Name: אקו Transthoracic ב עכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-05-28T17:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 9 s
Description: למד אקוקרדיוגרפיה טרנסתורקלית בעכברים להערכת תפקוד לב סיסטולי ודיאסטולי. שיטה זו משלבת אולטרסאונד ודופלר לניטור לא פולשני של ממדים ותפקוד לבי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ברצוננו להודות לד&quot;ר קורי ריינולדס ואת Phenotyping עכבר BCM Core לעזרה המומחה שלהם עם הפרויקט הזה וגישה סוג של מתקנים. XHTW הוא WM Keck קרן מלומד נכבד צעירים למחקר רפואי, והוא נתמך גם על ידי NIH / NHLBI מענקים R01-R01 HL089598 ו-HL091947, ניוון שרירים ו האגודה להעניק # 69238. עבודה זו נתמכת גם על ידי קרן Leducq הברית למען CaMKII איתות בלב בחלקו.

1. עכברים הכנה ללימודי הדמיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני בדיקות הדמיה, להרדים את העכבר (2% isoflurane מעורבב עם 0.5 L / min 100% O 2) בתא אינדוקציה. הקפד לסנן גז פסולת לשלומם של המפעיל. הסר את החיה מבית הבליעה אינדוקציה ושימוש קוצץ שיער לגלח את הפרווה מן הצוואר עד גובה החזה באמצע. ואז להסיר את שיער הגוף הנותר עם קרם להסרת שיער. הכנה זו עשויה להתבצע יום לפני בדיקות הדמיה כדי למזער את פוטנציאל התגובות ללחץ לא רצוי בעכברים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל duralube ג'ל על שתי העיניים כדי למנוע התייבשות של בלובן העין (למנוע פנייה הקרנית עם המוליך ג'ל). מניחים את העכבר הרדים בעמדה פרקדן על גבי כרית חימום עם מוטבע א.ק.ג. מוביל על מנת לשמור על טמפרטורת הגוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את חוטם בתוך חרוט האף מחובר למערכת הרדמה כדי לשמור על רמה היציב הרגעה לאורך ההליך (1.0% עד 1.5% isoflurane מעורבב עם 0.5 L / min 100% O 2). בצע קמצוץ הבוהן או זנב כדי לאשר תרופות הרגעה. אם יש צורך, לרמה של ההרדמה ניתן להתאים לקבל היעד קצב לב 450 ± 50 פעימות לדקה (BPM). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס בעדינות בדיקה רקטלית (לאחר סיכה) כדי לפקח באופן רציף ולהתאים את טמפרטורת הגוף באמצעות כרית חימום. חשוב לשמור על טמפרטורת הגוף בטווח צר (37.0 ° C ± 0.5 ° C), כמו גם שינויים מתונים בטמפרטורה וקצב הלב להשפיע על תפקוד הלב בעכברים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל ג'ל האלקטרודה על ארבע כפות רגליים קלטת להם אלקטרודות א.ק.ג.. </li></ol> 2. הערכת תפקוד סיסטולי של הלב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להתחיל בהליך זה, למרוח שכבה של ג'ל אולטרסאונד שחומם מראש ל בחזה, בעיקר באזור שמעל הלב. ג'ל יש לחמם לטמפרטורת הגוף המשוער. נפח של ג'ל קר יכול להוסיף במהירות לשיעור של אובדן חום הגוף. הימנע בועות אוויר ג'ל, אשר יכול להפריע הדמיה קולי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשתק את העכבר בעמדה קלה כלפי מעלה (את הראש) תחת בזווית קלה. שימוש micromanipulator, לשתק את החללית אולטרסאונד עם זווית של 90 מעלות בין החללית ואת הלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להתחיל לעשות קצר ציר מדידות echocardiographic, מנמיכים את החללית על החזה parasternally. הימנע הצבת בדיקה ישירות מעל עצם החזה או על העור, כמו זה יהיה לעוות את האות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ראשית, נבצע דו ממדי (2D) הדמיה ("B-mode") כדי לקבל תצוגה לאורך ציר קצר parasternal. התאם את אזור התצוגה של החללית כדי לקבל תמונה מלאה תלוי בגודל הלב של החיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמונה נכונה בכיוון זה יכלול את החדר השמאלי וחלק קטן של קיר החדר הימני. החץ (המוצג בסרטון) מציין את שרירי papillary anterolateral ו posteromedial, הקירות האחורי ואת הקדמי של LV, הקיר במחיצה תוך חדרי, וחלק קטן של קיר החדר הימני. במהלך המדידות הללו, להקדיש תשומת לב מיוחדת פוטנציאל ליקויים קיר תנועה (למשל, hypokinesia, akinasia, asynchrony) או מפרצת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר מכן, נשתמש M-mode אקו, אשר מספק 1 מימדי (1D) להציג, להשיג מידות נאה של ממדים לב contractility. חנות רכשה תמונות להערכת מאוחר יותר של פרמטרים של תפקוד סיסטולי החדר השמאלי. </li></ol> 3. הערכת תפקוד הדיאסטולי של הלב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעודו מציג את ציר קצר parasternal, אנו יכולים לבצע רקמה דופלר הדמיה (TDI) כדי למדוד את מהירות התנועה של שריר הלב. האזור של עניין מסומן לכלול הקיר האחורי של החדר השמאלי להערכת ציר רדיאלי. צורת הגל המתקבל יהיו ארבעה פסגות להעריך את תפקוד דיאסטולי: IVRT, ה ', א', ו IVCT. 'S מייצג את מהירות הסיסטולי. (איור 3B) פרמטרים אלה שיפורט בהמשך סעיף נציג תוצאות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דופק גל דופלר (מע"צ) ניתן להשתמש כדי למדוד את מהירות זרימת הדם בתוך שטח קטן בעומק מסוים ברקמת שריר הלב. התמונה דפוס טרנס מיטרלי זרימה, להטות את חיה לאחור בעמדה Trendelenburg. הטה את החללית כלפי מעלה, כך החללית היא אורתוגונליים עם הקודקוד של הלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכשיו להעלות את רמת isoflurane להוריד את קצב הלב כדי 300-350 פעימות לדקה, אשר יאט את התנועה של המסתם המיטרלי. עבור מחקרים השוואה, חשוב לשמור על קצב הלב דומה בין בעלי חיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דמיינו את התנועות של שסתום מיטרלי כנקודת התייחסות כדי למדוד את זרימת פני המסתם. מניחים את נפח דגימה בקצה של השסתום המיטרלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדדו את דפוסי זרימת פני שסתום מיטרלי באמצעות מע"צ. שני גלים נראים אופיינית, אחד המייצג מילוי פסיבית של החדר (בראשית [E] גל), ובקנה אחד עם מילוי פעיל עם התכווצות עליות (פרוזדורים גל [א]) אחד. בלב בריא, מהירות E-גל הוא מעט גדול יותר מזה של גל (איור 3 ג). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שכל המדידות הושלמו, להסיר את ג'ל האלקטרודה (על ידי מנגב בעדינות עם פדי גזה רגיל) מעצורים מן החיה. אפשר חיה חסרת מעצורים להתאושש על גבי משטח מחומם א.ק.ג. בתנוחה זקופה לכבות את ההרדמה. כאשר סמן העכבר מתעורר, להחזיר אותו לכלוב שלו. </li></ol> 4. נציג אקו תוצאות Transthoracic מחקרים echocardiographic פולשנית ניתן להשתמש כדי להעריך מורפולוגיה ותפקוד החדר השמאלי Murine במודלים של מחלת לב. 4,5 טכניקה זו נמצאת בשימוש נרחב ומספק אלטרנטיבה נהלים מסוף להערכת תפקוד LV, כמו לולאה הלחץ בנפח intracardiac measurements.8 או vivo לשעבר עובד הלב מודל. 9 הערכת ממדים LV קאמרית על ידי אקו M-mode transthoracic מאפשר זיהוי של הגדלה LV תא נורמלי או עובי דופן מוגבר במודלים שונים של מחלת לב. 5 לפיכך, אקו transthoracic, בשילוב עם גל הדופק דופלר , מהווה השדרה מקיף להערכה בלתי פולשנית של תפקוד הלב סיסטולי ודיאסטולי בעכברים. <img src="/files/ftp_upload/1738/1738fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> באיור 1. סקירה כללית של החלטה 770 Vevo גבוה במערכת Micro-Imaging עבור Vivo ו אקו דופלר הדמיה. (א) אנו משתמשים במערכת משולבת VisualSonics מעקה עם יחידת ניטור פיזיולוגי, א.ק. ג המערכת, RMV ראש 30mHz סריקה. (ב) העכבר ממוקם כראוי ועל ריסון על הלוח חימום משולב עם אלקטרודות א.ק.ג. (צבע זהב). ארבעת הגפיים מוקלטות לתוך אלקטרודות א.ק.ג.. (CD) צילומים מראה זוויות הולם הדופק גל דופלר להשתמש כדי להשיג מדידות תפקוד דיאסטולי, כמתואר בסעיף 4 של הפרוטוקול. אוריינטציה Probe עבור מדידות תפקוד סיסטולי הם מראים בפרוטוקול וידאו. <img src="/files/ftp_upload/1738/1738fig2.jpg" alt="איור 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 2"> איור 2. נציג 2D תמונות אקו (B-mode). (א) סעיף-sternal קצר ציר להציג מראה את החדר השמאלי הקדמי (AW) ואת האחוריים (PW) קירות, קיר במחיצה תוך חדרי (SW) ו לרוחב הקיר (LW). קוטר לומן של החדר השמאלי ניתן למדוד כמו קוטר החדר השמאלי הפנימי (LVID). הכוכבית מציינת את שריר פפילרי posteromedial. (ב) להציג Apical ארבע קאמרית עם שטח צפייה מעל שסתום מיטרלי להגדרה של E / מהירויות שיא. עלון MVAL, שסתום צניפי קדמית; עלון MVPL, שסתום צניפי האחורי, RV, החדר הימני, LV, החדר השמאלי. <img src="/files/ftp_upload/1738/1738fig3.jpg" alt="איור 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 3"> איור 3. רכישה כימות נתונים אקו דופלר ו. נתון זה מכיל תמונות של נציג נתונים רכשה המתאים את התמונות אקו 2D המוצג באיור 2. (A) M-mode מעקב עם קווים המציין סוף סיסטולי (ESD) הקצה הדיאסטולי בקטרים ​​(EDD). LVAWD / S, החדר השמאלי הקדמי עובי הקיר (דיאסטולה / התכווצות); LVPWD / S, הקיר השמאלי האחורי חדרית עובי (דיאסטולה / התכווצות). (ב) העתקים נציג עבור רקמות דופלר הדמיה של הקיר האחורי LV. IVRT, הרפיה זמן isovolumic; זמן IVCT, התכווצות isovolumic. ה 'גל המתאים תנועה של annulus מיטרלי במהלך מילוי דיאסטולי מוקדם של LV, ואת "גל מקורו התכווצות פרוזדורים במהלך מילוי מאוחר של LV. 'S מהירות מייצגים הסיסטולי. (ג) דופק גל הקלטה דופלר של טיפים עלון מיטרלי המסתם מיטרלי מספק מהירות זרימת דפוסי שממנו מהירות הדיאסטולי מוקדם (E), מהירות דיאסטולי מאוחר עם התכווצות הדיאסטולי (א), ואת E / יחס ניתן לגזור. IVRT הוא גם משתנה שימושי לאפיין את תפקוד דיאסטולי ולחצים מילוי. ET מצביע זמן פליטה.

<ol><li>Zhang, T. M. aier, S, L., Dalton, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+deltaC+isoform+of+CaMKII+is+activated+in+cardiac+hypertrophy+and+induces+dilated+cardiomyopathy+and+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">The deltaC isoform of CaMKII is activated in cardiac hypertrophy and induces dilated cardiomyopathy and heart failure.</a> Circ Res. 92 (8), 912-912 (2003).</li>
<li>Srivastava, D., Thomas, T., Lin, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+cardiac+mesodermal+and+neural+crest+development+by+the+bHLH+transcription+factor%2C+dHAND%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Regulation of cardiac mesodermal and neural crest development by the bHLH transcription factor, dHAND.</a> Nat Genet. 16 (2), 154-154 (1997).</li>
<li>Sood, S., Chelu, M. G., van Oort, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracellular+calcium+leak+due+to+FKBP12.6+deficiency+in+mice+facilitates+the+inducibility+of+atrial+fibrillation%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Rhythm%22%5BJournal%5D)">Intracellular calcium leak due to FKBP12.6 deficiency in mice facilitates the inducibility of atrial fibrillation.</a> Heart Rhythm. 5 (7), 1047-1047 (2008).</li>
<li>Gardin, J. M., Siri, F. M., Kitsis, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+assessment+of+left+ventricular+mass+and+systolic+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic assessment of left ventricular mass and systolic function in mice.</a> Circ Res. 76 (5), 907-907 (1995).</li>
<li>Tanaka, N., Dalton, N., Mao, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transthoracic+echocardiography+in+models+of+cardiac+disease+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Transthoracic echocardiography in models of cardiac disease in the mouse.</a> Circulation. 94 (5), 1109-1109 (1996).</li>
<li>Patten, R. D., Aronovitz, M. J., Bridgman, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+pulse+wave+and+color+flow+Doppler+echocardiography+in+mouse+models+of+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Echocardiogr%22%5BJournal%5D)">Use of pulse wave and color flow Doppler echocardiography in mouse models of human disease.</a> J Am Soc Echocardiogr. 15 (7), 708-708 (2002).</li>
<li>Garcia-Fernandez, M. A., Azevedo, J., Moreno, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+Left+Ventricular+Diastolic+Dysfunction+Evaluated+by+Pulsed-Tissue+Doppler+Echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Echocardiography%22%5BJournal%5D)">Regional Left Ventricular Diastolic Dysfunction Evaluated by Pulsed-Tissue Doppler Echocardiography.</a> Echocardiography. 16 (5), 491-491 (1999).</li>
<li>Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+cardiac+function+using+pressure-volume+conductance+catheter+technique+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats.</a> Nat Protoc. 3 (9), 1422-1422 (2008).</li>
<li>Larsen, T. S., Belke, D. D., Sas, R. Pflugers Arch. 437 (6), 979-979 (1999).</li>
<li>Roth, D. M., Swaney, J. S., Dalton, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+anesthesia+on+cardiac+function+during+echocardiography+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Impact of anesthesia on cardiac function during echocardiography in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 282 (6), H2134-H2134 (2002).</li>
</ol>

חשוב לתקנן את רמת ההרדמה, 10 טמפרטורת הגוף, קצב הלב בתוך קבוצה של עכברים כדי להקל על ההשוואה בין הקבוצות או גנוטיפים שונים של עכברים בעת שימוש M-mode אקו. להערכת מע&quot;צ תפקוד דיאסטולי, קצב הלב צריך להיות הוריד על מנת להעריך את המאפיינים הדיאסטולי של הלב Murine. פונקציות חיוניות של בעל החיים יש להקפיד באופן הדוק על מנת למנוע כישלון מוות hemodynamic ו. מצד שני, לתפקוד סיסטולי מדידות באמצעות M-הדגם, אקו קצב הלב מתחת 400 פעימות בדקה יכולה לגרום סוף דיאסטולי בקטרים ​​להגדיל עקב מילוי מוגברת של LV.

* התוכנה הנדרשת היא תוכנה Vevo לרבות יישום B-Mode, הדופק יישום גל דופלר, חבילת כלי ניתוח לב וכלי דם.

אקו transthoracic ב עכברים

Transthoracic Echocardiography in Mice

בשנים האחרונות, מודלים Murine הפכו את השדרה העיקרית לחקר המנגנונים המולקולריים של חוסר תפקוד הלב שנבעו משינויים ביטוי גנים. טראנסגנטי שיטות מיקוד הגן יכול לשמש כדי ליצור עכברים עם גודל הלב ואת תפקוד שונה,<sup&gt; 1-3</sup&gt; וכתוצאה מכך,<em&gt; In vivo</emטכניקות&gt; יש צורך להעריך את הפנוטיפ הלב שלהם. אקו Transthoracic, דופק גל דופלר (מע&quot;צ), ורקמות דופלר הדמיה (TDI) יכול לשמש כדי לספק מדידות ממדי של הלב העכבר כדי לכמת את מידת הסיסטולי והדיאסטולי לב וביצועים. הדמיה דו מימדי משמש כדי לזהות אנטומיה נורמלית או תנועות של החדר השמאלי, ואילו ה-M-mode הד משמש כימות של ממדים לב contractility.<sup&gt; 4,5</sup&gt; בנוסף, PWD משמש לכמת מהירות מקומי של זרימה טורבולנטית,<sup&gt; 6</sup&gt; ואילו TDI משמש כדי למדוד את מהירות התנועה של שריר הלב.<sup&gt; 7</sup&gt; לכן, אקו transthoracic מציעה שיטה מקיפה להערכת פולשנית של תפקוד הלב בעכברים.

אקו Transthoracic מציעה שיטה לא פולשנית להערכת תפקוד הלב בעכברים. שילוב של אולטראסאונד דופלר שיטות הדמיה ניתן להשתמש כדי להשיג מדידות ממדי של הלב ואת זרימת הדם intracardiac, אשר יחדיו מספקים הערכה של הסיסטולי והדיאסטולי לב וביצועים.

אקו Transthoracic ב עכברים

בשנים האחרונות הפכו מודלים של עכברים לנתיב העיקרי למחקר של המנגנונים המולקולריים של תפקוד לבבי לקוי הנובע משינויים בגן...

לפני ביצוע מדידות אקו-קרדיוגרפיה, העכבר מונח על לוח EKG מחומם, כאשר כפות רגליו מקובעות בעזרת סרט הדבקה לאלקטרודות ECG המשובצות בבמה. רמת הרדמה וטמפרטורת גוף מתאימות נשמרות לאורך כל הניסוי. המדידה מבוצעת באמצעות מצב הציר הקצר, הידוע גם כ-B mode.תמונה תקינה מתקבלת כאשר השרירים הפפילריים הלטרליים והפוסט-מדיאליים, כמו גם כל דפנות השריר הלבבי, נראים בבירור. ניתן לשנות את מצב התצוגה למצב M כדי להעריך ולכמת מדידות של תפקוד סיסטולי של הלב. לאחר התמקדות בדופן האחורית של החדרי השמאלי, ניתן להשתמש במצב הדמיית דופלר של הרקמה (tissue doppler) כדי לכמת מדידות של תפקוד דיאסטולי.במצב תצוגת ארבעה חללים, ניתן לקבל תמונה נכונה של המסתם המיטרלי ושל דופן המחיצה. לבסוף, על ידי מעבר למצב דופלר של גל דופס (pulse wave Doppler), ניתן להמחיש את תבנית זרימת הדם במסתם המיטרלי. שלום, שמי ג'ונתן רפרס מהמעבדה של ד"ר זנדר וורס במחלקה לפיזיולוגיה מולקולרית וביופיזיקה בבית החולים של קולג' ביילור לרפואה.היום נראה לכם הליך לבדיקת אקו-קרדיוגרפיה טרנס-תורקית בעכברים. אנו משתמשים בטכניקה זו במעבדה שלנו כדי לחקור את תפקודי הלב וממדיו לאורך זמן. בואו נתחיל.יום אחד לפני בדיקות הדימות, הרדימו את העכבר והשתמשו במכונת תספורת כדי לגלח את הפרווה מקו הצוואר ועד למחצית החזה. לאחר מכן, הסירו את שאר שיער הגוף באמצעות קרם להסרת שיער ומרחו ג'ל dura loop לשתי העיניים כדי למנוע התייבשות של הלובן (sclera). הניחו את העכבר המורדם בתנוחת גב (supine) על גבי משטח חימום הכולל אלקטרודות ECG מובנות.על מנת לשמור על טמפרטורת הגוף, יש להניח את האף בתוך קונוס אף המחובר למערכת ההרדמה כדי לשמור על רמת הרגעה יציבה לאורך כל ההליך. במידת הצורך, ניתן להתאים את רמת ההרדמה כדי להגיע לקצב לב יעד של 450 פלוס או מינוס 50 פעימות לדקה (BPM). יש להחדיר בעדינות גשש רקטלי כדי לנטר ולהתאים באופן רציף את טמפרטורת הגוף באמצעות משטח חימום.חשוב לשמור על טמפרטורת הגוף בטווח צר, שכן אפילו שינויים מתונים בטמפרטורה ובקצב הלב משפיעים על התפקוד הלבבי. בעכברים, יש למרוח ג'ל מוליך על ארבעת הכפות והדבקן אותן לאלקטרודות ה-ECG.כדי להתחיל את ההליך, מרחו שכבה של ג'ל אולטרה-סאונד על החזה, בעיקר באזור שמעל הלב. הימנעו מבועות אוויר בג'ל, שכן הן עלולות להפריע לדימות האולטרה-סאונד. קבעו את העכבר במצב עם נטייה קלה כלפי מעלה, כאשר הראש מורם בזווית קלה, באמצעות מיקרו-מניפולטור.קבעו את מתמר האולטרסאונד בזווית של 90 מעלות בין המתמר ללב. כדי להתחיל בביצוע מדידות אקו-לב בחתך רוחבי (short axis), הניחו את המתמר בחוזקה על בית החזה. הימנעו מהנחת המתמר ישירות מעל עצם הסטרנום, שכן הדבר יעוות את האות.ראשית, נבצע דימות דו-ממדי או B mode כדי לקבל תצוגה לאורך הציר הקצר הפריסטנלי (per sternal short axis), ונכוון את שטח התצוגה של המתמר כדי לקבל תמונה מלאה. בהתאם לגודל לב החיה, תמונה תקינה באוריינטציה זו תכלול את החדר השמאלי וחלק קטן מדופן החדר הימני. החץ מצביע על השרירים הפפילריים האנטרו-לטרליים והפוסטרו-מדיאליים, הדפנות האחורית והקדמית של החדר השמאלי, דופן המחיצה הבין-חדרית וחלק קטן מדופן החדר הימני.בשלב הבא, נשתמש במצב אקו-קרדיוגרפיה, המספק מבט חד-ממדי כדי לקבל מדידות מדויקות של ממדי הלב והתכווצותו, ונשמור את התמונות שנרכשו להערכה מאוחרת של פרמטרים של תפקוד סיסטולי של החדר השמאלי. תוך כדי צפייה בציר הקצר פאראסטרנלי, נוכל לבצע הדמיית דופלר של רקמות (TDI) למדידת מהירות התנועה של השריר בליב. אזור העניין מסומן כך שיכלול את הדופן האחורית של החדר השמאלי לצורך הערכת הציר הרדיאלי.לצורת הגל שתתקבל יהיו ארבעה שיאים להערכת התפקוד הדיאסטולי: IVRT, ePrime, AP prime, ו-I-V-C-T-S prime המייצג את המהירות הסיסטולית. פרמטרים אלו יתוארו בהמשך בסעיף התוצאים המייצגים. ניתן להשתמש בדופלר גל דופק (Pulse wave doppler או PWD) למדידת מהירות זרימת הדם בתוך שטח קטן בעומק ספציפי ברקחת השריר הלבבי.כדי לדמות את תבנית הזרימה דרך המסתם המיטרלי, הטה את בעל החיים לאחור בעמדת טרנדלנבורג (Trendelenburg), והטה את המתמר כלפי מעלה כך שיהיה מאונך לשיא הלב (apex). כעת הגבר את רמת ה-ISO fluorine כדי להוריד את קצב הלב ל-300 עד 350 BPM, דבר שיאט את תנועת המסתם המיטרלי. לצורך מחקרי השוואה, חשוב לשמור על קצבי לב דומים בין בעלי החיים.הדמיאו את תנועות המסתם המיטרלי כנקודת ייחוס למדידת הזרימה דרך המסתם. מדדו את דפוסי הזרימה דרך המסתם המיטרלי. בשימוש ב-PWD נצפים באופן אופייני שני גלים, אחד המייצג מילוי פסיבי של החדר בתחילת ה-EWA, ואחד התואם למילוי פעיל עם סיסטולה של העליה.בגל עליתי (a wave) עליותי בלב בריא, מהירות ה-EWA גדולה מעט מזו של גל A. לאחר השלמת כל המדידות, יש לאפשר לבעל החיים להתאושש על גבי משטח ה-ECG המחומם ולכבות את ההרדמה. כאשר העכבר מתעורר, החזירו אותו לכלובו.אנו מציגים כאן תמונת אקו-קרדיוגרפיה דו-ממדית או B mode שהתקבלה לאורך הציר הקצר הפאראסטרנלי, המראה את הדפנות הקדמית והאחורית של החדר השמאלי, את דופן המחיצה התוך-חדרית ואת הדופן הלטרלית. ניתן למדוד את קוטרו של חלל החדר השמאלי כקוטר הפנימי של החדר השמאלי. הכוכבית מציינת את השריר הפפילרי הפוסטו-מדיאלי.תמונת האקו-קרדיוגרפיה הדו-ממדית הבאה, או B mode, מציגה מבט של ארבעה חללים מהספיץ (apical four chamber view) עם אזור צפייה מעל המסתם המיטרלי לקביעת E ביחס למהירויות שיא. MVAL מציין את העלה הקדמי של המסתם המיטרלי. MVPL מציין את המסתם המיטרלי.העלפית האחורית RV מציינת את החדרי הימני ו-LV מציינת את החדרי השמאלי. ברישום מייצג זה במצב M mode, החצים הגדולים מצביעים על הקוטר הסיסטולי הסופי ESD ועל הקוטר הדיאסטולי הסופי EDD של החדרי השמאלי.LV A WDS מציינת את עובי הדופן הקדמית של החדר השמאלי ו-L-V-P-W-D-S מציינת את עובי הדופן האחורית של החדר השמאלי במהלך הדיאסטולה והסיסטולה בהתאמה. כאן מוצג רישום מייצג של דימות דופלר של רקמות עבור הדופן האחורית של ה-LV, כאשר IVRT מייצגת את זמן ההרפיה האיזו-וולומטרי ו-IVCT מייצגת את זמן ההתכווצות האיזו-וולומטרי. גל ePrime תואם לתנועת הטבעת המיטרלית במהלך מילוי דיאסטולי מוקדם של ה-LV, וגל APR נובע מהסיסטולה העלילית במהלך מילוי מאוחר של ה-LV; S prime מייצגת את המהירות הסיסטולית.הקלטת דופלר של גלי דופק (Pulse wave doppler) של קצות עליכסובי המסתם המיטרלי מספקת תבניות של מהירות זרימה לתוך המסתם המיטרלי, מהן ניתן להסיק את המהירות הדיאסטולית המוקדמת, המהירות הדיאסטולית המאוחרת עם התכווצות דיאסטולית ואת היחס E/A. ה-IVRT הוא גם משתנה שימושי לאפיון התפקוד הדיאסטולי ולחצי המילוי. ET ברישום זה מציין את זמן הפליטה בלב בריא.מהירות ה-EWA גדולה מעט מזו של גל a כפי שנצפה כאן. שלום, הרגע הדגמנו בפניכם כיצד לבצע אקו-לב טרנסתורקלי בעכברים. זכרו, בעת ביצוע הליך זה, יש להקפיד על טיפול נאות בבעל החיים וכן להתאים את רמות ההרדמה בהתאם.זהו זה. תודה שצפיתם ובהצלחה בניסויים שלכם.

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

וידאו זה מדגים שימוש רכבת רכוב בתדירות גבוהה בדיקה אולטרסאונד לבצע אקו על העכבר בהרדמה. שיטות מתארים הן מדידות דו מימדי ו-M-mode קונבנציונלי של תפקוד הלב בנוסף, הכלים החדשים חזקים יותר כגון צבע דופלר, ניתוח המתח, כמו גם בניגוד הדמיה בכלל ממוקדות.

אקו Murine והדמיה אולטראסאונד

סרטון זה מתאר פרוטוקול לביצוע אקוקרדיוגרפיה על עכבר מעבדה.

אקוקרדיוגרפיה של עכבר: טכניקה לא פולשנית להערכת מורפולוגיה של הלב

מאמר זה מספק פרוטוקול להערכת אקו בגודל חדר ממני ויתר לחץ דם ריאתי בעכברים. יישומים כוללים קביעת הפנוטיפ והערכה סידורי במהונדס ומודלי עכבר מושרה רעל של קרדיומיופתיה ומחלת כלי דם ריאתי.

אקו הערכה של הלב הימני בעכברים

תפקוד לקוי של חדר ממני (RV) הוא קריטי בפתוגנזה של מחלות לב וכלי דם, אך מתודולוגיות מוגבלות זמינות להערכתו. ההתקדמות שחלה באחרונה בתחום ההדמיה אולטרה סאונד מספקת אפשרות פולשני ומדויקת עבור מחקר RV אורך. בזאת, אנו פירוט שיטת אקו צעד אחר צעד תוך שימוש במודל עכברי של עומס יתר לחץ RV.

הערכה של מבנה הנכון חדרית ותפקוד בעכבר הדגם של תעוקת עורק ריאה על ידי Transthoracic אקו

מטרת פרוטוקול זה היא להעריך לב פולשנית לשינויים מבניים ותפקודיים במודל של עכברים של מחלת לב נוצר על ידי התכווצות רוחבי אבי העורקים, באמצעות B ו- M-mode אקוקרדיוגרפיה וצבע / הדמיה דופלר גל הדופק.

שינויים הערכה לב מורפולוגי תפקודי עכבר דגם של מועקה הרוחבית אב עורקים על ידי הדמית אקו

פרוטוקול זה מספק תיאור מפורט של הגישה האקו-קרדיוגרפית לפנוטיפ מקיף של תפקוד הלב ומסתמי הלב בעכברים.

גישות פרוטוקולים אקו לאפיון פנוטיפי מקיף של מסתמית מחלות לב בעכברים

הפרוטוקול הבא מתאר את המתודולוגיה לרכישה וניתוח תמונות אקו על מנת לקבל את נפח פרוזדורי שמאל (LAV), אב עורקי קוטר (Ao), ואת עורק ריאה (PA) בקוטר בעכברים. טכניקה זו היא הליך פולשני, שאינו מסוף המאפשר הערכה של תפקוד לב-ריאה.

אקו Murine של השמאל אטריום, אבי העורקים, ו עורק הריאה

בדיקה echocardiographic משמש לעתים קרובות בעכברים. מכשירי אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה יקר פותחו למטרה זו. פרוטוקול זה מתאר הליך echocardiographic סבירים בשילוב עם morphometric היסטולוגית ניתוחים כדי לקבוע מורפולוגיה לב.

בבדיקה היסטולוגית ו echocardiographic של מורפולוגיה לב העכבר

כאן אנו מתארים ומשווים שתי עמדות לקבלת השקפה של ארבעה קאמריים בעכברים. תנוחות אלה מאפשרות את כימות התפקוד הימני של הפונקציה, לספק תוצאות דומות, ניתן להשתמש לסירוגין.

המדידה האקוקרדיוגרפית של פרמטרים של הימני החדרית בעכבר

מוות עובר ולידה הוא תכונה נפוצה כאשר לומדים שינויים גנטיים המשפיעים על התפתחות לב. הדמית אולטרסאונד בתדר גבוה השתפרה רזולוצית 2-D ויכולה לספק מידע מצוין על התפתחות מוקדמת ולב היא שיטה אידיאלית כדי לזהות את ההשפעה על מבנה ותפקוד לב לפני המוות.

אקו העוברי Murine

למד אקוקרדיוגרפיה טרנסתורקלית בעכברים להערכת תפקוד לב סיסטולי ודיאסטולי. שיטה זו משלבת אולטרסאונד ודופלר לניטור לא פולשני של ממדים ותפקוד לבי.

אקו Transthoracic ב עכברים

גלה סרטונים נוספים