הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

פלטפורמה מיקרופלואידית לבחינת תפקידי דחיסה מכנית באינטראקציות בין תאי גידול לתאי מערכת החיסון במטריצה חוץ-תאית תלת-ממדית

121 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/72929

⸱

28 באוגוסט 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Biomedical Engineering, Cornell University, 2Department of Biological and Environmental Engineering, Cornell University, 3Translational Science and Therapeutics Division, Fred Hutchinson Cancer Center, 4Department of Pathology, Albert Einstein College of Medicine

במאמר זה

סיכום

אנו מציגים פרוטוקול לשימוש בפלטפורמה מיקרופלואידית למידול אינטראקציות בין גידול למערכת החיסון בתוך סביבה תלת-ממדית (3D). התוצאות שלנו גילו שתאי Natural Killer (NK) שמרו על פעילותם נגד הגידול תחת דחיסה מכנית.

תקציר

כוחות מכניים משפיעים באופן משמעותי על יכולתם של תאי מערכת החיסון להרוג תאי גידול בהקשר של אימונותרפיה מבוססת תאים. כדי להרוג תאי גידול, תאי מערכת החיסון חייבים להפעיל כוחות על תא המטרה וליצור סינפסה חיסונית, שדרכה מועברים מולקולות ציטוטוקסיות — כולל granzyme B. למרות חשיבותם, האופן שבו ניתן לנצל רמזים מכניים כדי להגביר הרג המתווך על ידי מערכת החיסון נותר לא מובן דיו. פער ידע זה נובע בחלקו מהיעדר כלים המסוגלים לספק מאץ מכני מבוקר היטב לתרביות תאים בסביבה ריאליסטית מבחינה פיזיולוגית. כאן, אנו מתארים התקן דחיסה מיקרופלואידי שיכול להפעיל דחיסה סטטית או דינמית על ספרואידים של גידול המוטמעים במטריצה חוץ-תאית (ECM), תוך מתן אפשרות לדימוי בזמן אמת של אינטראקציות בין הגידול למערכת החיסון באמצעות מיקרוסקופיה אופטית.

הפלטפורמה המיקרופלואידית מורכבת מ-12 תאים (6 תאי בקרה ו-6 תאים פונקציונליים). כל תא מכיל תא תאים הממוקם ישירות מתחת ליחידת בקרת הלחץ. ספרואידים המוטמעים ב-ECM ממוקמים בתוך תא התאים. באמצעות פלטפורמה זו, חקרנו את יעילות ההריגה של תאי Natural Killer (NK) כנגד ספרואידים של גידול שדי (MCF-7) תחת דחיסה מכנית מוגדרת. התוצאות הראו כי תאי NK נותרו הגורמים המרכזיים למות הספרואידים של הגידול ללא קשר לדחיסה מכנית ב-1.5 mg/mL collagen. מכך עולה כי תאי NK יכולים לשמר את פעילותם האנטי-גידולית תחת עקה דחוסה. ממצאים אלו מדגימים את יעילותה של פלטפורמה זו לחקירת תפקידן של כוחות מכניים באינטראקציות בין גידול למערכת החיסון. מחקרים נמשכים מזהים כעת את המנגנונים המולקולריים המאפשרים לתאי חיסון להסתגל לעקה דחוסה. תובנות שיירכשו ממחקרים אלו עשויות לחשוף נתיב טיפולי מבטיח.

מבוא

אימונותרפיה לסרטן מבוססת תאים היא גישה טיפולית המשתמשת בתאי מערכת החיסון כדי להתמקד בתאי סרטן1. אסטרטגיה זו הוכיחה הצלחה ניכרת בטיפול בסרטני דם2,3,4. עם זאת, רמת ההצלחה שנצפתה בסרטני דם טרם תורגמה במלואה לטיפול בגידולים סולידיים5,6,7. סיבה מרכזית אחת למגבלה זו היא מיקרו-סביבת הגידול (TME) המדכאת את מערכת החיסון, המאפיינת גידולים סולידיים.

ה-TME מאופיין ברמזים מכניים מובחנים שיכולים להסדיר את ההתנהגות התאית. כדי שתהיה השמדה יעילה של תאי גידול על ידי תאי חיסון, על האחרונים להפעיל כוחות על תאי המטרה ולהקים סינפסה חיסונית שדרכה מועברים מולקולות ציטוטוקסיות8. לפיכך, הבנה של האופן שבו כוחות מכניים משפיעים על תפקוד תאי חיסון עשויה לחשוף אסטרטגיות טיפוליות חדשות לשיפור היעילות של אימונותרפיות מבוססות תאים נגד גידולים סולידיים.

מאפיין מכני מגדיר של TME מוצק הוא מאמץ הדחיסה שסביבת המיקרו של הגידול מפעילה על הגידול הצומח9,10. עד כה, מרבית מחקרי הדחיסה התמקדו בהשפעות על התנהגות תאי הגידול10,11. רק לאחרונה עברה תשומת הלב להבנת האופן שבו דחיסה משפיעה על תאי חיסון בתוך ה-TME12. כתוצאה מכך, המנגנונים שבאמצעותם מאמץ דחיסה משפיע על נדידת תאי Natural Killer (NK), עלה היווצרות הסינפסה החיסונית ועל פעילות הציטוטוקסיות נותרו לא מובנים דיו ולא כוונתו באופן מספיק. פער זה מהווה מגבלה קריטית בהבנתנו לגבי האופן שבו ניתן לנצל רמזים מכניים בתוך ה-TME כדי לשפר את התקיפה החיסונית של גידולים מוצקים.

מחסום מרכזי במתן מענה לשאלה זו הוא המחסור בפלטפורמות ניסיוניות המסוגלות להפעיל דחיסה מבוקרת וכמותית בתוך מיקרו-סביבות תלת-ממדיות רלוונטיות פיזיולוגית, תוך שהן מאפשרות בו-זמנית דימות בזמן אמת של אינטראקציות בין גידול למערכת החיסון. גישות ניסיוניות מוקדמות לבחינת מאמץ דחיסה כללו הטמעה של ספרואידים בג'לי אגרוז13. בעוד ששיטה זו לכדה ביעילות את ההגבלה הפיזית, היא ביטלה אינטראקציות טבעיות בין תאים למטריצה החוץ-תאית (ECM). Dolega et al. השתמשו בלחץ אוסמוטי כדי להשרות מאמץ דחיסה; עם זאת, הספרואידים היו תלויים בתווך תרבית ולכן נותרו חסרי אינטראקציות עם ה-ECM9. Pandey et al. השתמשו במבנה transwell ובמשקולות כדי לדחוס ספרואידים המוטמעים בקולגן, מה ששמר על אינטראקציות בין ה-ECM לתאים אך הגביל את הדימות ברזולוציה גבוהה הדרוש לכימות ניידות של תאי חיסון ופעילות ציטוטוקסית14. יחד, מגבלות אלו מדגישות את הצורך בפלטפורמות ניסיוניות המאפשרות דימות בזמן אמת של התגובות המורפולוגיות של תאים לדחיסה בתוך ה-TME.

כאן אנו מציגים פרוטוקול למכשיר דחיסה מיקרופלואידי15 המאפשר הפעלה מבוקרת של מאמץ דחיסה תוך שימור אינטראקציות רלוונטיות פיזיולוגית בין תאים ל-ECM ותמיכה בדימות תאי חיים ברזולוציה גבוהה של דינמיקה בין תאי חיסון לגידול. הפרוטוקול מורכב מהכנת רכיבי המכשיר (סעיף 1), הרכבת המכשיר (סעיף 2) ודימות של אינטראקציות בין גידול לתאי חיסון (סעיף 3). אנו מדגימים את זרימת העבודה באמצעות בדיקת הרג של תאי NK כנגד ספרואידים של גידול המסומנים בחלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP). מעבר ליישום זה, ניתן להתאים בקלות את הפלטפורמה לחקר ההשפעות של כוחות מכניים על מגוון רחב של סוגי תאים ואינטראקציות תאיות בסביבות מיקרו 3D.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. הכנת רכיבי המכשיר

  1. הפעלה של פני השטח של תא טעינת הדגימה
    1. הנח מסכה מעל תא טעינת הדגימות (שכבה 1, L1) כך שרק הבארות יהיו חשופות.
    2. חשוף את שכבה 1 הממוסכת לפלזמה של חמצן למשך 15 שניות תוך שימוש בהגדרת ההספק הגבוה (45 W).
    3. הניחו את שכבה 1 בצלחת פטרי, ולאחר מכן המשיכו בביצוע השלבים הבאים בתוך קבינה לבטיחות ביולוגית.
    4. טפל בכל באר באמצעות 10 µL של 1% פוליאתילן-אימין (PEI) למשך 10 דקות.
    5. הסיר את ה-PEI מהבארות באמצעות שאיבה בוואקום מארבעת הפינות של כל באר, כדי למנוע שריטות של משטח הזכוכית.
    6. שטפו את הבארים באמצעות 10 µL של תמיסת סליין עם בופר פוספט (PBS), ולאחר מכן הסר את תמיסת השטיפה באמצעות שאיבה בוואקום מהצד.
    7. טפל בבארות באמצעות 10 µL ב-0.1% גלוטרלדהיד למשך 30 דקות, ולאחר מכן יש להסיר את הגלוטרלדהיד באמצעות שאיבה בוואקום מהפינות.
    8. שטפו את הבארות עם PBS שלוש פעמים, והסירו את נוזל השטיפה מהפינות לאחר כל שטיפה.
    9. עטפו בנייר רגיל (foil) את פטרית הפטרי המכילה את שכבה 1 והשאירו אותה בקבינה לבטיחות ביולוגית למשך הלילה.
  2. עיקור של מסגרת המתכת
    1. טבול את ה-38 מ"מ × מסגרת מתכת של 88 מ"מ ואת שנים-עשר ברגי ראש-צלחת M2.5 באתנול 70% למשך לילה.
  3. הכנה (Priming) של יחידת בקרת הלחץ
    1. חשפו את יחידת בקרת הלחץ לפלזמת חמצן למשך 30 שניות באמצעות הגדרת ההספק הגבוה (45 W).
    2. טבלו את יחידת בקרת הלחץ, כאשר המאפיינים פונים כלפי מטה, במים דה-יוניים (DI) למשך לילה כדי למלא את התעלים ואת התאים של יחידת בקרת הלחץ.
    3. למחרת, הוצא את יחידת בקרת הלחץ מתוך מי ה-DI שבה הייתה טבולה.
    4. מלאו מאגר מיקרופלואידי ב-50 מ"ל של מים מזוקקים (DI water).
      הערה: מאגר המיקרופלואידיות מורכב ממשפער קוני בנפח 50 מ"ל המצויד במכסה מותאם אישית הכולל שני חיבורי צינוריות: קו צינוריות פניאומטי וקו צינוריות להעברת נוזלים.
    5. חבר מזרק מלא באוויר לקו צינור הפניאומטיקה.
    6. לחץ באיטיות על בוכנת המזרק כדי להפעיל לחץ במאגר ולדחוף מים מזוקקים (DI water) דרך צינורת הולכת הנוזלים, עד שהצינורית תהיה מלאה ומים יחלו לטפטף מהקצה.
    7. חברו את צינורות הובלת הנוזלים הממולאים מראש ומטפטפים דרך הסעף (manifold) מפוליקרבונט ואז לכניסה בקוטר 1.5 מ"מ הנמצאת בגב יחידת בקרת הלחץ.
    8. הניחו ליחידת בקרת הלחץ ומכלול הצנרת להתייבש באוויר למשך שעתיים. לאחר ייבוש מלא, יחידת בקרת הלחץ ומכלול הצנרת מוכנים לשלב הבא.

2. הרכבת המכשיר

  1. הכנת קולגן עם תאים מוטמעים
    1. הוצא וייבש את מסגרת המתכת ואת הברגים מהאתנול 70%.
    2. בתוך קבינת בטיחות ביולוגית, הנח שלושה מיקרו-מבחנות של 600 µL על קרח. סמן את המבחנות כדלקמן: "N" (ניטרול), "sp" (ספרואידים של MCF-7), ו-"sp+NK" (ספרואידים של MCF-7 עם תאי NK).
    3. הכן את תערובת הניטרול על ידי הוספת 10× מהנפח הנדרש של Medium 199 (M199) ונתרן הידרוקסיד (NaOH) למבחנה "N".
    4. העבר את הנפח המתאים של תערובת ה-M199:NaOH למבחנות "sp" ו-"sp+NK" כדי להגיע לריכוז סופי של 1×.
    5. אסוף את ספרואידי הגידול וסובב בצנטריפוגה במהירות של 141 × g למשך 3 דקות כדי לאפשר לספרואידים לשקוע בתחתית המבחנה.
      הערה: ספרואידי גידול בקוטר של כ-200 µm הופקו באמצעות פלטפורמת מיקרו-בארים של אגרוז שתוארה בעבר16. בקצרה, 3 × 106 תאי MCF-7 נזרעו במערך מיקרו-בארים של אגרוז בגודל 36 × 36, המורכב מבארים בקוטר 200 µm ובעומק 200 µm, ולאחר מכן תורבדו למשך 7 ימים כדי להפיק את ספרואידי הגידול ששימשו בניסויים.
    6. הסר בזהירות את הנוזל העליון ותלה את הספרואידים ב-200 µL של מצע מלא 50:50 MCF-7/NK (טבלה 1 ו-טבלה 2).
    7. אסוף תאי NK למבחנה קונית של 50 mL, סובב בצנטריפוגה במהירות של 141 × g למשך 4 דקות, וספור את התאים.
      הערה: חיוניות תאי ה-NK צריכה להיות >85% ביום הניסוי.
    8. תלה את המשקע שהתקבל ב-200 µL של מצע NK מלא.
    9. הוסף את הנפח המתאים של תמיסת מלאי הקולגן לכל מבחנה של מיקרו-צנטריפוגה.
    10. הוסף את הנפח המתאים של תלי התאים לכל מבחנה כדי להגיע לנפח סופי של 200 µL המכיל 1.5 mg/mL קולגן.
      הערה: תלי ה-"sp" מכיל ספרואידים של גידול בלבד, בעוד שתלי ה-"sp+NK" מכיל ספרואידים של גידול ו-1.5 × 106 תאי NK.
    11. ערבב בעדינות באמצעות פיפטה כדי להבטיח פיזור אחיד של תאים וקולגן תוך מזעור היווצרות בועות.
  2. הרכבת המכשיר וטעינת תאים
    1. הנח את שכבה 1 בתוך מסגרת המתכת המיובשת.
    2. טען 9 µL מתערובת הקולגן לכל באר.
    3. יישר את יחידת בקרת הלחץ ואת מכלול הצנרת עם תאי התאים בשכבה 1 באמצעות מיקרוסקופ.
    4. הכנס את הברגים המיובשים דרך הצנרת ואל תוך מסגרת המתכת, תוך קיבוע יחידת בקרת הלחץ ושכבה 1 בין הצנרת למסגרת המתכת.
    5. הנח את המכשיר המורכב באינקובטור בטמפרטורה של 37 °C ו-5% CO₂ למשך 45 דקות כדי לאפשר פולימריזציה של הקולגן.
    6. הוסף מצע תרבית תאים מלא 50:50 MCF-7/NK דרך ארבעת פתחי המצע.

3. דימוי של אינטראקציות בין גידול למערכת החיסון

  1. הנח את המכשיר המורכב בתוך אינקובטור השולחן המותקן על מיקרוסקופ אפי-פלואורסצנציה הפוך לצורך דימות תאים חיים.
    הערה: מדגרה הבמה שמרה על טמפרטורה של 37 °C ולחות של כ-50% לאורך משך הדמיה.
  2. הנח קופסת מעטפת משנית מעל המכשיר המורכב כדי לשמור על הסביבה הפנימית ב- 37 °C, 100% לחות, ו-5% CO2₂ לאורך תקופת הדימות.
  3. חבר את המכשיר לבקר הלחץ באמצעות צינור פנאומטי.
  4. יש לרכוש תמונות בשדה בהיר (brightfield) וב-GFP של הספרואידים הגידוליים לפני הפעלת הדחיסה, על מנת לאפשר הערכה של דפורמציית הספרואידים לאחר הדחיסה.
  5. יש להחיל לחץ קבוע של 120 mbar לאורך כל תקופת ההדמיה.
    הערה: תוכנת בקר הלחץ מאפשרת למשתמש להגדיר את פרופיל הלחץ ואת עוצמתו המופעלים במהלך הניסוי. איור משלים 1 מכיל סכימה של מערכת בקרת הלחץ.
  6. התחילו את הדמיית ה-time-lapse על ידי רכישת תמונות בשדה בהיר (brightfield) ותמונות GFP מדי 10 דקות למשך 18 שעות.
    הערה: התמונות נרכשו במישור Z המרכזי של כל ספרואיד גידולי באמצעות 20× עדשה אובייקטיבית במיקרוסקופ פלואורסצנציית-אפי (epi-fluorescence) הפוך. תמונות בשדה בהיר (Brightfield) ובפלואורסצנציית GFP צולמו בזמני חשיפה של 200.1 מילי-שניות ו-298.9 מילי-שניות, בהתאמה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

עבור הניסויים הבאים, נעשה שימוש במכשיר דחיסה מיקרופלואידי15 כדי לדמות אינטראקציות בין גידול למערכת החיסון בתוך מיקרו-סביבה תלת-ממדית רלוונטית פיזיולוגית, ובמקביל, להפעיל דחיסות סטטיות ודינמיות על ספרואידים של גידולים (איור 1).  רכיבי המכשיר (איור 1A1) וסדר ההרכבה שלהם (איור 1A2) מוצגים ב-איור 1A. מסגרת המתכת משמשת כבסיס של המכשיר, כאשר שכבת תא תא...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

שיטה זו מתארת את השימוש במכשיר דחיסה מיקרופלואידי לבחינת ההשפעות של מאמץ דחיסה על אינטראקציות בין גידול למערכת החיסון. מערכת זו מסוגלת להפעיל דחיסה מכנית מבוקרת על ספרואידים של גידול המוטמעים בתוך מטריצת קולגן תלת-ממדית. תשתית הזכוכית המהווה את בסיס תא התאים (L1) מאפשרת דימות תאים חיים ברזולוציה גבוהה, מה שהופך את הפלטפורמה למתאימה מאוד למחקרים השואפים לכמת ניידות של תאי חיסון, חדירה ופעילות ציטוטוקסית. באופן חשוב, המערכת משמרת אינטראקציות בין תא לתא ובין תא למטריצה תוך שהיא מאפשרת בקרה מדויקת על הסביבה המכנית. לעומת זאת...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי מענק מהמכון הלאומי לסרטן (Grant R01CA221346), מלגת Lance R. Collins מהמכללה להנדסה באוניברסיטת קורנל עבור FM, וקרן ה-Provost של קורנל לחוסן מחקרי עבור FM. עבודה זו בוצעה בחלקה במתקן ה-NanoScale של קורנל, חבר בתשתית הריכוז הלאומית לננוטכנולוגיה (NNCI), הנתמכת על ידי הקרן הלאומית למדעים (Grant NNCI-2025233).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
1 N NaOHSigma-Aldrich797247 µL
10× מדיום M199Sigma-AldrichM0650200 µL
2-מרקפטואתנולThermoFisher313500100
מדחס אווירElveflowמדחס Jun-Air מדגם 3
במה של מיקרוסקופ X-Y אוטומטיתמכשור מדעי יישומיMS-2000
מצלמת CCDHamamatsu PhotonicsORCA-R2
סרום עגל עוברי (FBS)GeminiBioS11150
צינור להגשת נוזליםEleveflowגליל רזרבי של צינור PTFE1/16 אינץ' בקוטר חיצוני
מקור אור פלואורסצנטיExcelitas Technologies יחידת PC מסדרת X-Cite 120
חומצה פוליתסיגמאF7876
גלוטראלדהידמדעי ה-EM 160190.10%
מנקה פלזמה של HarrickHarrick PlasmaPDC-001-HPהגדרת הספק גבוה (45W)
סרום סוס (HS)ThermoFisher16050-122
מיקרוסקופ אפי-פלואורסצנטי הפוךOlympusIX81עדשת אובייקטיב 20x (NA = 0.25), המופעלת באמצעות תוכנת Olympus CellSens
מסיכהArtusגיליון דק של אלומיניום במידה 10העובי הוא 0.0125" (0.75 ממ')
קו תאים יציב של MCF-7/GFP (Puromycin)GenTarget IncSC050-G
מסגרת מתכתהכנה בהתאמה אישית הכנה בהתאמה אישית 
מאגר מיקרופלואידיEleveflowמאגר מיקרופלואידי בנפח 50 מ"ל 
מיקרוסקופ OlympusCKX41עדשת אובייקטיב 4x              (NA = 0.1)
מיו-אינוזיטולסיגמאI7508
NK-92 MIATCCCRL-2407
פניצילין/סטרפטומייציןGibco 15140122
סריש פוספטי מאוזן (PBS) ThermoFisher 10010072
צינור פניאומטיEleveflowכניסת צינור פוליאתר PUR שקוף4" קוטר חיצוני ב-מ"מ
פוליאתילן-אימין (PEI)Sigma-AldrichP31431%
בקר לחץElveflowOB1 NK4מופעל באמצעות תוכנת Elveflow Smart Interface
קולגן מסוג I מזנב חולדה Corning35424931.3 µL מתוך תמיסת מקור של קולגן בריכוז 9.6 mg/mL
ברגיםפיליפסבורג ראש שטוח M2.512 ברגים
דגרה לשולחן המיקרוסקופפלסטיק מדויקמיוצר לפי הזמנה
מזרקBecton Dickinson303134מוצמד למסגרת נעילה אינטגרלית של Luer זכר ל-3/32" OD Barb מבית Eleveflow
αמדיום MEM-ThermoFisher12561056

מקורות

  1. Cao J-Z, Zhao W, Xia X-J. Cell-based cancer immunotherapy: milestones, mechanistic insights, and emerging therapeutic directions. Acta Pharmacol Sin. 2026:https://doi.org/10.1038/s41401-026-01811-y.
  2. Yang R, Yang Y, Liu R, et al. Advances in CAR-NK cell therapy for hematological malignancies. Front Immunol. 2024;15:1414264.
  3. Neelapu SS, et al. Axicabtagene ciloleucel CAR T-cell therapy in refractory large B-cell lymphoma. N Engl J Med. 2017;377(26):2531-44.
  4. Sheykhhasan M, Manoochehri H, Dama P. Use of CAR T-cell for acute lymphoblastic leukemia (ALL) treatment: a review study. Cancer Gene Ther. 2022;29(8-9):1080-96.
  5. Tan S, Li D, Zhu X. Cancer immunotherapy: Pros, cons and beyond. Biomed Pharmacother. 2020;124:109821.
  6. Chen T, Wang M, Chen Y, Liu Y. Current challenges and therapeutic advances of CAR-T cell therapy for solid tumors. Cancer Cell Int. 2024;24(1):133.
  7. Peng L, et al. CAR-T and CAR-NK as cellular cancer immunotherapy for solid tumors. Cell Mol Immunol. 2024;21(10):1089-108.
  8. Basu R, et al. Cytotoxic T cells use mechanical force to potentiate target cell killing. Cell. 2016;165(1):100-10.
  9. Dolega ME, et al. Cell-like pressure sensors reveal increase of mechanical stress towards the core of multicellular spheroids under compression. Nat Commun. 2017;8(1):14056.
  10. Linke JA, Munn LL, Jain RK. Compressive stresses in cancer: characterization and implications for tumour progression and treatment. Nat Rev Cancer. 2024;24(11):768-91.
  11. Luo M, Cai G, Ho KKY, et al. Compression enhances invasive phenotype and matrix degradation of breast cancer cells via Piezo1 activation. BMC Mol Cell Biol. 2022;23(1):1.
  12. Ren T, Sun L, Zheng Y, et al. Mechanical forces and immune cells in the tumor microenvironment: from regulation mechanisms to therapeutic strategies. Int J Surg. 2025;111(8):5420-34.
  13. Helmlinger G, Netti PA, Lichtenbeld HC, Melder RJ, Jain RK. Solid stress inhibits the growth of multicellular tumor spheroids. Nat Biotechnol. 1997;15(8):778-83.
  14. Pandey M, et al. Mechanical compression regulates tumor spheroid invasion into a 3D collagen matrix. Phys Biol. 2024;21(3):036003.
  15. Suh YJ, et al. A microfluidic rheometer for tumor mechanics and invasion studies. Lab Chip. 2025;25(22):6018-32.
  16. Song W, et al. Dynamic self-organization of microwell-aggregated cellular mixtures. Soft Matter. 2016;12(26):5739-46.
  17. Pandey M, et al. Viscoelastic properties of tumor spheroids revealed by a microfluidic compression device and a modified power law model. Soft Matter. 2026;22(7):1618-29.
  18. Steff A-M, Fortin M, Arguin C, Hugo P. Detection of a decrease in green fluorescent protein fluorescence for the monitoring of cell death: An assay amenable to high-throughput screening technologies. Cytometry. 2001;45(4):237-43.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

אינטראקציות חיסוניות עם גידוליםסינפסה חיסוניתספרואידים של גידוליםתאי NK (תאיים קטלנים טבעיים)דימיון בזמן אמתמיקרוסקופיה אופטיתמטריצת קולגן

מאמר זה פורסם

הסרטון יגיע בקרוב

צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.