זיהוי תגובות פיזיולוגיות מתאי עצב חושיים בדרוזופילה

חבר על צדו Drosophila melanogaster מהונדס גנטית מורדם לכיסוי.

הארך את רגליו הקדמיות ואבטח אותן כדי לחשוף את מקטעי הטרסל.

למקטעים אלה יש נוירונים טעמיים המבטאים קומפלקסים של אינדיקטורים לסידן שזוהרים בצורה הקשורה לסידן.

צייר מחסום הידרופובי סביב הזבוב כדי לשמור על התמיסה.

אפשר לזבוב להתאושש ולכסות תמיסת מלח חוצצת על מקטעי הטרסל החשופים כדי להרטיב אותם.

תחת מיקרוסקופ קונפוקלי, התבונן במקטעי טרסל ודמיין את נוירוני הטעם בעומקים שונים כדי לקבל פלואורסצנטיות לפני גירוי.

הוסף תמיסת גירוי המכילה ליגנדים ליפופיליים על הקטע.

ליגנדים אלה נקשרים לקולטני נוירוני הגעש, יוזמים מסלולי איתות ומפעילים פתיחת תעלות סידן.

זה מאפשר ליוני סידן מהנוזל החוץ-תאי להיכנס לציטופלזמה ולהיקשר למתחמי אינדיקטור הסידן, וכתוצאה מכך פליטת פלואורסצנטיות.

כאשר נצפה שוב, עלייה בפלואורסצנציה העצבית מאשרת את התגובה הפיזיולוגית העצבית לליגנד.

לאחר הרדמת הזבוב, חבר אותו לכיסוי של 0.17 מילימטר, בעזרת טיפה קטנה מאוד של לק שקוף. חבר את צד הזבוב למגלשה באמצעות הטיפה כולה. לאחר מכן, תחת מיקרוסקופ מנתח, השתמש במכחול רטוב כדי להאריך את הרגל הקדמית של הזבוב. לאחר מכן, בעזרת שתי רצועות סרט דקות מאוד, אבטח את מקטעי הטרסל הראשון והחמישי לכיסוי.

אם רוצים לדמות נוירונים בחוטם, הנח רצועה דקה נוספת של סרט על דוכן הפרובוסקיס כדי לחשוף את ה