Name: הערכת אורך של עכבר הינד איבוד מסת העצם לימב לאחר פגיעה בחוט השדרה באמצעות רומן, In vivo מתודולוגיה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-12-07T12:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 39 s
Description: למדו שיטה חדשנית להערכת אובדן צפיפות העצם בעכברים לאחר פגיעה בחוט השדרה באמצעות צילומי רנטגן במינון נמוך. השיטה מאפשרת מעקב לאורך זמן בגפיים האחוריות ומספקת רזולוציה מרחבית וזמנית גבוהה למחקר אוסטאופורוזיס.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ברצוננו להודות גם חבר המשלחת וקרן Gillson-Longenbaugh למתן כספים עבור פרויקט זה. אנחנו רוצים גם להודות לד&quot;ר קתרין אמברוז עצה קריטית שלה שימוש בציוד שלה DXA. לבסוף, ברצוננו להודות לד&quot;ר קאורי אונו, החוג לביולוגיה אינטגרטיבית לפרמקולוגיה, לקבלת הצעות אותה בניתוח עצם DXA הירך.

<ol><li>Jiang, S. D., Jiang, L. S., Dai, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+osteoporosis+in+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Endocrinol.+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of osteoporosis in spinal cord injury.</a> Clin. Endocrinol. (Oxford). 65, 555-565 (2006).</li>
<li>Uebelhart, D., Demiaux-Domenech, B., Roth, M., Chantraine, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+metabolism+in+spinal+cord+injured+individuals+and+in+others+who+have+prolonged+immobilisation.+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Paraplegia%22%5BJournal%5D)">Bone metabolism in spinal cord injured individuals and in others who have prolonged immobilisation. A review.</a> Paraplegia. 33, 669-673 (1995).</li>
<li>Elefteriou, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+signaling+and+the+regulation+of+bone+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.+Mol.+Life.+Sci%22%5BJournal%5D)">Neuronal signaling and the regulation of bone remodeling.</a> Cell. Mol. Life. Sci. 62, 2339-2349 (2005).</li>
<li>Finsen, V., Indredavik, B., Fougner, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+mineral+and+hormone+status+in+paraplegics%5BTitle%5D)+AND+%22Paraplegia%22%5BJournal%5D)">Bone mineral and hormone status in paraplegics.</a> Paraplegia. 30, 343-347 (1992).</li>
<li>Sugawara, H., Linsenmeyer, T. A., Beam, H., Parsons, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+properties+of+bone+in+a+paraplegic+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Spinal.+Cord.+Med%22%5BJournal%5D)">Mechanical properties of bone in a paraplegic rat model.</a> J. Spinal. Cord. Med. 21, 302-308 (1998).</li>
<li>Kiratli, B. J., Smith, A. E., Nauenberg, T., Kallfelz, C. F., Perkash, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+mineral+and+geometric+changes+through+the+femur+with+immobilization+due+to+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Rehabil.+Res.+Dev%22%5BJournal%5D)">Bone mineral and geometric changes through the femur with immobilization due to spinal cord injury.</a> J. Rehabil. Res. Dev. 37, 225-233 (2000).</li>
<li>Shen, J., Fan, L., Yang, J., Shen, A. G., Hu, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+longitudinal+Raman+microspectroscopic+study+of+osteoporosis+induced+by+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoporos.+Int%22%5BJournal%5D)">A longitudinal Raman microspectroscopic study of osteoporosis induced by spinal cord injury.</a> Osteoporos. Int. 21, 81-87 (2010).</li>
<li>Guertin, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technological+platform+to+optimize+combinatorial+treatment+design+and+discovery+for+chronic+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Res%22%5BJournal%5D)">A technological platform to optimize combinatorial treatment design and discovery for chronic spinal cord injury.</a> J. Neurosci. Res. 86, 3039-3051 (2008).</li>
<li>Picard, S., Lapointe, N. P., Brown, J. P., Guertin, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histomorphometric+and+densitometric+changes+in+the+femora+of+spinal+cord+transected+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Anat.+Rec.+%28Hoboken%29%22%5BJournal%5D)">Histomorphometric and densitometric changes in the femora of spinal cord transected mice.</a> Anat. Rec. (Hoboken). 291, 303-307 (2008).</li>
<li>Kuhn, P. L., Wrathall, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+graded+contusive+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A mouse model of graded contusive spinal cord injury.</a> J. Neurotrauma. 15, 125-140 (1998).</li>
<li>Tsujio, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((mineral+analysis+through+dual+energy+X-ray+absorptiometry+in+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vet.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">mineral analysis through dual energy X-ray absorptiometry in laboratory animals.</a> J. Vet. Med. Sci. 71, 1493-1497 (2009).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

מחקר זה מציג רומן, פולשני שיטה להערכת שינויים בצפיפות בתוך עצמות אדם (tibiae ואת עצמות הירך) longitudinally, בתוך קבוצה אחת של עכברים, באמצעות IVIS Caliper לומינה XR מערכת הדמיה. SCI המיוצר ירידה בצפיפות העצם בשתי עצמות הירך לבין tibiae כאשר חקרו בתוך קבוצה אחת של spinally-transected העכברים לאורך תקופה assay 40 יום לעומת גיל בהתאמה, וללא כל פגע עכברים שליטה. התוצאות שלנו ב הירך אושרו, שלאחר המוות, באמצעות DXA, טוען כי הבקשה של מכשירים Caliper IVIS לומינה XR יכול לשמש ככלי מדידה רגיש כדי להעריך את ההשפעות לטווח ארוך ומתקדמת של SCI על איבוד מסת העצם . אחד היתרונות הפוטנציאליים החוקרים באמצעות מערכת זו היא היכולת longitudinally לעקוב אחר התפתחות של שינויים פתולוגיים בעצמות הגפיים האחוריות של בעלי החיים לאחר SCI. היכולת להעריך קבוצה אחת על פני תקופות זמן מספק רחוביתרונות rong לחוקר במונחים של: 1) העלויות הכרוכות ברכישת חיות סיעודי. במקום מחקר הדורשים מספר רב של בעלי חיים כי צריך להקריב בנקודות זמן ספציפיות על מנת להעריך שינויים תלויי זמן, תוצאות אלו פתולוגי ניתן בעקבות בתוך קבוצה זאת על פני תקופה כי באותו זמן, 2) שונות: בנוסף השוואה עם קבוצות בקרה, תוצאות שנוצר בתוך הדור יחיד של נושאים נפצעו ניתן להעריך ולהשוות בין נקודות זמן החיות אותו לאורך כל היקף המחקר, שוב, הפחתת שתי השתנות פנים בעלי חיים, כמו גם את הצורך גדול קבוצות של נושאים ניסיוני. בעוד IVIS Caliper לומינה XR סיפקו לנו מידע חשוב האורך לגבי התפתחות אוסטאופורוזיס SCI-Induced, קיימות מגבלות שיש לשקול: 1) בעוד פלטפורמה זו אפשרה לנו ליצור ברזולוציה גבוהה רנטגן datבעצמות הגפיים האחוריות של עכברים לאחר SCI, השירות שלה עשוי להיות מוגבל מכרסמים קטנים כגון עכברים. הגובה נושא המרבי המותר בתוך XR לומינה הוא 2.8 ס&quot;מ. כל דבר מעל גובה שלא ניתן צילמו בהצלחה באמצעות רכיב ה-X של XR לומינה. בידיים שלנו, זה מנע את היכולת שלנו ללמוד חולדות במשקל 200-250 גרם. אמנם ייתכן שניתן חולדות תמונה תחת טווח זה משקל או מכרסמים אחרים, כגון אוגרים או גרבילים, זה יחייב בדיקות נוספות על ידי PI. 2) Joint אוריינטציה. זה קריטי, כי החוקר בקפידה לסדר את אברים באוריינטציה לשחזור בקלות שיאפשר השוואה מוצלחת בין הפגישות הדמיה. סטנדרטיזציה של מיקום האיבר יאפשר החוקר להפיק וליישם סטנדרטית של ROI כי ניתן לשמור ו מיושם על שני נושאים וזמן. בסך הכל, אנו מאמינים כי IVIS לומינה XR מספק פלטפורמה מצוינת שבה המודלהתפתחות אוסטאופורוזיס SCI תלויי בעכברים. היכולת ללמוד איבוד מסת העצם longitudinally בתוך הדור עכבר זהה יאפשר לנו: 1) להבין טוב יותר את האופי הזמני של איבוד מסת העצם ואת איבוד מינרלים לאחר SCI, 2) לקבוע אם שינויים אלה לייצב לאורך זמן, 3) לחקור, עם הזמינות של שני קווי עכבר מהונדס null, את היכולת ללמוד את המנגנונים המולקולריים שבבסיס אלה שינויים פתולוגיים בצורה רדוקציוניסטית, ו 4) ייתכן מאוד את היתרון החשוב ביותר, מתחילים לבדוק התערבויות הרומן נועד גם למנוע התפתחות של אוסטאופורוזיס בשלבים המוקדמים הפציעה, או להפוך שינויים כאלה פעם אוסטאופורוזיס כבר פיתח. לבסוף, XR לומינה, בנוסף לספק פוטנציאל מעולה הדמיה רנטגן, יכול לשמש גם כדי ללמוד הן אותות bioluminescent ו ניאון בעלי חיים. אפשר בקלות לדמיין שילוב שיטות אחרות המוצעות בתוך המערכת הזאת להסתכל מולtitude של הגורמים הקובעים הדינמיקה עצם מכניסטי הבאים SCI או כל מחלה אחרת בתהליך המביא לאוסטיאופורוזיס.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> שם מגיב </th><th> חברה </th><th> מספר קטלוגי </th><th> תגובות </th></tr><tr><td> Beuthanasia </td><td> שיין באטלר בעלי חיים בריאות </td><td> 001848 </td><td></td></tr><tr><td> Ketathesia (קטמין Hydrochloride) </td><td> שיין באטלר בעלי חיים בריאות </td><td> 023061 </td><td></td></tr><tr><td> Xylazine </td><td> שיין באטלר בעלי חיים בריאות </td><td> 037849 </td><td></td></tr><tr><td> Bupivicaine </td><td> שיין באטלר בעלי חיים בריאות </td><td> 021801 </td><td></td></tr><tr><td> Gelfoam; 7mm </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> NC0085178 </td><td> כדי לקדם במהלך hemostasis ניתוח </td></tr><tr><td> IVIS לומינה XR </td><td> Caliper מדעי החיים </td><td> 135400 </td><td></td></tr><tr><td> ZFOV, 2.5 השדה ס&quot;מ נוף עדשה </td><td> Caliper מדעי החיים </td><td> 127285 </td><td> הכרחי אלליצור גבוה הגדלה רנטגן תמונות של העצם מבנה </td></tr><tr><td> QDR עצם צפיפות </td><td> Hologic </td><td></td><td> הדגם כבר לא בשימוש הייצור </td></tr></tbody></table>

הערכת אורך של עכבר הינד איבוד מסת העצם לימב לאחר פגיעה בחוט השדרה באמצעות רומן, in vivo מתודולוגיה

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

פגיעה בחוט השדרה (SCI) מלווה לעתים קרובות באזורים sublesional של האגן ואת הגפיים התחתונות על ידי אוסטאופורוזיס, המוביל תדירות גבוהה יותר של שברים 1. כמו שברים אלה לעיתים קרובות מופיעות באזורים שאיבדו את התפקוד החושי הרגיל, החולה נמצא בסיכון גדול יותר של פתולוגיות שבר תלויי, כולל מוות. SCI תלויי אובדן צפיפות העצם הן (BMD, גרם / ס&quot;מ 2) ו המינרלים בעצמות תוכן (BMC, גרם) יוחסה חוסר שימוש מכני 2, 3 סוטה איתות עצבי ושינויים הורמונליים 4. השימוש במודלים של מכרסמים אוסטאופורוזיס SCI-Induced יכולים לספק מידע רב ערך לגבי המנגנונים שבבסיס התפתחות אוסטאופורוזיס הבאים SCI כמו גם סביבת בדיקה עבור הדור של טיפולים חדשים 5-7 (ו הנסקרת ב 8). מודלים עכבר של SCI הם עניין רב כפי שהם היתר הגישה הרדוקציוניסטית אל ba-מנגנוןsed הערכה באמצעות העכברים הטרנסגניים בטלה. בעוד מודלים כגון סיפקו נתונים חשובים, עדיין יש צורך, שיטות מינימלית פולשנית ואמינה, לשחזור, וכמותיים בקביעת מידת איבוד מסת העצם הבא SCI, במיוחד לאורך זמן בתוך קבוצה זהה של חיות הניסוי, כדי לשפר את האבחון , שיטות טיפול, ו / או מניעת אוסטאופורוזיס SCI-Induced. שיטה אידיאלי למדידת צפיפות העצם אצל מכרסמים תאפשר חשיפות מרובות, רציפים (לאורך זמן) אל רמות נמוכות של קרינת רנטגן. מחקר זה מתאר את השימוש בסורק שלמה חיה חדשה, IVIS לומינה XR (Caliper מכשירים), שניתן להשתמש בהם כדי לספק אנרגיה נמוכה (1-3 milligray (mGy)) ברזולוציה גבוהה, בהגדלה גבוהה רנטגן תמונות של עצמות הגפיים האחוריות בעכבר לאורך זמן לאחר SCI. אובדן משמעותי בצפיפות העצם נצפתה tibiae של עכברים על ידי 10 ימים לאחר חיתוך רוחב השדרה בהשוואה מלאה וללא כל פגע גיל בהתאמה, (נאיבי) עכברים (13% ירידה, p &lt;0.0005). אובדן צפיפות העצם בעצם הירך הדיסטלית גם לזיהוי על ידי 10 יום שלאחר SCI, בעוד הפסד של צפיפות עצם הירך הפרוקסימלית, לא היה ניתן לגילוי עד 40 ימים שלאחר פציעה (ירידה של 7%, p &lt;0.05). SCI תלויי אובדן צפיפות עצם הירך עכבר אושרה שלאחר המוות באמצעות Dual-X-ray אנרגיה (DXA) absorptiometry, את &quot;תקן הזהב&quot; הנוכחי עבור מדידות צפיפות העצם. אנו מזהים אובדן 12% BMC את עצמות הירך של עכברים ב 40 יום שלאחר SCI באמצעות IVIS לומינה XR. זאת, לעומת לטובה עם הפסד BMC שדווח בעבר של 13.5% על ידי פיקארד וחבריו שנהגו ניתוח DXA על העכבר עצמות הירך שלאחר המוות 30 הימים שלאחר SCI 9. התוצאות שלנו מראים כי IVIS לומינה XR מספק רומן, שיטה high-resolution/high-magnification לביצוע לטווח ארוך, מידות האורך של איבר האחוריות צפיפות העצם עכבר הבאה SCI.

בדיקת האורך של איבוד מסת העצם של עצמות הירך לבין tibiae של עכברים בוגרים בוצעה בעקבות פגיעה בחוט השדרה באמצעות רציפים במינון נמוך רנטגן סורק. אובדן העצם Tibia זוהה לאורך כל תקופת המחקר, תוך איבוד מסת העצם בעצם הירך לא זוהה עד 40 ימים שלאחר הפציעה.

הערכת אורך של עכבר הינד איבוד מסת העצם לימב לאחר פגיעה בחוט השדרה באמצעות רומן, In vivo מתודולוגיה

פגיעה בחוט השדרה (SCI) מלווה לעיתים קרובות באוסטאופורוזיס באזורים שמתחת לנגע באגן ובגפיים התחתונות, מה שמוביל לשיעור גבוה יותר של...

נוהל זה מדגים שיטה חדשנית המשמשת לזיהוי וכימות של אובדן צפיפות העצם בגפיים האחוריות של עכבר, כתלות בזמן, בעקבות פגיעה בחוט השדרה. הדבר מבוצע תחילה על ידי ביצוע פגיעת חיתוך (transection) של חוט השדרה בעכבר שהורדם תחת תנאים סטריליים ובאישור של ה-alac. לאחר תקופת התאוששות, בעל החיים מורדם שוב ומתקבלות תמונות רנטגן של ה-tibia וה-fibia של שתי הגפיים האחוריות, ימין ושמאל.פעולה זו מבוצעת מדי שבוע עד ל-40 ימים לאחר הפציעה. לאחר מכן, מבוצע ניתוח תמונה של סריקות הרנטגן. השלב האחרון הוא ביצוע הערכה פוסט-מורטם של צפיפות העצם בעצמות הגפיים האחוריות שהוצאו.בסופו של דבר, התוצאות מראות כיצד פגיעה בחוט השדרה גורמת לאובדן מהיר ופרוגרסיבי של צפיפות העצם בגפיים האחוריות של העכבר. שיטה חדשנית זו מספקת רזולוציה מרחבית וזמנית גבוהה תוך שימוש במינוני קרני x נמוכים מאלו המשמשים בשיטות דימות אחרות. אוסטאופורוזיס הוא מצב מסכן חיים הפוגע באנשים החיים עם פגיעה בחוט השדרה.אנו מציעים שיטה חדשנית לשימוש במחקרי בעלי חיים על פגיעות בחוט השדרה, המאפשרת לחוקר לעקוב לאורך תקופות זמן ממושכות אחר אובדן העצם הקשור לאוסטאופורוזיס. דבר זה חשוב משתי סיבות. ראשית, הדבר יספק הזדמנות לחקור את המנגנונים המעצבים את התפתחות האוסטאופורוזיס.השני הוא שהיא מספקת לנו דרך לבחינת התערבויות חדשות שנועדו למנוע או אולי להפוך את התפתחות האוסטאופורוזיס במטופלים החיים עם פגיעה בחוט השדרה. למרות ששיטה זו יכולה לספק תובנות לגבי אוסטאופורוזיס המושרה על ידי פגיעה בחוט השדרה, ניתן להחיל אותה גם על מערכות אחרות כגון אובדן עצם הקשור לגיל המתרחש בנשים לאחר גיל המעבר, כמו גם על ירידות אחרות בצפיפות העצם המושרות על ידי טראומה; אי-שימוש בגפיים כתוצאה מבידוד, לאחר שבר או נזק אחר, עלול להוביל לאובדן עצם משמעותי במהלך תהליך ההחלמה. יישום דימות X-ray במינון נמוך ובאורך זמן בבעל החיים השל עשוי לספק נתיבים חדשים לפיתוח טיפולים שנועדו לצמצם או למנוע בעיות אלו.בצע את ניתוח הפגיעה בחוט השדרה בהתאם לפרוטוקולי sander ובהתאם להנחיות הוועדה המוסדית לטיפול בבעלי חיים ושימוש בהם (IACUC). לאחר מכן, החל מהיום ה-10 לאחר ניתוח חוט השדרה והמשך במרווחים של 10 ימים עד ליום ה-40, העरक את עצמות הפמור והטיביה הימניות והשמאליות של חיות עם פגיעה בחוט השדרה בעקבות חיתוך (transection), תחת הרדמה, ושל קבוצות ביקורת תואמות בגיל שלא נפגעו, באמצעות סריקה במערכת ivus Lumina XR. לפני הסריקה, אתחל את מכשיר ה-Lumina XR כדי לאפשר למצלמה הפנימית להגיע לטמפרטורת עבודה של minus 90 °C.הנח בעל חיים שעבר הרדמה על הפלטפורמה בתוך ה-Lumina xr. לאחר מכן, הכנס עדשה בהגדלה גבוהה כדי לאפשר מיקוד הן באזור הפמור (עצם הירך) והן באזור הטיביה (שוקמיה).במידת הצורך, פתחו את הדלת ומקמו מחדש את בעל החיים. מיקום נכון של בעל החיים מוצג כאן. לאחר שהמיקום תקין, ניתן לבצע את פונקציית הצילום בקרני X.בחרו מהרשימה הנפתחת של האנרגיה ערך המתאים לבעל חיים. לאחר מכן, פתחו את לוח הבקרה. הפעילו את תכונת רנטגן על ידי סימון תיבת הבחירה x-ray, ורכשו את תמונת הרנטגן.יש לוודא כי כל העצם הירך (femur) והשוק (tibia) נראות, כפי שמוצג כאן. מכיוון שתוכנת הדמיון החי מציגה כברירת מחדל תמונות רנטגן שעברו טרנספורמציה, ודאו שתמונות רנטגן גולמיות מוצגות על ידי כניסה לתפריט כלי סינון התיקונים והסרת סימון ה-V לצד ספיגת רנטגן (x-ray absorption). נתוני תמונה גולמיים נשמרים באופן אוטומטי בכונן הקשיח.קבצי TIFF מייצגים נשמרים גם הם. לאחר ההדמיה, העכבר מוחזר לכלובו ומורשה להתאושש תחת השגחת החוקר. התהליך חוזר על עצמו עם העכבר הבא.ראשית, פתח את התוכנה על ידי לחיצה כפולה על סמל ה-living image בתיבת הדו-שיח המופיעה. בחר את התיקייה הרצויה ולחץ על אישור. טען תמונת רנטגן על ידי לחיצה על כפתור ה-browse.דפדפן התמונות החיות מציג את הנתונים שנבחרו יחד עם מזהה המשתמש. מידע על תוויות ומידע על תצורת המצלמה. כדי לפתוח נתונים, יש להקליק פעמיים על שורת הנתונים. התמונה ולוח כלי העבודה יוצגו.הנתונים הפתוחים מודגשים בכחול בדפדפן. כעת, לחצו על ROI tools. בפלטת הכלים ב-ROI tools, פתחו את רשימת הבחירה של ה-type ובחרו ב-measurement ROI.כדי לטעון את שלושת ה-ROIs המשמשים בניסוי זה, לחצו על סמל הריבוע וטענו ריבועים. באמצעות סרגל, מדדו את אורך ה-femur, והתאימו את אורך שני הריבועים כך שיהיו שמינית מאורך ה-femur הכולל. התאימו את רוחב הריבועים כך שיהיו אחת ל-24 מאורך ה-femur הכולל.כעת, בעזרת הסרגל, מדדו שמינית מהמרחק מקצה הפמור הפרוקסימלי ומקמו מלבן אחד כך שיהיה ממורכז במיקום זה. העבירו את המלבן השני לקצה הפמור הדיסטלי ומקמו אותו כך שיהיה ממורכז בתוך האזור הטרבכולרי של הברך. לאחר מכן, מדדו את אורך הטיביה.כווננו את אורך התיבה לשמינית מאורך השוקה (tibia) הכולל. כווננו את הרוחב לשלושיםית מאורך השוקה הכולל. לבסוף, מקמו את התיבה כך שתהיה ממורכזת, ובמרחק של שמינית מאורך השוקה הכולל מקצה השוקה הפרוקסימלי (proximal), כפי שניתן לראות כאן.בשלב הבא, לחצו על סמל המדידה; מדידות העוצמה של ה-ROI יופיעו בתמונת הרנטגן וטבלת מדידות ה-ROI תוצג. ייצאו טבלה זו למיקום הרצוי כקובץ CSV עם נקודה. פעולה זו תאפשר לפתוח את הטבלה באמצעות Excel.חזור על שלב זה עם כל התמונות השמורות המיועדות לניתוח. לבסוף, רכז את כל הנתונים בגיליון Excel אחד. מובהקות סטטיסטית נקבעת באמצעות מבחן t של student באמצעות תוכנה כגון Microsoft Excel או תוכנת Sigma Plot 11.0. במידת הצורך, ניתן להשוות את התוצאות לאלו שהתקבלו מניתוח פוסט-מורטם של צפיפות העצם באמצעות dual energy x-ray absorb geometry, תוך שימוש בפרוטוקולים סטנדרטיים לשיטה זו.ניתן לזהות באמצעות השיטה לעיל את אובדן צפיפות העצם היחסי בשוק ובירך של עכבר לאחר פגיעה בחוט השדרה, בהשוואה לעכברים נאיביים. איור זה מראה אובדן בצפיפות העצם לאחר פגיעה בחוט השדרה בחלק הפרוקסימלי של השוק, 10, 20, 30 ו-40 ימים לאחר הפגיעה. בהשוואה לקבוצת ביקורת נאיבית תואמת גיל, נצפתה ירידה משמעותית של 12% בצפיפות העצם של השוק כבר לאחר 10 ימים, עם אובדן של עד 15% בצפיפות העצם ביום ה-40.כאן אנו רואים ירידה בצפיפות העצם לאחר פגיעה בחוט השדרה בפמור הפרוקסימלי, 10, 20, 30 ו-40 ימים לאחר הפגיעה. בהשוואה לקבוצת ביקורת תואמת גיל, נצפתה ירידה של 7% בצפיפות העצם בפמור הפרוקסימלי ביום ה-40 לאחר הפגיעה. גרף זה מציג את הירידה בצפיפות העצם לאחר פגיעה בחוט השדרה בפמור הדיסטלי 10, 20, 30 ו-40 ימים לאחר הפגיעה.בהשוואה לקבוצות ביקורת נאיביות תואמות בגילן, ניתן היה להבחין באובדן צפיפות עצם בחיצונית הפמור כבר 10 ימים לאחר הפציעה, ומצב זה נשמר לאורך יתרת הניסוי. תמונה מייצגת זו של נתוני גאומטריית קרן-X באנרגיה כפולה (dual energy x-ray abor geometry) מציגה את פלט תוכן המינרלים בעצם וצפיפות המינרלים בעצם. הפמור שהוצאו נותחו 40 ימים לאחר פגיעה בחוט השדרה.כדי להשוות את יעילות השיטה המוצגת בפרוטוקול זה לשיטות אחרות הזמינות כיום, איור זה מציג ניתוח גאומטריה של תוכן מינרלי בעצם בגרמים בירך של עכברים עם פגיעה בחוט השדרה באמצעות ספיגת קרני רנטגן באנרגיה כפולה (dual energy x-ray absorption), 40 ימים לאחר הניתוח, בהשוואה לקבוצת ביקורת תמימה תואמת גיל. נצפה אובדן משמעותי של 12% בתוכן המינרלי של העצם בעכברים עם פגיעה בחוט השדרה בהשוואה לקבוצת הביקורת.כאן אנו רואים ניתוח גיאומטריה של צפיפות מינרליים בעצם במיליגרם לסנטימטר רבוע (mg/cm²) בשיטת dual energy, extra abor, בירך של עכברים עם פגיעה בחוט השדרה, 40 ימים לאחר הפגיעה, בהשוואה לעכברים נאיביים תואמי גיל. אובדן צפיפות המינרלים בעצם לא השתנה באופן מובהק, אך הראה מגמה דומה לזו של תוכן המינרלים בעצם. לאחר רכישת מיומנות, ניתן לבצע זאת בתוך 20 עד 30 דקות, אך זכרו כי חשוב למקם את הגפיים האחוריות בצורה נכונה.לאחר צפייה בסרטון זה, תהיה לכם הבנה כיצד לבצע הערכה אורכית של צפיפות העצם בבעלי חיים חיים לאחר פגיעה בחוט השדרה, באמצעות מכשיר ה-Caliper Instruments Lumina XR.

longitudinal-evaluation-mouse-hind-limb-bone-loss-after-spinal-cord

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

פרוטוקול פולשנית כדי לייצב את עמוד השדרה העכבר ולבצע...

בתחום ההדמיה vivo של חוט השדרה בעזרת עכבר דו פוטון מיקרוסקופית

אנו מתארים שיטה להשתלה ותחזוקה של חלונות זכוכית מעל חוט השדרה החשוף של עכברים בוגרים לחקר דלקת מוח אוטואימונית ניסיונית. חלונות אלה מספקים גישה אופטית כרונית לחוט השדרה לניטור דינמיקת התאים ברמה התת-תאית בבעלי חיים חיים באמצעות מיקרוסקופיה דו-פוטונית.

השתלת זכוכית חוט השדרה של Windows בעכברים בוגרים עם ניסיון אוטואימוניות Encephalomyelitis

פגיעה בחוט השדרה היא מצב טראומטי שגורם לתחלואה קשה ותמותה גבוהה. בעבודה זו אנו מתארים בפירוט מודל חבלה של פגיעה בחוט השדרה בעכברים ואחרי השתלה של תאי גזע עצביים.

השתלת תאי גזע עצבית בדגם ניסיוני של Contusive פגיעה בחוט השדרה

אנו מציגים פרוטוקול המשתמש במיקרוסקופ זמן-lapse של עירור שני פוטונים כדי לדמיין בו זמנית את הדינמיקה של פגיעות אקסון ומיאלין בזמן אמת. פרוטוקול מוצע זה מאפשר מחקרים של גורמים פנימיים וחיצוניים כאחד שיכולים להשפיע על גורל האקסון המיאליני המרכזי לאחר פציעה ולתרום לנכות קלינית קבועה.

Ex Vivo חוט השדרה מושרה לייזר הפגיעה דגם להערכת מנגנוני axonal הניוון בזמן אמת

בסרטון הזה, אנו מתארים הליך להשתלת חדר הדמיה אופטי כרוני על חוט השדרה הגבי של עכבר חי. קאמרי, ההליך כירורגי, וההדמיה כרונית נבדקים והפגינו.

נוהל השתלה קאמרי בעמוד השדרה לאורך In vivo הדמיה של כבל עכבר השדרה

מאמר זה מתאר שיטה ליצירת פגיעת דחיסת חוט שדרה (SCI) הניתנת לשחזור בעכבר היילוד. המודל מספק פלטפורמה מועילה לחקר מנגנונים של פלסטיות אדפטיבית העומדים בבסיס התאוששות תפקודית ספונטנית.

חוט השדרה עכבר בילוד דגם פגיעה דחיסה

הערכת התפתחות רקמת ב קסם שבר במהלך הריפוי עצם endochondral חיוני לעקוב אחר תהליך הריפוי. כאן, אנחנו מדווחים על השימוש תהודה מגנטית הדמיה (MRI)-fixator חיצוני תואם את אתי העכבר כדי לאפשר MRI סריקות במהלך התחדשות העצם בעכברים.

אין ויוו הערכה של שבר פיתוח קסם במהלך עצם הריפוי בעכברים שימוש בהתקן התואם ל- MRI Osteosynthesis את העכבר אתי

פרוטוקול זה מתאר מודל העכבר של כירורגיה אורתופדית, שבו נעשה שימוש כדי לחקור מנגנונים של neuroinflammation לאחר הניתוח, שינויים התנהגותיים, וכאשר בשילוב עם parabiosis, ללמוד התחדשות רקמות במהלך ההזדקנות.

דגם העכבר של כירורגיה אורתופדית ללמוד לאחר הניתוח בתפקוד הקוגניטיבי ו התחדשות רקמות

טכניקות זעיר פולשניות ומכשיר מעבדה פשוט משפרים את יכולת השכפול של מודל הפגיעה בחוט השדרה על ידי הפחתת הנזק האופרטיבי לחיות הניסוי ומתן אפשרות לתחזוקה של המורפולוגיה האנטומית. השיטה כדאית משום שהתוצאות האמינות וההליך הניתן לשחזור מקלים על חקירת מנגנוני תיקון המחלה.

הקמת מודל פגיעה בעמוד השדרה של חבלה בעכבר המבוסס על טכניקה זעיר פולשנית

צינור ניסיוני לתיאור כמותי של דפוס הלוקומוטור של עכברים ההולכים בחופשיות באמצעות ארגז הכלים MouseWalker (MW) מסופק, החל מהקלטות וידאו ראשוניות ומעקב ועד ניתוח לאחר כימות. מודל פגיעה בחוט השדרה בעכברים משמש כדי להדגים את התועלת של מערכת MW.

שימוש בהליכון עכבר לכימות תפקוד לקוי של מנוע עכבר במודל עכבר של פגיעה בחוט השדרה

מוצג כאן מכשיר חדשני אוטומטי לפגיעה בחוט השדרה עבור עכברים, שיכול לייצר במדויק מודלים של פגיעה בחוט השדרה בדרגות שונות.

משפיען אוטומטי למודל פגיעה מתמשכת בחוט השדרה בעכברים

למדו שיטה חדשנית להערכת אובדן צפיפות העצם בעכברים לאחר פגיעה בחוט השדרה באמצעות צילומי רנטגן במינון נמוך. השיטה מאפשרת מעקב לאורך זמן בגפיים האחוריות ומספקת רזולוציה מרחבית וזמנית גבוהה למחקר אוסטאופורוזיס.

הערכת אורך של עכבר הינד איבוד מסת העצם לימב לאחר פגיעה בחוט השדרה באמצעות רומן, In vivo מתודולוגיה

גלה סרטונים נוספים