אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 2:53 דק׳ • July 8th, 2025
הרכיבו זבוב דרוזופילה חי בצינור כשראשו חשוף, אנטנות מודבקות לסרט דביק ומאובטחות על ידי מוט אחיזה.
שמור את התכשיר תחת זרימה מתמדת של אוויר לח כדי למנוע התייבשות.
הכנס את אלקטרודת הייחוס דרך הקליפיאוס, מבנה תומך המגן על חלקי הפה, כדי להגיע למערכת הדם.
הנח את אלקטרודת ההקלטה ליד הסנסילום, איבר החישה של החרק.
הכנס את האלקטרודה לבסיס הסנסילום.
רשום אותות עם קוצים ספציפיים כדי לאשר את מיקום האלקטרודה הנכון ליד נוירוני קולטני הריח.
חבר מחסנית המכילה את ריח הבדיקה לצינור המסירה.
מקם את הצינור המכוון לאנטנה של הזבוב, התאם את הגובה והמרחק מהאלקטרודות.
באמצעות התוכנה, הגדר את קצב זרימת הריח וכמות המינון, ולאחר מכן שחרר את הריח.
כעת, רשמו אותות חשמליים כדי ללכוד את התגובה העצבית של הזבוב לריח.
כדי לצלם הקלטות, הכנס את אלקטרודת הייחוס לקליפיאוס בתנועה מהירה וחלקה. הניחו אותו ממש מתחת לציפורן היכן שהוא יהיה במגע עם המולימפה. לאחר מכן, הורד לאט את אלקטרודת ההקלטה עד שהיא נכנסת לאותו מישור ראייה כמו סנסילום המטרה. לאחר מכן, הכנס את אלקטרודת ההקלטה לבסיס הרגיש.
לפני שתמשיך, ודא שיש יחס אות לרעש גבוה, עם קוצים ניתנים לזיהוי מנוירונים at4A ו-at4C. תא העצב at4A אמור לירות לא יותר מ-20 הרץ.
כעת, חבר את המחסנית לצינור אספקת הריח. במקרה זה, מחסנית חומצה פלמיטולאית מחוברת. לאחר מכן, השתמש במיקרומניפולטור כדי לתמרן את המחסנית לכיוון ההכנה תוך כדי כיוונה אותה לראש. מקם את קצה המחסנית המצביע ישירות על האנטנה ממרחק של כ-4 מילימטרים. המחסנית חייבת להיות גם כמילימטר אחד מעל המגלשה.
המחסנית עשויה להיות תחומה מאוד על ידי האלקטרודות והשקופית. באופן אידיאלי זה צריך להיות לפחות ארבעה מילימטרים מכל אלקטרודה. לגירוי, הגדר את בקר זרימת הריח להתפרצויות של 500 אלפיות השנייה והשתמש בקצב זרימה של 500 מיליליטר לדקה. עבור כל פרץ גירוי, רשום את הפעילות החשמלית למשך 10 שניות.