פיתוח Bronchiolitis סותם במודל Murine של השתלת ריאות Orthotopic

המטרה הכוללת של הליך זה היא לבסס מודל ברונכיוליטיס ספרותי בשיקוף השתלת ריאות אורתוטופית. זה מושג על ידי קצירת הריאה התורם מעכבר C 57 BL 10. השלב השני הוא הכנת השרוול לעורק הריאה של הסימפונות והווריד לאנסטומוזיס.

לאחר מכן, ריאת התורם המוכנה מושתלת בנמען C חמש שבע BL שישה עכבר. השלב האחרון הוא התבוננות בעכבר המושתל במשך 21 או 28 יום לאחר ההשתלה. בסופו של דבר, ניתוח היסטולוגי משמש להצגת נגעי ברונכיוליטיס ספרותיים בריאה המושתלת.

היתרון העיקרי של מודל זה בהשוואה למודל השתלת דרכי הנשימה ההטרוטופיות הוא שהמודל הנוכחי מחקה את המצב האנושי. בדרך כלל, אנשים חדשים בשיטה זו יתקשו מכיוון שהמבנים הגבוהים בעכברים עדינים מאוד ורגישים יותר לפציעה מכיוון שהמסה רק עשירית מהמסה של החולדה מניחים את העכבר התורם בתא אחיזה אטום וגורמים להרדמה עם 5% פלואור. לאחר מכן, השתמש בצנתר התוך-ורידי בגודל 20 כדי להחדיר את העכבר או Trae, ולאחר מכן הנח אותו על מכונת הנשמה למכרסמים.

שמור על הרדמה עם 1 עד 2% של פלואור. לאחר שווידאתם שהעכבר מורדם לחלוטין עקב חוסר תגובה לתנועת זנב וצביטה בבוהן, הניחו אותו במצב שכיבה והכינו את הבטן עם 70% אלכוהול. כעת, חתכו את העור המכסה את הבטן בעזרת מספריים וחשפו את שרירי הבטן.

לאחר מכן, בצע סטרנוטומיה לפרית על ידי ביצוע חתך בקו האמצע דרך דופן הבטן, ולאחר מכן על ידי חיתוך רוחבי על פני עצם החזה, הרחק את המעיים ואתר את הווריד הנבוב התחתון, שנמצא ממש מתחת לכבד. הזריק הפרין ב-100 מיקרוליטר לק"ג לתוך ה-IVC. לאחר מכן, משוך כלפי מטה את הרצועה הפלציפורמית של הכבד וחתוך את הסרעפת לאורך החיבור הסיבתי הגחוני לכיוון עמוד השדרה.

חותכים את שני צידי דופן בית החזה לצוואר על מנת לחשוף את חלל בית החזה. חותכים את כלוב הצלעות דו צדדי תוך הגנה על הריאה ומסירים את בלוטת התימוס. לאחר מכן, חתוך את ה- IVC התוך-חזה בגובה הסרעפת.

כעת אתר את הלב וכרת את התוספתן הפרוזדורי הימני. לאחר מכן בצע חתך רוחבי בשורש תא המטען של עורק הריאה והשתמש בחתך כדי לשטוף את הריאות בשני מיליליטר של טבעות חלב מקוררות ו -0.1 מיליליטר הפרין. חשפו את קנה הנשימה ואז חתכו אותו יחד עם הוושט.

עכשיו עצרו את האוורור בשני שליש מאינפלציית הגאות והשפל. כרתו את הבלוק הארוך של הלב ואחסנו אותו על קרח. הניחו גזה על הריאה שנכרתה כדי להגן עליה מפני אור.

חתך את הרצועה הריאתית עד לווריד הריאה או PV. הסר את הוושט ואת אבי העורקים כדי למקם את ההילום. מצא את עורק הריאה או pa, שנמצא בהיבט הגולגולתי ביותר של ההילום והסימפונות הראשיים המצורפים.

נתח בזהירות את עורק הריאה הרחק מהסימפונות. כעת, הכינו שרוול PA מצנתר IV בגודל 24 על ידי חיתוך לאורך של 0.5 מילימטרים עם הארכה של 0.7 מילימטרים. משטח השרוול קלוע AB.

על מנת לספק משטח לאנסטומוזיס, הכינו שרוול לסמפונות באמצעות חומר דומה לשרוול הרשות הפלסטינית רק באמצעות קטטר בגודל 20 שנחתך לאורך של מילימטר אחד עם הארכה של 0.7 מילימטרים. גודל השרוול PV משתנה בהתאם למשקל העכבר התורם. לעכברים במשקל 24 עד 27 גרם.

גודל השרוול הוא 22 מד עם אורך 0.7 מילימטר והארכה של 0.7 מילימטר לעכברים במשקל 27 עד 32 גרם. האורכים זהים, אך נעשה שימוש בצנתר בגודל 20. כעת, הכנס את האזיקים לעדשה הדיסטלית של עורק הריאה, וריד הריאה והסימפונות, וקבע כל אחד מהם עם תשעה תפרי משי.

לאחר שכל האזיקים חוברו כהלכה. עוטפים את ריאת התורם המוכנה בגזה ספוגה בטבעות חכמות, ומניחים אותה על קרח עד להשתלה. כדי להכין את המקבל יש לגרום להרדמה ולהניח על הנשמה מכנית באותו אופן ששימש עבור התורם.

גלחו את דופן בית החזה השמאלי והתכוננו עם 70% אלכוהול. התחל בביצוע חתך בית החזה בחלל הבין-צלעי השלישי השמאלי. הארך את החתך בגב קרוב לעמוד השדרה.

ודא ששדה הניתוח עטוף בצורה סטרילית והנח מהדק כלי מיקרו על כלי הריאה השמאליים והסימפונות הסמוכים ללב. ניתן לדמיין את עורק הריאה בהיבט הגולגולתי, את וריד הריאה בקצה הקיפוד של ההילום ואת הסימפונות ביניהם. לאחר מכן, השתמש במתיחה עדינה על המוסטט כדי לגרום למתח קל על האבא, ה-PV והסימפונות.

השאירו את המבנים ההילריים מהודקים וכרתו בזהירות את הריאה השמאלית. בודדו את וריד הריאה והסימפונות של עורק הריאה, ולאחר מכן הניחו תפר oh באופן רופף סביב כל מבנה. נתח את הרשות הפלסטינית לחלוטין מהמעטפת האדוונטיאלית שלה, ולאחר מכן בצע חתך רוחבי קטן של כרבע מהיקף הכלי לתוך הדופן הקדמית.

תוך השארת המשך החלק הגבי של העורק שלם, השג את הריאה התורמת, העטופה בגזה כותנה ספוגה בטבעת חלב קרה, והנח אותה בחלל בית החזה. לאחר מכן, הכנס את האזיקים לתוך האבא, ה-PV והסימפונות כדי ליצור אנסטומוזה ולקשור אותם עם תפר ננו. לאחר מכן, הסר את הריאה המקבלת.

לאחר מכן הסר את מהדק הצלב ההילר, המאפשר זלוף ואוורור. מקם את הריאה המושתלת בחזרה לבית החזה המקבל וסגור את חתך בית החזה באמצעות חמישה תפרים, העכבר אמור כעת להתאושש מההרדמה. ניתן לתת בופרנורפין לשיכוך כאבים לאחר שהעכבר חזר להכרה.

טבלה זו מציגה את הציונים ההיסטולוגיים של דחייה חריפה ושכיחות של ברונכיוליטיס ספרותית או OB. ציון לאחר ההשתלה של דחייה חריפה מכונה ציון A. שילובי האלוגרפט מראים פתולוגיית דחייה חריפה או כרונית במידה ניכרת בהשוואה לשתל ISO. בנוסף, השכיחות של ברונכיוליטיס ספרותית הייתה גבוהה משמעותית בשילובי האלוגרפט מאשר בשתל ISO ביום 21 ו-28 לאחר ההשתלה.

ממצאי המאקרו וההיסטופתולוגיה ב-28 ימים לאחר השתלת הריאות מוצגים כאן. תמונות אלה מייצגות ממצאי מאקרו וריאות שתל ISO מוכתמות ב-H ו-E, וריאה נאיבית ימנית. תמונות אלה מייצגות h ו-e ו-masen trireme מוכתמת BL 10 אלוגרפט ריאה מושתלת במושתל BL 6 עכברים, שפיתחו OB ולא OB בהתאמה.

החץ הלבן באחד B מזהה את נגעי ה-OB. פאנל זה מציג BL שש אלוגרפט ריאות מושתל במושתל עכבר BL 10 לאחר שליטה. טכניקה זו יכולה להיעשות תוך כמעט חצי שעה אם היא מבוצעת כראוי.

התועלת של טכניקה זו היא שניתן להשתמש בה כדי לענות על שאלות מכניסטיות לגבי תפקוד לקוי של השתל הראשוני, דחייה חריפה וברונכיוליטיס אבלטיבית לאחר השתלת ריאות.