Name: שיטה כללית להערכת דגירה של השתוקקות סוכרוז בחולדות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-11-04T12:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 44 s
Description: חקור את תופעת ההשתוקקות המתגברת לסוכרוז בחולדות לאחר תקופות התנזרות ממושכות. שיטה זו מאפשרת למדוד תגובות לרמזים הקשורים לסוכרוז ולהבין מנגנוני החזרה להתמכרות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

הפקה של כתב היד הזה וידאו נתמך על ידי המכון הלאומי לשימוש בסמים המכונים / הלאומי לבריאות מענק DA016285 R15-02, אוניברסיטת וושינגטון המערבי פעילויות Biomedical Research ב Neuroscience יוזמת, ומערב אוניברסיטת וושינגטון.

1. בעלי חיים נושאים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זכר ארוך אוונס חולדות הן 3 חודשים בתחילת המחקר. חולדות הן סימונסן הנגזרות (גילרוי, קליפורניה, ארה"ב) וגדל בוושינגטון המערבי אוניברסיטת ביבר והם שוכנו בנפרד על מחזור של 12 שעות להפוך יום / לילה (האורות ב 0700) עם פורינה מילס פתיתי בע"מ Mazuri מכרסמים (Summit גריי , מיזורי, ארה"ב) ו כרצונך זמין מים המודעה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל הדרכה ובחינות מתרחש בין 0900-1300 עם קבוצות של חולדות שאומנו תמיד ונבדקו באותו זמן יומי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדות הם שקלו כל יום שני, רביעי ושישי למשך של המחקר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסמוך לפני שלב האימונים, חולדות מקופחים מים כ -20 שעות על מנת לעודד סוכרוז מינהל עצמי ביום הראשון של האימונים. </li></ol> 2. נוהלי ההתנהגות כל נוהלי התנהגות אופרנטית להשתמש בתאי התניה אופרנטית רגילה (מד Associates Inc, סנט אלבנס, VT, ארה"ב) עם משאבת אינפוזיה (רזאל מכשירים מדעיים, סנט אלבנס, VT, ארה"ב), הממוקמים על גבי תא כל התניה אופרנטית. התניה אופרנטית לתאי מוקפים קול הפחתת ארונות עם אוהדים אוורור (מערב אוניברסיטת וושינגטון, ארה"ב). כל התנאים ניסיוניים איסוף הנתונים נשלטים על ידי מד IV PC תוכנה (מד Associates Inc, סנט אלבנס, VT, ארה"ב). התניה אופרנטית לתאי (30 x 20 x 24 ס"מ) מכילים שני מנופים (אחד נייח ואחד נשלף), מחולל צליל, אור גירוי לבן מעל ידית נשלפת, ואור הבית האדום על הקיר ממול. משאבת עירוי מספק סוכרוז לתוך כלי קיבול פרס מימין מנוף הפעיל. מנופים הם 10 ס"מ מהרצפה את הרשת. ארבעה photobeams אינפרא אדום שחוצים כל תא. הקורות מול כל אחד מהם 10.5 ס"מ מהקירות בצד בצד קורות כל 6 ס"מ מן הקירות הצדדיים. קרן כל 4.5 ס"מ מעל הרצפה נירוסטה הבר. הקורותלהגדיר מחדש לספור את מספר הפסקות מוחלטת. המספר הכולל של הקרן נרשמות הפסקות במהלך בדיקה הדרכה השתוקקות. למעט מגבלה מים לפני האימון הראשון, חולדות ניתנים מזון ומים כרצונך מודעות הן בכלובים הביתה בתאי התניה אופרנטית. צ'יימברס נמצאים בחדר מבחן ייעודי, כמו ביבר, הוא על מחזור אור הפוכה. חולדות מועברים בתוך כלובים בבית בין החדרים על עגלה כי הוא מכוסה בד חוסם אור. בסוף כל פגישה, חולדות הם חזרו הביתה בכלובים. ישנם שלושה שלבים בניסוי טיפוסי: הדרכה, התנזרות כפויה, ובדיקות. בדיקה היא ההשתוקקות שבו ישיבה מוערך. אנו מעריכים השתוקקות בשני הליכי בדיקה כללית, תלוי במחקר. שני אלה הליכים המתוארים בסעיפים 2.3.1 ו - 2.3.2. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכשרה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בניסוי טיפוסי, חולדות לבלות 2 שעה / יום10 ימים רצופים בתאי התניה אופרנטית שבו הם רשאים ללחוץ על הדוושה נשלף (פעיל) לאספקת 0.2 מ"ל של תמיסת סוכרוז 10% לתוך כלי קיבול מצד ימין של הידית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תגובה זו גם מפעיל גירוי מתחם המורכב של בטון (2 kHz, 15 dB מעל רעש הסביבה) לבין אור לבן. גירוי המתחם נמשך 5 s ואחריו זמן 40-s החוצה, שבמהלכה לחיצות על דוושה הפעיל נרשמות אבל אין תוצאה מתוכנת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תגובה על הידית (נייח) פעיל אין תוצאה מתוכנת, אבל בתי נרשמות. המספרים של קרן נרשמות הפסקות במהלך הדרכה ובדיקה. כל אמצעי התגובה של תנועה נרשמות לקורסים זמן (2 פחי דקות), אך מדווחות בדרך כלל הסיכומים בכל הפעלה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התנזרות כפויה. החולדות נשארות בכלובים בבית למשך התנזרות כפויה. תקופות טיפוסי התנזרות נאלצים אנו משתמשים הן כי חולדות נבדק הדואר היום מיד לאחר היום האחרון של ההדרכה (יום 1 של התנזרות בכפייה), או 30 ימים לאחר היום האחרון של ההדרכה (30 יום של התנזרות בכפייה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדיקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Extinction בלי רמזים. בהליך זה בדיקה, חולדות מותר הראשון ללחוץ על הדוושה פעיל בתנאים זהים הדרכה למעט בתגובה כי אין כל ההשלכות ואת משך הפגישה הוא 1 ח חולדות ניסיון לפחות שישה מפגשים אלה הכחדה ביום מבחן. כל מפגש הוא הכחדה מופרדות תקופה 5 דקות שבו הפעיל מנוף חזר והאור בבית כבוי. "הכחדה" מצוין אם ידית פעיל להגיב צומצם לפחות מ 20 בתי / h. חולדות מסוימות דורשות הפעלה השביעי. בפגישה הבאה (לאחר עיכוב נוסף 5 דקות) הוא מושב בדיקה שבה חולדות יכול מכן הקש לצליל + אות אור זה היה זיווג בתחילה עם כל משלוח של סוכרוז במהלך אימון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Extinction עם רמזים. בכך לקצרהליך בדיקת ד, חולדות מותר ללחוץ על הדוושה פעיל בתנאים זהים הדרכה אלא סוכרוז לא מועבר. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחיצה על המנוף לא פעיל משמש כמדד של אפליה מנוף. זה גם, יחד עם הפסקות photobeam, המשמש כאמצעי של הפעלת הלא ספציפית המנוע. שינויים המוטורית לעומת מוטיבציה לסבך את הפרשנות של התנהגות השתוקקות. מנוף פעיל להגיב נתונים לשבור photobeam מועילים לבירור תרומות המנוע לעומת המוטיבציה תשוקה, כמו גם קבוצות השוואה במחקרים פרמקולוגיים שם חולדות להגיב בקצב גבוה עבור סוכרוז או אחר מזון מאותגרים עם תרכובת תשוקה העשויים להשפיע (למשל 7 , 8). </li></ol> 3. מניפולציות נציג להשפיע השתוקקות סוכרוז לאחר תקופות משתנות של התנזרות כפויה השיטה הכללית המתוארת כאן מספק דרך לחקור את determina התנהגותיות הנוירוביולוגילילות של השתוקקות לאחר תקופות משתנות של התנזרות כפויה. המתוארות כאן הן שיטות הקשורות תוצאות נציג כאמור בסעיף 4. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שובע. חולדות שקיבלו כמה בקבוקים של סוכרוז 10% בכלובים בביתם 17 שעות מיד לפני בדיקה 8. החולדות במחקר זה נבדקו באמצעות הכחדה ללא הליך רמזים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העשרה סביבתית. במהלך תקופת התנזרות בכפייה, החולדות כמה נשאר דיור בודדות (Controls), בעוד אחרים הועברו גדול ("רוחב x 20" x 36 עומק 40 "גובה; קייג' איכות מוצרים, פורטלנד, אורגון, ארה"ב) כלוב עם שלוש קבוצות (מועשר). החיות מועשר היו כמה צעצועים בסביבתם כולל צינורות PVC, ניתנו גם צעצועים רומן כל M, W, F 10. החולדות במחקר זה נבדקו באמצעות הכחדה ללא הליך רמזים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אתגר תרופתי. ביום הבדיקה, החולדות היו pretreated עם מינון של אנטגוניסט לדופמין D1 SCH 23390. חולדות wer את המחקר הזהדואר נבדק באמצעות הכחדה עם הליך רמזים. </li></ol> 4. נציג תוצאות: <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/3335/3335fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> איור 1 אימון נציג נתונים בדיקת הדגירה של הניסוי השתוקקות סוכרוז. נקודות הנתונים מצביעים על אמצעי ± ומשווקי מנועי חיפוש. גודל הקבוצה עבור איור 1a הוא 77 חולדות עבור הקבוצה איור 1b גדלים נע בין 11-12 לכל קבוצה. * הבדל משמעותי מהקבוצה יום 1, p &lt;0.05. דמות זו היא עיבוד נתונים 8 באישור שפרינגר. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/3335/3335fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 2"> איור 2 אפקט השובע סוכרוז על השתוקקות סוכרוז אחרי 1 או 30 ימים של התנזרות כפויה. גודל הקבוצה 8-9 לכל קבוצה. * הבדל משמעותי מקבוצה 1 יום, הבדל † משמעותי שליטה בקבוצה, p &lt;0.05. נתון זה מותאםמתוך 9 באישור Elsevier. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/3335/3335fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 3"> איור 3 חודש של העשרה סביבתית מופחתת השתוקקות סוכרוז. גודל הקבוצה כל 8 חולדות. * הבדל משמעותי בין 1 יום, הבדל † משמעותי שליטה בקבוצה, p &lt;0.05. דמות זו היא עיבוד 10 עם רשות הבריאות Kluwer וולטרס. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/3335/3335fig4.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 4"> איור 4 מערכתית SCH 23390 השתוקקות סוכרוז ירד בצורה יעילה יותר אחרי יום אחד של התנזרות כפויה. גודל הקבוצה 8-12 לכל קבוצה. * הבדל משמעותי מקבוצה 1 יום, הבדל † משמעותי מהקבוצה 0 מנה, p &lt;0.05. דמות זו היא עיבוד 8 באישור שפרינגר. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איור 1 מציין נציג הדרכה ובדיקה נתונים עבור סוכרוז עצמית ניהול חולדות (איור1 TOP) ולאחר מכן להגיב ב Extinction עם קיו סוכרוז-לזווג הזמין (איור 1 למטה). כפי שניתן לראות, חולדות להגיב באופן סלקטיבי על המנוף פעיל במהלך הדרכה במהלך הבדיקה. מעניין, להגיב פעיל ופעילות של תנועה להראות כמה הדגירה, אם כי ההשפעה היא החזקה ביותר על מנוף פעיל להגיב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איור 2 מראה את ההשפעה של שובע עם סוכרוז על השתוקקות סוכרוז אחרי 1 או 30 ימים של התנזרות כפויה. השובע מופחת Extinction בלי רמזים להגיב לאחר תקופה או של התנזרות כפויה, אבל להגיב מופחת רק המקל סוכרוז לבד חולדות אשר רק יום אחד של התנזרות כפויה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כפי שניתן לראות בתרשים 3, העשרה סביבתית מופחתת הכחדה מודגרות ללא אות להגיב להגיב על המקל סוכרוז לבד התנהגויות לרמות מצאו אחרי יום אחד בלבד של התנזרות כפויה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איור 4 מתאר את ההשפעה של התנזרות תלויי SCH 23390 על הכחדה עם רמזים להגיב. SCH 23390 היה EF ביותרfective להפחית את הכמיהה סוכרוז לאחר 1, לעומת 30 ימים של התנזרות כפויה. </li></ol>

<ol><li>Sobik, L., Hutchison, K., Craighead, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cue-elicited+craving+for+food%3A+a+fresh+approach+to+the+study+of+binge+eating%5BTitle%5D)+AND+%22Appetite%22%5BJournal%5D)">Cue-elicited craving for food: a fresh approach to the study of binge eating.</a> Appetite. 44, 253-2561 (2005).</li>
<li>Geiger, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficits+of+mesolimbic+dopamine+neurotransmission+in+rat+dietary+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Deficits of mesolimbic dopamine neurotransmission in rat dietary obesity.</a> Neuroscience. 159, 1193-1199 (2009).</li>
<li>Grimm, J. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGrimm%2C+JW+%22Craving+In+Animal+Models+of+Drug+Addiction%22">Craving In Animal Models of Drug Addiction</a>. Olmstead, C. , Humana Press. New York. 311-336 (2011).</li>
<li>Grimm, J. W., Kruzich, P. J., See, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contingent+access+to+stimuli+associated+with+cocaine+self-administration+is+required+for+reinstatement+of+drug-seeking+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Psychobiology%22%5BJournal%5D)">Contingent access to stimuli associated with cocaine self-administration is required for reinstatement of drug-seeking behavior.</a> Psychobiology. 28, 383-386 (2000).</li>
<li>Bossert, J. M., Ghitza, U. E., Lu, L., Epstein, D. H., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobiology+of+relapse+to+heroin+and+cocaine+seeking%3A+an+update+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Neurobiology of relapse to heroin and cocaine seeking: an update and clinical implications.</a> Eur. J. Pharmacol. 526, 36-50 (2005).</li>
<li>Bossert, J. M., Poles, G. C., Wihbey, K. A., Koya, E., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+effects+of+blockade+of+dopamine+D1-family+receptors+in+nucleus+accumbens+core+or+shell+on+reinstatement+of+heroin+seeking+induced+by+contextual+and+discrete+cues%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Differential effects of blockade of dopamine D1-family receptors in nucleus accumbens core or shell on reinstatement of heroin seeking induced by contextual and discrete cues.</a> J. Neurosci. 27, 12655-12663 (2007).</li>
<li>Grimm, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+systemic+or+nucleus+accumbens-directed+dopamine+D1+receptor+antagonism+on+sucrose+seeking+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Effects of systemic or nucleus accumbens-directed dopamine D1 receptor antagonism on sucrose seeking in rats.</a> Psychopharmacology (Berl). , (2011).</li>
<li>Grimm, J. W., Fyall, A. M., Osincup, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incubation+of+sucrose+craving%3A+effects+of+reduced+training+and+sucrose+pre-loading%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Incubation of sucrose craving: effects of reduced training and sucrose pre-loading.</a> Physiol Behav. 84, 73-79 (2005).</li>
<li>Grimm, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+enrichment+attenuates+cue-induced+reinstatement+of+sucrose+seeking+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Environmental enrichment attenuates cue-induced reinstatement of sucrose seeking in rats.</a> Behav Pharmacol. 19, 777-785 (2008).</li>
<li>Shaham, Y., Shalev, U., Lu, L., De Wit, H., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+reinstatement+model+of+drug+relapse%3A+history%2C+methodology+and+major+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings.</a> Psychopharmacology (Berl). 168, 3-20 (2003).</li>
<li>Childress, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limbic+activation+during+cue-induced+cocaine+craving%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Limbic activation during cue-induced cocaine craving.</a> Am J Psychiatry. 156, 11-18 (1999).</li>
<li>Gearhardt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+Correlates+of+Food+Addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Gen.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Neural Correlates of Food Addiction.</a> Arch. Gen. Psychiatry. , (2011).</li>
<li>Markou, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+drug+craving%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Animal models of drug craving.</a> Psychopharmacology (Berl). 112, 163-182 (1993).</li>
<li>Phillips, R. G., LeDoux, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+contribution+of+amygdala+and+hippocampus+to+cued+and+contextual+fear+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Differential contribution of amygdala and hippocampus to cued and contextual fear conditioning.</a> Behav. Neurosci. 106, 274-285 (1992).</li>
<li>Holland, P. C., Bouton, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampus+and+context+in+classical+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Hippocampus and context in classical conditioning.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 9, 195-202 (1999).</li>
<li>Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+a+model+of+drug+relapse%3A+an+assessment+of+the+validity+of+the+reinstatement+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure.</a> Psychopharmacology (Berl). 189, 1-16 (2006).</li>
<li>Kupferschmidt, D. A., Brown, Z. J., Erb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Procedure+for+Studying+the+Footshock-Induced+Reinstatement+of+Cocaine+Seeking+in+Laboratory+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats.</a> J. Vis. Exp. (47), (2011).</li>
</ol>

כל ההליכים בעקבות ההנחיות המתוארות בסעיף &quot;עקרונות טיפול בבעלי חיים במעבדה&quot; (NIH פרסום לא. 86-23) וכן אושרו על ידי טיפול בבעלי חיים באוניברסיטת וושינגטון המערבית מוסדיים ועדת שימוש.

הנהלים המתואר כאן יכול להיות מזוהה הליכי השבה, אם כי זה לא מדויק מבחינה טכנית כמנוף לחיצה על האות אינו כבה לפני הפגישה מבחן השתוקקות. בהליך כינון טיפוסית, להגיב עם גמול-לזווג רמזים הוא כיבה ולאחר מכן &quot;מחדש&quot; עם הממשל של המצגת הלא מותנה של הפרס (תחול-Induced השבה) או מלחץ כגון footshock (מתח המושרה השבה) 11. הכחדה של מנוף לחיצה לבד ואחריו גישה המקל (פריט 2.3.1) הוא קירוב הקרובים השבה. עם זאת, אנו מתארים את ההליכים לאפשר מדידה של מכוונת מטרה להגיב על רמז, סוכרוז ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> פריט </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוג </td></tr><tr><td> העשרה קייג&#39; </td><td> קייג&#39; איכות החברה </td><td> FH-36 ½ T-N </td></tr><tr><td> לשכת אופרנטית </td><td> מד Associates </td><td> MED-008-CT-B3 </td></tr><tr><td> SCH 23390 </td><td> סיגמא </td><td> D054 </td></tr></tbody></table>

שיטה כללית להערכת דגירה של השתוקקות סוכרוז בחולדות

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

עבור מישהו על תשוקה מזון מוגבלת, אוכל דיאטטי בתגובה מזון לזווג רמזים עשויה לשמש כנקודת מעבר מפתח התנהגותית בין התנזרות הישנות למזון לוקח 1. השתוקקות מזון conceptualized בדרך זו משול תשוקה סמים בתגובה סמים לזווג רמזים. ספרות עשירה פותחה סביב הבנת הגורמים ההתנהגותיים הנוירוביולוגי של השתוקקות לסמים, אנחנו ואחרים היו מתמקדים לאחרונה על תרגום טכניקות מחקר התמכרות בסיסית כדי להבין טוב יותר התמכרות כמו התנהגויות הקשורות לאוכל 2-4. נעשה כמו במחקרים קודמים של השתוקקות לסמים, אנו בוחנים התנהגות השתוקקות סוכרוז על ידי שימוש במודל עכברים של נסיגה. במודל זה, חולדות עצמית לנהל או סמים או מזון בהפעלות על פני כמה ימים. בפגישה, מנוף להגיב מספק את הפרס יחד עם בטון + גירוי האור. התנהגות השתוקקות אז הוא מוגדר תפעולית להגיב בתוךבפגישה שלאחר מכן שבו הגמול אינו זמין. חולדות יהיה אמין להגיב לצליל + גירוי האור, סביר בשל המאפיינים שלה רכשה חיזוק מותנה 5. התנהגות זו מכונה לעיתים מחפשים סוכרוז או תגובתיות קיו. בדיון הנוכחי נשתמש &quot;השתוקקות סוכרוז&quot; המונח לכבוש את שני המושגים הללו. בעשור האחרון, יש לנו התמקדו איך את משך הזמן הבאים עצמית הממשל לתגמל השפעות השתוקקות גמול. מעניין לציין, כי חולדות להגדיל להגיב על אות גמול-לזווג במהלך כמה שבועות של תקופה של התנזרות-בכפייה. &quot;דגירה של השתוקקות&quot; זו נצפתה אצל חולדות אשר למילוי עצמי או מזון או תרופות של התעללות 4,6. גידול זה תלוי זמן על השתוקקות שזיהינו במודל חיה יכול להיות רלוונטיות פוטנציאל גדול התרופה האדם התמכרות התנהגויות מזון. כאן אנו מציגים פרוטוקול הדגירה של הערכת sucrose השתוקקות אצל חולדות. גרסאות של ההליך תסומן שבו הכמיהה נבחנת כפי להגיב על רמז, סוכרוז לזווג בדידים הבאים הכחדה של מנוף לחיצה בתוך סוכרוז העצמי הממשל בהקשר (Extinction בלי רמזים) או להגיב על סוכרוז, לזווג רמזים בהקשר הכחדה כללית (Extinction עם רמזים).

בתגובה לאותות מזון או תרופות לזווג עליות במהלך תקופה של התנזרות זה עשוי להתייחס רגישות מוגברת להתנהגויות הישנות. כאן אנו פרט בהליך להערכת זה &quot;דגירה של השתוקקות&quot; אצל חולדות אשר למילוי עצמי סוכרוז.

עבור אדם הנמצא בתזונה מוגבלת, תשוקה למזון בתגובה לרמזים המזוהים עם מזון עשויה לשמש כנקודת מעבר התנהגותית מרכזית בין הינזרות לבין...

המטרה הכללית של ניסוי זה היא להעריך את התשוקה לסוכרוז בחולדות לאחר תקופה קצרה או ממושכת של הימנעות כפויה מהזרקה עצמית של סוכרוז. דבר זה מושג תחילה על ידי מתן אפשרות לחולדות לבצע הזרקה עצמית של סוכרוז ב-10 מפגשי הזרקה עצמית יומיים. לאחר מכן, החולדות מוכנסות לתקופה של הימנעות כפויה מהזרקה עצמית של סוכרוז, פשוט על ידי השארתן בכלובי הבית שלהן למשך יום אחד או 30 ימים.השלב האחרון של הפרוצדורה הוא החזרת החולדות לסביבת ההגשה העצמית ומתן אפשרות להגיב לרמזים שהקושרו בעבר באופן מפורש לסוכרוז ולתהליך ההגשה העצמית, אך לא לסוכרוז עצמו. בסופו של דבר, התוצאות מראות כיצד ה-Vigo של התגובה לרמזים המצומדים לסוכרוז משתנה בהתאם למשך תקופת ההיגמול הכפוי. כפי שדיווחנו בעבר, התשוקה לסוכרוז עולה או עוברת אינקובציה במהלך חודש של היגמול כפוי מסוכרוז.ניתן לבצע ניסויי ניהול עצמי (Self-administration) באמצעות פרוצדורה זו כדי לחקור את התשתיות ההתנהגותיות והנוירוביולוגיות של הגברת התשוקה (incubation of craving). היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות הוא שניתן לשנות את משך הזמן החולף לאחר מפגש הניהול העצמי האחרון. שיטה זו עשויה לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בתחום מחקר ההתמכרויות, ובמיוחד באופן שבו משך תקופת הינמנעות כפויה משפיע על התשוקה.ההשלכות של שימוש בטכניקה זו חולשות לכיוון של טיפול בהתנהגויות של נסיגה (relapse). בפרט, מכיוון שרובם המכריע של האנשים חוו נסיגה לאחר תקופה ממושכת של הינזרות. עם זאת, שיטה זו יכולה לספק תובנות לגבי תשוקה לסוכר.ניתן ליישם זאת גם על תגמולים אחרים, כגון סמים ממכרים. מחקר זה משתמש בחולדות זכרים מגזע long Evans שבגילן שלושה חודשים בתחילת המחקר. החולדות הוחזקו באופן פרטני במחזור יום-לילה הפוך של 12 שעות, עם מזון בכיתורים ומים הזמינים ad libitum; לפני תחילת הפרוצדורה, יש לשקול את כל בעלי החיים בקבוצת הניסוי ובקבוצת הביקורת, ולשקול אותם גם לאחר מכן.יש לשקול את בעלי החיים בכל יום שני, רביעי ושישי למשך כל תקופת המחקר. לבסוף, יש להתחיל במניעת מים כ-20 שעות לפני תחילת מחקר התשוקה לסוכרוז. פעולה זו תעודד מתן עצמי של סוכרוז ביום הראשון של האימון.כל האימונים והבדיקות מתבצעים בין השעות 900 ל-1300, והקוהורטות מאומנות ונבדקות תמיד באותה השעה מדי יום בחדר הבדיקות. תאי ההתניה האופרנטית סגורים בתוך ארונות בידוד אקוסטי עם מאווררים. לתאים ששימשו במחקר זה ממדים של 30 על 20 על 24 סנטימטרים, והם מכילים שני מנופים: מנוף קבוע ומנוף נסוג.שני המנופים ממוקמים במרחק של 10 סנטימטרים מרצפת הסורגים. בנוסף, התאים מכילים מחולל צלילים, נורת גירוי לבנה מעל המנוף הנשלף, ונורת בית אדומה על הקיר ממול. להערכת הפעילות הלוקומוטורית, התאים מצוידים בקרני פוטו-אינפרא-אדום; הקרניים הקדמיות נמצאות במרחק של 10.5 סנטימטרים מהדפנות הצדדיות והקרניים הצדדיות נמצאות כל אחת במרחק של שישה סנטימטרים מהדפנות הצדדיות.כל קורה נמצאת בגובה של 4.5 centimeters מעל רצפת מוטות הנירוסטה. הוסיפו תמיסת 10%sucrose רעננה למשאבת ההזרקה הממוקמת בחלק העליון של כל תא. תכננו את התוכנה הרלוונטית כך שתפעיל את המשאבה להזרקת 0.2 milliliters של תמיסת 10%sucrose אל תוך המיכל שנמצא מימין למנוף.בנוסף, באמצעות תוכנת המחשב הנלווית, הגדירו את התא כך שלחיצה על המנוף הנשלף או הפעיל תפעיל גם גירוי משולב המורכב מצליל ואור לבן. הגירוי המשולב יימשך חמש שניות, ולאחריו תבוא הפסקת זמן של 42 שניות, שבמהלכה לחיצות על המנוף הפעיל יירשמו אך לא תהיה להן השפעה מתוכננת. המנוף הנייח או הבלתי פעיל מתוכנן כך שלא תהיה ללחיצה עליו השפעה, אלא רק רישום של מספר הלחיצות.בעיקרון, התוכנה צריכה לתעד את כל הלחיצות על שני המנופים ואת מספר הפסקות קרן האינפרה-אדום שהתרחשו במהלך כל מפגש אימון. ביום האימון הראשון, מקמימו את החולדה בתא ההתניה האופרנטית למשך שעתיים בסך הכל. במהלך זמן זה, החולדה רשאית לנוע בחופשיות ועשויה ללחוץ על המנוף הנסוג לקבלת תמיסת 10%Sucrose, או ללחוץ על המנוף הסטטי שאינו פעיל.כל מדדי התגובה והתנועה נרשמים כמההליכי זמן במרווחי זמן של שתי דקות, אך בדרך כלל מדווחים כסכומים כוללים לכל מפגש. לאחר שחלפו שעתיים, הוציאו את החולדה והחזירו אותה לכלוב הבית. ודאו שתא ההתניה האופרנטית מנוקה ביסודיות כדי להסיר שאריות או רמזים ריחוניים שעלולים להפריע למפגשי אימון עוקבים.במהלך תקופת ההימנעות הכפויה, החולדות נשארות בכלוב הבית כאשר מזון בכיתורים ומים זמינים ad libitum. משך תקופת ההימנעות הכפויה עשוי להשתנות בהתאם לצורך. מסגרת זמן טיפוסית להדגרה במחקרי תשוקה היא בין יום אחד ל-30 ימים.בנוסף, ניתן לבחון פרמטרים נוספים, כגון סוכרוז, שביעות רצון או השפעת העשרה סביבתית, תחת תנאי בקרה. במהלך תקופה זו, מוצגות כאן שתי פרדיגמות בדיקה. הראשונה שבהן מדגימה הכחדה ללא רמזים.ראשית, הגדירו את תא ההתניה האופרנטית כך שישחזר את תנאי האימון, למעט העובדה שהצליל והאור הלבן אינם מופעלים בתגובה ללחיצה על המנוף הפעיל. תכננו את התא להרצת שישה מפגשי הכחדה כאלה, שכל אחד מהם נמשך שעה אחת ומופרד בפרק זמן של חמש דקות שבו אור הבית כבוי והמנוף הפעיל נסוג, וזאת באופן רצוף. לאחר השלמת תקופת ההיגמול הכפויה, הניחו את החולדה בתא ההתניה האופרנטית ואפשרו לה להגיב באמצעות המנוף הפעיל בשישה מפגשי הכחדה של שעה אחת כל אחד.כיבוי התנהגותי נחשב למשמעותי אם התגובה הפעילה למנוף הופחתה לפחות מ-20 לחיצות לשעה במפגש הכיבוי השישי. אם לא חל כיבוי, יש לאפשר לחולדה לבצע מפגש כיבוי שביעי. המפגש הבא, לאחר השהיה נוספת של חמש דקות, הוא מפגש בדיקה של שעה אחת שבו החולדות יכולות ללחוץ עבור רמז הצליל בתוספת האור שצומדו בתחילה לכל מתן של סוכרוז במהלך האימון. עבור פרוצדורת הבדיקה השנייה, כיבוי עם רמזים, תא ההתנייה האופרנטית מוגדר כך שישחזר את תנאי האימון.למעט העובדה שתמיסת סוכרוז אינה מוגשת בעקבות לחיצה על המנוף הפעיל, החולדה הנבדקת מושמת בתא ההתניה האופרנטית למשך שעתיים. לחיצות על המנוף הבלתי פעיל, בשילוב עם נתוני קטיעת קרן (beam break), עשויות לשמש כמדד להפעלה מוטורית לא ספציפית, מאחר ששינויים מוטוריים לעומת מוטיבציוניים עלולים לסבך את פרשנות התנהגות התגובה ל-Q.איור זה מציג נתונים טיפוסיים שהתקבלו מקבוצה של 77 חולדות נורמליות שאומנו להבדיל בין מינונים של סוכרוז באופן עצמאי (self-administer). בהתאם לפרדיגמת האימון המתוארת בפרוטוקול זה, ניתן לראות כי החולדות מגיבות באופן סלקטיבי למנוף הפעיל במהלך האימון. כאן מוצגים הנתונים שהתקבלו ממפגש בדיקה.ניתן לראות כי החולדות מגיבות בהכחדה כאשר הרמזים המזווגים זמינים, ובהכחדה עם רמזים. שוב, החולדות מגיבות באופן סלקטיבי על המנוף הפעיל במהלך הבדיקה, בעוד שהתגובה על המנוף הלא-פעיל והפעילות הלוקומטורית מראות דפוסי אינקובציה מסוימים, אם כי ההשפעה היא החזקה ביותר בתגובה למנוף הפעיל. גדלי הקבוצות נעו בין 11 ל-12 חולדות לקבוצה, ונצפה הבדל מובהק בין קבוצת היום הראשון לקבוצת היום ה-30 עם ערך P של פחות מ-0.05. איור זה מראה את השפעת השובע מסוכרוז על התגובתיות לסוכרוז לאחר יום אחד או 30 יום של הימנעות כפויה; חלק מהחולדות קיבלו בקבוקי סוכרוז 10% בכלובי הבית שלהן במשך 17 השעות שקדמו לבדיקה, תוך שימוש בהכחדה ללא רמזים.בפרוצדורה, השובע הפחית את ההכחדה ללא תגובות לרמזים לאחר כל אחת מתקופות ההימנעות הכפויה, אך הפחית את התגובה עבור sucrose Q לבדו רק בחולדות שעברו יום אחד בלבד של הימנעות כפויה; גודל הקבוצות היה שמונה עד תשעה פרטים לקבוצה. הכוכבית מציינת הבדל מובהק מקבוצת היום הראשון וסימן הפלוס מציין הבדל מובהק מקבוצת הביקורת כאשר P קטן מ-0.05. תוצאות אלו מדגימות כי חודש אחד של העשרה סביבתית הפחית את הרגישות ל-sucrose Q בחולדות.במהלך תקופת ההימנעות הכפויה, חולקי הבקרה נותרו בתוך כלובים אישיים, בעוד שקבוצת ההעשרה הועברה לכלובים גדולים עם מספר צעצועים בסביבתם, כולל צינורות PVC. חולקים אלו קיבלו גם צעצועים חדשים בכל יום שני, רביעי ושישי. החולקים במחקר זה נבחנו באמצעות פרוצדורת הכחדה ללא Q'S.העשרה סביבתית הפחיתה את התנהגויות ה-incubated extinction ללא תגובה ל-Q ותגובה ל-Q של סוכרוז בלבד לרמות שנמצאו לאחר יום אחד בלבד של הימנעות כפויה, כאשר כל קבוצה כללה שמונה חולדות. הכוכבית מציינת הבדל מובהק מקבוצת היום הראשון וסימן האיקס מציין הבדל מובהק מקבוצת הביקורת כאשר P פחות מ-0.05. כאן החולדות קיבלו טיפול מקדים במינון של anntagonist של דופמין D1, s CH 2 3 3 9 0, ביום הבדיקה ונבדקו באמצעות פרוצדורת ה-extinction with QS.ניתן לראות כי s CH 2 3 3 9 0 סיסטמי מפחית את החיפוש אחר סוכרוז באופן יעיל יותר לאחר יום אחד של הימנעות כפויה, כאשר כל קבוצה כללה שמונה עד 12 חולדות. הכוכבית מציינת הבדל מובהק מקבוצת היום הראשון. סימן האיקס מציין הבדל מובהק מקבוצת הביקורת כאשר P קטן מ-0.05.בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב לזכור לאזן את הקבוצות שהוקצו לתנאי ההימנעות הכפויה בהתבסס על התנהגויות האימון שלהן. בעקבות פרוצדורה זו, ניתן לבצע שיטות אחרות, כגון ניהול עצמי של סמים (drug self-administration), כדי לענות על שאלות נוספות, כגון הכלליות של אפקט האינקובציה של התשוקה (incubation of craving) לאחר התפתחותו. טכניקה זו סיפקה למחקרים בתחום ההתמכרויות דרך לבחון את התשתיות העצביות של שינויים תלויי-הימנעות בתשוקה בחולדות.לאחר צפייה בסרטון זה, תרכשו הבנה מעמיקה לגבי אופן ביצוע מחקר למדידת תשוקה לסוכרוז התלויה בגמילה בחולדות, הנמדדת על ידי תגובת החולדות למכבש (Q) שהיה מקושר בעבר למתן סוכרוז עצמי.

a-general-method-for-evaluating-incubation-of-sucrose-craving-in-rats

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

המחקר הנוכחי מעריך הליך חדשני להערכת השפעות חיזוק של פתרונות טעימים בחולדות מעבדה: ניהול עצמי intraoral. לשם כך, בתגובה אופרנטית (כלומר ידית לחיצה) לחליטות intraoral של פתרונות מתוקים בריכוזים שונים נמדדה על לוחות זמנים של יחסים מתמשכים והדרגתיים של חיזוק.

רומן נוהל להערכה על מאפייני חיזוק של Tastants אצל חולדות מעבדה: ממשל עצמי intraoral אופרנטית

פרוטוקול ההתניה של Proboscis Extension Response (PER), שפותח עבור דבורת הדבש (Apis mellifera), מספק אמצעי רלוונטי מבחינה אקולוגית וניתן לכימות בקלות לחקר מספר מנגנוני למידה שונים במיני חרקים רבים.

תגובת פרוטוקול חוטם הרחבה לחקירת פלסטיות התנהגות בחרקים: בקשה ליסוד, ביו רפואית, ומחקר חקלאי

פרוטוקול זה מתאר שיטה חדשה ויעילה ליזום אופרנטית במהירות להגיב עבור אתנול בחולדות כי בניגוד שיטות סטנדרטיות, אינו מחייב מצוקת המים או סוכרזית / סוכרוז דהייה ליזום להגיב.

שיטה להערכת מאפייני החיזוק של אתנול בחולדות ללא מצוקת מים, סכרין Fading או הדרכת גישה מורחבת

מטרת מחקר זה היא לזהות רשתות מוח מופצות הקשורות גמול על ידי התוויית טכניקת immunohistological אמינה באמצעות הפעלת C-FOS הסלולר למדוד לשינוים סימולטניים מסלולי דופאמין ואתרי מסוף לאחר בליעת רומן של שומן וסוכר בחולדות.

זיהוי סימולטני של הפעלת ג-Fos מאתרים זכו דופמין Mesolimbic ו Mesocortical בעקבות סוכר נאיבי בליעת שומן אצל חולדות

טעם הוא תהליך חושי חשוב המאפשר משיכה לחומרים מועילים והימנעות מחומרים רעילים.  פרוטוקול זה מתאר מבחן בליעה פשוט לקביעת העדפת טעם של דרוזופילה לתרכובת כימית נתונה.

Assay העדפות טעם למבוגרים<em&gt; תסיסנית</em

הסימן תגובתיות נתפסת כמו רגישות רמזים מקושר עם התנסויות בסמים לתרום תשוקה, נסיגה בבני אדם מפוכח. תגובתיות cue הוא המודל בחולדות על ידי מדידה התמצאות כל מעסיק כלפי סמים-הקשורים רמזים כי התוצאות בהתנהגות הגישה התיאבון במבחן תגובתיות cue בעקבות ניהול עצמי והכריחו התנזרות.

פרוטוקול למדידת Cue תגובתיות במודל של עכברים של הפרעה לשימוש בקוקאין

פרוטוקול זה מתאר מודל חדש שבאמצעותו חולדות בריא יכול חוזה דיכאון על נתון periodthrough הדבקה על ידי חשיפה כרונית בלתי צפויות הדגיש חולדות (CUS).

שיטה חדשה עבור גרימת התנהגות כמו דיכאון אצל חולדות

כאן, פרוטוקול העדפה (CPP) מורפיום ממוזגים המקום מתואר למדוד דגירה של השתוקקות אצל חולדות.

פרוטוקול העדפה המקום ממוזגים למדידת דגירה של השתוקקות אצל חולדות

מוצג כאן פרוטוקול לחקר התנהגות דיכאון ו anhedonic בחולדות. היא משלבת שתי שיטות התנהגות מבוססות היטב, העדפת סוכרוז ובדיקות היפופגיה חדשניות, עם מערכת אוטומטית לניטור צריכת מזון ונוזלים, כדי לחקור בעקיפין התנהגות מכרסמים באמצעות פרמטרים חלופיים.

העדפת סוכרוז ובדיקות היפופגיה המושרה על ידי חידוש בחולדות באמצעות מערכת אוטומטית לניטור צריכת מזון

פרוטוקול זה מתאר שיטה לבחינת היררכיה חברתית במודל עכברוש. חולדות מבצעות משימת צלילה למזון מורכבת שבה הן יוצרות היררכיה ברורה בהתאם לנכונותן לצלול מתחת למים ולשחות כדי להשיג גלולת מזון. שיטה זו משמשת להבנת קבלת החלטות ויחסים חברתיים בין בעלי חיים חברתיים מאוד בקבוצות קטנות.

משימת צלילה למזון מורכבת לחקירת ארגון חברתי ואינטראקציות בחולדות

מחקר זה העריך את היעילות נוגדת הדיכאון של Qiangzhifang במודל עכברוש של דיכאון כרוני הנגרם על ידי מתח והבהיר את השפעתו הרגולטורית על מסלולי HIF-1 ו-JAK-STAT על ידי פרמקולוגיה של רשת וניתוח עגינה מולקולרית.

פרמקולוגיה ברשת ואימות המנגנונים נוגדי הדיכאון של צ'יאנגז'יפאנג במודל עכברוש דיכאון המושרה על ידי ריסון כרוני

חקור את תופעת ההשתוקקות המתגברת לסוכרוז בחולדות לאחר תקופות התנזרות ממושכות. שיטה זו מאפשרת למדוד תגובות לרמזים הקשורים לסוכרוז ולהבין מנגנוני החזרה להתמכרות.

שיטה כללית להערכת דגירה של השתוקקות סוכרוז בחולדות

גלה סרטונים נוספים