Name: תרבות explant עור אגרוף ביופסיה לגזירה של fibroblasts אדם היסודי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-07-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 19 s
Description: למדו תרבית explant עור אגרוף ביופסיה לגזירת fibroblasts אדם היסודי. שיטה זו מאפשרת אחסון של 15-20 מיליון תאים במספר מעברים נמוך בתוך 4-8 שבועות למחקר ביולוגי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

פיתוח של פרוטוקול זה מומן על ידי מכון קליפורניה לרפואת רגנרטיבית (CIRM, TR1-01246) ופרקינסון הברית.

עור אגרוף ביופסיה שהושגה באמצעות הליך רגיל 3 (המתקבל לדוגמה עם 4 מ&quot;מ מכשיר Visipunch סיבוב) צריך להיות כל הזמן ב20% FBS DMEM מלא תקשורת על קרח. לאחר המדגם הגיע במעבדה, לעבד את הביופסיה בהקדם האפשרי. 1. הכנת עור אגרוף הביופסיה צעדים 1.1-1.3 הם להיות מתבצעים בתוך biosafety CABINET <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להכין מראש: הוסף 1 מ&quot;ל של 0.1% לטין היטב בכל צלחת 6 באר. הגדר את הצלחת בצד ל30-60 דקות. לשאוב את פתרון ג&#39;לטין ולהוסיף 800 μl של שלם DMEM/20% FBS תקשורת היטב כל אחד. ודא שכל פני השטח שלו מכוסה היטב עם תקשורת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך את המכסה של צלחת רקמת 10 ס&quot;מ סטרילי תרבות ולהוסיף 1.5 מ&quot;ל של DMEM / 20% FBS תקשורת לאמצע המכסה ונפרש טיפת התקשורת עם קצה פיפטה סרולוגית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחיים סטריליים, מקום לאהוא חתיכת עור הביופסיה בתקשורת על הצלחת. </li></ol> 2. Dissection של עור אגרוף הביופסיה שלבי 9 2.1-2.2 ARE להתבצע בתוך מכסה מנוע זרימה למינרית אופקי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את החלק התחתון של צלחת 10 ס&quot;מ על מכסה הפוך, ולהעביר את עור הביופסיה למיקרוסקופ לנתח במכסת מנוע הזרימה למינרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח סיבוב 4 מ&quot;מ עור ביופסיה ל12-15 חתיכות בגודל אחיד עם קצוות חדים על ידי חיתוך חתיכות בחצי שווים שימוש באחד אזמל כדי להחזיק את הביופסיה במקום שני והאזמל כדי לחתוך עם תנועה סיבובית בכיוון אחד. חתיכות עם קצוות משוננים לתרום לתולדת קובץ מצורף / תא עני. </li></ol> 3. העברת העור גזור ביופסיה חתיכות לתוך צלחות תרבית רקמה צעדים הם 3.1-3.6 להתבצע בתוך biosafety CABINET <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את החלק התחתון של המנה תרבית רקמת 10 ס&quot;מעל גבי מכסה ההפוך, ומנה בחזרה להעברה לארון הבטיחות הביולוגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחיים מחודדים, מקום 2-3 ביופסיה חתיכות לתוך באר כל הצלחת 6 היטב המוכנה המכילה 800 μl ולא על בארות יבשות. השתמש הקשה או הזזה תנועה כדי לקבל את החלקים לצרף לתחתית הבאר. אזמל הוא שימושי כדי להסיר כל חתיכות מביופסית המלקחיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את הצלחת 6 היטב ב37 ° C החממה. לפקח יומי כדי להבטיח שיש סרט של מדיה ציפוי תחתית הבאר בשבוע הראשון; להוסיף ~ 200 μl כל 2 ימים להחליף כל מדיה התאדתה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי שבוע אחד, להגדיל את כמות המדיה ל2 מ&quot;ל של FBS DMEM/20% השלם ושינוי תקשורת כל 2-3 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהם מחוברות fibroblasts היטב כל אחד לנקודה שבה fibroblasts מגיע לקצוות היטב, ומעבר Trypsinize צלחת 6 היטב לתוך צלוחיות T75 2X (קטע 1). ניתן להעביר את פיסות הרקמה גם כן. הם לא לצרף ולהישטף OUT במהלך שינוי המדיה הבאה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שfibroblasts הם מחוברות, להעביר אותם לT175 צלוחיות 3x (קטע 2), הקפאה בתקשורת DMEM המלאה בתוספת 10% DMSO ב1x10 6 תאים / מ&quot;ל לבקבוקון. </li></ol> 4. אפיון את fibroblasts דרך Immunostaining <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> fibroblasts התרבות בשקופית 8 קאמריות גם מצופה בג&#39;לטין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר תאים הם בשיעור 80% confluency, לשאוב את המדיום מכל אחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן תאים בparaformaldehyde 4% במשך עשר דקות בטמפרטורת חדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטוף את זמני בארות 3 עם 1X PBS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Permeabilize את התאים עם 150 μl של 0.3% טריטון X-100 (PBS) למשך 5 דקות בטמפרטורת חדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטוף את זמני בארות 3 עם 1X PBS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 200 חסימת פתרון μl (סרום עיזים PBS + 5% רגיל (וקטור, S-1000)) במשך שעה 1 בטמפרטורת חדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן דילול 1:250 של Anti-SERPHIN-1 (נגד ארנב, מב, Sigma, S5950-200 μl) בחסימת פתרון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl">spirate פתרון החסימה, ולהוסיף 150 μl של דילול 1:250 של AntiSERPINH-1. לדגור על 1-2 שעות בטמפרטורת חדר, או על 4 מעלות צלזיוס למשך הלילה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטוף את זמני בארות 3 עם 1X PBS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן נוגדן חד שבטי עז נגד ארנב 1:200 (אלקסה פלואוריד עיזים נגד ארנב IgG (H + L), Invitrogen, A11008) בחסימת פתרון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 150 μl של 1:200 נוגדן חד שבטי עז נגד ארנב היטב כל אחד. דגירה במשך שעה 1, בחושך, בטמפרטורת חדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשטוף בארות פעם אחת עם 1xPBS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשאוב PBS, והרם בזהירות את התאים כדי לחשוף רק את השקופית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הר השקופית עם 2-3 טיפות של הרכבה בינונית המכילות DAPI (וקטור, H-1200). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את השקופית תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי. </li></ol>

<ol><li>Nguyen, H. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LRRK2+mutant+iPSC-derived+DA+neurons+demonstrate+increased+susceptibility+to+oxidative+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">LRRK2 mutant iPSC-derived DA neurons demonstrate increased susceptibility to oxidative stress.</a> Cell Stem Cell. 8, 267-280 (2011).</li>
<li>Mak, S. K., Tewari, D., Tetrud, J. W., Langston, J. W., Schule, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dysfunction+in+skin+fibroblasts+from+a+Parkinson%27s+disease+patient+with+an+alpha-synuclein+triplication%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Parkinson%27s+Disease%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dysfunction in skin fibroblasts from a Parkinson's disease patient with an alpha-synuclein triplication.</a> Journal of Parkinson's Disease. 1, 175-183 (2011).</li>
<li>Punch Zuber, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((biopsy+of+the+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+Fam.+Physician%22%5BJournal%5D)">biopsy of the skin.</a> Am. Fam. Physician. 65, 1155-1164 (2002).</li>
<li>Takashima, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+fibroblast+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Protoc.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Establishment of fibroblast cultures.</a> Curr. Protoc. Cell Biol. Chapter 2, Unit 2, 1(2001).</li>
<li>Kuroda, K., Tajima, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HSP47+is+a+useful+marker+for+skin+fibroblasts+in+formalin-fixed%2C+paraffin+embedded+tissue+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cutan.+Pathol%22%5BJournal%5D)">HSP47 is a useful marker for skin fibroblasts in formalin-fixed, paraffin embedded tissue specimens.</a> J. Cutan. Pathol. , 241-246 (2004).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

עם פרוטוקול זה, ניתן להשיג תרבויות טהורות יחסית של fibroblasts העור. יש את fibroblasts תכונות מורפולוגיות אופייניות של גופים מוארכים, דמויי כישור סלולרי, עגולים לגרעין תא סגלגל, ואת fibroblasts לגדול ומיושר בצרורות כאשר מחוברות. התקשורת תומכת בצמיחה של fibroblasts אילו אוכלוסיות תאי הקרטינוציטים אחרות כגון צריכים תוספים נוספים וגורמי גדילה, או שmitotically פחות פעילים, זה מאפשר לתרבויות פיברובלסטים טהורות יחסית. <p class="jove_content" style=";text-align:right;directi...

<table><tbody><tr><td>מיקרוסקופ לדיסקציה</td><td>Leica</td><td>S6E</td><td></td></tr><tr><td>צלוחית פטרי לתרבית רקמה בנפח 10 ס"מ</td><td>VWR</td><td>25382-166</td><td></td></tr><tr><td>פלטת תרבית רקמה בעלת 6 בארות </td><td>VWR</td><td>73520-906</td><td></td></tr><tr><td>סכיני ניתוח סטריליות חד-פעמיות מפלדת אל-חלד (2), להב מס' 15, Miltex</td><td>VWR</td><td>21909-660</td><td></td></tr><tr><td>פינצטה סטרילית בעלת קצה מחודד</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מבחנות קוניות של 50 מ"ל</td><td>VWR</td><td>21008-940</td><td></td></tr><tr><td>פיפטים סרולוגיים של 2 מ"ל</td><td>VWR</td><td>89130-894</td><td></td></tr><tr><td>פיפטות סרולוגיות של 5 מ"ל</td><td>VWR</td><td>89130-896</td><td></td></tr><tr><td>פיפטות סרולוגיות של 10 מ"ל</td><td>VWR</td><td>89130-898</td><td></td></tr><tr><td>פיפטות פסטור</td><td>VWR</td><td>14672-380</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">&lt;p class=&quot;נא לספק את התוכן שברצונך לתרגם.&quot;&gt;&lt;חזק&gt;טבלה A. טבלת ריאגנטים וציוד ספציפיים.&lt;/strong&gt;&lt;/p&gt;</td></tr><tr><td>1X DMEM: גלוקוז גבוה</td><td>Invitrogen/Gibco</td><td>11960-069</td><td></td></tr><tr><td>20% סרום עגלe עוברי (Fetal Bovine Serum)</td><td>Invitrogen/Gibco</td><td>26140-079</td><td></td></tr><tr><td>1X L-גלוטמין</td><td>Invitrogen/Gibco</td><td>25030-164</td><td></td></tr><tr><td>1X MEM חומצות אמינו שאינן חיוניות </td><td>Invitrogen/Gibco</td><td>11140-076</td><td></td></tr><tr><td>1X פניצילין/סטרפטומייצין</td><td>Invitrogen/Gibco</td><td>15140-163</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">&lt;p class=&quot;שלב JoVE&quot;&gt;&lt;חזק&gt;טבלה B. ריאגנטים.&lt;/strong&gt; &lt;/p&gt;</td></tr></tbody></table>

תרבות explant עור אגרוף ביופסיה לגזירה של fibroblasts אדם היסודי

Skin Punch Biopsy Explant Culture for Derivation of Primary Human Fibroblasts

רקמות ושורות תאים שמקורם אדם עם מחלה הן מקורות אידיאליים ללמוד פנוטיפים סלולריים הקשורות למחלה. fibroblasts מטופל שמקורם בפרוטוקול זה היה בשימוש בהצלחה בנטילה של תאי גזע pluripotent מושרה למחלת מודל 1. קטעים ראשונים של fibroblasts אלה יכולים לשמש גם עבור מבחני תפקודיים מבוססי תאים ללמוד מסלולים ספציפיים, מנגנוני מחלה 2 ולאחר מכן סמים גישות הקרנה. היתרון של הפרוטוקול שהוצג על הליכים אנזימטיות הוא 1) שחזור של הטכניקה מכמויות קטנות של רקמות הנגזרות מחולים מבוגרים, חולים כגון החולים במחלת פרקינסון, 2) גישה טכנית הפשוט על מתודולוגיות מאתגרות יותר באמצעות טיפולים אנזימטיות, ו3 ) שיקול הזמן: פרוטוקול זה לוקח 15-20 דקות ויכול להתבצע מייד לאחר הגעתו ביופסיה. טיפולים האנזימטית יכולים לקחת עד 4 שעות ויש לי את הבעיות שלoverdigestion, הפחתה של כדאיות תא ולאחר מכן קובץ מצורף של תאים, כאשר לא מטופל כראוי. פרוטוקול זה מתאר את הנתיחה והכנת עור אנושי 4 מ&quot;מ ביופסיה לגזירה של תרבות פיברובלסטים ויש לו אחוזי הצלחה גבוהה מאוד וזה חשוב בעת ההתמודדות עם דגימות רקמת מטופל הנגזרות. בתרבות זו, קרטינוציטים נודדים מרקמת הביופסיה בתוך השבוע הראשון לאחר הכנה. Fibroblasts להופיע 7-10 ימים לאחר התוצאה הראשונה של קרטינוציטים. תקשורת גלוקוז גבוהה DMEM בתוספת 20% FBS מעדיפה את הצמיחה של fibroblasts על קרטינוציטים וfibroblasts תהיה לגדול יותר את הקרטינוציטים. לאחר 2 קטעים כבר דילול את הקרטינוציטים וכתוצאה מתרבויות פיברובלסטים הומוגניות יחסית, המבטאת את סמן SERPINH1 פיברובלסטים (HSP-47). השימוש בגישה זו, ניתן לגזור 15-20 מיליון fibroblasts בשבועות 4-8 לבנקאות סלולרי. נתיחת העור לוקחת בערך 15-20 דקות, ולאחר מכן תאים מנוטרים פעם ביוםמתחת למיקרוסקופ, והתקשורת משתנה כל 2-3 ימים לאחר התקשרות ותולדה של תאים.

קרטינוציטים צומחים מתוך יצירות הביופסיה בהקדם 48 שעות לאחר ניתוח. תולדת fibroblasts הראשונה ניתן לראות כשבוע לאחר עיבוד. ברגע שהגיעו לבארות confluency, fibroblasts הוא passaged לשני קטעים נוספים כדי להגיע לשלוש צלוחיות 150 ס&quot;מ (T150) ותאי cryopreserved. אנו מייצרים בשיטה זו 15-20 מיליון תאים. את fibroblasts הם חיוביים עבור אנטי SERPINH1 (הידוע גם בHSP-47) (איור 1), שהוא קולגן ספציפי מלווה מולקולרי מקומיים בreticulum endoplasmic. HSP47 ממלא תפקיד חיוני בסינתזת...

פרוטוקול תרבות explant פיברובלסטים מביופסיות אגרוף עור אנושי הוא דרך פשוטה וחזקה מבחינה טכנית להפיק תאי עור בתוך 4-8 שבועות לבנקאות של כ 15-20 מיליון תאים במספר מעבר נמוך.

רקמות וקווי תאים המופקים מאדם החולה במחלה הם מקורות אידיאליים לחקר פנוטיפים תאיים הקשורים למחלה. פיברובלסטים המופקים מחולים...

שלום. ברוכים הבאים למדריך הווידאו על עיבוד ביופסיית עור. התחילו בהצבת החומרים הדרושים במCב מ कल्चर (tissue culture hood). יש לרסס ב-70% ethanol ולנגב את כל החפצים הנכנסים למב. סמנו את הפיתה עם מספר ה-PI, התאריך, ראשי תיבות וסוג המצע; הוסיפו מילוליטר אחד של 0.1% gelatin לכל דופן, וסובבו את הפיתה כדי להבטיח שהתחתית מצופה ב-gelatin.השאירו את הפלטה למשך שעה לפני השימוש. השלב הראשון הוא העברת הביופסיה מהמבחנה לצלחית החיתוך. צלחית חיתוך היא מכסה של פטרי 10 סנטימטר שעליו תבוצע הדיסקציה של הביופסיה.הוסף 1.5 milliliter של DMEM 20%FBS למרכז צלחת החיתוך. פזר את המצע החוצה מהמרכז. כאן ניתן לראות את הביופסיה של העור.השלב הבא הוא להעביר את הביופסיה מהמבחנה למרכז צלחת החיתוך. בעזרת פינצטה סטרילית, מקמו את פיסת הביופסיה מהעור במרכז. היו זהירים בעת ביצוע פעולה זו, שכן שמירה על סטריליות היא חיונית.כסו את צלחת החיתוך והעבירו אותה למיקרוסקופ הדיסקציה בתוך מ 빠르게 זרימה למינרית (laminar flow hood). השלב הבא הוא לחתוך את הביופסיה ל-12 עד 18 חלקים שווים בגודלם. היזהרו בעת השימוש בסקלפלים.כאשר תהיו מוכנים, חשפו את הביופסיה. השתמשו בסקלפל אחד כדי לקבע את הביופסיה. הזיזו את הסקלפל השני למעלה ולמטה בתנועת חיתוך חד-כיוונית.חלק את הביופסיה לשניים. המשך לחלק כל חלק לשניים עד לקבלת 12 עד 18 חלקים. הגודל האידיאלי ש

skin-punch-biopsy-explant-culture-for-derivation-primary-human

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

Fibroblasts מחולים שנשאו מוטציות בגני פרקינסון גורמי מחלות לייצג...

השימוש בפיברובלסטים אנושיים ראשוניים לניטור פנוטיפים מיטוכונדריאלי בתחום מחלת פרקינסון

אנו מדווחים על שיטה לבודד מבשר עור נגזרות נאיביים multipotent (SKP) תאים פיברובלסטים מתרבויות האנושיות העיקריות. אנו מראים כי SKPs אלה נגזרים מתרבויות פיברובלסטים חולקים מאפיינים של תאי גזע דומים לאלה שנגזרים ישירות מביופסיות עור אדם. תאים אלה מבטאים את סמן הרכס העצבי, nestin, בנוסף לסמני multipotent כגון Oct4 וNanog.

בידוד תאי גזע בוגרים נאיבי מתרבויות פיברובלסטים אנושיות הראשוניות

דור של תאי גזע pluripotent מושרה מספק סיכויים מרתקים לגזירה של השתלות אוטולוגית. עם זאת, ההתקדמות במדינת pluripotent מחדש בידול מייגע עדיין מעכבת תרגום קליני. כאן אנו מתארים את הגזירה של fibroblasts אדם הבוגר וההמרה הישירה שלהם לתאים עצביים מושרה ובידול שלאחר מכן לשושלות עצביות.

גזירה של fibroblasts אדם הבוגר וההמרה ישירה שלהם לתאים להרחבה עצבי אב

גזירה חזקים של האדם המושרה האדם pluripotent גזע (hiPS) תאים הושג באמצעות שילוב של וירוס Sendai וירוס (Sev) וקטור בתיווך תיכנות של fibroblasts עורי. HiPS התא תחזוקה התרחבות המשוב בוצע באמצעות xeno חופשי ו מוגדר תנאי תרבות כימית עם laminin רקומביננטי אנושי 521 (LN-521) מטריקס Essential E8 (E8) בינוני.

אינטגרציה חופשית של גזירה אנושית של תאים גזעיים Pluripotent באמצעות Laminin 521 מטריקס

מתכנות התא מחייב הקדמה של גנים מרכזיים, אשר לווסת ולתחזק את מצב התאים pluriפוטנטי. הפרוטוקול המתואר מאפשר היווצרות של תאי גזע מושרה pluripotent iPSCs) מושבות של האדם המעטפת הגוף ללא ויראלי/שילוב שיטות אך באמצעות RNAs שאינו משתנה (ננומטר-RNAs) בשילוב עם גורמי התחמקות החיסון הפחתת מנגנוני ההגנה הסלולריים.

בידוד של האדם למבוגרים פיברוכדורים מעור הבטן הדור של המושרה בתאי גזע Pluriפוטנטי באמצעות שיטה שאינה משלבת

פרוטוקול זה מתאר את ההמרה של פיברובלסטים בעור לתוך myoblasts ואת הבידול שלהם myotubes. קווי התאים נגזרים מחולים עם הפרעות נוירומוסקולריות וניתן להשתמש בהם כדי לחקור מנגנונים פתולוגיים ולבדוק אסטרטגיות טיפוליות.

תכנות ישיר של פיברובלסטים אנושיים למיובלסטים כדי לחקור טיפולים להפרעות נוירומוסקולריות

מאמר זה מתאר שיטה מבוססת תרבית אקספלנט לבידוד וגידול של תאי שריר חלקים ראשוניים של אבי העורקים האנושיים הספציפיים לחולה ופיברובלסטים עוריים. יתר על כן, מוצגת שיטה חדשנית למדידת התכווצות תאים וניתוח לאחר מכן, אשר ניתן להשתמש בה כדי לחקור הבדלים ספציפיים לחולה בתאים אלה.

בידוד של תאי שריר חלק אבי העורקים העיקריים הספציפיים למטופל ומדידות כיווץ חצי-קוונטיטיביות בזמן אמת במבחנה

המחקר של ריפוי פצעים הקשורים לפגיעה בשרירים-שלד דורש לעתים קרובות הערכה של אינטראקציות במבחנה בין תאי שוואן (SCs), קרטינוציטים ופיברובלסטים. פרוטוקול זה מתאר את הבידוד, התרבות והאפיון של תאים ראשוניים אלה מהעורלה האנושית.

בידוד, תרבית ואפיון של תאי שוואן ראשוניים, קרטינוציטים ופיברובלסטים מעורלה אנושית

מחקר זה מתאר פרוטוקול אופטימלי לביסוס פיברובלסטים ראשוניים מרקמות קלואידיות שיכולים לספק פיברובלסטים טהורים ויציבים ביעילות ובהתמדה.

בידוד, תרבית ואפיון פיברובלסטים עוריים ראשוניים מרקמת קלואיד אנושית

כתב יד זה מתאר פרוטוקול דו-שלבי ליצירת פודוציטים ספציפיים למטופל מפיברובלסטים עוריים באמצעות תכנות מחדש אפיזומלי לתאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם (hiPSCs) ולאחר מכן התמיינות לפודוציטים.

יצירת פודוציטים שמקורם במטופל מביופסיות עור

למדו תרבית explant עור אגרוף ביופסיה לגזירת fibroblasts אדם היסודי. שיטה זו מאפשרת אחסון של 15-20 מיליון תאים במספר מעברים נמוך בתוך 4-8 שבועות למחקר ביולוגי.

תרבות explant עור אגרוף ביופסיה לגזירה של fibroblasts אדם היסודי

גלה סרטונים נוספים