הערכת Biomaterials עבור הגדלת שלפוחית ​​השתן באמצעות ניתוח Cystometric על מודלים מכרסם שונים

מטרת פרוצדורה זו היא להעריך את השימוש בביומטריאלים להגדלת שלפוחית השתן באמצעות השגת נתונים תפקודיים בציטומטריה. דבר זה מושג תחילה על ידי קיבוע הפיגום (scaffold) לפגם שנוצר בשלפוחית השתן. השלב השני של הפרוצדורה הוא יצירת מנהרה עבור צינור הציסטוסטומיה אל הבטן.

השלב השלישי הוא הנחת צינור הציסטוסטומיה לתוך השלפוחית המוגדלת וקיבועו על גב בעל החיים. השלב הסופי הוא ביצוע ציטומטריה להערכת השלפוחית המוגדלת מנקודת מבט תפקודית. בסופו של דבר, התוצאות יכולות להראות שינויים בקיבולת השלפוחית ובגמישותה (compliance), בלחצי הריקון, בזמני מחזורי התזונה ובנפחי השארית לאחר ריקון באמצעות ציטומטריה במצב ערות.

ההשלכות של טכניקה זו חולשות לכיוון טיפול באנומליות מולדות ונרכשבות של השלפוחית או השופכה המובילות לפגיעה בקיבולת השלפוחית, בציות (compliance) ובתפקוד הכללי. זאת מכיוון שיש להעריך תפקודית חומרים ביולוגים חדשניים המשמשים להרחבת השלפוחית. לאחר הכנת בעל החיים לניתוח בטן, השתמש בסכין מנתחים כדי לבצע חתך בקו האמצע התחתון דרך העור.

באמצעות פינצטה שיניית, הרימו את שריר הרקטוס (rectus muscle) והפרידו את השטח האחורי של השריר בעזרת מספריים עדינים (fine mets and balm scissors). חתכו את יתרת השריר בקו האמצע לאורך כל החתך העורי. הוציאו את שלפוחית השתן דרך פצע החתך. הניחו תפר דרך הדופן האחורית של שלפוחית השתן ולאחר מכן דרך הדופן הקדמית של השלפוחית. הניחו תפרים נוספים בצדי השלפוחית; אין לקשור תפרים אלו.

כאשר התפרים מתוחים, לשלפוחית השתן יהיה מבנה ריבועי בגודל של כסמימטר רבוע, לאורך השלפוחית דרך דופן השלפוחית הקדמית, ממש מתחת לק会上ת השלפוחית לאורך קו האמצע. יש להיזהר שלא להפעיל מתיחה רבה מדי על תפרים אלו, שכן הם עלולים להימשך בקלות דרך רקמת השלפוחית. עבור שלב זה, מומלץ להשתמש בהגדלה באמצעות לופה לצורך האנסטומוזה של הפיגום. באמצעות מספריים עדינים, גזרו את פיגום המשי לאזור המקורב של הפגם בשלפוחית השתן.

התחילו בפינה אחת של הפיגום ותפרו אותו לשלפוחית השתן בתפר רציף. כדי ליצור אטימה הרמטית היטב מסביב לכל הפגם, חשוב מאוד שהמנתח יבצע אנסטומוזה אטומה למים וללא מתח של הפיגום לשלפוחית השתן. פעולה זו תבטיח שהשתן יישאר בתוך השלפוחית, שכן כל דליפה תוך-פריטוניאלית תגרום ככל הנראה למות בעלי החיים.

כבדיקה, השתמשו במחט היפודרמית במידה 30 כדי למלא את שלפוחית השתן במים. אם נמצאו דליפות, סגרו אותן בעזרת תפר נפרד נוסף. לאחר מכן, החזירו את השלפוחית המשוחזרת אל תוך הבטן לפני סגירת דופן הבטן.

הזריקו בופיוקאין (bupivacaine) לשריר הרקטוס ולרקמה התת-עורית לצורך הרדמה מקומית וסגרו את החתך. לאחר מכן, השתמשו בתפר רציף כדי לקרב מחדש את שריר הרקטוס וסגרו את העור בתפר רציף. לאחר ניקוי וייבוש של החתך, העבירו את בעל החיים לכלוב נקי וחם להתאוררות מההרדמה.

לפני התחלת הפעולה, צרו עיגון בקצה של צינור PE 50 באורך 10 centimeter כדי למנוע את החלקתו אל מחוץ לשלפוחית. עשו זאת על ידי הרחבת קצה הצינור באמצעות חשיפה עדינה ללהבה. שנית, ודאו שהצינור אינו חסום.

הזריקו תמיסת סליין לקצה הלא-מורחב וודאו שהנוזל זורם. לאחר הכנת בעל החיים לניתוח, ולפני חשיפת שלפוחית השתן, בצעו חתך של סנטימטר אחד בגב, בין השכמות. באמצעות מספרי Metson balm, צרו מישור בין העור לשריר שמתחתיו.

לאחר מכן, הכניסו את קצות המספריים למישור ופתחו אותם כדי ליצור מנהרה תת-עורית אל הבטן הוונטרלית. לאחר מכן, הפכו את בעל החיים. חשפו והחזירו את שלפוחית השתן אל הבטן.

בחזרה לחתך הגבי, הכניסו תפס קטן אל תוך התעלה התת-עורית. השתמשו באצבעותיכם כדי להגן על התוכן התוך-בטני, ולאחר מכן השתמשו בקצות התפס כדי לנקב את דופן הבטן. כעת, תפסו בעזרת התפס את הקצה החלק של הצינור המתרחב ומשכו אותו חזרה דרך החתך הגבי.

אין למשוך את קצה העוגן המורחב מעבר לדופן הבטן כאשר הפרוטורה עוברת דרך החתך. בצעו תפר מסוג "purse string" בצמרת השלפוחית. השאירו תפס קטן בקצה החופשי של התפר כדי למנוע את משיכתו השגגו דרך התפר.

בנוסף, אין למתוח את התפר. כעת השתמשו במחט EU gauge 18 כדי לנקב את דופן השלבח במרכז תפר ה"שקית" (purse string suture) עד לרמה שתבטיח חדירה לתוך הלומן. לאחר מכן, הכניסו פינצטה עדינה לתוך הפתח והרחיבו אותה בעדינות כדי להגדיל את החור.

הכנס את הקצה המורחב של הקטטר לתוך הפגם בשלפוחית השתן עד שיהיה הוא בתוך הלומן (intraluminal). הדק את תפר ה-purse string סביב הקטטר וקשור אותו. לאחר מכן, הwrapp את קצה התפר החופשי סביב הקטטר פעם אחת וקשור אותו.

כעת, בדקו את השלפוחית על ידי הזרקה איטית של תמיסת סלין לתוכה דרך הצינור. אם קיימת זרימה מהשופכה, שאבו את הסלין כדי להפחית את הלחץ בשלפוחית. אם נמצא דליפה, יש לתקנה באמצעות תפר; דליפת שתן עלולה להוביל לתמותה.

סגרו את החתך הבטני כפי שהודגם קודם לכן. לאחר מכן, המשיכו לסגירת החתך הגבי. תהליך סגירת החתך הגבי שונה עבור חולדות ועכברים.

עבור חולדות, השתמשו במספריים כדי לחתוך את צינור הקטטר בגובה העור. לאחר מכן, הכניסו מחט בעלת קצה קהה בכילוי (gauge) 22 אל תוך הצינור. השתמשו בתפרים רציפים כדי לסגור את העור מעל הצינור, והשאירו את בסיס המחט חارج.

כעת הניחו מכסה לקטטר תוורידי (intravenous line cap) על המחט קהה הקצה והצמידו את קצה הקטטר לעור. לאחר מכן, נקו את אזור החיתוך ואפשרו לבעל החיים להתאושש בסביבה חמה. בעכברים, יש לקבע את הקטטר באופן הבא: השאירו את הקטטר ארוך וסגרו את קצהו על ידי המסה באמצעות להבה.

גלגלו את קצה הפיתול והשאירו אותו בכיס התת-עורי בגב בעל החיים. סגרו את העור מעל הפיתול בתפר רציף. לפני ביצוע ניתוח ציטרי, המתינו לפחות חמישה עד שבעה ימים להחלמה לאחר הניתוח, הן בחולדות והן בעכברים.

לאחר ההתאוששות ביום הפרוצדורה של הציטומטריה. עבור עכברים, יש לפתוח תחילה את החתך הגבי תחת הרדמה ולהוציא את הפיתול של הצינורית מהכיס התת-עורי. לאחר הוצאת הצינורית, סגרו חתך זה והמתינו שהעכבר יתעורר לחלוטין מההרדמה לפני תחילת הציטומטריה; התחילו בהצבת בעלי החיים בכלובי מטבוליזם התלויות מעל משקלים.

כעת גשו לקטטרים הסופרה-פוביים (supra pubic) בעזרת מחט במידה 27 gauge המחוברת באמצעות T-tube למתמר הלחץ ולמשאבת ההזרקה. התחילו בהזרקת תמיסת סלין פיזיולוגית. המתינו עד להתייצבות של רישום דפוס ההשתנה.

במהלך 10 עד 20 הדקות הבאות, לחץ השלפוחית עולה תחילה, ולאחריו מתרחש ריקון. לאחר מכן, רשמו את מחזורי הריקון במשך 15 עד 120 דקות, או לפחות שלושה או ארבעה מחזורי ריקון במהלך הפרוצדורה. שימו לב לכיפוף של הקטטר ולסיבוכים אחרים.

ניתן לנתח את רישומי העורודינמיקה כדי להפיק פרמטרים כגון נפחי השתנה, ציות (compliance), לחצי השתנה שיאיים, התכווצות, מרווח, זמן מחזור מתן שתן ונפחי שארית לאחר השתנה. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיה לכם הבנה טובה לגבי האופן שבו ניתן לבצע הרחבה של השלפוחית באמצעות כל חומר ביולוגי. כמו כן, תדעו כיצד להעריך את התפקוד של שלפוחית של כל מכרסם באמצעות ציטומטריית מדידה במצב ער ללא הגבלה.