Name: תלת ממדית ברזולוציה אופטית photoacoustic מיקרוסקופית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-03T17:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 31 s
Description: למדו מיקרוסקופיה פוטואקוסטית ברזולוציה אופטית לדימות מיקרוגורם בלתי פולשני וללא תוויות בחיות מודל. השיטה מספקת נתונים על ריכוז חמצן ורוויית המוגלובין ברקמות חיות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

החוקרים מעריכים קריאה לסגור ד&quot;ר Lynnea של Brumbaugh של כתב היד. עבודה זו מומנה על ידי המכונים הלאומיים לבריאות מענקים EB000712 R01, R01 EB008085, R01 CA134539, U54 CA136398 ו 5P60 DK02057933. פרופ &#39;Lihong V. וואנג יש אינטרס כלכלי Microphotoacoustics, Inc Endra, Inc, אשר, עם זאת, לא תמך את העבודה הזאת.

1. תצורת מערכת <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אופטי קרינה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקור קרינה אופטי: דיודת-שאוב מצב מוצק פעמו לייזר (INNOSLAB, Edgewave) ו לייזר צבע (CBR-D, סירה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קרן לייזר פלט (רוחב הדופק: 7 ns) ממוקדת על ידי עדשה מעבה (LA1131, Thorlabs) לעבור דרך חריר 50 מיקרומטר (P50C, Thorlabs). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חריר ממוקמת מעט מן המוקד של העדשה הקבל כדי להתאים את קוטר חריר בקוטר יסוד מצב הקורה לסינון מרחבי יעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קרן מסוננת הוא נחלש על ידי מסנן צפיפות ניטרלי (NDC-50C-2M, Thorlabs) ולאחר מכן מצמידים לתוך סיב יחיד במצב אופטי (P1-460A-FC-2, Thorlabs). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפוקת סיבים ממלא את הצמצם חזרה המטרה מיקרוסקופ (RMS4X, Thorlabs) כדי להשיג מוקד עקיפה מוגבל אופטי של ~ 2.6 מיקרומטר באורך גל של 570 ננומטר. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זיהוי קולי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתמר Ultrasonic: 50-MHz בתדר המרכזי (V214-BB-RM, Olympus-NDT). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתמר קולי מצורף תוצרת בית אקוסטית אופטי קרן combiner 11 עבור זיהוי קולי, אשר מיושר coaxially עם הקרנה-עקיפה מוגבל אופטי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חלל כדורית היא קרקע מתוך בתחתית combiner כדי לייצר עדשה אקוסטית. זו עדשה אקוסטית יש הצמצם המספרי של 0.5 במים ונותן בקוטר מוקד אקוסטי של 43 מיקרומטר בתדר המרכזי 50-MHz. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוקדים אופטיים אקוסטי מיושרים confocally על מנת למקסם את רגישות הזיהוי. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אקוסטית צימוד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צימוד קולי יבש מועסק כדי למנוע הצללה חיות הניסוי במים, ששימש בתחילת מערכות הדמיה photoacoustic 12. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חלון הדמיה נפתח החלק התחתון של צלחת פטרי (9 ס&quot;מ קוטר), והוא חתום עם קרום ultrasonically ו אופטית פוליאתילן שקוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ג&#39;ל Ultrasonic (תמונה ברורה, SonoTech) בין הממברנה פוליאתילן את האובייקט להיות זוגות צילמו את גל photoacoustic שנוצר האובייקט צלחת פטרי, ומים deionized בצלחת פטרי זוגות עוד גל של ראש שקוע הדמיה OR-PAM . </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אלקטרוניקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האות photoacoustic זוהה על ידי מתמר קולי מוגבר על ידי שני מגברי מדורגות (ZFL 500LN, Mini-Circuits) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האות מוגבר הוא דיגיטציה על ידי רכישת נתונים 14 סיביות (DAQ) הלוח (CompuScope 14200, גייג&#39; יישומית למדעים) בקצב דגימה של 200 MS / s. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תוכנית סריקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דו מימדי (2-D) סריקה סריקה של הראש או הדמיה-PAM לאורך מישור (xy) אופקי נשלטת על ידי מחשב אישי, אשר מפעילה גם את הלוח DAQ ואת לייזר המשאבה. האות ההדק מסונכרן עם אות השעון את מהלוח DAQ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ציר מהיר של הסורק 2-D מוגדר לכיוון לסרוק חתך (B-scan). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רצף של B-לסרוק תמונות ניתן נרכשה על ידי מתרגם את הראש הדמיה לאורך ציר איטי כדי ליצור תמונה volumetric, אשר ניתן לצפות גם בעיבוד 3-D ישיר או הקרנה 2-D המרבי משרעת (MAP) תמונה . </li></ol></li></ol> 2. מערכת יישור <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש הדופק הד אולטרסאונד רפלקטור קולי כדי לקבוע את המיקום של המטוס מוקד אקוסטי (כלומר, העיכוב זמן מן האות על ההדק לאות הדופק המרבי הד קולי). צעד זה נדרש להתבצע רק פעם אחת בעת בניית המערכת או-PAM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למקסם את היעילות של צימוד סיבים במצב יחיד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל ג&#39;ל קולי על גבי אובייקט אופטית סופג (למשל, נייר דבק שחור) בעדינות לצרף אותו מתחת לחלון ההדמיה בצלחת פטרי מלא מים deionized. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מנמיכים את הראש הדמיה לתוך המים, להסיר בועות אוויר שנלכדו תחת העדשה אקוסטי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את הראש הדמיה עד האות photoacoustic של האובייקט הוא סופג מהמטוס מוקד אקוסטי, אשר יכול להישפט מן העיכוב אקוסטי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כוונו את המיקום האנכי (כלומר, העמדה z) המטרה מיקרוסקופ כדי למקסם את המשרעת של האות photoacoustic שנוצר אובייקט שטוח. משרעת האות מוגדל עולה כי מוקד אופטי מיושר עם המוקד אקוסטי בכיוון אנכי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את עמדות האופקי (עמדות כלומר, x ו-y) המטרה מיקרוסקופ עד האות photoacoustic שנוצר מהיעד מציג דפוס סימטרי. סימטריה עולה כי מוקד אופטי מיושר עם המוקד אקוסטי בכיוון אופקי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 2.6 ו - 2.7 עד האות photoacoustic מותאם בסימטריה והן המשרעת. </li></ol> 3. Sa<html> הליך הניסוי mple-in vivo OR-PAM של העכבר לאוזן vasculature <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב זה לא נדרש עכברים בעירום. להרדים את החיה עם זריקה intraperitoneal של קוקטייל [מתכון: 1 מ&quot;ל קטמין (100 מ&quot;ג / מ&quot;ל), 0.1 מ&quot;ל xylazine (100 מ&quot;ג / מ&quot;ל), ו - 8.9 מ&quot;ל תמיסת מלח; מינון: 0.1 ml/10 g]. לגלח את השיער באוזן, ועוד להשיר שער השיער שיורית עם קרם Surgi (קטגוריה #: 82565, American International Industries) לפני ניקוי עם מים deionized. שים לב depilation כזה עלול קצת לגרות את העור ובכך vasculature מבוצע הכי טוב 24 שעות לפני הניסוי המתוכנן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את מערכת הלייזר photoacoustic, ולבדוק את מערכת היישור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את העכבר עם 3% isoflurane מתאדה על ידי שאיפת גז (את קצב הזרימה אופיינית היא 1.0-1.5 ליטר / דקות, תלוי במשקל הגוף של בעל החיים), ולשמור על הרדמה עם 1% isoflurane לאורך הניסוי. הרפואי כיתה אוויר מומלץ כמו משאיפת הגז כדי לשמור את העכבר על הסטטוס פיזיולוגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת העכבר לשלב stereotactic, שליטה בטמפרטורת הגוף שלה ב 37 מעלות צלזיוס עם כרית חימום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטחו את האוזן העכבר על צלחת פלסטיק למרוח שכבה של ג&#39;ל אולטרסאונד על גבי האוזן. הימנע השמנה בועות אוויר בתוך הג&#39;ל. ואז, במקום אוזן מתחת לחלון ההדמיה ולאט לאט להעלות את הבמה החיה עד ג&#39;ל הקשר אולטרסאונד התחתון של קרום פוליאתילן. מגע רך נדרש כי לחיצה על אוזן נגד הקרום עשוי להשפיע על זרימת הדם באוזן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קלאמפ oximeter הדופק ברגל או זנב עכבר לפקח המצב הפיזיולוגי שלה, ולהחיל משחה לעיניים למניעת יובש נזק מקרי לייזר לעיניים העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מנמיכים את הראש עד הדמיה העדשה אקוסטי הוא שקוע במים deionized, ולהסיר בועות אוויר שנלכדו תחת העדשה אקוסטי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את השטף לייזר כדי לוודא שהוא בתוך תקני בטיחות לייזר של המוסד לתקינה האמריקאית מכון 13. השטף לייזר לא יעלה על 20 mJ / 2 ס&quot;מ, אשר מיתרגם 80 NJ אנרגיה הדופק לייזר כאשר קרן הלייזר ממוקדת על 150 מיקרומטר מתחת לפני השטח של העור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את לייזר מצב חיצוני-ההדק ולהתחיל סריקה לדין. לשנות את מיקום z של ראש הדמיה עד האות החזק ביותר הוא photoacoustic מהמטוס מוקד אקוסטי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדרת פרמטרים סריקה נכונה ולהתחיל רכישת תמונה רשמית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הניסוי, לכבות לייזר, להרים את הראש הדמיה מהמים deionized, מנמיכים את שלב בעלי חיים כדי לשחרר את העכבר, לנקות את האוזן עם העכבר deionized מים, לכבות את המערכת הרדמה בקר טמפרטורה, ולפרוק את העכבר משלב stereotactic. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם הדמיה חוזרות נדרש, לשים את העכבר באינקובטור עם טמפרטורת הסביבה נקבע על 37 ° C. החזר את העכבר למתקן חיה לאחר מתעורר באופן טבעי. אחרת, בצע את הפרוטוקולים החיה euthanatize ו להיפטר ממנו. </li></ol> 4. פונקציונלית OR-PAM של ריכוז מוחלט רווית החמצן של המוגלובין <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Oxyhemoglobin (HBO 2) ו deoxyhemoglobin (HBr) הן שתי הצורות העיקריות של המוגלובין, המקור העיקרי photoacoustic אנדוגני בטווח הספקטרום הנראה. HBO 2 ו HBr יש קליטה שונים הספקטרום האופטי, ולכן יכול להיות מובחן spectrally לכמת גם את הריכוז הכולל (HBT) ואת הרוויה חמצן (SO 2) של המוגלובין 5. להלן שתי הנחיות כדי לעזור לבחור האור הנראה ראוי כל כך 2 מדידות: </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אורכי גל יש לבחור בתוך הלהקה-Q של הספקטרום המוגלובין קליטה (כלומר, 550-600 ננומטר), כדי להבטיח יחס מספיק אות לרעש וחדירה הולם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אורכי גל בו מקדמי הספיגה של HBO 2 ו HBr יש הבדל מובהק (למשל, HBr, דומיננטי 561 ננומטר 2-HBO דומיננטי 578 ננומטר) מומלץ. </li></ol> חוץ מזה כל כך 2, HBT יכול להיות מחושב על ידי הוספת [HBr] ו [HBO 2] יחד, או שהוא ניתן למדוד ישירות באורכי גל isosbestic של ספקטרה מקדם טוחנת הכחדה של המוגלובין (למשל, 530 nm, 545 nm, 570 nm, ו 584 ננומטר) 14, שם HBr ו-HBO יש 2 שווים מקדמי הכחדה טוחנת. 5. נציג תוצאות: שמוצג באיור 1 הוא אנטומיה של כלי הדם ועוד 2 באוזן עכבר חי צילמו בעירום באמצעות כפול אורך הגל (561 ו - 570 ננומטר) או-PAM. תמונה אופיינית רכישת זמן אורך הגל כפול כך 2 מדידות של אזור כזה עניין (גודל התמונה: 10 מ&quot;מ x 10 מ&quot;מ; גודל הצעד: 2.5 מיקרומטר x 5 מיקרומטר) הוא ~ 80 דקות. p_upload/2729/2729fig1.jpg &quot;alt =&quot; איור 1 &quot;/&gt; איור 1. מיקרוסקופיה אופטית ברזולוציה vivo photoacoustic. MAP תמונות של ריכוז (א) המוגלובין הכולל מראה את האנטומיה של כלי הדם (נרכשה ב 570 ננומטר) ו - (ב) את החמצן המוגלובין הרוויה (נרכשה ב 561 ננומטר 570 ננומטר) באוזן עכבר בעירום. (ג) תקריב של האזור התאגרף בלוח (A). סרגל מידה בלוח (א) חלה הן (א) ו - (ב).

<ol><li>Maslov, K., Zhang, H. F., Hu, S., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical-resolution+photoacoustic+microscopy+for+in+vivo+imaging+of+single+capillaries%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Lett%22%5BJournal%5D)">Optical-resolution photoacoustic microscopy for in vivo imaging of single capillaries.</a> Opt. Lett. 33, 929-931 (2008).</li>
<li>Zhang, C., Maslov, K., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subwavelength-resolution+label-free+photoacoustic+microscopy+of+optical+absorption+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Lett%22%5BJournal%5D)">Subwavelength-resolution label-free photoacoustic microscopy of optical absorption in vivo.</a> Opt. Lett. 35, 3195-3197 (2010).</li>
<li>Wang, Y., Maslov, K., Kim, C., Hu, S., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+photoacoustic+and+fluorescence+confocal+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE.+Trans.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Integrated photoacoustic and fluorescence confocal microscopy.</a> IEEE. Trans. Biomed. Eng. 57, 2576-2578 (2010).</li>
<li>Jiao, S., Xie, Z., Zhang, H. F., Puliafito, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+multimodal+imaging+with+integrated+photoacoustic+microscopy+and+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Lett%22%5BJournal%5D)">Simultaneous multimodal imaging with integrated photoacoustic microscopy and optical coherence tomography.</a> Opt. Lett. 34, 2961-2963 (2009).</li>
<li>Hu, S., Maslov, K., Tsytsarev, V., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+transcranial+brain+imaging+by+optical-resolution+photoacoustic+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Opt%22%5BJournal%5D)">Functional transcranial brain imaging by optical-resolution photoacoustic microscopy.</a> J. Biomed. Opt. 14, 040503-040503 (2009).</li>
<li>Hu, S., Yan, P., Maslov, K., Lee, J. M., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+imaging+of+amyloid+plaques+in+a+transgenic+mouse+model+using+optical-resolution+photoacoustic+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Lett%22%5BJournal%5D)">Intravital imaging of amyloid plaques in a transgenic mouse model using optical-resolution photoacoustic microscopy.</a> Opt. Lett. 34, 3899-3901 (2009).</li>
<li>Hu, S., Rao, B., Maslov, K., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+Photoacoustic+Ophthalmic+Angiography%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Lett%22%5BJournal%5D)">Label-free Photoacoustic Ophthalmic Angiography.</a> Opt. Lett. 35, 1-3 (2010).</li>
<li>Jiao, S. L., Jiang, M. S., Hu, J. M., Fawzi, A., Zhou, Q. F., Shung, K. K., Puliafito, C. A., Zhang, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoacoustic+ophthalmoscopy+for+in+vivo+retinal+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Express%22%5BJournal%5D)">Photoacoustic ophthalmoscopy for in vivo retinal imaging.</a> Opt. Express. 18, 3967-3972 (2010).</li>
<li>Oladipupo, S., Hu, S., Santeford, A., Yao, J., Kovalski, J. R., Shohet, R., Maslov, K., Wang, L. V., Arbeit, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditional+HIF-1+induction+produces+multistage+neovascularization+with+stage-specific+sensitivity+to+VEGFR+inhibitors+and+myeloid+cell+independence%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Conditional HIF-1 induction produces multistage neovascularization with stage-specific sensitivity to VEGFR inhibitors and myeloid cell independence.</a> Blood. , Forthcoming Forthcoming.</li>
<li>Hu, S., Maslov, K., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+functional+chronic+imaging+of+a+small+animal+model+using+optical-resolution+photoacoustic+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Phys%22%5BJournal%5D)">In vivo functional chronic imaging of a small animal model using optical-resolution photoacoustic microscopy.</a> Med. Phys. 36, 2320-2323 (2009).</li>
<li>Hu, S., Maslov, K., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Second-generation+optical-resolution+photoacoustic+microscopy+with+improved+sensitivity+and+speed%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Lett%22%5BJournal%5D)">Second-generation optical-resolution photoacoustic microscopy with improved sensitivity and speed.</a> Opt. Lett. 36, 1134-1136 (2011).</li>
<li>Wang, X., Pang, Y., Ku, G., Xie, X., Stoica, G., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+laser-induced+photoacoustic+tomography+for+structural+and+functional+in+vivo+imaging+of+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Noninvasive laser-induced photoacoustic tomography for structural and functional in vivo imaging of the brain.</a> Nat. Biotechnol. 21, 803-806 (2003).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Laser+Institute+of+America%2C+American+National+Standard+for+Safe+Use+of+Lasers+ANSI+Z136%22">Laser Institute of America, American National Standard for Safe Use of Lasers ANSI Z136</a>. , American National Standards Institute Inc. New York, NY. (2007).</li>
<li>Jacques, S. L., Prahl, S. A. Optical Absorption of Hemoglobin . Oregon Medical Laser Center [Internet]. , Available from: http://omlc.ogi.edu/spectra/hemoglobin/index.html (1999).</li>
</ol>

הנהלים כל חיית ניסוי בוצעו התאמה עם פרוטוקול מעבדה חיה שאישרה הספר לרפואה בעלי חיים מחקרים ועדת מאוניברסיטת וושינגטון בסנט לואיס.

בסרטון הזה, אנו מספקים הדרכה מפורטת על פרוטוקולי הניסוי של OR-PAM, לרבות תצורת המערכת, יישור המערכת, הפרוצדורות טיפוסי. OR-PAM ללא תווית, לא פולשנית אפשרה מחקרים של תפקוד כלי הדם ואת חילוף החומרים על בסיס נימי יחיד ובכך בעל פוטנציאל להרחיב את ההבנה שלנו של microcirculation הקשורות הפיזיולוגיה והפתולוגיה. Microphotoacoustics כרגע זה ייצור מערכת OR-PAM.

בית מתוצרת אקוסטי אופטי קרן combiner: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזווית ישרה פריזמה (NT32-545, אדמונד אופטיקה) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעוין פריזמה (NT49-419, אדמונד אופטיקה) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמן סיליקון (1000cSt, מוצרים Clearco) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> OR-PAM המערכת (Microphotoacoustics) </li></ul>

תלת ממדית ברזולוציה אופטית photoacoustic מיקרוסקופית

Three-dimensional Optical-resolution Photoacoustic Microscopy

מיקרוסקופיה אופטית, לספק תובנות רבות ערך ברמות הסלולר אברון, הוכרה באופן נרחב כטכנולוגיה המאפשרת ביו. מאחר התווך של in vivo תלת ממדי (3-D) מיקרוסקופיה אופטית, מיקרוסקופ פלואורסצנטי single-/multi-photon ו טומוגרפיה קוהרנטיות אופטית (אוקטובר) הראו רגישות יוצאת דופן שלהם ניגודים פיזור הקרינה אופטיות, בהתאמה. עם זאת, בניגוד קליטה אופטי של רקמות ביולוגיות, אשר מקודד מידע פיזיולוגיות / פתולוגי חיוני, טרם שומתי. הופעתם של photoacoustics ביו הוביל ענף חדש של מיקרוסקופיה אופטית מיקרוסקופיה אופטית ברזולוציה photoacoustic (OR-PAM) 1, שם הקרנה ממוקדת אופטי להגביל את עקיפה להשיג הסלולר subcellular 1 או אפילו 2 ברזולוציה רמת לרוחב. כהשלמה ערך הקיימות בטכנולוגיות מיקרוסקופיה אופטית, OR-PAM מביאה לפחות שני חידושים. ראשית, וחשוב מכל, OR-PAM מזהה ניגודים קליטה אופטית עם רגישות יוצאת דופן (כלומר, 100%). שילוב OR-PAM עם מיקרוסקופ פלואורסצנטי 3 או עם פיזור אופטי מבוסס אוקטובר 4 (או עם שניהם) מספק תכונות אופטיות מקיפה של רקמות ביולוגיות. שנית, OR-PAM מקודד קליטה אופטית לתוך גלים אקוסטיים, בניגוד לתהליכי אופטי טהור מיקרוסקופ פלואורסצנטי ו אוקטובר, ומספק רקע ללא זיהוי. גילוי אקוסטי של OR-PAM מפחית את ההשפעות של פיזור אופטי על השפלה האות טבעי מבטל הפרעות אפשרי (כלומר, crosstalks) בין עירור וגילוי, המהווה בעיה נפוצה מיקרוסקופ פלואורסצנטי בשל חפיפה בין עירור ואת ספקטרום הקרינה. ייחודי עבור הדמיה קליטה אופטית, OR-PAM הוכיחה יישומים ביו רחב מאז המצאת שלה, כולל, אך לא מוגבל, נוירולוגיה 5, 6, עיניים 7, 8, 9 וסקולרית ביולוגיה, ו -10 דרמטולוגיה. בסרטון הזה, אנו מלמדים את תצורת המערכת ויישור של OR-PAM, כמו גם את נהלי ניסיוני בתחום ההדמיה כלי הדם vivo תפקודית.

מיקרוסקופיה אופטית ברזולוציה photoacoustic (OR-PAM) היא טכנולוגיה המתעוררים מסוגל קליטה הדמיה אופטית ניגודים<em&gt; In vivo</em&gt; עם רזולוציה רגישות הסלולר. כאן, אנו מספקים הדרכה דמיינו על פרוטוקולי הניסוי של OR-PAM, כולל תצורה יישור מערכת מערכת, טיפוסי<em&gt; In vivo</em&gt; הפרוצדורות, וערכות הדמיה תפקודית.

מיקרוסקופיה אופטית, המספקת תובנות בעלות ערך ברמות התא והאברון, מוכרת רחבה כטכנולוגיה ביו-רפואית מאפשרת. ככל ש...

המטרה הכללית של הליך זה היא להדגים מיקרוסקופיה פוטו-אקוסטית ברזולוציה אופטית (Optical Resolution Photoacoustic Microscopy), או PAM, של מיקרו-סירקולציה, שהיא לא פולשנית וללא סימון. הדבר משיג תחילה על ידי הרדמת חיית הניסוי. השלב השני של ההליך הוא מיקום אזור העניין באמצעות הזזת ראש הדמיות של המיקרוסקופ הפוטו-אקוסטי ברזולוציה אופטית, לאחר מכן נקבעים פרמטרי הסריקה ונמתחלת רכישת התמונה.בסופו של דבר, התהליכים של ריכוז החמצן הכולל ורוויית החמצן של ההמוגלובין מתקבלים באמצעות חישוב של נתונים ניסיוניים באורכי גל מרובים. מיקרוסקופיה פוטו-אקוסטית ברזולוציה אופטית מבוססת על עירור בלייזר וגילוי אולטרה-סוני. קרן לייזר קצרה ממוקדת לתוך רקמה ביולוגית.בליעת אור יוצרת חימום זמני ופליטה אולטרסונית עוקבת, המתקבלת כדי ליצור תמונה. היתרון הייחודי של RPM הוא גילוי ללא סימון ורגישות יוצאת דופן לבליעה אופטית. בניגוד לכך, טכנולוגיות מיקרוסקופיה אופטית קיימות, כולל רפלקסיה, רגישות בעיקר לפיזור אופטי או פלואורסצנציה. היכולת לספק דימוג ברזולוציה גבוהה ללא סימון in vivo של בליעה אופטית הופכת את ה-RPM לבעל יישומים ביו-רפואיים רחבים בנוירולוגיה, אופתלמולוגיה, ביולוגיה וסקולרית ודרמטולוגיה.מיקרוסקופיה פוטו-אקוסטית ברזולוציה אופטית, או pamm, מורכבת מרכיבים אופטיים ואולטרסוניים. מקור ההקרנה האופטי הוא לייזר צבע המופעל

three-dimensional-optical-resolution-photoacoustic-microscopy

Research

JoVE Journal

Bioengineering

הנדסה ביולוגית

רפואת עיני photoacoustic (PAOM), שיטת הדמיה אופטית המבוססת על קליטה, מספקת את ההערכה המשלימה של הרשתית לטכנולוגיות ההדמיה לרפואת העיניים הזמינים כיום. אנו מדווחים על השימוש של PAOM משולב עם טומוגרפיה רפאים-תחום קוהרנטיות אופטית (SD-אוקטובר) להדמית רשתית multimodal סימולטני בחולדות.

Ophthalmoscopy photoacoustic משולב וטומוגרפיה אופטית קוהרנטיות Spectral-תחום

cystography photoacoustic (PAC) יש פוטנציאל גדול כדי למפות שלפוחיות השתן, איברים פנימיים רגישים קרינה במטופלי ילדים, ללא כל שימוש בקרינה מייננת או חומר ניגוד רעיל. כאן אנו מדגימים את השימוש בPAC למיפוי שלפוחיות השתן עם הזרקה של קליעים נותבים אופטיים אטומים...

Cystography photoacoustic

ההדמיה intravital ברזולוציה גבוהה עם ניגודיות משופרת עד 120 מיקרומטר עומק בבלוטות הלימפה של עכברים בוגרים מושגת על ידי מרחבית ויסות דפוס העירור של מיקרוסקופ שני פוטונים רב המוקדים. ב100 עומק מיקרומטר מדדנו החלטות 487 ננומטר (לרוחב) ו551 ננומטר (צירי), ובכך לעקוף את מגבלות פיזור ועקיפות.

מיקרוסקופית Intravital הפסים תאורה נפתר מאוד של מרכזי ז&#39;רמינל

אנו מספקים כאן תיאור מפורט של פרוטוקול הניסוי להדמיה עם מערכת אופטואקוסטית (פוטו-אקוסטית) שפותחה לאחרונה להדמיה פונקציונלית ומולקולרית תלת מימדית בזמן אמת. הביצועים העוצמתיים והרבגוניות המוכחים עשויים להגדיר תחומי יישום חדשים של הטכנולוגיה האופטואקוסטית במחקר פרה-קליני ובפרקטיקה הקלינית.

יוניברסל כף היד תלת ממדי Optoacoustic הדמיה בדיקה לרקמות עמוקות אנגיוגרפיה אדם ופונקציונליים פרה-קליניים מחקרים בזמן אמת

כאן ברזולוציה אקוסטית להחלפה (AR) ו רזולוציה אופטי (OR) מיקרוסקופית photacoustic (AR-OR-PAM) מערכת המסוגלת הן הדמיה ברזולוציה גבוהה בעומק רדודים ברזולוציה נמוכה הדמיה רקמה עמוקה על אותו מדגם in vivo הוא הפגינו.

רזולוציה אקוסטית ואופטית למיקרוסקופיה פוטוקוסטית עבור<em&gt; בויבו</em&gt; בעלי חיים קטנים דם Vasculature הדמיה

מערכת קומפקטית המבוססת על דיודות פולוקוסטיות (PLD-PAT) המבוססת על דיודות פולס-קומפקטיות עבור הדמיה מהירה במוח בחיות קטנות מופגנת.

קומפקטית קומפקטית טומוגרפיה מערכת עבור<em&gt; בויבו</em&gt; הדמיה מוחית קטנה של המוח

כתב יד זה מתאר את הרומן ההתקנה והפעלת הליך של מיקרוסקופ photoacoustic וכן מערכת כפולה-מודאליות טומוגרפיה אופטית קוהרנטית עבור הדמיה לא פולשנית, ללא תווית chorioretinal בעלי חיים גדולים יותר, כמו ארנבים.

הדמיה Chorioretinal כפול-מודאליות מיקרוסקופ Photoacoustic הרומן ו טומוגרפיה אופטית קוהרנטית בעיניים הארנב חי

תוכנן צילום פוטואקוסטי כפול לסריקת רסטר, אשר שילב הדמיה רחבת שדה והדמיה בזמן אמת.

צילום כפול של בעלי חיים קטנים פוטואקוסטיים לסריקת רסטר לפריטים חזותיים של כלי דם

כאן, אנו מתארים כלים ושיטות חישוביות המאפשרים הדמיה וניתוח של נתוני תמונה תלת-ממדיים וארבעה מימדיים של עוברי עכבר בהקשר של התארכות צירית וסגמנטציה, המתקבלים על ידי טומוגרפיה של הקרנה אופטית טוטו, ועל ידי הדמיה חיה וכתם אימונופלואורסצנטי בהר שלם באמצעות מיקרוסקופיה רב-פוטונית.

גישות הדמיה וניתוח תלת-ממדיות וארבעה מימדים לחקר התארכות צירית וסגמנטציה צירית של בעלי חוליות

מיקרוסקופ פוטואקוסטי אולטרה סגול במהירות גבוהה ופתוח שיכול לספק תמונות היסטולוגיות תוך ניתוחיות לניתוח שוליים כירורגיים מודגם, כולל תצורת המערכת, יישור אופטי, הכנת דגימות והליכים ניסיוניים.

מיקרוסקופיה פוטואקוסטית אולטרה סגולה במהירות גבוהה להדמיה היסטולוגית עם צביעה וירטואלית בסיוע למידה עמוקה

הפרוטוקול הנוכחי מתאר רכישה של תמונות אופטואקוסטיות מולטיספקטרליות של כלי דם בעור אנושי in vivo . אלה כוללים כימות של המוגלובין ומלנין, הנחשבים כרומופורים בעלי עניין לניתוח פונקציונלי.

טומוגרפיה אופטואקוסטית מולטיספקטרלית להדמיה תפקודית בחקר כלי הדם

למדו מיקרוסקופיה פוטואקוסטית ברזולוציה אופטית לדימות מיקרוגורם בלתי פולשני וללא תוויות בחיות מודל. השיטה מספקת נתונים על ריכוז חמצן ורוויית המוגלובין ברקמות חיות.

תלת ממדית ברזולוציה אופטית photoacoustic מיקרוסקופית

גלה סרטונים נוספים