Name: דגם Murine של אימון שרירים באמצעות גירוי חשמלי neuromuscular (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-09T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 24 s
Description: למד מודל עכברים לאימון שרירים באמצעות גירוי חשמלי נוירומוסקולרי. השיטה מדגימה התאמת אלקטרודה קלינית לשימוש בעכברים ומאפשרת חקר פיזיולוגיית שריר ופיתוח פרוטוקולים שיקומיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו מומנה על ידי המכון הלאומי לבריאות בארה&quot;ב (NIH) K12 למטפלים, מקיף הזדמנויות פיזיותרפיה וריפוי בעיסוק באימון מחקר שיקום (K12 HD055931), הקרן פיזיותרפיה קלוד פיטסבורג ד &#39;פלפל ישן יותר אמריקאים העצמאות מרכז (p30 AG024827 ).

1. אלקטרודה הכנה <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים 1 ס&quot;מ x 1 ס&quot;מ בחלק של המעגל וקטור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לייצב 2 סיכות wirewrap באמצעות אחיזה סגן, עם סיכות במרווחים של כ 3.5 מ&quot;מ זה מזה. את הקצוות מפוצלת של הפינים יש פונה כלפי מעלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכופף wirewrap סיכות בזווית 90 מעלות, כ באמצע הדרך לאורך שלהם, באמצעות צבת נידלנוז. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשוף את חוטי נחושת של מחברים, כ 7 ס&quot;מ מחיבור עופרת, על ידי הפשטת בידוד תיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הלחמה אחת חוטי נחושת עד הסוף מפוצלת של אחד הפינים wirewrap. חזור על שלב ההלחמה של סיכה wirewrap אחר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משוך לכווץ צינורות על החיבור מולחם בין חוטי נחושת וסיכות זהב כדי לבודד ולייצב. מחממים את צינורות באמצעות קצה הלחמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את הטיפים unsoldered של wirewrap סיכות לתוך פתחים סמוכים של המעגל קרש החיתוך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להבטיח את הסיכות wirewrap מקבילים זה לזה רחובאיכס באמצעות קרש החיתוך כך את הטיפים נמצאים באותו מרחק כאשר הניח את הלוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שבץ קצוות מולחמים של סיכות אפוקסי ברור. אפשר אפוקסי לרפא כ 10 דקות, או עד לייבוש מלא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על היישום של אפוקסי עד סיכות המעגלים וקטור מוטבעים לחלוטין על מנת לספק שלמות מבנית והקלה על מתח החוטים מובילים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חול למטה אפוקסי באמצעות קובץ מתכת לחשוף את קצות הפינים זהב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש מודד על מנת להבטיח את שתי הפניות לא לקצר חשמלי וכי החוטים מובילים יש המשכיות ראויה </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את האלקטרודה מוביל מהמכשיר NMES למחבר 2-way נקבה חוט (כבל פומונה תיקון). </li></ul> 2. בעלי חיים הכנה <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים מורדמים באמצעות שאיפת באמצעות isofluorane 2% (Abbott Laboratories, צפון שיקגו, אילינוי) ב 100 הגז O 2%. בעל חיים צריך להישאר בהרדמה ברחבי tהוא NMES הפגישה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני שמתחילים לבצע פרוטוקול NMES קמצוץ הבוהן על מנת להבטיח כי בעל החיים הוא מורדם לחלוטין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים צריך להיבדק באופן קבוע על מנת להבטיח את רמת ההרדמה היא מספיק בתגובה לגירוי. הרדמה יש להתאים לפי הצורך. תנועה חוץ מזה של הרגל מגורה, שינויים עומק הנשימה, צבע ריריות צריכים להיבדק באופן קבוע כדי לפקח על עומק ההרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את החיה שכיבה לרוחב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל סיכה עיניים לעיניים, כדי למנוע התייבשות הקרנית במהלך ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את האזור hindlimb לקבל טיפול, ולנגב עם אלכוהול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נגב את האלקטרודה עם אקונומיקה 3%, ולאחר מכן לשטוף עם מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למרוח שכבה של מנהלים ג&#39;ל על האתר שבו האלקטרודה יחולו. להחיל מחדש לפי הצורך בכל פרוטוקול NMES כדי להבטיח זרימת הנוכחי בין האלקטרודה ואת העור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חום מנורת Or שמיכה במחזור המים יש להשתמש כדי לשמור על נורמליות בגוף טווחי הליבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הערה: כל הנהלים נבדקו ואושרו על ידי טיפול אוניברסיטת פיטסבורג בעלי חיים מוסדי ועדת שימוש והופיע PHS מובטח ויש AAALAC int. תוכנית מוסמך ומתקנים. </li></ul> 3. גירוי <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אלקטרודה מיקום: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על גירוי של השרירים תא הקדמי, כולל הקדמי tibialis ואת השרירים longus extensor digitorum, למקם את האלקטרודה פני השטח באופן ישיר על העצב שוקיתי עמוק של בעל החיים, שהוא סניף דיסטלי את העצב peroneal משותף, והוא ממוקם קדמית רק כדי שוקיתי הראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על גירוי של השרירים תא הקדמי, מיקום האלקטרודה הוא אישר כאשר גירוי מעורר dorsiflexion הקרסול מלא והסיומת מלא הספרות. מצד שני, dorsiflexion, בהעדר סיומת ספרות עולה כי רק אנטה tibialisשרירים rior נמצא מגורה. תגובה כזו כויץ ממוקד יכול להיות רצוי, בהתאם לעיצוב המחקר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התכווצות השריר מחולק 2 שלבים: שלב של גירוי חינם מרגש, קונצנטרי, אשר מתרחשת במהלך הראשוני ~ 0.5 שניות. בשלב ראשון זה, כפה עובר ממצב מנוחה כדי dorsiflexion מירבית סיומת ספרות. השלב השני של גירוי הוא כיווץ איזומטרי שעברנו dorsiflexion מקצה טווח סיומת ספרות. </li></ul></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גירוי פרמטרים: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מודל זה מנצל NMES 300 PV Empi מכשיר תכליתי בחשמל, המספק 2 ערוצי NMES קונבנציונאלי (ראו טבלה). לצורך מודל זה, רק ערוץ 1 משמש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרמטרים המשמשים כוללים צורת גל סימטרי, משך הדופק של 150 μs ואת תדירות 50Hz. בזמן גירוי מוגדר 5 שניות, עם עד 0.5 הרמפה השנייה כבש 0.5 2 למטה. זה יאפשר לשריר יותר בהדרגה accliחבר לגירוי. בפרוטוקול הנוכחי, את הזמן בין הצירים נקבע ל -10 שניות, אבל זה עשוי להיות מותאם בהתאם לפעילות הרצויה. ירידה הזמנים תגרום ייזום מהירה יותר של עייפות שרירים. פרמטרים אלה גירוי התבססו על פרוטוקולים קליניים שנועדו לשפר את כוח השרירים באמצעות גירוי חשמלי neuromuscular, ללא גרימת נזק משמעותי בשריר השלד 1, 15, 16. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים להשלים שתי קבוצות של 10 צירים, עם כל 5 דקות בין סטים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים בוגרים, עוצמת NMES היא יזמה בדרך כלל mA 9. מניסיוננו, זה בערך לעוצמת החל מקסימלי זה לא לגרום פגיעה בהליכה מורגש מיד לאחר הגירוי. עבור הפעלות NMES הבאים, עוצמת גדל ב 1 mA בכל פעם החיות יכולים להשלים 20 dorsiflexions מלא. </li></ul></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות השלמת גירוי פרוטוקול recoמאוד מן ההרדמה, בעלי חיים בדרך כלל להפגין הליכה יציבה תקינה. ההליכה צריך להישאר נפגמה לכל אורך התוכנית NMES. </li></ul> 4. נציג תוצאות פרוטוקול NMES המתוארת במאמר זה יושם על זני עכברים שונים, וביניהם: סוג Wild (B6/10), B6.SCID MDX ו / עכברי SCID. תוצאות נציג של NMES שבוצעו במהלך 4 שבועות (20 מפגשים) ב 3-5 חודשים בן MDX / SCID מוצגים. החיות היו מורדמים אנושי על ידי צוואר הרחם בזמן העקירה בהרדמה. השריר הקדמי tibialis היה לקצור ולהקפיא מיד ג 2 מתיל בוטאן מראש מקורר בחנקן נוזלי, ומאוחסנים ב -80 ° טורי חתכים (10 מיקרומטר) התקבלו ו מותקן על גבי שקופיות. ניתוחים סטטיסטיים בוצעו באמצעות תקן חבילות תוכנה סטטיסטית (SPSS, v19.0 תוכנה). ראשית, המבחן של לוין שימש כדי להעריך אם יש WAשל שוויון שונויות. מדגמים בלתי תלויים מבחן t נערך אז לחקור את ההבדלים בין NMES וקבוצות בקרה. Hematoxylin ו Eosin (H &amp; E) כתמים בוצעו כדי לבדוק האם פרוטוקול NMES יביא לפגיעה מוגברת בשריר dystrophic. חלק אחד נבחר, ותמונות התקבלו באמצעות מיקרוסקופ אור (Nikon Eclipse E800, ניקון, יפן). המספר הכולל של סיבים ומספר סיבי עם גרעינים במיקום מרכזי נספרו באופן ידני באמצעות המכון הלאומי לבריאות בארה&quot;ב (NIH) - פיתחה תוכנה לניתוח תמונה, תמונה ג&#39;לא היתה עלייה משמעותית במדד התחדשות (מספר סיבי גרעיני מרכזי / המספר הכולל של סיבים) של בעלי החיים שהוגשו NMES, בהשוואה לקבוצת הביקורת (p = 0.802, איור 1). הדבר מצביע על כך את היישום של NMES אינו מעלה את מפל ניוון-התחדשות נצפתה אצל בעלי חיים dystrophic, ולכן לא סבירלהיות גרימת פציעה בשריר מוגברת. מכתים Immunofluorescent עבור CD31 בוצע כדי לחקור את ההשפעה של פרוטוקול NMES 4 שבועות על כלי הדם בשריר. בקצרה, שרירים חלקים תוקנו ב 4% פורמלין וחסמו באמצעות סוס 5% סרום (HS). סעיפים היו מודגרות עם נוגדנים נגד עכברוש העכבר הראשי (1:300 דילול ב HS 5%) מטופלים עם נוגדנים 555-שכותרתו עז נגד עכברים משני (1:300 דילול ב HS 5%). כדי לכמת את המספר הכולל של תאים CD31 חיובי, חלק אחד נבחר, וצילם באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי (Nikon Eclipse E800, יפן). המספר הכולל של הנימים נמנה באופן ידני באמצעות צפון Eclipse תוכנה (Empix הדמיה בע&quot;מ). חלה עלייה משמעותית במספר CD31 בתאים חיוביים בעלי החיים שהוגשו NMES בהשוואה לקבוצת הביקורת (p &lt;0.01, איור 2), המציין את הפרוטוקול NMES כמתואר מעודד היווצרות כלי דם בשרירי השלד. <strong&gt; בבדיקה situ כויץ: ארבעה שבועות לאחר סיום פרוטוקול NMES, בדיקות התכווצות של שרירי תא הקדמי בוצעה באמצעות מנגנון בדיקה באתרם (דגם 809B, אורורה מדעי Inc, קנדה), ממריץ (דגם 701C, אורורה מדעי Inc , קנדה), וכוח מתמר (אורורה מדעי Inc, קנדה). בקצרה, עצב peroneal בעלי חיים הרדים היה מבודד דרך חתך קטן לרוחב כדי לברך. עכברים הונחו אז פרקדן על משטח מוגבה, רגל למבחן היה ממוקם על מדרגת. Hindlimb המשמש לבדיקות התייצב עם סרט בד על הברך וכף הרגל. השרירים היו מגורה באמצעות מספר אלקטרודות וו מוכנס מתחת לעור. התכווצות שרירים tetanic נבדק בתדר של 150Hz עבור 350ms לבדוק האם פרוטוקול 4 שבועות NMES תגרום לשיפור כוח השרירים. התוצאות היו מנורמל משקל שריר רטוב. חלה עלייה של 30% בערך tetanהתכווצות IC בעלי חיים שהוגשו NMES, בהשוואה לקבוצת הביקורת (p = 0.005) (איור 3), דבר המצביע על פרוטוקול תיאר משפר את חוזק שרירי השלד ב MDX / SCID בעלי חיים. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/3914/3914fig1.jpg" /> . איור 1 Hematoxylin &amp; Eosin מכתים שלד שריר dystrophic (MDX) / עכברים immunodeficient (4-5 חודשים) (הגדלה פי 10): א) שולטת ללא טיפול, ב &#39;) לאחר 4 שבועות של NMES. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/3914/3914fig2.jpg" /> איור 2. CD31 immunofluorescence (אדום), כסמן של כלי הדם בשרירי השלד, בשריר השלד של dystrophic (MDX) / עכברים immunodeficient (4-5 חודשים) (20x בהגדלה) A) שולטת ללא טיפול, ב &#39;) לאחר 4 שבועות של NMES. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/3914/3914fig3.jpg" /> איור 3. בדיקות כויץשל שרירי תא הקדמי בשליטה חיות שטופלו NMES למשך 4 שבועות. mNm = מילי מטר ניוטון. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/3914/3914fig3large.jpg">לחץ כאן כדי להציג דמות גדולה</a> .

<ol><li>Snyder-Mackler, L., Delitto, A., Bailey, S. L., Stralka, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strength+of+the+quadriceps+femoris+muscle+and+functional+recovery+after+reconstruction+of+the+anterior+cruciate+ligament.+A+prospective%2C+randomized+clinical+trial+of+electrical+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+%26+Joint+Surgery+-+American%22%5BJournal%5D)">Strength of the quadriceps femoris muscle and functional recovery after reconstruction of the anterior cruciate ligament. A prospective, randomized clinical trial of electrical stimulation.</a> Journal of Bone & Joint Surgery - American. 77, 1166-1173 (1995).</li>
<li>Gibson, J. N., Smith, K., Rennie, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+disuse+muscle+atrophy+by+means+of+electrical+stimulation%3A+maintenance+of+protein+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Prevention of disuse muscle atrophy by means of electrical stimulation: maintenance of protein synthesis.</a> Lancet. 2, 767-770 (1988).</li>
<li>Malatesta, D., Cattaneo, F., Dugnani, S., Maffiuletti, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+electromyostimulation+training+and+volleyball+practice+on+jumping+ability%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Strength+%26+Conditioning+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of electromyostimulation training and volleyball practice on jumping ability.</a> Journal of Strength & Conditioning Research. 17, 573-579 (2003).</li>
<li>Maffiuletti, N. A., Dugnani, S., Folz, M., Di Pierno, E., Mauro, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+combined+electrostimulation+and+plyometric+training+on+vertical+jump+height%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Sci.+Sports+Exerc%22%5BJournal%5D)">Effect of combined electrostimulation and plyometric training on vertical jump height.</a> Med. Sci. Sports Exerc. 34, 1638-1644 (2002).</li>
<li>Pichon, F., Chatard, J. C., Martin, A., Cometti, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrical+stimulation+and+swimming+performance%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Sci.+Sports+Exerc%22%5BJournal%5D)">Electrical stimulation and swimming performance.</a> Med. Sci. Sports Exerc. 27, 1671-1676 (1995).</li>
<li>Gondin, J., Guette, M., Ballay, Y., Martin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electromyostimulation+training+effects+on+neural+drive+and+muscle+architecture%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Sci.+Sports+Exerc%22%5BJournal%5D)">Electromyostimulation training effects on neural drive and muscle architecture.</a> Med. Sci. Sports Exerc. 37, 1291-1299 (2005).</li>
<li>Mathieu-Costello, O., Agey, P. J., Wu, L., Hang, J., Adair, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capillary-to-fiber+surface+ratio+in+rat+fast-twitch+hindlimb+muscles+after+chronic+electrical+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Capillary-to-fiber surface ratio in rat fast-twitch hindlimb muscles after chronic electrical stimulation.</a> Journal of Applied Physiology. 80, 904-909 (1996).</li>
<li>Ebina, T., Hoshi, N., Kobayashi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiological+angiogenesis+in+electrically+stimulated+skeletal+muscle+in+rabbits%3A+characterization+of+capillary+sprouting+by+ultrastructural+3-D+reconstruction+study%5BTitle%5D)+AND+%22Pathology+International%22%5BJournal%5D)">Physiological angiogenesis in electrically stimulated skeletal muscle in rabbits: characterization of capillary sprouting by ultrastructural 3-D reconstruction study.</a> Pathology International. 52, 702-712 (2002).</li>
<li>Zhao, M., Huai, B., Wang, E., Forrester, J. V., McCaig, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrical+stimulation+directly+induces+pre-angiogenic+responses+in+vascular+endothelial+cells+by+signaling+through+VEGF+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cell+Science%22%5BJournal%5D)">Electrical stimulation directly induces pre-angiogenic responses in vascular endothelial cells by signaling through VEGF receptors.</a> Journal of Cell Science. 117, 397-405 (2004).</li>
<li>Nagasaka, M., Kohzuki, M., Fujii, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+low-voltage+electrical+stimulation+on+angiogenic+growth+factors+in+ischaemic+rat+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+%26+Experimental+Pharmacology+%26+Physiology%22%5BJournal%5D)">Effect of low-voltage electrical stimulation on angiogenic growth factors in ischaemic rat skeletal muscle.</a> Clinical & Experimental Pharmacology & Physiology. 33, 623-627 (2006).</li>
<li>Brutsaert, T. D., Gavin, T. P., Fu, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+differences+in+expression+of+VEGF+mRNA+in+rat+gastrocnemius+following+1+hr+exercise+or+electrical+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Physiology%22%5BJournal%5D)">Regional differences in expression of VEGF mRNA in rat gastrocnemius following 1 hr exercise or electrical stimulation.</a> BMC Physiology. 2, 8(2002).</li>
<li>Putman, C. T., Dusterhoft, S., Pette, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+satellite+cell+content+and+myosin+isoforms+in+low-frequency-stimulated+fast+muscle+of+hypothyroid+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Changes in satellite cell content and myosin isoforms in low-frequency-stimulated fast muscle of hypothyroid rat.</a> Journal of Applied Physiology. 86, 40-51 (1999).</li>
<li>Monaghan, B., Caulfield, B., O'Mathuna, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+neuromuscular+electrical+stimulation+for+quadriceps+strengthening+pre+and+post+total+knee+replacement%5BTitle%5D)+AND+%22Cochrane+Database+Syst.+Rev%22%5BJournal%5D)">Surface neuromuscular electrical stimulation for quadriceps strengthening pre and post total knee replacement.</a> Cochrane Database Syst. Rev. CD007177, (2010).</li>
<li>Jubeau, M., Gondin, J., Martin, A., Sartorio, A., Maffiuletti, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Random+motor+unit+activation+by+electrostimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Sports+Med%22%5BJournal%5D)">Random motor unit activation by electrostimulation.</a> Int. J. Sports Med. 28, 901-904 (2007).</li>
<li>Piva, S. R., Goodnite, E. A., Azuma, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuromuscular+electrical+stimulation+and+volitional+exercise+for+individuals+with+rheumatoid+arthritis%3A+a+multiple-patient+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Physical+Therapy%22%5BJournal%5D)">Neuromuscular electrical stimulation and volitional exercise for individuals with rheumatoid arthritis: a multiple-patient case report.</a> Physical Therapy. 87, 1064-1077 (2007).</li>
<li>Delitto, A., Rose, S. J., McKowen, J. M., Lehman, R. C., Thomas, J. A., Shively, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrical+stimulation+versus+voluntary+exercise+in+strengthening+thigh+musculature+after+anterior+cruciate+ligament+surgery.%5Berratum+appears+in+Phys+Ther+1988+Jul%3B68%287%29%3A1145%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Physical+Therapy%22%5BJournal%5D)">Electrical stimulation versus voluntary exercise in strengthening thigh musculature after anterior cruciate ligament surgery.[erratum appears in Phys Ther 1988 Jul;68(7):1145].</a> Physical Therapy. 68, 660-663 (1988).</li>
</ol>

אין לנו מה למסור.

התוצאות מראות כי המודל Murine מפותחת שלנו NMES מעודד היווצרות כלי דם בשרירי השלד (איור 2) וחיזוק (איור 3), אך לא לגרום נזק שרירי השלד (איור 1). יש לציין כי הפרמטרים גירוי המתוארים כאן עוצבו כדי לגרום שרירים עומס יתר על שרירי תא הקדמי. בדיוק כמו במקרה של תרחישים קליניים, מיקום האלקטרודה עשוי להיות מותאם כדי לעורר את קבוצות השרירים האחרות, אם כי התגובה שריר NMES עשויים להיות שונים, בהתאם לסוג הרכב סיבים. NMES משך הזמן, המספר הכולל של טיפולים, והמספר הכולל של חזרות ניתן לשנות לפי ללמוד עיצוב. כמו עם כל פרוטוקול, שיטה זו יש מגבלות, כי יש לציין. במחקר הנוכחי, גירוי בוצע על העצב שוקיתי עמוק. עם זאת, במרפאה, גירוי אניזה מנוהל בדרך כלל על יחידת המנוע. במודל חיה, גירוי של העצב ידרוש עוצמה נמוכה יותר כדי לעורר התכווצות שרירים מלא. מגבלה נוספת של המודל כפי שהוצגה היא כי איננו יכולים לקבל מידע לגבי רמת הנוחות במהלך היישום של NMES, שכן בעלי החיים מורדמים. לכן, והסבילות של בעוצמות דומות באוכלוסייה קליני קשה להעריך. עם זאת, תוצאות היסטולוגית שלנו מציעים מודל NMES שלנו, כפי שתואר, לא לגרום לפגיעה בשרירים. פיתוח מודלים בעלי חיים המחקים את שיטות מיושם בדרך כלל במרפאה לספק לנו כלים שימושיים מעבדה המאפשרת הבנה משופרת של תגובות תאית ומולקולרית התערבויות טיפוליות. בנוסף, מודלים כאלה שימושיים לערוך מחקרים קדם קליניים הן לחדד פרוטוקולים השיקום הקיימים ולפתח סימנים חדשים.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td></tr><tr><td> תיל וקטור לעטוף ההודעה עם מסוף הלחמה מפוצלת </td><td> ניוארק </td><td> T68 </td></tr><tr><td> וקטור המעגלים </td><td> ניוארק </td><td> 3662-2 </td></tr><tr><td> פומונה תיקון כבל </td><td> ניוארק </td><td> P-36-0 </td></tr><tr><td> 5 דקות אפוקסי </td><td> VO בכר ושות&#39; </td><td> 4001 </td></tr><tr><td> ספקטרה 360 ג&#39;ל אלקטרודה </td><td> Milliken רפואי </td><td> MR41217 </td></tr><tr><td> ניידת גירוי neuromuscular המכשיר </td><td> EMPI </td><td> 300pv </td></tr></tbody></table>

דגם murine של אימון שרירים באמצעות גירוי חשמלי neuromuscular

A Murine Model of Muscle Training by Neuromuscular Electrical Stimulation

גירוי חשמלי neuromuscular (NMES) היא שיטת קליני נפוץ בשימוש נרחב להחזיר 1, 2 לשמור או לשפר 3-5 קיבולת שרירים פונקציונלי. גירוי משטח Transcutaneous של שרירי השלד כולל זרימת הנוכחי בין הקתודה לבין האנודה, ובכך גרימת ההתרגשות של יחידת המנוע סיבי השריר שמסביב. NMES היא שיטת אטרקטיבי כדי להעריך את התגובות שריר השלד הסתגלות מכמה סיבות. ראשית, הוא מספק מודל ניסיוני לשחזור בו התאמות פיזיולוגיות, כגון hypertophy myofiber וחיזוק שרירים 6, אנגיוגנזה 7-9, 9-11 הפרשת גורם הגדילה, ו מבשר שריר תא הפעלת 12 מתועדים היטב. התגובות הפיזיולוגיות כאלה ניתן טיטרציה בזהירות באמצעות פרמטרים שונים של גירוי (Cochrane לבדיקה, לראות 13). בנוסף, NMES המגויסיםיחידות המנוע הלא סלקטיבי, ובאופן קבוע במרחב ואת סינכרוני temporally 14, מציע את היתרונות של הפעלת השפעה על הטיפול סיבי כל, ללא קשר לסוג סיבים. אמנם יש התוויות נגד שצוינו NMES באוכלוסיות קליניות, כולל הפרעות ורידיים הפריפריה או גידול ממאיר, למשל, NMES הוא בטוח ריאלי, אפילו עבור אלה אשר חולים ו / או מרותק למיטתו ועל אוכלוסיות שבהן פעילות גופנית קפדנית יכול להיות אתגר. הנה, אנחנו מדגימים את פרוטוקול התאמת האלקטרודות זמינים מסחרית וביצוע פרוטוקול NMES תוך שימוש במודל murine. מודל זה בעל חיים יש את היתרון של שימוש במכשיר זמין קלינית ומתן משוב מיידי לגבי המיקום של האלקטרודה לעורר את האפקט הרצוי שרירים כויץ. לצורך כתב יד זה, נתאר את פרוטוקול לגירוי שרירים של שרירי תא הקדמי של hindlimb העכבר.

מודל murine של גירוי חשמלי neuromuscular (NMES), שיטת קליני בטוח ולא יקר, אל השרירים תא הקדמי מתואר. מודל זה יש את היתרון של שינוי התקן קליני זמינים לצורך לעורר התכווצויות שרירים ממוקד וספציפי בעכברים.

דגם Murine של אימון שרירים באמצעות גירוי חשמלי neuromuscular

גירוי חשמלי עצבי-שרירי (NMES) הוא מודאליות קלינית נפוצה המשמשת באופן נרחב לשיקום1, שמירה2 או שיפור3-5 של תפקוד השרירים...

המטרה הכוללת של פרוצדורה זו היא להדגים מודל של אימון שרירים באמצעות גרייה חשמלית נוירו-שרירית. דבר זה מושג תחילה על ידי התאמה של אלקטרודת שטח הזמינה באופן קליני ומיועדת לשימוש בבני אדם לאלקטרודת שטח שניתן להשתמש בה בעכברים; לאחר מכן יש להרדימ את בעל החיים ולמקמו לצורך הגרייה. לאחר מכן, יש להניח את אלקטרודת השטח ישירות מעל העצב הפיבולרי העמוק (deep fibular nerve), ממש דיסטלית לראש הפיבולה.השלב הסופי הוא ביצוע פרוטוקול הגירוי של שרירי הכיפוף הקדמיים. בסופו של דבר, ניתוח היסטולוגי מראה עלייה בוסקולריות של השריר השלדי, ובדיקת כיווץ in situ מראה עלייה בשיא הכוח התטני. היי, שמי פבריציו.אני מרצה בכיר במחלקה לרפואה פיזיקלית ושיקום באוניברסיטת פיטסבורג ומנהל המעבדה לשיקום תאי. היום נדגים עבורכם מודל שיקוף של אימון שרירים באמצעות גירוי חשמלי עצבי-שרירי. בחלק הראשון של ההדגמה, נראה לכם כיצד להפוך אלקטרודה שטחית הזמינה באופן קליני לאלקטרודה שניתן להשתמש בה כדי לגרות שריר שלד בעכברים.בחלק השני, נדגים כיצד ליישם פרוטוקול זה של גירוי חשמלי עצבי-שרירי בניסוייכם וכיצד לפתח מודלים של בעלי חיים המדמים באופן הדוק מודליות טיפוליות. השימוש בקליניקה הוא חשוב מכיוון שהוא יכול לסייע לנו להשיב על שאלות הקשורות לפיזיולוגיה של השריר השלדי, כגון כיצד הפעלת השריר מעוררת תגובות של התמרות מכניות (mechano transductive responses), ובמסגרת זו נוכל לבחון זאת ברמות המולקולרית, התאית והרקמתית. שלום, שמי ריקרדו פררי.אני סטודנט לדוקטורט במחלקה לפיזיותרפיה באוניברסיטת פיטסבורג. גירוי חשמלי של השרירים הוא הליך נפוץ המשמש בקליניקות להגברת כוח השרירים ולשיפור ריפוי השרירים. עם זאת, נותרו שאלות רבות בנוגע לפרמטרים האופטימליים שיש להשתמש בהם.מודל חיה זה עשוי לסייע בפיתוח פרוטוקולי גירוי חשמלי ספציפיים לשימוש במסגרת קלינית. להכנת האלקטרודה, התחל בכיפוף של שני פינים מזהב באורך six millimeter בזווית של 90 מעלות. לאחר מכן, חשוף כ-seven centimeters של שני חוטי נחושת על ידי הסרת הבידוד החיצוני.לאחר מכן, הלחים את החוטים מהמחברים לשני הפינים המוזהבים, הממוקמים במרחק של כ-3.5 מילימטרים זה מזה. לאחר מכן, הנח שרינק טיובינג (צינור בידוד מתכווץ) על החיבור בין חוטי הנחושת לפינים המוזהבים לצורך בידוד וייצוב, וחמם את השרינק טיובינג. ודא שהפינים המוזהבים מקבילים זה לזה והחדר אותם דרך לוח המעגל כך שהקצוות יהיו מיושרים. לאחר מכן, טבל את הפינים במספר שכבות של אפוקסי שקוף, תוך מתן זמן לאפוקסי להתייבש לחלוטין בין השכבות. לבסוף, שייף את האפוקסי כדי לחשוף את קצותיהם של הפינים המוזהבים.בשלב הבא, השתמש במד מתח כדי לוודא שהחוטים אינם נמצאים בקצר חשמלי. לאחר מכן, השתמש בצינורית פלסטיק כדי לבודד את הפינים המתכתיים של מחבר החוטים הדו-כיווני הנקבי. לבסוף, חבר את מובילי האלקטרודות של מכשיר ה-NMES למחבר החוטים הדו-כיווני הנקבי.כל ההליכים נסקרו ואושרו על ידי ה-Iacuc של אוניברסיטת פיטסבורג, ובוצעו בתוכניות ובמתקנים המאושרים על ידי PHS ומוסמכים על ידי alac. International. את החיה מרדימה באמצעות שאיפה של isof fluorine. החיה צריכה להישאר תחת הרדמה לאורך כל מפגש ה-NMES.יש לאשש את ההרדמה באמצעות בדיקת רפלקס פשיטה על ידי צביטה בבהוtoe. לאחר מכן, הנח את בעל החיים בתנוחה שכיבה צדית (lateral recumbent). בהמשך, גלח את הגפה האחורית, נגב אותה באלכוהול, ונגב את האלקטרודה בתמיסת bleach 3%.לאחר מכן, בעזרת מים, הגדירו את פרמטרי הגירוי, כולל משך פולס של 150 microseconds ותדר של 50 PP s. לאחר מכן, הגדירו את זמן הגירוי לחמש שניות, עם ramp up של 0.5 second ו-ramp down של 0.5 second. פעולה זו תאפשר לשריר להסתגל בהדרגה לגירוי ותהיה נוחה יותר עבור בעל החיים.לאחר מכן, הגדירו את זמן המנוחה בין ההתכווצויות ל-10 שניות. ניתן להתאים ערך זה בהתאם לאפקט הרצוי, אך קיצור זמני המנוחה יוביל להופעה מהירה יותר של עייפות שרירים. בשלב הבא, סטריליזו את האלקטרודה באמצעות 3%bleach ולאחר מכן במים, ומריחו ג'ל מוליך על האלקטרודה לצורך גרייה של שרירי המדור הקדמי (anterior compartment), כולל ה-tibial anterior וה-extensor digitorum longest. מקמו את אלקטרודת השטח ישירות מעל העצב הפרינאלי המשותף (common perineal nerve) של בעל החיים, הממוקם ממש דיסטלית לקונדילה הפמורלית הלטרלית (lateral femoral condyle).מיקום האלקטרודה מאושר כאשר הגירוי גורם לדורסיפלקסיה מלאה של קרסול ולפשיטה מלאה של האצבעות. מנגד, דורסיפלקסיה של כף הרגל ללא פשיטה של האצבעות מעידה על כך שרק השריר הטיביאליס אנטריור (tibialis anterior) מגורה. לאחר מכן, התחל את עוצמת ה-NMES ב-9 milliamps ובצע שתי סדרות של התכווצויות, לסך הכל 20 התכווצויות, עם מנוחה של חמש דקות בין הסדרות; במהלך תקופת המנוחה, יש לבצע גירוי של הגפה הנגדית.כעת העבירו את בעל החיים לתא ההתאוששות. לאחר ארבעה שבועות של NMES בעכברי MDX skid בני שלושה עד חמישה חודשים, צביעת שריר שלד בהמטין ואאוזין אינה מעלה עלייה במספר הסיבים בעלי גרעין מרכזי בהשוואה לקבוצות הביקורת שלא עברו גרייה. נתון זה מרמז כי יישום ה-NMES אינו מעורר את רצף הניוון וההתחדשות.צביעה אימונוהיסטוכימית ל-CD 31 כסמן לתאי אנדותל מגלה כי ביחס לעכברי ביקורת שלא קיבלו גרייה, ארבעה שבועות של NMES הובילו לתסמיכי אנגיוגנזה משמעותית בשריר המטופל. איור זה מראה את העלייה בשיא החוזק הטטני של שרירים שטופלו ב-NMES ביחס לשרירי ביקורת שלא טופלו. לאחר שתשלטו בטכניקה זו, השלמת הפרוטוקול צריכה לארוך כ-15 דקות לבעל חיים.החלק המאתגר ביותר בפרוטוקול זה הוא מציאת המיקום הנכון עבור האלקטרודה כדי להוציא את תגובת השריר הרצויה. תודה שצפיתם. אתם מוזמנים ליצור קשר עם המעבדה שלנו אם יש לכם שאלות כלשהן.

a-murine-model-muscle-training-neuromuscular-electrical

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

גירוי חשמלי מתוכנת מספק את היכולת לקבוע תכונות ההולכה של הלב, ואת האפשרות להשפיע ולסיים הפרעות בקצב הלב באמצעות פרוטוקולים שונים לצעוד. באמצעות קטטר transvenous, הקלטות intracardiac electrogram ניתן להשיג אצל עכברים הבאים מתוכנת פרוטוקולים גירוי חשמלי לזהות מצעים arrhythmogenic.

גירוי חשמלי מתוכנת עכברים

רקמת שריר מהונדסת יש פוטנציאל גדול ברפואת רגנרטיבית, כמודל מחלה וגם כמקור חלופי לבשר. כאן אנו מתארים ההנדסיים של מבנה שרירים, במקרה זה מתאי עכבר והיצמדות לאב, והגירוי על ידי פולסים חשמליים.

רקמות שריר שלד הנדסה מתאי Murine היצמדות מולידו ויישום של גירוי חשמלי

אנו מציגים פרוטוקול להערכת שינויים בתפקוד העצבי-שרירי. גירוי עצבי חשמלי מלעורי הוא שיטה לא פולשנית המעוררת תגובות שרירים. התכונות האלקטרופיזיולוגיות והמכניות של תגובות אלה מאפשרות להעריך את התפקוד העצבי-שרירי מהמוח לשריר (רמות על-עמוד השדרה, עמוד השדרה והיקפי).

הערכה של תפקוד העצבי באמצעות גירוי עצבי חשמלי Percutaneous

פרוטוקול זה מתאר את השימוש של הדגם פעילות כויץ כרונית של תרגיל להתבונן הנוצרות על-ידי גירוי שרירי השלד עיבודים ב hindlimb החולדה.

יישום של גירוי כרוני ללמוד עיבודים פנוטיפי של שרירי השלד כויץ הנוצרות על-ידי פעילות עכברוש

פגיעה בחוט השדרה הוא מצב רפואי טראומטי שעלולים לגרום הסיכונים מוגברות של הפרעות מטבוליות משנית כרונית. כאן, אנחנו הציגה פרוטוקול באמצעות משטח עצבי גירוי-ההתנגדות החשמלית הכשרה בשיתוף עם פונקציונלי הגפיים גירוי-נמוך חשמלי אופניים כאסטרטגיה דהוא מספר בעיות רפואיות אלה.

פרדיגמות של הגפיים התחתון גירוי חשמלי אימון לאחר פגיעה בחוט השדרה

מדידה של הפונקציה כויץ מכרסמים שרירי השלד הוא כלי שימושי, יכול לשמש כדי לעקוב אחר התקדמות המחלה, כמו גם היעילות של התערבות טיפולית. נתאר כאן את פולשני, אין ויוו ההערכה של השרירים dorsiflexor שיכול לחזור לאורך זמן העכבר באותו.

הערכה בלתי פולשני של תפקוד השרירים Dorsiflexor בעכברים

אנו מתארים מערכת הדמיה ניתנת לשחזור, אוטומטית ובלתי משוחדת לאפיון תפקוד צומת נוירומוסקולרי באמצעות רקמת שרירי שלד מהונדסת אנושית ומוטונורונים אופטוגנטיים. מערכת זו מאפשרת כימות תפקודי של קישוריות עצבית-שרירית לאורך זמן ומזהה ירידה בתפקוד העצבי-שרירי הנגרמת על ידי נוירוטוקסינים וסרום המטופלים myasthenia gravis.

הנדסה ואפיון של מודל אופטוגנטי של הצומת העצבי-שרירי האנושי

הליך זה מתאר מודל אימון התנגדות גלגל ריצה טעון פרוגרסיבי הניתן לתרגום בעכברים. היתרון העיקרי של מודל אימון התנגדות זה הוא שהוא התנדבותי לחלוטין, ובכך מפחית את הלחץ על בעלי החיים ואת העומס על החוקר.

דגם גלגל ריצה פשוט וזול לאימוני התנגדות פרוגרסיביים בעכברים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר טכניקה ייחודית הנקראת אימון התנגדות מותאם מינון (DART), אשר ניתן לשלב במחקרי שיקום מדויקים המבוצעים בחיות קטנות, כגון עכברים.

אימוני התנגדות מותאמים למינון בעכברים עם סיכון מופחת לפגיעה בשרירים

בהירות אופטית היא יתרון משמעותי לעבודה הביולוגית והפיזיולוגית של התא בדגי זברה. מתוארות שיטות חזקות למדידת צמיחת תאים בבעלי חיים בודדים המאפשרות תובנות חדשות על האופן שבו צמיחת שרירי השלד והרקמות השכנות משולבת עם צמיחת כל הגוף.

מדידה בזמן אמת וחוזרת ונשנית של גדילת שרירי השלד אצל דגי זברה חיים בודדים הנתונים לשינויים בפעילות החשמלית

במחקר זה, אנו מדגימים פרוטוקול אלקטרומיוגרפיה מעודן של סיב יחיד (SFEMG) כדי לאפשר מדידה in vivo של העברת צומת עצבית-שרירית (NMJ) במודלים של מכרסמים. גישה שלב אחר שלב לטכניקת SFEMG מתוארת כדי לאפשר כימות של השתנות העברת NMJ וכישלון בשריר גסטרוקנמיוס חולדה.

אלקטרומיוגרפיה מגורה של סיב יחיד (SFEMG) להערכת העברת צומת עצבית-שרירית במודלים של מכרסמים

למד מודל עכברים לאימון שרירים באמצעות גירוי חשמלי נוירומוסקולרי. השיטה מדגימה התאמת אלקטרודה קלינית לשימוש בעכברים ומאפשרת חקר פיזיולוגיית שריר ופיתוח פרוטוקולים שיקומיים.

דגם Murine של אימון שרירים באמצעות גירוי חשמלי neuromuscular

גלה סרטונים נוספים