פעילויות הדמיה ריח ועוררה הנורה חוש הריח באמצעות עכבר אופטי החזר אותות autofluorescence

המטרה הכוללת של ניסוי זה היא למפות פעילויות מעוררות ריח על פני פקעת הריח של עכברים באמצעות אותות אופטיים פנימיים ואותות אוטו-פלואורסצנטיים של פלבופרוט או הדמיית FAS לאחר הרדמת העכבר וחשיפת הגולגולת. העצם מעל נורת הריח מדוללת. דש עצם נמשך באמצעות קצה להב אזמל ולאחר מכן מוסר תא עשוי מלט דנטלי ומקיף את המשטח החשוף של נורת הריח.

הוא מלא בארוס ומונחת כיסוי על גבי תכשיר זה. מפות ריח נרכשות ברצף באותו עכבר באמצעות אותות אופטיים פנימיים והדמיית FAS, הדמיית פעילויות מעוררות אחרות בנורת הריח של העכבר באמצעות החזר אופטי ואותות אוטופלואורסצנטיים יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח הנוגעות לציפוי המיוחד של הזמנות בנורת הריח. היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות כגון הדמיית גלוקוז של שני דוקסי או FMRI הוא לאפשר להקליט פעילויות מעוררות הזמנה ברזולוציה מיוחדת של רשימת זוהר אחת.

בדרך כלל, אנשים חדשים בשיטות אלה יתקשו בתחילת עבודתם מכיוון שהן מיומנויות כירורגיות והן אינסטרומנטליות נרכשות באיטיות. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית כדי למשוך את תשומת הלב לשלבים המכריעים של הליכי הניתוח וההדמיה. צבט את כף הרגל האחורית של העכבר כדי לאשר את ההרדמה ולהסיר את השיער מהקרקפת באמצעות קוצץ.

נגב את שאריות השיער מהעור בעזרת רפידות גזה סטריליות ספוגות במים מזוקקים. הנח את העכבר במסגרת הסטריאוטקסית כך שהחוטם יהיה באותו מישור כמו החלק האחורי של הראש. על מנת למקם את נורת הריח בצורה אופקית, אבטח היטב את מוטות האוזן והאף על מנת למנוע תנועה.

מרחו משחה עיניים על העיניים כדי למנוע ייבוש במהלך ההדמיה, ולאחר מכן חטאו את אזור הקרקפת עם בטדין באמצעות מספריים סטריליים. בצע חתך בחלק האחורי של הראש בין האוזניים, ואז חתוך בשני הצדדים לכיוון בסיס האוזן ובכיוון האחורי הקדמי לכיוון המצח לאורך העפעפיים. סיים את הסרת הקרקפת על ידי חיתוך העור על החוטם.

שימוש במוט האף כמדריך. מקם את החיה מתחת למיקרוסקופ סטריאו והשתמש בצמר גפן ספוג במי מלח כדי לנתק בעדינות את הפריאוסטאום בחלק העליון של הגולגולת. השתמש בזוג מלקחיים כדי להסיר את הרקמה שנותרה ולגרד את פני הגולגולת בעזרת אזמל כדי להבטיח הכנה נקייה על מנת לשמור על אזור פקעת הריח לח לאורך כל הניסוי.

מניחים חתיכת ג'לטין נספג, ספוג ספוג במים מזוקקים על העצם מעל נורת הריח הממוקמת בין העיניים. הסר את ספוג הג'לטין והתחל בגירוד עדין של העצם עם להב אזמל מספר 10. שמור על זווית קבועה של 45 מעלות בין הלהב לעצם והעבר את הלהב מהעפעפיים לצד הסגיטלי של אזור הנורה.

הקפדה לא להפעיל לחץ אנכי על העצם או לשרוט את העצם מעל הסינוס הוורידי בתהליך הדילול. עצרו כל חמש דקות והניחו ספוג ג'לטין מיובש על העצם כדי לקרר את התכשיר. ספוג את הגולגולת עם הספוג כדי להסיר עצם, אבק ונגב את קצה האזמל מעת לעת כדי לשמור על ניקיונו ולשמור עליו חד.

המשך עד ששכבת העצם הספוגית או הטרבקולה נראית לעין. כאשר כלי הדם העדינים של נורת הריח נראים לעין, הפסיקו לשרוט את העצם והשתמשו בקצה אזמל מספר 11 כדי לצייר אזור מלבני ולסגור את נורת הריח. שמירה על החלון בגבול הסינוסים הוורידיים ממשיכה לשרוט את העצם בתוך האזור המלבני.

היזהר במיוחד בעומק קצה האזמל כדי להימנע מנגיעה במשטח הדורה. על מנת לקבל תחושה של עובי העצם שנותרה, דחפו אותה בעדינות עם קצה פרה של מלקחיים. אם העצם מתקפלת בלחץ, עברו לשלב הבא.

הוסיפו טיפת מי מלח והשתמשו בקצה האזמל בכיוון אופקי כדי להרים את דש העצם. הסר בזהירות את הדש באמצעות מלקחיים כדי למנוע קריעת העצם שנותרה. לאחר חשיפת פני השטח של פקעת הריח, בדוק אם אין דימום או כלי דם. אנסטומוזיס.

נגב את האזור עם ספוג ג'לטין ספוג במי מלח. על מנת לשמור על לחות נורת הריח, יש למרוח מלט דנטלי פולי אקרילט באמצעות מזרק בגודל 29 כדי ליצור באר על העצם סביב חלון הגולגולת. הניחו טיפה של נקודת התכה נמוכה מעל הדורה והניחו זכוכית כיסוי סטרילית מעל חלון הגולגולת להדמיה.

מקם את המסגרת הסטריאוטקסית מתחת למיקרוסקופ הסטריאו כאשר חלון הגולגולת מרוכז בשדה הראייה כדי להביא את הנימים לעין. עבור לאור ירוק של 580 ננומטר וצלם תמונת בקרה אנטומית כדי לבדוק את מצב התכשיר במהלך ההדמיה. לאחר מכן המשך ללכוד את ניסויי הגירוי באמצעות הדמיית אותות אופטיים פנימיים תחת תאורה של 630 ננומטר או הדמיית אותות פלבו-פלואורסצנטיים תחת תאורה של 480 ננומטר, סשן הדמיה סטנדרטי כולל קו בסיס של חמש עד 10 שניות שבו מועבר רק אוויר, ואחריו גירוי הריח למשך שלוש עד 10 שניות בהתאם לריכוז הריח הנבחר.

ולבסוף, 70 עד 82 שניות של משלוח אווירי נרשמות להתאוששות בסיסית. כאן, כלי הדם של פקעת הריח מצולמים דרך חלון הגולגולת, ואחריו תוצאות של ניסוי גירוי באמצעות h sinal כריח שנלכד באמצעות הדמיית iOS ו-FAS. באמצעות הדמיית iOS, פעילות מעוררת ריח מוצגת כאשר אזורים כהים של אזורי ספיגה המופעלים על ידי AL מסומנים על ידי החיצים הלבנים, וניתן לראות אזורים פעילים הן במספר ניסויים בודדים והן בממוצע.

מעבר להדמיית FAS באותה פעילות OD של עכבר מוצג כעת כאזורים לבנים של פליטת אוטופלואורסצנטי המסומנים על ידי החצים השחורים, וניתן לראות זאת גם במספר ניסויים בודדים וממוצעים. שימו לב שגם אזורי הספיגה השחורים שנראים בהדמיית iOS וגם האזורים הלבנים של פליטת האוטופלואורסצנציה שנראים בהדמיית FAS חופפים. התאמה מרחבית זו מאשרת ששתי הטכניקות מאפשרות הדמיה של אותו גלומרולי ריח ברגע שסדר הדמיה מאסטר מעורר פעילויות באמצעות החזר אופטי ואותות אוטופלואורסצנטיים ניתן לבצע תוך שעה אחת לניתוח וכמה שעות לרכישת תמונה.

החסרונות העיקריים בשימוש בשיטות הדמיה אופטיות אלה הם העובדה שלא ניתן ליישם אותן כדי לדמיין מפות ריח בצורה כלשהי, עכברים נעים חופשיים. ובשל החדירה המוגבלת של פוטונים לרקמות הביולוגיות, הם אינם נותנים גישה לגלומרולי הריח הגחוני לאחר התפתחותו בסוף שנות התשעים, תוך רישום אותות מהותיים במערכת הריח. אולי דרך לחוקרים בתחום ההדמיה האופטית לחקור את המאפיינים של הציפוי המיוחד של od.

בפקעת הריח, הדמיה של פלבו-פרוטאין היא טכניקה מבטיחה לתת תובנות חדשות בציפוי המיוחד של OD באמצעות אותות אופטיים אנדוגניים.