13 בפברואר 2011
אנו מדגימים את הוידאו שיטה לייצור באמצע חסימה בעורק המוח בעכברים בוגרים באמצעות monofilament intraluminal. כמו כן, אנו מראים כיצד להעריך את מידת אוטם מוחי על ידי מכתים 2,3,5-triphenyltetrazolium כלוריד (TTC).
היי, שמי טרנס ג'אם. שמי האי ג'ו. היום נראה לך כיצד לבצע מודל עכבר של חסימת עורק אמצעי.
אז בואו נתחיל. ניסוי זה מתחיל בהכנת התפר. התחל בחיתוך התפר לחתיכות של 20 מילימטר.
לאחר מכן, עגול את הקצה על ידי הבאת התפר לכיוון צריבה לאחר מכן, מדוד את קצה התפר. כעת אנו מוכנים להתחיל את הניתוח עם המסכה המונחת על גבו.
בצע חתך לאורך קו האמצע. השתמש במלקחיים כדי לחשוף את ה-ECA. עורק הצוואר החיצוני לאורך ה- ECA הם ענפים רבים.
אחד הענפים הללו הוא STA, עורק בלוטת התריס העליון. יש להיקרש את ה-STA עם מלקחיים דו קוטביים. לאחר מכן יש לחתוך את ה-STA כדי לאפשר ל-ECA להיות מבודד טוב יותר.
לאחר מכן, ה-ECA נקרש וגודלו רחוק ככל האפשר מה-CCA. בשלב זה, ייתכן שתרצה לבודד את ה-ECA לגישה טובה יותר. לאחר מכן קשרו באופן רופף שני תפרים סביב ה-ECAA במרחק של כמה מילימטרים זה מזה.
החל את המהדק בהסתעפות ה-CCA על ECA ו-ICA. לאחר מכן המשך לחתוך את קצה גדם ה- ECA. לאחר מכן, מקם מחדש את ה-ECA כך שיתיישר עם ה-ICA.
זה מאפשר לתפר כניסה רציפה מה-ECA ל-ICA. מדוד את האורך הכולל של התפר לפני ההחדרה. הכנס את התפר לתוך הפתח שנעשה על ידי חיתוך גדם ה-ECA.
כאשר התפר עובר את הקשר הדיסטלי, אבטח את הקשר על ידי הידוקו. לאחר מכן, הסר את המהדק והכנס את התפר הלאה לתוך ה-ECA. כאשר התפר עובר את הקשר הפרוקסימלי, אבטח את הקשר על ידי הידוקו.
לאחר אבטחת שני הקשרים, הכנס בזהירות את התפר לאורך העורק עד להעברת תשעה עד 10 מילימטרים של תפר. נקודת ההסתעפות, ניתן לעשות זאת על ידי הפחתת אורך התפר עד לנקודת ההסתעפות מאורך התפר הכולל. כאשר התפר מגיע למקור ה-MCA.
ה-MCA חסום. לאחר 24 שעות, ההמונים מקריבים והמוח מבודד. לצורך צביעת TTC, המוח המבודד מונח בתבנית ופורס בעזרת סכין גילוח.
לאחר מכן המוח ממוקם ב-2% TTC למשך 20 דקות בטמפרטורת החדר. לבסוף, המוח מקובע, בן לילה ונייטרלי. פורמין חוצץ.
הכנת תפרים היא תהליך עדין. הנה כמה טיפים מועילים. מקם את התפר והצריבה כך.
לאחר מכן, תוך שמירה על הצריבה נייחת, קרב לאט את התפר. לאחר מכן, מדוד את התפר כדי לוודא שהוא בגודל הנכון. גודל התפר בו אנו משתמשים בניסוי זה הוא בסביבות 0.21 עד 0.22 מילימטרים.
כדי להתחיל בניתוח, הניחו את המסכה על גבה וגרמו להרדמה עם 30% חמצן ו-70% חנקן. בצע חתך לאורך קו האמצע ולאחר מכן החל מחזירים כדי לפתוח גישה לאזור. זה אמור להיראות כך.
הפרד את הטישו עם המלקחיים בזהירות. לאחר מכן לחשוף ולבודד את ה-ECA עם המלקחיים בתהליך בידוד ה-ECA, יש לקרוש ולחתוך את ה-STA. זה מאפשר לבודד חתיכת ECA ארוכה יותר.
לאחר מכן, יש להקריש את ה- ECA בעזרת מלקחיים דו קוטביים לאחר הקרישה, יש לחתוך את ה- ECA. לאחר מכן, בודדו את ה-ECA וקשרו שני תפרים באופן רופף סביב ה-ECAA במרחק של כמה מילימטרים זה מזה. התוצאה אמורה להיראות בערך כך.
כעת החל את המהדק בהתפצלות של CCA ל-ICA ו-ECA. ודא שהצדפה חוסמת לחלוטין את זרימת הדם ל-ECA. לאחר מכן גזוז את קצה גדם ה-ECA.
מדוד את התפר לפני ההחדרה לאחר ביצוע פתח ב-ECA. הכנס את התפר ואת הפתח מעבר לקשר הדיסטלי. לאחר העברת התפר הקשר הדיסטלי, הדק את הקשר.
לאחר מכן, הסר את המהדק. לאחר וידוא שהקשר הדיסטלי מאובטח, הכנס את התפר הלאה לאורך ה-ECA מעבר לקשר הפרוקסימלי. לאחר מכן, הדק את הקשר הפרוקסימלי.
כעת הכנס בזהירות את התפר לאורך ה-ECA לתוך ה-ICA. המשיכו להחדיר את התפר לאורך ה-ICA עד תשעה עד 10 מילימטרים שהתפר עבר את נקודת ההסתעפות. ניתן לעשות זאת על ידי הפחתת אורך התפר עד לנקודת ההסתעפות מהאורך הכולל של התפר.
לאחר מכן, חתוך את התפר כך שלא יפגע ברקמה שמסביב. לאחר מכן תפר את החתך ואפשר לעכבר להתאושש. התכוננו לצביעה TTC 24 שעות לאחר הניתוח.
התחל בהקרבת העכבר עם פריקת צוואר הרחם. לאחר מכן בודדו את המוח מהגולגולת והניחו בתבנית. לאחר מכן פורסים בעזרת סכין גילוח, מכתימים את המוח ב -2% TTC למשך 20 דקות בטמפרטורת החדר.
לאחר מכן יש לתקן למשך הלילה ו-10% ניטרלי עבור מלין. אז זהו. תודה על הצפייה ובהצלחה בניסויים שלך.
הסרטון הזה מדגים שיטה לייצור חסימה של עורק מוחי אמצעי (MCAO) בעכברים בוגרים באמצעות חוט חד-גדילי תוך-לומינלי. הוא גם ממחיש כיצד להעריך את היקף האוטם המוחי באמצעות צביעת כלוריד טריפנילטטרזוליום (TTC) 2,3,5.
The mouse model of middle cerebral artery occlusion (MCAO) provides a robust, reproducible platform for evaluating ischemic stroke mechanisms and potential therapeutic interventions in preclinical research. This model enables quantitative assessment of infarct size and supports translational continuity from early discovery through preclinical validation. Its widespread adoption in neuroscience R&D reflects its value for mechanistic de-risking and predictive confidence in cerebrovascular target validation.
This MCAO model bridges early discovery, lead identification, and preclinical validation for cerebrovascular targets and interventions.