Name: טכניקה פשוטה לייצור דגם פצע איסכמי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-02T12:00:00.000+00:00
Duration: 12 min
Description: למד טכניקה מינימלית לייצור פצעים איסכמיים באוזני ארנבים, כולל חיות סוכרתיות. השיטה כוללת חתכי עור קטנים, בידוד כלי דם ויצירת מנהרה תת-עורית לצמצום הפרעה ברקמה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה נתמך בחלקו על ידי NIH מענקים 1RO1DK74566 ו 1RO1AM52984. המחברים מבקשים להודות לגב &#39;ז&#39;קלין מקארטי ב RRC על עזרתה במהלך הניתוח, בני הזוג. Jianpu וואנג Harshini םרוג&#39;יני על עזרתם בטיפול ניתוח שלאחר ניתוח של כמה ארנבות, ד&quot;ר Rong וואן לעבודה היסטולוגיה שלה, גב &#39;מינג לי למדידות HPLC שלה אנרגיה גבוהה פוספטים.

1. הבסיס האנטומי אוזן ארנב כבר חומר הלימוד המועדף לטיפול בפצע מאז המאה ה 20 המוקדמות ה. האוזן מסופק על ידי שלוש חבילות של כלי הדם (מרכזי, הגולגולת, ואת הזנב); צרור המרכזי הוא הגדול ביותר, בעוד הכלים של חבילות גולגולת הזנב משתנים בגודלם. מדי פעם, את העורק הזנב עשוי להיעדר. 1 כל הכלים האלה מזוהים בקלות בצד הגבי לאחר אוזן הוא גילח (איור 1). בצד הגחוני, העור דיסטלי אינו מקבל אספקת דם מכלי הדם הפרוקסימלי. שלוש חבילות כלי באוזן הגב יש סניפים רבים לחדור דרך הסחוס לספק אספקת הדם לעור הגחון דיסטלי (איור 2). ב ארנבות מסוימים, כלי קטן מאוד תת עורית קורה גם בצד הגחוני, המספק דם לא יותר מ 1/3 של העור הגחון. ב חתך בעור פתוח ההיקפי, יש אסןtially אין דימום מן החתך הגחון. 2. נוהל כירורגי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הארנב נשקלת ואת האוזניים הם מגולח, יחד עם העורף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Premedication של עצירות (0.01 מ"ג / ק"ג) ניתנת IM שעה לפני הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ההרדמה הוא המושרה על ידי תערובת של קטמין (50 מ"ג / ק"ג) ו Xylazine (5 מ"ג / ק"ג) IM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הארנב מוגן עם כרית חימום במהלך הניתוח, העיניים מוגנים עם משחה, ואת הסימנים החיוניים שלה מנוטרים במהלך הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתחום כירורגית מוכנה בסביבה נקייה מחיידקים, עם שיחים כירורגית עטוף כך ששני האוזניים חשופות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אוזן אחת מוצג איסכמית, בעוד האוזן השני משמש פקד שאינו איסכמי יחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שלושת כלי הדם pedicles מזוהים על ידי עורקים וורידים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות להב # 15, שלושה חתכים אנכיים קטנים (1-1.5 ס"מ) עשויים על pedicles כלי דם, כ 1-2 ס"מ מבסיס האוזן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הווריד המרכזימבודד הרקמות הסובבות וגם תפר משמש להקיף אותה הכחשה. העורק המרכזי ligated עם התפרים 4-0 ומחולק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העצבים המרכזית המלווה הוא חתך גם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Pedicle הגולגולת כולה ligated ומחולק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Pedicle הזנב נשמר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מנהרה תת עורית נעשית דרך 3 חתכים. מטרה זו מושגת על ידי דיסקציה קהה עם מהדק ו והניתוחים חדות עם סכין ומספריים. כל רקמות תת עורי, שרירים, עצבים, כלי דם וענפים קטנים הופסק. Vasculatures הקטנים מתחת הדרמיס חלוקים לחלוטין. כל רקמות תת עורי נחתכים לרמה של הסחוס עם הלהב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> והניתוחים חדות עוד יותר בוטה משמשים כדי לנקות את הבסיס, ומשאיר הסחוס החשוף על 5-10 מ"מ רחב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הליך זה קוטע את כל הענפים כלי דם תת עורי כדי למנוע מהם להקים במהירות בטחונות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דימום הואמינימלית. אם יש, זה נשלט בקלות על ידי דחיסה גזה, ללא צורך electrocautery. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העור בתוך האוזן אינו נושא אספקת דם רב, ולכן לא חתכו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 3 חתכים בעור נסגרים באמצעות תפרים 4-0 או 5-0, מכוסה בתחבושת סטרילית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> את תוצאות הפרוצדורה ב 3 חתכים קטנים בעור כרוך נזק לעור הרבה פחות מאשר ניתוח פתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ארבעה מעגלי עובי מלא פצעים בעור נוצרים בצד הגחון של כל אוזן עם 6 מ"מ נירוסטה אגרוף. המרחק בין הפצעים לפחות 20-30 מ"מ. העור בתוך הפצע אגרוף מוסר הסחוס. Perichondrium מוסר גם, עם העור או בנפרד. הבסיס שעליו פרור ו epithelization להתקיים הוא הסחוס, אבל הסחוס אינו מחורר (איור 3). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר הפצעים על שתי האוזניים הושלמו, בדיקות סמים מוחל על צד אחד של שני פצעים תוך בקרת תרופות הוא ApplIED את הפצעים בצד השני. רוטב occlusive (TegaDerm, 3M) משמש כדי לכסות את הפצע האתר. זה מונע את הפצעים מלהפוך מיובש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> את הפצעים על החלק התחתון של האוזן בדרך כלל להחלים מהר יותר הפצעים בחלק העליון של האוזן. לצורך המחקר ריפוי הפצע השוואה, מומלץ להשוות בין שני פצעים בצד אחד עם שני פצעים בצד השני, או להשוות את החלק העליון פצעים התחתונה בנפרד. </li></ol> 3. לאחר הניתוח טיפול <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תיקון Duragesic מחובר העור האחורי לשחרר פנטניל (25 מיקרוגרם / שעה) במשך 2-3 ימים כדי להפחית את הכאב אפשרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הארנבונים מותר גישה חופשית אוכל ושתייה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שינויים ההלבשה מתבצעות מדי יום. תחבושות הישנים יוסרו את הפצעים מנקים עם צמר גפן סטריליים. תמונות דיגיטליות נלקחים להשוואה. רטבים חדשים חלים, וגם את הפצעים מכוסים שוב TegaDerm. הרדמה אין צורך במהלך ההלבשה CHAnges. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טמפרטורת העור נמדד מדי יום לשם השוואה על כל אוזן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זרימת דם נוספת האוזן ניתן למדוד עם מד מתח Transcutaneous חמצן או flowmeter דופלר לייזר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התפרים יוסרו אחרי שבוע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור מי שאינם סוכרתיים בעלי חיים, רוב הפצעים אוזניים בדרך כלל להחלים תוך 2-3 שבועות. </li></ol> 4. סיבוכים אפשריים וכיצד להימנע מהן זה ניתוח פולשנית הוא בטוח סיבוכים נדירים. מלבד המעבר לאחר הניתוח בצקת קלה באוזן, אף אחד הארנבים שלנו היו סיבוכים ניתוחיים חמורים. עם זאת, ישנם כמה סיבוכים אפשריים עבור הליך זה: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דימום. דימום עלול להתרחש אם החתכים hemostasis אינו שלם או אם כלי דם גדול יותר (כמו זה של כלי pedicle העיקריים) פגום. זה להימנע בקלות על ידי דיסקציה זהירה. בנוסף לשלושת חבילות כלי דם גדולים, זה היה כמהמחדש הרבה סניפים קטנים תת עורית של כלי הדם. כאשר מנהרה תת עורית הוא עשה, הכלים האלה נעשים לחתוך אבל קשירת לא הכרחי. Hemostasis יכולה להיות מושגת רק על ידי לחיצה על גזה. זה נעשה בקלות על ידי הוספת פינת גזה לתוך המנהרה במשך כמה דקות. לפני סגירת החתך, לוודא שאין דימום פעיל קיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זיהום החתך ואת בקיעה: סיבוכים אלה עלולות להתרחש אם חתכים מזוהמים. זה יכול להימנע על ידי שימוש בטכניקה אספטי מחמירים לא אנטיביוטיקה היא זקוקה. עם זאת, אם הזיהום מתרחש, ניקוז מתאים ההלבשה שינויים נדרשים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצקת באוזן: בשל ligations כלי דם והפרעה זרימת הלימפה, בצקת קלה באוזן יכול להציג כמה ימים. עם זאת, היא נעלמת מעצמה וטיפול לא הכרחי. </li></ol> 5. נציג תוצאות מאז 2007, השתמשנו בהליך זה ביותר מ -70 ארנבות, כולל סוכרת 23imals. בקבוצה סוכרתית, הניתוח בוצע בשעות סוכרת שונים: שבעה ארנבונים היו שבועיים של זמן סוכרתית, 4 מהם היו חודשיים, 10 היה 12 חודשים, 2 היו 24 חודשים של זמן סוכרתית. מיד לאחר הניתוח, האוזן איסכמי נראה מגניב בכחלון, עם בצקת קלה. האוזן החשוב ביותר עורקים עורק מרכזי, היה דופק חזק באוזן רגילה, אבל הדופק לא היה נוכח באוזן איסכמי. תנועת האוזן צומצם, אבל לא לגמרי נעלם. העור הראו שקעים ברורים על פני המנהרה, אבל לא איסכמיה או נמק נמצאה כל בעל חיים (איור 4). הטמפרטורות עור של האוזניים נורמליים איסכמי נמדדו עם מדחום דיגיטלי (Omron ידי Omron Healthcare, Bannockburn, IL, או סוג K מדחום אינפרא אדום במקום על ידי פישר סיינטיפיק, פיטסבורג, פנסילבניה). ההבדלים בטמפרטורה בין האוזן הלא איסכמי ו איסכמי נע בין 1-10 ° C, Wרוב ארנבים ith נופלים בטווח של 2-6 ° C. איור. 5 מראה את ההבדלים הטמפרטורה הממוצעת מ -30 ארנבים. ההבדל הטמפרטורה היתה גבוהה יותר בימים הראשונים לאחר הניתוח, ירד בהדרגה לאחר 15 יום, אבל נשמר עדיין בסוף חודש. אנרגיה גבוהה רקמות תוכן פוספט נמדדו אצל בעלי חיים מסוימים אחרי שהם הקריבו. שש דגימות רקמות שנלקחו מאוזנו כל אנרגיה גבוהה תכולת פוספט נמדדו על ידי HPLC. הן ATP ריכוזי האנרגיה היו גבוהים יותר מאשר את האוזניים רגילות באזני איסכמי. איור. 6 מציג דוגמה של ארנב הקריב 23 ימים לאחר הניתוח. רקמות התכנים מתכוון ה-ATP היו 0.349 ± 0.047 μMol / g (ממוצע ± סטיית תקן) באוזן רגילה לעומת 0.237 ± 0.059 μMol / g באוזן איסכמי (p &lt;0.005). כלומר האנרגיה (ATP + ADP + AMP) היה 0.882 ± 0.137 μMol / g באוזן רגילה לעומת 0.556 ± 0.115 μMol / g ב ische מיקרופון אוזן (p &lt;0.001). ריפוי הפצע הזמנים היו תמיד יותר לאוזן איסכמי מאשר האוזן הלא איסכמי בכל הקבוצות (ללא סוכרת או סוכרת). איור. 7 מציגה השוואה של ריפוי בין 26 זוגות של פצעים על אוזניים איסכמי ולא איסכמי. פעמים הריפוי נע בין 13 ל -18 יום (ממוצע 14.9 ± 1.6 ימים) על אוזניים רגילות לעומת 17 עד 27 ימים (ממוצע 20.5 ± 3.4 ימים) על האוזניים איסכמי (p = 0.001). ריפוי פצעים פעמים ארנבונים בגיל ו סוכרתית היו הרבה יותר, במיוחד כאשר זמן סוכרתית היה יותר מ -12 חודשים. ב ארנבים אלה, כל החתכים הגלידו בדרך כלל ללא סיבוכים כלשהם, כולל ארנבים עם 24 חודשים של זמן סוכרתית. איור 8 דוגמה היסטולוגיה מראה מנהרה תת עורית נרפא שבו השריר התאור, והוא הוחלף על ידי רקמות סיביים. עם זאת, העור לא נפגע. / 3341fig1.jpg "/&gt; באיור 1. אוזן ארנב מסופק על ידי שלוש חבילות של כלי הדם. המרכזי הוא הגדול ביותר, גולגולת קטנה, ואת צרור הזנב הוא הקטן ביותר. כלים אלה נראים בקלות על פני השטח לאחר האוזן מגולח. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/3341/3341fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 2"> איור 2. שלוש חבילות על כלי הדם אספקת הגב האוזן לא רק עור הגב, אלא גם על העור הגחון באמצעות כלי נוקבות. החץ מראה את כלי חודר דרך הסחוס. מראה הבלעה לחצות קטע של הכלים האלה. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/3341/3341fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 3"> איור 3. ארבע 6 מ"מ פצעים נוצרים בצד הגחון של האוזן, perichondrium מוסר גם. הבסיס שעליו פרור ו epithelization להתקיים הוא הסחוס, אבל הסחוס אינו מחורר. Smal 3 חתכים וסעד עור סגורות עם הפרעה העור מעט מאוד. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/3341/3341fig4.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 4"> איור 4. לאחר חתכים בעור סגורים, indention על מנהרה תת עורית נראה בבירור. <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/3341/3341fig5.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 5"> איור 5. העור ממוצע הטמפרטורה ההבדל בין האוזן נורמלי איסכמי ב -30 ארנבים. טווחי ההבדל מוקדם 7 ° C עד 10 ° C לאחר הניתוח. ההבדל יורדת בהדרגה, אך עדיין שמר בסוף חודש. <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/3341/3341fig6.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 6"> איור 6. האוזן אנרגיה גבוהה רקמות תוכן פוספט מופחתים באוזן איסכמי, בהשוואה לאוזן הלא איסכמי ב 23 ימים לאחר הניתוח (p &lt;0.001). 41/3341fig7.jpg "/&gt; איור 7. ריפוי פצע זמן ארוך באזני איסכמי מאשר הלא איסכמי האוזניים (26 פצעים כל אחת). הריפוי מוגדר להשבת שלמות רקמות פצועים, כלומר reepithelialization מלאה של אתרי הפצע. <img alt="איור 8" src="/files/ftp_upload/3341/3341fig8.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 8"> איור 8. מדגם היסטולוגיה מראה חלק האוזן המכיל מנהרה תת עורית. רקמת נרפא הוא רזה יותר לאוזן רגילה, שרירי השלד המקורי נעדר, והוא הוחלף על ידי רקמות סיביים. עם זאת, העור לא נפגע.

<ol><li>Ninomiya, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+vascular+bed+in+the+rabbit+ear%3A+microangiography+and+scanning+electron+microscopy+of+vascular+corrosion+casts%5BTitle%5D)+AND+%22Anat.+Histol.+Embryol%22%5BJournal%5D)">The vascular bed in the rabbit ear: microangiography and scanning electron microscopy of vascular corrosion casts.</a> Anat. Histol. Embryol. 29, 301-305 (2000).</li>
<li>American Diabetes Association: Diabetes statistics. , American Diabetes Association. Available from: 
 
 <a target="_blank" href="http://www.diabetes.org/diabetes-basics/diabetes-statistics">http://www.diabetes.org/diabetes-basics/diabetes-statistics</a> (2011).</li>
<li>Sen, C. K., Gordillo, G. M., Roy, S., Kirsner, R., Lambert, L., Hunt, T. K., Gottrup, F., Gurtner, G. C., Longaker, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+skin+wounds%3A+a+major+and+snowballing+threat+to+public+health+and+the+economy%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair%22%5BJournal%5D)">Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy.</a> Wound Repair. 17, 763-771 (2009).</li>
<li>Boulton, A. J., Vileikyte, L., Ragnarson-Tennvall, G., Apelqvist, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+global+burden+of+diabetic+foot+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">The global burden of diabetic foot disease.</a> Lancet. 366, 1719-1724 (2005).</li>
<li>Edwards, J., Stapley, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Debridement+of+diabetic+foot+ulcers%5BTitle%5D)+AND+%22Cochrane+Database+Syst.+Rev%22%5BJournal%5D)">Debridement of diabetic foot ulcers.</a> Cochrane Database Syst. Rev. 1, 1-40 (2010).</li>
<li>Werdin, F., Tennenhaus, M., Schaller, H. E., Rennekampff, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence-based+Management+Strategies+for+Treatment+of+Chronic+Wounds%5BTitle%5D)+AND+%22Eplasty%22%5BJournal%5D)">Evidence-based Management Strategies for Treatment of Chronic Wounds.</a> Eplasty. 9, 169-179 (2009).</li>
<li>Wu, Y., Chen, L., Scott, P. G., Tredget, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells+enhance+wound+healing+through+differentiation+and+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells enhance wound healing through differentiation and angiogenesis.</a> Stem Cells. 25, 2648-2659 (2007).</li>
<li>Bennett, J. P., Matthews, R., Faulk, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+chronic+ulceration+of+the+legs+with+human+amnion%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Treatment of chronic ulceration of the legs with human amnion.</a> Lancet. 1, 1153-1156 (1980).</li>
<li>Gottrup, F., Agren, M. S., Karlsmark, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+for+use+in+wound+healing+research%3A+a+survey+focusing+on+in+vitro+and+in+vivo+adult+soft+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair%22%5BJournal%5D)">Models for use in wound healing research: a survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue.</a> Wound Repair. 8, 83-96 (2000).</li>
<li>Lindblad, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+wound+healing+research%3A+do+we+need+more%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair%22%5BJournal%5D)">Animal models in wound healing research: do we need more.</a> Wound Repair. 8, 81-82 (2000).</li>
<li>LoGerfo, F. W., Gibbons, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+disease+of+the+lower+extremities+in+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinol.+Metab.+Clin.+North+Am%22%5BJournal%5D)">Vascular disease of the lower extremities in diabetes mellitus.</a> Endocrinol. Metab. Clin. North Am. 25, 439-445 (1996).</li>
<li>Gottrup, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxygen%2C+wound+healing+and+the+development+of+infection.+Present+status%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Surg%22%5BJournal%5D)">Oxygen, wound healing and the development of infection. Present status.</a> Eur. J. Surg. 168, 260-263 (2002).</li>
<li>Niinikoski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+blood+and+oxygen+supply+on+the+biochemistry+of+repair%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">The effect of blood and oxygen supply on the biochemistry of repair.</a> , 56-71 (2002).</li>
<li>Schaffer, M., Witte, M., Becker, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+to+study+ischemia+in+chronic+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Low+Extrem.+Wounds%22%5BJournal%5D)">Models to study ischemia in chronic wounds.</a> Int. J. Low Extrem. Wounds. 1, 104-111 (2002).</li>
<li>Niinikoski, J., Gottrup, F., Hunt, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+oxygen+in+wound+repair%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">The role of oxygen in wound repair.</a> , 165-174 (1991).</li>
<li>Harding, K. G., Morris, H. L., Patel, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Science%2C+medicine+and+the+future%3A+healing+chronic+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ%22%5BJournal%5D)">Science, medicine and the future: healing chronic wounds.</a> BMJ. 324, 160-163 (2002).</li>
<li>Lindblad, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Editorial%3A+How+should+one+study+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair%22%5BJournal%5D)">Editorial: How should one study wound healing.</a> Wound Repair. 14, 515-515 (2007).</li>
<li>Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+rabbit+ear+model+created+by+minimally+invasive+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+Regen%22%5BJournal%5D)">Ischemic rabbit ear model created by minimally invasive surgery.</a> Wound Repair Regen. 15, 928-935 (2007).</li>
<li>Joseph, J., Townsend, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+healing+of+defects+in+immobile+skin+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Surg%22%5BJournal%5D)">The healing of defects in immobile skin in rabbits.</a> Br. J. Surg. 48, 557-564 (1961).</li>
<li>James, G. A., Swogger, E., Wolcott, R., Pulcini, E., Secor, P., Sestrich, J., Costerton, J. W., Stewart, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biofilms+in+chronic+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+Regen%22%5BJournal%5D)">Biofilms in chronic wounds.</a> Wound Repair Regen. 16, 37-44 (2008).</li>
<li>Niitsuma, J., Yano, H., Togawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+study+of+decubitus+ulcer+formation+in+the+rabbit+ear+lobe%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Rehabil.+Res.+Dev%22%5BJournal%5D)">Experimental study of decubitus ulcer formation in the rabbit ear lobe.</a> J. Rehabil. Res. Dev. 40, (2003).</li>
<li>Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+pressure+ulcer+research%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Spinal+Cord+Med%22%5BJournal%5D)">Animal models in pressure ulcer research.</a> J. Spinal Cord Med. 30, 107-116 (2007).</li>
</ol>

אין סתירה הכספי של העניין מעורב במחקר זה.

סוכרת משפיעה על 23.6 מיליון בני אדם בארצות הברית, 2,3 ו - 15-20% מהחולים הללו מפתחים כיבים ברגל בחייהם, 4.5 בעלות הטיפול השנתית של יותר מ 25 מיליארד דולר. 3,6 עם זאת, גם הטוב ביותר טיפולים להשיג רק שיעור הריפוי 50% וזה בדרך כלל זמני, 7 עם שיעורי הישנות גבוהים כמו 66% אצל חולי סוכרת. 3,6 כאשר כיבים להתרחש אצל חולי סוכרת, סיבוכים מרכזיים כגון זיהום כריתת גידול דרמטי. למרות כמעט מאה שנה של מחקר מקיף ופיתוח של אלפי מוצרי ההלבשה, א...

לניטור במהלך הניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כרית חימום לשמירה על חום נורמלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג חמצן Transcutaneous. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג הטמפרטורה. </li></ol> לניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סכין עם להב 3 # 15 #. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שני זוגות מלקחיים (1 לעור ועוד על רקמות רכות אחרות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 2-3 זוגות מלחציים קטנים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחד או 2 זוגות מספריים Micro (לחיתוך רקמות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זוג מספריים קטנים (לחיתוך התפרים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעל מחט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פלדה אל חלד (כמה אגרופים להכנת הפצעים). </li></ol>

טכניקה פשוטה לייצור דגם פצע איסכמי

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

מכשול אחד עיקרי המחקר הנוכחי פצע סוכרתי היא חוסר מודל פצע איסכמי, שניתן להשתמש בהם בבטחה אצל בעלי חיים סוכרתיים. תרופות שעובדות היטב שאינם איסכמיים פצעים לא יכול לעבוד פצעים סוכרתיים אדם כי vasculopathy גורם אחד מרכזי מעכבת ריפוי של פצעים אלה. אנו פרסם מאמר בשנת 2007 המתאר אוזן ארנב מודל איסכמי הפצע שנוצר על ידי טכניקה כירורגית פולשנית. מאז, יש לנו לפשט עוד יותר את ההליך לפעולה קלה יותר. על אוזן אחת, שלושה חתכים קטנים בעור נעשו על pedicles כלי דם, 1-2 ס&quot;מ מבסיס האוזן. העורק המרכזי ligated וחותכים יחד עם העצב. צרור הגולגולת כולה לגזור ligated, ומשאיר רק את הסניף הזנב ללא פגע. מנהרה תת עורית ההיקפי נעשה דרך חתכים את, לחתוך רקמות תת עורי, שרירים, עצבים וכלי קטנים. האוזן השנייה שימשה כביקורת לא איסכמית. ארבעה פצעים נעשו על הצד O הגחוןF כל אוזן. טכניקה זו מייצרת 4 פצעים איסכמיים ו -4 שאינם איסכמיים הפצעים בעלי חיים 1 עבור השוואות לזווג. לאחר הניתוח, האוזן איסכמי היה קריר בכחלון, והראה התנועה הקטינה וחוסר הדופק בעורק האוזן. טמפרטורת העור של האוזן איסכמי היה 1-10 מעלות צלזיוס נמוך מזה על האוזן נורמלי ההבדל הזה נשמר במשך חודש אחד או יותר. רקמות האוזן אנרגיה גבוהה תכולת פוספט היו נמוכים יותר באוזן איסכמי מאשר אוזן שליטה. ריפוי הפצע הזמנים היו יותר באוזן איסכמי מאשר באוזן שאינו איסכמי כאשר אותו טיפול נעשה שימוש. טכניקה יש עכשיו כבר בשימוש על יותר מ -80 ארנבות שבו היו 23 סוכרתית (זמן שנע בין סוכרת 2 שבועות עד 2 שנים). לא ארנבת אחת פיתחה סיבוכים כירורגיים כגון דימום, זיהום, או קרע של חתכים בעור. מודל יש יתרונות רבים, כגון הפרעה עור קטן, זמן איסכמי יותר, שיעור הצלחה גבוה יותר, לעומת דגמים אחרים. זה can בטוח לשימוש בחיות עם התנגדות נמוכה, והוא יכול גם להיות שונה כדי לעמוד בדרישות בדיקות שונות.

פיתחנו שיטה פולשנית ליצור אוזן איסכמי ארנב מודל הפצע על ידי חלוקת עורק העצבים המרכזית ואת צרור neurovascular גולגולתי. מנהרה תת עורית ואז חותך את כל רקמות תת עורית. הליך זה גורם הפרעה העור מינימלי בטוח לשימוש בבעלי חיים חולי סוכרת.

מכשול מרכזי אחד במחקרים הנוכחיים על פצעים סוכרתיים הוא היעדרו של מודל לפצע איסכמי שניתן להשתמש בו בבטחה בבעלי חיים סוכרתיים. תרופות הפועלות...

המטרה הכוללת של הניסוי הבא היא לאפשר יצירת פצעים איסכמיים, לא רק בארנבים בריאים, אלא גם בארנבים עם עמידות מופחתת, כגון ארנבים קשישים או חולי סוכרת. כל הטכניקות המשמשות כיום ליצירת פצעים איסכמיים הן פולשניות מאוד, ועד כה, אף אחת מהטכניקות הללו אינה ניתנת לשימוש בבעלי חיים חולי סוכרת. הליך זה משתמש בניתוח זעיר-פולשני המתחיל בביצוע שלושה חתכי עור קטנים מעל שלושת הצמורים הכליים.השלב הבא הוא לבודד ולהגן על הווריד המרכזי ועל הצרור כלי הדם של ה-coddle, כך שסירקולציית הדם לאוזן תצטמצם אך לא תופסק לחלוטין. לבסוף, שאר כלי הדם, העצבים והרקמות התת-עוריות נכרתים או נקשרים דרך החתכים בעור. איסכמיה של האוזן מאומתת על ידי היעדר דופק עורקי, מראה האוזן, הפרש בטמפרטורה ורוויית חמצן תת-עורית.ניתוח זעיר-פולשני זה עשוי להיראות קשה לביצוע, אך למעשה הוא קל מאוד. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא גורמת לפגיעה מועטה מאוד בעור. מאז שפרסמנו את הטכניקה הזו לראשונה בשנת 2007, קיבלנו שאלות רבות.מאז פישטנו עוד יותר את ההליך הזה. כדי להפוך את הביצוע לקל עוד יותר ללא שימוש במיקרוסקופ, התחילו בשקילת הארנב הנבחר, הרדימו את הארנב באמצעות תערובת של ketamine ו-xylazine. עקבו אחר הסימנים החיוניים של הארנב; ניתן לזהות בצד הגבי (dorsal) שלושה צרורות כלי דם המספקים דם לאוזן.אלו הם הצרור המרכזי, שהוא הגדול ביותר ובעל ענפים המתרחבים לכלי דם אחרים; צרור ה-coddle, שבו העורק בדרך כלל קטן מאוד או חסר; והצרור הקרניאלי. בצד הוונטרלי, העור הדיסטלי אינו מקבל אספקת דם מהכלים הפרוקסימליים.במקום זאת, צרורות כלי דם באונה הגבית של האוזן כוללים ענפים חודרניים רבים דרך הסחוס כדי לספק אספקת דם לעור הוונטרלי הדיסטלי. בחלק מהארנבות, קיים גם כלי דם תת-עורי קטן מאוד בצד הוונטרלי, המספק דם ללא יותר משליש מהעור הוונטרלי. בחתך עורי היקפי פתוח, כמעט ואין דימום מהחתך הוונטרלי.לפני ההמשך, ודאו כי הארנב אינו מגיב לגירויי כאב באמצעות צביטה בבהוות ובדיקת רפלקס העין, והגנו על עיני החיה על ידי מריחת משחה של דמעות מלאכותיות. שמרו על חום גוף של הארנב במהלך הניתוח באמצעות פד חימום. לאחר מכן, קרצפו את שתי האוזניים ואת העור שמסביבן באמצעות Betadine ואלכוהול, וכסו את הארנב בסדין סטרילי כך שרק שתי האוזניים יהיו חשופות.אוזן אחת תהפוך לאיסכמית בעוד שהשנייה תשמש כביקורת. הכלים המשמשים לניתוח הם סכין כירורגית עם להב מספר 15, שני זוגות פינצטות, אחת לעור ואחרת לרקמות רכות אחרות. שלושה תפסני מושקית (mosquito clamps), זוג אחד או שניים של מיקרו-מספריים קמורות, זוג מספריים קטנות לחיתוך תפרים ורקמות קשוחות, מחזיק מחטים ומספר מחללי נירוסטה (punches).התחילו את הניתוח בזיהוי שלושת הגבעולים הווסקולריים (vascular pedicles) על פי העורקים והורידים. בעזרת להב מספר 15, בצעו בזהירות חתך עורי אנכי אחד על הגבעול הווסקולרי המרכזי.בודד את הווריד המרכזי מהרקמות שסביבו והגן עליו. שלב זה מקיף את הווריד המרכזי לצורך הרחקה.בצעו דיסקציה של העצב המרכזי כדי לשחררו. הוא נמצא בדרך כלל בצדו של הווריד. חתכו את העצב באמצעות מספריים.בצעו דיסקציה של העורק המרכזי עד לשחרורו. הוא נמצא בדרך כלל בצד הקרניאלי ועמוק יותר מהוריד; קשרו את העורק וחתכו אותו. נקו את הרקמות מסביב לוריד המרכזי מעל סחוס האוזן.חתך עור שני מבוצע מעל ה-coddle pedicle. כדי לשמר את הצרור, כלי הדם מופרדים בתהליך דיסקציה ונקיפים לצורך הגנה.זה שימושי במיוחד כאשר הווריד גדול, כפי שניתן לראות בארנב זה. צרו מנהרה בין נקודה זו לבין החתך הראשון. גזרו את הרקמות התת-עוריות מעל הסחוס.חתך עור שלישי מבוצע מעל הצרור הקראניאלי. צרור זה כולו נקשר ומופרד. העור מעל הצרור השלישי נחתך.וריד זה קרוב מאוד לעור, לכן אין לחתוך עמוק מדי. לאחר מכן מנתקים את כל צרור כלי הדם, קושרים אותו ומפרידים אותו. בעזרת סכין ומספריים, צרו תעלה תת-עורית.שלוש החתכים קוטעים את כל הרקמות התת-עוריות, השרירים, העצבים והענפים כלי הדם הקטנים. יש להשתמש בדיסקציות חדות וקהות נוספות כדי לנקות את הבסיס, כך שיישאר סחוס חשוף ברוחב של כ-5 עד 10 מילימטרים. ניתן לשלוט בדימומים באמצעות לחץ של גזה.אין צורך בכוייה חשמלית. העור בתוך האוזן אינו נחתך מכיוון שאינו עשיר בכלי דם. ההיבט החשוב בפרוצדורה זו הוא הבטחת דיסקציה נאותה של התעלה התת-עורית תוך הגנה על כלי הדם.פרוצדורה זו לא אמורה להיות קשה. לאחר המוסטזיס, שלוש חתכי העור נסגרים באמצעות תפרים במידה 4-0 או 5-0 ונבדקים שוב כדי לוודא שחתכי העור סגורים כראוי ושאין דימום. לבדיקת תרופות לפצעים, ניתן ליצור ארבעה פצעי עור מעגליים בעובי מלא בצד הוונטרלי של כל אוזן באמצעות מחסן (punch) מפלדת אל-חלד בקוטר 6 מילימטר.המרחק בין הפצעים הוא לפחות 20 עד 30 מילימטרים. העור והפריכונדריום (perichondrium) בתוך ה-punch מוסרים, אך הסחוס אינו נפגע. לאחר יצירת הפצעים בשתי האוזניים, כסו אותם זמנית בגזה והעבירו את הארנב לחדר הפרוצדורות לצורך יישום התרופה.לאחר ניקוי הפצעים מקרישי דם, יש למרוח את תרופות הבדיקה והביקורת. הפצעים מכוסים בחבישה אוקלוסיבית למניעת התייבשות. בעת השוואה בין שתי תרופות, יש למרוח כל תרופה הן על פצע פרוקסימלי והן על פצע דיסטלי.פעולה זו משמשת כבקרה להבדלים בקצבי ריפוי הפצעים באוזן הדיסטלית והפרוקסימלית לאחר הניתוח. האוזן האיסכמית הופכת בדרך כלל לקרה וכחולה (ציאנוטית), עם תחושה מופחתת לדיסטלית לחתך. בצקת קלה עשויה להופיע למשך מספר ימים, אך היא נעלמת מעצמה ואינה דורשת טיפול.הדופק בעורק המרכזי אינו מורגש. תנועת האוזן מופחתת, אך לא נעלמת לחלוטין מכיוון שחלק מהשרירים עדיין מחוברים לבסיס האוזן. אם התעלה נוצרה בצורה נכונה, ניתן לראות שקע ברור בין החתכים.מדבקת פנטניל מודבקת לעור הגב להקלה על כאבים פוסט-אופרטיביים אפשריים. טמפרטורת העור נמדדת מדי יום בכל אוזן באמצעות מדחום. זרימת הדם באוזן נמדדת באמצעות מד מתח חמצן טרנס-cutנאומי או מד זרימה בלייזר דופלר.לאחר שבוע, ניתן להסיר את התפרים של חתכי העור מ-2007. הפרוצדורה בוצעה ביותר מ-70 ארנבים. מספר זה כולל 23 ארנבים סוכרתיים וארבעה ארנבים מבוגרים.ההבדלים בטמפרטורה בין האוזן הלא-איסכמית לאוזן האיסכמית נעו בין 1 ל-10 מעלות צלזיוס, כאשר רוב השפנפנים היו בטווח של 2 עד 6 מעלות צלזיוס. הפרש הטמפרטורה היה גבוה יותר בימים הראשונים לאחר הניתוח, ירד בהדרגה לאחר היום ה-15, אך נשמר עד לסוף חודש אחד. שש דגימות רקמה נלקחו מכל אוזן ותכני פוספט בעל אנרגיה גבוהה נמדדו באמצעות HPLC, הן עבור TP והן עבור אנרגיה כוללת.הריכוזים היו גבוהים יותר באוזניים הנורמליות מאשר באוזניים האיסכמיות. זמני ריפוי הפצעים היו תמיד ארוכים יותר באוזן האיסכמית מאשר באוזן שאינה איסכמית בבעלי חיים שאינם סוכרתיים ובבעלי חיים סוכרתיים ב-15 ארנבים שאינם סוכרתיים. זמן הריפוי הממוצע היה 17.8 ימים באוזן שאינה איסכמית לעומת 21.8 ימים באוזן האיסכמית.בבעלי חיים סוכרתיים בני 10-12 חודשים, זמן הריפוי הממוצע היה 18.3 ימים באוזן הלא-איסכמית בהשוואה ל-29.1 ימים באוזן האיסכמית. בכל בעלי החיים, כולל ארנבים סוכרתיים, חתכי העור הגבירו באופן תקין ללא סיבוכים בארנבים. בזמן סוכרת של 24 חודשים, לפצעים בבטן (ventral) יש נטייה גבוהה יותר להידבק בזיהומים.מאפיין זה הופך אותו לדומֶה יותר לפצעים סוכרתיים אנושיים. דגימה היסטולוגית מראה את הריפוי של התעלה התת-עורית, שבה השריר חסר ומוחלף ברקמות סיביות. עם זאת, העור נותר שלם.בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב לזכור להתייחס לבעלי החיים באופן הומני. לאחר רכישת המיומנות, ניתן לבצע טכניקה זו בפחות משעה אחת. השתמשנו בטכניקה זו ביותר מ-70 ארנבות, כולל 23 ארנבות סוכרתיות, ללא סיבוכים כגון דימום או זיהום.זהו הליך בטוח מאוד בעקביות לביצוע לפי פרוטוקול זה. ניתן לבצע שיטות נוספות, כגון איסכמיה נוספת, נזק עצבי והזרקת חיידקים, כדי להשיב על שאלות נוספות הנוגעות לאולקוסים וסקולריים, פצעי לחץ ונוירופתיה סוכרתית.

a-simplified-technique-for-producing-an-ischemic-wound-model

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

טראומה ניתוחית גורם לתגובה דלקתית. ציטוקינים ligands אנדוגניים ידועים לווסת את גודל האוטם בשריר הלב בעקבות איסכמיה ו reperfusion. אנו מציגים שונה סגור החזה מודל של איסכמיה reperfusion Murine באמצעות משקולות תלויות כדי למזער את ההשפעות של פתיחת בית החזה.

דגם Murine סגור החזה של איסכמיה של שריר הלב reperfusion

מודל עכברי של ריפוי פצע עורי שניתן להשתמש כדי להעריך את התרכובות טיפוליות בהגדרות פיסיולוגיות וpathophysiological.

מודל עכברי של ריפוי פצע

החלון של חדר skinfold הגב העכברי הציג מדמיין אזור של איסכמיה המתמשכת האקוטית של כנף musculocutaneous. היתרי Intravital עלית מיקרוסקופ פלואורסצנטי להערכה ישירה וחוזרת ונשנית של נימי הדם והכימות של פרמטרים המודינמיים. נוסף יכולים להיות מתואמות מורפולוגיים ותוצאות המודינמית עם ניתוחים היסטולוגית ומולקולריים.

פגיעה ברקמות איסכמי בהגבו skinfold לשכת העכבר: דגם דש עור לחקור איסכמיה מתמיד חריפה

במהלך התפתחות היונקים, פצעי עור הריון מוקדמים נרפאים ללא צלקת. כאן אנו מפרטים מודל אמין וניתן לשחזור של ריפוי פצעים עובריים ללא צלקת בגב העורי של עוברי עכברים E16.5 (ללא צלקת) ו-E18.5 (צלקות).

דגם עור עכבר עוברי של תיקון פצע צלקות

המטרה של פרוטוקול זה היא לבנות עור תלת מימדי בעובי מלא, הדומה לעור טבעי. עם מכשיר פציעה אוטומטי שנבנה במיוחד, ניתן ליצור פצעים מדויקים וניתנים לשחזור תחת שמירה על סטריליות.

דור של עור בעובי מלא תלת ממדי Equivalent ואוטומטי פציעה

החולדה, בשל הגודל, הזמינות, וההתנהגות לא הצייתנית שלה, נוצלה כמודל מחקר במשך שנים רבות. המטרה של פרוטוקול זה היא לנצל את החולדה כמודל ריפוי עור פצע איסכמי לספק תובנה חשובה הפתופיזיולוגיה של פצעים כרוניים.

הפגנה של דגם פצע עור העכברוש איסכמי

כאן, שני מודלים מורתיים ריפוי הפצע מתוארים, אחד שנועד להעריך את התגובה התאית הפצע ריפוי והשני כדי לכמת את שיעור סגירת הפצע. שיטות אלה ניתן להשתמש עם דגמי מחלות מורכבות כגון סוכרת כדי לקבוע מנגנונים של היבטים שונים של ריפוי הפצע המסכן.

הערכה של ריפוי בפצע חריפה באמצעות השרכה העור מפוליויניל כוהל של הרקמה העורית והזנב Excisional הפצע מודלים.

פרוטוקול זה מתאר כיצד ליצור פצעים דו-צדדיים בעובי מלא בעכברים וכיצד לעקוב אחר, לקצור ולהכין את הפצעים לניתוח מורפומטרי. כלול תיאור מעמיק של אופן השימוש בסעיפים היסטולוגיים טוריים כדי להגדיר, לכמת ולזהות פגמים מורפומטריים במדויק.

מודל ריפוי פצעים מרין וניתוח פצעים מורפומטריים היסטולוגיים

מאמר זה מדגים גישה כירורגית יעילה ליצירת איסכמיה חריפה בעכברים עם חתך קטן. גישה זו יכולה להיות מיושמת על ידי רוב קבוצות המחקר ללא כל שדרוגי מעבדה.

מודל כירורגי מותאם של איסכמיה בגפיים אחוריות ב- ApoE-/- עכברים באמצעות חתך מיניאטורי

מוצג פרוטוקול יעיל להקמת מודל ריפוי פצעי כוויות בעכברים באמצעות מכשיר חימום דיגיטלי. אתרי הניסוי דמויי לוח השחמט שנוצרו על העור מאפשרים ניתוח פונקציונלי נוסף לבדיקת ריפוי הפצעים.

מודל ריפוי פצעי כוויה דמוי לוח שחמט של עכברים המבוסס על מכשיר חימום דיגיטלי

מתואר מודל פצע מעור עכברוש המאפשר הערכה של תרופות שונות בתנאים פיזיולוגיים או פתולוגיים בשלבים שונים של תהליך ההחלמה. בנוסף, מפורט פרוטוקול לביצוע פלנימטריה ידנית למעקב אחר קצב התכווצות הפצע במהלך תיקון הרקמות.

מודל פצע עור כירורגי לעכברוש: גישה למחקרי ריפוי פצעים והערכת ביוחומרים

למד טכניקה מינימלית לייצור פצעים איסכמיים באוזני ארנבים, כולל חיות סוכרתיות. השיטה כוללת חתכי עור קטנים, בידוד כלי דם ויצירת מנהרה תת-עורית לצמצום הפרעה ברקמה.

טכניקה פשוטה לייצור דגם פצע איסכמי

גלה סרטונים נוספים