Name: השתלת כבד Orthotopic בחולדות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 25 s
Description: למדו טכניקה משופצת להשתלת כבד אורתוטופית בעכברושים, הכוללת ניתוח מיקרו-כירורגי מדויק ומהיר. שיטה זו משפרת את יעילות השתלת הכבד ומספקת כלי אימון חשוב לניתוחים מיקרו-כירורגיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

CT נתמך על ידי השוויצרי הקרן הלאומית למדע (דירוג מענק 3,232,230-126233). המחקר נתמך על ידי קרן Artères, קרן Astellas אירופה וקרן Boninchi.

1. התורם מבצע <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים חולדות זכרים במשקל של 200 ± 20 גרם עם isoflurane חרוט על המסכה (3% לזירוז, 2% במהלך המבצע, 1 ליטר / דקה זרימת אוויר, FiO2 70%). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע laparotomy חציון רוחבי גדול לצרוב את כלי הבטן העליונים בשני הצדדים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים רצועה falciform, ולהפריד את הווריד סרעפתי שמאל מ suprehepatic הווריד הנבוב. בסופו של דבר, לחלק את הווריד סרעפתי בין שני 7-0 ליגטורות משי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים את המשולש השמאלי הכבד הקיבה הרצועות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחלק את הרצועה hepato-הוושט ואת העורק בין 7-0 ליגטורות (קרישה היא אלטרנטיבה חוקית). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבודד את infrahepatic הווריד הנבוב עד וריד הכליה השמאלית. הפרד את הווריד כליות כבר מן הרקמות הסובבות ולחלק אותו בין 10-0 ו 7-0 ליגטורה, על קצות הפרוקסימלית ומ הדיסטלי שלה, בהתאמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלקים את הווריד הנכון בין suprarenal ligatur 7-0es ללא תשלום כבד מן הרצועות האחוריים שלה על ידי חיתוך עדין תחת תאוצה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבודד את הווריד gastrosplenic ולחלק אותו בין 10-0 ו 7-0 ליגטורה, על קצות הפרוקסימלית ומ הדיסטלי שלה, בהתאמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלקים את עורק הכבד ראוי בין 7-0 קשרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבודד את הווריד duodeno-הלבלב לחלק אותו בין 10-0 ו 7-0 ליגטורה, בצד הפרוקסימלי ו הדיסטלי שלה, בהתאמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס 22g, 3.5 סטנט מ&quot;מ לתוך צינור המרה המשותף על ידי תרגול חתך קטן במרחק 1 ס&quot;מ מן hilum הכבד. להבטיח את סטנט בעמדה עם הקשירה 7-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק 10 UI של הפרין, בדילול אל מ&quot;ל 1 של מלח רגיל, דרך וריד הגב של הפין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Cannulate פורטה הנבוב (במידת האפשר מן hilum) עם מחט 21G בעדינות לשטוף את הכבד עם 20 מ&quot;ל של חומצת חלב קר הצלצול (או פתרונות שימור אחרים). יחד עם זאת, לחתוך את הווריד הנבוב מתחת ורידים כליות לאפשר outfl הולםאיי. זלוף כבד קר צריך להימשך בין שעה 2 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים את פורטה הנבוב וריד מתחת duodeno-הלבלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים את צינור המרה המשותף distally כדי התלייה סביב הסטנט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השלם את החתך של infrahepatic הווריד הנבוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים את הווריד הנבוב suprahepatic רזה כדי הסרעפת ולהסיר את הכבד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את הכבד לתוך הכיור מלא לקטט הצלצול קר להניח את הכיור על משטח קרח. </li></ol> 2. שתל הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את פורטה הנבוב לתוך השרוול שלה, אז אוורט כלי מסביב לקצה לחשוף את אינטימה. להבטיח את קטע everted על השרוול עם הקשירה 7-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחזור על אותה פעולה על infrahepatic הווריד הנבוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם מהדק מיקרו (4-6 מ&quot;מ אורך) מצד הפרוקסימלי של infrahepatic הווריד הנבוב. פעולה זו נמנע איבוד דם לאחר reperfusion הפורטל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפוך את הכבד להוסיף שני prolene 8-0 תפריםבקצוות מנוגדים של לרוחב suprahepatic הווריד הנבוב, מהחוץ אל הפנים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחסן את השתל (שקוע בפתרון לקטט הצלצול) במקרר ב 0-4 ° C. </li></ol> 3. המקבל מבצע <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים חולדות זכרים במשקל של 200 ± 20 גרם עם isoflurane חרוט על המסכה (3% לזירוז, 2% במהלך המבצע, 1 ליטר / דקה זרימת אוויר, FiO2 70%) ולשמור על משטח חם. ראוי לציין, משקולות הנמען התורם צריך להתאים (± 40 גרם). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק 10 מ&quot;ל של תמיסת מלח רגיל תת עורית ו 0.03 גרם של piperacillin / tazobactam שרירית לפני laparotomy. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצוע פיום בטן קו האמצע xipho-הערווה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפוך את התהליך עם xiphoid אוטומטי סטטי מלקחיים כדי להיטיב לחשוף את הכבד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים את הרצועות הקדמי ולחלק את הווריד סרעפתי השמאלי בין שני 7-0 קשרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחלק את הרצועה hepato-הוושט ואת העורק בין 7-0 ליגטורות (coagulation היא אלטרנטיבה חוקית). לא רואים בסרט (זהה לפעולת התורם). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבודד את infrahepatic הווריד הנבוב עד וריד הכליה הימנית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלקים את הווריד suprarenal הנכון בין 7-0 ליגטורות והכבד חינם מן הרצועות האחוריים שלה על ידי חיתוך עדין תחת תאוצה (לא רואים בסרט (זהה לפעולת התורם)). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים תחבושת סביב 7-0 בצינור המרה המשותף, ממש מתחת וחלוקתו. במילים אחרות ליגטורה מילימטר אחד מתחת וחותכים באמצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבודד את עורק הכבד על hilum ולחלק אותו בין 7-0 ליגטורות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות להפריד סניפים פורטל על ימין ועל שמאל. שימו לב לא לפגוע בעורק הכבד הנפוצה או וריד הטחול הקיבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את טבעת caval סביב הווריד הנבוב, cranially אל וריד הכליה הימנית. ואז להבטיח את הקיר כלי לזירה על ידי הצבת ארבעה היסוד 9-0 תפרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחזור על הפעולה גם עם טבעת על הפורטל פורטה הנבוב. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק 10 UI של הפרין, בדילול אל מ&quot;ל 1 של מלח רגיל, דרך וריד הגב של הפין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את ההרדמה על 0.25% ו FiO2 על 100%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הצמד infrahepatic הווריד הנבוב בדיוק מעל עורק הכליה הימנית, ואז לצבוט פורטה הנבוב בדיוק מעל עורק הקיבה הטחול. לבסוף לצבוט suprahepatic הווריד הנבוב להיות בטוח לכלול לפחות 2 מ&quot;מ של הסרעפת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים את suprahepatic הנבוב קאווה קרוב ל parenchyma. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים שמאלה הענפים פורטל הנכונות לחלק את מחיצת באמצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים את infrahepatic הנבוב קאווה קרוב ל parenchyma, לשים לב שלא לחתוך כל אחד התפרים ממוקמים בעבר. הסר את הכבד ומניחים שתל לתוך חלל הבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצוע השקה קצה לקצה בין קאווה suprahepatic הנבוב של השתל לבין הנמען. התחל עם תפר את ניהול הקיר האחורי משמאל לימין, ואז להמשיך על הקיר הקדמי מימין להמטר שמור תפר הקדמי רופף עד תום על מנת לאפשר שטיפה נדיבה של לומן הפנים לפני הידוק הקצוות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את הסניף הזנב של approximator לתוך ידית טבעת פורטל, ואז להכניס את פורטה הנבוב של השתל לתוך החריץ של הסניף הגולגולת של approximator, עם השרוול פורטל למצוא את מעמדה לחריץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את approximator בזמן השטיפה הנבוב של הנמען פורטה עם מלח רגיל ולאפשר השרוול כדי להכניס לתוך כלי. אבטחת הנבוב של הנמען פורטה סביב השרוול שלה עם עניבה 7-0 ההיקפי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את approximator. פתח את מהדק על suprahepatic הווריד הנבוב ו פורטה הנבוב על מנת: זרימת פורטל כעת מחדש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הטבעת הפורטל על ידי חיתוך של 9-0 ליגטורות עם תוספת עדין מספריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את הסניף הזנב של approximator לתוך ידית טבעת caval, ואז להכניס את infrahepatic הווריד הנבוב של השתל לתוך החריץ של הגולגולת<html> סניף של approximator, עם השרוול caval למצוא את מעמדה לחריץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את approximator בזמן השטיפה infrahepatic הנבוב של הנמען קאווה עם מלח רגיל ולאפשר השרוול כדי להכניס לתוך כלי. אבטחת הנבוב של הנמען קאווה סביב השרוול שלה עם עניבה 7-0 ההיקפי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את approximator. פתח את microclamps על infrahepatic הווריד הנבוב של השתל לבין הנמען על מנת: זרימה ורידית כעת מחדש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבצעים חתך חלקי של צינור המרה המשותף של הנמען, חל המתיחה עדינה כלפי הראש, להכניס את הצד ללא סטנט מוכנס לתוך בעבר בצינור המרה של השתל. להבטיח את סטנט עם עניבה 7-0 ההיקפי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את בעלי החיים על ידי שכבות עם 5-0 תפרים. אפשר מים אוכל חופשי מ התעוררות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניהול כאבים יעיל פי פרוטוקולים מוסדיים מקומיים. תקופת מינימום של 24 שעות מומלץ. </li></ol>&quot;_content&gt; שים לב: מקצה לקצה עורק השקה כבד יכול להתבצע, כאשר נדרש על ידי עיצוב ניסיוני (עורק אינה נדרשת להישרדות ארוכת טווח על הכבד השתלת חולדה). 4. נציג תוצאות הטכניקה המתוארת ניתן לשלוט בהצלחה לאחר כ -10 ניתוחים על ידי צוות ההדרכה שלנו. זה מותר 100% לטווח ארוך (&gt; 21 יום) על הישרדות 36 ברציפות לואיס אל לואיס כהים agouti אל לואיס השתלות, לאחר תקופת אימונים קצרה (מספר מקבלי שוחד syngeneic כבד נשמרו בחיים במשך 12 חודשים). לאחר syngeneic יום השתלת כבד 1 בדיקות תפקוד הראה טרנסאמינזות aspartate החציוני (AST): 84 U / L (51.7-92.7) ו החציוני טרנסאמינזות אלאנין (ALT): 172.5 U / L (127.5-240.2). בשלב anhepatic ממוצע (מ הנבוב פורטה מהדק את השתל מחדש זלוף) היה 14 ± 2 דקות, בצעד הארוך ביותר להיות suprahepatic הווריד הנבוב השקה (ריצה שלuture) הזמן 9 ± 2 דקות. המערכת מהירה מקשר מותר המיקום של 1.55 מ&quot;מ, נשא האזיקים על הנבוב פורטה ו 2.40 מ&quot;מ, נשא האזיקים על הווריד הנבוב (מקבלי במשקל 200 ± 20 גרם). לעומת זאת, כאשר ניסינו השתלה באמצעות טכניקה של קמהדע, הם לא יכלו לעלות על 1.40 מ&quot;מ ו 2.16 מ&quot;מ, בהתאמה (חולדות תואמים עבור מתח ומשקל). כפי שניתן לראות בתרשים 7, מהיר מקשר הטבעות נועדו לשמור על כלי המקבל על מתיחה אופטימלית, המאפשרת קליפר מינימום בזבוז אורך, שתוצאתה קרוב יותר אל פיזיולוגיים תוצאות המודינמים. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig1.jpg" alt="איור 1" /> באיור 1. אמצעים טבעות. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig2.jpg" alt="איור 2" /> איור 2. אמצעים Microclamps. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig3.jpg" alt="איור 3" /> באיור 3. מהיר מקשר קיט. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig4.jpg" alt="איור 4" /> איור 4. מהיר מקשר מזוין. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig5.jpg" alt="איור 5" /> איור 5. מהיר מקשר סגור. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig6.jpg" alt="איור 6" /> איור 6. מהדק SHVC. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig7.jpg" alt="איור 7" /> איור 7. קלאסיקה לעומת מהיר מקשר בסיוע השרוול, השקה ופרמטרים המודינמיים. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig8.jpg" alt="איור 8" /> איור 8. תורמים והכנת העור של הנמען ואת החתך.

<ol><li>Starzl, T. E., Marchioro, T. L., Porter, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+clinical+observation+after+homotransplantation+of+the+whole+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Revue+internationale+d%27hepatologie%22%5BJournal%5D)">Experimental and clinical observation after homotransplantation of the whole liver.</a> Revue internationale d'hepatologie. 15, 1447(1965).</li>
<li>Starzl, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Evolution of liver transplantation.</a> Hepatology. 2, 614S-636S (1982).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47(1979).</li>
<li>Kashfi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+various+techniques+of+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+proceedings%22%5BJournal%5D)">A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation proceedings. 37, 185-188 (2005).</li>
<li>Hori, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+and+innovative+techniques+for+liver+transplantation+in+rats%3A+A+surgical+guide%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%3A+WJG%22%5BJournal%5D)">Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide.</a> World Journal of Gastroenterology: WJG. 16, 3120(2010).</li>
<li>Oldani, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+technique+for+rat+liver+transplantation+using+Quick+Linker+system%3A+a+preliminary+result%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result.</a> Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).</li>
<li>Nosaka, T., Bowers, J. L., Cay, O., Clouse, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biliary+complications+after+orthotopic+liver+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Surg.+Today%22%5BJournal%5D)">Biliary complications after orthotopic liver transplantation in rats.</a> Surg. Today. 29, 963-965 (1999).</li>
<li>Li, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+incidence+of+biliary+complications+in+rat+liver+transplantation%3A+can+we+avoid+it%5BTitle%5D)+AND+%22World+J.+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">High incidence of biliary complications in rat liver transplantation: can we avoid it.</a> World J. Gastroenterol. 17, 3140-3144 (2011).</li>
<li>Peng, Y., Gong, J. P., Yan, L. N., Li, S. B., Li, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+two-cuff+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatobiliary+Pancreat.+Dis.+Int%22%5BJournal%5D)">Improved two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.</a> Hepatobiliary Pancreat. Dis. Int. 3, 33-37 (2004).</li>
<li>Urata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+survival+in+rat+liver+transplantation+with+extended+cold+preservation%3A+role+of+portal+vein+clamping+time%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Decreased survival in rat liver transplantation with extended cold preservation: role of portal vein clamping time.</a> Hepatology. 28, 366-373 (1998).</li>
</ol>

אין ניגוד עניינים הצהיר.

עכברוש הנוכחי הכבד השתלת המודל ניתן לקבוע בקלות. מניסיוננו, כמה נקודות מפתח למזער את הסיכון למוות (≤ 20%). מקרי המוות הראשונים, המתרחשים בתוך שלוש השעות הראשונות של reperfusion, הם בדרך כלל עקב אוטם שריר המעי, כתוצאה של פורטל לחיצה ארוכה. לכן מומלץ לשמור את השלב anhepatic בתוך מגבלת האידיאלי של 15 דקות (20 דקות עדיין מקובל). תסחיף אוויר מרכזי יכול להיות גם הגורם למוות פתאומי וזה חובה לשטוף את כל הוורידים לפני השקה. מקרי מוות שאירעו בין יום לאחר הניתוח 1 ו 3 הם בדרך כלל בשל אי ספיקת כבד או פקקת של הווריד הנבוב. יש אפוא להימנע מכל שתל אגרסיבי שטיפה לפני explantation של התורם (אנחנו שטוף עם 20 מ&quot;ל במשך כ 60 שניות) ולהבטיח שמירה קר המתאים (טבילה מלאה תוך 0-4 מעלות צלזיוס פתרון הצלצול לקטט). הסיכון של פקקתניתן לצמצם על ידי צמצום מניפולציה של אינטימה ושמירה על שלמותו. אנחנו לא ממליצים להשתמש קרישה לאחר הניתוח. מקרי המוות בין יום לאחר הניתוח 4 ו 9 קשורות לעיתים קרובות cholangitis חיידקי 7. בהתבסס על הניסיון שלנו, מנה בודדת של piperacilline / tazobactam (0.03 גר &#39;) ניתן לפני laparotomy מספיקה כדי למזער את הסיכון לזיהום צינור המרה המשותף. המוות הוא אירוע נדיר אחרי יום 10. עם זאת, בשל היעדר זרימת עורקים, הדביק כמה בעיות המרה ניתן לראות עם cholastasis 8. בהתאם לצרכים של החוקר arterialization ניתן לשקול 9. ראוי לציין, זמן איסכמיה קר עד 24 שעות יכול להיחשב 10 מקובלת. המערכת מהירה מקשר תוכנן במקור כדי לבצע השתלת כבד עם שלושה anastomoses השרוול (שלב anhepatic קצר מאוד). עם זאת, שלושה השרוול technique מחייב שימוש מחוגה קטנים מאוד השרוול suprahepatic הנבוב (SHVC) קאווה ואת זה לא היה מקובל בשל הסיכון של זרם בעיות בכבד 11-14. לפיכך, אנו מעדיפים מהיר מקשר טכניקה בסיוע שלושה השרוול רק כאשר לעתים איסכמיה חמים קצר יותר מעשר דקות נדרשים. במרבית המחקרים לעומת זאת, שלבי ההשתלה עד 15-18 דקות מקובלים, המאפשר את השימוש בטכניקה של שתי השרוול, ואת ניקוז SHVC פיזיולוגי יותר. כפי שניתן לראות במאמר זה וידאו, אנחנו משתמשים באופן שגרתי מערכת מהיר מקשר בחלק השני של ההשתלה בלבד. בעוד זמן כירורגית נוספת נדרש למקם את מהיר מקשר ידיות, בחלק זה של ההליך קשורה סיכונים מינימליים ומאפשר קיצור של השלב תודה קריטיים anhepatic ל הוספות חפתים קל. יתרונות נוספים של המערכת מהיר מקשר הם טובים יותר שתל הנמען יישור כלי ושימוש באזיקים רחב יותר עם תוצאות טובות יותר בהשוואה המודינמיםהטכניקות המתוארות לעיל (כולל אחד שתואר על ידי קמהדע et al.) 6 (איור 7).

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> כלי / מגיב </td><td> חברה </td><td> קטלוג n. </td><td> הערה </td></tr><tr><td> פורטל השרוול </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> או <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">Smiths-medical.com</a> </td><td> קויל 01-96-1729 800/100/420 </td><td> משעמם: 1.55mm הכותל: 0.30mm אורך: 3.5 מ&quot;מ </td></tr><tr><td> Infrahepatic נ &#39;קאווה השרוול </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> או <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">Smiths-medical.com</a> </td><td> קויל 01-96-1733 800/100/540 </td><td> משעמם: 2.40mm הכותל: 0.30mm <br/&gt; אורך: 3.5 מ&quot;מ </td></tr><tr><td> סטנט המרה המשותף צינור </td><td> המשותף 22g venflon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 7-0 משי קשרים </td><td> <a href="http://georgetiemann.com" target="_blank">georgetiemann.com</a> </td><td> 160-1226-7 / 0 </td><td></td></tr><tr><td> 10-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 9-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 8-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> מלקחיים מיקרו ישרים </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">S-ו-T</a>NET. </td><td> FRC-15RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> מלקחיים מיקרו מעוקלים </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">s-and-t.net</a> </td><td> FRS-15-RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> דיסקציה מחט בעל </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">s-and-t.net</a> </td><td> B-15-8.2 </td><td></td></tr><tr><td> השקה מחט בעל </td><td> <a href="http://rumex.net" target="_blank">rumex.net</a> </td><td> 8-021T </td><td></td></tr><tr><td> מיקרו מלחציים </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18055-03 </td><td> 6 x 1mm </td></tr><tr><td> המוליך מהדק Micro </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18057-14 </td><td></td></tr&gt; <tr><td> Suprahepatic נ &#39;קאווה מהדק </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> 13.349.14 </td><td></td></tr><tr><td> מהיר מקשר טבעות </td><td> <a href="http://dltchiropody.co.uk" target="_blank">dltchiropody.co.uk</a> </td><td> PAR 10 </td><td> להבי אזמל הניתוחים שונה </td></tr><tr><td> Quick-Linker approximator </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> א.ד.-04-275 </td><td> שונה Kocher של המלקחיים </td></tr></tbody></table>

השתלת כבד orthotopic בחולדות

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

התקדמות קלינית בתחום השתלת כבד נתמכה בעיקר על ידי 1,2 חיה מודלים. מאז פרסום השתלת כבד 1 orthotopic חולדה בשנת 1979 על ידי קמהדע et al. 3, מודל זה נותר תקן הזהב למרות שונים טכניקות חלופיות המוצעות 4. אף על פי כן, השימוש הרחב בו מוגבל על ידי עקומת למידה תלולה שלו 5. במאמר זה וידאו, אנחנו מצביעים על גרסה פשוטה וקלה ליצור בטכניקה של קמהדע שתי השרוול. Suprahepatic הווריד הנבוב השקה מתבצעת באופן ידני עם תפר רץ, פורטה הווריד הנבוב ו infrahepatic anastomoses הנבוב מבוצעות תוך שימוש במערכת מהיר מקשר השרוול 6. ייצור ערכת מהיר מקשר מוצג במאמר וידאו נפרד.

אנו מציגים גרסה לא קל ליצור בטכניקה של שתי השרוול קלאסית השתלת כבד orthotopic בחולדה.

השתלת כבד Orthotopic בחולדות

ההתקדמות הקלינית בתחום השתלת הכבד נתמכה במידה רבה במודלים של בעלי חיים1,2. מאז פרסומו של הדיווח הראשון על השתלה אורתוטופית בחולדה...

השתלה אורתוטופית של כבד בחולדה היא הליך תובעני הדורש הכשרה במיקרו-כירורגיה של ריאות כדי להגיע לשליטה מלאה. דיוק ומהירות, במיוחד במהלך שלב ההשתלה, הם המפתחות להצלחה. בסרטונים הבאים, נחשוף כל שלב בסיסי להשתלה מוצלחת ונסביר כיצד מכשיר קליני מהיר יכול להקל על שלב ההשתלה.צפייה נעימה בסרטונים. התורם נפתח באמצעות חתך רוחבי. הרצועה המגלבנית (falciform ligament) נחתכת והוריד הנבוב התחתון (inferior vena cava) נחשף.הווריד הסרעפתי השמאלי מנותק מהווריד הנח, ואז מחולק בין קשרי משי 7-0. הרצועה האוסטאופתית של הגז נחתכת, ולאחר מכן הרצועה הוושטיות מחולקת בין קשרים. הווריד הנח הבטני נחשף על ידי משיכה עדינה של מעי דק ומעי גס.בצד שמאל, פותחים את הפריטונאום (peritoneum) ומשחררים בעדינות את הווריד הנבוב (vena cava) מהרקמות שסביבו. מבודדים את וריד תוהו של בלוטת האדרנל הימנית ולאחר מכן קושרים אותו בין שבעה קשריהם (ties). דוחפים את הכבד לצד שמאל ושומרים אותו בעדינות תחת מתיחה.יש לחתוך את הרצועות הרטרו-הפאיות ואת הרצועה המשולשת הימנית. יש לקשור את הווריד הרנלי הימני בקציו הפרוקסימלי באמצעות קשירת ניילון 10 oh. יש לקשור יחד את הווריד והעורק הרנליים הימניים בקציום הדיסטלי, ולאחר מכן יש לחתוך את הווריד הרנלי הימני.מוצגת סקירה כללית של הווריד הנבוב המבודד לחלוטין. סקירה כללית של האנטומיה האזורית של קשרי הכבד (hepatic hilum) והווריד השער, העורק הכבדי הנכון, תעלת המרה המשותפת וווריד הטחול-קיבה. בלוטת הלבלב.מבודד את הווריד הגסטרו-ספלני ומחלק אותו בין קשירת 10 oh לקשירת 7 oh. את העורק הכבדי העליון חותכים בין קשירות 7 oh. לבסוף, מחלקים את הווריד הווינו-פנקריאטי.מוצגת סקירה כללית של הווריד הפורטלי המבודד. צינור המרה המשותף פתוח חלקית בחיבורו לרקמת הלבלב. סטנט 22 G ברוחב 3.5 מילימטר מוחדר ומאובטח היטב.מזריקים 10 units של heparin. לאחר מכן שוטפים את הכבד דרך ה-vena porta באמצעות 20 milliliter של תמיסת Ringer lactate מקוררת, בעוד שה-vena cava הדיסטלית נחתכת כדי לאפשר זרימה החוצה מספקת. ה-vena porta נחתכת בקצבה הדיסטלית שלה, ומושלם חיתוך של מקטע ה-common bile duct. לאחר מכן נחתכת ה-hepatic vena cava בקצבה הדיסטלית שלה, בעוד ה-supra hepatic vena cava נחתכת במישור הסרעפת, אשר מוסרת והטבעה בתוך תמיסת Ringer lactate בטמפרטורה של 4 °C.מוכנסת ונה פורטר (Vena porter) לתאריו, לאחר מכן היא מוסטת כדי לחשוף את האינטימה, ולבסוף מקובעת לתאריו באמצעות קשירת 7-0. הפעולה נחזרת בווריד הנבוב התחתון (repath vena cava). מיקרו-קלימפ ממוקם בחלק הקרניאלי ביותר של הווריד הנבוב התחתון.הכבד הופך ושתי תפרי prolene מסוג ATO מושחלות בקצוות הלטרליים המנוגדים של ה-Vena cava מהחוץ פנימה. הרסיפיש נשמר תחת הרדמה של Isof. Fluor על פד מחמם, 10 milliliters. תאי קו נורמליים מוזרקים תת-עורית לפני לפרטומיה. חתך midline cyop pubic מבוצע וה-cy מוטה לאחור על מנת לחשוף טוב יותר את הכבד.תעלת המרה המשותפת מאובטחת באמצעות קשירת 7-0 ונחתכת רגע לפני התפצלותה לשמאל וימינה. ענפי השער מופרדים בדייקנות. טבעת קוואלית ממוקמת מסביב לווריד הנבוב (vena cava) קראניאלית לווריד הכליה השמאלי.תפר ראשון מסוג 9-0 מועבר דרך דופן כלי הדם בקצה הימני שלו, ולאחר מכן מקובע לטבעת הקוואלית (caval ring) במיקום שנקבע מראש. תפר שני מועבר דרך הקצה הנגדי ומקובע. התפר השלישי מקובע במיקום ונטרלי.לבסוף, הרביעי מקובע בעמדה גבית. לאחר הפיכת הטבעה בצדו השמאלי, התפר הראשון מועבר דרך הדופן האחורית על ידי הרמת כלי הדם. לאחר מכן ממוקם טבעת השער והקשירה מקובעת לענף האחורי שלה.תפר שני מועבר דרך קצה ענף השער השמאלי ומאובטח; תפר שלישי מועבר לקצה ענף השער הימני ולאחר מכן מאובטח. התפר האחרון חודר את הדופן הקדמית של השער ומאובטח במקומו לפני הסגירה בצבת.ביצוע ניקוי סופי של ה-vena cava בחלק האחורי. ה-Vena cava וה-vena porta נסגרים באמצעות תסמיכים (cross clamped) לפי הסדר. לאחר מכן ה-vena cava בחלק האחורי נסגר בתסמיך ונחתך בהתאם לפרנכימה. הענפים הפורטליים הימני והשמאלי נחתכים והמחיצה ביניהם מופרדת; ה-vena cava בחלק הפנימי נחתך בהתאם לפרנכימה. לאחר מכן הכבד מוסר.ה-Vena cava וה-vena porta נשמרים פתוחים בבטחה באמצעות שתי הטבעות. השתל ממוקם בתוך חלל הבטן ותפר NATO מקובע לקצה השמאלי של ה-vena cava. תפר שני מקובע לקצה הימני.תפירת הדופן האחורית בשיטת Iranian מבוצעת משמאל לימין, כדי למנוע הכללת פרנכימה של הכבד בתפירה. תפירת הדופן הקדמית נשארת רפויה כדי לאפשר שטיפה נרחבת לפני הסגירה המלאה. תמרון זה מונע תסביב אוויר.ענף ה-coddle של ה-approximator מוכנס לתוך ידית טבעת הפורטל, ועגל הפורטל מוכנס דרך החריץ של הענף הקרניאלי שלו. ה-Vina porter של המקבל נשטף בתמיסת סליין נורמלית בזמן שה-approximator סגור. כדי לסייע בהחדרת העגל, ה-Porter של המקבל מקובע לעגל באמצעות קשירה של 7-0.את האפרוקסימטור מסירים ואת זרימת הפורטל משחזרים על ידי הסרה לפי הסדר של תסבית ה-Atic VNA CVA ותסבית הפורטל, וטבעת הפורטל מוסרת באמצעות חיתוך. עם זאת, הליגטורות הננו משוחזרות באמצעות אותה טכניקה של מקבלים. צינור המרה המשותף נשמר תחת מתיחה והסטנט מוחדר דרך חתך קטן.ליגטורה מעגלית מקבעת את מיקומה. מבט כולל על השתל המחובר מוצג ב-a.

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

השתלת הכבד orthotopic בחולדות היא מודל ניסיון הכרחי למחקר ביו. כאן אנו מציגים הניתוחים שלנו להשתלת כבד חולדת orthotopic עם שחזור עורק כבד באמצעות 50% שתל חלקי.

ניתוחים למודל חולדה של השתלה כבדה orthotopic חלקית עם שחזור עורקית כבדיה

נתאר לנו את העיצוב של המכשיר "מהיר מקשר" להשתלת כבד חולדת orthotopic קלה יותר.

התקני ייצור מכשירים להשתלת כבד חולדה קלה יותר

השתלה כבד עזר מספקת תמיכה זמנית בכשל כבד אקוטי, עד התחדשות של הכבד הכושל. השתלת heterotopic עזר הכבד (אלט) עם arterialization וריד שער (PVA) הופכת את תפקוד כבד מספיק. פיתחנו טכניקה דומה בעכברים, כדי לבחון את ההשפעה של arterialization וריד שער על המורפולוגיה והתפקוד של השתל.

Heterotopic עזר עכברוש כבד השתלה עם זרימה מוסדר פורטל וריד Arterialization בכישלון חריף כבדית

כאן, מוצג פרוטוקול מעורבים השתלת כבד חלקית עכברוש arterialized מחדש. באופן ספציפי, 70% הכבד היה resected ויוו באמצעות טכניקת מעודכן של hepatectomy מונחה כלי השיט. עורק הכבד שוחזר בצורה הקצה לצד. הטכניקה השרוול שונה כדי לקצר את זמן השקה של infrahepatic את הווריד הנבוב.

מחדש Arterialized השתלת הכבד חלקית עכברוש עם ויוו מונחה כלי 70% Hepatectomy

השחזור של הווריד הנבוב suprahepatic (SHVC) נשאר צעד קשה בהשתלת הכבד orthotopic חולדה. במאמר זה אנו מראים פרוטוקול צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים.

מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic

המטרה של מחקר זה היא לשנות את מודל השתלת כבד אורתוטופית חולדה כדי לייצג טוב יותר השתלת כבד אנושי ולשפר את הישרדות הנמען. השיטה המוצגת מחדש את זרימת העורקים הכבדים על ידי חיבור עורק הכבד המשותף של הכבד התורם לעורק הכבד התקין של הכבד הנמען.

סיבוכים מופחתים לאחר חיבור מחדש עורקי במודל חולדה של השתלת כבד אורתוטופית

מאמר זה מספק תיאור מפורט של איך לבנות מודל של בעלי חיים של השלב האנהפטי (איסכמיה בכבד) בחולדות כדי להקל על מחקר בסיסי לתוך פגיעה איסכמיה-reperfusion לאחר השתלת כבד.

פגיעה באיבר איסכמיה-רפרופוזיה על ידי הדמיית שינויים המודינמיים במודל השתלת כבד עכברוש

בפרוטוקול זה נדון ביישום מודל של השתלת כבד אורתוטופית מוצלחת (OLT) בעכברים. בנוסף, נדונים גם אדג'ובנטים לניתוח נוסף של פטנטיות אלוגרפט לאחר OLT מוצלח בעכבר, במיוחד באמצעות סריקות טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (microCT).

השתלת כבד אורתוטופית מוצלחת בעכברים באמצעות טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת אנגיוגרפיה

פרוטוקול השתלת כבד עזר הטרוטופי של חולדות המתואר כאן מציע כלי מחקר מעשי לחקר מנגנונים של דחיית השתלת כבד. מודל זה מסייע להקל על המכשולים הכירורגיים והלחץ של בעלי חיים של השתלת כבד אורתוטופית בחולדות.

מודל השתלת חולדה בכבד שלם עזר הטרוטופי תוך שימוש בכבד כבד למחקרי דחיית אלוגרפט

פרוטוקול זה מתאר טכניקה משופרת להשתלת ריאה שמאלית אורתוטופית בחולדות, תוך התמקדות בהפחתת קושי תפעולי ושיפור שיעורי ההישרדות.

השתלת ריאה שמאלית אורתוטופית בחולדות

למדו טכניקה משופצת להשתלת כבד אורתוטופית בעכברושים, הכוללת ניתוח מיקרו-כירורגי מדויק ומהיר. שיטה זו משפרת את יעילות השתלת הכבד ומספקת כלי אימון חשוב לניתוחים מיקרו-כירורגיים.

השתלת כבד Orthotopic בחולדות

גלה סרטונים נוספים