית עם גרפים המראים את השפעת הקוקאין על פסיניאני, מייסנר, סיבי A וסיבי C.
איור 3תיקוף של השפעות דיקור באמצעות MAI (מיקרו-מניפולציה אקופונקטורית) ברמת התחושה ההיקפית והקולטנים המכניים. (Aתרשים סכימטי של העברה של אותות מהפריה למרכז המושרה על ידי דיקור מכני. גרייה רטית ב-HT7 מפעילה מכנריצפטורים, כולל גופי מייסנר ופצ'יני, ברקמות העור ומתחת לעור. אותות אלו מועברים באמצעות סיבי A מיומילינזים גדולים של העצב האולנרי (העצב המסודי) למקטעים ספינליים C8–T1, ובעקבות זאת משפיעים על המערכת הדופמינרגית המזולימבית.B) השפעת הזרקת חומר הרדמה מקומי על ההשפעה העיכבית של גרייה ב-HT7-MAI. הזרקת בופיבקאין (Bupivacaine) מסביב ל-HT7 הפחיתה את השפעת הדיכוי של גריית HT7 על פעילות מוטורית המושרית על ידי קוקאין, דבר המעיד על מעורבות של סיגנלינג אפרנטי פריפריאלי מקומי. (C–Hתגובות סומטיות אפרנטיות של סיבים הקשורים לדרפיס פצ'יני (Pacinian corpuscle) וסיבים הקשורים לדרפיס מייסנר (Meissner corpuscle) במהלך גירוי MAI בנקודה HT7.I–N) תגובות של סיבי A וסיבי C במהלך גרייה של MAI בנקודה HT7. גריית MAI הפעילה באופן חסון סיבים אפרנטיים מסוג A והפיקה תגובות חלשות יותר מסיבי C. הנתונים מוצגים כממוצע ± SEM. *p < 0.05 בהשוואה לקו הבסיס או לבקרת טיפול בקוקאין, לפי העניין. איור זה הותאם באישור מ-Kim et al.13. אנא לחצו כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

דיאגרמה של פיזיולוגיית דיקור, מסלולי עמוד השדרה והמוח, אינטראקציות בין נוירוני דופמין ל-GABA.
איור 4מסלול עצבי מוצע מההיקף למרכז העומד בבסיס הוויסות המתווך על ידי MAI של תגובות מושראות קוקאין ומערכת דופמינרגית מסולמביתגירוי MAI על העור מפעיל עצבים תחושתיים פריפריאליים ומעביר אותות סומטוסנסוריים דרך נתיבים עולים בעמוד השדרה. קלטים אלו מועברים למעגלי מוח הכוללים את ה-mPFC, LHb, RMTg, VTA ו-NAc. הפעלה של נתיב ה-mPFC–LHb–RMTg עשויה להגביר עיכוב GABAergic של נוירוני דופמין ב-VTA, ובכך להפחית את שחרור הדופמין ב-NAc ולדכא אקטיבציה פסיכומוטורית המושרית על ידי קוקאין. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של איור זה.

דיון

מחקר זה מציג פרוטוקול סטנדרטי להחלת דיקור מכני באמצעות מכשיר גירוי רטט שמאפשר מתן רב-שחזיר של גירוי מכני מבוסס רטט. על ידי אספקת בקרה כמותית של תדר הגירוי, עוצמת ההאצה ומשך הזמן, גישה זו נותנת מענה למגבלה מרכזית של דיקור ידני מסורתי, התלוי מטבעו בטכניקה של המטפל וקשה לסטנדורטיזציה.

אחד היתרונות המרכזיים של פרוטוקול זה הוא היכולת לבודד ולתקנן את הרכיב המכני של גירוי הדיקור. בניגוד לדיקור ידני, המשתנה באופן משמעותי בין מטפלים שונים, ה-MAI מייצר גירוי רטט יציב וניתן לשחזור ישירות דרך מחט הדיקור המוחדרת. יכולת שחזור זו חשובה במיוחד עבור מחקרי מנגנונים הבוחנים את הבסיס העצבי והפיזיולוגי של השפעות הדיקור.

בהשוואה לאלקטרו-אקופנקטורה (EA), פרוטוקול זה מאפשר לבחון גרייה מכנית ללא הכנסת זרם חשמלי חיצוני. הבחנה זו חשובה כיוון שגרייה חשמלית עשויה לדפולריז את סיבי העצבים הפריפריאליים באופן ישיר, בהתאם לעירור החשמלי, לתצורת האלקטרודות, לעוצמת הזרם ולהתנגדות הרקמה16,17. לעומת זאת, ה-MAI יוצרת בעיקר דפורמציה מכנית של רקמות עור ורקמות תת-עוריות מקומיות המקיפות את המחט המוחדרת. לפיכך, פרוטוקול זה משחזר בצורה מדויקת יותר את הרכיב הפיזי של אקופנקטורה ידנית, תוך שהוא מאפשר בקרה כמותית של פרמטרי הגרייה.

מחקרי תיקוף קודמים הדגימו כי גרייה של MAI בנקודה HT7 מדכאת פעילות מוטורית המושרית על ידי קוקאין באמצעות מנגנונים אפרנטים פריפריאליים13. ההשפעה המעכבת נבלמה על ידי הרדמה מקומית ב-HT7 ובטלה על ידי חיתוך של העצב האולנרי, דבר המצביע על כך שסיגנל אפרנטי תקין של העצב האולנרי נדרש עבור ההשפעות ההתנהגותיות של גרייה אקופונקטורית מכנית. באופן חשוב, ההשפעה המעכבת לא נבלמה על ידי חסימה של נתיבי סיבי C/Aδ ולא שוחזרה על ידי גרייה נוציצפטיבית סלקטיבית, מה שמרמז כי גריית MAI מפעילה בעיקר נתיבים של סיבי A מיאליניים גדולים ולא אפרנטים נוציצפטיביים.

הטבע של פרוטוקול זה, המבוסס על מכנורצפטורים, מבדיל עוד יותר בין גרייה מסוג MAI לבין EA. תדירות הגרייה המתוארת כאן מייצגת את התדירות הדומיננטית של הרעידה התנודתית המועברת לקצה המחט, ולא את קצב התנועה הידנית החזרתית. מחקרים קודמים הראו כי תדרי רעידה הקשורים להפעלת גופי מייסנר ופאצ'יני דיכאו ביעילות תגובות מוטוריות ה闹וכות על ידי קוקאין5,18. ממצאים אלו תומכים בפרשנות שדיקור מכני מבוסס רעידות מפעיל סיבי afferents הקשורים למכנורצפטורים בעלי סף נמוך ברקמות שטחיות ועמוקות, ומעביר אותות דרך נתיבי סיבי A גדולים של העצב האולנרי3,13. לפיכך, ה-MAI מייצג מודל ניסויי ביניים בין דיקור ידני ל-EA, בכך שהוא משמר את המרכיב המכני מבוסס המחט של הדיקור הידני ובעת זאת מאפשר להפוך את הגרייה לסטנדרטית ומדודה.

התוקף הביולוגי של פרוטוקול זה נתמך עוד יותר על ידי ראיות ברמת המסלול. גרייה מכנית של העצב האולנרי הפעילה את מסלול העמוד הדורסלי–גרעין הקונאט (dorsal column–cuneate nucleus), ושיבוש של מסלול זה ביטל את ההשפעה המעכבת על פעילות מוטורית המושרית על ידי קוקאין3. לעומת זאת, נגעים במסלול הספינו-תלמי (spinothalamic tract) לא מנעו את ההשפעה ההתנהגותית, מה שמרמז כי מסלולים סומטוסנסוריים הקשורים למגע לא-מזיק ולרעידות, ולא איתותים נוציספטיביים, הם המעורבים. מבחינה מכניסטית, מחקרים קודמים אלו מעידים כי גריית HT7 מבוססת MAI מפעילה מסלול פריפרי-מרכזי המקשר בין סיבי A מיילינציה גדולים בתוך העצב האולנרי לבין ויסות דופמין מסולימבי. אותות סומטוסנסוריים אלו מועברים דרך מסלול העמוד הדורסלי-גרעין הקונאט ובשלב הבא מגייסים מעגלי ויסות מסולימביים במורד המסלול, כולל מסלול ה-mPFC–LHb–RMTg–VTA–NAc. מסלול זה עשוי לתרום לדיכוי של פעילות מוטורית ותגובות התנהגותיות הקשורות לדופמין המושרות על ידי קוקאין4,6,7,8. יחד, ממצאים אלו מצביעים על כך שפרוטוקול ה-MAI מספק פלטפורמה ניסויית ניתנת לשחזור לחקירת האופן שבו גרייה מכנית פריפרית מוגדרת מווסתת מעגלים עצביים מרכזיים והתנהגויות הקשורות לתגמול.

יש להקפיד על מספר שלבים קריטיים ליישום מוצלח של פרוטוקול זה. ראשית, localization של נקודת האקופונקטורה חייבת להיות מדויקת מבחינה אנטומית. עבור גירוי של HT7 במכרסמים, קפל פרק כף היד הרוחבי וגיד ה-flexor carpi ulnaris משמשים כנקודות ייחוס אנטומיות חיוניות13,19. שנית, יש להפחית את השונות בניסוי על ידי סטנדרטיזציה של עומק ההחדרה באמצעות ה stopper, שכן שונות בלתי נשלטת בעומק ההחדרה עלולה להגביר את השונות הניסוית20. שלישית, נדרש חיבור יציב בין המחט למנוע כדי להבטיח העברה מדויקת של הרעידות לקצה המחט. לבסוף, יש להימנע מגירוי מופרז. מחקרי תיקוף קודמים הראו כי גירוי רציף ממושך, כגון רעידות למשך 40-s, עורר תגובות התנהגותיות דמויות סטרס, בעוד שגירוי למשך 20-s הפיק השפעות התנהגותיות חזקות עם סבילות משופרת13.

למרות יתרונות אלו, יש להכיר במספר מגבלות. הגירוי הנוצר על ידי ה-MAI מייצג רק תת-קבוצה של טכניקות דיקור ידני ואינו משחזר באופן מלא את המניפולציות הרב-כיווניות המבוצעות על ידי מטפלים מנוסים. בנוסף, מרבית תיקופי הפרוטוקול הזה בוצעו במודלים של בעלי חיים, ויכולת היישום הישירה שלו במסגרות קליניות אנושיות דורשת בדיקה נוספת.

ה-MAI אינו משחזר את מלוא המורכבות הרב-ממדית של דיקור ידני מסורתי, הכוללת הרמה-דחיפה (lifting-thrusting), סיבוב, דפורמציה דו-כיוונית של הרקמה ומשוב תחושתי התלוי במטפל. לפיכך, אין לפרש את הגירוי הרטט המועבר על ידי ה-MAI כייצוג מלא של דיקור ידני. במקום זאת, פרוטוקול זה סטנדרטיז את הרכיב המכני מבוסס-הרעידה המועבר לקצה המחט במהלך מניפולציה של נקישת הידית (handle-flicking).

למרות שפרוטוקול זה תוקף בעיקר באמצעות גירוי HT7 בחולדות Sprague-Dawley זכרים במודל של פעילות לוקומוטורית המושרית על ידי קוקאין, ניתן להתאים את ה-MAI לנקודות דיקור אחרות ולמודלים ניסויים אחרים. עם זאת, ייתכן שיהיה צורך באופטימיזציה מחודשת של הפרמטרים, מכיוון שעומק הרקמה, האנטומיה המקומית, התפלגות המכנורצפטורים והרכב העצבים האפרנטיים עשויים להשתנות בין נקודות דיקור, מינים, זנים, מינים ומצבים מחלתיים.

יישומים עתידיים של גישה זו עשויים לכלול את שילובה בפלטפורמות סטנדרטיות למחקר נוירומודולציה ואת התאמתה למחקרי דיקור קליניים וטרנסלציונליים. זירוף נוסף של המכשיר עשוי לאפשר שליטה מדויקת יותר בדפוסי העירור ולהקל על יישום רחב יותר במודלים למחלות מרובות. בסופו של דבר, פרוטוקול זה עשוי לסייע בגישור בין פרקטיקת דיקור מסורתית לבין מדעי המוח המודרניים, על ידי אפשור חקירה הדירה וכמותית של מנגנונים פיזיולוגיים המתווכים על ידי דיקור.

גילויים

המחברים מצהירים כי אין להם ניגודי אינטרסים פיננסיים או קונפליקטים של אינטרסים הקשורים למחקר זה.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי המכון הקוריאני לרפואה מזרחית (KIOM) תחת מענק מספר KSN2512011, ועל ידי רשות הטכנולוגיה הבריאותית של קוריאה (KHITR)&פרויקט D באמצעות המכון לפיתוח תעשיית הבריאות של קוריאה (KHIDI), במימון משרד הבריאות & משרד הרווחה, רפובליקה של קוריאה (RS-2024-00443893), והקרן הלאומית למחקר של קוריאה (NRF), באמצעות מענק במימון ממשלת קוריאה (RS-2024-00349070). ברצוננו להביע את תודתנו הכנה לצוות מחקר נקודות הדיקור במכון הקוריאני לרפואה מזרחית, למחלקה ללימודי מרידיאנים ונקודות דיקור באוניברסיטת Daegu Haany, ולמחלקה לפיזיולוגיה בפקולטה לרפואה של אוניברסיטת Yonsei, על תמיכתם יקרת הדמי והדיונים המעמיקים בנוגע לפיתוח ותיקוף המכשיר לדיקור מכני.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מד תאוצה (Accelerometer)PCB PiezotronicsPO-AXA-12-01משמש למדידת רעידות
מחט דיקור (0.10 mm × 10 mm)Dongbang Acupuncture Inc.DB102מחט דיקור סטרילית לשימוש חד-פעמי
מחבר תלי-אלגטור (Alligator clip connector)N/AN/Aמשמש לחיבור הרעיד למחט הדיקור
Bupivacaine hydrochloride (0.5%)Huons Pharm, KoreaHIRA Code (199502333)משמש לניסויי הרדמה מקומית
Cocaine hydrochlorideMacfarlan Smith Ltd 53-21-4 משמש לניסויי פעילות מוטורית המושרה על ידי קוקאין
יחידת בקרהCustom-madeN/Aמשמשת לכיוון תדירות הגירוי, עוצמת התאוצה ומשך הזמן
תוכנה לרכישת נתוניםLabVIEWLabVIEW 7 Express (7.0)משמשת לניתוח אותות רעידה
מערכת לרכישת נתוניםNational InstrumentsDAQ-NI USB-6200משמשת לדיגיטציה של אותות
מכשיר דיקור מכני (MAI)Custom-madeN/Aמכשיר שנבנה בהתאמה הכולל יחידת בקרה, מנוע רעידה, מחבר מסוג תלי, מחט דיקור ופקק גומי
תא למדידת פעילות מוטורית בשטח פתוח (Open-field locomotor chamber)Custom-madeתיבת שטח פתוח ריבועית
(40 cm × 40 cm× 45cm)
עשויה מאקרילי שחור. 		משמש לניתוח פעילות מוטורית
פקק גומיN/AN/Aמותקן במרחק 3 mm מקצה המחט כדי להבטיח עומק החדרה סטנדרטי
חולדות Sprague-DawleyOrient BioCrl:CD(SD)IGSזכרים, 270–320 g
מנוע רעידהMotor BankMB-0412V משמש לגירוי רעידה מכני
תוכנת מעקב וידאוEthoVision XTEthovision 3.1משמשת למעקב אחר פעילות מוטורית

מקורות

  1. Langevin HM, et al. Biomechanical response to acupuncture needling in humans. J Appl Physiol (1985). 2001;91(6):2471-2478.
  2. Langevin HM, et al. Manual and electrical needle stimulation in acupuncture research: Pitfalls and challenges of heterogeneity. J Altern Complement Med. 2015;21(3):113-128.
  3. Chang S, et al. Involvement of the cuneate nucleus in the acupuncture inhibition of drug-seeking behaviors. Front Neurosci. 2019;13:928.
  4. Chang S, et al. Acupuncture reduces cocaine psychomotor responses by activating the rostromedial tegmental nucleus. Addict Biol. 2021;26(6):e13052.
  5. Shin JH, et al. Paired mechanical and electrical acupuncture of neurogenic spots induces opioid-mediated suppression of hypertension in rats. J Physiol Sci. 2020;70(1):14.
  6. Chang S, et al. Acupuncture attenuates alcohol dependence through activation of endorphinergic input to the nucleus accumbens from the arcuate nucleus. Sci Adv. 2019;5(9):eaax1342.
  7. Chang S, et al. Mediation of mPFC-LHb pathway in acupuncture inhibition of cocaine psychomotor activity. Addict Biol. 2023;28(10):e13321.
  8. Ahn D, et al. Role of lateral hypothalamus in acupuncture inhibition of cocaine psychomotor activity. Int J Mol Sci. 2021;22(11):5994.
  9. He J, et al. Cancer detection for small-size and ambiguous tumors based on semantic FPN and transformer. PLoS One. 2023;18(2):e0275194.
  10. Zhang J, Yu H, Ning X. Variational mode decomposition based on refined composite multiscale dispersion entropy and its application in sEMG denoising. J Electromyogr Kinesiol. 2026;89:103176.
  11. Zhu H, Rong C, Liu H. Deep deterministic policy gradient algorithm based on dung beetle optimization and priority experience replay mechanism. Sci Rep. 2025;15(1):13978.
  12. Su H, et al. A novel transfer learning framework based on deep contrastive convolution for wind turbine bearing fault localization. IEEE Trans Reliab. 2025;74(4):5579-5591.
  13. Kim SA, et al. Peripheral afferent mechanisms underlying acupuncture inhibition of cocaine behavioral effects in rats. PLoS One. 2013;8(11):e81018.
  14. Jin W, et al. Acupuncture reduces relapse to cocaine-seeking behavior via activation of GABA neurons in the ventral tegmental area. Addiction Biology. 2018;23(1):165-181.
  15. Kim, DH, et al. Acupuncture points can be identified as cutaneous neurogenic inflammatory spots. Sci Rep. 2017;7:15214.
  16. Merrill DR, Bikson M, Jefferys JG. Electrical stimulation of excitable tissue: Design of efficacious and safe protocols. J Neurosci Methods. 2005;141(2):171-198.
  17. Rattay F. The basic mechanism for the electrical stimulation of the nervous system. Neuroscience. 1999;89(2):335-346.
  18. Abraira VE, Ginty DD. The sensory neurons of touch. Neuron. 2013;79(4):618-639.
  19. Yin CS, et al. A proposed transpositional acupoint system in a mouse and rat model. Res Vet Sci. 2008;84(2):159-165.
  20. Macpherson H, et al. Standards for reporting interventions in controlled trials of acupuncture: The STRICTA recommendations. Acupunct Med. 2002;20(1):22-25.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

HT7A

מאמר זה פורסם

הסרטון יגיע בקרוב

צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.