26 ביוני 2011
השימוש חזירים מקומיים זעירים במדע גדל באופן משמעותי בשנים האחרונות. באמצעות הוכחת כיצד לבצע אינטובציה, צנתור שלפוחית השתן transurethral, עורק הירך ואת צנתור וריד, כמו גם זלוף transcardial, אנו שואפים להגביר עוד יותר את הערך של גטינגן minipigs במחקר ביו.
לבצע אינטובציה אנדוטרכיאלית בכל פעם שחזיר קטן עובר הרדמה כללית כדי להקל על הניתוח מכיוון שהוא שומר על נתיב נשימה פטנט, מאפשר אוורור מסייע ומגן על דרכי הנשימה מפני שאיבה. ניתן להחדיר מיני חזירים מתנוחות שונות, אך החזקת החיה על גבה נוטה להיות קלה יותר למי שמבצע באופן קבוע אינטובציה אנושית מכיוון שהיא מציגה את דרכי הנשימה בצורה דומה מלבד אמצעי הנשמה בסיוע. הציוד הדרוש לאינטובציה אנדוטרכיאלית הוא מתלים לפתיחת הפה, יניקה בלחץ נמוך עם קצה קהה, לרינגוסקופ וטרינרי עם להב ישר באורך של בין 17 ל-25 סנטימטרים, מזרק עם סטטוסקופ אוויר וסרט דבק.
למעיים בוגרים ומיני חזירים. צינור אנדוטרכיאלי בגודל חמישה עד שבעה מילימטרים מתאים. בסרטון זה נעשה שימוש בצינור 5.5 מילימטר.
המיני חזיר מונח על גבו ונתמך כראוי. על מנת להבטיח שמעבר הגרון יישמר ישר, הלשון נשלפת מעט החוצה והלסת מוחזקת פתוחה על ידי עוזר. מבלי להאריך יתר על המידה, סיבוב הראש של דרכי הנשימה או הארכה מוגזמת של הראש עלולה לחסום את דרכי הנשימה, מה שהופך את פתח הגרון לקשה יותר לזיהוי.
הגרון משמש לדיכוי הלשון וקצה היניקה משמש לעקירת האפיגלוטיס מהחיך הרך. לאחר מכן משתמשים בקצה הגרון כדי ללחוץ את האפיגלוטיס כלפי מעלה לכיוון בסיס הלשון, וחושף את פתח הגרון. פתיחת הרטינואידים, הסחוסים ומיתרי הקול נראים לעין, והצינור האנדוטרכיאלי מתקדם בעדינות עם סיבוב קל לתוך קנה הנשימה.
במהלך התפוגה, שרוול הצינור מנופח על פי מפרט היצרן. תוך הקפדה על מניעת ניפוח עודף, שעלול לגרום לנפיחות ובצקת בדרכי הנשימה, לחזירים יש סימפונות לאוורור אונת ריאת הגולגולת הימנית. לכן חשוב למקם את הצינור מעל התפצלות קנה הנשימה.
זה מקל על ידי שימוש בגודל הצינור הנכון ועל ידי הידוק הקצה הפרוקסימלי של הצינור בגובה החוטם באמצעות סרט דבק. כאשר המיני חזיר מונשם כהלכה, יש להרגיש מעבר חופשי של אוויר דרך הצינור והאזנה בחזה אמורה לחשוף קולות נשימה הן בצד שמאל והן בצד ימין של בית החזה. עם חיבור מכונת ההנשמה עם מערכת הניטור למיני חזיר, ערכי הפחמן הדו חמצני הפיזיולוגיים צריכים להיות ניתנים למדידה וניתן לצפות בעקומת הפחמן הדו חמצני העוקבת אחר דפוס הנשימה שנקבע על ידי הגדרות מכונת ההנשמה.
אינטובציה אנדוטרכיאלית של מיני חזירים יכולה להיות מאתגרת מכיוון שמעבר הגרון צר והקרום הרירי של מיתרי הקול עובר טראומה בקלות. אם נעשה שימוש בצינור גדול מדי או בכוח רב מדי, השימוש בתרסיס קסילוקאין או בהרפיית שרירים יכול להקל על החדרת הצינור. אך השימוש בחוסמים עצביים-שריריים צריך להיעשות רק על ידי צוות המאומן היטב בהליכים כאלה.
צנתור שלפוחית השתן עשוי לשמש כדרך לנטר את ייצור השתן, מה שיכול לספק מידע שימושי על מצב ההידרציה כמו גם על תפקוד הכליות והלב וכלי הדם במהלך פרוצדורות כירורגיות ארוכות. צנתור שלפוחית השתן דרך השופכה נעשה בקלות אצל חזירות. בעוד שהליך זה קשה ביותר, אולי בלתי אפשרי אצל זכרים עבור מיני חזירים בוגרים, קטטר פולי צרפתי בגודל 8 או 10 מתאים בשל העקמומיות והגודל של השופכה החיצונית.
עדיף לפתוח קטטר עם סטילט. הציוד הדרוש כולל מלקחיים עם קצה קהה ספקולום, מזרק עם חומר סיכה מלוח ושקית ניקוז שתן סגורה. על מנת לדמיין בצורה הטובה ביותר את פתח השופכה החיצוני במהלך הצנתור, מניחים את החזיר המיני על גבו עם התמיכה מתחת לאזור המותני.
בזמן שעוזרת מושכת את הרגליים האחוריות, פתח השופכה החיצוני הנשי ממוקם ברצפת הנרתיק, כשליש עד מחצית המרחק לצוואר הרחם. עם זאת, מכיוון שהחיה מונחת על הגב, מיקום פתח השופכה ייראה הפוך. הצנתר נשלט באמצעות מלקחיים עם קצה קהה, כך שקצה הקטטר נמצא בהמשך למלקחיים.
הכנס בזהירות את הקטטר לפתח השופכה. השופכה עוברת טראומה בקלות אם משתמשים בכוח רב מדי במהלך הצנתור, עם זאת, ניתן להרגיש בתחילה התנגדות קלה עד שהקטטר עובר את סוגר השתן החיצוני. אם בעיה זו נמשכת, הדבר עשוי להצביע על כך שהחיה אינה מורדמת מספיק עמוק.
הפתרון הוא לחכות זמן מה ולתת להרדמה לעשות את שלה. כאשר הצנתר מגיע לשלפוחית השתן, הסר את הסגנון והשתן ייראה זורם. נפחו את הבלון במי מלח בהתאם למפרט היצרן, ומשכו בעדינות את הקטטר החוצה עד שהבלון נתפס בצוואר שלפוחית השתן.
חבר את שקית ניקוז השתן של המערכת הסגורה, הדבק את הקטטר לזנב כדי למנוע תזוזה מקרית של הקטטר. כאשר מטפלים בבעל החיים עם הכשרה וניסיון מתאימים, ניתן לבצע צנתור שלפוחית השתן דרך השופכה בקושי מועט. הליך זעיר פולשני זה יכול למנוע זיהום של ציוד טכני רפואי עדין והארכת שלפוחית השתן כואבת, העלולים לפגוע בבעלי חיים ולהשפיע על הניסוי עקב טונוס נרתיקי מוגבר ופרמטרים פיזיולוגיים משתנים.
צנתור עורקי וורידי שימושי להשגת דגימות דם חוזרות ולניטור פרמטרים פיזיולוגיים שונים. בעת ביצוע צנתור כלי דם במחקרי הישרדות, יש להשתמש בטכניקה אספטית קפדנית כדי למנוע זיהומים. הציוד הדרוש כולל אזמל, קצה קהה, מספריים כירורגיים, מלקחיים לרקמות, קצה קהה קטן, מלקחיים כירורגיים, מפסק רקמות קטן השומר על עצמו, החלפות כירורגיות של מחזיק מחט, תפר עם מי מלח שהופרין במחט כנוזל שטיפה לשמירה על סבלנות הצנתר.
שתי צינוריות 18 מד IV שתיים ארבע נדן קצה בהיר צרפתי עם מבוא וחוט G סלדינגר. עומק ההרדמה מוערך על ידי בדיקת רפלקס הכאב הבין-דיגיטלי. ניגשים לעורק הירך ולווריד כשהחזיר המיני מונח על גבו והרגל האחורית נסוגה לרוחב.
זהה בקפל העור בין השריר הגרצילי לשריר הסרטורי היכן נעלמת פעימת החלק השטחי של עורק הספנוס המדיאלי. בצע חתך עור שטחי אורכי בגולגולת עד לנקודה זו, ובכך הימנע מפגיעה בשוגג בכלי הספנוס המדיאלי. השתמש במספריים עם קצה קהה כדי לנתח את הרקמה התת עורית הבסיסית.
חלוקת הפאשיה של שריר הסרטוריוס והגרציליס מחולקת גולגולת לאתר החדירה של כלי הספנוס המדיאלי. תחילה עם קצה קהה קטן, מלקחיים כירורגיים, ואז באופן דיגיטלי שתי קבוצות השרירים מופרדות באמצעות מפסק רקמות קטן השומר על עצמו תוך הקפדה לא לפגוע בעצב הירך ובכלי הדם, העורק מבודד לאורך של כסנטימטר עד שני סנטימטרים. בעזרת דיסקציה קהה, סובב את מחט הון פלון המשופעת כך שהלומן פונה כלפי מעלה.
כופפו מעט את המחט כך שהיא תעקוב אחר עקמומיות הכלי ביתר קלות. זכור לבדוק אם המחט עדיין יכולה לנוע קדימה ואחורה. העורק מנוקב.
המחט נסוגה וחוט ההנחיה של הסלדינגר מוכנס דרך צינור הוונטון. הסר את צינור ה-ven flon תוך הפעלת לחץ עדין על העורק כדי להבטיח קיבוע של חוט ה-G. הנדן עם המבוא מוחדר מעל חוט המלח ומתקדם למצב הרצוי, ולאחר מכן מסירים את המכניס והתפיסה או החוט.
וריד הירך ממוקם ממש מתחת ומדיאלי לעורק. לאחר בידוד הווריד באמצעות דיסקציה קהה, הווריד עובר קנולציה כפי שתואר קודם לכן עבור העורק. כדי לוודא שגם העורק וגם הווריד מצנתרים כהלכה, יש לשאוב דם משני הנדנים ולהשוות את צבע הדגימות.
בכל פעם שאתה לוקח דגימת דם, זכור לאחר מכן לשטוף את הצנתרים במי מלח הפריניזציה. על מנת לשמור על סבלנות הצנתר, הצנתרים מאובטחים והעור סגור. עם כמה תפרים, ניתן להניח לולאת כלי דם סביב העורק והווריד על מנת לקבע את כלי הדם לפני הניקוב.
למרות יתרונותיו, אנו בדרך כלל נמנעים משלב נוסף זה מכיוון שהוא דורש חיתוך יתר של הכלים ומגביר את הסיכון לפגיעה בענפים הצדדיים והעמוקים. הצילומים הנוכחיים מדגימים כיצד לצנתר את כלי הירך. צנתור כלי הירך עדיף על צנתור כלי הצוואר לנוחות הגישה.
בעת ביצוע ניסויים הכוללים נוירוכירורגיה סטריאוטקסית מבוססת מסגרת והדמיית מוח, זלוף טרנס-קרדיאלי הוא שיטת הקיבוע היעילה ביותר ומניב תוצאות בולטות. בעת הכנת איברי חזיר מיני להיסטולוגיה והיסטוכימיה, יש צורך בציוד הבא לצורך ההליך. נוזלי שפע רלוונטיים למערכת הזלוף, מזרק צינורית IV, אזמל פנטוברביטל, קצה קהה, מספריים כירורגיים, מספריים לעצם ושני מלקחיים גדולים המחזיקים את עצמם, שלפחות לאחד מהם יש קצה מעוקל.
מפסק חזה שומר על עצמו אינו הכרחי לחלוטין, אך הוא מקל על ההליך במידה ניכרת. יש לבצע זלוף טרנס-קרדיאלי בחדר מאוורר היטב עם מערכת שאיבת אדים בעוצמה גבוהה ומתקנים המאפשרים איסוף של שמונה נוזלים ודם בשפע לסילוק בטוח לאחר מכן. לאחר הזרקת מנה קטלנית של פנטה ברביטל, בדוק את רפלקס הכאב הבין-דיגיטלי.
הגישה הטובה ביותר ללב ולאבי העורקים ניתנת באמצעות סטרנוטומיה חציונית. בצע חתך עור אורכי עמוק המשתרע מהמנובריום לתהליך הקסיפואיד של עצם החזה. קבל גישה לחלל בית החזה על ידי ביצוע חתך קטן בסרעפת ממש מתחת לתהליך ה-xiphoid.
הכנס את מזמרות העצם לחלל בית החזה וחצה את עצם החזה יש לנקוט בזהירות בעת ביצוע הליך זה מכיוון שהלב עלול להידבק במקום כלשהו לחלק הפנימי של עצם החזה. לאחר חלוקת עצם החזה, הכניסו את מפסק החזה המחזיק את עצמו ופתחו את חלל בית החזה אם עדיין שלם, בצעו חתך קטן בקרום הלב בקודקוד הלב, ולאחר מכן פתחו דיגיטלית את שק קרום הלב. זהה את החדר השמאלי, האורקל הימני ואבי העורקים.
יחד עם וריד הקוואל העליון, בצע חתך שטחי קטן ליד קודקוד הלב וגש לחדר השמאלי על ידי ניקוב שריר הלב עם מכשיר קהה. הכנס את צינורית הזלוף לתוך החדר השמאלי והעבר את גולגולת קצה הצינורית לתוך אבי העורקים. כאשר הצינורית מורגשת בין האצבע השנייה לשלישית באבי העורקים, מהדקים את הצינורית למקומה.
בעזרת המלקחיים המעוקלים המחזיקים את עצמם, בצע חתך לתוך האורקל הימני והתחל להזריק את הקיבוע דרך צינורית הזילוף. ניתן להרגיש את זרימת השמונה השופעת באבי העורקים ודם ישפך דרך האורקל הימני החרוט כאשר זרימת שמונה הפרפיוז לתוך כלי החזיר הקטנים נמשכת. שימו לב כיצד שפע מערכתי עם פרה-פורמלדהיד גורם למתיחת יתר של הגפיים ועוויתות של השרירים השטחיים עקב קישור צולב של אלדהיד של עצבים ושרירים.
בעת שימוש במערכת זלוף המופעלת על ידי אוויר דחוס, הקפד להסיר את הצינורית או clamp צינור הסיליקון השקוף לפני שהמיכל ריק על מנת למנוע כניסת אוויר למערכת כלי הדם. בסרטון הנוכחי אנו משתמשים במערכת זלוף המופעלת על ידי אוויר דחוס במקום כוח הכבידה. היתרון של מערכות המשתמשות באוויר דחוס הוא שהלחץ ההידרוסטטי המופעל קבוע במהלך התהליך, ובסופו של דבר מספק את שפע האיברים הטוב ביותר.
מאמר זה דן בשימוש הגובר במיני-חזירי גטינגן (Göttingen minipigs) במחקר ביו-רפואי, תוך התמקדות בפרוצדורות חיוניות כגון אינטובציה והחדרת קטטרים. מטרתו היא לשפר את ההבנה ואת היישום של טכניקות אלו במחקרים מדעיים.
טכניקות כירורגיות במיני-חזיר גטינגן (Göttingen minipig) תומכות במידול פרה-קליני על ידי מתן אפשרות לניטור פיזיולוגי ולשימור רקמות, החיוניים למחקר תרגומי. הליכים אלו משפרים את איכות הנתונים במחקרים בנושאי מדעי המוח, מטבוליזם ותפקודי מערכת לב וכלי דם, על ידי הפחתת השונות הפרוצדורלית ושיפור רווחת בעלי החיים. שליטה בשיטות אינטובציה, קטטריזציה ופרפוזיה מחזקת את הביטחון הפרה-קליני ותומכת בהחלטות go/no-go בשלבי הגילוי המוקדמים.
טכניקות אלה משתלבות בתהליכי גילוי, החל מסריקה פיזיולוגית ראשונית ועד לתיקוף פרה-קליני, ובכך הן תומכות בתכנון איטרטיבי בשלבי התיקוף של המטרה ואופטימיזציה של המולקולה המובילה.