אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 5:54 דק׳ • July 8th, 2025
מיקרוסקופיה פלואורסצנטית תוך-חיונית שימושית לחקר האינדוקציה הפוטוטוקסית של היווצרות פקקת - קריש דם - באתר פגיעה מיקרו-וסקולרית.
התחל בלקיחת עכבר חסר שיער מורדם שהוזרק לו פוליסכריד פוטוטוקסי עם תווית פלואורופור. הנח את העכבר במצב שכיבה על משטח חימום כדי לשמור על הטמפרטורה הפיזיולוגית לזרימת דם תקינה.
הנח את החלק האפיקלי של האוזן מתחת למיקרוסקופ פלואורסצנטי תוך-חיוני. עם עירור עם אור, הפלואורופור פולט פלואורסצנטיות - מה שמאפשר ניטור של זרימת הדם המיקרו-וסקולרית. הגדל את עוצמת האור כדי לגרום להיווצרות פקקת.
הפלואורופור סופג את האור בעוצמה גבוהה ומגיב עם חמצן מולקולרי ליצירת מיני חמצן תגובתיים. מולקולות אלו גורמות למתח חמצוני בתאי האנדותל, ובכך מובילות לנזק לתאים ולחשיפה של המטריצה התת-אנדותלית.
התאים הפגועים משחררים מתווכים טרומבוטיים המגשרים בין הקולגן החשוף במטריצה התת-אנדותלית לבין טסיות הדם במחזור הדם, הנקשרות למתווכים באמצעות קולטנים ספציפיים.
הקישור מפעיל את טסיות הדם, וגורם לשחרור מולקולות אפקטור המפעילות ומגייסות טסיות דם אחרות במחזור לאתר הפציעה. חלבוני פיברינוגן במחזור נקשרים לקולטני הפיברינוגן על הטסיות המופעלות - ומקשרים אותם ליצירת פקק טסיות דם.
דמיין את זרימת הדם המוגבלת כדי לאשר את פקק הטסיות - השלב העיקרי של היווצרות פקקת.
הנח את החיה על הרציף מתחת לסטריאומיקרוסקופ. הש
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים