איתור intraoperative של אנדומטריוזיס העדין: פרדיגמה חדשה לאיתור וטיפול בכאב באגן הקשורים לפגיעה בשלמות פריטונאלית

המטרה הכוללת של הניסוי הבא היא לספק לאנשי מקצוע המטפלים בנשים הסובלות מכאבי אגן שיטה פשוטה להדגשת הנוכחות וההיקף של אנדומטריוזיס סמוי. דבר זה מושג תחילה על ידי ביצוע סקר של אנדומטריוזיס גלוי כדי לזהות מחלה ברורה. כשלב שני מיושם צבע מתילן כחול, המראה אזורים של אנדומטריוזיס סמוי שעלולים להתפספס במהלך לפרוסקופיה רגילה.

בשלב הבא, כל האזורים הצבועים בכחול נכרתים כדי להסיר לחלוטין את המחלה מגוף המטופלת. תוצאות שהתקבלו ממיקרוסקופיה אלקטרונית סורקת מראות כי גישה זו מסירה אנדומטריוזיס בלתי נראה המשפיע על תאי הפריטון שמתחתיו, מה שמאפשר בתורו לדם מחזור או דם ביצולת להגיע לעצבים החושיים המעצבבים את האגן ולגרום לכאב. ההשלכות של טכניקה זו משתרעות הן על האבחנה והן על הטיפול באנדומטריוזיס, שכן היא מאפשרת לנו לזהות אנדומטריוזיס עדין ואפילו בלתי נראה שעלול לשבש את פני השטח של הפריטון ולאפשר לדם לבוא במגע עם העצבים הנמצאים מתחת לרקמות, דבר המסביר את הכאב שחווות מטופלות אלו.

בדרך כלל בזמן ביוץ או וסת, כמות מסוימת של דם חודרת לחלל האגן. רירית האגן והבטן מכילה שכבה שלמה של מזותליום המונעת מהדם זה, או מהגורמים בתוך הדם הגורמים לכאב, לבוא במגע עם סיבי עצבים תחושתיים. בנשים עם אנדומטריוזיס, תאי אנדומטריואיד דלקתיים עלולים לגרום לתאי הפריטוניאום לאבד את המגעים התאיים שלהם, ובכך לאפשר לדם גישה לרקמות ולסיבי העצבים שמתחתיהם.

ניתן להבחין בפערים אלו בתאי המזותל באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק, אך הם גם הסיבה לכך שצבע כחול יכול לצבוע את הרקמות שמתחתיו במקומות מסוימים. נשים הסובלות מכאב אגן כרוני עוברות תחילה ראיון כדי לקבוע את ההיסטוריה הרפואית שלהן ופרטים הנוגעים למיקום הכאב ותזמונו ביחס למחזור החודשי; תסמינים נלווים, כולל תלונות על תסמונת המעי הרגיז או תלונות על השלפוחית, נרשמים ומסומנים. בנוסף, לאחר ביצוע בחירת המטופלות, נערכת בדיקה גופנית למטופלת.

יש להקפיד לבקש מהנשים העוברות לפרוסקופיה הסכמה לכריתה אפשרית של אנדומטריוזיס ולשימוש ברקמותיהן לצורכי מחקר. בצעו את הלפרוסקופיה באמצעות טכניקות סטנדרטיות דרך פורט טבילי של 5 mm ופורטים נוספים של 5 mm בבטן התחתונה. בצעו בדיקה קפדנית של האגן כדי להקיש על הקשר בין ממצאי האנדומטריוזיס לבין מיקום הכאב הפרה-אופרטיבי כפי שדווח על ידי המטופלת.

בשלב הבא, ערבב צבע מethylene blue בדילול של 1:200 עם סליין סטרילי והשתמש במחט שאיבה כדי להזריק את התמיסה על פני השטח של האגן. לאחר מכן, בצע שטיפה באמצעות שאיבה כדי להסיר את עודפי הצבע ולשטוף את פני השטח של הפריטוניאום. שוב, בצע בדיקה קפדנית של האגן ורשום כל אזור שבו נספג הצבע הכחול.

במידת האפשר, בצעו כריתה של האזורים הפגועים בפריטונאום. לאחר השלמת הכריתה, בדקו את האגן כדי לוודא שאין דימום. לאחר מכן, שחררו את גז ה-CO2, הוציאו את המכשירים וסגרו את החתכים באמצעות דבק לרקמות.

לאחר מנוחה של שעה בחדר ההתאוששות, המטופל רשאי לחזור לביתו. כדי לתעד אנדומטריוזיס בלתי נראה באמצעות מיקרוסקופיה אלקטרונית סורקת, תחילה תפר מקטעי פריטוניום לרפידת Telfa סטרילית כדי להשטיח את הדגימה ולשמור על אוריינטציה שבה הצד האינטרה-פריטוניאלי פונה כלפי מעלה. לאחר מכן, הנח את המקטעים במקבע glutaraldehyde עבור SEM. לאחר קיבוע הולם, ניתן לעבד את הדגימות למיקרוסקופיה אלקטרונית סורקת במטופל אחר שביצע בעבר כריתה של אנדומטריוזיס משלפוחית השתן וכבר אינו סובל מכאבים באזור זה.

הצבע לא צבע את משטחי הפריטונאום, מה שתומך בקשר שבין המתאם של צביעה בצבע כחול לבין נוכחות של כאבים באגן. תמונה זו של משטח הפריטונאום נלקחה מאישה עם כאבי אגן כרוניים ותלונות על שלפוחית השתן שהחמירו בזמן הווסת. התמונה הלפרוסקופית נלקחה לפני יישום הצבע הכחול, ורק השתקפות האור הלפרוסקופי הראתה אזורים החשודים כנגעי אנדומטריוזיס ברורים כפי שסומן על ידי החצים; בתמונה זו, שצולמה באותו אזור, ניתן לראות כי צבע כחול שיושם על שלפוחית השתן צבע חלקים מובחנים של הפריטונאום.

תמונה זו מציגה כריתה של הפריטונאום המכסה את שלפוחית השתן, ותמונה זו מציגה את התאים מאזור זה כפי שנראים במיקרוסקופ אלקטרונים סורק. הדגימה הוכנה בהתאם לנהלים סטנדרטיים ועברה ציפוי בשיטת sputter בסגסוגת זהב-פלטינה לעובי של 20 nanometers. ניתן לראות שהפריטונאום מצופה בתאים הנחשבים לאנדומטריוזיס, ובתאי המזוטל של הפריטונאום קיימים מרווחים במגעים בין התאים החושפים את המטריצה החוץ-תאית שמתחתיהם.

לעומת זאת, תמונת מיקרוסקופ אלקטרונים סורק זו של דגימת פריטוניאום נורמלית שהוכנה באותה צורה, מראה כי התאים האפיтелиאליים של הפריטוניאום הנורמלי מחוברים היטב. כפי שניתן לראות, זוהי טכניקה פשוטה למדי שניתן להשתמש בה במהלך הליכים לפרוסקופיים כדי לסייע בזיהוי אנדומטריוזיס עדין ובלתי נראה הגורם לחדירות של משטחי הפריטוניאום. על ידי כריתה של כל הנגע יחד עם כל תאי האנדומטריואיד, אתם מעניקים למטופל את הסיכוי הטוב ביותר להקלה בכאב.