בידוד קרטינוציטים בעור האדם: שיטה לתרבית קרטינוציטים ראשוניים מדגימות עור

- קרטינוציטים הם התאים הבולטים ביותר הנמצאים באפידרמיס, או השכבה החיצונית ביותר של העור. הם מסדרים את עצמם בשכבות מרובות מעל הדרמיס, הקשורות לסוגי תאים שונים אחרים כגון מלנוציטים, תאים דנדריטיים ותאי מרקל.

כדי לבודד keratinocytes, להתחיל על ידי נטילת רקמת האפידרמיס מעור האדם. לאחר מכן, לטפל עם מאגר עיכול אנזימטי. אנזימים במאגר מפרקים את חלבוני המטריקס החוץ-תאיים הנמצאים ברקמת האפידרמיס, ובכך גורמים לדיסוציאציה של התא. כעת, הוסף מדיה מתאימה ושבש מכנית את הרקמה.

כדי לשחרר את התאים המנותקים לתרחיף, סנן את תרחיף תאי האפידרמיס דרך מסננת כדי להסיר גושי תאים או פסולת. צנטריפוגה כדי לכרות את תאי האפידרמיס ולהפריד אותם מהסופרנטנט המכיל אנזים. הסר את supernatant ו resuspend את התאים באמצעות מצע גידול keratinocyte מועדף. תרבית את התאים למשך הזמן הרצוי.

במהלך התרבית, המדיה האופטימלית מעשירה את התפשטות הקרטינוציטים על ידי קידום הצמיחה הסלקטיבית שלהם על פני סוגי תאי האפידרמיס האחרים. בפרוטוקול הבא נראה בידוד של קרטינוציטים מרקמת עור אנושית בוגרת.

- איסוף דגימות עור בגודל 10 ס"מ על 15 ס"מ ממתנדבים בוגרים בריאים שעברו ניתוחים פלסטיים. שמרו על קרירות העור על ידי הובלת דגימות העור בקופסת קלקר המכילה גוף קירור. במידת הצורך, יש לאחסן את דגימת העור בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס למשך הלילה. בעזרת מספריים,