Name: רגישות בדיקת Antimicrobial של קומפלקס שחפת Mycobacterium עבור תרופות הקו הראשון והשני על ידי דילול מרק בפורמט פלייט microtiter (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-06-24T16:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 39 s
Description: למדו שיטה לבדיקת רגישות אנטיביוטית של Mycobacterium tuberculosis ל-12 תרופות בו-זמנית באמצעות פורמט פלייט microtiter. השיטה מאפשרת קביעת ערכי MIC לבחירת טיפול מתאים בחולי שחפת.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ברצוננו להודות הטכנולוגיה במעבדה של מרפאת מאיו Mycobacteriology מעבדה על עזרתם במהלך המחקר.

כל מעבדה זקוקה כדי לבצע הערכת סיכונים תוך שיתוף פעולה עם קצין בטיחות ביולוגית המוסדיים שלהם כדי לקבוע את הרמה המתאימה biosafety להכנת inoculum ועל pipetting של inoculum לתוך הצלחת. במעבדה שלנו, אנו מנצלים רמת biosafety 3 מעבדה (BSL3) נוהלי עד צלחות microtiter הם מחוסן, וחתום בחותמת דבק פלסטי. הצלחות אלה ממוקמות ואז בתוך שקית ניילון, אשר חתום גם חום. דגירה ופרשנות קריאה הצלחת microtiter מתנהל 2 רמת biosafety מעבדה (BSL2). 1. תיוג של חומרים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לייבל דם צלחת אגר, שלושה מידלברוק 7H10 צלחות, מידלברוק 7H9 מרק, מלח tween שפופרת זכוכית חרוז וצלחת AST microtiter עם מזהים המתאים (למשל, שם החולה, מספר רשומה רפואית) ב BSL2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תווית אגר דם 7H10 מצופה כמו "לבדוק את טוהר". ספירות תקופתיות של המושבה inoculum מומלץ לוודא כי ריכוז מתאים של אורגניזמים משמש הבדיקה. ספירת המושבה לבצע כאשר צריך לעבור שתי צלחות 7H10 שכותרתו עם "לספור 1 / 1 המושבה" ו "לספור 1 / 50 המושבה". </li></ol> 2. טכנולוג ההכנות להיכנס BSL3 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ציוד מגן אישי מתאים יש צורך לעבוד BSL3 וכולל מוצק מול חלוק, כיסוי ראש, כפפות, כיסויי נעליים, ומכשיר הנשמה. כל מוסד צריך להקים תוכנית להגנה על דרכי הנשימה שלהם בשיתוף פעולה עם קצין היגיינה תעשייתי במוסד שלהם. במעבדה שלנו, יש לנו כמה הנשמה זמין, כולל מופעל טיהור הנשמה אוויר (PAPRs) והתאים-HEPA מסונן, חצי פנים מסכת N95. </li></ol> 3. הכנת הארון בטיחות ביולוגית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ב BSL3, להכין את ארון הבטיחות הביולוגית (BSC) על ידי חיטוי את פני השטח הנחת מגבת נייר ספוגה כ 6 אינץ' חיטוי מהלוח פתח האוורור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח מיכל פסולת בצד שמאל, ו nephlometer vortexer קטן בצד ימין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לולאות inoculating, pipetors וטיפים ממוקמים ליד מגבת נייר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המקום מתלה עם האורגניזם (במרק או בינוני מוצק) ורמת 0.5 מק 'פרלנד על מגבת נייר. </li></ol> 4. כיול nephelometer <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים שפופרת זכוכית מלוחים tween חרוז nephelometer ולהגדיר את המכשיר לאפס באמצעות ריק מלוחים tween. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את תקן 0.5 מק 'פרלנד ב nephelometer ו לכייל בהתאם להוראות היצרן. </li></ol> 5. הכנת Inoculum <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבודה, מושבות BSC לגרד ממדיום מוצק באמצעות לולאה סטרילי לתוך שכותרתו כראוי מלוחים צינור tween חרוז זכוכית עד ≥ 0.5 מק 'פרלנד רגיל מתקבל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ראייה לבדוק את המדגם, ולהשוות את תקן מק 'פרלנד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> וורטקס מדגם עבור 30-60 שניות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר inoculum להתיישב במשך 15 דקות (הגדרת טיימר). </li></ol> 6. הרכבה של הצלחת microtiter <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את inoculum עם מרק tween מלוחים באמצעות nephelometer מכויל על מק 'פרלנד 0.5 צעדים 4.1 ו 4.2. זה חייב להסתיים תוך 30 דקות (לפי מפרט היצרן). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש pipetter 200 μL ו אירוסול ארוך עמיד pipet קצה להסיר 100 μL של inoculum מ rd 1 / 3 העליון של צינור מלוחים tween חרוז. לחסן את התבשיל 7H9 מידלברוק. לאט לאט מערבולת מרק 7H9 מחוסן למשך 20 שניות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את צלחת microtiter AST מהחבילה של היצרן. אין להשתמש אם יבוש הוא כחול או אם חבילת נייר פגום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן צינורית 1:50 דילול לשימוש מאוחר יותר בהכנת דילול 01:50 על ידי pipetting 50 μL של מים סטריליים לתוך צינור סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות לצקת את המרק inoculum 7H9 לתוך שוקת. למניעת יצירת אירוסולים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את צלחת microtiter AST עם התווית פונה אליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש pipetter 12 ערוצים להוסיף 100 μL של inoculum אל היטב כל אחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן דילולים עבור מונה המושבה: <ol type="a" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דילול 1 / 1 מוכן משליטת חיובי היטב (H12) על ידי פסים 1 לולאה μl על הצלחת 7H10 שכותרתו "01/01". </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דילול 1 / 50 הוא הוכן על ידי inoculating לולאה 1 μl משליטת חיובי היטב (H12) ו מתערבל אותו לתוך הצינור עם 50 μl של צינור מים מוכן לעיל. 1 Streak μL של דילול זו הצלחת שכותרתו "1 / 50". </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחסן את הצלחות טוהר מן השוקת על ידי pipetting 50 μL על אגר דם שכותרתו הולם צלחת 7H10 ותגרום לבידוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקוםחותם דבק על הצלחת microtiter AST. לחץ בחוזקה על כל היטב כדי להבטיח איטום הולם באמצעות גב לבן של החותם. הימנע קמטים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את הצלחת microtiter ידי מנגב אותו עם מגבת נייר ספוגה בחומר חיטוי tuberculocidal ו microtiter צלחת מקום בתוך שקית פלסטיק עם קרוב חותם חום או קלטת. <ol type="a" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שקית הניילון משמשת מיכל המשני על מנת להבטיח כי כל מרק הוא הכיל לא אמורה להיות דליפה או לשפוך הצלחת העיקרית. </li></ol></li></ol> 7. חיטוי של חומרים ארון בטיחות ביולוגית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למנוע ייצור אירוסולים, למקום אחר שוקת על גבי השוקת מחוסן לפני הצבת אותו בעדינות לתוך המיכל וזורקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את כל החומרים כולל nephlometer, vortexer, צלחות, צינורות, וכו 'על ידי וניגבתי חיטוי tuberculocidal ולחכות את הזמן המתאים כדי להבטיח חיטוי על פי הוראות היצרן לפני הסרת מן BSC. לדוגמה, Prospray, חיטוי tuberculocidal אנו משתמשים, דורש 15 דקות כדי להרוג mycobacteria. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את מיכל להשליך בשקית Biohazard חותם ולפני מעוקר. </li></ol> 8. דגירה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צלחות צריך להיות מודגרות עם התקשורת למטה יש להיזהר כדי למנוע שפיכת כל נוזל או התזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה את הצלחת microtiter AST צלחת, 7H10 ו צלחות אגר דם 35-37 מעלות צלזיוס עם חממה CO 2 עם 5-10% 5-10% CO 2 במעבדה BSL2. <ol class="lalpha" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במעבדה שלנו, זה מקובל, כי הצלחת היטב אטום בתוך שקית ניילון סגורה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לא יותר מ 2 צלחות microtiter AST צריך להערם בחממה על פי הוראות היצרן. </li></ol> 9. נציג תוצאות פרשנות של תוצאות: אטום AST צלחות microtiter ניתן לקרוא באופן ידני באמצעות מראה כעזר או עם קורא צלחת אוטומטי כגון Vizion (TREK באבחון). הצלחות ניתן לבחון בהקדם 7 ימים לאחר חיסון. בדוק את בקרת צמיחה בארות בעמדות H11 ו H12 כדי לקבוע אם הם חיובי (כלומר, יש הפקדה של תאים בתחתית הבאר). אם הפקד בארות צמיחה לא חיובית, reincubate את הצלחת לבחון מחדש מעת לעת (למשל, יום 10, יום 14) עד בקרת בארות הצמיחה הן חיוביות. <ol type="a" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מירור נכתב: <ol type="i" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המקום אטום צלחת AST microtiter לבמה; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקריאה מלאה בארות צמיחה לאחר 7 ימים של דגירה, אם זה שלילי, reincubate צלחת AST microtiter; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם פקדי צמיחה מקובלים, ולאחר מכן קרא את התרופה המכילים בארות. עבור לכל תרופה, הרשומה דילול הראשונה אין צמיחה על ידי השוואת בארות התרופה עם שליטה הצמיחה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צמיחה מופיעה עכירות או הפקדה של תאים בתחתית באר. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כלי קריאה: בצע את ההוראות יצרני; את ההוראות להלן דוגמה לאופן הקריאה ייעשה עם פלטפורמת Vizion: <ol type="i" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כניסה פנימה </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש "MYCOTB" תוכנה AST צלחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים צלחת עם ברקוד אטומה מול המשתמש. צמיחה מופיעה עכירות או הפקדה של תאים בתחתית באר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קראו שולטת צמיחה, אם זה שלילי, reincubate צלחת AST microtiter, אם חיובי לקרוא את הצלחת על ידי נגיעה במסך עם טוב הראשון של כל תרופה שאינה להראות צמיחה. </li></ol></li></ol> קראו צלחות טוהר. צלחת אגר דם לא צריך להראות צמיחה לאחר 48 שעות את הצלחת טוהר 7H10 צריך צמיחה ומחוברות סוג של אורגניזם אחד. אם מזוהמים, המבחן microtiter AST צריך להיות חזר מתרבות טהור. חישוב ספירת המושבה משליטת חיובי גם באמצעות הטבלה שלהלן: הרוזן המושבה מפתח <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> מושבות # מנה על צלחת שכותרתו "01/01" </td><td> מושבות # מנה על צלחת שכותרתו "1 / 50" </td><td> Inoculum הרוזן המושבה (CFU / mL) </td></tr><tr><td> &lt;50 </td><td> 0 </td><td> &lt;5 X 10 4 </td></tr><tr><td> 50-100 </td><td> 0-2 </td><td> 5 X אוקטובר 04-01 X 10 5 </td></tr><tr><td> &gt; 100 </td><td> ≤ 10 </td><td> 1 X אוקטובר 05-05 X 10 5 </td></tr><tr><td> &gt; 100 </td><td> &gt; 10 </td><td> &gt; 5 X 10 5 </td></tr></tbody></table> אולי יש נגרר עם חומצה פארה-aminosalicylic כמה זנים של Mycobacterium tuberculoאחותי. זה יכול להתפרש על ידי הסתכלות כל הבארות, כי יש כדוריות ושימוש הבאר הראשונה כי יש גלולה בגודל זהה דילול הבאה כנקודת סיום. ההתנגדות היא נדירה עם התרופה הזו. <img src="/files/ftp_upload/3094/3094fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> באיור 1. נציג התוצאות באמצעות צלחת MYCOTB. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> תרופות קיצור </td><td> תרופה </td><td> MIC μ / mL </td></tr><tr><td> OFL </td><td> ofloxacin </td><td> 16 </td></tr><tr><td> Mxf </td><td> moxifloxacin </td><td> 8 </td></tr><tr><td> RIF </td><td> rifampin </td><td> &gt; 16 </td></tr><tr><td> עמי </td><td> amikacin </td><td> 0.5 </td></tr><tr><td> STR </td><td> סטרפטומיצין </td><td> 16 </td></tr><tr><td> RFB </td><td> rifabutin </td><td> 8 </td></tr><tr><td> PAS </td><td> p-aminosalicylic חומצה </td><td> ≤ 0.5 </td></tr><tr><td> ETH </td><td> ethionamide </td><td> 5 </td></tr><tr><td> Cyc </td><td> cycloserine </td><td> 4 </td></tr><tr><td> INH </td><td> isoniazid </td><td> 2 </td></tr><tr><td> קן </td><td> kanamycin </td><td> 1.2 </td></tr><tr><td> EMB </td><td> ethambutol </td><td> 4.0 </td></tr></tbody></table>

<ol><li>Wengenack, N., Hall, L., Labombardi, V., Parrish, N. Evaluation of the New Sensititre (MYCOTB) MIC Plate for the Susceptibility Testing of Mycobacterium tuberculosis (Mtb) to First and Second Line Drugs. Presented at 50th Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2010 Sept. 12, Boston, MA, , Abstract 2450 (2010).</li>
<li>HHS Publication No. (CDC) 21-112: Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (BMBL). <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22U.S.+Department+of+Health+and+Human+Services+Centers+for+Disease+and+Preventions%22">U.S. Department of Health and Human Services Centers for Disease and Preventions</a>. , 5th Edition, National Institutes of Health. (2009).</li>
<li>Morcillo, N., Imperiale, B., Digiulio, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+MGIT+960+and+the+colorimetric-based+method+for+tuberculosis+drug+susceptibility+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Tuberc+Lung+Dis%22%5BJournal%5D)">Evaluation of MGIT 960 and the colorimetric-based method for tuberculosis drug susceptibility testing.</a> Int J Tuberc Lung Dis. 14, 1169-1175 (2010).</li>
<li>Bemer, P., Bodmer, T., Munzinger, J., Perrin, M., Vincent, V., Drugeon, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multicenter+Evaluation+of+the+MB%2FBACT+System+for+Susceptibility+Testing+of+Mycobacterium+tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Multicenter Evaluation of the MB/BACT System for Susceptibility Testing of Mycobacterium tuberculosis.</a> J Clin Microbiol. 42, 1030-1034 (2004).</li>
<li>SENSITITRE MYCOTB Susceptibility Plate: For Mycobacterium Susceptibility Testing. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Product+Insert%22">Product Insert</a>. , TREK Diagnostic Systems. Cleveland, OH. (2010).</li>
<li>CLSI. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Susceptiblity+Testing+of+Mycobacteria%2C+Nocardia%2C+and+Other+Aerobic+Actinomycetes%3B+Approved+Standard.+Document+M24-A%22">Susceptiblity Testing of Mycobacteria, Nocardia, and Other Aerobic Actinomycetes; Approved Standard. Document M24-A</a>. , CLSI. Wayne, Pennsylvania. (2003).</li>
<li>Sullivan, N., Sotos, J., Anhalt, K., Allen, S. Preliminary results from a new TREK Sensititre Mycobacterium tuberculosis MIC plate (MYCOTB). C-151 presented at 110th American Society for Microbiology, Annual Meeting, San Diego, CA, , Abstract C-151 (2010).</li>
<li>VersaTREK MYCO SUSCEPTIBLITY KIT. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Product+insert%22">Product insert</a>. , TREK Diagnostic Systems. Cleveland, OH. 7115-7160 (2008).</li>
<li>Parrish, N. M., Carroll, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Role+of+the+Clinical+Mycobacteriology+Laboratory+in+the+Diagnosis+and+Management+of+Tuberculosis+in+Low+Prevalance+Settings%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The Role of the Clinical Mycobacteriology Laboratory in the Diagnosis and Management of Tuberculosis in Low Prevalance Settings.</a> J Clin Microbiol. , Forthcoming (2010).</li>
<li>Kam, K. M., Sloutsky, A., Yip, C. W., Bulled, N., Zingol, M., Espinal, M., Kim, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+critical+concentrations+of+second-line+anti-tuberculosis+drugs+with+clinical+and+microbiological+relevance%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Tubercl+Lung+Dis%22%5BJournal%5D)">Determination of critical concentrations of second-line anti-tuberculosis drugs with clinical and microbiological relevance.</a> Int J Tubercl Lung Dis. 14, 282-288 (2010).</li>
<li>Woods, G. L., Warren, N. G., Inderlied, C. B. Susceptibility Test Methods: Mycobacteria, Nocardia, and Other Actinomycetes. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWoods%2C+GL+%22Manual+of+Clinical+Microbiology%22">Manual of Clinical Microbiology</a>. Murray, P. R., Barron, E. J., Jorgensen, J. H., Landry, M. L., Pfaller, M. A. , 9th Ed, ASM Press. Washington DC. 1223-1247 (2007).</li>
<li>Bergmann, J. S., Woods, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+ESP+Culture+System+II+for+Testing+Susceptibilities+of+Mycobacterium+tuberculosis+Isolates+to+Four+Primary+Antituberculosis+Drugs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the ESP Culture System II for Testing Susceptibilities of Mycobacterium tuberculosis Isolates to Four Primary Antituberculosis Drugs.</a> J Clin Microbiol. 36, 2940-2943 (1998).</li>
</ol>

דוגמה צלחת microtiter AST אשר שולטת צמיחה חיובית מוצג באיור 1 ו MIC נקודת קצה (מיקרוגרם / מ&quot;ל) עבור כל תרופה היא הקיפה. מחקר שנערך במעבדה שלנו ציינו כי שיטת צלחת AST microtiter שווה את השיטה אגר תקן הזהב שיעור לבדיקות הרגישות של שחפת Mycobacterium. דיווח מהיר יותר של תוצאות הושג עם צלחת microtiter microtiter AST לעומת השיטה המסורתית פרופורציה אגר עם הפרשנות הסופית צלחת microtiter AST ו - פרופורציה שיטה אגר ב 14 ו 21 ימים, respectively.The צלחת AST microtiter יש את היתרון של הבדיקה הראשונה קו תרופות second בו זמנית אשר יכול לעזור למנוע עיכובים מופרזת עם זנים עמידים. צלחת microtiter AST הוא גם הרבה יותר קל להגדיר מאשר לקרוא APM ושניהם מראה ידנית ומערכת חצי אוטומטי כגון VIZION ניתן להשתמש כדי לקרוא את הצלחות. הזמינות של ערך MIC עבור בדיקות סמים TB התנגדות עשוי לספק מידע חדש בעל ערך לרופאים יחסית לערך ריכוז המסורתית קריטי, במיוחד עבור אלה מבודד עם רגישות &quot;גבולי&quot;.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> שם מגיב </th><th> חברה </th><th> מספר קטלוגי </th></tr><tr><td> AST microtiter צלחות חותם דבק </td><td> TREK אבחון, קליבלנד אוהיו </td><td> MYCOTB </td></tr><tr><td> מק &#39;פרלנד 0.5 תקן </td><td> TREK אבחון, קליבלנד, אוהיו </td><td> E1041 </td></tr><tr><td> מידלברוק 7H10 צלחות </td><td> דיג </td><td></td></tr><tr><td> פלטות אגר דם </td><td> דיג </td><td></td></tr><tr><td> סטרילי לולאות 1 μL </td><td> דיג </td><td></td></tr><tr><td> לולאות סטרילי 10 μL </td><td> דיג </td><td></td></tr><tr><td> Sensititre Saline-Tween חרוז זכוכית מרק </td><td> TREK אבחון, קליבלנד, אוהיו </td><td> 27143 </td></tr><tr><td> 7H9 OADC מרק </td><td> TREK אבחון, קליבלנד, אוהיו </td><td> T3440 </td></tr><tr><td> Pipet טיפים לונג </td><td> דיג </td><td></td></tr><tr><td> סטרילי שקתות </td><td> TREK אבחון, קליבלנד, אוהיו </td><td></td></tr><tr><td> מ שחפת </td><td> ATCC </td><td> 27294 </td></tr><tr><td> Pipeters: 1000, 200, 20μL </td><td> דיג </td><td></td></tr><tr><td> טיפים 1000, 20, 20 μL </td><td> דיג </td><td></td></tr><tr><td> רב Pipetter </td><td> דיג </td><td></td></tr><tr><td> החממה CO% 05-10 פבואר </td><td> דיג </td><td></td></tr><tr><td> שקיות פלסטיק, קטנה, CO 2 חדיר </td><td> פולי פלסטיק, דלאנו, הרשות הפלסטינית </td><td></td></tr><tr><td> חיטוי שחפת (כגון ProSpray C-60) </td><td> Certol הבינלאומי, המסחר סיטי, CO </td><td> PSC60/32 </td></tr><tr><td> מראה תיבת Reader </td><td> דיג </td><td></td></tr></tbody></table>

רגישות בדיקת antimicrobial של קומפלקס שחפת mycobacterium עבור תרופות הקו הראשון והשני על ידי דילול מרק בפורמט פלייט microtiter

Antimicrobial Susceptibility Testing of Mycobacterium Tuberculosis Complex for First and Second Line Drugs by Broth Dilution in a Microtiter Plate Format

איתור מהיר של עמידות מיקרוביאלית חשוב במאמץ לשלוט על הגידול עמידים Mycobacterium tuberculosis (MTB). בדיקות רגישות Antimicrobial (AST) של MTB באופן מסורתי בוצעו בשיטה אגר פרופורציה או על ידי בדיקות macrobroth על מכשיר כמו BACTEC (בקטון דיקינסון, ניצוצות, MD), VersaTREK (TREK אבחון, קליבלנד, OH) או BacT / התראה (bioMérieux, הייזלווד, MO). שיטת שיעור אגר, בעוד נחשב סטנדרטי &quot;זהב&quot; של AST, הוא עבודה אינטנסיבית ודורשת חישוב התנגדות על ידי ביצוע ספירת המושבה על אגר סמים המכילים לעומת אגר נקי מסמים. אם יש ≥ צמיחה של 1% על מדיום המכיל את התרופה לעומת בינוני התרופה ללא תשלום, האורגניזם נחשב עמידות לתרופה זו. שיטות macrobroth דורשות מכשור לשבור נקודת מבחן (&quot;קריטי&quot;) ריכוזי התרופה עבור תרופות הקו הראשון (isoniazid, ethambutol, rifampin ו pyrazinamide). השיטה המתוארת כאן זמין מסחרית בתבנית 96 microtiter גם צלחת [MYCOTB (TREK באבחון)] והוא מכיל ריכוז גדל והולך של 12 antimicrobials משמש לטיפול בשחפת כולל שני הראשונים (isoniazid, rifampin, ethambutol) תרופות הקו השני (amikacin, cycloserine, ethionamide, kanamycin, moxifloxacin, ofloxacin, para-aminosalicylic חומצה, rifabutin, וסטרפטומיצין). Pyrazinamide, תרופה השורה הראשונה, לא נכלל הצלחת microtiter בשל הצורך שלה התנאים מבחן חומצי. היתרונות של מערכת microtiter לכלול הן קלות להגדיר להפוך מהר יותר סביב זמן (14 ימים), לעומת שיעור אגר המסורתיים (21 ימים). בנוסף, הצלחת ניתן להגדיר מ inoculum מוכן שימוש או מרק או בינוני מוצק. מאז הפורמט צלחת microtiter הוא חדש מאז MTB מציב אתגרים ייחודיים בטיחות במעבדה, פרוטוקול זה יתאר כיצד בבטחה ההתקנה, דגירה ולקרוא את הצלחת microtiter.

בדיקות רגישות Antimicrobial של Mycobacterium tuberculosis מאתגרת אך קריטי עבור הטיפול בחולה. מתכונת זו צלחת microtiter מציע בדיקה של 12 תרופות antimycobacterial ומספק ריכוז מעכבות המינימלי (MIC) ערכים, אשר יסייע הטיפול המתאים.

רגישות בדיקת Antimicrobial של קומפלקס שחפת Mycobacterium עבור תרופות הקו הראשון והשני על ידי דילול מרק בפורמט פלייט microtiter

זיהוי מהיר של עמידות לאנטיביוטיקה הוא חשוב במאמץ לשלוט בעלייה של *Mycobacterium tuberculosis* (Mtb) עמיד. ...

קיימות מעט תרופות זמינות לטיפול ב-mycobacterium tuberculosis, ולכן עמידות לכל תרופה היא מקור לדאגה. מאמר וידאו זה מתאר פרוצדורה לבדיקת העמידות של M tuberculosis ל-12 תרופות אנטי-מיקרוביאליות שונות בו-זמנית. לפיכך, היכולת לזהות במהירות עמידות אנטי-מיקרוביאלית של M tuberculosis היא חשובה מאוד במאמץ לבקר את העלייה בזנים עמידים, וכאן נבחן את הרגישות לאנטיביוטיקה.ראשית גדלים את M tuberculosis על מצע מוצק או במצע צח, עד לקבלת תרחיף חיידקים. מכינים את האינוקולום ומוסיפים אותו ללוחית מיקרוטיטר המכילה ריכוזים שונים של 12 תרופות, כולל תרופות קו ראשון וקו שני. לאחר האינקובציה, נקבעת מידת הצמיחה בכל באר באופן ידני באמצעות קופסת מראות או באמצעות קורא לוחות חצי-אוטומטי.הנתונים המתקבלים מצביעים על הריכוז המעכב המינימלי עבור כל תרופה שנבדקה ומראים לאילו אנטיביוטיקות השבט הנבדק של TB עמיד. תוצאות אלו מסייעות בבחירת התרופה המתאימה לטיפול ב-tb. שלום, שמי ננסי אק ואני מנהלת מעבדת המיקובקטריולוגיה במאיו קליניק ברוצ'סטר, מינסוטה.היום נתאר שיטה לביצוע בדיקת רגישות לאנטיביוטיקה עבור mycobacterium tuberculosis. היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות, כגון דילול במצע נוזלי (macro broth dilution), הוא שערך ה-MIC נקבע עבור כל תרופה ו-12 אנטיביוטיקה נבדקים בו-זמנית. את הפרוצדורה יעשׂה קורט ג'וד, מומחה איכות במעבדה שלי, בעת עבודה על שולחן מעבדה.הכינו את הפרוצדורה על ידי סימון של צלחת אגר דם, שלוש צלחות Middlebrooks 7H10, מבחנה עם חרוזי זכוכית המכילה saline tween, וצלחת מיקרוטיטר בשם המטופל ובמספר זיהוי הדגימה. בנוסף, סמנו את צלחת אגר הדם ואת צלחות ה-7H10 כ-"purity" (בדיקת טוהר). סמנו את אחת מצלחות ה-7H10 כ-"one to one colony count" ואת השנייה כ-"one to 50 colony count".לאחר מכן, הניחו את המגש במעבר (pass through). כעת, היערכו לעבודה במעבדה ברמת בטיחות ביולוגית 3 (BSL three) על ידי לבישת חלוק בעל חזית סגורה, כיסוי ראש, כפפות, כיסויי נעליים ומסכת נשימה. במקרה זה, נעשה שימוש במסכת נשימה מסוג PAPR.לאחר מכן, הוציאו את המגש מהחלון למעבר. בשלב הבא, בתוך מתקן ה-BSL 3, חטאו את פני השטח של קבסינט הבטיחות הביולוגית. לאחר מכן, הניחו בתוך המנדף נייר סופג ספוג בחומר חיטוי, במרחק של כשישה אינצ'ים מלוח פתחי האוורור שליד הנייר הסופג.הניחו לולאותe接 chủng (inoculating loops), פיפטורים וטיפים, מכל פסולת מתאים, nephi, TER וורטקס. לאחר הכנת המנדף, הניחו את האורגניזם על נייר סופג יחד עם מעמד הכולל סטנדרט McFarland 0.5, ציר H7H9 עם OADC ומבחנה עם חרוזי מלח. הגדרה זו מבוצעת ממצע מוצק.הכינו אינוקולום מתרבית של מצע מוצק מדגימה של מטופל. השתמשו בלולאה סטרילית כדי לגרד את המושבות ולהעבירן לשפופרת זכוכית עם חרוזי זכוכית המכילה saline tween. ערבבו את התמיסות באמצעות vortex למשך 30 עד 60 שניות.בצעו בדיקה חזותית של הדגימה והשוו אותה לתקן McFarland. הכמות שהועברה צריכה להיות שווה או גדולה מזו של התקן. אם לא, הוסיפו עוד מהדגימה הבקטריאלית ושנו שוב ב-vortex.לאחר התאמה לתקן McFarland, יש להמתין 15 דקות להשקעת האינוקולום כדי לאפשר לגושים גדולים יותר של חיידקים לשקוע. לאחר מכן, השתמש ב-nefi TER כדי למדוד את צפיפות החיידקים התלויים לאפס. ה-nephi ter.ראשית, הניחו מבחנה עם חרוץ מלח פיזיולוגי ריק בתוך ה-nephi ter. לחצו על כפתור הכיול (calibrate) כדי לאפס את המכשיר, ולאחר מכן הניחו את סטנדרט McFarland 0.5 ב-Nephi ter ולחצו שוב על כפתור הכיול. ברגע שהמכשיר כויל, הוציאו את סטנדרט McFarland והכניסו את האינוקולום.קריאת האינוקולום צריכה להיות שווה לקריאת תקן מקפארלנד (McFarland). אם הקריאה נמוכה מדי, הוציאו את המבחנה והעבירו חיידקים נוספים מהצלחת. לאחר מכן, ערבבו בוורטקס וקראו את הדגימה שוב.אם הקריאה גבוהה מדי, הוסיפו saline tween למבחנה ושקשקו במערבל vortex. לאחר מכן, קראו שוב את הדגימה. המשיכו להתאים את התמיסה המזהמה (inoculum) לפי הצורך עד שריכוז החיידקים יתאים לתקן McFarland.בשלב הבא, השתמשו בפיפטור של 200 µL ובטיפ פיפטה ארוך עמיד לארסול כדי להוציא 100 µL מהאינוקולום מהשליש העליון של המבחנה. כדי למנוע גושים ששוקעים לתחתית ציר Middlebrook 7H9, ערבלו את ציר האינוקולום באיטיות במכשיר וורטקס למשך 20 שניות לפני זריעת האינוקולום. התחילו בהוצאת פלטת המיקרוטיטר מאריזת היצרן. אם החומר מייבש כחול או אם אריזת הרדיד פגומה, אין להשתמש בה.הפלטה כבר מכילה את 12 האנטימיקרוביאליים לבדיקה בכל באר, כולל התרופות היעילות ביותר או תרופות קו ראשון ותרופות קו שני. שפכו בזהירות את אינוקולום ה-H nine broth לתוך מבחנה, תוך הקפדה שלא להיווצר אירוסולים. לאחר מכן, הניחו את פלטת המיקרו-טיטר כך שהתווית פונה החוצה כפי שמוצג כאן, והשתמשו בפיפט 12 ערוצים כדי להוסיף 100 µL של האינוקולום לכל באר.בשלב הבא, הכינו את הצלחות לביצוע ספירת מושבות. ראשית, הכינו צלחת ללא דילול על ידי העברת לולאה של 1 µL מהדגימה שבבאר הביקורת החיובית אל צלחת H 10 המסומנת כ-1:1. לאחר מכן, השתמשו בלולאה כדי לזרוע את הצלחת כפי שמוצג כאן.בשלב הבא, להכנת דילול של 1:50, העבירו לולאת מיקרוליטר אחד מבאר ביקורת החיובי וערבבו אותה בתוך מבחנה המכילה 50 µL מים. זרעו מיקרוליטר אחד מדילול זה על פלטה המסומנת ב-1:50. זרעו את פלטות הבדיקה לטוהר על ידי פיפטור של 50 µL מהאינוקולום מהתרבית אל פלטות blood agar ו-7H10 המסומנות כראוי, ובצעו מריחה לבידוד.לאחר מכן, הניחו trth נוסף מעל ה-trth שהוחדר וסידרו אותם בעדינות במיכל הפסולת. הניחו מדבקת איטום על לוח המיקרוטיטר. לאחר מכן, בעזרת הגב הלבן, לחצו בחוזקה על כל באר כדי להבטיח איטום נאות, וודאו שאין קפלים.חטא את פלטת המיקרוטיטר על ידי ניגוחה בנייר סופג הספוג בחומר חיטוי קוטל-שחפת (tuberculocidal). לאחר מכן, הכנס את פלטת המיקרוטיטר לשקית פלסטיק וסגור אותה באמצעות חום (heat seal). לבסוף, חטא את כל החומרים, כולל הפיפטות, הוורטקס, הפלטות והמבחנות, על ידי ניגוחם בחומר חיטוי קוטל-שחפת.כאן משתמשים ב-pro spray לאחר שעבר מספיק זמן כדי להבטיח חיטוי. 15 דקות עבור pro spray. הצלחות נסגרות בעזרת סרט הדבקה (scotch tape), מוכנסות לשקיות פלסטיק, וציוד אטום מוצא מקללת הבטיחות הביולוגית ומועבר לתא המעבר (pass through).בשלב זה יש לסגור ולאטום את שק הפסולת האדום באמצעות קשירה, ולהסיר את הגלימה, כיסויי הנעליים והכפפות. לאחר מעבר לחדר ההכנה (ante room) ושטיפת ידיים, יש להסיר את מסכת הנשימה, לחטא אותה ולאחסנה; לאחר שטיפת ידיים נוספת, יש ללבוש גלימה נקייה ולעזוב את מתחם ה-BSL three. לאחר מכן, יש לבצע עיקור באוטוקלאב למכל הפסולת.לאחר מכן, הדגרירו את פלטת המיקרוטיטר ואת שבע פלטות ה-H 10 ו-blood auger כשהן פונות כלפי מעלה באינקובטור בטמפרטורה של 35 עד 37 °C עם 5 עד 10% CO2 במעבדת BSL 2. הדבר מקובל כיוון שהפלטה אטומה היטב ונמצאת בתוך שקית פלסטיק. זמן הדור של *Mycobacterium tuberculosis* הוא כ-12 עד 24 שעות, ולכן יעבור שבוע לפחות עד שניתן יהיה להבחין בצמיחה כהיווצרות של משקע תאים בתחתית באר הביקורת. ביום ה-10, בצעו קריאה ידנית במכשיר ה-MIRR על ידי הנחת פלטת המיקרוטיטר ה-AST האטומה על פלטפורמת תיבת ה-MIRR.השתמשו במנורת שולחן כדי לסייע בוויזואליזציה של הצמיחה, והתאימו את המיקום לפי הצורך כדי לקבל את הניגודיות הטובה ביותר. בדקו את בארות בקרת הצמיחה, במקרה זה H 11 ו-H 12, על ידי התבוננות במראה. אם ישנה צמיחה, הבארה תיראה עכורה או שתיראה כבעלת משקעים, כפי שמוצג כאן.אם לא נצפתה צמיחה כפי שמוצג בדוגמה זו, הבאר תיראה שקופה. במקרה זה, החזירו את הפלטה למדגרה והמשיכו בדגירה למשך עד 21 ימים. עבור כל תנאי, השוו את הצמיחה לבקרת הניסוי.אם כן, עבור כל רשומת תרופה, הדילול הראשון שאינו מראה צמיחה הוא הריכוז המעכב המינימלי, או ה-MIC, של התרופה. כדי לבחון תוצאות באמצעות קורא לוחיות אוטומטי כגון ה-vision, התחילו בפתיחת תוכנת ה-Myco TB a ST plate וביצוע התחברות. הניחו את הלוחית האטומה כאשר הברקוד פונה החוצה. כפי שמוצג כאן, צמיחה נראית כעכירות או כמשקע של תאים בתחתית הבאר על מסך המחשב.ראשית, יש לבחון את בישורי הצמיחה, כפי שנעשה קודם לכן. אם לא נצפתה צמיחה, יש להחזיר את הפיתה למדגרה למשך תקופה של עד 21 ימים.אם התוצאה חיובית, רשמו את התוצאות על ידי לחיצה על המסך על הבאר הראשונה שאינה מראה צמיחה עבור כל תרופה. במקרים מסוימים, חיידקים, משקעים או תרופות שוקעים לתחתית הבאר. תופעה זו, המכונה trailing, מזוהה על ידי מספר בארות עם משקע בגודל זהה ואינה נחשבת למעשה לצמיחה חיובית.בשלב הבא, בוחנים את שבעה מובילי ה-H 10 ואת צלחות האגר דם כדי לקבוע את הריכוזים החיידקיים ולהעריך את הטוהר. בצלחת אגר הדם לא אמור להופיע גדילה לאחר 48 שעות. גדילה בצלחת אגר הדם מעידה על זיהומים של חיידקים בעלי קצב גדילה מהיר.במידה וישנו גדילה, יש לחזור על בדיקת המיקרוטיטר. בצלחת בדיקת הטוהר H 10 צריכה להיות גדילה של אורגניזם אחד. זן EM tuberculosis צריך להופיע בצבע בז', מקומט וחספס. במקרה של זיהום, יש לחזור על בדיקת המיקרוטיטר מתרבית טהורה.כדי להעריך את ריכוז החיידקים, ספרו את המושבות על פלטת ה-H 10 השביעית. לאחר מכן, באמצעות הטבלה במסמך הכתוב המצורף, חשבו את מספר המושבות. Mycobacterium tuberculosis גודל מדגם של מטופל והעמידות לאנטיביוטיקה הוערכה כפי שמתואר בסרטון זה; בפלטה המוצגת כאן, קיימים 12 תרופות שונות בריכוזים עולים, כאשר הריכוזים הגבוהים ביותר נמצאים למעלה והריכוזים הנמוכים ביותר למטה.הריכוז המעכב המינימלי, או MIC של התרופה, התוווה לריכוז הנמוך ביותר של התרופה שלא הראה צמיחה כלל, והוא מסומן במעגל בתמונה המוצגת כאן, בהתאם לנקודות חיתוך סטנדרטיות שנקבעו על ידי ה-Clinical and Laboratory Standards Institute. הנתונים המוצגים כאן מצביעים על כך שזן TB זה יהיה עמיד ל-Isid ול-Rifampin. במבחנה (In vitro), ערכי ה-mics הגבוהים שנצפו במספר תרופות אחרות, כולל oin, moxifloxacin, streptomycin ו-rifabutin, מצביעים על עמידותו של זן ה-EM tuberculosis לסוכנים אלו.יש להשתמש בתוצאות ה-MIC על ידי מומחה למחלות זיהומיות בעל ניסיון בטיפול בשחפת לצורך פיתוח תוכנית טיפול אישית. לאחר רכישת מיומנות, הכנת בידוד אחד בשיטה זו אורכת כ-40 דקות. בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב לזכור כי מדובר בפתוגן נשימתי וכי אין לייצר אירוסולים. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיה לכם הבנה טובה של אופן ביצוע בדיקת רגישות לאנטימיקרוביאליים עבור mycobacterium tuberculosis באמצעות שיטת דילול במיצואי צח (micro broth dilution). זכרו כי עבודה עם mycobacterium tuberculosis עלולה להיות מסוכנת ביותר, ויש לנקוט תמיד באמצעי זהירות, כגון הגנה נשימתית, במקום שבו הדבר נדרש.

antimicrobial-susceptibility-testing-mycobacterium-tuberculosis

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

תצפית מיקרוסקופית, רגישות לתרופות (MODS) assay היא בעלות נמוכה, low-tech כלי לגילוי בעל ביצועים גבוהים של שחפת (TB) ו multidrug עמיד שחפת (MDRTB). וידאו זה מתאר את שיטת התקשורת MODS נוזלי תרבות.

השיטה MODS לאבחון שחפת שחפת עמידים multidrug

שחפת Mycobacterium מהווה biofilms סמים סובלניים כאשר בתרבית בתנאים מסוימים. כאן אנו מתארים שיטות culturing מ ' שחפת biofilms וקביעת תדירות persisters סמים סובלניים. פרוטוקולים אלה יהיה שימושי למחקרים נוספים לתוך מנגנוני עמידות לתרופה בתוך: מ ' שחפת.

גידול של שחפת Mycobacterium Biofilms

מקור: Koeth, L. M., et. al., A Reference Broth Microdilution Method for Dalbavancin In Vitro Susceptibility Testing של חיידקים הגדלים באופן אירובי. J. Vis. Exp. (2015).סרטון זה מדגים את שיטת מיקרו-דילול המרק לקביעת הריכוז המעכב המינימלי (MIC) של אנטיביוטיקה ליפוגליקופפטיד כנגד חיידקים גראם חיוביים. הוא מכסה בידוד מושבות חיידקים, דילול, חיסון בארות מיקרו-צלחת עם ריכוזי אנטיביוטיקה משתנים, ואימות טוהר התרבית וספירת התאים. הסרטון גם מסביר כיצד קשירת אנטיביוטיקה משבשת את סינתזת דופן התא, מה שמוביל...

שיטת מיקרו-דילול מרק לבדיקת רגישות לאנטיביוטיקה של חיידקים גראם חיוביים

סרטון זה מדגים בדיקה להערכת יעילות התרופות נגד זיהום Mycobacterium tuberculosis (Mtb).  נוצר מודל זיהום במבחנה המכיל אגרגטים Mtb/מקרופאגים המחקה זיהום in vivo. עם החדרת אנטיביוטיקה מתאימה, יעילותם נבדקת באמצעות בדיקת resuzarin כדי לפקח על הישרדותם של חיידקים עם ריכוזי תרופות עולים.

בדיקה להערכת יעילות התרופה נגד מודל זיהום Mycobacterium tuberculosis

סרטון זה מדגים בדיקה במרק כדי לקבוע יעילות אנטיביוטית נגד Mycobacterium tuberculosis. תרבית החיידקים מודגרת בריכוזים שונים של אנטיביוטיקה קוטלת חיידקים. יעילות קוטל החיידקים נמדדת על ידי הערכת נוכחותם של חיידקים ברי קיימא באמצעות בדיקת רזזורין.

הערכת היעילות של תרכובת בדיקה נגד מיקובקטריה במרק

ה-charcoal agar resazurin assay (CARA) היא שיטה כמותית למחצה, תפוקה בינונית להערכת הפעילות של סוכני בדיקה כנגד מיקובקטריות המשכפלות, אינן משתכפלות או שניהם.  ה-CARA מאפשר הערכה מהירה של פעילות תלוית זמן וריכוז ומזהה פרמטרים שיש לעקוב אחריהם על ידי מבחני יחידת יצירת מושבה (CFU).

ויזואליזציה של Assay Resazurin פחם אגר עבור וכמותיות, ספירת בינוני תפוקה של Mycobacteria

פתחנו מערכת הקרנה מודולרית תפוקה גבוהה לגילוי תרכובות רומן נגד שחפת Mycobacterium, מיקוד תאי ב-המרק גובר חיידקים כמו גם רעילה לתאים נגד התא המארח היונק.

מערכת לסינון יעילות Cytotoxicity של מעכבי מיקוד תאי<em&gt; שחפת Mycobacterium</em

מודלים ומבחנים חדשים שישפרו את תהליך פיתוח התרופות המוקדם לתרופות נגד שחפת מהדור הבא הם רצויים מאוד. כאן, אנו מתארים בדיקה מהירה, זולה ותואמת BSL-2 להערכת יעילות התרופה נגד Mycobacterium tuberculosis שניתן להתאים בקלות לבדיקה בתפוקה גבוהה.

Assay תואם תפוקה גבוהה כדי להעריך יעילות התרופה נגד Macrophage passaged<em&gt; שחפת Mycobacterium</em

כימות מהיר ויעיל של גדילת שחפת M. תוך תאית הוא חיוני להמשך טיפולים משופרים נגד שחפת ( שחפת ). פרוטוקול זה מתאר בדיקת זיהוי קולורימטרית מבוססת מרק באמצעות מערכת תרבית נוזלית אוטומטית כדי לכמת את גידול ה-Mtb במקרופאגים שטופלו בטיפולים מוכווני מארח מועמדים.

מערכת תרבית אוטומטית לשימוש בבדיקות פרה-קליניות של טיפולים מכווני מארח לשחפת

כאן אנו מציגים פרוטוקול לזיהוי מועמדים פוטנציאליים לתרופות נגד שחפת באמצעות סקר פנוטיפי, הכולל סינתזה כימית של תרכובת 4-אמינוקווינולין, קביעת ריכוז המעכב המינימלי שלה נגד מיקובקטריום טוברקולוזיס, והערכת הציטוטוקסיות שלה בקווי תאים יונקים.

זיהוי מועמדים פוטנציאליים לאנטי-שחפת: מדריך שלב אחר שלב לסינתזה, קביעת MIC והערכת ציטוטוקסיות בתאי יונקים

למדו שיטה לבדיקת רגישות אנטיביוטית של Mycobacterium tuberculosis ל-12 תרופות בו-זמנית באמצעות פורמט פלייט microtiter. השיטה מאפשרת קביעת ערכי MIC לבחירת טיפול מתאים בחולי שחפת.

רגישות בדיקת Antimicrobial של קומפלקס שחפת Mycobacterium עבור תרופות הקו הראשון והשני על ידי דילול מרק בפורמט פלייט microtiter

גלה סרטונים נוספים