דום לב Normothermic ו החייאה: במודל עכבר של פגיעה איסכמיה reperfusion

מודל רב עוצמה עבור perioperative וביקורתית טיפול הקשור לפגיעה כליות חריפה מוצגת. שימוש hypoperfusion כל הגוף הנגרמת על ידי דום לב אפשר כמעט לשחזר את השינויים היסטולוגית ופונקציונלי של AKI קליניים.

המטרה הכוללת של הליך זה היא למדל רפרפוזיה גלובלית של איסכמיה של Norm Themic כדי להעריך את ההשפעה של התערבויות על מצב מחלה חשוב ונפוץ זה. ראשית, מכינים עכבר מורדם לדום לב והחייאה או החייאה. לאחר מכן נגרם דום לב.

לאחר מכן העכבר עובר החייאה מדום לב באמצעות לחיצות חזה ואפינפרין. בסופו של דבר, ניתן לבצע בדיקות פונקציונליות כגון אוריאה בדם, חנקן, קריאטינין בסרום, אלן טרנספראזס, אספרטט לטרנספראזות קלות והיסטולוגיה כדי להעריך את הנזק המשמעותי לאיברים. ניתן למדוד גם את נוכחותם של סמנים ביולוגיים מוקדמים כגון ליפו קאלין הקשור לג'לטין נויטרופיל.

לבסוף, תוצאת ההחייאה מוערכת כאן, ומודגמת כ-24 שעות של טראנס לב-ריאה, זלוף וקצירת כליות. היתרון העיקרי של מודל זה על פני השיטות האחרות שלנו, כגון מודלים גדולים יותר של בעלי חיים של דום לב והחייאת לב ריאה, הוא שעכברי מעבדה הם זולים, נמצאים בכל מקום וזמינים בזנים טרנסגניים רבים. כדי להתחיל, יש לשמן את עיניו של עכבר מורדם ולהניח את החיה במצב שכיבה על כרית חימום.

לאחר מכן קבעו את גפיים החיה באמצעות סרט, הניחו את הנקבוביות האחוריות במצב ניטרלי, אך אבטחו את ארבע הנקבוביות קרוב ככל האפשר לדופן החזה כדי לאפשר טיול מלא של דופן החזה במהלך לחיצות חזה. לאחר מכן יש לשמן ולהניח בדיקת טמפרטורה רקטלית. החדרו את קנה הנשימה באמצעות קטטר טפלון בגודל 22 ומכניס זוויתי.

ניתן לאשר את המיקום האנדוטרכאלי של הצינור באמצעות לחץ חיובי או שלילי. באמצעות לחץ חיובי, נפח אוויר קטן נאלץ לתוך הצינור. אם הצינור ממוקם בקנה הנשימה ולא בוושט, החזה עולה באופן סימטרי באמצעות לחץ שלילי.

כמות קטנה של נוזל מונחת בצינורות שקופים, המחוברים לצינור האנדוטרכיאלי. מאמץ נשימתי ספונטני של העכבר מניע את הנוזל בתוך הצינור. אבטח את הצנתר האנדוטרכיאלי עם לולאת חוט לחותך, תוך שמירה על מתח קל על החותך כדי לשמור על הראש משותק במהלך לחיצות חזה.

אוורר את העכבר באופן מכני כאשר מאוורר המכרסמים מוגדר ל -140 מיקרוליטר 150 נשימות לדקה. באמצעות טכניקה סטרילית ומיקרוסקופ ניתוח, הנח קטטר PE 10 שטוף מראש בווריד הצוואר. אבטח את קטטר PE 10 לתוך סגירת העור עם דבק כירורגי ציאנואקרילט.

הניחו שלוש אלקטרודות א.ק.ג תת עוריות, אחת ליד כל ציר, ואחת ברבע התחתון השמאלי של הבטן. ודא שכל החוטים מאובטחים למשטח ההפעלה. צמצם את מעברי האותות ומזער את המבודדים בתוך נתיב האות.

לאחר החיבור, בצע אופטימיזציה של אות ה-EKG בצג. ודא שהעכבר הוא נושא נורמלי. יש לתת 40 מיקרוליטר של טמפרטורת החדר, 0.5 אשלגן כלורי מולארי תוך ורידי, ולהתבונן במעקב האיזואלקטרי על האק"ג.

הפעל את טיימר המעצר. לאחר מכן, נתק את מכונת ההנשמה והפסק את אדי ההרדמה. כבה את כרית החימום וכל ציוד אחר המייצר רעש אלקטרוני ועלול להפריע לניטור האק"ג.

הניחו שמיכת בידוד מעל העכבר. רשום את הטמפרטורה כל דקה במהלך דום לב. במידת הצורך, השתמש במנורת חימום כדי להעלות את טמפרטורת הליבה לטווח הנושא הרגיל.

לאחר שבע דקות ו-30 שניות של דום לב, חברו מחדש את מכונת ההנשמה והגדילו את הקצב ל-180 נשימות בדקה. ביצוע לחיצות חזה כדי להחזיר את זרימת הדם הספונטנית הוא החלק המסובך ביותר במודל זה. העכבר די קטן, ולכן המיקום והלחץ הם קריטיים.

לחץ רב מדי יגרום לפגיעה בריאות ובכבד ויפחית את ההישרדות. לחץ מועט מדי יפחית את ההסתברות להחזרת מחזור ספונטני. יש לדחוס את החזה משליש למחצית משורת ה- ANA.

יש לאפשר מרחק אחורי ורתיעה מלאה בין הלחיצות. כישלון בהשגת הישרדות במודל זה נובע כמעט תמיד מהחייאה לא אופטימלית בשמונה דקות. התחל לחיצות חזה ב -300 פעימות לדקה.

יש להעביר דחיסת חזה עם האצבע המורה. חמישה מילימטרים מעל תהליך ה- xiphoid ומעט משמאל לקו האמצע להחדיר. 0.5 מיליליטר אפינפרין מדולל ל -15 מיקרוגרם למיליליטר.

ב-30 השניות הראשונות של ההחייאה, יש להתבונן היטב ב-EKG להחזרת זרימת הדם הספונטנית או ROSC, התכווצויות חדרים מוקדמות תכופות ושינויים בציר ה-EKG נצפים בשתי הדקות הראשונות. ROSC וכמעט תמיד נפתר לטכיקרדיה יציבה בסינוסים. לאחר שתי דקות, רשום את הזמן הכולל של ההחייאה ומינון האפינפרין.

רשום את הטמפרטורה כל דקה למשך 10 דקות. לאחר R-O-S-C-E-K-G ניתן להסיר מובילים כאשר מתחילה נשימה ספונטנית, בדרך כלל תוך 12 עד 50 דקות לאחר ROSC, הסר את קטטר הצוואר והשתמש בלחץ ישיר כדי להשיג המוסטזיס, הוצא את קנה הנשימה כאשר קצב הנשימה הספונטני גדול מ-60 לדקה. לבסוף, הנח את העכבר בכלוב התאוששות על משטח מבוקר טמפרטורה המוגדר ל-37 מעלות צלזיוס למשך השעתיים הראשונות לאחר ההליך או יותר במידת הצורך להחלמה מלאה מההרדמה, ניתן להעביר את הכלוב לתנאי דיור סטנדרטיים לאחר הניתוח 24 שעות לאחר C-A-C-P-R להרדים את העכבר ולבצע זלוף לב טרנס תחילה עם מי מלח ולאחר מכן עם פורמלין לאחר קיבוע, לפרוטומיה מבוצעת כדי לבדוק את נאותות הקיבוע הכלייתי.

כליות מקובעות ומקובעות כראוי מולבנות היטב. דום לב גורם לאובדן מיידי של זלוף. לחץ מיוצג כאן כלחץ עורקי ממוצע או מפה.

אובדן זה של לחץ הזלוף מביא להפסקה כמעט מוחלטת של זרימת הדם האזורית בקליפת הכליה או RR CBF לאורך כל תקופת דום הלב באזור המוצל. כפי שניתן לראות כאן, החייאה עם לחיצות חזה והחזרות אפינפרין ממופות לנורמה ו-RR CBF עולה בהתמדה בתקופה שלאחר ההחייאה. באיור זה, ניתן לראות כיצד 24 שעות לאחר ההליך חנקן אוריאה בדם או קריאטינין בסרום BUN והיקף מוות התאים הצינוריים כולם גבוהים באופן משמעותי בבעלי חיים שעברו החייאה בהשוואה לבעלי חיים שטופלו בהליך דמה ca החייאה גורמת כאן לעלבון איסכמי פאן-אורגניזמי, עדות על ידי עלייה מסיבית של אנזימי תפקודי כבד, Alan Transferases או LT ואספרטט ל-minoro transferase או ST ב-ca, עכברי החייאה בהשוואה לבעלי חיים שטופלו בדמה.

כאן, כתם מערבי המבוצע באמצעות נוגדן פוליקלונלי לנויטרופילים ג'לטין הקשורים לליפו קאלין או סוף גל. מוצג אינדיקטור רגיש לפגיעה איסכמית כלייתית. דגימות שתן נלקחו מיד לפני ו-24 שעות לאחר C-A-C-P-R בארבעה בעלי חיים המיוצגים כ-A, B, C ו-D.נתון זה מראה כי N gal מווסת באופן מסיבי בשתן עכברים לאחר C-A-C-P-R.

איור זה מציג כתם המט, טואין ואואין של קטע הילר ציר קצר של רקמת הכליה 24 שעות לאחר החייאה, אך ניתן לראות נזק ברור לצינורות המדולריים המדולריים וקורטיקו עם סתימה צינורית כתם פלואורו ירקן B של אותו אזור באותה חיה. 24 שעות לאחר C-A-C-P-R ניתן לראות באיור זה, ירקן הפלואורו B מכתים את התאים הנמקיים בירוק בהיר, ומראה נמק טובולין מדולרי של קורטיקו. ממצאים אלה דומים באופן מהותי לממצאי ביופסיית כליה מבני אדם שפיתחו פגיעה כלייתית חריפה או KI ובניגוד לאלה שהופקו על ידי מודלים אחרים של בעלי חיים של KI, בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור למקם את העכבר בזהירות לפני מנוחה כדי למזער את רעש אות ה-EKG, ולספק לחיצות חזה בלחץ אופטימלי.