RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/3108-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
ליקוי קוגניטיבי הנובע מניהול רדיותרפי של גידולי מוח מייצג מצב בלתי פתיר מבחינה קלינית המשפיע לרעה על איכות החיים. היכולת להעריך באופן ביקורתי התערבויות פוטנציאליות לשיפור ירידות קוגניטיביות הנגרמות על ידי קרינה תלויה בסופו של דבר ביכולת לבצע הערכות כמותיות קפדניות של קוגניציה.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לכמת שינויים התנהגותיים וקוגניטיביים הנגרמים על ידי הקרנת גולגולת. הצעד הראשון הוא בדיקת זיכרון זיהוי מרחבי מבוסס היפוקמפוס באמצעות משימת זיהוי המקום החדשה. לאחר מכן, רמות החרדה מוערכות באמצעות משימת מבוך מוגברת פלוס, יצירת זיכרון מבוסס פחד, באמצעות משימת התניה הוגנת תלויה בהיפוקמפוס ובאמיגדלה, ולאחר מכן נמדדת משימת התניה של פחד תלויה באמיגדלה.
השלב האחרון הוא ניהול משימת מבוך המים של מוריס על מנת להעריך למידה מרחבית, זיכרון מרחבי ויכולת למידה הפוכה. בסופו של דבר, פרוטוקול זה מזהה שינויים במצב הרוח, למידה וזיכרון מרחביים ולא מרחביים, כמו גם כל הפרעה מוטורית חושית הנגרמת על ידי קרינה גולגולתית. אם כי שיטה זו יכולה לספק תובנה לגבי ההשפעות של הקרנת גולגולת על התנהגות וקוגניציה.
זה יכול לשמש גם למצבים אחרים שבהם הקוגניציה נפגעת כתופעת לוואי לא רצויה של טיפול אחר, כמו במקרה של ליקויי למידה וזיכרון הנגרמת על ידי כימותרפיה או כימותרפיה. אנשים חדשים בשיטה זו יתקשו בגלל האופי הגוזל זמן של הקמה ואופטימיזציה של הציוד. פרשנות הממצאים יכולה להיות קשה אם הליכי הניסוי אינם מבוקרים היטב, והשונות בנתונים מקשה על זיהוי הבדלים בין קבוצת ביקורת לקבוצת ניסוי.
הדגמה חזותית של מתודולוגיות אלה היא קריטית, כך שהקורא יכול להעריך את הדקויות הכרוכות בארגון או בחדרי הניסוי שבהם נערכת הבדיקה הקוגניטיבית, כמו גם את ההליכים הספציפיים בהם נעשה שימוש. על מנת להבטיח טיפול עקבי בבעלי החיים, יש להתחיל את שלב ההיכרות בהכנת סביבת הניסוי, לנקות היטב שני קוביות פלסטיק זהות עם 70% אתנול ולמקם אותם במיקומים ספציפיים בתוך הזירה. מקם את החיה במרכז הזירה ואפשר לה לחקור בחופשיות.
במשך חמש דקות, התנהגויות חקרניות מקבלות ניקוד. באמצעות מערכת מעקב אוטומטית, חקר מוגדר כאפו של בעל חיים שנמצא ברדיוס של ארבעה סנטימטרים ומכוון לעבר הבלוקים. כשנגמר הזמן, הוציאו את החיה לכלוב החזקה למשך חמש דקות נוספות.
במהלך תקופה זו, נקו את זירת הבדיקות עם 70% אתנול. הוסף עותק זהה אחד של הבלוקים לאותו מיקום מרחבי כמו בשלב ההיכרות ועותק אחד למיקום מרחבי חדש. לאחר מרווח העיכוב של חמש דקות, הכניסו מחדש את החיה לזירות הניסוי לשלב ניסוי של חמש דקות ואפשרו להם לחקור בחופשיות במשך שלוש דקות.
אם זוכרים את הסידור המרחבי של הבלוקים משלב ההיכרות, החולדה תבלה זמן רב יותר בחקר הבלוק במיקום המרחבי החדש. למחרת, החיות מוחזרות שוב לזירה. במשך שלב מבחן של 24 שעות, שוב, בלוק אחד נשאר במצב מוכר בעוד שאחר נמצא ברומן.
האחד, מקם את החיה במרכז הזירה והקלט את החקירה במשך שלוש דקות. מבוך הפלוס המוגבה מודד את רמות החרדה אצל מכרסמים. לפני הבדיקה, ודא שהמבוך מנוקה ביסודיות.
כדי להתחיל למקם את החיה בחלק המרכזי של המבוך מול הזרוע הפתוחה הרחק מהנסיין, אפשרו לחיה לחקור במשך חמש דקות. מספר הכניסות ומשך הזמן המושקע בזרועות הפתוחות והסגורות מתבצע באמצעות תוכנת מעקב אוטומטית. אם חולדה נופלת מהמבוך, הנח אותה במהירות בחזרה על זרוע פתוחה ותעד את האירוע.
שימו לב גם לכל התנהגות הקפאה יחד עם כל הסיבות האפשריות. התניה של פחד היא פרדיגמה התנהגותית שבה בעלי חיים לומדים לפחד מגירוי ניטרלי בעבר. על ידי זיווג עם גירוי מזיק ביום הראשון, הכניסו את החיה לתא נקי היטב.
התחל את ניסוי האימון, המורכב משלושה שלבים. הראשון הוא שלב בסיס של חמש דקות כאשר לא ניתן שוק חשמלי או טונוס במהלך שלב האימון, זיווגי זעזועים מרובים מוצגים על פני פרק זמן של חמש דקות. לבסוף, בשלב שלאחר האימון, החיה מקבלת חמש דקות נוספות.
בהיעדר שוק חשמלי או צליל, אחוז הזמן שכל בעל חיים מבלה בהקפאה נמדד מ-60 השניות האחרונות של שלב הבסיס ומ-60 השניות האחרונות של השלב שלאחר האימון. 24 שעות לאחר מכן, החזירו את החיה לתא לבדיקת הקשר של חמש דקות ורשמו את אחוז הזמן שהוקדש להקפאה שעה לאחר הבדיקה. בהקשר המוכר, הסר את רצפת הרשת, הוסף לוחות לחלק החיצוני של החדר ונקה עם חומר ניקוי ביתי ריחני.
כדי לבדוק התניה של פחד רמז, מקם את החיה בהקשר החדש ורשום התנהגות קפואה בנוכחות ובהיעדר הצליל שהוצמד קודם לכן לגירוי המזיק. מבוך המים של מוריס הוא מבחן ללמידה מרחבית הדורש שימוש ברמזים דיסטליים לאיתור פלטפורמת מילוט שקועה בבריכה גדולה של מים אטומים, המשימה מנוהלת על פני שמונה ימים ומורכבת מארבעה שלבים, בדיקת תור ורכישה. שלב מבחן בדיקה של 24 שעות, ומבחן למידה הפוך.
כדי להתחיל את המבחן בתור, הניחו דגל שחור ולבן מובהק באמצע הרציף כך שמיקום הבריחה יהיה ברור לבעל החיים. עבור כל ניסוי CUD, מקם את החיה במיקום התחלה אחר שנקבע מראש בהיקף הבריכה, העבר את הפלטפורמה לרביע אחר. עבור כל אחד מארבעת הניסויים, תנו לחיה 30 שניות למצוא את פלטפורמת המילוט.
אם מגיעים לזמן המקסימלי, הדריכו את בעלי החיים לשם ביד. אפשר לבעל החיים להישאר על הרציף למשך 20 שניות לפני הכנסתו לכלוב מחומם. למחרת, התחל את שלב הרכישה המורכב מארבעה ניסויים ביום במשך חמישה ימים רצופים.
במהלך שלב זה, הפלטפורמה הנסתרת נשארת באותו מיקום ובעלי חיים לומדים לנווט אליה. בעזרת רמזים דיסטליים לחדר, מקם את החיה בבריכה בנקודת התחלה אחרת שנקבעה מראש. עבור כל רשומת ניסוי, ההשהיה הממוצעת למציאת הפלטפורמה ואורך הנתיב כמדדים של למידה מרחבית.
אם בעל החיים לא נמלט בתוך זמן השחייה המרבי של 60 שניות, הונחו לפלטפורמה באופן ידני ואפשרו לה להישאר שם למשך 20 שניות. 24 שעות לאחר ניסוי האימון האחרון, ערכו ניסוי בדיקה 62 שבו הפלטפורמה מוסרת כדי לקבוע את העדפת החיה לרביע שהכיל בעבר את הפלטפורמה. לאחר ניסוי בדיקה זה, החזר את הפלטפורמה לאותו רבעון ונהל שלושה ניסויי רכישה נוספים למבחן Reversal Learning.
ביום השמיני, העבר את הפלטפורמה למיקום חדש. הכניסו את החיה לבריכה ומדדו את משך הזמן שהושקע בחיפוש אחר הפלטפורמה במיקומה הקודם לעומת הפלטפורמה החדשה כאן. תוצאות מבקרת ובעלי חיים מוקרנים במשימת זיהוי המקום החדש הראו ששתי העמדות נחקרו באופן שווה בשלב ההיכרות.
עם זאת, חיות ביקורת הראו העדפה ברורה למיקום המרחבי החדש לאחר מרווחי ההשהיה של חמש דקות ו-24 שעות, בעוד שבעלי חיים מוקרנים לא. במבוך המוגבה פלוס בעלי חיים מוקרנים בילו פחות זמן בחקר הזרועות הפתוחות ממה שניתן היה לצפות במקרה. אחוז ההקפאה במהלך החשיפה הראשונית לתא היה נמוך מאוד בהשוואה לתקופה שלאחר האימון למחרת.
התנהגות הקפאה עדיין גדלה בהקשר המוכר, אם כי הרבה פחות בבעלי חיים מוקרנים כאשר הוצבו בהקשר חדש, התנהגות הקפיאה חזרה לרמות הבסיס, אך הועלתה שוב על ידי הצגת הטון במבוך המים של מוריס. Task Control Animals איתרו את פלטפורמת Escape מהר יותר במהלך ניסויים עוקבים בהשוואה לבעלי חיים מוקרנים. בעלי חיים מוקרנים גם לקחו יותר זמן ונתיב ארוך יותר לפלטפורמה בניסוי בדיקה, 24 שעות לאחר מכן במהלך מבחן הלמידה ההפוכה, כאשר מיקום הפלטפורמה משתנה, בעלי חיים רגילים מפסיקים בהדרגה לחפש ברביע הישן ולומדים את מיקום הפלטפורמה החדשה, בעוד שבעלי חיים מוקרנים לא.
בעת ביצוע משימות אלו, חשוב לרשום הערות מפורטות לגבי אירועים או התנהגויות חריגות, כמו גם כל בעיות מעקב שמתעוררות שיש לטפל בהן לפני ניתוח הנתונים. אל תשכח שעבודה עם חיות ניסוי עלולה להיות מסוכנת ותמיד יש להשתמש באמצעי זהירות כגון שימוש בציוד מגן אישי בעת ביצוע הליכים אלה. כמו כן, חיוני לקבל אישור מוסדי ולעקוב אחר הנחיות מוסדיות ופדרליות לשימוש בטוח ואתי בבעלי חיים.
Related Videos
11:24
Related Videos
15K Views
11:45
Related Videos
12.5K Views
09:11
Related Videos
22.7K Views
07:27
Related Videos
9K Views
06:23
Related Videos
33.5K Views
07:55
Related Videos
11.9K Views
09:58
Related Videos
7.8K Views
07:30
Related Videos
3.3K Views
07:57
Related Videos
3K Views
08:27
Related Videos
734 Views