Name: הערכת Biomaterials עבור הגדלת שלפוחית השתן באמצעות ניתוח Cystometric על מודלים מכרסם שונים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-08-09T12:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 19 s
Description: למדו הערכת ביומטריאלים להגדלת שלפוחית השתן בדגמי מכרסמים באמצעות ציסטומטריה. שיטה זו מאפשרת מדידת נפח, תאימות ולחצי השתנה לניתוח פונקציונלי של השתן.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקרים אלו מומנו, בין השאר, על ידי החולים לילדים בבוסטון קרן התרומות הכנסות אורולוגיה ואת מכוני הבריאות הלאומיים מענקים NIBIB P41-EB002520 (קפלן); NIDDK T32-DK60442 (פרימן); NIDDK 1K99-DK083616 (Mauney). אנו מכירים ד&quot;ר פיטר Zvara מאוניברסיטת ורמונט לסיוע בהקמת טכניקה מיקום צינור cystostomy ו cystometry.

<ol><li>Atala, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+engineering+for+bladder+substitution%5BTitle%5D)+AND+%22World.+J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Tissue engineering for bladder substitution.</a> World. J. Urol. 18, 364-370 (2000).</li>
<li>Roehrborn, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+lower+urinary+tract+symptoms+%28LUTS%29+and+benign+prostatic+hyperplasia+%28BPH%29%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Clin.+North+Am%22%5BJournal%5D)">Male lower urinary tract symptoms (LUTS) and benign prostatic hyperplasia (BPH).</a> Med. Clin. North Am. 95, 87-100 (2011).</li>
<li>Niknejad, K. G., Atala, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bladder+augmentation+techniques+in+women%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+Urogynecol.+J.+Pelvic+Floor+Dysfunct%22%5BJournal%5D)">Bladder augmentation techniques in women.</a> Int. Urogynecol. J. Pelvic Floor Dysfunct. 11, 156-169 (2000).</li>
<li>Hensle, T. W., Gilbert, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+metabolic+consequences+and+long-term+complications+of+enterocystoplasty+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Urol.+Rep%22%5BJournal%5D)">A review of metabolic consequences and long-term complications of enterocystoplasty in children.</a> Curr. Urol. Rep. 8, 157-162 (2007).</li>
<li>Somani, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bowel+dysfunction+after+transposition+of+intestinal+segments+into+the+urinary+tract%3A+8-year+prospective+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Bowel dysfunction after transposition of intestinal segments into the urinary tract: 8-year prospective cohort study.</a> J. Urol. 177, 1793-1798 (2007).</li>
<li>Atala, A., Bauer, S. B., Soker, S., Yoo, J. J., Retik, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-engineered+autologous+bladders+for+patients+needing+cystoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Tissue-engineered autologous bladders for patients needing cystoplasty.</a> Lancet. 367, 1241-1246 (2006).</li>
<li>Sharma, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+nonhuman+primate+model+for+urinary+bladder+regeneration+using+autologous+sources+of+bone+marrow-derived+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">A nonhuman primate model for urinary bladder regeneration using autologous sources of bone marrow-derived mesenchymal stem cells.</a> Stem Cells. 29, 241-250 (2011).</li>
<li>Chung, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bladder+reconstitution+with+bone+marrow+derived+stem+cells+seeded+on+small+intestinal+submucosa+improves+morphological+and+molecular+composition%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Bladder reconstitution with bone marrow derived stem cells seeded on small intestinal submucosa improves morphological and molecular composition.</a> J. Urol. 174, 353-359 (2005).</li>
<li>Ashley, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+variations+in+small+intestinal+submucosa+evoke+differences+in+inflammation+with+subsequent+impact+on+tissue+regeneration+in+the+rat+bladder+augmentation+model%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">Regional variations in small intestinal submucosa evoke differences in inflammation with subsequent impact on tissue regeneration in the rat bladder augmentation model.</a> BJU Int. 105, 1462-1468 (2010).</li>
<li>Zhang, Y., Frimberger, D., Cheng, E. Y., Lin, H. K., Kropp, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+in+a+larger+bladder+replacement+with+cell-seeded+and+unseeded+small+intestinal+submucosa+grafts+in+a+subtotal+cystectomy+model%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">Challenges in a larger bladder replacement with cell-seeded and unseeded small intestinal submucosa grafts in a subtotal cystectomy model.</a> BJU Int. 98, 1100-1105 (2006).</li>
<li>Gomez, P. 3rd <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+manipulation+of+silk+scaffold+fabrication+parameters+on+matrix+performance+in+a+murine+model+of+bladder+augmentation%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The effect of manipulation of silk scaffold fabrication parameters on matrix performance in a murine model of bladder augmentation.</a> Biomaterials. 32, 7562-7570 (2011).</li>
<li>Mauney, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+gel+spun+silk-based+biomaterials+in+a+murine+model+of+bladder+augmentation%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Evaluation of gel spun silk-based biomaterials in a murine model of bladder augmentation.</a> Biomaterials. 32, 808-818 (2011).</li>
<li>Persson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+and+peripheral+mechanisms+contributing+to+hyperactive+voiding+in+spontaneously+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Spinal and peripheral mechanisms contributing to hyperactive voiding in spontaneously hypertensive rats.</a> Am. J. Physiol. 275, 1366-1373 (1998).</li>
<li>Yaksh, T. L., Durant, P. A., Brent, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micturition+in+rats%3A+a+chronic+model+for+study+of+bladder+function+and+effect+of+anesthetics%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Micturition in rats: a chronic model for study of bladder function and effect of anesthetics.</a> Am. J. Physiol. 251, 1177-1185 (1986).</li>
<li>Pandita, R. K., Fujiwara, M., Alm, P., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cystometric+evaluation+of+bladder+function+in+non-anesthetized+mice+with+and+without+bladder+outlet+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Cystometric evaluation of bladder function in non-anesthetized mice with and without bladder outlet obstruction.</a> J. Urol. 164, 1385-1389 (2000).</li>
<li>Soler, R., Fullhase, C., Lu, B., Bishop, C. E., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bladder+dysfunction+in+a+new+mutant+mouse+model+with+increased+superoxide--lack+of+nitric+oxide%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Bladder dysfunction in a new mutant mouse model with increased superoxide--lack of nitric oxide.</a> J. Urol. 183, 780-785 (2010).</li>
<li>Matsuura, S., Downie, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+anesthetics+on+reflex+micturition+in+the+chronic+cannula-implanted+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol.+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Effect of anesthetics on reflex micturition in the chronic cannula-implanted rat.</a> Neurourol. Urodyn. 19, 87-99 (2000).</li>
<li>Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+for+urodynamic+investigation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol.+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Rodent models for urodynamic investigation.</a> Neurourol. Urodyn. 30, 636-646 (2011).</li>
<li>Soler, R., Fullhase, C., Santos, C., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+bladder+dysfunction+in+a+rat+model+of+dopaminergic+brain+lesion%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Development of bladder dysfunction in a rat model of dopaminergic brain lesion.</a> Neurourol Urodyn. 30, 188-193 (2011).</li>
<li>Streng, T., Santti, R., Andersson, K. E., Talo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+rhabdosphincter+in+female+rat+voiding%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">The role of the rhabdosphincter in female rat voiding.</a> BJU Int. 94, 138-142 (2004).</li>
<li>Malmgren, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cystometrical+evaluation+of+bladder+instability+in+rats+with+infravesical+outflow+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Cystometrical evaluation of bladder instability in rats with infravesical outflow obstruction.</a> J. Urol. 137, 1291-1294 (1987).</li>
<li>Smith, P. P., Kuchel, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+uroflow+cystometry+in+the+urethane-anesthetized+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol.+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Continuous uroflow cystometry in the urethane-anesthetized mouse.</a> Neurourol. Urodyn. 29, 1344-1349 (2010).</li>
<li>Cannon, T. W., Damaser, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+anesthesia+on+cystometry+and+leak+point+pressure+of+the+female+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Effects of anesthesia on cystometry and leak point pressure of the female rat.</a> Life Sci. 69, 1193-1202 (2001).</li>
<li>Smith, P. P., Hurtado, E., Smith, C. P., Boone, T. B., Somogyi, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+cystometric+methods+in+female+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol.+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Comparison of cystometric methods in female rats.</a> Neurourol. Urodyn. 27, 324-329 (2008).</li>
</ol>

אין ניגוד עניינים הצהיר.

הערכות Cystometric של תצורות ביולוגי לאחר ההשתלה הגדלת שלפוחית ​​השתן במודלים של בעלי חיים קטנים מייצג צעד חשוב אימות זיהוי מאפיינים מבניים מכני אופטימליות של עיצובים מטריקס לשימוש במצבים קליניים. במחקר זה, אנו מתארים שיטות ניתוחיות לביצוע הגדלת שלפוחית ​​השתן אצל עכברים וחולדות, כמו גם טכניקות cystometric לקבוע מאפיינים urodynamic של איברים מהונדסים עבור הערכות תפקודיות. יש לנו שימוש בטכניקות אלה בניסויים רבים מעורבים שני עכברים וחולדות, עם כל ניסוי בהיקף של 30 מכרסמים + ללא בעיות משמעותיות. מעבדת המחקר שלנו היא קונגלומרט מגוון של מדענים בסיסיים ומנתחים רופא, מנתחים עם לפחות 5-6 שנים של אימונים לאחר ניתוח בוגר ביצע בהיבטים פרוצדורליים של ניסויים אלו. ללא קשר לסוג ביולוגי בשימוש, די גדולfference משלים בין שלפוחית ​​השתן בחולדות לעומת עכברים הוא בגודל של שלפוחית ​​השתן. בשל גודל השלפוחית ​​קטן יותר, דיסקציה ושילוב של ביולוגי הוא יותר קשה מבחינה טכנית על העכבר. כדי לסייע להדמיה, מיקרוסקופ כירורגי ניתן להשתמש. מאז בגודל של שלפוחית ​​השתן בחולדות גדול, זה נוח יותר במצבים בהם אחד או יותר של ההליך חייב להתבצע על שלפוחית ​​השתן (כגון הגדלת והמיקום של קטטר cystostomy). בנוסף, הפרוטוקול הנ&quot;ל מתאר את השימוש של צינורות PE-50 עבור חולדה 13, עם זאת, צנתרים גודל גדולים עוד יותר, עד PE-100 נעשה שימוש, במיוחד עבור מחקרים ארוכי טווח 14. בעכברים, בקוטר קטן יותר, כגון צינורות PE-10 יכול להיות מנוצל 15,16, אך יש לזכור כי צינורות גמישים יותר, יותר לא יכול להעביר שינויים בלחץ כדי מתמר מדויק. כמו כן, שיטה חלופית להבטיח את הקטטר על dorsum (שלב 8 * לעיל) נעשית מיילCE עקב גודל קטן שלהם בגוף המחט עצה בוטה שווי IV הם מסורבלים מדי. החיסרון של זה הוא הצורך בהרדמה כדי לחלץ את סוף קטטר בכיס תת עורית לפני cystometry. מחקרים הראו כי בימים הראשונים הראשונים (0-4 ימים) לאחר מיקום צנתרים את, cystometry גילה לחצים בשלפוחית ​​השתן גבוהה עם פעילות יתר כרכים הרקה נמוכים. ממצאים אלה נראה לייצב סביב 6 עד היום 7 14,17 ועל כן, הוא כנראה עיתוי אידיאלי להערכת cystometric. עם זאת, רוב הדיווחים בספרות לבצע cystometry במהלך 3 הימים הראשונים של צנתור 18, זה מסביר את השינוי רחב בפרמטרים הנ&quot;ל ביחס לעת. השארת צנתר suprapubic למשך יותר מ -3 ימים נושא עמו נלוות כגון הסיכון של אבנים, שליפה, זיהום, המטוריה לבין חסימה של קטטר בפסולת. &lt;בכיתה P = &quot;jove_content&quot;&gt; שיעורי עירוי שונים במהלך cystometry תוארו מ 1-3mL/hr על עכברים 15,16 ו 10-11mL/hr לחולדות 13,19,20. שיעורי עירוי Supraphysiologic יכול לגרום ללחצים גבוהות שקר 14. אנו משתמשים בשיעור עירוי של 12.5 μL / דקה (0.75 mL / שעה) עבור עכברים 100 μL / דקה (6 מ&quot;ל / שעה) של חולדות ההתקנה שלנו, אבל שיעור נמוך יותר יכול גם להיות מנוצל. הטמפרטורה של תמיסת מלח פיזיולוגית צריך להיות לפחות בטמפרטורת החדר, אם כי מלוחים חמים (37 מעלות) הוא אופטימלי יותר כדי למנוע פעילות יתר בשלפוחית ​​השתן עורר עם הטמעת פתרון קר. ב cystometry ער, חשוב לאפשר ייצוב של דפוס הרקה כמו חיה בכלוב הופך להיות מותאם, אשר הניסיון שלנו דורש תקופה של ~ 10-20 דקות. בעקבות זאת, מחזורי השתנה רגילים ניתן להקליט על 45-120 דקות, או לכל הפחות 3-4 מחזורים הרקה. בעלי חיים יש לשים לב בזמן אמת מאז חיה הוא חופשי לזוזגרם וסיבוכים כגון סיבוב או מסתלסל של קטטר יכול לשנות ניתוח cystometric. הגבלת רעש סביבתי במהלך cystometry הוא הרצוי כדי להקטין תנועת בעלי חיים ממצאים הבאים. Cystometry מודע אין את הבעיות הנלוות כמו cystometry ער, אבל הרדמה רבים הוכחו לעכב את התכווצויות שלפוחית ​​השתן ספונטניות. עיכוב זה מתאים ישירות למשך הזמן הצפוי של פעולה של תרופות הרדמה, כלומר, כאשר שוך אפקט הרדמה, התכווצויות ספונטניות לחדש 14. יתר על כן, הלחצים הנמדדים כאשר שלפוחית ​​השתן עלה על גדותיו, היו מבחינה סטטיסטית גדולה יותר אצל חולדות הרדים, הן בחיים שלאחר המוות, המעיד על השפעה על תכונות ציות פסיבי של קיר שלפוחית ​​השתן. השפעה זו נתפסת עם 21 pentobarbital, קטמין, ו chloralose IM / IP, בנוסף halothane שאף intrathecal nesacaine 14. מחקר מקיף יותר של חומרי הרדמה שונים confirמ &#39;זה ממצא עם דיכוי של רפלקס השתנה עבור הרדמה הן שאיפת (ו isoflurane methoxyflurane) ו ברביטורטים (pentobarbital ו thiobutabarbital) תחת הרדמה רמות מתונות 17. תופעה זו נצפתה עם רמות האור אפילו הרגעה או הרדמה של עם תרופות כגון פנטניל, דרופרידול ו-דיאזפם קטמין, וכמו במחקר הקודם, גם את השפעת ההרדמה נרגע, כך גם עיכוב 17. על הליך זה, urethane זריקות intraperitoneal ניתן להשתמש שכן הוכח כי השתנה רפלקס נשמר גם בעת המאפשר הרדמה נאותה 17,22. יתר על כן, השפעה הוא ציין לגבי הלחצים השתנה 23. מיקום קטטר Suprapubic עבור cystometry מתואר כאן, מאז צנתור intraurethral הוכח יש יותר לחץ בשלפוחית ​​השתן עקומות ספיקות נמוכות בקנה אחד עם חסימת מוצא שלפוחית ​​השתן יחסית 24.יתר על כן, צנתור intraurethral אפשרית רק אצל בעלי חיים רדומה וגם אז, צנתור יכול להיות קשה, במיוחד מכרסמים עכברים זכרים. לסיכום, הבחירה של איזה דגם להשתמש עבור הגדלת שלפוחית ​​השתן ו / או ניתוח cystometric תלויה במטרות המחקר הספציפי. מבחינה טכנית מודל עכברוש בעל יתרון ברור על הסיבות שנדונו לעיל. עם זאת, המודל העכבר יכול לשמש במחקרים שבדקו את התפקידים של גנים המקודדים מוצרים ספציפיים הקצה במחלות של דרכי השתן, בשל הרגישות שלהם מניפולציה גנטית. זה לא אפשרי בדרך כלל עכברים. Cystometry ער מחקה באופן המדויק ביותר את מצב פיזיולוגי נורמלי, שבו בעלי החיים האלה עוברים מחזורים השתנה שלהם, ולכן, סביר לתת להגדרה פיזיולוגי אמין יותר של תפקוד שלפוחית ​​השתן. יתר על כן, משתנה בלבול של השפעות ישירות שלnesthetics על תפקוד שלפוחית ​​השתן הוא התחמק.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> חומרים: </td><td> תיאור / שימוש: </td></tr><tr><td> גילוח המזמרה </td><td> אופן ההכנה של עכברוש / עכבר לניתוח </td></tr><tr><td> בסדינים מעוקרים, בבטאדין, אתנול 70%, גזה סטרילית </td><td> הכנת בתחום כירורגית סטרילית </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td colspan="2"> מכשירים: </td></tr><tr><td> אזמל להב </td><td> החתך בעור </td></tr><tr><td> מלקחיים עם שיניים </td><td> מניפולציה העור </td></tr><tr><td> פיין מלקחיים </td><td> Atraumatic (ללא שיניים), לא serrations או עם serrations בסדר לתפעל </td></tr><tr><td> מחט קטנה הנהג </td><td> רקמת שארפ לנתיחה </td></tr><tr><td> מצנבאום מספריים </td><td> Bldder החתך </td></tr><tr><td> Tenotomy מספריים </td><td> על התפרים הכחשה ולפתח תת עורית לאunnel (קטטר cystostomy) </td></tr><tr><td> מהדק מעוגלים קטנים </td><td> מנהרה תת עורית (קטטר cystostomy) </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td colspan="2"> תפרים: </td></tr><tr><td> 6-0 פוליפרופילן התפרים </td><td> השהייה שלפוחית ​​השתן ואת התפרים תפר pursestring </td></tr><tr><td> 7-0 polyglactin תפר </td><td> השקה של הפיגום אל שלפוחית ​​השתן </td></tr><tr><td> Polyglactin 4-0 תפר </td><td> סגירת שריר / עור </td></tr><tr><td> 3-0 או 4-0 תפר המשי </td><td> קטטר קצה אבטחת לעור </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td colspan="2"> מחטים ומזרקים: </td></tr><tr><td> 18 מחט מד </td><td> פירסינג שלפוחית ​​השתן על קטטר cystostomy </td></tr><tr><td> 25 ו 30 כיול מחטים </td><td> בדיקות השתן של זליגת </td></tr><tr><td> 1 מ&quot;ל ו מלוחיםilled המזרק </td><td></td></tr><tr><td> 22 מד בוטה קצה המחט </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td colspan="2"> Cystostomy קטטר: </td></tr><tr><td> PE-50 צינורות </td><td></td></tr><tr><td> מצית </td><td> להבהיק PE-50 צינורות </td></tr><tr><td> מהדק קטן מעוגל </td><td> לפתח מנהרה תת עורית </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td colspan="2"> Cystometry: </td></tr><tr><td> MLT844 ADInstruments לכידת נתונים ותוכנה LabChart </td><td> נתונים בלחץ הרכישה </td></tr><tr><td> הרווארד 22 מזרק משאבה (הרווארד Apparatus, Holliston, MA) </td><td> עירוי נוזלים משאבה </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td colspan="2"> הרדמה (cystometry מודע): </td></tr><tr><td> אניsoflurane </td><td> אינדוקציה / תחזוקה של הרדמה כללית </td></tr><tr><td> Urethane </td><td> Unconconscious cystometry </td></tr><tr><td> Bupivicaine או שווה ערך </td><td> הרדמה מקומית </td></tr><tr><td> Meloxicam </td><td> לאחר הניתוח כאבים </td></tr><tr><td> עצירות </td><td> לאחר הניתוח כאבים </td></tr></tbody></table>

הערכת biomaterials עבור הגדלת שלפוחית ​​השתן באמצעות ניתוח cystometric על מודלים מכרסם שונים

Evaluation of Biomaterials for Bladder Augmentation using Cystometric Analyses in Various Rodent Models

תפקוד כליות ההתאפקות ואת השתן תלויים באופן קריטי על תפקוד תקין של שלפוחית ​​השתן, אשר מאחסן שתן בלחץ נמוך ומוציאה אותו עם בדיוק ניצח התכווצות. מספר חריגות אורולוגית מולד ונרכש כולל שסתומים השופכה האחורי, גידול שפיר של הערמונית, ועל שלפוחית ​​השתן neurogenic משני ספינה ביפידה / פגיעה בחוט השדרה יכול לגרום שיפוץ רקמות פתולוגי המוביל ציות לקוי ויכולת מופחתת 1. חסימה תפקודית או אנטומית בדרכי השתן קשורה לעתים קרובות עם תנאים אלה, והוא יכול להוביל בריחת שתן ופגיעה בכליות מ האחסון גדל ולחצים הרקה 2. השתלה כירורגית של חלקים במערכת העיכול כדי להרחיב את יכולת האיבר ולהפחית לחצים השלפוחית ​​מייצג את האופציה העיקרית טיפול כירורגי בהפרעות אלה, כאשר הניהול הרפואי נכשל 3. עם זאת, גישה זו היא לעכבאד על ידי הגבלה של רקמות התורם זמין, והיא קשורה עם סיבוכים משמעותיים, כולל דלקת בדרכי השתן כרונית, הפרעה מטבולית, היווצרות אבנים בדרכי השתן, וכן גידול ממאיר משני 4,5. המחקר הנוכחי בהנדסת רקמות שלפוחית ​​השתן מתמקדת בעיקר על זיהוי תצורות ביולוגי אשר יכול לתמוך והתחדשות של רקמות באתרים פגם. קונבנציונאלי 3-D ויוצר תשתית נגזר פולימרים טבעיים וסינתטיים, כגון submucosa המעי הדק פולי חומצה גליקולית הראו הצלחה מסוימת לטווח קצר בתמיכה התחדשות שריר urothelial וחלק, כמו גם להקל על האחסון גדל איבר קיבולת הן בבעלי חיים והן המרפאה 6,7. עם זאת, ליקויים תקינות הפיגום biocompatibility מכונות לעתים קרובות לגרום סיסטיק מזיקה 8, התכווצות השתל 9, 10 ו הסתיידות, ובכך מגדילים את הסיכון לאי ספיקת השתל וצורך FO-R ניתוחים משניים. בנוסף, שחזור של מאפיינים הרקה נורמלי ניצול מבנים סטנדרטיים ביולוגי עבור cystoplasty הגדלת טרם הושג, ולכן המחקר והפיתוח של מטריצות הרומן אשר יכול למלא תפקיד זה היא זקוקה. על מנת לפתח בהצלחה ולהעריך biomaterials אופטימליים הגדלת שלפוחית ​​השתן קליני, מחקר יעילות תחילה יש לבצע בבעלי חיים סטנדרטיים בשיטות כירורגיות מפורטים והערכות תוצאה תפקודית. דיווחנו בעבר על שימוש במודל הגדלת שלפוחית ​​השתן בעכברים כדי לקבוע את הפוטנציאל של fibroin מבוססי פיגומים משי לתווך התחדשות רקמות ותכונות הרקה תפקודית. 11,12 ניתוחים Cystometric של מודל זה הראו כי שינויים מבניים תכונות שתל מכני יכול להשפיע על תכונות urodynamic כתוצאה של שלפוחיות רקמות מהונדסות 11,12. חיובי correlations בין מידת התחדשות מטריקס בתיווך רקמות נקבע בהיסטולוגיה ותאימות יכולת תפקודית ומוערכת על ידי cystometry הודגמו במודל זה 11,12. תוצאות אלו ולכן עולה כי הערכות תפקודיות של תצורות ביולוגי בשלפוחית ​​מערכות מכרסמים הגדלת יכול להיות בפורמט שימושי להערכת נכסים הפיגום והקמת ב היתכנות vivo לפני מחקרים בבעלי חיים גדולים פריסה קליני. במחקר הנוכחי, נציג בשלבים שונים של ניתוח הגדלת שלפוחית ​​השתן בשני עכברים וחולדות באמצעות פיגומים משי ולהדגים טכניקות cystometry ער הרדים.

שלבי ניתוח של הגדלת שלפוחית ​​השתן מתוארים באמצעות 3-D פיגומים במודלים Murine וחולדה. כדי לבדוק את היעילות של תצורות ביולוגי לשימוש הגדלת שלפוחית ​​השתן, טכניקות cystometry הן ער הרדים מוצגים.

הערכת Biomaterials עבור הגדלת שלפוחית ​​השתן באמצעות ניתוח Cystometric על מודלים מכרסם שונים

התפקוד הכליתי והשליטה על השתן תלויים באופן קריטי בתפקוד תקין של שלפוחית השתן, המאחסנת שתן בלחץ נמוך ו...

מטרת הליך זה היא להעריך את השימוש בחומרי בנייה ביולוגיים (biomaterials) להרחבת שלפוחית השתן, באמצעות השגת נתונים פונקציונליים בציטומטריה. הדבר משיג תחילה על ידי קיבוע הפיגום (scaffold) לפגם שנוצר בשלפוחית השתן. השלב השני של ההליך הוא העברת צינור הציסטוסטומיה אל הבטן.השלב השלישי הוא הנחת צינור הציסטוסטומיה אל תוך השלפוחית המורחבת וקיבועו על גב בעל החיים. השלב הסופי הוא ביצוע ציטומטריה להערכת השלפוחית המורחבת מנקודת מבט תפקודית. בסופו של דבר, התוצאות יכולות להראות שינויים בקיבולת השלפוחית ובגמישותה (compliance), בלחצי הריקון, בזמני מחזור התזונה ובנפחי השארית לאחר ריקון, וזאת באמצעות ציטומטריה במצב ערות.ההשלכות של טכניקה זו הן רחבות ומתמשכות לטיפול באנומליות מולדות ונרכשות של שלפוחית השתן או השופכה, המובילות לירידה בקיבולת שלפוחית השתן, בגמישותה ובתפקודה הכללי. זאת מכיוון שביומטריאליים חדשניים המשמשים להרחבת שלפוחית השתן דורשים הערכה תפקודית. לאחר הכנת בעל החיים לניתוח בבטן, השתמש בסכין מנתחים כדי לבצע חתך בקו האמצע התחתון דרך העור.באמצעות פינצטה עם שיניים, הרימו את שריר הרקטוס (rectus muscle) ושחררו את פניו האחוריים של השריר באמצעות מספריים עדינים מסוג mets ו-balm; גזרו את שאר השריר בקו האמצע לאורך כל החתך העורי. הוציאו את שלפוחית השתן דרך פצע החתך. לאחר מכן, הניחו תפר דרך הדופן האחורית של שלפוחית השתן ולאחר מכן דרך הדופן הקדמית שלה. הניחו תפריים נוספים באופן לטראלי על שלפוחית השתן; אין לקשור תפרים אלו.כאשר התפרים מתוחים, לשלפוחית תהיה תצורה ריבועית בגודל של כסנטימטר רבוע, לאורך השלפוחית דרך הדופן הקדמית של השלפוחית, ממש מתחת לקודקוד השלפוחית לאורך קו האמצע. יש להיזהר שלא להפעיל מתיחות רבה מדי על תפרים אלה, שכן הם עלולים להימשך בקלות דרך רקמת השלפוחית. לשלב זה, מומלץ להשתמש בהגדלה באמצעות לולאה לצורך אנסטומוזיס של הפיגום. בעזרת מספריים עדינים, יש לקצץ את פיגום המשי לאזור המקורב של הפגם בשלפוחית.התחילו בפינה אחת של הפיגום ותפרו אותו לשלפוחית השתן בתפר רציף. כדי ליצור אטום למים לאורך כל היקף הפגם, חשוב מאוד שהמנתח יבצע אנסטומוזה אטומה למים וללא מתח בין הפיגום לשלפוחית השתן. פעולה זו תבטיח את הכלית השתן בתוך שלפוחית השתן, שכן כל דליפה תוך-peritoneal תוביל ככל הנראה למות בעל החיים.כמבחן, השתמש במחט היפודרמית בקוטר 30 gauge כדי למלא את שלפוחית השתן במים. אם נמצא דליפה, סגור אותה באמצעות תפר קטיע נוסף. לאחר מכן, החזר את השלפוחית המשוחזרת אל תוך הבטן לפני סגירת דופן הבטן.הזריק ביופיבקאין לשריר הרקטוס (rectus muscle) ולרקמה התת-עורית לצורך הרדמה מקומית וסגור את החתך. לאחר מכן, השתמש בתפר רציף כדי לקרב מחדש את שריר הרקטוס וסגור את העור בתפר רציף. לאחר ניקוי וייבוש של החתך, העבר את בעל החיים לכלוב חם ונקי להתאוששות מההרדמה.לפני התחלת הפעולה, צרו עיגון בקצה צינור PE 50 באורך 10 סנטימטר כדי שלא יחליק אל מחוץ לשלפוחית. עשו זאת על ידי הרחבת קצה הצינור בחשיפה עדינה ללהבה. שנית, ודאו שהצינור אינו חסום.הזריקו תמיסת מלח לקצה הלא מורחב וודאו שהיא זורמת. לאחר הכשרת בעל החיים לניתוח, ולפני חשיפת שלפוחית השתן, בצעו חתך של סנטימטר אחד בגב בין השכמות. באמצעות מספרי Metson balm, צרו מישור בין העור לשריר שמתחתיו.לאחר מכן, הנח את קצות המספריים במישור ופתח אותם כדי ליצור מנהרה תת-עורית אל הבטן הוונטרלית. לאחר מכן, הפוך את בעל החיים. חשוף את שלפוחית השתן והחזר אותה אל הבטן.בחזרה לחתך הגבי, מקם תפס קטן בתוך המנהרה תת-עורית. השתמש באצבעותיך כדי להגן על התוכן התוך-בטני, ולאחר מכן השתמש בקצות התפס כדי לחדור דרך דופן הבטן. כעת, תפוס את הקצה החלק של הפיתול המורחב בעזרת התפס ומשוך אותו חזרה דרך החתך הגבי.אין למשוך את קצה העוגן המורחב מעבר לדופן הבטן כאשר הצינור עובר דרך החתך. בצעו תפר מסביב (purse string stitch) בצמרת השלפוחית. השאירו תפיסה (clamp) קטנה על הקצה החופשי של התפר, כדי שלא יימשך בטעות דרך התפר.כמו כן, אין למתוח את התפר. כעת השתמשו במחט EU gauge 18 כדי לנקב את דופן השלפוחית במרכז תפר ה-purse string, במידה שתספיק להגיע לחלל השלפוחית (intraluminal). לאחר מכן, הכניסו את הפינצטה העדינה לפתח והרחיבו אותה בעדינות כדי להגדיל את החור.הכנס את הקצה המורחב של הקטטר אל תוך הפגם בשלפוחית השתן עד שיהיה בתוך הלומן (חלל הצינור). הדק את תפר שקית התבלין (purse string suture) סביב הקטטר וקשור אותו. לאחר מכן, לפף את קצה התפר החופשי פעם אחת סביב הקטטר וקשור אותו.כעת, בדקו את שלפוחית השתן על ידי הזרקה איטית של תמיסת סליין לתוכה דרך הצינור. אם יש זרימה מהשופכה, שאבו את הסליין כדי להמשיך את דחיסת השלפוחית. שחזרו את הפעולה. אם נמצאה דליפה, יש לתקן אותה באמצעות תפר, שכן דליפת שתן עלולה להוביל לתמותה.סגור את החתך הבטני כפי שהודגם קודם לכן. לאחר מכן, המשך בסגירת החתך הגבי. ההליך לסגירת החתך הגבי שונה עבור חולדות ועכברים.עבור חולדות, השתמשו במספריים כדי לחתוך את צינור הקטטר בגובה העור. לאחר מכן, הכניסו מחט בעלת קצה קהה במידה 22 לתוך הצינור. השתמשו בתפרים רציפים כדי לסגור את העור מעל הצינור, כאשר בסיס המחט נשאר בולט החוצה.כעת מקמו מכסה לקטטר ורידי (intravenous line cap) על המחט קהה הקצה והדביקו את קצה הקטטר לעור. לאחר מכן, נקו את אזור החתך והניחו לבעל החיים להתאושש בסביבה חמימה. בעכברים, יש לקבע את הקטטר באופן הבא: השאירו את הקטטר ארוך ואטמו את קצהו על ידי המסה בעזרת להבה.גלגלו את קצה הפחית והשאירו אותו בכיס תת-עורי בגב בעל החיים. סגרו את העור מעל הפחית בתפר רציף. לפני ביצוע אנליזה ציטרית, המתינו לפחות חמישה עד שבעה ימי התאוששות לאחר הניתוח עבור חולדות או עכברים.לאחר ההתאוששות ביום הצטומטריה. עבור עכברים, יש לפתוח תחילה את החתך הגבי רק תחת הרדמה ולהוציא את הצינור השזור מהכיס התת-עורי. לאחר הוצאת הצינור, סגרו חתך זה והמתינו עד שהעכבר יתעורר לחלוטין מההרדמה לפני ביצוע הצטומטריה; התחילו בהנחת בעלי החיים בכלובים מטבוליים התלויים מעל מאזניים.כעת גשו לקטטרים שמעל הע在他的 (supra pubic) באמצעות מחט במידה 27 המחוברת באמצעות T-tube למתמר הלחץ ולמשאבת ההזרקה. התחילו בהזרקת תמיסת מלח פיזיולוגית. המתינו עד ליתייצבות רישום דפוס הריקון.במהלך 10 עד 20 הדקות הבאות, לחץ השלפוחית יעלה תחילה, ולאחריו תתרחש השתנה. לאחר מכן, רשמו את מחזורי ההשתנה במשך 15 עד 120 דקות, או לפחות שלושה או ארבעה מחזורי השתנה במהלך הפרוצדורה. עקבו אחר כיפוף של הקטטר וסיבוכים אחרים.ניתן לנתח את רישומי הבדיקה העורודינמית כדי להפיק פרמטרים כגון נפחי התרוקנות, ציות (compliance), לחצי התרוקנות שיאיים בזמן התכווצות, מרווח, זמן מחזור הטיבול ונפחי שארית לאחר התרוקנות. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיה לכם הבנה טובה לגבי האופן שבו ניתן לבצע הרחבה של שלפוחית השתן באמצעות כל חומר ביומטרי. כמו כן, תדעו כיצד להעריך את התפקוד של שלפוחית שתן בכל מכרסם באמצעות ציטומטריה במצב ער ולא מורסן.

evaluation-biomaterials-for-bladder-augmentation-using-cystometric

Research

JoVE Journal

Bioengineering

הנדסה ביולוגית

שלפוחית ​​השתן עכבר הזרקת הקיר היא גישה יעילה orthotopically מחקר גזע שלפוחית ​​השתן התא וביולוגיה סרטן. שיטה זו microsurgical עדין ניתן לשלוט בטכניקה תרגול זהיר.

שלפוחית ​​השתן עכבר וול Injection

Cystometry היא טכניקה יעילה למדידת תפקוד שלפוחית ​​שתן של בעלי חיים...

השימוש בCystometry במכרסמים קטנים: חקר Chemosensation שלפוחית ​​השתן

הטכניקה המבוססת לחסן xenografts orthotopic פולשנית העיקרית לסרטן שלפוחית ​​השתן דורשת laparotomy והתגייסות של שלפוחית ​​השתן. הליך זה גורם תחלואה משמעותית בעכברים, הוא מאתגר מבחינה טכנית ודורש זמן רב. לפיכך, אנו פיתחנו דיוק גבוה, בגישה מלעורית ניצול הנחיית אולטרסאונד.

פולשנית הקמת Murine Orthotopic שלפוחית ​​השתן xenografts

מחקר זה מתאר את ההליכים כירורגית וטכניקות ניסיוני לביצוע cystometry ער בעכבר נע בחופשיות. בנוסף, הוא מספק ראיות ניסוייות לתמוך אופטימיזציה וסטנדרטיזציה.

הערכת הנוהל לביצוע Cystometry ער במודל עכבר

פרוטוקול זה מתאר לראשונה את הליך כירורגי של השתלה קבועה של צנתור שלפוחית השתן בשילוב עם אלקטרודות חיצוניות סוגר השופכה, ואת השני, את המדידה של הפונקציה של שלפוחית השתן או השופכה חיצוני טבעתי בבעלי ער מושתל.

מדידות סוגר השופכה Cystometric או חיצוני בחולדות ער עם קטטר מושתל ואלקטרודות ומאפשר למדידות חוזרות

מודל שלפוחית השתן מאפשר גישה ישירה לסובורוטנום כדי ללמוד מנגנונים מקומיים לוויסות זמינות מגשרת פעילה ביולוגית בסווברואלינום/לאמה קינאה במהלך אחסון ובדיקת שתן. ההכנה דומה מאוד למילוי של שלפוחית השתן והיא מאפשרת לבצע מחקרים בלחץ-נפח שיבוצעו ללא השפעות מערכתיות.

מבוזרים (Ex Vivo) מורלין מודל שלפוחית השתן עם השריר הדטראאור הוסר עבור גישה ישירה Suburothelium במהלך מילוי שלפוחית השתן

פרוטוקול זה מתאר את ההליך למדידת ריכוזי ATP בלומן של שלפוחית השתן במכרסם מורדם.

ב Vivo מדידה לומינלית של שחרור ATP אורותלי מעורר התנפחות במכרסמים

שתלים מהונדסים רקמות לניתוחי שחזור מתקדמים רק לעתים רחוקות מעבר לניסויים פרה-קליניים בשל תרבית אקס ויוו מייגעת, הכוללת רכיבי פיגומים מורכבים ויקרים. כאן, אנו מציגים הליך חד שלבי המיועד להטיית שתן עם פיגום צינורי נגיש על בסיס קולגן המכיל מיקרושתלים אוטולוגיים.

מודל כירורגי לצינורות שופתן מהונדסים רקמה חד-שלבית במיני-חזירים

פרוטוקול זה מספק מדריך לאיטום העור עם ציאנואקרילט למניעת ספיגת שתן על ידי פרווה ועור. הוא כולל הוראות למריחת הדבק על העור, השתלת קטטר שלפוחית השתן ואלקטרודות לציסטומטריה ורישום אלקטרומיוגרפיה של סוגר שופכה חיצוני בעכברים ערים.

אופטימיזציה של טכניקות אורודינמיות בעכבר לשיפור הדיוק 

מאמר זה מסביר מודל חדש של בעלי חיים המיועד לבדיקת חומרי השתלה תת-שופכה. במודל זה מושתל סרט רשת דרך חתך בנרתיק בכבשים, ובעלי החיים נצפים לאורך תקופה של שלושה חודשים. מודל זה חיוני מכיוון שהוא מניח את היסודות למחקר ניסיוני על שתלים.

טכניקה כירורגית חדשנית במודל כבשים להשתלת שתל בשופכה

למדו הערכת ביומטריאלים להגדלת שלפוחית השתן בדגמי מכרסמים באמצעות ציסטומטריה. שיטה זו מאפשרת מדידת נפח, תאימות ולחצי השתנה לניתוח פונקציונלי של השתן.

הערכת Biomaterials עבור הגדלת שלפוחית ​​השתן באמצעות ניתוח Cystometric על מודלים מכרסם שונים

גלה סרטונים נוספים

הערכת Biomaterials עבור הגדלת שלפוחית השתן באמצעות ניתוח Cystometric על מודלים מכרסם שונים