Name: השתלות מעי דק orthotopic בחולדות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-06T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: למד השתלת מעי דק אורתוטופית בחולדות לחקר תהליכים אימונולוגיים ודלקתיים. שיטה זו מאפשרת הישרדות ארוכת טווח ופונקציית שתל מיטבית עם ספיגת מזון מספקת.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. מבצע תורם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברוש התורם צריך להיות כל זמן צום של 24 שעות (גישה חופשיה לתמיסת מים / גלוקוז). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לגרום להרדמת משאיפת isoflurane, להתחיל עם 2% בריסוס רגיל, ולאחר מכן להפחית 1% לאחר ביצוע laparotomy. בצע קמצוץ בוהן כדי לבדוק תרופות הרגעה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הבטן ולנקות עם הכנת עור 3 פעמים (Kodan). ואז לבצע חתך החציוני לאחר תת עורית ממשל של משכך כאבים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר ההשתלה היא עטופה בגזה ספוגה מלח, להפריד את ההידבקויות הפיזיולוגיות בין הלבלב והמעי הגס עולה בעדינות עם Q-קצה (מתחת למיקרוסקופ הניתוחי עם גדלת 6x). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור ולחלק את כלי קוליק ileocecal וימין ואמצע באמצעות 7-0 משי. לאחר המעי הגס עולה פרוש לצד הימני של וריד mesenteric המעולה (SMV), כלי קוליק ileocecal, ימין ואמצע ניתן לזהות לקשירה וחלוקת שימוש 7-0 קשרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחזור בו הקיבה כלפי מעלה, כך שכל SMV הוא התיישר וחשוף. השתמש במהדק יתושים להכחשה. המהדק מוחזק על ידי מסת פלסטלינה נוצרה לצורה במידת צורך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור ולחלק את ורידי לבלב והתריסריון, המגיעים מSMV. כל ורידי לבלב והתריסריון, הקטנים שמקורם SMV חייבים להיות מזוהים בזהירות, גבעול עם 7-0 משי ומחולקים לפני שניתן תהיה להסיר את רקמת הלבלב מהשתל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור ולחלק את רקמת חיבור מאבד כולל כל lymphatics בין SMV ואב העורקים בבטן. עם השתל עדיין בצד ימין של הבטן, לאבד רקמת חיבור כולל כל lymphatics בין SMV ואב העורקים בבטן הוא נגיש. רקמת חיבור זו חייבת להיות גבעול באמצעות 7-0 משי ומחולקת להימנע מlymphorrhea לאחר ניתוח השתלת המעיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור ולחלק את עורק הכליה הימני. לאחר רקמת החיבור מתחלקת, עורק הכליה הימני הופך accessiblדואר ואת הגבעול ומחולק באמצעות 7-0 משי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערכתי heparinise העכברוש באמצעות 200 יחידות של הפרין iv דרך וריד הפין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור את העורקים השוליים, ולחלק את המעי הדק בצומת duodeno-jejunal ובאילאום המסוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אב עורקי גבעול proximally למקורו של SMA. וריד פורטל הצניעות הצטלב בנקודת המפגש עם וריד הטחול. אז השתל שנקטף עם מורכב pedicle כלי הדם של SMA עם קטע אב עורקים. </li></ol> 2. נוהל Backtable <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תנקב את השתל באמצעות 3 מ&quot;ל של אוניברסיטת ויסקונסין הפתרון (UW) ב 4 ° C באמצעות צינור אב העורקים ולהשקות לום המעיים מסוף jejunal עם 30 מ&quot;ל של פתרון N-uro Nebacetin ב 4 ° C (השקית לומן היא חובה) . </li></ol> מייד לאחר חילוץ השתל, צינור אב העורקים משמש לזלוף עם פתרון UW מצונן מ&quot;ל 3. לשם כך, 20 קטטר G iv עלמזרק 10 מ&quot;ל משמש. Perfusate צריך להיות שנצפה לזרום החוצה בחופשיות מוריד השער המחולק. להשקית מעי עם Nebacetin, מזרק 50 מ&quot;ל משמש. <ol start="2" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחסן את השתל בפתרון UW ב 4 מעלות צלזיוס במהלך תקופת ההכנה של הנמען. </li></ol> 3. מבצע נמען <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברוש הנמען צריך להיות כל זמן צום של 24 שעות (גישה חופשיה לתמיסת מים / גלוקוז). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לגרום להרדמת משאיפת isoflurane, להתחיל עם 2% בריסוס רגיל, ולאחר מכן להפחית 1% לאחר ביצוע laparotomy. בצע קמצוץ בוהן כדי לבדוק תרופות הרגעה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הבטן ולנקות עם הכנת עור 3 פעמים (Kodan). ואז לבצע חתך החציוני לאחר תת עורית של ממשל carprofen 5 מ&quot;ג / קילו sc לשיכוך כאבים במהלך ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עטוף את מעי הנמען בגזה ספוגה מלח רגילה ומניח אותו על חזו של הנמען. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח retroperitoneum בוטות עם Q-טיפים, ולחשוף abdomiאב עורקי nal ונחות וריד נבוב ממש מתחת כלי הכליות עד לרמה של כלי הכסל, אם יש צורך להשתמש גם microscissors. לקשור את tribuaries המותני ועמוד השדרה הקטנה מאב העורקים ווריד הנבוב באמצעות 7-0 משי כדי להימנע מאיבוד דם. (לשם כך, לשנות את הזום עד 16x מיקרוסקופ הניתוחי). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צולב לצבוט את אב העורקים וIVC מתחת כלי הכליה השמאליים proximally ומעל הסתעפות כסל distally באמצעות סרטוני microvessel. רק מהדק אחד משמש proximally כמו גם distally כדי לצבוט את שני הכולים בו זמנית. חתוך שני כלי anteriorly באמצעות microknife ולשטוף את הדם שנותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יצירת השקת קצה לצד בין מגזר שתל אב עורקים ואב עורקי infrarenal של הנמען באמצעות תפר Prolene 10-0 מתמשך .. בתחילה, השתל ימוקם בצד ימין של הבטן (ראש העכברוש מוצב בשעת 12 לפנות בוקר) כדי לבצע את תפרי הקיר האחוריים של ההשקה העורקת וקשירה של התפרים שהיו נמוכים יותר. הen, השתל התהפך לצד השמאלי של הבטן (ראש העכברוש מוצב בשעה 9) לחשוף ולתפור את קיר החזית של ההשקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השקת קצה לצד בין וריד שער השתל וIVC של הנמען מבוצעת גם על ידי הפעלה באמצעות תפרים 10-0 Prolene. עם העכברוש עדיין שוכב על צד (ראש בשעת העמדה 9), השתל ימוקם בצד השמאלי של הבטן ותפרים שהיו תחתונים ממוקמים. השקתו התחילה עם הקיר האחורי מבפנים הכלי. לאחר השהייה של התפר התחתון קשור, תפרי הקיר הקדמיים יכולים להתבצע מבחוץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את תפסי 1 דיסטלי, ואחריו את התפסים העליונים. כל דימום anastomotic נשלט על ידי לחץ ישיר באמצעות Q-טיפים. השתל צריך להיבדק לreperfusion שווה ומהיר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכרות המעי הדק של כל הנמען לאחר קשירה של כלי mesenteric. מקבלים לעבור enterectomy סיכום הביניים, שימור 2-3 סנטימטר של פרומעי צם ximal ו1 סנטימטר של אילאום דיסטלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שחזור המשכיות enteric ידי הפרוקסימלית (jejuno-jejunostomy) ודיסטלי (ileo-ileostomy) קצה לקצה anastomoses מעיים באמצעות תפר נקטע שכבה אחת עם 6-0 Monocryl. בערך 16 תפרים יש צורך להשלים את anastomoses. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השקיית חלל הצפק עם מלח רגיל עד נקי. לנהל 2 מ&quot;ל של תמיסת מלח הרגיל intraperitoneally להחלפת נוזלים. ואז לסגור את הבטן באמצעות תפרים רצופים עם 3-0 Vicryl לשכבת השריר בתוספת תפר עור מתמשך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתקופה שלאחר ניתוח החולדות צריכות להיות כל הזמן בצום (עם גישה לפתרון גלוקוז ומים) עבור 24 שעות נוספות ואז מחדש על החולדה צ&#39;או הסטנדרטי וכרצונך מים. שיכוך כאבים בcarprofen צריך להינתן במשך 3 ימים (ראה מינון בהמשך). </li></ol>

<ol><li>Abu-Elmagd, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Five+Hundred+Intestinal+and+Multivisceral+Transplantations+at+a+Single+Center%3A+Major+Advances+With+New+Challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Surg%22%5BJournal%5D)">Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges.</a> Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).</li>
<li>Berney, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+versus+systemic+drainage+of+small+bowel+allografts%3A+comparative+assessment+of+survival%2C+function%2C+rejection%2C+and+bacterial+translocation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Surg%22%5BJournal%5D)">Portal versus systemic drainage of small bowel allografts: comparative assessment of survival, function, rejection, and bacterial translocation.</a> J. Am. Coll. Surg. 195 (6), 804(2002).</li>
<li>Fishbein, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Intestinal transplantation.</a> N. Engl. J. Med. 361 (10), 998(2009).</li>
<li>Hernandez, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+portal+venous+outflow+better+than+systemic+venous+outflow+in+small+bowel+transplantation%3F+Experimental+study+in+syngeneic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pediatr.+Surg%22%5BJournal%5D)">Is portal venous outflow better than systemic venous outflow in small bowel transplantation? Experimental study in syngeneic rats.</a> J. Pediatr. Surg. 40 (2), 336(2005).</li>
<li>Monchik, G. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+small+bowel+in+the+rat%3A+technical+and+immunological+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Transplantation of small bowel in the rat: technical and immunological considerations.</a> Surgery. 70 (5), 693(1971).</li>
<li>Murase, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graft-versus-host+disease+after+brown+Norway-to-Lewis+and+Lewis-to-Brown+Norway+rat+intestinal+transplantation+under+FK506%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Graft-versus-host disease after brown Norway-to-Lewis and Lewis-to-Brown Norway rat intestinal transplantation under FK506.</a> Transplantation. 55 (1), 1(1993).</li>
<li>Murase, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunomodulation+of+intestinal+transplant+with+allograft+irradiation+and+simultaneous+donor+bone+marrow+infusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Immunomodulation of intestinal transplant with allograft irradiation and simultaneous donor bone marrow infusion.</a> Transplant Proc. 31 (1-2), 565(1999).</li>
<li>Pech, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perioperative+infliximab+application+ameliorates+acute+rejection+associated+inflammation+after+intestinal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Transplant%22%5BJournal%5D)">Perioperative infliximab application ameliorates acute rejection associated inflammation after intestinal transplantation.</a> Am. J. Transplant. 10 (11), 2431(2010).</li>
<li>Schaefer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resident+macrophages+are+involved+in+intestinal+transplantation-associated+inflammation+and+motoric+dysfunction+of+the+graft+muscularis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Resident macrophages are involved in intestinal transplantation-associated inflammation and motoric dysfunction of the graft muscularis.</a> Am J Transplant. 7 (5), 1062(2007).</li>
<li>Schaefer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+and+impact+of+organ+harvesting+and+ischemia-reperfusion+injury+within+the+graft+muscularis+in+rat+small+bowel+transplantation.+Transplant%5BTitle%5D)+AND+%22Proc%22%5BJournal%5D)">Mechanism and impact of organ harvesting and ischemia-reperfusion injury within the graft muscularis in rat small bowel transplantation. Transplant.</a> Proc. 38 (6), 1821(2006).</li>
<li>Schaefer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+rejection+and+the+muscularis+propria+after+intestinal+transplantation%3A+the+alloresponse%2C+inflammation%2C+and+smooth+muscle+function%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Acute rejection and the muscularis propria after intestinal transplantation: the alloresponse, inflammation, and smooth muscle function.</a> Transplantation. 85 (10), 1465(2008).</li>
<li>Xue, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+experience+of+refined+3-cuff+technique+for+orthotopic+small-bowel+transplantation+in+rat%3A+a+report+of+270+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Surg%22%5BJournal%5D)">Surgical experience of refined 3-cuff technique for orthotopic small-bowel transplantation in rat: a report of 270 cases.</a> Am. J. Surg. 198 (1), 110(2009).</li>
<li>Zhang, X. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+techniques+in+rat+heterotopic+small+bowel+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant.+Proc%22%5BJournal%5D)">Simplified techniques in rat heterotopic small bowel transplantation.</a> Transplant. Proc. 38 (6), 1840(2006).</li>
<li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+establishment+of+a+new+en+bloc+combined+liver-small+bowel+transplantation+model+in+rats.+Transplant%5BTitle%5D)+AND+%22Proc%22%5BJournal%5D)">The establishment of a new en bloc combined liver-small bowel transplantation model in rats. Transplant.</a> Proc. 39 (1), 278(2007).</li>
</ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

בעוד מודלי השתלת מעיים בעכברים כבר תוארו כבר ב5 1970ies רוב הדגמים המועסקים לאחרונה כרוך השתלת מעי heterotopic בטכניקות שונות 13. בעוד הליכי heterotopic בכלל יש יתרון של טכניקות מייקרו קלות ונגישות קלה יותר של השתל לצורך ההערכה, השתלת מעיים heterotopic יש חסרון הגדול של לא לוקח בחשבון את יחסי הגומלין המרובים של המעי הדק המושתל וההיבטים הפונקציונליים שלה כמו פעילות התכווצות ו תפקוד מחסום רירית המאפיין את שתל orthotopic בהקשר של מארח עצום של commensals ומזיקים....

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם המגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות (אופציונלי) </td></tr><tr><td> אוניברסיטת ויסקונסין (UW) פתרון (ViaSpan) </td><td> בריסטול מאיירס סקוויב </td><td></td><td></td></tr><tr><td> פתרון uro-N Nebacetin </td><td> Nycomed </td><td> 6967855 </td><td></td></tr><tr><td> אמפיצילין </td><td> רציופארם </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Carprofen (Rimadyl) </td><td> פייזר </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Prolene 10-0 תפר unresorbable </td><td> Ethicon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Monocryl 6-0 תפר resorbable </td><td> Ethicon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Vicryl 3-0 תפר resorbable </td><td> Ethicon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> ד הצנתר G 20 מ&quot;מ 1.1x33 </td><td> בראון </td><td></td><td></td></tr><tr><td> צנתר 22 מ&quot;מ 0.9x25 ד G </td><td> בראון </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Kodan העור Prep </td><td> Schülke </td><td></td><td></td></tr><tr><td> NaCl 0.9% פתרון עירוי </td><td> בראון </td><td></td><td></td></tr><tr><td> מלקחיים מעוגלים קטן </td><td> FineScienceTools </td><td> 11009-13 </td><td></td></tr><tr><td> מלקחי Micro מעוקלים </td><td> Aesculap </td><td> BD 333 </td><td></td></tr><tr><td> מלקחי Micro מעוקלים </td><td> Aesculap </td><td> FD281R </td><td></td></tr><tr><td> מייקרו מלקחיים ישר 1 </td><td> WPI </td><td> 5 </td><td></td></tr><tr><td> מייקרו מלקחיים ישר 2 </td><td> WPI </td><td> 2 </td><td></td></tr><tr><td> בעל מחט מייקרו </td><td> WPI </td> &lt;td&gt; 14081 </td><td></td></tr><tr><td> מספרי מייקרו </td><td> FineScienceTools </td><td> 15006-09 </td><td></td></tr><tr><td> מייקרו אזמל </td><td> מאני </td><td> סכין העינים </td><td></td></tr><tr><td> מהדק מייקרו </td><td> Aesculap </td><td> FB329R </td><td></td></tr></tbody></table>

השתלות מעי דק orthotopic בחולדות

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

השתלת מעי דק הפכה אפשרות קלינית מקובלת לחולים עם תסמונת מעי קצר וכישלון של תזונת Parenteral (כישלון מעיים בלתי הפיך). במרכזים מיוחדים השתפר אופרטיבי ואסטרטגיות ניהול הובילו למטופל מצוין לטווח קצר ובינוני טווח והישרדות שתל תוך מתן איכות חיים גבוהה 1,3. שלא כמו בהשתלה הנפוצה יותר של איברים מוצקים אחרים (כלומר לב, כבד) רב מנגנון בסיסי של תפקוד שתל ושינויים חיסוניים הנגרם על ידי השתלת מעי אינו ידוע לחלוטין 6,7. פרקים של דחייה חריפה, אלח דם וכישלון שתל הכרוני הם המכשולים העיקריים עדיין תורמים לתוצאות לטווח ארוכות פחות טובות ופוגעים תעסוקה נרחבת יותר של ההליך, למרות מספר גדל והולך של חולים על תזונת Parenteral הבית שהיה פוטנציאל להפיק תועלת מהשתלה מסוג זה. המעי הדק מכילמספר גדול של הנוסעים leucocytes נפוץ המכונה חלק ממערכת הלימפה קשורה (גאלט) להיות חלק זה מהסיבה לimmunogenity הגבוה של שתל מעי המעי. הנוכחות והקרבה של commensals ומזיקים רבים בבטן, מסבירות את החומרה של אפיזודות אלח דם פעם שלמות ריריות שתל נפגמת (למשל על ידי דחייה). כדי לקדם את התחום של נתוני מעיים וmultiorgan השתלה יותר שנוצרו ממודלים של בעלי חיים אמינים וריאליים הוא זקוקים. המודל אמור בהסכם זה משלב את שניהם אמינות והיתכנות הוקמה פעם אחת בצורה סטנדרטית ויכול לספק תובנה חשובה במנגנונים המורכבים המולקולריים, התאיים ופונקציונליים שמופעלים על ידי השתלת מעיים. אנחנו השתמשנו בהצלחה ומעודנת ההליך המתואר על יותר מ 5 שנים במעבדה שלנו 8-11. פורמט וידאו מבוסס יופיטר הוא שימושי במיוחד כדי להדגים את proce המורכבדורה ולהימנע ממלכודות ראשוניות לקבוצות מתכננות להקים מודל מכרסם orthotopic חוקר השתלת מעיים.

כמובן שלאחר ניתוח רגיל החיות המושתלות צריכות להתאושש במהירות מההליך תחת מנורת חום לכ 1 שעות. היפותרמיה היא אחד הגורמים עיקריים לתמותה לאחר ניתוח ויש להימנע בזהירות תוך ואחרי ניתוח. הפסדי נוזלים במהלך ניתוח חייבים להיות מוחלפים על ידי הזרקה של תמיסת מלח רגילה sc 2.5 מ&quot;ל בתוספת גלוקוז מ&quot;ל 2.5 5% כל 8 שעות ל24 השעות הראשונות. החולדות צריכות גם גישה חופשיה לפתרון גלוקוז (או דיאטת ג&#39;ל) והמים לפו 24 השעות לא...

השתלת מעי דק הפכה אפשרות טיפול מקובלת לחולים עם אי ספיקת מעיים בלתי הפיכה. מודל ניסיוני שלנו של השתלת מעי דק orthotopic בחולדות משמש ככלי אמין לטיפול חיסוני בסיסיות ותהליכים דלקתיים שיסבכו השתלת מעיים.

השתלת מעי דק הפכה לאופציה קלינית מקובלת עבור מטופלים עם תסמונת מעי קצר וכשל של תזונה פרינטרנלית...

המטרה הכללית של הליך זה היא לבצע השתלה אורתוטופית של המעי בחולדה. פעולה זו משיגה תחילה באמצעות השגת המעי הדק מבעל החיים התורם. השלב השני של ההליך הוא הכנת השתל המעי, המכונה "הכנה על שולחן העבודה" (back table preparation), טרם ההשתלה.השלב השלישי של הפרוצדורה הוא השתלה באמצעות ביצוע אנסטומוזה עורקית וורידית, ולאחריה רפרפוזיה של השתל. השלב הסופי של הפרוצדורה הוא השבת הרצף האנטרלי על ידי השלמת אנסטומוזה מעיית בשיטה של קצה לקצה (end-to-end), בהתאם לסטומה הגסטרית ולאילאו-אילאוסטומיה, בהתאמה. בסופו של דבר, ניתן להשיג תוצאות המראות הישרדות לטווח ארוך של בעלי חיים שהושתלו באופן איזוגני, הודות לתפקוד מצוין של השתל וספיגת רכיבים תזונתיים דרך הפה בכמויות מספיקות בקומבינציות אלרגניות.עם זאת, ניתן לחקור היבטים שונים של דחייה מעיית חריפה וכרונית. שיטה זו יכולה לסייע במתן תשובות לשאלות מפתח בתחום השתמנות המעי, כגון מנגנוני הדחייה החריפה והכרונית העשויים להוביל לכשל של הש transplanted ולפגוע בתוצאה הקלינית. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית.השלבים המכריעים קשים ללמידה, בעיקר בשל גודלן הקטן של כלי הדם והצורך בשימוש בטכניקה מיקרוכירורגית מהירה ומדויקת כדי לצמצם את זמן האיסכמיה החמה. לפני הניתוח בחולדה התורמת, יש להשאיבה אותה תוך גישה חופשית למים ולתמיסת גלוקוז למשך 24 שעות. לאחר הרדמת בעל החיים באמצעות שאיפת 2% isof fluorine, יש לבדוק את רמת הסדציה על ידי ביצוע בדיקת רפלקס באצבע.צבטו, גלחו את הבטן וחטאו את העור שלוש פעמים באמצעות תכשיר להכנת העור. לאחר מכן, בצעו חתך חצקי (median incision) באמצעות סכין מנתחים, לאחר מתן משכך כאבים תת-עורי. בצעו חתך חצקי תחת מיקרוסקופ כירורגי.עטפו את המעי הדק בגזה ספוגה בסליין והניחו אותו בצד השמאלי של הבטן עם פתה סטרילית וסמרטוט. הפרידו בעדינות את ההדבקות הפיזיולוגיות בין הלבלב למעי הגס העולה באמצעות מיקרומספריים במידת הצורך, תוך שימוש בחוטי משי 7/0 עם קשרים בצורת שמינית, וחתכו את כלי הדם האיליאו-צקליים ואת כלי הדם הקוליות הימנית והמרכזית לאחר הרחקת המעי הגס העולה לצד הימני של הווריד המזנטרי העליון (SMV) באמצעות קשרי 7/0 בצורת שמינית; חתכו את כלי הדם הקוליות הימנית והמרכזית באמצעות תפסנית מוסקיטו המוחזקת במקומה על ידי פלסטר המעוצב לצורך כך. משכו את הקיבה כלפי מעלה כך שכל ה-SMV ייושר ויהיה חשוף.בשלב הבא, קשרו ונתקו את הוורידים הלבלביים-תריסריים המגיעים מה-SMV. לאחר מכן, הפכו את הש transplanted אל הצד הימני של הבטן; כאשר הש transplanted נמצא בצד ימין של הבטן, רקמת החיבור הרפויה, כולל כל הלימפות בין ה-SMV לבין הבטן, הופכת נגישה. השתמשו במשי 7/0 כדי לקשור את הרקמה ולנתק אותה, כדי למנוע נזילה לימפתית לאחר הניתוח מהש transplanted המעי.שנו את רקמת החיבור, חלקו, קשרו ונתקו את העורק הכליתי הימני. הגהפיני את החולדה באופן סיסטמי באמצעות 200 units של heparin ב-IV דרך הווריד הפנימי של האיבר הזכר. קשרו את העורקים השוליים ונתקו את המעי הדק בחיבור ה-duodenojejunal ובאבסוף האיליאום.בצעו ליגציה של האורטה פרוקסימלית למקור ה-SMA, וחתכו את הווריד הפורטלי בנקודת ההשכפה עם הווריד הספלני. קצרו את השטלים יחד עם הגבעול הווסקולרי שלו, המורכב מה-SMA ומסגמנט של האורטה. השתמשו בקטטר IV במידה של 20 gauge על מזרק של 10 milliliter דרך התעלה האורטלית.בצעו פרפוזיה לשטבל בעזרת 3 mL של תמיסת University of Wisconsin מקוררת או uw. לאחר מכן, באמצעות מזרק של 50 mL, שטפו את לומן המעי מקצה ה-AL בעזרת 30 mL של תמיסת cetin קרה במהלך הכנת מקבל השתל. אחסנו את השטבל בתמיסת UW קרה לפני הניתוח בחולדה המקבלת.השאירו את בעל החיים בצום עם גישה חופשית לתמיסת גלוקוז במים למשך 24 שעות לאחר הרדמתו ב-2% isof fluorine. ניתן carprofen לאנלגזיה תוך-ניתוחית. גלחו את הבטן וחטאו את העור שלוש פעמים באמצעות תמיסת חיטוי לעור.לאחר מכן בצעו חתך חצצי (median incision). עטפו את מעי המקבל ב-GREs ספוגים בתמיסת סלין (normal saline) והניחו אותו על חזה המקבל. השתמשו בתמניהים סטריליים ובמטבון כדי לפתוח בעדינות את הרטרו-פריטוניאום (retroperitoneum) ולחשוף את אבי העורקים הבטני ואת הווריד הנבוב התחתון (inferior vena cava) ממש מתחת לכלי הדם הכליתיים, ועד למפלס של כלי הדם האיליאקים, כדי למנוע איבוד דם כפי שמוצג בדמות 8.סגור בעזרת קליפסים את העורקים והורידים המותניים והשדרתיים הקטנים המסתעפים מהאורטה ומהווריד הנבוב (vena cava). בצע סגירה של האורטה וה-IVC מתחת לכלי הדם הכליתיים השמאליים, פרוקסימלית, ומעל לפיצול האיליאקי, דיסטלית. לאחר מכן, חתוך את הדופן הקדמית של שני כלי הדם ושטוף את שאריות הדם.העבירו את הש transplanted למקום הניתוח כדי לבצע אנסטומוזיס מקצה לקצה (end-to-end anastomosis) בין מקטע האב coleta של הש transplanted לבין אבי העורקים התת-כלייתי (infrarenal aorta) של המקבל. השתמשו בתפר פרולין (prolene) רציף במידה 0. מקמו את הש transplanted בצד ימין של הבטן, בצעו את התפרי של הדופן האחורית באנסטומוזיס העורקי וקשרו את תפר העגינה (stay suture) התחתון.לאחר מכן, העבירו את השתול לצד שמאל של הבטן כדי לחשוף את הדופן הקדמית של האנסטומוזיס, כאשר השתול עדיין נמצא בצד שמאל של הבטן. התחילו את האנסטומוזיס בשיטת Porter cable על ידי הנחת תפר קיבוע (stay suture) תחתון. לאחר מכן, באמצעות פרולין 10 zero, בצעו אנסטומוזיס מקצה לקצה (end-to-end) בין הווריד הפורטלי של השתול לבין ה-IVC של המקבל.לאחר מכן, מהצד החיצוני, קבעו את תפרי הדופן הקדמית כאשר כל התפרים במקומם. הסירו את התסמיכים הדיסטליים ולאחריהם את התסמיכים העליונים. השתמשו בלחץ ישיר עם מקלוני צמר כדי לשלוט בכל דימום אנסטומוטי.בדוק את הש移植 עבור רפרופוזיה (reperfusion) שווה ומהירה לאחר קשירה של כלי הדם המזנטריים, הסר את כל המעי הדק של המקבל, תוך שימור של שניים עד שלושה סנטימטרים של תחילת התריסריון (proximal jejunum) וסנטימטר אחד של סוף העיליאום (distal ileum) באמצעות כ-16 תפרים רציפים מסוג Monocryl 6/0. שחזר את הרציפות המעית באמצעות אנסטומוזיס (anastomosis) קצה-לקצה של הקצוות הפרוקסימליים והדיסטליים. שטוף את חלל הפריטונאום בתמיסת סליין נורמלית עד להשגת ניקיון.החדירו שני מיליליטרים של תמיסת סליין נורמלית באופן אינטריפרואיטוני להחלפת נוזלים. לאחר מכן, השתמשו בחוט Vicryl 3-0 עבור שכבת השריר, ובתוספת תפר עור רציף לסגירת הבטן לאחר הניתוח. להשגחה על התאוששות מהירה, הניחו את החולדה תחת מנורת חימום.יש להשאיר את בעל החיים בצום עם גישה למים ולתמיסת גלוקוז, ולהחדיר זריקות תת-עוריות של תמיסת סליין נורמלית וגלוקוז מדי שמונה שעות במהלך 24 השעות הראשונות; ביום השני, יש להחזירם למשטר של מזון רגיל למכרסמים ומים באופן חופשי (ad libitum) לאחר הליך הש transplantation. המראה הכללי, מצב הפרווה ומראה הריריות צריכים להיות נורמליים לאחר היום הראשון לאחר הניתוח. רמת הפעילות צריכה לחזור למצב שהיה לפני הניתוח.עם זאת, התנהגות אпатиית או חריגה מעידה על סיבוכים כירורגיים מוקדמים. איור זה מציג את המשקל הממוצע לאחר ניתוח בעקבות השתקת מעי דק אורתוטופית. לאחר ירידה ראשונית של עד 20% ממשקל הגוף, החולדות יחלו לעלות שוב במשקל סביב היום השישי עד השמיני לאחר הניתוח, ויגיעו לכ-90% ממשקלן לפני הניתוח בדרך כלל סביב היום ה-14 לאחר הניתוח.בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב להתמקד במינימום איבוד דם ובזמן קצר של איסכמיה חמה. השגת הצלחה תלויה בזמן שעבר מאז הפיתוח. טכניקה זו סללה את הדרך עבור חוקרים בתחום השתלות המעיים לבחון דחייה חריפה וכרונית במודל של מכרסמים.

orthotopic-small-bowel-transplantation-in-rats

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

המעי הדק העכבר מודל השתלת הוכר ככלי חשוב ללמוד mechanismes הדחייה החיסונית מסך תרופות מדכאות חיסון חדש. עם זאת, מודל זה הוא מוגבל לשימוש בגלל טכניקות מעורב הוא אתגר מאוד מבחינה טכנית. עכשיו אנחנו מציגים את הטכניקה שונה.

מעי והשתלות קטן עכברים

וידאו זה מדגים את מודל orthotopic השתלת מסתם אאורטלי כמודל פשוט ללמוד את הפיתוח של vasculopathy ההשתלה (TVP) בחולדות.

Orthotopic אבי העורקים להשתלות: מודל עכברוש לחקר התפתחות vasculopathy כרונית

כאן אנו מתארים את העכברוש orthotopic איבר האחוריות, הליך ההשתלה, אשר נראה כי תקן...

השתלת orthotopic לימב הינד-בחולדות

אנו מציגים גרסה לא קל ליצור בטכניקה של שתי השרוול קלאסית השתלת כבד orthotopic בחולדה.

השתלת כבד Orthotopic בחולדות

השתלת הכבד orthotopic בחולדות היא מודל ניסיון הכרחי למחקר ביו. כאן אנו מציגים הניתוחים שלנו להשתלת כבד חולדת orthotopic עם שחזור עורק כבד באמצעות 50% שתל חלקי.

ניתוחים למודל חולדה של השתלה כבדה orthotopic חלקית עם שחזור עורקית כבדיה

השחזור של הווריד הנבוב suprahepatic (SHVC) נשאר צעד קשה בהשתלת הכבד orthotopic חולדה. במאמר זה אנו מראים פרוטוקול צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים.

מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic

מטרת כתב היד והפרוטוקול היא להסביר ולהדגים בפרוטרוט את ההליך הכירורגי של השתלת כליות אורתוגרפית בחולדות. שיטה זו היא פשוטה כדי להשיג את הפרזיה הנכונה של כליה התורם ולקצר את הזמן הreperfusion באמצעות שימוש בטכניקת ורידי השרוול וההשקה.

אורתובנושא חולדה השתלת כליה: מגישת רומן וכירורגית פשוטה

אנו מתארים מודל של הטרוהנושא השתלת לב הבטן בחולדות, רומז שינויים של אסטרטגיות נוכחיות, אשר להוביל גישה כירורגית פשוטה. בנוסף, אנו מתארים מודל דחייה הרומן על-ידי הזרקה באוזן של תאים חיוניים שרירי הלב, המאפשר ניתוח נוסף השתלת אימונולוגיים בחולדות.

מודל אימונוולוגי עבור הלב הטרוולפית ושריר הלב השתלת תא בחולדות

מודל השתלת הכליה האורתטופית של חולדה תורם לחקר המנגנון של דחיית כליות. המודל הנוכחי מגביר את הישרדותם של המושתלים ללא הפרעה לאספקת הדם ולרפלוקס ורידי של פלג הגוף התחתון באמצעות אנסטומוזיס מקצה לקצה של השתלת כליות ושיטת "מנהרה" מקצה לקצה של אנסטומוזיס בשלפוחית השתן של השופכן.

מודל השתלת כליה אורתוטופית של חולדה לדחיית כליאה

פרוטוקול זה מתאר טכניקה משופרת להשתלת ריאה שמאלית אורתוטופית בחולדות, תוך התמקדות בהפחתת קושי תפעולי ושיפור שיעורי ההישרדות.

השתלת ריאה שמאלית אורתוטופית בחולדות

פרוטוקול זה מתאר מודל השתלת מעיים מבוסס חולדה עם איליאוסטומיה להערכת מהלך הזמן של התערבות תרופתית בדחיית השתל.

מודל דחיית שתל חולדה של השתלת מעיים עם איליאוסטומיה חיצונית להערכת פרוגנוזה אורכית

למד השתלת מעי דק אורתוטופית בחולדות לחקר תהליכים אימונולוגיים ודלקתיים. שיטה זו מאפשרת הישרדות ארוכת טווח ופונקציית שתל מיטבית עם ספיגת מזון מספקת.

השתלות מעי דק orthotopic בחולדות

גלה סרטונים נוספים