Name: יצירתו של מודל הפיך עכברוש Cholestatic (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-21T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 39 s
Description: למדו ליצור מודל הפיך של כלסטזיס בעכברושים באמצעות צינור פוליאסטר ומיקרוכירורגיה. שיטה זו מאפשרת חקר שינויים פיזיולוגיים ופתולוגיים במערכת הכבד והמערכת העיכולית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. עכברוש המרה אנטומיה הקוטר הממוצע אורך צינור המרה והיה 1 מ&quot;מ ו 29 מ&quot;מ בהתאמה. המרחק הממוצע בין השוער לבין פטמית התריסריון היה 28 מ&quot;מ. ישנם שני צינורות הלבלב העיקרית אשר פתוח לתוך צינור המרה - צינור הקדמי פותח בצד שמאל את צינור האחורי נפתח בצד ימין. נוסף על אלה צינוריות גדולות, מספר צינורות ניקוז קטין כי כל שלושת החלקים של הלבלב לפתוח ישירות בצינור המרה. 6 2. טכניקה כל הניסויים בבעלי חיים בוצעו בהסכם עם המכון הלאומי לחקר הבריאות הנחיות אתיות אושרו על ידי ועדת המחקר של המוסד טיפוח ועדת בעלי חיים. זכר Sprague-Dawley חולדות בגילאי 8 שבועות שימשו הפגנה זו. חולדות התקבלו צ&#39;ארלס ריבר מעבדות בווילמינגטון, מסצ&#39;וסטס וכולם היו מעל 300 גרם. החולדות היתה גישה דיאטה מעבדה סטנדרטיים שוכנו יחד בתנאי מעבדה סטנדרטיים. החולדות היו בתחילה הרדים עם isofluorane ושמר תחת הרדמה במהלך הניתוח עם isofluorane דרך מסכה. חתך קו האמצע של 2 ס&quot;מ נעשתה החל xiphisternum. לאחר fascia נפתחה, האונות בכבד בוטלו cranially עם מפשק של סן, ואת התריסריון בוטלה caudally באמצעות Q-טיפים. בצינור המרה זוהה מבנה צינורי הזנת התריסריון. בצינור המרה הושם תחת מתח לחתוך חלקית. סטרילי 5 ס&quot;מ צינור פוליאתילן ארוך בקוטר פנימי של 0.6 מ&quot;מ ו קוטר חיצוני של 0.9 מ&quot;מ היה בשימוש. קצה אחד של הצינור הזה היה חום אטום, ואת הקצה השני היה משופעים בעדינות. סוף משופעים הועבר מכן לתוך צינור המרה. זה היה במקום מאובטח באמצעות 8-0 תפרים ניילון הן הפרוקסימלית ומ דיסטלי לפתיחת בצינור המרה. צינור הנותרים יחד עם סוף חתום הוצב חלל הצפק. האתר היה פעיל מושקים עם מלח רגיל. הבטן נסגר אז 2 שכבות, עם תפר Polyglactin 4-0. Linea alba נסגר עם התפרים רציפה ואת התפרים עורי קטע הונחו. דבק עור הוחל אז על העור. החולדות הורשו לשחזר בתנאי מעבדה רגילים, ניטור יומיומי משקל הגוף על מנת להבטיח הידרציה תקין. במשך המבצע היפוך cholestasis, החולדות היו מורדמים באמצעות isofluorane כפי שתואר לעיל. הבטן נפתחה על האתר החתך הקודם. הצינור היה מזוהה ונלקח מתוך חלל הצפק. Omental הידבקויות סביב הצינור משוחררים באמצעות לנתיחה בוטה וחד. אתר תריסריון זוהה לאחר מכן על מיקום נוח של הצינור duodenostomy. מחרוזת ארנק תפר, 2-3 מ&quot;מ קוטר, הוצב מכן באמצעות ניילון 8-0. התריסריון נפתח ואז בתוך תפר זה מחרוזת בארנק. סוף חתום של הצינור נחתך אז אורך מתאים. זרימה חופשית של מיצי מרה היתה מובטחת. סיום זה של הצינור הונח אז אל התריסריון ואת תפר מחרוזת הארנק היה התהדקו. הבטן היתה מושקים וסגר בשכבות. במחקר קודם, שבו choledochoduodenostomy בוצעה בטכניקה שונה, החולדות היו שרד במשך 12 שבועות וחולדות היו בריאים באותה תקופה. כמו כן, מחקר זה אישר את היפוך של שינויים ביוכימיים היסטולוגית לאחר choledochoduodenostomy בחולדות נתון חסימה של צינור המרה לתקופה של 2 שבועות. 7

<ol><li>Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+nutritional+status+associated+with+obstructive+jaundice+and+biliary+drainage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Nutr%22%5BJournal%5D)">Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats.</a> Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).</li>
<li>Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-mediated+sinusoidal+endothelial+cell+injury+after+extensive+hepatectomy+in+cholestatic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats.</a> Hepatology. 25, 636-641 (1997).</li>
<li>Abe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kupffer+cell-derived+interleukin+10+is+responsible+for+impaired+bacterial+clearance+in+bile+duct-ligated+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice.</a> Hepatology. 40, 414-423 (2004).</li>
<li>Saiki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preoperative+internal+biliary+drainage+is+superior+to+external+biliary+drainage+in+liver+regeneration+and+function+after+hepatectomy+in+obstructive+jaundiced+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats.</a> Ann Surg. 230, 655-662 (1999).</li>
<li>Subhas, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+methylprednisolone+on+warm+ischemia-reperfusion+injury+in+a+cholestatic+rat+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver.</a> Am J Surg. 199, 377-380 (2010).</li>
<li>Kara, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+anatomical+study+on+the+rat+pancreas+and+its+ducts+with+emphasis+on+the+surgical+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Anat%22%5BJournal%5D)">The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach.</a> Ann Anat. 187, 105-112 (2005).</li>
<li>Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choledochoduodenostomy+in+the+rat+with+obstructive+jaundice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice.</a> J Surg Res. 23, 321-331 (1977).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

Cholestasis מוביל מספר עצום של שינויים במערכת העיכול. מחקרים שנעשו מחפש את השינויים במערכת החיסונית ואת מצב תזונתי. Cholestasis 1-3 יכולים להשפיע על תוצאות של ניתוחים בכבד. מחקרים בוצעו כדי לשפר את התוצאות של ניתוחי הכבד בנוכחות cholestasis. 4-5 עם שיפור הרפואה והמחקר, מחקרים נוספים ייעשה על cholestasis. לפיכך יש צורך יש מודל cholestatic טוב. החולדה היא המועדפת כחיה ניסיוני כי הוא זמין, טיפל בקלות, זול מודל יציב לחקר מערכת hepatopancreatobiliary. 6...

יצירתו של מודל הפיך עכברוש cholestatic

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Cholestasis הוא מצב קליני נתקל בדרך כלל על ידי שני מנתחים גסטרואנטרולוגים. Cholestasis יכול לגרום לשינויים פיזיולוגיים שונים משפיעים על מצב תזונתי ותוצאות הניתוח. חקר השינויים המתרחשים pathophysiological הכבד ואיברים אחרים הוא בעל חשיבות. מחקרים שונים שנעשו במודלים של חולדה cholestatic. השתמשנו במודל הפיך עכברוש cholestatic במחקר האחרונות שלנו מסתכל התפקיד של methylprednisolone לפציעתם reperfusion איסכמיה. טכניקות שונות ליצירת מודל cholestatic הפיך תוארו. יצירה של מודל cholestatic הפיך עכברוש יכול להיות מאתגר לאור גודל קטן האנטומיה hepatopancreatobiliary ייחודי בחולדות. מאמר זה מדגים וידאו ויצירת מודל cholestatic הפיך. מודל זה יכול לשמש במחקרים שונים, כמו להסתכל על שינויים תזונתיים, פיזיולוגיים, שינויים פתולוגיים היסטולוגית ו החיסונית במערכת העיכול. מודל זה יכול לשמש גם כדי לראות את ההשפעות של cholestasis ו התערבויות טיפוליות שונות על ניתוחים הכבד הגדולות.

Cholestasis הוא מצב קליני נתקל בדרך כלל על ידי שני מנתחים גסטרואנטרולוגים. יצירה של מודל cholestatic הפיך עכברוש יכול להיות מאתגר לאור גודל קטן האנטומיה hepatopancreatobiliary ייחודי בחולדות. מאמר זה מדגים וידאו ויצירת מודל cholestatic הפיך.

יצירתו של מודל הפיך עכברוש Cholestatic

כולסטזיס (Cholestasis) הוא מצב קליני שכיח הנתקל בו הן מנתחים והן גסטרואנטרולוגים. כולסטזיס עלול לגרום לשינויים פיזיולוגיים שונים ו...

יצירה של מודל חולסטזי הפיך בחולדה. שלום לכולם. אני Goulash, רזידנט בכירugía כללית מבית החולים והמרכזים הרפואיים Providence ב-Southfield, מישיגן.היום אדגים את הקמת מודל חוליה (cholestasis) הפיך בחולדה. החולדה מורדמת באמצעות isof fluorine בתא הרדמה ומאוחר יותר באמצעות מסכה. במהלך הפעולה, נעשה שימוש בצינור פוליאסטר בעל קוטר חיצוני של 0.9 millimeter וקוטר פנימי של 0.6 millimeter, כאשר קצה אחד פתוח והשני אטום. הכלים שנעשה בהם שימוש כוללים ערכת סטנדרטית לחולדות, מכשירים למיקרו-כירורגיה, פינצטות אופתלמיות, מקלוני צמר גפן וחוטי nylon 8-0. הפרוצדורה מבוצעת באמצעות מיקרוסקופ ניתוחי.ניתן לבצע זאת לחלופין באמצעות לולאות כירורגיות. במקרה זה מיושם כיסוי סטרילי יציב. הליך זה מבוצע תחת כל אמצעי הזהירות הסטריליים.שלבי הניתוח: חתך של שני סנטימטרים בקו האמצע מבוצע החל מהסטרנום. הרקמה התת-עורית והפסציה נחתכות באמצעות מספריים. הפריטונאום נחתך כאן ובחשיפת הכבד.הבטחת המוסטזיס תתבצע באמצעות מכשיר כוייר ידני. אלו הם האונה המדיאלית והאונה השמאלית של כבד חולדה. זוהי תרשים סכימטי של האנטומיה של דרכי המרה בחולדה.כבד החולדה מחולק לאוניות ימנית, אמצעית, שמאלית וסיסולית (chordate). זהו הקישרון והקיבה, וזהו תעלת המרה. כאן ניתן לראות שחלק משמעותי מתעלת המרה אינו קשור לווריד השער ולעורק הכבד.זהו החלק של תעלת המרה המשמש לתלישה (hooking) וליצירת כולסטזיס. אונוני הכבד מודחקים באמצעות רטראקטור, ומקלון צמר (Q-tip) משמש למשיכה של התעלה כלפי מטה. לאחר מכן, תעלת המרה נתפסת באמצעות מכשיר מיקרו-כירורגי בסמיכות לאנומיה.זהו אותו שלב של תליית צינור המרה, המודגם כאן במודל חולדה שונה. ושוב, זהו אותו שלב של תליית צינור המרה, שהוקלט מחוץ למיקרוסקופ הניתוחי. יצירת כולסטזיס (Cholestasis), לאחר מכן מעבירים תפר של חוט פוליגליקול (polyglycolic acid) מתחת לצינור המרה ומפעילים מתיחה על צינור המרה.זהו תעלת המרה תחת מתיחה. זוהי תצוגה מוגדלת. תעלת המרה נחתכת כאן.קצה הצינור הפולי מועבר כעת לתוך תעלת המרה זו. אנו משתמשים במכשיר מיקרו-כירורגי להזנת צינורות כדי לסייע לנו בתהליך זה. יש להקפיד להחדיר את הצינור בעדינות.לאחר מכן יוצרים פתח בצינור המרה הפרוקסימלי. תפר ניילון 8 מושחל דרך פתח זה. לאחר מכן קושרים את תפר ה-ATO באמצעות שלושה קשרים ריבועיים כדי להחזיק את הצינור במקומו.חלון שני נוצר מתחת ל-Blac, פרוקסימלית לתפר הראשון. תפר ATO נוסף משמש להבטחת הצינור באופן פרוקסימלי. לאחר מכן נוצר חלון בחלק הדיסטלי של צינור המרה, ותפר ATO מועבר דרכו.זה משמש תחילה כדי לקשור את צינור המרה. תפר זה נכרך לאחר מכן סביב הפרובל והנקשר סביבו, ובכך מעגן את הפרובל באופן מאובטח. התפר נגזר; כאן, תפר המתיחה נמשך החוצה.כאן אנו מבצעים שוב זום-אאוט. את הפקת הנדחפת בחזרה אל חלל הפריטונאום ומסודרת כך שתשכב בנוחות. לאחר מכן, שוטפים את הבטן באמצעות 2 ml של סליין נורמלי.לאחר מכן מנקזים את הנוזלים באמצעות פ gauze בגודל 2x2. לאחר מכן נערכת בדיקה סופית כדי לוודא שהשפשוף של הצינור תקין ונוח, ובדיקה של ההמוסטזיס לפני סגירת הבטן. הפסציה נסגרת באמצעות תפר רציף של 5-0 poly actin.לאחר מכן סוגרים את העור באמצעות תפרים מקוטעים בשכבה העורית. היפוך כולסטזיס מבוצע על ידי החדרת קוביית פוליאסטר אל תוך התעבולה. היפוך כולסטזיס מוצג כאן בחולדה באותם תנאים. העור והפציה נגזרים באמצעות מספריים.הכבד מורחק והתריסום (duodenum) נמשך. באמצעות מקלוני צמר גפן (Q-tips), אנו מזהים נקודה בתריסום להנחה נוחה של צינור הפוליאסטר. לאחר מכן, אנו מבצעים תפרי בורסטינג (bursting sutures) עם נימה מסוג nylon בעובי שמונה סביב האזור שנבחר מראש להנחת הצינור.אנו מוודאים שנלקחות נשיכות של שריר הסרום בכל תפר. לאחר מכן, שולפים את צינור ה-NEP poly מחלל הפריטונאום. במקרים בהם הצינור הושאר למשך זמן ממושך, עלול להיווצר הידבקות משמעותית או מנטלית סביב הצינור, שיש לשחרר בעדינות.לאחר מכן גוזרים את הצינור בעזרת מספריים מעל תחבושת סופגת כדי לספוג את ניקוז המרה. במקרים שבהם הצינור הושאר למשך זמן ממושך יותר, ניתן לראות כמות משמעותית של מרה שנשפכת החוצה. כאשר הצינור נגזר, חיתוכים של הקשורה (durum) מבוצעים במרכז תפר ה-pulse string בעזרת מספריים, תוך הבטחה שכל עובי הקשורה נחתך.לאחר מכן דוחפים את הצינור אל תוך ה-nu ומוודאים שהוא מונח בנוח ומיושר בכיוון הנכון. תפר קיבוע העובר לאחר מכן מהדק באמצעות שלושה קשרים ריבועיים כדי לעגן את הצינור ב-dynam. לאחר מכן שוטפים את הפצע כדי לנקות את המרה שדלפה במהלך הפרוצדורה, ואז סוגרים את ה-ADOS כדי לוודא שהצינור מונח בנוח ושקיימת המוסטזיס טובה לפני הסגירה.הדגמה של ניקוז מרה; כאן, למטרות הדגמה בלבד, אנו מושכים את הצינור החוצה מהג'ורדן כדי להראות שיש ניקוז חופשי של מרה מהצינור. יישום של מודל זה: ניתן להשתמש במודל זה לחקר שינויים פיזיולוגיים, פתולוגיים והיסטולוגיים במערכת המרה ובמערכת העיכול הקשורים לכולסטזיס. ניתן להשתמש במודל זה כדי לבחון את ההשפעות של כולסטזיס על ניתוחי כבד, וכן ניתן להשתמש בו כדי לחקור שינויים במצב התזונתי הקשורים לכולסטזיס.

creation-of-reversible-cholestatic-rat-model

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

הפרעה בזרימת המרה גורמת לפגיעה דלקתית חמורה בכבד כולסטטי עם רצף אופייני תלוי זמן של שינויים מורפולוגיים. כאן אנו מציגים פרוטוקול לקשירה כירורגית של צינור המרה המשותף בעכברים המאפשר לגרום לתגובה פיברוטית חזקה לאחר 21 עד 28 יום.

מרה Duct קשירת בעכברים: אינדוקציה של דלקת כבד פגיעה ופיברוזיס ידי חסימתית cholestasis

גרימת היפרטרופיה הכבד מהירה באמצעות שיוך מחיצה הכבד, וריד שער הכבד מצדו hepatectomy בשלבים (ALPPS) הוצע עבור כריתה של גידולים בכבד resectable גבוליים. מודל זה עשוי להבהיר המנגנונים המעורבים היפרטרופיה מהיר ומאפשר בדיקות סמים לקדם או לחסום את ההאצה של התחדשות.

עכברוש מודל של שיוך מחיצה בכבד, וריד שער הכבד מצדו לניתוח בשלבים Hepatectomy (ALPPS)

כאן אנו מתארים שיטה נפוצה כדי לגרום נזק כבד כרונית בעכברים על ידי האכלה של תזונה לקויה כולין, בתוספת ethionine (CDE). נדגים לניטור תקינות זלוף בכבד, בידוד, שימור. קורס זמן של 6 שבועות ניתן להודיע על פגיעה בכבד, pathohistology, פיברוזיס, דלקתיות, ותגובות תא קדמון בכבד.

מאתר כולין לקויה, בתוספת Ethionine (CDE) דיאטה מודל של פגיעה כרונית בכבד

כאן, אנו מציגים את צינור המרה חלקית מצדו כמודל כירורגי של פגיעה בכבד והתחדשות בחולדות.

צינור המרה חלקית מצדו העכבר: מודל מבוקרת של מקומי חסימתית לחסימת מרה תוך כבדית

כאן נתאר פרוטוקול מפורט למדידות פולשנית של פרמטרים והמודינמיקה כולל הפורטל לחץ, זרימת הדם splanchnic ספיקת הדם מערכתית על מנת לאפיין את התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם אצל חולדות.

אפיון והמודינמיקה פולשנית של התסמונת פורטל-יתר לחץ דם אצל חולדות זה קשה וחיוור.

ספיקת כבד חריפה מודל בעלי חיים שפותחה במחקר הנוכחי מציג חלופה אפשרית למחקר של טיפולים פוטנציאליים. המודל הנוכחי מעסיק את ההשפעה המשולבת של פציעה פיזית ומושרה בתרופות בכבד ומספק חלון זמן מתאים כדי ללמוד את הפוטנציאל של טיפולים חדשניים.

הדור של מודל עכברוש של אי ספיקת כבד חריפה על ידי שילוב 70% כריתת הריאה חלקית ופרצטמול

פרוטוקול זה מתאר שיטה נפוצה ומקובלת לגרימת פגיעה בכבד חריפה (ALI) באמצעות החשיפה של CCl4 דרך צינור הקיבה. החשיפה CCl4 גורמת ALI דרך היווצרות של מינים חמצן תגובתי במהלך ביומרה בכבד. שיטה זו משמשת כדי לנתח את הפתופסולוגיה של עלי ולבחון אסטרטגיות hepatop, שונים.

גרימת פגיעה חמורה בכבד חולדות באמצעות פחמן טטרכללוריד (CCl4) חשיפה באמצעות צינורית אורוקיבה

מודלים של בעלי חיים לדלקת לבלב חריפה חמורה מאפשרים לחקור שינויים פתופיציולוגיים בשלב הראשוני, ומאפשרים התבוננות בהתפתחות של אירועים דלקתיים. כאן אנו מספקים פרוטוקול עבור אינדוקציה של דלקת לבלב מרה חריפה חמורה על ידי עירוי מדרדר של נתרן taurocholate לתוך צינור הלבלב של עכברי C57BL/6 מרדים.

נתרן Taurocholate המושרה חמור דלקת לבלב חריפה ב C57BL/6 עכברים

דלקת לבלב כרונית (CP) היא מחלה המאופיינת בדלקת ופיברוזיס של הלבלב, הקשורים לעתים קרובות עם כאבי בטן עקשניים. מאמר זה מתמקד בשיפור הטכניקה ליצירת מודל עכבר של CP באמצעות עירוי צינור המרה עם 2,4,6 -טרינדרובנזן חומצה גופרתית (TNBS).

מודל עכבר לדלקת לבלב כרונית באמצעות עירוי TNBS צינור המרה

מודל עכבר של דלקת לבלב חריפה חמורה מתואר כאן. ההליך המוצג כאן הוא מהיר מאוד, פשוט ונגיש, ובכך עשוי לאפשר את חקר המנגנונים המולקולריים והתערבויות טיפוליות שונות בדלקת הלבלב החריפה בצורה נוחה.

הקמת מודל דלקת לבלב חריפה חמורה עכבר באמצעות הזרקה מדרדרת של נתרן Taurocholate לתוך צינור ביליופנקראטי

הקמנו מודל עכברי של פיברוזיס כרוני בכבד, המספק מודל חייתי מתאים למחקר המכניסטי של אפיברוזיס כבד המושרה על ידי וירוסים של אטרזיה מרה (BA) ופלטפורמה לטיפולי BA עתידיים.

מודל עכברי של פיברוזיס כרוני בכבד לחקר אטרזיה של המרה

למדו ליצור מודל הפיך של כלסטזיס בעכברושים באמצעות צינור פוליאסטר ומיקרוכירורגיה. שיטה זו מאפשרת חקר שינויים פיזיולוגיים ופתולוגיים במערכת הכבד והמערכת העיכולית.

יצירתו של מודל הפיך עכברוש Cholestatic

גלה סרטונים נוספים