Name: פרוטוקול ליפרתרמיה הארוכה משך כל גוף בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-08-25T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 10 s
Description: למד פרוטוקול ליפרתרמיה ארוכת טווח בכל הגוף בעכברים לחקירת תגובות חיסוניות ומנגנוני חום. שיטה זו מאפשרת לחוקרים לחקור השפעות פיזיולוגיות של חום במודל בעלי חיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. אתיקה של בעלי חיים לפני ביצוע היפרתרמיה משך זמן הארוכה על עכברים לוודא שההליך אושר על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים ועדה ושימוש. כל ההליכים שנדונו במאמר זה ושמוצגים בוידאו הנלווה, אושרו על ידי ועדת אתיקת בעלי החיים המוסדית של המכון הלאומי לאימונולוגיה. 2. היפרתרמיה הבנה היפרתרמיה כל גוף (WBH) מועברת על ידי נחת את החיות בכלובי prewarmed אשר ממוקמים בחממה נשמרה ב39.5 ° C. במהלך סטנדרטיזציה של פרוטוקול, חיישן טמפרטורה שמושתל בעכברים וטמפרטורת הגוף שלהם הייתה פיקוח בתנאי ניסוי שונים. היה נראה כי בעת ביצוע את החיות בסביבה מחוממת, הטמפרטורה שלהם עלו בהדרגה מ 37 מעלות צלזיוס לעד 42 ° C מעל משך 100 דקות (איור 1). הדואר כתוצאה &quot;ספייק&quot; בטמפרטורה הוא מסקרן כמו טמפרטורת הגוף הפנימית נורתה אף גבוהה יותר מטמפרטורת הסביבה החיצונית. כאשר טמפרטורת הגוף עולה על 40 מעלות צלזיוס, החיה היית להראות סימנים של לחץ והתייבשות כגון הרטבה סביב החוטם. הגדל את טמפרטורת הגוף מעבר ל40 ° C, יוביל להרטבה ומתח בלתי הפיך ואף למוות של בעלי חיים עקב עומס חום. לכן חשוב למנוע את קוצי הטמפרטורה במהלך הקורס של היפרתרמיה. תופעה זו של קוצים בטמפרטורה גבוה קשורה ליפראקטיביות הפיסית של חיה במהלך חשיפת היפרתרמיה. קוצי טמפרטורה דומים נצפו גם על ידי קבוצות אחרות והיו קשורים עם היפראקטיביות הפיסית של החיה על שהוצג לסביבה שטמפרטורות גבוהות יותר 10. בפרוטוקול שלנו, עכברים משותקים במהלך חשיפת היפרתרמיה. כמושמוצג באיור 2, קיבוע של חיה מונע את הקוצים בטמפרטורה. יש לנו להשתמש 8-12 שבועות עכברים זקנים BALB / Cj להוכחה בפרוטוקול זה. הפרוטוקול אינו מוגבל לסוג מסוים / זן של העכברים. 3. מתכונן לניסוי 3.1 חממה ניסוי זה יכול להתבצע בCO 2 חממה רגילה כמו שיש להם שליטה בטמפרטורה טובה. ניתק אספקת גז CO 2 ולהסיר מגש מחזיק מים של CO 2 החממה. בחלק מהדגמים של חממות ניתן לכבות את בקר CO 2. סידור מדפים בחממה, כך שכלוב עכברים יכול להיות ממוקם במקום נוח בפנים. הגדר את הטמפרטורה בחממה ב39.5 מעלות צלזיוס 3.2 כלובים בדרך כלל, הניסוי מתבצע היפרתרמיה על 4 עכברים בכל פעם. שני כלובים נדרשים; עלהדואר ממוקם בתוך החממה והשנייה ממוקם מחוץ בטמפרטורת חדר. מצעים של כלובים הוא נמנע, כמו הכתמים של מצעים רטובים הפכו עם זמן וכתוצאה מכך הטמפרטורה לא אחידה בתוך הכלוב. הכלוב צריך להיות מחוץ כופתות מזון ובקבוקי מים. 3.3 עכברי צינורות Immobilization במהלך 4 המחזורים הראשונים של עכברי היפרתרמיה הם משותק בצינורות מחוררים. צינורות Immobilization אלה יכולים להיות עשויים מהצינורות 50 &#39;צנטריפוגות&#39; המ&quot;ל על ידי 3 מ&quot;מ חורי פירסינג בכל רחבי יידרשו גופו וארבעה מצינורות כאלה. 50 מיליליטר השפופרת נוחה יכולה לשתק עכברי BALB / Cj שישנים יותר מ 8 שבועות. צינורות בגדלים מתאימים עשויים להידרש לקצת מתח שונה מרגיל של עכברים או לעכברים שהם מאוד צעירים או מבוגרים יותר מ -50 שבועות. צינורות קיבוע מקום וכלוב בתוך החממה נשמרו ב39.5 ° C. חכה לפחות 2 שעות, כך שכלוב ואניצינורות mmobilization להשיג את הטמפרטורה בחממה. 4. המחזור ראשון של היפרתרמיה עכברים עלולים לחוות התייבשות במהלך חשיפת היפרתרמיה. לכן לפני תחילת הניסוי, לנהל intraperitoneally המלוח נורמלי מ&quot;ל 0.5 לכל עכבר. השתמש במחט 26 G עם מזרק 1 מ&quot;ל. מהר להוציא את הכלוב הונח בחממה, מקום בעל חיים אחד בכל צינורות וקיבוע הנח חזרה כלוב בחממה. רשום את הזמן. זה חיוני כדי לשמור על הכלוב באותו המקום בחממה בכל פעם. לאחר 90 דקות, מוציא את הכלוב מהחממה. לשחרר בעלי חיים מצינורות Immobilization ולמקם אותם בכלוב בטמפרטורה נורמלית עם גישה נוחה למזון ומים. הנח צינורות Immobilization ריקים בחזרה בחממה. לאחר 15 דקות, המחזור השני של היפרתרמיה מופעל על ידי אספקת 0.intraperitoneally 5 מ&quot;ל מי מלח לכל עכבר. אז הם משותקים ב50 צינורות מחוררים Immobilization מ&quot;ל והושמו באינקובטור. 5. מחזורי היפרתרמיה הבאים במשך 4 מחזורים הראשונים, זה חיוני כדי לשתק עכברים במהלך חשיפת היפרתרמיה ולשני המחזורים הראשונים, הזרקה מי מלח ניתן לפני תחילת תקופת היפרתרמיה. לאחר המחזורים אלה של היפרתרמיה ואחריו שאר סקרים, עכברים לקבל להתאקלם ואינם הופכים להיפראקטיביים במהלך חשיפת היפרתרמיה. ההזרקה של מי מלח intraperitoneal לא יכולה להיות הכרחית אם עכברים בקלות לקחת את מזון ומים בזמן המנוחה. 6. לאחר כל המחזורים הושלמו, השלב הסופי הוא לבחון את בעלי החיים לא צריך להיות כל מוות במהלך מחזורי היפרתרמיה. לכל בעל חיים יש להיות התבוננו בקפידה ב1כמה מחזורים. מהירות לחפש כל הרטבה סביב החוטם. תופעה זו היא חתימתו של התייבשות. עכברים עם סימפטומים אלה באופן מיידי יש לתת ip 0.5 מ&quot;ל סליין נורמלי ומנוחה בטמפרטורת חדר. רוב העכברים המשותקים לא דורשים כל טיפול נוסף וישא את הלחץ בהצלחה היפרתרמיה. לאחר שסיים את המחזורים נדרשים, בעלי חיים עשויים להיראות חלשים ומיובשים אבל הם יתאוששו במהירות תוך מספר שעות. <img src="/files/ftp_upload/3801/3801fig1.jpg" alt="איור 1" /> איור 1. וריאציה של טמפרטורת גוף הליבה של עכברים כאשר הכלוב הושם באינקובטור ב39.5 ° C. לאחר 90 דקות הכלוב הוסר מהחממה והניח במהירות של 25 ° C. עיגולים אדומים מצביעים על קוצים בטמפרטורה גבוהה. <img src="/files/ftp_upload/3801/3801fig2.jpg" alt="איור 2" /> איור 2. וריאציה של temperatu גוף הליבהמחדש של עכברים חסרי יכולת תנועה במהלך מחזורי היפרתרמיה. לאחר לשתק את החיה, קוצי טמפרטורות גבוהים לא להתבונן בי הכלוב הונח ב39.5 מעלות צלזיוס

<ol><li>Braude, A. I., Beck, J., Zalesky, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Febrile+response+to+bacterial+pyrogens+in+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Febrile response to bacterial pyrogens in leukemia.</a> Blood. 16, 1279(1960).</li>
<li>Dovern, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperthermic+intraperitoneal+chemotherapy+added+to+the+treatment+of+ovarian+cancer.+A+review+of+achieved+results+and+complications%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Gynaecol.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Hyperthermic intraperitoneal chemotherapy added to the treatment of ovarian cancer. A review of achieved results and complications.</a> Eur. J. Gynaecol. Oncol. 31, 256(2010).</li>
<li>Gaworek, J., Mayer, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+whole+body+hyperthermia+in+oncology%3A+fatal+heat+for+tumor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Pflege.+Z%22%5BJournal%5D)">Systemic whole body hyperthermia in oncology: fatal heat for tumor cells.</a> Pflege. Z. 56, 15(2003).</li>
<li>Hegewisch-Becker, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+whole+body+hyperthermia+%2841.8+degrees+C%29+on+the+frequency+of+tumor+cells+in+the+peripheral+blood+of+patients+with+advanced+malignancies%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of whole body hyperthermia (41.8 degrees C) on the frequency of tumor cells in the peripheral blood of patients with advanced malignancies.</a> Clin. Cancer Res. 9, 2079( ).</li>
<li>Jia, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+B16+murine+melanoma+metastasis+and+enhancement+of+immunity+by+fever-range+whole+body+hyperthermia%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Inhibition of B16 murine melanoma metastasis and enhancement of immunity by fever-range whole body hyperthermia.</a> Int. J. Hyperthermia. 27, 275(2011).</li>
<li>Maluta, S., Dall'oglio, S., Nadalini, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+for+intermediate+and+high-risk+prostate+cancer%3A+controversial+issues+and+the+role+of+hyperthermia%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Treatment for intermediate and high-risk prostate cancer: controversial issues and the role of hyperthermia.</a> Int. J. Hyperthermia. 26, 765(2010).</li>
<li>Moyer, H. R., Delman, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+hyperthermia+in+optimizing+tumor+response+to+regional+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">The role of hyperthermia in optimizing tumor response to regional therapy.</a> Int. J. Hyperthermia. 24, 251(2008).</li>
<li>Muthana, M., Multhoff, G., Pockley, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumour+infiltrating+host+cells+and+their+significance+for+hyperthermia%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Tumour infiltrating host cells and their significance for hyperthermia.</a> Int. J. Hyperthermia. 26, 247(2010).</li>
<li>Ostberg, J. R., Repasky, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+effects+of+two+different+whole+body+hyperthermia+protocols+on+the+distribution+of+murine+leukocyte+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Comparison of the effects of two different whole body hyperthermia protocols on the distribution of murine leukocyte populations.</a> Int. J. Hyperthermia. 16, 29(2000).</li>
<li>Pritchard, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocols+for+simulating+the+thermal+component+of+fever%3A+preclinical+and+clinical+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Protocols for simulating the thermal component of fever: preclinical and clinical experience.</a> Methods. 32, 54(2004).</li>
<li>Repasky, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+mild+whole-body+hyperthermia+protocols+using+human+breast%2C+ovarian%2C+and+colon+tumors+grown+in+severe+combined+immunodeficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Dis.+Obstet.+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Characterization of mild whole-body hyperthermia protocols using human breast, ovarian, and colon tumors grown in severe combined immunodeficient mice.</a> Infect. Dis. Obstet. Gynecol. 7, 19(1999).</li>
<li>Willnow, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+otherwise+incurable+tumor+diseases+in+childhood+using+whole-body+hyperthermia+and+chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Dtsch.+Med.+Wochenschr%22%5BJournal%5D)">Treatment of otherwise incurable tumor diseases in childhood using whole-body hyperthermia and chemotherapy.</a> Dtsch. Med. Wochenschr. 114, 208(1989).</li>
</ol>

אין לנו מה למסור.

<html> כבר ב 5000 לפנה&quot;ס, רופאים מצריים לטפל גידולים עם חום. היוונים הכירו בערכו של חום בחלק מהטיפולים רפואיים. את הטקסטים העתיקים ביותר של תורת משה אזכור מעיינות חמות (בראשית 36:24) כדי להעלות את טמפרטורת גוף טיפולי. הטכניקות הקודמות הועסקו או השימוש בתמציות של חיידקי pyrogenic לאינדוקציה של חום או אמבטיות מים חמות לזירוז של היפרתרמיה 1. אולם אף לא אחד מהגישות האלה יכולה להיות מנוטר בקלות או בשליט...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Thermistor </td><td> RS רכיבים </td><td> 528-8558 </td><td></td></tr><tr><td> CO 2 חממה </td><td> Heraeus </td><td> B5060 EK-CO2 </td><td></td></tr><tr><td> כלובי עכברים </td><td> אזרח תעשיות בע&quot;מ. </td><td></td><td> הסוג B 365X207X190 סנטימטר </td></tr><tr><td> מזון לבעלי חיים </td><td> Provimi הודו </td><td></td><td></td></tr><tr><td> בקבוק מים לכלוב </td><td> ספק מקומי </td><td></td><td> בקבוק זכוכית </td></tr><tr><td> מלחם </td><td> Solderon, הודו </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 50 צינורות צנטריפוגות מ&quot;ל </td><td> BD Biosciences </td><td> 352070 </td><td></td></tr><tr><td> שעון עצר </td><td> ספק מקומי </td><td></td><td></td></tr><tr><td> מזרק 1 מ&quot;ל עם מחט 26G </td><td> BD Biosciences </td><td> 309602 </td><td></td></tr><tr><td> מלוח </td><td> ספק מקומי </td><td></td><td></td></tr></table>

פרוטוקול ליפרתרמיה הארוכה משך כל גוף בעכברים

Protocol for Long Duration Whole Body Hyperthermia in Mice

היפרתרמיה היא מונח כללי המשמש להגדרת העלייה בחום גוף גבוה מרגיל. הוא משמש לעתים קרובות כדי לתאר את חום הגוף המוגבר שנצפה בחום. השימוש בהיפרתרמיה כאדג&#39;ובנט התפתח הליך מבטיח לנסיגה של גידול בתחום הביולוגיה של הסרטן. לצורך כך, הדרישה החשובה ביותר היא שתהיה לי פרוטוקולי חימום אמינים ואחידים. פתחנו פרוטוקול ליפרתרמיה (כל גוף) בעכברים. בפרוטוקול זה, בעלי חיים נחשפים למחזורים של היפרתרמיה ל90 דקות ואחרי תקופת מנוחה של 15 דקות. במהלך תקופה זו עכברים יש גישה קלה למזון ומים. קוצי טמפרטורת גוף גבוהים בעכברים במהלך כמה מחזורי חשיפת היפרתרמיה הראשונים מנעו ידי עצירת בעלי החיים. בנוסף, מי מלח רגיל הוא מנוהל בכמה מחזורים הראשונים כדי למזער את ההשפעות של התייבשות. פרוטוקול זה יכול לדמות חום כמו תנאים בעכברים עד 12-24 שעות. יש לנושימוש 8-12 שבועות עכברים זקנים BALB / Cj נשיים להפגין את הפרוטוקול.

מאמר זה מתאר פרוטוקול ליפרתרמיה כל גוף בעכברים שיכולים לעורר חום כמו תנאים עד 12-24 שעות.

היפרתרמיה (Hyperthermia) היא מונח כללי המשמש להגדרת עלייה בטמפרטורת הליבה של הגוף מעל הרמה הנורמלית. לעיתים קרובות משתמשים במונח זה כדי לתאר עלייה בטמפרטורת הליבה של הגוף...

protocol-for-long-duration-whole-body-hyperthermia-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

בסרטון זה אנו מתארים פרוטוקול שלב אחר שלב לחקר מכת חום במאמץ (EHS) במודל עכבר.

מודל עכבר שבץ חום במאמץ: פרוטוקול לחקר מנגנונים העומדים בבסיס מכת חום במאמץ

סרטון זה מדגים את ההליך לגרימת התקפים הנגרמים מחום בעכבר טרנסגני עם מוטציות גנטיות הקשורות לאפילפסיה על ידי העלאה הדרגתית של טמפרטורת הגוף בתא מבוקר. פרוטוקול זה משמש לחקר מנגנוני התקפים וטיפולים פוטנציאליים לאפילפסיה.

הפעלה וניטור של התקפים הנגרמים על ידי חום במודל עכבר טרנסגני

מוצג כאן פרוטוקול לייצור מיקרו-פגזים עם ננו-חלקיקים (NSMs) המופגזים בתחמוצת ברזל באמצעות הרכבה עצמית, סינרגיה של תגובה מגנטית, אקוסטית ואופטית בפלטפורמה ננו-תרפיוטית אחת לטיפול בהיפרתרמיה מגנטית ובשילוב פוטותרמי לסרטן.

מיקרו-גיבלים מגנטיים, אקוסטיים ואופטיים-משולשים-רספונסיביים לטיפול בסרטן משולב של פוטוטותרמיה

מאמר זה מתאר שתי שיטות של אינדוקציה היפותרמיה לכל הגוף קצר בחולדות. שיטת האינדוקציה הראשונה, המהירה, משתמשת בקירור פעיל באמצעות מאווררים ותרסיס אתנול לירידה מהירה בטמפרטורה. השיטה השנייה היא שיטת קירור הדרגתית. זה מושג באמצעות השילוב של הרדמה איזופלוריין והפחתת הגדרות הטמפרטורה על מחצלת החום ההומיאותרמית. התוצאה היא ירידה הדרגתית בטמפרטורת הגוף הליבה ללא שימוש במכשירי קירור...

אינדוקציה היפותרמיה משך זמן קצר בחולדות באמצעות מודלים למחקרים הבוחנים רלוונטיות קלינית ומנגנונים

הפרוטוקול מתאר התפתחות של מודל סטנדרטי, חוזר, פרה-אקליני של מכת חום מאמץ (EHS) בעכברים ללא גירויים חיצוניים שליליים כגון הלם חשמלי. המודל מהווה פלטפורמה ללימודים מכאניסטיים, מונעים וטיפוליים.

מודל פרה-אקליני של מכת חום מאמץ בעכברים

מטרת השיטה היא לסנן היפרתרמיה או התקפים הנגרמים בחום במודלים של עכבר. הפרוטוקול מתאר את השימוש בתא שנבנה בהתאמה אישית עם ניטור רציף של טמפרטורת הגוף כדי לקבוע אם טמפרטורת הגוף הגבוהה מובילה להתקפים.

מסך התנהגותי להתקפים הנגרמים על ידי חום במודלים של עכבר של אפילפסיה

עכברים וחולדות מושתלים בניתוח במשדרי טמפרטורה מרוחקים ולאחר מכן מורגלים לסביבת הבדיקה ולהליך. שינויים בטמפרטורת השרירים נמדדים בתגובה לגירויים פרמקולוגיים או קונטקסטואליים בכלוב הביתי או במהלך פעילות גופנית שנקבעה (כלומר, הליכה על הליכון במהירות קבועה).

מדידת תרמוגנזה של שרירי השלד בעכברים ובחולדות

מוצג כאן פרוטוקול לשימוש בהיפרתרמיה מבוקרת, הנוצרת על ידי אולטרסאונד ממוקד מונחה תהודה מגנטית בעוצמה גבוהה, כדי להפעיל שחרור תרופות מליפוזומים רגישים לטמפרטורה במודל עכבר rhabdomyoscoma.

אולטרסאונד ממוקד מונחה תהודה מגנטית בעוצמה גבוהה שנוצר היפרתרמיה: שיטת טיפול אפשרית במודל מורין רבדומיוסרקומה

פרוטוקול זה מציג טכניקות ומתודולוגיה הנחוצות לטיפול היפרתרמי ממוקד במודלים של גידולים מוצקים. הגישה ממנפת את ההמרה הפוטותרמית של אור אינפרא אדום קרוב על ידי ננו-מוטות זהב המוזרקים תוך גידול כדי לגרום לחימום מקומי בתוך מיקרו-סביבת הגידול.

גרימת היפרתרמיה קלה ממוקדת במודלים של גידולי עכברים באמצעות המרה פוטותרמית של אור קרוב לאינפרא אדום על ידי ננו-מוטות זהב תוך-גידוליים

Parabiotic הצטרפותו של שני אורגניזמים מוביל להתפתחותה של מערכת דם משותפת. בפרוטוקול זה, אנו מתארים את הצעדים כירורגית כדי ליצור חיבור בין parabiotic עכבר wild-type ועכבר-GFP-לבטא מכונן.

Parabiosis בעכברים: פרוטוקול מפורט

למד פרוטוקול ליפרתרמיה ארוכת טווח בכל הגוף בעכברים לחקירת תגובות חיסוניות ומנגנוני חום. שיטה זו מאפשרת לחוקרים לחקור השפעות פיזיולוגיות של חום במודל בעלי חיים.

פרוטוקול ליפרתרמיה הארוכה משך כל גוף בעכברים

גלה סרטונים נוספים