Name: אלקטרודה ייצור השרשה ב Aplysia californica עבור הקלטות רב ערוצי עצבית ושרירי ב, חיים שלמים חופשי מתנהג (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-06-04T17:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 37 s
Description: למדו לייצור ולהשתיל אלקטרודות רב ערוציות ב-Aplysia californica לרישום עצבי ושרירי בזמן אמת. שיטה זו מאפשרת חקר בקרה נוירומוסקולרית של התנהגות האכילה בחיות חופשיות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

בהכרת תודה אנו מודים תמיכה מ-NIH (NS047073 אל בג&quot;ץ). כמו כן, אנו מודים קתרין Kehl לניסויים המוקדמות שלה עם Kwik-סיל, אשר עודדו אותנו להשתמש בו עבור היישום שלנו.

1. אלקטרודה ייצור <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי ליצור את האלקטרודה, להשתמש במספריים לחתוך חתיכת אמייל מצופים 0.001 אינץ חוט נירוסטה בקוטר של כ - 2 מטרים. צרף כדור קטן של מרק לכל קצה החוט, מקפלים את החוט לשניים, לסובב את הקצוות כדי ליצור זוג שזור, המכונה אלקטרודה ההפרש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סרט בשני קצותיו של חוט כדי למנוע נפרמים. הפוך את ההפרש ארבע אלקטרודות, באמצעות צבע שונה של קלטת של כל אלקטרודה ההפרש למטרות זיהוי (איור 1A). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טוויסט שני אלקטרודות ההפרש יחד, ומשאיר סנטימטרים untwisted בצד אחד 1 ס"מ בצד השני. חזור עם זוג הנותר של אלקטרודות ההפרש (איור 1B). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טוויסט שני סטים של שתי אלקטרודות ההפרש יחד, מוודא כי המטרה להישאר untwisted. החזק את הרכבה אלקטרודה וליישם סיליקון דבק משק בצומת של ארבע אלקטרודות ההפרש, והשאיר מסתיים החופשי. חכה ולאפשר הדבק להתייבש במשך 4 שעות לפחות (תרשים 1C). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לבודד את הענפים, להניח את הרכבה האלקטרודה על משטח שטוח, מטלטלין כגון חתיכת עץ. מניפה את הקצוות ולהבטיח להם את הקלטת. השתמש חתיכה קטנה של פלסטיק להעלות את הרכבה אלקטרודה ממש לפני סניפים, ובטוחה כי עם הקלטת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב מיקרוסקופ לנתח, להשתמש במלקחיים כדי מעיל הענפים עם דבק סיליקון. 1 אינץ' מסתיים ארוך יהיה בתוך החיה, ולכן הם צריכים מעיל דק מאוד של דבק. אפשר הדבק להתייבש לפחות 3 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קצר את סוף 1 אינץ' ארוכה של האלקטרודה אחד ההפרש לשני סנטימטרים. על כל חוט, הסר 1cm של סיליקון אמייל. קורל חוט אחד חשוף לתוך וו הקלטה. לכופף את חוט השני מעלה הרחק הוו, זה יהווה חוט הקרקע. חזור במשך שלוש אלקטרודות הנותרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר אחת מארבע אלקטרודות על קצה 2 אינץ. שימוש במלקחיים כדי לגרד את אמייל סיליקון, חשיפת 1cm של חוט חשוף נירוסטה על כל אחד 2 חוטים. הלחמה זהב מחבר אחד משני חוטים. השתמש חתיכת סרט במעבדה כדי להבטיח את הסוף ולשמור על הפרדה בין הקרקע סיכות ההקלטה. חזור במשך שלוש אלקטרודות הנותרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף כדור 1-2cm של דבק סיליקון כבל, כ -1.5 ס"מ מהקצה וו לעגן את האלקטרודות בתוך החיה. לייבוש למשך שעה אחת לפחות (1D איור). <img src="/files/ftp_upload/1791/1791fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> באיור 1. האסיפה ייצור אלקטרודה. (א) אלקטרודה בודדת ההפרש הכולל חוט מקופל ומפותל עם הקצוות שלו מאובטח עם הקלטת. (ב) שתי אלקטרודות ההפרש מעוות יחד, והשאיר חלל untwisted בקצוות. סרט בצבעים שונים או אחרת סימון צריך לשמש כדי לזהות את הקצוות. (ג) כל אלקטרודות ההפרש four לשלב ההרכבה אלקטרודה בודדת להרכיב כבל יחיד עם סניפים נפרדים של אלקטרודות בודדים בכל קצה, המסומנים בצבעים שונים של הקלטת. (ד) טופס הרכבה הסופי של האלקטרודה. מצד שמאל, יש מכורבלת ווים הקלטות וחוטי הקרקע של כל אלקטרודה ההפרש. מימין, הפינים זהב כבר מולחמים החוטים לחיבור המגבר. כדור עיגון של סיליקון דבק גם הונחה כלפי הצד השמאלי של הרכבה. </li></ol> 2. הכנת בעלי חיים להשתלה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר בעל חיים בריא שוקל כ 350-450. בתגובה חתיכות קטנות של אצות, החיה צריך ליצור עקיצות במרווחים של בין 3 עד 5 שניות. ניתוח להשלים עם השתלת אלקטרודה צריך לקחת כשעה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להרדים את החיה, להזריק את זה עם 30% w / v איזוטוני MgCl 2. כדי למנוע אובדן של hemolymph ו MgCl 2, הזריקה יכולה להיות מצופים בדבק לפני הסרת המחט. <img src="/files/ftp_upload/1791/1791fig2.jpg" alt="איור 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 2"> איור 2. תרשים סכמטי המציג את האופן שבו היא חיה ניצח עבור השתלת אלקטרודה, ואת המיקום של החתך (מסומן על ידי בר). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את החיה הרדים את במגש דיסקציה עם הרגל שלה למטה. מול ראש החיה על, משמרת את אזור הזימים עד כה שמאל שהחיה היא חלקית על צידו, נשען לאחור. להצמיד את זרועות קדמית (איור 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את המגש על הבמה של מיקרוסקופ לנתח. הנכס את המגש בזווית של כ 20 מעלות להעלות את הראש לאסוף את hemolymph בזנב, הרחק מן החתך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מספריים לנתיחה, להתחיל חתך מעט ימינה שלך eyespot ולהרחיב אותו 1 עד 1.5cm anteriorly. השתמש retractors המצורפת את הקצוות של המגש כדי להחזיק את החתך פתוח (איור 2: חתך ליד בר לב eyespot המצביעים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לחשוף את מסת buccal, להשתמש במלקחיים כדי להרים את הקרום מתחת ברוראת העור מספריים להשתמש כדי לחתוך פתח תואמים את החתך המרכזי. טאק את הקצוות של הממברנה לתוך retractors. </li></ol> 3. אלקטרודה השרשה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את האלקטרודה על הרכבה micromanipulator והעבר אותו על החתך של החיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העצב radular הוא הקשה ביותר לגישה, ויש ניגש הראשון. ישנן שתי אפשרויות לגישה העצב radular. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האפשרות הראשונה, שהיא עדיפה, היא להסתכל תחת הגנגליון buccal בין BN1 ו BN2. אם ענף של העצב radular גלוי, להשתמש קנס שקצהו מלקחיים כפופות לתוך וו להרים את ענף (איור 3, לולאה של RN תחת הגנגליון שכותרתו 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם ענף של העצב radular אינו נגיש מעל השריר, האפשרות השנייה היא לגשת אליו דרך חתך קטן I2 ליד רקמת החיבור בבסיס הגנגליון buccal (איור 3, RN מתחת לשריר שכותרתו 2). החתך I2 חייב לעבור שתי שכבות של שריר I2. תחזיק את הקצה של חתך השריר עם מלקחיים ישר להשתמש במלקחיים מכור לשלוף ענף RN. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעוד מחזיק את העצב עם מלקחיים מכור, השתמש קבוצה שונה של מלקחיים כדי לתפעל את הקרס על אלקטרודה לעצב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש micromanipulator להעלות את הקרס כך העצב הוא הרים מן המסה buccal וברור של כל עצבים או רקמות אחרות. לא להתמתח יתר על המידה את העצב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יבש את האלקטרודה באמצעות קים, נגבו או יניקה את עודף הנוזלים בעזרת מזרק. מתח מים יכול לגרום להתמוטטות עצבים על עצמה, או חותמת מים כדי ליצור תחת העצב. בכל מקרה, האזור צריך להיות יבש לחלוטין לפני דבק מוחל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החלת טיפה קטנה של דבק מגע היכן הבסיס של הקרס נמצא במגע עם החלק התחתון של עצב. החל ירידה של Aplysia מלוחים או hemolymph להגדיר בדבק. כאשר הדבק אינו רטוב יש להעביר כפי מקבל דבק בין חוט עצבים יחסום את החיבור החשמלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יבש את הקרס שוב. מערבבים Kwik-סיל דבק על חבילת קרח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש קצה סיכה להחיל כמות קטנה של דבק Kwik-סיל, המכסים לחלוטין כל חוט חשוף של הקרס, אך לא את החוט הקרקע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר להדביק את להגדיר כ -5 דקות, מתקנים את הדבק אם זה מתרחקת ממקטעים של הקרס. דבק מוגדר כאשר מקלות כבר לא כאשר נגע עם הסיכה (איור 4 מראה את התצורה הסופית). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר אלקטרודה עצב radular מוגדר, השריר I2 ניתן לגשת. באזור בין BN1 ו BN2, להשתמש במלקחיים מכור להתחבר כדי להפריד 2 להקות של שריר I2 משאר חלקי בשריר על ידי משיכתו בעדינות הלהקות כלפי מעלה. צרף את האלקטרודה באמצעות ההליך אותו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עצבים buccal 2 ו -3 ניתן לגשת בקלות אלקטרודות מחוברות עם הליך זהה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שכל האלקטרודות מחוברות, להחליק את הרכבה אלקטרודה לתוך החיה עד עוגן הסיליקון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפר החתך נסגר סביב הכבל אלקטרודה בולטות, שמירה על עוגן בתוך החיה. הפלא את התפרים, כדי להבטיח אטימה טובה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את עצות מחבר זהב בקצה השני של האלקטרודה לתוך בלוק קטן של קלקר. מחזירים את החיה למיכל הראשי במיכל בידוד סודה עבור לילה התאוששות. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1791/1791fig3.jpg" alt="איור 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 3"> איור 3. דיאגרמה של המנגנון האכלה Aplysia המכונה מסת buccal. המוצגים הם עצבים buccal (BN1, BN2, BN3), העצב radular (RN) כי היציאות בתחתית הגנגליון buccal, ולאחר מכן צולל מתחת לשריר, ואת המיקום על השריר I2 שבו אלקטרודה מחוברת. <img src="/files/ftp_upload/1791/1791fig4.jpg" alt="איור 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 4"> איור 4. תרשים סכמטי של אלקטרודה אחת מחוברת עצב (או שריר) ו דבוק במקום. שים לב לאזור מבודד של דה וו מכורבלת נמצא בקשר ישיר עם העצב (או שריר), המעוגן במקום עם דבק מגע, ומבודד חשמלית ממדיום את הנוזל באמצעות Kwik-סיל. שים לב גם כי קצה deinsulated של האלקטרודה הקרקע חשופה מדיום הנוזלים. 4. הקלטה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאקלם את החיה במיכל סודה בעוד מחובר ציוד ההקלטה לפחות 1.5 שעות. צג את האות בעוד החיה הסתגלות כדי לוודא כי כל אלקטרודות עובדים וכי רמות רעש נמוכות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במצלמת וידאו כדי לתעד התנהגות האכלה תוך כדי שימוש במחשב כדי להקליט אותות עצביים האלקטרודות ושרירי. סנכרן את הקלטות וידאו באמצעות אלקטרודה אות גל מרובע השולט מונה דיגיטלי בתצוגה את המצלמה בזמן שהוא נרשם בו זמנית כערוץ נוסף במחשב ב Axoscope. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האכלה התנהגויות שהושרו על ידי טכניקות דהscribed ב מורטון Chiel 1993. </li></ol> אמנם בעלי חיים חסרי חוליות שאינם דורשים אישור רשמי על ידי שימוש בבעלי חיים מוסדיים ועדה לטיפול, עלינו להבטיח כי כל הטיפולים של Aplysia למזער את הפגיעה והסבל לחיה, וכי כל טכניקות ניתוחיות מתבצעות בעוד החיה בהרדמה מלאה. נציג תוצאות <img src="/files/ftp_upload/1791/1791fig5.jpg" alt="איור 5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 5"> איור 5.) A (סימולטני הקלטות ערוץ לארבעה שריר (השריר מד I2), וכן משלושה עצבים buccal (העצב radular, RN, עצב buccal 2, BN2, ואת העצב buccal 3, BN3) במהלך בתגובה בליעה. (ב) מסגרת עדיין הקלטת וידאו סימולטני של החיה בחופשיות מתנהג כפי שהוא בולע אצות שנחתך מראש פוזרו רצועה (0.5 ס"מ רוחב), אשר סומן על 0.5 ס"מ במרווחים עם להקות לבן כך תנועותיו ניתן דמיינו בקלות כמו החיה הזנות.

<ol><li>Lu, H., Chestek, C. A., Shaw, K. M., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+extracellular+stimulation+of+individual+neurons+in+ganglia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neural+Eng%22%5BJournal%5D)">Selective extracellular stimulation of individual neurons in ganglia.</a> J. Neural Eng. 5, 287-309 (2008).</li>
<li>Morton, D. W., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+buccal+nerve+activity+that+distinguishes+ingestion+from+rejection+can+be+used+to+predict+behavioral+transitions+in+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">In vivo buccal nerve activity that distinguishes ingestion from rejection can be used to predict behavioral transitions in Aplysia.</a> J Comp. Physiol. A. 172, 17-32 (1993).</li>
<li>Warman, E. N., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+technique+for+chronic+single+extracellular+recording+in+freely+behaving+animals+using+pipette+electrodes%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">A new technique for chronic single extracellular recording in freely behaving animals using pipette electrodes.</a> J. Neurosci. Methods. 57, 161-169 (1995).</li>
<li>Ye, H., Morton, D. W., Chiel, H. J., J, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((nbsp%3BNeuromechanics+of+multifunctionality+during+rejection+in+Aplysia+californica%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">nbsp;Neuromechanics of multifunctionality during rejection in Aplysia californica.</a> J. Neurosci. 26, 10743-10755 (2006).</li>
</ol>

חדשנות מפתח שהפכה הקלטות הללו מוצלח הוא שילוב של אלקטרודות לתוך כבל אחד. שתי הקלטות אלקטרודה שימשו בעבר, אך מתרחבת עד ארבע אלקטרודות הפרט הביאה להיווצרות הידבקויות כירורגית שלעתים קרובות מנעו מן החי עושה תנועות האכלה רגילה. השילוב בין האלקטרודות לתוך כבל אחד מקטין את כמות גדולה של אלקטרודות בתוך החיה, אשר בתורו מפחית את התגובה החיסונית ומאפשר החיה לנוע בחופשיות רבה יותר. ההיבט חדשניות אחרות של הליך זה הוא שילוב ש...

<table><tbody><tr><td>חוט פלדה אל-חלודה מצופה באמייל</td><td>California Fine Wire Company</td><td></td><td>0.001D, ציפוי h</td></tr><tr><td>דבק סיליקון ביתי II</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>דבק Kwik-Sil</td><td>World Precision Instruments, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>דבק מהיר Duro Qwik-Gel</td><td>Henkel Corp</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מגבר A-M Systems דגם 1700</td><td>A-M Systems</td><td></td><td>הגדרות סינון: 100-1000Hz עצבים, 10-1000Hz שריר I2</td></tr><tr><td>Axoscope 10.1</td><td>Molecular Devices</td><td></td><td></td></tr><tr><td>פיני חיבור מוזהבים</td><td>Bulgin</td><td>SA3148/1</td><td></td></tr><tr><td>תושבות חיבור מוזהבות</td><td>Bulgin</td><td>SA3149/1</td><td></td></tr></tbody></table>

אלקטרודה ייצור השרשה ב aplysia californica עבור הקלטות רב ערוצי עצבית ושרירי ב, חיים שלמים חופשי מתנהג

Electrode Fabrication and Implantation in Aplysia californica for Multi-channel Neural and Muscular Recordings in Intact, Freely Behaving Animals

הקלטה של ​​העצבים והשרירים העיקריים של<em&gt; Aplysia</em&gt; במהלך התנהגות האכלה מאפשרת לנו ללמוד את דפוסי השליטה העצבית חיים שלמים. במקביל להקלטה מתוך העצבים והשרירים מרובים נותן לנו מידע מדויק על העיתוי של פעילות עצבית. שיטות הקלטה קודמים עבד עבור שתי אלקטרודות, אבל את המחקר של עצבים או שרירים נוסף נדרש שילוב ממוצעים של ההקלטות של בעלי חיים רבים, אשר הקשו על מנת לקבוע הפרטים הקטנים של עיתוי בהדרגה, בגלל השתנות מן כתגובה, ומתוך חיה לחיה. השתלת ארבע אלקטרודות אדם בעל שיעור הצלחה נמוך מאוד עקב היווצרות של הידבקויות המונעות חיות מלבצע תנועות האכלה רגילה. פיתחנו שיטה חדשה של ייצור אלקטרודה המפחיתה את חלק הארי של האלקטרודות בתוך החיה ומאפשר תנועות האכלה רגילה. באמצעות שילוב של דבקים לצרף את התוצאות אלקטרודות בידוד אמין יותר של האלקטרודה אשר נמשך זמן רב יותר, כך שניתן להקליט לתקופות עוד שבוע. טכניקת ייצור שאנו מתארים ניתן יהיה להרחיב לשלב אלקטרודות נוספות אחדות, תהיה ישימה בעלי חיים בעלי חוליות.

הטכניקה מתוארת עבור השתלה four<em&gt; In vivo</em&gt; אלקטרודות לפקח על השליטה neuromuscular התנהגות האכלה<em&gt; Aplysia californica</em&gt;.

אלקטרודה ייצור השרשה ב Aplysia californica עבור הקלטות רב ערוצי עצבית ושרירי ב, חיים שלמים חופשי מתנהג

הקלטה מעצבים ושרירים מרכזיים של *Aplysia* במהלך התנהגות האכלה מאפשרת לנו לחקור את דפוסי הבקרה העצבית בבעל חיים שלם.

כדי להכין את מכלול האלקטרודות להקלטות in vivo רב-ערוציות, יוצרים ארבע אלקטרודות דיפרנציאליות וסובבים אותן יחדיו, כאשר כל אחת מהאלקטרודות הדיפרנציאליות מסתעפת החוצה. בקצוות, מקבעים את בעל החיים המורדם בעזרת נעצים ומבצעים חתך לצדו של אזור העין. לאחר איתור העצבים והשרירים המטרה, מחברים את האלקטרודות לטיפת דבק סופר (superglue) בבסיס הוו, ולאחר מכן מבודדים אותן בעזרת חומר איטום quick seal.שלום, אני מירנדה קולינס מהמעבדה של ד"ר Halal Thiel מהמחלקה לביולוגיה באוניברסיטת Kiss Western Reserve. היום אדגים לכם פרוצדורה להרכבה והשתלה של אלקטרודות להקלטות in vivo ב-SIA, קליפורניה. אנו משתמשים בפרוצדורה זו במעבדתנו כדי לחקור את הבקרה הנוירו-שרירית של ההאכלה וה-sia.נתחיל בעבודה. כדי ליצור את האלקטרודה, השתמשו במספריים כדי לחתוך חתיכה של חוט פלדה אל-חלודה בעובי 0.001 inch ומצופה אמייל, באורך של כשני רגליים. הצמידו כדור קטן של פלסטלינה לכל קצה של החוט.קפלו את התיל לחצי וסובבו את הקצוות כדי ליצור זוג שזור הנקרא אלקטרודה דיפרנציאלית. הדביקו את שני קצות התיל בעזרת סרט הדבקה כדי למנוע פרימה. הכינו ארבע אלקטרודות דיפרנציאליות, תוך שימוש בצבע סרט הדבקה שונה עבור כל אלקטרודה דיפרנציאלית.למטרות זיהוי, סבבו שניים מהאלקטרודים הדיפרנציאליים זה סביב זה, תוך השארת 2 inches ללא פיתול בקצה אחד ו-1 inch ללא פיתול

electrode-fabrication-implantation-aplysia-californica-for-multi

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

אנו מראים כיצד שינויים בריכוז התאי החופשיים הסיד ויעילות הסינפטית ניתן לפקח במקביל בהכנה של...

מעקב אחר שינויים בריכוז הסידן התאיים ויעילות הסינפטית ברכיכות<em&gt; Aplysia</em

אנו מתארים טכניקת extracellularly להקליט ולעורר מעצבים, שרירים, ונוירונים בודדים...

<em&gt; במבחנה</em&gt; הכנה להפקה והקלטה של ​​תוכניות רכב האכלה עם תנועות פיסיולוגיות<em&gt; Aplysia californica</em

סרטון זה מדגים טכניקה להשתלת מכלול אלקטרודות במוח עכבר. ההרכבה מכילה אלקטרודות דו-קוטביות לרישום פעילות מההיפוקמפוס ואלקטרודת ייחוס לקבלת פעילות בסיסית מהמוח הקטן. עכבר מורדם מונח על מסגרת סטריאוטקסית, ומכלול האלקטרודות מושתל באזור מוח המטרה. לאחר מכן מאפשרים לבעל החיים להתאושש לפני ביצוע הקלטה אלקטרופיזיולוגית.

השתלת מכלול אלקטרודות במוח עכבר לצורך רישום אלקטרופיזיולוגי

בבעלי חיים עם נוירונים שזוהו גדולים...

Extracellularly זיהוי תאי עצב מוטורי לשריר בברכת מוטור<em&gt; Aplysia californica</em

השתלת מערכים מאורגנים של microwires לשימוש בקלטות אלקטרו יחידה אחת מציגה מספר האתגרים טכניים. שיטות לביצוע טכניקה זו ואת הציוד הדרוש מתוארות. כמו כן, השימוש מועיל של מערכי Microwire מאורגנים להקליט מאזורי משנה עצביים שונים עם סלקטיביות מרחבית גבוהה נדון.

הליך השתלת מערכים מאורגנים של Microwires להקלטות יחידה אחת בAwake, מתנהגת בעלי חיים

חילזון ימי Aplysia californica כבר בשימוש נרחב כמודל נוירוביולוגיה למחקרים על בסיס תאי ומולקולרי של התנהגות. כאן מתוארת מתודולוגיה לחקר מערכת העצבים של Aplysia לניתוחים אלקטרופיזיולוגיים ומולקולריים של נוירונים בודדים של מעגלים עצביים מזוהים.

אקליפסיה (1991) הכנת גנגליה לניתוחים אלקטרופיזיולוגיים ומולקולריים של נוירונים בודדים

מחקר זה מציג שיטה עבור ההקלטה סימולטני של שדה מקומי פוטנציאל המוח, electrocardiograms, electromyograms, ונשימה אותות של חולדה נעה בחופשיות. טכניקה זו, אשר מפחית את עלויות ניסיוני ומפשטת את ניתוח הנתונים, יתרום להבנה של אינטראקציות בין המוח לבין איברים היקפיים בגוף.

הקלטות סימולטני של פוטנציאל קורטיקלית שדה מקומי, רל, Electromyogram נושם קצב מעכברוש נעה בחופשיות

המתואר להלן הוא שיטה עבור השרשה של מערכי האלקטרודה מרובים פולימר ברחבי אזורים מרוחקים מבחינה אנטומית עבור הקלטה אלקטרופיסיולוגית כרונית בחופשיות הזזת חולדות. הכנה והשתלות כירורגיות מתוארות בפרוטרוט, בדגש על עקרונות עיצוב להנחות את השיטות לשימוש במינים אחרים.

השרשה כרונית של מערכים גמישים אלקטרודה מרובים

המוצג כאן הוא פרוטוקול עבור ייצור של מערכת הוהשתלות עבור בהקלטה vivo כרונולוגי של פוטנציאל אלקטרומגנט מעורר וספונטני. המערכת חלה על חקירת שימור של שרירי הגרון לאחר פגיעת העצבים.

מערכת ולוהשתלות לכרוני בVivo האלקטרומגרפיה

אנו מתארים כאן שיטה עבור בדיית Ti3C2 mxene מערכים מיקרואלקטרודה וניצול אותם עבור בהקלטה vivo עצבית.

הייצור של Ti3C2 Mxene מערכים מיקרואלקטרודה בVivo הקלטה עצבית

פיתחנו גישה פשוטה וחסכונית לייצור אלקטרודות וערכנו הקלטות של אותות באזורים מרובים בעכברים הנעים בחופשיות. שימוש באופטוגנטיקה, לצד אלקטרופיזיולוגיה רב-אזורית ורישום אותות סידן, איפשר גילוי של פעילויות עצביות באזורים שונים במודל הצתת ההתקפים.

שיטה משולבת ליצירת אופטרודים אלקטרופיזיולוגיים גמישים ונוחים להקלטה רב-אזורית in vivo

למדו לייצור ולהשתיל אלקטרודות רב ערוציות ב-Aplysia californica לרישום עצבי ושרירי בזמן אמת. שיטה זו מאפשרת חקר בקרה נוירומוסקולרית של התנהגות האכילה בחיות חופשיות.

אלקטרודה ייצור השרשה ב Aplysia californica עבור הקלטות רב ערוצי עצבית ושרירי ב, חיים שלמים חופשי מתנהג

גלה סרטונים נוספים