גידול מהיר של מלנוציטים ופיברובלסטים ראשוניים של מורין: בידוד מלנוציטים ופיברובלסטים מדגימת עור מורין שלם

- העור מורכב מתאים שונים המאכלסים את שכבותיו השונות. מלנוציטים, התאים מייצרי המלנין, מתמקמים בצומת האפידרמיס-עור, ואילו פיברובלסטים, התאים המייצרים את רקמת החיבור, שוכנים בדרמיס.

כדי לבודד במהירות מלנוציטים ופיברובלסטים, התחל על ידי לקיחת גזע של גור עכבר שעבר המתת חסד. חותכים את העור בגחון לאורך תא המטען. מקלפים את העור המכיל את שכבת האפידרמיס והעור וטוחנים את הרקמה לחתיכות קטנות.

כעת, טפלו עם חיץ עיכול המכיל אנזימי טריפסין וקולגנאז המפרקים את המטריצה החוץ תאית ומשחררים את התאים לתרחיף. צנטריפוגה כדי לפלס את התאים ולהשליך את הסופרנטנט. להשעות מחדש את התאים במדיה מלנוציטים ולהעביר את התרחיף לתוך צלחת multiwell.

במהלך התרבית, רוב הפיברובלסטים נצמדים לקרקעית הבאר, בעוד המלנוציטים ותאי אפידרמיס אחרים נשארים בתרחיף. שאפו את התאים המרחפים והוסיפו מדיה ספציפית לפיברובלסטים לתרבית הפיברובלסטים כדי לקדם את צמיחתם. העבירו את המתלה לבאר מצופה קולגן טרי כדי לסייע ביצירת תרבית דבקה.

יש להוסיף גנטיקה, אנטיביוטיקה ולהוסיף מצע גידול מלנוציטים טרי. גנטיקה מבטלת באופן סלקטיבי את כל הפיברובלסטים שנותרו, בעוד שהתקשורת מקדמת צמיחה של מלנוציטים על פני סוגי תאי אפידרמיס אחרים. בפרוטוקול הבא, נבודד מלנוציטים ופיברובלסטים מעור גור מורין.

- בארון זרימה למינרית, גלגלו לזמן קצר את תא המטען של כל עכבר שעבר המת