Name: השתלת orthotopic לימב הינד-בחולדות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-07-12T17:40:00.000+00:00
Duration: 14 min 3 s
Description: למד השתלת איברי כליה אורתוטופית בעכברושים לחקר שתל רקמה מרוכבת ופציעות איסכמיה-רפרפוזיה. שיטת החפת הדם מקצרת זמן ניתוח ומאפשרת חקר תגובות חיסוניות ואסטרטגיות מודולציה מכוונת לשיפור הישרדות השתל.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מבצע התורם הינד ו-Harvest לימב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במשך ההליך האופרטיבי להגדיר סטרילית של microsurgical מכשירים מנוצל. המנתח צריך ללבוש לבוש הולם, כולל כפפות סטריליות, אשר צריך להיות שונה לפני תחילת ההליך הכירורגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדה הוא הרדים עם זריקה intraperitoneal של pentobarbital (IP 50mg/kg) והניח פרקדן על שדה הניתוח מחוממת, המאפשר טמפרטורת גוף יציבה החיה לאורך כל ההליך הכירורגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני חתך עור הגישה של המבצע הוא מחוטא שלוש פעמים כל אחד עם שני, חיטוי ואלכוהול. כדי למנוע את קרניות חיות מהתייבשות, העיניים משומנים עם משחת עיניים (Vidisic) לפני הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החתך בעור הוא עשה פני במפשעה ימין בערך ברמה של הרצועה מפשעתי. כלי הירך הם גזור חופשי עם הפרעה דו כויה ו דיסקציה קהה; ענפים עמוק הם ligated עם משי 8-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 300μl (50 IU) של הפרין מוזרקים דרך הווריד הפין עבור אנטי קרישה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כלי עצם הירך הם ligated ברמה של הרצועה מפשעתי וחותכים דיסטלי אל המיתר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איבר האחוריות היא הסמיקה קר כקרח (4 ° C) פתרון HTK (5 מ&quot;ל) דרך עורק הירך מעל 5 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל קבוצות השרירים נחלקים באופן חד עם מספריים osteotomy מבוצע עם חשמלי מסתובב ראה ברמה של בשליש דיסטלי של עצם הירך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איבר שנקטפו הוא שקוע אז 20mL של פתרון קרים כקרח HTK לשימור בקירור עד להשתלה. </li></ol> נמען מבצע והשתלות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדה הוא הרדים עם זריקה intraperitoneal של פרקדן pentobarbital והניחה על שדה הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החתך בעור הוא עשה פני במפשעה ימין בערך ברמה של הרצועה מפשעתי. כלי הירך הם גזור חופשי עם הפרעה דו כויה ו דיסקציה קהה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כלי עצם הירך הם ligated כמו דיסטלי ככל האפשר, אך בקרבה ההמראה כלי ברום הבטן. מהדק דם ממוקמים ברמה של הרצועה מפשעתי על העורק לווריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שרוול פוליאתילן הוא עצר העורק (קוטר בתוך השרוול: 0.912, מ&quot;מ השרוול קיר עובי: 0.010 מ&quot;מ, אורך השרוול: 2.0 מ&quot;מ) וריד (בקוטר בתוך השרוול: 1.151 מ&quot;מ; השרוול קיר עובי: 0.010 מ&quot;מ, אורך השרוול : 2.0 מ&quot;מ). בקצה לומן כלי נמשך אז עם המרחיב כלי ואת עורק וריד הירך הם everted על הגוף של השרוול (כ 2 מ&quot;מ) ו קבוע עם ליגטורה 8-0 ההיקפי משי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לפנות מקום איבר איבר התורם למקבל יוסר עם דיסקציה חריפה של קבוצות שרירים osteotomy מבוצעת אמצע הירך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איבר התורם יוסר הפתרון HTK והשתלות מתחיל osteosynthesis של עצם הירך באמצעות מחט 18-מד (אורך: 1.5-2.0 ס&quot;מ) כמו מוט intramedullary. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קבוצות שרירים הגחון הם מקורב באופן הדוק עם Vicryl 4-0 או תפרים Prolene. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Anastomoses כלי הדם מבוצעות על ידי משיכת וריד התורם מעל עורק לווריד הנמענים ומורכב השרוול. ליגטורה ההיקפי 8-0 משי ממוקמת שוב כדי לאבטח את השקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מהדק ורידי הוא שוחרר לאחר מכן תפס העורקים, ו reperfusion הוא מדמיין על ידי החזרת צבע האיבר הדיסטלי רגל ו, כמו גם תזרים pulsatile דרך העורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקבוצות הנותרות שריר הגב הם מחדש עם מקורב Vicryl 4-0 או תפרים Prolene. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העור הוא סגור עם vicryl 4-0 או תפרים prolene. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החולדה הנמען מושם על כרית חימום פיקוח הדוק עד להחלמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים הנמען לקבל אנטיביוטיקה מניעתית (Cefazolin, 20 מ&quot;ג / יום, IM) ו Buprenex (0.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג, SC) במשך שלושה ימים posttransplant. </li></ol>

<ol><li>Shapiro, R. I., Cerra, F. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+reimplantation+and+transplantation+of+a+complex+organ%3A+the+rat+hind+limb%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">A model for reimplantation and transplantation of a complex organ: the rat hind limb.</a> J Surg Res. 24 (6), 501-506 (1978).</li>
<li>Petruzzo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+international+registry+on+hand+and+composite+tissue+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The international registry on hand and composite tissue transplantation.</a> Transplantation. 86 (4), 487-492 (2008).</li>
<li>Schneeberger, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+forearm+transplantation%3A+outcome+at+3+years%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">First forearm transplantation: outcome at 3 years.</a> Am J Transplant. 7 (7), 1753-1762 (2007).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

עשרות שנים של מחקר ניסיוני יש שקדמה ואפשרה יד השתלה מוצלחת האדם בתקופה האחרונה. בשנת 1978, שפירא ואח&#39;. פיתחו השתלת orthotopic האחוריות איבר מודל בחולדות, מתאים גם ללמוד היבטים פתולוגיים, פיזיולוגיים, ואת מערכת החיסון שונים, כמו גם התוצאה התפקודית של שתלי רקמה מרוכבים. אנחנו צריכים לשנות את החלק המאתגר ביותר של ההליך, דהיינו השקה של כלי הדם, על ידי החדרת טכניקה לא תפר השרוול. כאשר לעומת הטכניקה המקובלת תפר אותה מפשטת ומקצרת את הליך כירורגי ומאפשרת למנתחים בעלי ניסיון בסיסי micr...

<table><tbody><tr><td>נמבוטל (Nembutal)&amp;#174;</td><td>OVATION Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אימונו-הפרין</td><td>Ebewe Pharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>תמיסת Custodiol HTK</td><td>תרופות חיוניות</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מספרי אדוונטיציה (Adventitia Scissors)</td><td>ספיגומנומטריה (ASSI)</td><td>ASSI&amp;#174;SAS-21 R-8T</td><td></td></tr><tr><td>פינצטה</td><td>ASSI</td><td>מדד רגישות להרס של חומרים (ASSI)&amp;#174;JFC-7</td><td></td></tr><tr><td>פינצטת הרחבה</td><td>Sindex (מדד הריכוז של רסרסורי חומרי גלם)</td><td>מדד רגישות ספיגוביליות (ASSI)&amp;#174;D-5AZ</td><td></td></tr><tr><td>צינורות פולימיד</td><td>River Tech Medical</td><td>#17; #19</td><td></td></tr></tbody></table>

השתלת orthotopic לימב הינד-בחולדות

Orthotopic Hind-Limb Transplantation in Rats

Allotransplantation רקמות Composite (CTA) עכשיו מהווה אופציה טיפולית תקף לאחר אובדן של האמה ביד, או ספרות הפכה לישות טיפולית חדשנית של ניתוח שיקומי. עם זאת, לטווח ארוך במינון גבוה סמים רב טיפול לדיכוי המערכת החיסונית נדרשת כדי להבטיח הישרדות השתל, הנושאת את הסיכון של תופעות לוואי חמורות אשר קולר יישום רחב יותר. התקדמות נוספת בתחום זה תלויה הבנה טובה יותר של בסיסי אימונולוגיה reperfusion איסכמיה פגיעה ברקמות שתלי מרוכבים. נכון להיום, השתלת איבר orthotopic האחוריות של חולדות כבר מכרסם את המודל המועדף שחזור השתלה (RT), לעומת זאת, הוא הליך מאוד תובעני שדורש מיומנויות microsurgical יוצאת דופן וחיבור מחדש של כלי הדם, העצמות, השרירים והעצבים. יש לנו הציג את הטכניקה וסקולרית השקה השרוול מודל זה, מתן גישה מהירה ואמינה עכברוש השתלת איבר האחוריות. טכניקה זו מפשטת ומקצרת את הליך כירורגי ומאפשרת למנתחים בעלי ניסיון בסיסי microsurgical בהצלחה לבצע את הפעולה עם הישרדות גבוהים שיעורי סיבוכים נמוך. הטכניקה נראית גם מתאים החיסונית, כמו גם פגיעה reperfusion איסכמיה (IRI) מחקרים.

כאן אנו מתארים את העכברוש orthotopic איבר האחוריות, הליך ההשתלה, אשר נראה כי תקן הזהב<em&gt; In vivo</em&gt; מודל למחקר רקמות מרוכבים allotransplantation.

השתלה אלוגנטית של רקמה מורכבת (CTA) מהווה כיום אפשרות טיפולית תקפה לאחר אובדן של כף יד, אמה או אצבעות, והפכה לשיטה חדשנית...

אני רוברט סוהה מהמעבדה למחקר דניאלס רוסקי במחלקה להשתלות ויסרליות וכירורגיה של בית החזה מאוניברסיטת אינסברוק לרפואה. היום נדגים לכם את ההליך של השתלת גפה בעכבר, תוך הצגת טכניקת cuff להשחזרת כלי דם. ניתוח השתלת הגפה מבוצע על ידי המתמחים בכירורגיה שלנו, כולל אני.אנו משתמשים במודל חיה זה כדי לחקור פגיעות הקשורות לאיסכמיה ורפרופוזיה באלוגרפט של רקמה מורכבת. יתרה מכך, אנו משתמשים בהליך זה כדי לחקור אירועים אימונולוגיים של דחיית אלוגרפט של רקמה מורכבת, וכן אסטרטגיות למניעת התרחשות הדחייה. אסטרטגיות אלו כוללות מזעור או אפילו הימנעות מדיכוי חיסוני לתחזוקה באמצעות שימוש במשטרי אימונומודולציה ממוקדים.הליך השתלת הגפה האחורית האדומה מתחיל בהסרת השתל הרקמתי המורכב מהתורם, במסגרתו מוסרת הגפה האחורית הימנית מהחולדה התורמת ונשמרת על קרח. לאחר מכן, מוסרת הגפה האחורית הימנית מהחולדה המקבלת כדי לפנות מקום לגפה התורמת. לבסוף, הגפה התורמת מוצאת מהקרח ומושתלת בחולדה המקבלת.במודל זה, אנסטומוזיס וסקולרית מבוצעת באמצעות טכניקת שרוול (cuff). עבור הניסויים שלנו, נעשה שימוש בזכרים של Louis Reds השוקלים 250 גרם. הרדמה הושרה באמצעות הזרקה תוصفית (intraperitoneal) של 50 מיליגרם לקילוגרם של פנטוברביטול.החולדה המורדמת נגלחת ומחוטאת באזור המפשעה והגפה לצורך הפרוצדורה. נדרש סט מלא של מכשירים למיקרוכירורגיה, הכולל מספריים מיקרוכירורגיים ישרים, מרחיבי כלי דם ושתי פינצטות מעוקלות. יתרה מכך, המכשירים החשובים ביותר הם התפסני כלי הדם למיקרוכירורגיה המוצגים כאן.כדי לבחון את עומק ההרדמה, נעשה שימוש ברפלקס צביטה של בהו. החולדה מונחת על פלטפורמה סטרילית ומקובעת כאשר כל ארבעת הגפיים במתיחה מלאה לפני החתך. הגפה מנוקת מכל שערה כדי למנוע זיהום.מבצעים חתך לרוחב המפשעה הימנית בערך בגובה הרצועה המפשעתית (inguinal ligament). כלי הדם הפמורליים מופיעים מיד מתחת לעור והם מופרדים באמצעות צריבה ביפולרית ודיסקציה קהה. לאחר מכן מופרדים כלי הדם האפיגסטריים ונצרבים.לולאה בודדת המשמשת כתפר ייצוב מונחת סביב הווריד והעורק כדי לאפשר מתיחה ללא מגע ישיר עם כלי הדם באמצעות מכשירים לאחר ההפרדה. הענפים העמוקים של העורק והווריד נקשרים באמצעות תפר משי 8-0 פרוקסימלית ונצרבים דיסטלית לפני קצירת הגפה התורמת. 50 units של heparin ניתנים דרך הווריד הפנומי.לאחר דקה אחת, חוזרים להתמקד בכלי הדם הפמורליים. העורק הפמורלי נקשר באופן הדוק ככל האפשר באמצעות תפר משי במידה של 8-0, ואותו הליך חוזר על הווריד הפמורלי. לאחר מכן, שני כלי הדם נחתכים באופן דיסטלי לליגטורה, והגפה האחורית נשטפת דרך העורק באמצעות תמיסת HDK קרה מאוד עם הפרין במשך חמש דקות.בשלב הבא, מחלקים בזהירות את כל קבוצות השרירים באמצעות מספריים. האוסטאוטומיה מבוצעת באמצעות מסור חשמלי מסתובב בגובה השליש הדיסטלי של ה-femur. את הגפה שהופקה טובלים לאחר מכן ב-20 milliliters של תמיסת HDK קרה במיוחד לצורך שימור ואחסון בקירור עד להשתלה.פעולת המקבל מתחילה באופן דומה לפעולת התור, עם בידוד ודיסקציה של כלי הדם הפמורליים. לאחר דיסקציה קפדנית, כלי הדם נקשרים באמצעות silk 8-0 רחוק ככל האפשר מהמרכז (distal), אך פרוקסימלית לנקודת הפיצול של כלי הדם האפיגסטריים. לאחר מכן נמשיך בהרכבת השרוול על וריד המקבל על ידי משיכת שרוול הפולילין מעל כלי הדם.תפס וריד בודד מונח פרוקסימלית לשרוול מעל הווריד וידית השרוול כדי להבטיח המוסטזיס מלא. הקשירה בקצה הדיסטלי של הווריד נחתכת והווריד מופנה מעל השרוול. קשירה מסוג 8-0 נקשרת היקפית סביב הכלי והשרוול כדי לקבע את וריד המקבל במקומו.אותו הליך בדיוק מבוצע עבור העורק עם השרוול בעל הקוטר הקטן יותר. הגפה של המקבל מופרדת באופן דומה לגפת התורם, באמצעות הפרדה חדה של קבוצות השרירים וביצוע אוסטאוטומיה במרכז הפמור. כעת אנו מוכנים להשתיל את הגפה האחורית.הגפה התורמת מוצאת מתמיס ה-HDK. השתלה מתחילה בביצוע אוסטאוסנתזה (osteosynthesis) של הפמור באמצעות מחט gauge 18 המשמשת כמוט תוך-לשדי.קבוצות שרירים ונטרליות מקורבות בעזרת ארבע תפרים מקטעים מסוג Vicryl או proline כדי לייצב את הגפה ולהכין אותה לאנסטומוזה וסקולרית. עבור אנסטומוזת Cuff R, הווריד התורם מורחב, נמשך מעל הווריד של המקבל וה-cuff, ומקובע באמצעות ליגטורה היקפית נוספת בגודל שמונה o. אותו הליך מבוצע עבור העורק התורם.לבסוף, לאחר ששני הכלי הדם מוכנים, משחררים את התסביך הוורידי ולאחריו את התסביך העורקי. הרפרפוזיה היא מיידית וניתנת לצפייה בקלות על ידי חזרת הצבע לגפה המרוחקת ולכף הרגל, וכן על ידי זרימה פולסטילית דרך העורק. קבוצות השרירים הגבייות שנותרו מקרבות מחדש.העור נסגר באמצעות ארבע תפרים רציפים של Vicryl או proline, וההשתלה הושלמה לאחר הניתוח. החולדה מחוממת על משטח חימום, וניתנים משככי כאבים ואנטיביוטיקה. החולדה תנוטר מקרוב במשך 48 עד 72 שעות לאיתור סימני מצוקה או סיבוכים ניתוחיים.טכניקת ה-cuff לביצוע אנסטומוזיס חוזרת בוצעה באופן נרחב בתחומי מחקר כירורגיים שונים במהלך העשורים האחרונים, ממודלים של השתלת כליות בממיים ועד למודלים של השתלת לב הטרוטופית. היא מאפשרת לחקור היבטים שונים של פגיעות כתוצאה מאיסכמיה ורפרפוזיה, כמו גם תופעות אימונולוגיות. בעקבות ההשתלה שלנו.כאן אנו מציגים את היישום הראשון של טכניקת השרוול (cuff) הייחודית הזו להשתלת רקמה מורכבת של גפה. במודל של בעלי חיים קטנים, טכניקת השרוול מפחיתה באופן משמעותי את זמן הניתוח, את רמת המומחיות במיקרו-כירורגיה הנדרשת מהמנתח ואת איבוד הדם תוך כדי הניתוח, בהשוואה לטכניקות תפירה קונבנציונליות לאנסטומוזיס.

orthotopic-hind-limb-transplantation-in-rats

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

אנו מציגים גרסה לא קל ליצור בטכניקה של שתי השרוול קלאסית השתלת כבד orthotopic בחולדה.

השתלת כבד Orthotopic בחולדות

השתלת הכבד orthotopic בחולדות היא מודל ניסיון הכרחי למחקר ביו. כאן אנו מציגים הניתוחים שלנו להשתלת כבד חולדת orthotopic עם שחזור עורק כבד באמצעות 50% שתל חלקי.

ניתוחים למודל חולדה של השתלה כבדה orthotopic חלקית עם שחזור עורקית כבדיה

מודל הרומן הזה להשתלה הגפיים האחוריות orthotopic בתוך העכבר, החלת טכניקה השרוול הלא תפר עבור השקה סופר-כלי הדם, מספק כלי רב עוצמה עבור מחקר אימונולוגי מכניסטית in vivo הקשורים אלוגרפט מרוכבים vascularized (VCA).

Orthotopic הינד לימב השתלה בבית העכבר

השתל המורכב של vascularized מציע יתרונות משנים חיים לנמעני ההשתלה, אך הגורמים הביולוגיים לדחיית השתל והעיקור נשארים ברורים לקוי. המודל הכירורגי מכרסם הציג כאן מציע המודל הרלוונטי קלינית של השתלת, המאפשר לחוקרים להעריך את אירועי דחייה ואסטרטגיות טיפוליות פוטנציאליות כדי למנוע את התרחשותן.

שונה הטרולנושא הגפיים האוסטאופהעורית מודל החולדה על השתלת ואסימטיקה מורכבת מחקר האלוגרפט

פרוטוקול זה מציג מודל חזק, לשחזור של כלי דם מרוכבים allotransplant (VCA) מכוון למחקר בו זמנית של אימונולוגיה והתאוששות תפקודית. הזמן שהושקע בטכניקה קפדנית בהשתלה אורתוטופית ירך ימין באמצע הירך האחורי עם תפורים ביד וסמיכות עצבית מניב את היכולת ללמוד התאוששות תפקודית.

לוקח את הצעד הבא: מודל השתלת גפיים אחוריות קופטציה עצבית כדי למקסם את ההתאוששות תפקודית בחולדה

אנו מתארים מודל של הטרוהנושא השתלת לב הבטן בחולדות, רומז שינויים של אסטרטגיות נוכחיות, אשר להוביל גישה כירורגית פשוטה. בנוסף, אנו מתארים מודל דחייה הרומן על-ידי הזרקה באוזן של תאים חיוניים שרירי הלב, המאפשר ניתוח נוסף השתלת אימונולוגיים בחולדות.

מודל אימונוולוגי עבור הלב הטרוולפית ושריר הלב השתלת תא בחולדות

מאמר זה מציג פרוטוקול השתלת דש אוסטאומיו-עורית הטרוטופית חלקית בחולדות ותוצאותיו הפוטנציאליות במעקב אמצע הטווח.

מודל השתלת הינדימבה הטרוטופית חלקית בחולדות

פרוטוקול זה מתאר טכניקה משופרת להשתלת ריאה שמאלית אורתוטופית בחולדות, תוך התמקדות בהפחתת קושי תפעולי ושיפור שיעורי ההישרדות.

השתלת ריאה שמאלית אורתוטופית בחולדות

פרוטוקול זה מדגים כיצד לבצע קטיעה מתחת לברך בחולדות ולבצע מיד חידוש שרירים ממוקד (iTMR) כדי לחקור אסטרטגיות לטיפול ומניעת כאב הקשור לקטיעה ולהבנה טובה יותר של מנגנוני הכאב הקשורים לקטיעה.

מודל כריתת גפה אחורית מתחת לברך של עכברוש ועצבוב שרירים ממוקד מיידי

אנו מציגים מודל עכבר שניתן לשחזור של אלוטרנסלנטציה מורכבת של גפיים אחוריות לצוואר הטרוטופית. פרוטוקול סופר-מיקרוכירורגי זה, הכולל אנסטומוזות כלי דם בקוטר 0.3-0.5 מ"מ, משלב הנחיית חוטי ניילון ושרוול ורידי. הוא מספק פלטפורמה אמינה למחקרים תרגומיים על סבילות, פגיעות איסכמיה-רפווזיה, ומנגנונים אימונולוגיים באלוטרנסרפלנטציה של כלי דם מרוכב.

השתלת גפה אחורית לצוואר הטרוטופית בעכבר: מודל סופר-מיקרוכירורגי של אלוטרנספלינצ'נציה מורכבת וסקולרית

למד השתלת איברי כליה אורתוטופית בעכברושים לחקר שתל רקמה מרוכבת ופציעות איסכמיה-רפרפוזיה. שיטת החפת הדם מקצרת זמן ניתוח ומאפשרת חקר תגובות חיסוניות ואסטרטגיות מודולציה מכוונת לשיפור הישרדות השתל.

השתלת orthotopic לימב הינד-בחולדות

גלה סרטונים נוספים