Name: דרך פשוטה למדוד את רגישות אתנול זבובים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-02-19T17:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 15 s
Description: למד שיטה פשוטה למדידת רגישות אתנול בזבובי Drosophila melanogaster באמצעות אובדן רפלקס ההתיישרות. שיטה זו מאפשרת להעריך הבדלים ברגישות לכוהל בין זני זבובים שונים ומוטנטים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

אנו מודים Aylin רודן לקריאה ביקורתית של כתב היד, ואנשי המעבדה לדיון מועיל. מחקר זה נתמך על ידי NIH, R01AA019526.

1. יצירת תא חשיפה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גזור בקבוקון תוסף במחצית באמצעות סכין גילוח. לחלופין, להשתמש כדורי צמר גפן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דחוף את התקע בקבוקון וחצי, או כדור צמר גפן, אל החלק התחתון של בקבוקון אוכל לעשות משטח חלק, כי זבובים לא להיתקע בו </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם עושים לתאי חשיפה מרובות, לוודא כי התקע בקבוקון ומזון תופסים נפח זהה בתא אחד. סימן בצד של הבקבוקון יכולים להקל על זה. </li></ol> 2. חשיפת זבובים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף 8 זבובים אחד מין, גיל 1-5 ימים, יום לפני החשיפה לתוך צלוחיות מזון רגיל בלי שמרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תווית אותם בקוד, כך הניסוי הוא עיוור כדי גנוטיפ את המתח בפועל / השתמשו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת שמונה זבובים לתאי חשיפה ידי הקשה. לא להרדים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוספת כמויות קטנות של מזון צבע, חומצה למשל כחול 9, אתנול 200 הוכחה כדי להפוך אותו לגלוי בקלות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעיל התחתון של פקק הבקבוקון, או כדור צמר גפן, עם אתנול 0.5 מ"ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את התקע אתנול לתוך בקבוקון את החשיפה. ודא כי אלכוהול הוא פונה לתוך הבקבוקון, ולא לכיוון הקיר של הבקבוקון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחל טיימר ספירה למעלה. </li></ol> 3. אתנול-Induced שיא שכרות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל דקה לאחר טיימר מופעל, לחץ על תא החשיפה על הספסל, כדי להפתיע את הזבובים לצפות בהם במשך עשר שניות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את מספר הזבובים נייח לרגע אחד. זבובים הם נייח אם הם לא יכולים לרדת גבם, להישאר במקום אחד, או לרטוט במהירות כנפיהם לאורך התקופה כולה תצפית עשר שניות. הזבובים האחרונים נחשבים נייח כי הרוב המכריע של זבובים אלה נייחים בין תקופות של אגף התנועה המהירה. זבובים הם לא נייח אם הם יכולים לקבל את גבם וללכת ו / או את הקיר בקבוקון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משפט החשיפה הוא סיים כאשר 4 או יותר זבובים נרשמות נייח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בטל זבובים והניח לאוויר החדר חשיפה החוצה לשימוש במועד מאוחר יותר. </li></ol> 4. קבע את זמן הרגעה 50% זמן הרגעה 50% (ST50) היא זמן לאחר תחילת החשיפה אתנול כאשר ארבעה מתוך שמונת זבובים להישאר נייח. זה נקבע כדלקמן: או: ברגע המדידה הראשונה כאשר בדיוק ארבעה זבובים הם נייחים. או: אם פחות מארבע זבובים (Y1) הם נייח בנקודה פעם אחת (X דקה), ויותר מארבעה (Y2) בנקודת המדידה בפעם הבאה (X 1 דקה), ואז באופן ליניארי אינטרפולציה ST50 באמצעות הנוסחה: ST50 = (4 - Y1) / (Y2 - Y1) + X 5. חזור על חשיפה לקבוע סובלנות חשיפת זבובים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קבע את ST50 (wt) עבור זן wild-type הבקרה השתמשו בניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשוף את קבוצות הניסוי של זבובים אתנול כמתואר לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד ST50 שלהם (1), אבל ממשיכים לחשוף עד שתגיע השעה 2x ST50 (wt). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת הזבובים בחזרה לתוך בקבוקון שימורים ריקה, והחזק במשך 4 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Re-לחשוף את זבובים, ולקבוע את ST50 (2) החשיפה 2. </li></ol> קבע סובלנות חישוב סובלנות% כמו (ST50 (2) / ST50 (1) - 1) x100. 6. נציג תוצאות: מוצג כאן, כמה תוצאות נציג השגנו עם 6-8 בקבוקונים של זבובים לכל גנוטיפ ואת המינון. אם השגיאה הרגיל שלך הוא גדול יותר באופן משמעותי, אז בעיה שיטתית התרחשה סביר. ודא כי אתנול פניהם לתאי חשיפה, וזה התאים הם באותו נפח. <img src="/files/ftp_upload/2541/2541fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> באיור 1. בתגובה עקומת מנה של סוג בר זבובים שנחשפו אחוזי הגוברת של אתנול. שמונה צלוחיות של זבובים שנחשפו למנה ומין. זבובים זכר ונקבה להראות ST50 באותו מינון כל (p&gt; 0.22, 2-way ANOVA), בעוד ST50 ברחבי מינונים פוחתת משמעותית עם הגדלת המינון אתנול (p &lt;0.001). שים לב זבובים מעל צפוף בקבוקים ניתן באופן משמעותי יותר מאשר אלה מבקבוקי בריא, וזה ההבדל גודל יכולים להשפיע על ST50. כל בקבוק Seed עם נקבות 15-20 הנחת 1-2 ימים להשיג צפיפות מיטבית הזחל לבקבוק. <img src="/files/ftp_upload/2541/2541fig2.jpg" alt="איור 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 2"> איור 2. חשיפת טס אתנול 90%, או 100% או משחזרת את שתואר לעיל אתנול התנגדות הנגרמת על ידי הלבן rabbit1 mutation2 (p &lt;0.001, 2-way ANOVA). <img src="/files/ftp_upload/2541/2541fig3.jpg" alt="איור 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 3"> איור 3. חזור על חשיפה של 100% אתנול, במרווחים על ידי מרווח התאוששות 4 שעה, גורמת לעלייה משמעותית ST50 לאחר החשיפה השניה (p &lt;0.001, לא מזווגמבחן). שים לב הזבובים נחשפו במשך 24 דקות במהלך החשיפה הראשונה (המקביל ל ve פעמיים שלהם na ST50). חשיפה לכמות זמן קצר יותר (12 דקות) לא גרמה לעלייה משמעותית ST50 בחשיפה מחדש (מידע לא מוצג).

<ol><li>Bainton, R. J., Tsai, L. T. -Y., Singh, C. S., Moore, M. S. Curr. Biol. 10, 187-194 (2000).</li>
<li>Rothenfluh, A., Threlkeld, R. J., Bainton, R. J., Tsai, L. T. -Y. Cell. 127, 199-211 (2006).</li>
<li>Devineni, A. V., Heberlein, U. Curr. Biol. 19, 2126-2132 (2009).</li>
<li>Scholz, H., Ramond, J., Singh, C. S., Heberlein, U. Neuron. 28, 261-271 (2000).</li>
<li>Allen, M. J., Godenschwege, T. A., Tanouye, M. A., Phelan, P. Semin. Cell Dev. Biol. 17, 31-41 (2006).</li>
<li>Feany, M. B., Bender, W. W. Nature. 404, 394-398 (2000).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

במצגת זו, גיבשנו דרך פשוטה לקבוע אתנול-Induced שכרות בהתבסס על מבחני הקודם שתואר על ידי Bainton et al. 2000 1, Rothenfluh et al. 2006 2. מאז אלכוהול-Induced הרגעה היא בקורלציה עם העדפה שתיית אלכוהול 3, assay זה רלוונטי לחקר הפרעות שימוש באלכוהול. Assay המתואר מבוסס על בהלה הנגרמת geotaxis שלילי, ואיך חשיפה אלכוהול מפריע תגובה זו מולדת. לפני תחילת החשיפה, לוודא שכל זבובים שלך להראות תגובה נורמלית כדי לא להבהיל כזה, כלומר לאחר הקשה את זבובים הבקבוקון מזון, הם צריכים את כל המהלך מלמטה תוך זמן 10 תצפית השני. דוגמאות של זבובים לאחר geotaxis שלילית מופחתת כוללים המפץ רגיש מוטנטים תפיסת 5, תנועה מחסר זבובים נגרמת על ידי התנוונות של נוירונים דופמין 6. למרות assay תיאר היא פשוטה יחסית, משתנים two בזכות תשומת הלב הרבה ביותר כדי להבטיח תוצאות לשחזור. ראשית, כל צלוחיות החשיפה צריך להיות באותו נפח. זה כולל לוודא את החלק התחתון של הבקבוק מכיל באותו נפח של כדור + בקבוקון תוסף / כותנה מזון, כמו גם להכניס את התקע אתנול המכילים את אותו המרחק עבור כל בקבוקון. בקבוקון ריק לחלוטין יכול לשמש assay זה, אבל זה מוביל ערכים ST50 יותר, להקטין את התפוקה של assay. Assay זה מתאים גם כדי לקבוע את כמות הזבובים סובלנות לפתח אתנול בחשיפה חוזרת. מספר משתנים יש לשקול כאשר עושים חשיפות חוזרות. ראשית, המרווח בין החשיפה מתוארת כאן 4 שעות. משתנה זה יכול להיות שונה, אבל אנחנו ממליצים לא להיות נמוך מ 2 שעות, כדי להבטיח פינוי של אתנול מחשיפה הראשונה. ראה שולץ et al. 2000 4 עבור קינטיקה של פיתוח סובלנות אתנול וריקבון. המשתנה השני הוא לשקול את משך החשיפה הראשונה. זה כמובן חייב להיות זהה עבור השליטה והזבובים ניסיוני. עם זאת, זה לא עלול לגרום את אותה כמות האתנול נמסר הן אלו זנים לעוף. זבובים מסומם לספוג אתנול יותר זבובים פעיל 2, ולכן זן זה sedates מוקדם עלול לקבל מינון גבוה יותר מאשר זן מאוחר יותר, מרגיעים, וכך לפתח עמידות יותר עקב מינון ראשוני גבוה יותר. אנחנו מאוד בזהירות את הקורא כאשר משווים פיתוח סובלנות של זנים המראים הבדלים ST50 הראשוני (1). Assay אנו מתארים כאן הוא כלי שימושי בקלות reproducibly בקביעת זבובים תגובות התנהגותיות לאלכוהול.

<table><tbody><tr><td>מבחנות חשיפה</td><td>www.flystuff.com</td><td>32-116</td><td></td></tr><tr><td>פקקים</td><td>www.flystuff.com</td><td>49-102</td><td></td></tr><tr><td>Acid Blue 9</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>861146</td><td></td></tr></tbody></table>

דרך פשוטה למדוד את רגישות אתנול זבובים

A Simple Way to Measure Ethanol Sensitivity in Flies

מינון נמוך של אתנול לגרום זבובים להיות היפראקטיבי, ואילו במינונים גבוהים הם מרגיעים. רגישות כדי הרגעה אתנול-Induced של זן זבוב נתון בקורלציה עם העדפה אתנול כי זה זן, ולכן הרגעה הוא מדד רלוונטי ביותר ללמוד את הגנטיקה של התגובות אלכוהול ושתייה. אנו מדגימים דרך פשוטה לחשוף טס אתנול למדוד תופעות המשכר שלו. Assay אנו מתארים יכול לקבוע רגישות חריפה, כמו גם סובלנות אתנול הנגרם על ידי חשיפה חוזרת. היא לא דורשת התקנה מעורב מבחינה טכנית, ולכן יכול להיות מיושם במעבדה עם כל הכלים הבסיסיים תרבות לעוף.

Assay פשוט למדוד את ההשפעות מרגיעים של אתנול על<em&gt; תסיסנית</em&gt; זבובים, המבוסס על אובדן ליישר רפלקס, מתואר.

מינונים נמוכים של אתנול גורמים לזבובים להפוך להיפראקטיביים, בעוד שמינונים גבוהים הם מרגיעים. הרגישות להרגעה המושרית על ידי אתנול של זן זבובים נתון...

שלום, אני תומס מייפלס מהמעבדה של ד"ר אדריאן רותן במחלקה לפסיכיאטריה במרכז הרפואי UT Southwestern בדאלאס. היום אני אדגים פרוצדורה פשוטה לקביעת הרגישות של זבובים לסדציה הנגרמת על ידי אתנול. בדיקה זו מבוססת על אובדן רפלקס הרכיבה ויכולת ההליכה של הזבובים לאחר חשיפה לאתנול.מדד זה יכול לשמש לקביעת הבדלים ברגישות לאלכוהול בין זנים שונים של דרוזופילה ולבין מוטנטים. ניתן להשתמש בבדיקה זו גם כדי להשרות סבילות בזבובים, כאשר סבילות היא תגובה מופחתת לאלכוהול לאחר חשיפה חוזרת. בואו נתחיל.עבור ניסוי זה, תזדקקו למבחנות הבאות. עם שמונה זבובים פירות, דור שאספת יום או יומיים לפני כן. ניתן לבצע את החשיפות עם זכרים או נקבות.עם זאת, כל מבחנה צריכה להכיל רק מין אחד. מבחנת מזון ריקה שאינה מכילה זבובים, סכין גילוח, שני פקקי מבחנה העשויים מחומר דמוי כותנה. אם אין ברשותכם פקקים מסוג זה, ניתן להשתמש גם בכדורי צמר גפן, מיקרופיפיה של 1000 microliter עם טיפים, אתנול בריכוז 200 proof המכיל מאכל צבע שניתן להשיג בכל חנות מכולת, וטיימר.הדבר הראשון שעלינו לעשות הוא להכין תא חשיפה שבו נחשף את הזבובים לאתנול וננטר את הניידות שלהם. כדי ליצור תא זה, חתכו תחילה פקק של מבחנה לחצי באמצעות להב תער. לאחר מכן, דחפו את אחד החצאים לתחתית המבחנה כך שיכסה את המזון.פעולה זו יוצרת משטח ישר שאינו דביק עליו יכולים הזבובים ללכת. אם אתם משתמשים בכדור צמר גפן, לחצו אותו למטה בצורה חלקה ונסו להפוך אותו לפחות סיבי ככל האפשר כדי שהזבובים לא ייתקעו בסיבי הצמר. אם אתם מכינים מספר תאים, ודאו שהמזון ופקק המבחנה תופסים את אותו נפח בכל תא.פעולה זו מבטיחה שהזבובים בכל תא יהיו חשופים לאתנול בנפח זהה. עם תרגול, קל לחשוף שלושה מבחנות של זבובים במקביל. לאחר הכנת תאי החשיפה, ניתן כעת לחשוף את הזבובים לאתנול.ראשית, העבירו מבחנה של שמונה זבובים לתא חשיפה, ואטמו את התא באמצעות הפקק של המבחנה שבה היו הזבובים במקור. לאחר מכן, טפטפו באמצעות פיפט 500 µL של אתנול צבוע בריכוז שבחרתם על קצה אחד של פקק מבחנה דמוי כותנה. לאחר מכן, החליפו את הפקק של תא החשיפה בפקק המצופה באתנול, כאשר הקצה המצופה באתנול מוכנס לתוך התא.מיד לאחר הוספת הפקק המצופה באתנול לתא החשיפה, הפעל טיימר. הצבע שבאתנול מסייע להבטיח שהאתנול פונה פנימה אל תא החשיפה ולא אל דופן הבקבוקון. דבר זה חשוב במיוחד אם נעשה שימוש בכדורי צמר במקום בפקקי buzz, מכיוון שכל צד של כדור צמר יכול לפנות פנימה אל הבקבוקון.בחשיפה זו, אנו משתמשים ב-100% alcohol, אשר מפעפע כעת אל תוך תא החשיפה שבו הזבובים שואפים אותו מהאוויר. בכל דקה לאחר הוספת הפקג המצופה ב-ethanol לתא החשיפה, נספור כמה זבובים הפכו לנייחים, כלומר כאלה שאינם מסוגלים להתהפך ולהליכת. ככל שהזבובים נשארים ניידים זמן רב יותר, כך הם עמידים יותר בכל מרווח של דקה אחת.הבהילו את הזבובים על ידי הקשה על התא על גבי השולחן, כדי להבטיח שכל הזבובים המסוגלים לזוז אכן זזים. צפו בזבובים במשך 10 שניות לאחר ההקשה כדי לאפשר להם להתחיל לנוע או להתהפך בכל מרווח של דקה אחת. תיעדו כמה משמונת הזבובים נישארים ללא תנועה בתחילת הניסוי.מרבית הזבובים ירוצו במהירות במעלה דופן הבקבוקון לאחר שייבהלו. לאחר כשישה דקות של חשיפה ל-100% ethanol, הם יתחילו לנוע באיטיות ולעתים בצורה לא עקבית תוך 12 דקות. מרבית הזבובים יהיו ללא תנועה, ולא יוכלו ללכת או להיזדקף כאשר הם שוכבים על גבם.יש לספור רק זבובים המסוגלים להושיב את עצמם וללכת כזבובים ניידים; זבובים המזיזים את רגליהם או כנפיהם במקום בלבד יש לספור כזבובים נייחים. זבובים שנותרים על גבם לאורך כל תקופת התצפית ייספרו אף הם כנייחים, שכן חוסר יכולתם להושיב את עצמם היא סימן להרעלה. זבובים המרעידים את כנפיהם בעוצמה לאורך כל זמן התצפית בן עשר השניות ייספרו כמו כן כנייחים, גם אם הם משנים את מיקומם. הרוב המכריע של זבובים אלו הם נייחים בין פרקי תנועת כנפיים מהירה.לסיכום, זבובים המסוגלים להתהפך ולהליכה נחשבים לניידים; זבובים שאינם מסוגלים להתהפך, מזיזים את רגליהם וכנפיהם במקומם, או מרעידים את כנפיהם במהירות נחשבים לנייחים. אם נחיל כללים אלו, נראה כי מספר רב יותר של זבובים מסוג wild type הופכים לנייחים ככל שזמן החשיפה לאדי אתנול עולה. הערך שבו משתמשת בדיקה זו כדי לכמת את הרגישות לאתנול הוא זמן סדציה חציוני, או MST.אנו מגדירים את ה-MST כדקות החשיפה לאתנול הנדרשות כדי שארבעה משמונת הזבובים בתא החשיפה יהפכו לנייחים. ערך זה נקבע בקלות אם בדיוק ארבעה זבובים נייחים בפרק זמן תצפית מסוים. לדוגמה, אם בדיוק ארבעה זבובים נייחים לאחר 11 דקות של חשיפה, הרי ש-11 הוא ה-MST.אם בדיוק ארבע זבובים נישארים סטטיים לאחר 11 דקות של חשיפה ובדקה ה-12 המצב נשאר זהה, יש לקחת את הערך הראשון, שכן זהו הזמן שבו הזבובים הגיעו לראשונה ל-ST שלהם. אם ארבעה זבובים אינם סטטיים בפרק זמן תצפית ספציפי, יש לבצע אינטרפולציה ליניארית של הזמן שבו ארבעה זבובים הפכו לסטטיים. לדוגמה, אם מספר הזבובים הסטטיים קפץ משלושה לחמישה בין הדקה התשעית לעשירית של החשיפה, ניתן לקבוע גרפית שה-MST הוא 9.5. הנתונים הבאים שנאספו באמצעות בדיקה זו מראים כי מערך ניסויי זה הוא דרך מדויקת למדידת רגישות לאתנול.בניסויים הבאים נעשה שימוש ב-N של ששה עד שמונה מבחנות, כפי שצוין בתוך הברים. ה-MST של זבובים זכרים מסוג wild type שנחשפו ל-100%Ethanol הוא בערך 11 דקות עם שגיאת תקן נמוכה. השונות מדי יום היא נמוכה ובמרבית המקרים אינה מובהקת סטטיסטית, אך אנו עדיין ממליצים למדוד את קבוצות הניסוי והביקורת במקביל באותו היום.שימו לב גם לכך שהזבובים שנחשפו ביום A וביום B אינם אותם פרטים. אלו הם אחים המייצגים את אותו המאגר הגנטי; זבובים זכרים ונקבות שנחשפו ל-100% Ethanol אינם מראים הבדל ב-MST. עם זאת, אנו ממליצים להיצמד למין אחד.אם נחשף זבובים זכרים ונקבות למינונים עולים של אתנול, נקבל עקומת תגובה למינון טובה המראה ירידה מובהקת סטטיסטית ב-MST כפונקציה של ריכוז אתנול גבוה יותר. בדיקה זו משחזרת גם פנוטיפים שפורסמו בעבר ונמדדו באמצעות מערך אידוי אתנול מורכב יותר; זבובים עם מוטציית right rabbit one הראו עלייה משמעותית ב-MST. עלייה זו נצפתה ב-100% וכן ב-90% Ethanol.באמצעות בדיקה זו, אנו יכולים גם להשרות ולמדוד סבילות לאתנול ב flies. סבילות מוגדרת כהפחתה בתגובה לאלכוהול, בעקבות חשיפה מוקדמת לאלכוהול להשראת הסבילות. חשפו מבחנה של flies לאתנול למשך זמן השווה בקירוב לפעמיים ה-MST שלהם.לדוגמה, אנו חושפים את זכרי ה-Berlin wild type למסננת של 100% ethanol למשך 24 דקות. לאחר החשיפה, הקישו בעדינות את שמונת הזבובים חזרה אל מבחנת המצע שלהם, שם תניחו להם להתאושש במשך ארבע שעות. רשמו את ה-MST המקורי של הזבובים על המבחנה לאחר ארבע שעות התאוששות, חשפו שוב את אותם הזבובים בדיוק לאותו מנה של ethanol ורשמו את ה-MST השני שלהם.כפי שניתן לראות בגרף זה, ה-MST של החשיפה השנייה לאתנול גבוה משמעותית מה-MST של החשיפה הראשונה, מה שמעיד על כך שהזבובים פיתחו סבילות להשפעות המרדימות של האתנול. מדד לסבילות מחושב על ידי חלוקת ה-MST השני של מבחנה נתונה של זבובים ב-MST הראשון של אותם זבובים, והחסרת 1 מהתוצאה; הערך מבוטא כאחוז סבילות, שבמקרה שלנו הוא כ-50%. תודה שצפיתם ובהצלחה בניסוי שלכם.

a-simple-way-to-measure-ethanol-sensitivity-in-flies

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

דרוזופילה התפתחה כמערכת מודל משמעותית עבור לנתח את הבסיס התאי ומולקולרית של תגובות התנהגותיות לאלכוהול. כאן אנו מציגים פרוטוקול לאיסוף נתונים רגישות אלכוהול בהקשר היממה שיכולה להיות מיושם בקלות לניסויים אחרים, והוא מתאים היטב למחקר לתואר ראשון.

FlyBar: מתן אלכוהול לזבובים

בדיקות פשוטות למדידת רגישות לאתנול וסבילות מהירה בדרוזופילה מקלות על השימוש באורגניזם מודל זה לחקירת התנהגויות חשובות אלה הקשורות לאתנול. כאן מתוארת בדיקה פשוטה יחסית וניתנת להרחבה למדידת רגישות לאתנול וסבילות מהירה בזבובים.

Assay זול, Scalable התנהגות למדידת אתנול הרגעת רגישות וסובלנות מהירה ב<em&gt; דרוזופילה</em

C. elegans הוא מודל שימושי לחקר ההשפעות של אתנול על ההתנהגות. אנו מציגים בדיקת התנהגותית שמכמתת את ההשפעות של אתנול על מהירות התנועה של תולעים זוחלות; ניתן למדוד עם הבדיקה הזו גם את הרגישות הראשונית וגם את התפתחות הסובלנות התפקודית החריפה לאתנול.

Assay למדידת ההשפעות של אתנול במהירות התנועה של<em&gt; Elegans Caenorhabditis</em

אנו מתארים פרוטוקול גרימת מתגמל nonrewarding חוויות בזבובי פירות (תסיסנית) באמצעות צריכת אתנול מרצון כאמצעי לשינויים במדינות גמול.

דרך פשוטה למדוד שינויים בהתנהגות שוחרת זכה שימוש<em&gt; תסיסנית</em

בדיקת FEeder (CAFE) היא שיטה פשוטה, ידידותית לתקציב ואמינה ביותר לחקירת מנגנונים העומדים בבסיס צריכת מזון. בשימוש עם אורגניזם המודל הגנטי הרב-תכליתי Drosophila melanogaster, הוא מספק אמצעי רב עוצמה להשגת תובנות חדשות לגבי מנגנוני ויסות צריכת מזון.

את assay נימי מזין מודד צריכת המזון ב<em&gt; תסיסנית</em

שיטות נוכחיות למדידת רגישות האלכוהול בדרוזופילה נועדו לבחון קבוצות של זבובים. אנו מציגים בקלות, בעלות נמוכה, התפוקה גבוהה הערכה להערכת רגישות הרגעה אלכוהול במספר גדול של זבובים בודדים. השיטה אינה דורשת כלים מיוחדים וניתן לבצעו בכל מעבדה המשתמשת בחומרים משותפים.

שיטת תפוקה גבוהה עבור מדידת אלכוהול הרגעה זמן של הפרט דרוזופילה מלאנוגסטר

השיטת Flypub מודדת את ההתנהגויות שבהן מציג הפרי את מלאנוזופילה מלוגסטר תחת השפעת האתנול. ניתן לשלוט בקלות על ידי הניסויים בכל הרמות וליישם גירויים שונים, הקלה על שימוש בסמים ולימודי התמכרות.

Flypub ללמוד אתנול המושרה ביטול עכבה התנהגותית הרגישות

אטריה ו בדיקות Capellini טיפול מיומנות בכפו לנצל את הנטייה הטבעית של מכרסמים לתפעל פריטי מזון באמצעות בכפו מיומן ותנועות ספרות. בעלי חיים הם צילמו בזמן הטיפול גדילים קצרים של פסטה יבשה מבושלת. השמעת וידאו בהילוך איטי מאפשרת כימות של התאמות בכפו.

אטריה ו בדיקות Capellini טיפול: מדדים כמותיים פשוט פונקציה של מיומנות בכפו אצל חולדות ועכברים

עכברים וחולדות, בשל הזהירות הטבעית שלהם, הם בתחילה איטית לצרוך מזון רומן, במיוחד במקום רומן. Hyponeophagia זה יכול בקלות למדוד במעבדה, למרות בחיות מעבדה הם הרבה פחות חרדים מאשר עמיתיהם בטבע...

Hyponeophagia: מידה של חרדה העכבר

שיטה כדי לקבוע את מהלך הזמן של ריכוז אתנול במוחם של חולדות במהלך אתנול אופרנטית מנהל עצמי מתוארת. גז כרומטוגרפיה עם זיהוי יינון להבה משמשת לכימות אתנול בדגימות dialysate, כי יש לו את הרגישות הנדרשת לנפחים הקטנים שנוצרו.

Microdialysis של אתנול במהלך אתנול נחישות ממשל עצמי ואתנול אופרנטית על ידי גז כרומטוגרפיה

למד שיטה פשוטה למדידת רגישות אתנול בזבובי Drosophila melanogaster באמצעות אובדן רפלקס ההתיישרות. שיטה זו מאפשרת להעריך הבדלים ברגישות לכוהל בין זני זבובים שונים ומוטנטים.

דרך פשוטה למדוד את רגישות אתנול זבובים

גלה סרטונים נוספים