תגובות פוסט-סינפטיות מעוררות אור בתאי עצב של פרוסות רשתית עכבר
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:35 דק׳ • July 8th, 2025
קח פרוסת רשתית של עכבר מותאמת כהה בתוך תא הקלטה בחדר חשוך. הרשתית יושבת על בסיס מלאכותי תומך המונח מעל תלוש כיסוי. יש לערבב את הפרוסה ב- aCSF.
הרשת העצבית ברשתית כוללת קולטני אור המקושרים באופן סינפטי לתאים דו קוטביים המסונפסים עם תאי גנגליון.
מקם פיפטת הקלטה ליד הרשתית.
תחת מיקרוסקופ, הפעל לחץ חיובי תוך כדי התקרבות לתא גנגליון מטרה.
עבור ללחץ שלילי כדי למשוך טלאי ממברנה, ואז קרע אותו כדי ליצור המשכיות עם הציטופלזמה.
בחושך, קרום קולטני האור נשאר דה-פולריזציה, מה שמוביל לשחרור נוירוטרנסמיטרים.
נוירוטרנסמיטורים הנקשרים לקולטני תאים דו קוטביים מפעילים סגירת ערוץ קטיון, ומעכבים את העברת האותות.
החל דופק אור כדי להקפיא את קולטני האור. שחרור המוליך העצבי המופחת מפעיל פתיחת תעלות קטיון בתאים דו קוטביים.
זרם קטיון גורם לשחרור נוירוטרנסמיטר שנקשר לקולטני תאי גנגליון, ויוצר פוטנציאל פוסט-סינפטי מעורר שנרשם על ידי הפיפטה.
להקלטות מהדק טלאי, העמיסו את צינורות הזילוף במדיום של איימס ואפשרו לכל הבועות לעבור מהצינור. לאחר הכנת פיפטות הקלטה עם מושך זכוכית, מלאו מחדש את הקצה בתמיסת פיפטה. לאחר מכן, השתמש במילוי מיקרופיפטה כדי למלא כשליש מהפיפטה. לאחר המילוי, אחסן כל פיפטה בקופסת פיפטה לחה.
לאחר מכן, הפעל את הציוד להקלטות מהדק תיקון, כולל המחשב, המגבר, מצלמת CCD והמיקרוסקופ. בעבודה בתנאי חושך הנח תכ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים