Name: טכניקה כירורגית למשלוח חוט שדרה של טיפולים: הפגנה של הנוהל בגטינגן Minipigs (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-12-07T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 23 s
Description: למד טכניקה כירורגית למשלוח תרופות ביולוגיות לחוט השדרה ב-Göttingen Minipigs. השיטה כוללת למינקטומיה, הרכבת מתקן ייצוב וזריקות תוך-שדרתיות לדיוק ולבטיחות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מודים לחטיבת אוניברסיטת האמורי בצוות בעלי חי משאבים לטיפול וטרינרים. מקורות מימון כוללים: ALS אגודה, משרד ההגנה, וNeuralstem, Inc

1. שימוש בבעלי חיים נהלים הפגינו הסכם אושרו על ידי הטיפול באוניברסיטת האמורי המוסדי בעלי חיים והשתמשו ועדה (IACUC). minipigs הנשי גטינגן במשקל ק&quot;ג בערך 15-20 משמשים. 2. הרדמה בעלי חיים צמו כ 12 שעות לפני הניתוח. הרגעת בעלי חיים ואינדוקצית הרדמה מורכבת מקוקטייל של השריר קטמין (35 מ&quot;ג / ק&quot;ג), Acepromazine (1.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג), ואטרופין (0.04 מ&quot;ג / ק&quot;ג). בעלי חיים אז הם מחוברים לצינורות ושמרו על חמצן ו% הרדמה כללית isoflurane 1-3. בשלב זה, הגב והראש של כל חיתו מגולח. עומק ההרדמה מבוקר על ידי צוות הווטרינרים. היעדרם של רפלקסים interdigital, קרנית וpalpebral, כמו גם קצב לב ונשימה, oximetry הדופק, לחץ דם ישיר / עקיף, מדידות סוף גאות פחמן דו חמצני, וטונוס שרירים / תגובה לגירוי מזיק משמשים לניטור עומק<html> של הרדמה. 3. מיקום בעלי החיים נלקחים לחדר הניתוח ולהציב לתוך אפרקדן על מנהג מסגרת שנועד לחקות את מיצוב חולים על שולחן ניתוחים בעמוד שדרת ג&#39;קסון. המסגרת מנצלת מתלים מתכווננים שנמצאים מתחת לחזה והאגן של בעלי החיים, המאפשר הבטן לתלות חופשיה, ולכן צמצום לחץ על שרירי הבטן והחזה ודימום ורידי אפידורל סוגר (איור 1). המסגרת מספקת גם קיבוע חיצוני של עמוד השדרה להליך 1. בנוסף, בעלי חיים מונחים על כרית מחוממת מחדש השאלה כדי לשמור על טמפרטורת גוף ווריד אוזן שולית צינתור לממשל נוזל וכל משלוח סמי צורך במהלך ניתוח. לבסוף, את שדה הניתוח הוא prepped עם פתרון Chlorhexadine או פולידין ואלכוהול ווילאות כירורגיות מונחים על שדה הניתוח. le &quot;&gt; 4. Laminectomy כ 10-15 סנטימטר חתך בעור מתבצע ושרירי paraspinal נתח את עמוד השדרה בילטרלי. בשלב בא, laminectomy הגבה רב ברמה מתבצע. תהליכי lamina וspinous של שמעליה שלוש חוליות C3-C5 או L2-L4 מגזרים יוסרו באמצעות rongeurs ומקדח כירורגים. 5. מיקום של דריק השדרה אנו קוראים דריק שדרת המכשיר המיועד למשלוח של גן (ותא) טיפולים ל2-5 חוט השדרה. דיון מפורט על העיצוב והאבולוציה של מכשיר זה ניתן למצוא בריילי et al., 2011. 4 כדי לאבטח את המכשיר למטופל, הודעות percutaneous מוצבות דרך חתכים בעור 1cm מעל ומתחת לחתך הראשוני ורכובות על lamina מעל ומתחת לחתך הראשוני. בשלב בא, 2 מפשק משולב מצורפים לחצur percutaneous הודעות מעל ומתחת לאתר החתך כדי לחשוף את האזור של עמוד השדרה שעברה laminectomy. 6. פתיחת Dural בעזרת כלי שיניים וודסון 11 להב, חתך 2.5 סמ נעשה באמצעות הדורה, חושף את חוט השדרה. הדורה משתקפת משכבת ​​pial באמצעות תפר Nurolon 4-0 והבטיחה לשרירי paraspinal העמוקים. קציצות כירורגים ממוקמות בקצוות המקוריים וזנב של הפתיחה. אלה מספקים מחסום חלקי לזרימת נוזל המוח ושדרה וגם מספקים יעד בטוח למנתחים למקום פרייר מבלי לפגוע בכבל. בבני אדם, בהגדלת מיקרוסקופ כירורגי, משטח pial מנותח בשלב זה. בשל מגבלות טכניות, הליך זה אינו נדרש או ריאלי בבעלי חיים. 7. זריקות חוט שדרה ותזוזה לרוחב של דריק השדרה להזרקה נוספתשל מייד לפני זריקות, בולוס של מתילפרהדניזולון (125 מ&quot;ג, IV) ניתן למניעת נפיחות חוט שדרה. בשלב זה, מערכת רכבות הפלטפורמה מצורפת ואת המעקות מותאמים לייחס האורך המתאים. גונדולה היא עליונים הועמס על 2 ברים וכונן Z הוא רכוב על המפרק האוניברסלי. בשלב בא, הצינורית הטעונה מונחת על Microdrive. שימוש המשותף האוניברסלית על פלטפורמת microinjection, זוויות העטרה וsagittal מותאמים כדי להבטיח מסלול מאונך למשטח של זריקות השדרה בעקבות המיקום של הצינורית. המחט ממוקמת בהתאם המדיאלי לאזור כניסת השורש הגבה (DREZ). DREZ מזוהה תחת זכוכית מגדלת גדלת 3.5x כירורגית וחדר במסלול מאונך למשטח החוט בנקודה &lt;1 מ&quot;מ מדיאלית. בבני אדם, MRI טרום ניתוחי מספק בסיס הערכת of ממדי חוט שדרה לתכנון אופרטיבי. יתר על כן, בעובי של חוט השדרה נמדד כדי לקבוע את עומק המטרה של הקרן הבטנית. ההשעיה הוא החדיר בעומק של 4 מ&quot;מ ממגע pial. מקורב עשוי מפלסטיק Ultem משמש כפקק על פני שטח פיא למנוע את המחט מהקידום עמוק יותר מרצוי. ברגע שקצה המחט ממוקם ביעד, שרוול החיצוני מהמתכת הקשה הוא כלפי מעלה, ומשאיר את הצינור הגמיש חשוף. לאחר ההזרקה הושלמה, המחט להישאר במקום במשך דקות נוספות 1 כדי למנוע ריפלוקס הנייד את מערכת הזרקת הצינורית. טיפול נלקח כדי למנוע vasculature פני שטח על ידי התאמת microdrive או laterality או rostro-caudally מעט. דימום החלק מאתרי חדירה עלול להתרחש. כאשר דימום כזה הוא נתקל, קציצות מייקר ממוקמות מעל האתר לנקב דימום ויניקה מוחלת להם פתיל דם מצינורית penetrאתר ation ולמנוע הצטברות בכבל. זה אמין מאפשר לדם כדי להקריש. כווייה היא להימנע ככל הוא לחץ ישיר. לאחר הסרת מחט, מנגנון stereotaxic הוא עבר לאתר היעד הבא לאורך ציר rostro-הזנב, מופרד על ידי 2 או 4 מ&quot;מ או כדרוש כדי להימנע מכלי דם נראו על פני השטח הגבי של חוט שדרה. תהליך זה חוזר על עצמו פעמים רבות ככפי שהוצע במחקר נתון. 8. קנייה צפה צינורית עירוי מנהג הקוטר צר משמשת לזריקות. הצינורית מורכבת ממחט קטומה 30-מד של אורך קבוע מחובר לצינורות גמישים 30-silastic מד באורך משתנה. סוף דיסטלי מצויד במנעול המילטון luer המחובר למשאבת microinjector. צינורות silastic הפרוקסימלי הוא ensheathed בתוך צינורית חיצונית נוקשה 24 מד המושבים בסוף הפרוקסימלי של מקורבות מחט הזריקה. מקורב זה שני המושביםצינורית והחיצונית משמשת כתחנה לעומק את המזרק. לכל הזרקה, הנפח המתאים של השעיה טיפולית הוא החדיר ידי שימוש מראש מכוילת-MINJ-PD microINJECTOR משאבה (Tritech Research, Inc, לוס אנג&#39;לס, קליפורניה) בשיעור של 5 μl לדקה. 9. סגירה ברגע שכל הזריקות נעשו, דריק השדרה הוסר בעדינות והחתכים סגורים בארבע שכבות. הדורה סגורה באמצעות 4.0 Nurolon תפר, בצורה אטומה למים. תפר 0 Vicryl משמש לשכבת שרירים העמוקה. אז fascia סגור עם תפרי 0 Vicryl גם באופנה אטומה למים. שכבת הדרמיס היא סגרה לבסוף עם 2.0 Vicryl, עם תפר פועל. סגירת עור הושלמה באמצעות תפרי ניילון 3-0. 10. התאוששות וטיפול בכאב בעלי חיים והפיקוח extubated להתאוששות הרדמה הבאה 2 שעות. בשלב הבא, בעלי חיים הועברו לג פרטגילים ומעקב לפחות פעם ביום לצריכת מזון, עשיית צרכימים, והשתנה. לניהול כאב, מדבקת פנטניל דרך עור (75 ק&quot;ג) היא משודכת על גבם של בעלי החיים לשלושה ימים של כאבים שלאחר הניתוח. בנוסף, עצירות (0.05 מ&quot;ג / ק&quot;ג, BID, IM) יכולות גם תינתננה לתקופה של עד שלושה ימים לאחר הניתוח. 11. תוצאות ותוצאות מייצגות תצפיות קליניות והתנהגות מבוצעות לפני ניתוח ולאחר מכן נרשמו בימים 1 עד 7 ועד נקודת סיום שבועי על פי תכנון המחקר. נתוני התנהגות נאספים להעריך תחלואת נוירולוגית כפי שתוארו בעבר 6. תפקוד חושי מוערך על ידי נוכחות או היעדר של תגובה לגירוי מכאני נסיגה עד בוהן גפיים קדמיים ואחוריים. תפקוד מוטורי כדלקמן ניקוד Tarlov (טבלה 1): 0 - שיתוק, אין תנועה; 1 - הטונוס ניכר בגפיים האחוריים, מ &#39;קלovement; 2 - תנועה בגפיים האחוריים, אבל לא מסוגל לשבת או לעמוד, 3 - היכולת לעמוד וללכת אבל ataxic ולתקופות קצרות; 4 - התאוששות מלאה, תפקוד מוטורי נורמלי. בטיחות שבהליך זה נקבע על ידי יכולתו של בעל חיים כדי לחזור לנקודת התחלת טרום ניתוחית. גירעונות נוירולוגיות חולפים צריכים בעיקר לפתור בין ימים שלאחר ניתוח 1 ו 7, בשינויים קלים בהתאם לגזעים והנהלים של בעלי החיים (מספר הזריקות, בין פרמטרים אחרים). תחלואה קבועה מוגדרת על ידי גירעונות נוירולוגיות ארוכי טווח שלא ליישב בזמן בעלי חיים להגיע לנקודת סיום כברירת מחדל IACUC (איור 2).

<ol><li>Usvald, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+dosing+regimen+and+reproducibility+of+intraspinal+grafting+of+human+spinal+stem+cells+in+immunosuppressed+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Analysis of dosing regimen and reproducibility of intraspinal grafting of human spinal stem cells in immunosuppressed minipigs.</a> Cell Transplant. 19, 1103-1122 (2010).</li>
<li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+spinal+cord+therapeutics+delivery%3A+stabilized+platform+and+microelectrode+recording+guidance+validation%5BTitle%5D)+AND+%22Stereotact.+Funct.+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Targeted spinal cord therapeutics delivery: stabilized platform and microelectrode recording guidance validation.</a> Stereotact. Funct. Neurosurg. 86, 67-74 (2008).</li>
<li>Federici, T., Riley, J., Park, J., Bain, M., Boulis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+safety+validation+of+a+stabilized+viral+vector+direct+injection+approach+to+the+cervical+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Transl.+Sci%22%5BJournal%5D)">Preclinical safety validation of a stabilized viral vector direct injection approach to the cervical spinal cord.</a> Clin. Transl. Sci. 2, 165-167 (2009).</li>
<li>Riley, J. P., Raore, B., Taub, J. S., Federici, T., Boulis, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platform+and+Cannula+Design+Improvements+for+Spinal+Cord+Therapeutics+Delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Platform and Cannula Design Improvements for Spinal Cord Therapeutics Delivery.</a> Neurosurgery. 69, 147-154 (2011).</li>
<li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+spinal+cord+therapeutics+delivery%3A+preclinical+safety+validation+of+a+stabilized+microinjection+platform%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Cervical spinal cord therapeutics delivery: preclinical safety validation of a stabilized microinjection platform.</a> Neurosurgery. 65, 754-761 (2009).</li>
<li>Raore, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+multilevel+intraspinal+stem+cell+therapy%3A+assessment+of+surgical+risks+in+Gottingen+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Cervical multilevel intraspinal stem cell therapy: assessment of surgical risks in Gottingen minipigs.</a> Spine. 36, 164-171 (2011).</li>
<li>Boulis, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translational+stem+cell+therapy+for+amyotrophic+lateral+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Translational stem cell therapy for amyotrophic lateral sclerosis.</a> Nat. Rev. Neurol. , (2011).</li>
<li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraspinal+Stem+Cell+Transplantation+in+ALS%3A+A+Phase+I+Safety+Trial%2C+Technical+Note+%26+Interim+Safety+Outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Intraspinal Stem Cell Transplantation in ALS: A Phase I Safety Trial, Technical Note & Interim Safety Outcomes.</a> Neurosurgery. 71 (2), 405-416 (2012).</li>
<li>Boulis, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+intraspinal+injection+of+neural+stem+cells+in+patients+with+ALS%3A+results+of+a+Phase+I+trial+in+12+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Lumbar intraspinal injection of neural stem cells in patients with ALS: results of a Phase I trial in 12 patients.</a> Stem Cells. 30 (6), 1144-1151 (2012).</li>
</ol>

ד&quot;ר וליס הוא הממציא של מכשירים כדי לאפשר הזרמה בטוחה ומדויקת של חוט השדרה של האדם. Neuralstem, Inc רכש רישיון בלעדי לטכנולוגיה זו. ד&quot;ר וליס קבל הנתח של invento של תשלום זה, ויש לו את הזכויות לתשלומי תמלוגים עבור הפצה של טכנולוגיה זו. מחברים אחרים אין לי מה לחשוף.

למרות אישור להמשיך בטכניקה המתוארת בבני אדם 7-9, שאלות קריטיות להישאר להיות ענו במטרה לטיפולים בעמוד שדרה כדי להצליח. הבנה קפדנית של סובלנות חוט שדרה להזרקת intraparenchymal נדרשת כדי לאפשר תכנון וביצוע הניסויים לפיתוח טיפולים לdemyelinating, ניוונית, ומחלות עמוד שדרה טראומטיות. נכון לעכשיו, אין הבנה ברורה של מספר הזריקות שעמוד השדרה של יונקים הגדול יכול לסבול ללא תחלואה חולפת וקבועה. כמו כן, מרווח בין זריקות עלול להשפיע על תחלואה. יתר על כן, מאקרוסקופיים (...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם הציוד </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות (אופציונלי) </td></tr><tr><td> דריק שדרה </td><td> Neuralstem, Inc </td><td></td><td> Neuralstem, Inc רכשה רישיון בלעדי לטכנולוגיה זו </td></tr><tr><td> משאבת MINJ-PD Microinjector </td><td> Tritech Research, Inc </td><td></td><td> אישית עבור היישום הספציפי הזה </td></tr><tr><td> קנייה צפה </td><td> Neuralstem, Inc </td><td></td><td> מותאם במיוחד ליישום הספציפי הזה </td></tr></tbody></table>

טכניקה כירורגית למשלוח חוט שדרה של טיפולים: הפגנה של הנוהל בגטינגן minipigs

Surgical Technique for Spinal Cord Delivery of Therapies: Demonstration of Procedure in Gottingen Minipigs

זהו תיאור חזותי קומפקטי משילוב של טכניקה ומכשיר כירורגי למסירת גן (ותא) טיפולים לחוט השדרה. בעוד הטכניקה באה לידי ביטוי בחיים, הוא הליך ה-FDA אשר ומשמשת כיום להשתלת תאי גזע לתוך חוט השדרה של חולי ALS. למרות שה-FDA זיהה נתוני הוכחה של עיקרון על יעילות טיפולית במכרסמים אפיינו מאוד, השימוש בבעלי חיים גדולים נחשב קריטי עבור אימות שילוב של הליך כירורגי, והתקן, ואת הבטיחות של טיפול סופי לשימוש בבני אדם . הגודל, אנטומיה, והפגיעות כלליות של עמוד השדרה וחוט שדרה של החזירים מוכרים למודל טוב יותר האנושיים. יתר על כן, התהליך כירורגי של חשיפה ומניפולציה של עמוד השדרה, כמו גם לסגור את הפצע בחזיר אינו נבדל מהאדם. אנו מאמינים כי מודל החזיר הבריא מייצג critiהצעד הראשון cal במחקר של בטיחות פרוצדורלי.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td colspan="2"> ציון Tarlov </td></tr><tr><td> 0 </td><td> שיתוק, אין תנועה </td></tr><tr><td> 1 </td><td> טונוס ניכר בגפיים האחוריים, תנועה קלה </td></tr><tr><td> 2 </td><td> תנועה בגפיים האחוריים, אבל לא מסוגל לשבת או לעמוד </td></tr><tr><td> 3 </td><td> יכולת לעמוד וללכת אבל ataxic ולתקופות קצרות </td></tr><tr><td> 4 </td><td> התאוששות מלאה, תפקוד מוטורי נורמלי </td></tr></tbody></table><p...

תיאור חזותי קצר של הטכניקה והמכשיר הניתוחיים המשמשת לאספקה ​​(גן ותא) טיפולים לחוט השדרה. הטכניקה באה לידי ביטוי בחיים, אבל הוא לגמרי לתרגום וכרגע בשימוש עבור יישום אנושי.

טכניקה כירורגית למשלוח חוט שדרה של טיפולים: הפגנה של הנוהל בגטינגן Minipigs

זהו תיאור חזותי תמציתי של שילוב בין טכניקה כירורגית למכשיר להחדרה של טיפולים (גנומיים ותאיים) אל תוך עמוד השדרה...

המטרה הכוללת של הליך זה היא להוביל בבטחה ולכוון במדויק תרופות ביולוגיות לאתרים אינטרה-פארנכימליים ספציפיים של עניין בתוך חוט השדרה. מטרה זו מושגת תחילה על ידי הכנת בעל החיים לניתוח. לאחר מכן, מבוצעת למינקטומיה (laminectomy) ומוקם המכשיר למייצוב חוט השדרה (spinal derrick).לאחר מכן פותחת הקשיה (dura) ומבוצעות ההזרקות התוך-שדרתיות. לבסוף, סוגרים את השרירים, הפסציה והעור מעל הקשיה. בסופו של דבר, ניתן להשיג תוצאות המראות בטיחות ותוצאות מיקוד באמצעות איסוף נתונים התנהגותיים ונתוני מיקוד.הטכניקה המוצגת במסמך זה היא שימוש בפלטפורמת ייצוב, וכן בקנולה גמישה להחדרת מטען ביולוגי אל חוט השדרה. היתרונות של גישה זו הם שהיא מאפשרת דיוק בהחדרה, ובכך מחליפה טכניקות סטראאוטקטיות סטנדרטיות, אשר קשות ליישום בחוט השדרה עקב ניידותו. בנוסף לדיוק, הטכניקה מספקת מרווח ביטחון, כך שתנועה של המטופל.במקרה זה, חזיר אינו גורם לנזק לחוט השדרה בזכות פלטפורמת הקיבוע, ותנועת חוט השדרה בתוך התעלה המתרחשת במהלך הנשימה ובמהלך פעימות הלב אינה גורמת לנזק נוסף לחוט השדרה בשל גמישות הקנולה. לאחר הרעבת מיני-חזיר למשך 12 שעות והרדמתו באמצעות זריקה תוך-שרירית של ketamine, ace, promazine ו-atropine, בצעו אינטובציה לבעל החיים ושמרו אותו על חמצן ו-1 עד 3% isof fluorine. עקבו אחר עומק ההרדמה כפי שמתואר בפרוטוקול הכתוב.גזרו את הפרווה מגבו ומראשו של בעל החיים. העבירו את בעל החיים המורדם לחדר הניתוח והניחו אותו בתנוחת שכיבה על הבטן על מסגרת מותאמת, כדי לדמות מיקום על שולחן ניתוחים עמודי של Jackson. המסגרת משתמשת ברצועות מתכווננות המוצמדות תחת החזה והאגן של בעל החיים, מה שמאפשר לבטן להישאר חופשייה, ובכך ממזער את הלחץ על הבטן והחזה ואת הדימום הוורידי האפידורלי הנובע מכך.המסגרת מספקת גם קיבוע חיצוני של עמוד השדרה. לצורך הפרוצדורה, הניחו את החיה על פד חימום עם סירקולציה לשמירה על טמפרטורת הגוף. לאחר מכן, השחילו קטטר לווריד השולי של האוזן למתן נוזלים ותרופות במהלך הניתוח.לאחר מכן, הכינו את שדה הניתוח בעזרת אלכוהול וכלורהקסידין או תמיסת Betadine, והניחו סדיני ניתוח על שדה הניתוח. בצעו חתך עורי של 10 עד 15 סנטימטרים והשתמשו באלקטרו-קוואטר מונופולרי כדי לבצע דיסקציה דו-צדדית של שרירי הגב (paraspinal musculature). לאחר מכן, התחילו בלמינקטומיה דורסלית רב-מפלסית באמצעות Rongeurs ומקדחה כירורגית להסרת זקיקי העצם (spinous processes) ובצעו למינוטומיה של החוליות מעל סגמנטים C3 עד C5 או L2 עד L4.ה-Derrick לספיינל הוא מכשיר שנועד להחדרת טיפולים גנטיים ותאיים אל תוך חוט השדרה. כדי לקבע את המכשיר למטופל, בצעו חתכי עור של סנטימטר אחד מעל ומתחת לחתך הראשי. החדירו מוטות פרקוטניים דרך החתכים וקבעו אותם ללמינה כדי לחשוף את האזור הנדרש של חוט השדרה ולהשלים את הלמינקטומיה. הכניסו את להבי הרטרקטור האינטגרליים וחברו אותם ל-derrick.הסיטו את הרקמה תוך써 משיכה כלפי מעלה של הזרירים (spinous processes). חיתכו את הרצועות הבין-זריריות (interspinous ligaments) ואת ה-ligamentum flavum והשלימו את הלמינקטומיה (laminectomy). הקנולה מורכבת ממחט בכיול 30 המחוברת לצינור גמיש בכיול 30 עם שתי מעטפות מתכת, מעטפת חיצונית ניידת ומעטפת פנימית קבועה.באמצעות שימוש בסירינגת Hamilton עם חיבור Luer Lock המחוברת למשאבת מיקרו-הזרקה, התאם את הקצה הדיסטלי, ובעזרת קנולה חיצונית בכיול 24 gauge הממוקמת על הקצה הפרוקסימלי של אבזורי מחט ההזרקה והנרתיק, חשוף את הקצה הפרוקסימלי כדי להגיע לחוט השדרה. ראשית, מזריקי בולוס של methyl prednisone. לאחר מכן, מקם בזהירות את המכשיר כדי להרים את הקרומיות (dura) מהחוט השדרה.השתמשו בכלי דנטלי מסוג Woodson ובלהב מספר 11 כדי לבצע חתך של 2.5 centimeter דרך הקשיה (dura). לאחר מכן, השתמשו בתפרי nulon במידה 4-0 כדי להסיט את הקשיה מהשכבה המקולפת ולקבע אותה לשרירי הפרה-ספינליים העמוקים. הניחו רפידות כירורגיות (surgical patties) סביב חוט השדרה.לאחר מכן, חברו את מערכת מסילות הפלטפורמה על ידי הצמדת החלק העליון תחילה, העמסת הגונדולה על שני המוטות והרכבת התחرك Z על המפרק האוניברסלי. בשלב הבא, הניחו את הקנולה הטעונה על המיקרו-דרייב והשתמשו במפרק האוניברסלי שעל פלטפורמת המיקרו-הזרקה כדי לכוון את הזוויות הקורונליות והסגיטליות, דבר שיבטיח מסלול ניצב לפני השטח של הזרקות השדרה, בהמשך להנחת הקנולה. לאחר מכן, מקמו את המחט מדיאלית לאזור כניסת השורש הגבי (dres), ומשכו מעלה את השרוול החיצוני ממתכת קשיחה, כך שתישאר צינורית הגמישה חשופה.הזריקו לאתר המטרה באמצעות משאבת מיקרו-הזרקה מכוילת מראש. לאחר מכן, השאירו את המחט במקומה למשך דקה נוספת כדי למנוע רפלוקס (נסיגה) של תאים במעלה נתיב ההזרקה של הקנולה. לאחר הסרת המחט, העבירו את המכשיר הסטריאוטקסי לאתר המטרה הבא, במרחק של שני עד ארבעה מילימטרים לאורך הציר הרוסטרלי-קודאלי, כדי להימנע מכלי דם גלויים על פני השטח הדורסליים של חוט השדרה.לאחר הסרה עדינה של המכשור מהעמוד השדרה, השתמשו בחוט nylon במידה 4-0 כדי לסגור את הקשה (dura) באופן אטום למים. לאחר סגירת השכבה השרירית העמוקה ושכבות הפסציה באמצעות תפר Vicryl, השתמשו בתפר nylon במידה 3-0 לסגירת העור. עם התאוששות מההרדמה, בצעו אתרנבציה (extubate) ועקבו אחר בעל החיים במשך שעתיים. לצורך אלגזיה פוסט-אופרטיבית, הדביקו בעזרת סנורית (staple) מדבקת fentanyl טרנסדרמלית לגב בעל החיים למשך שלושה ימים.בנוסף, ניתן להעניק buprenorphine עד שלושה ימים לאחר הניתוח במידת הצורך. לאחר מכן, העבירו את בעל החיים לכלוב אישי ועקבו אחריו לפחות פעם ביום. נתונים התנהגותיים לגבי צריכת מזון, הפרשות ומיקרו-תזונה נאספים כדי להעריך תחלואה נוירולוגית.כפי שתואר בעבר, בטיחות הפרוצדורה נקבעת על ידי יכולתו של בעל החיים לחזור לרמת הבסיס שלפני הניתוח. גירעונות נוירולוגיים חולפים צריכים להיפתר ברובם בין היום הראשון לשביעי לאחר הניתוח, עם כמה שינויים התלויים בגזעים ובפרוצדורה. תחלואה קבועה מוגדרת כגירעונות נוירולוגיים מתמשכים, שאינם נפתרים עד שהבעליים מגיעים לנקודת הסיום של ה-iacuc לאחר פרוצדורה זו.ניתן להשתמש בשיטות אחרות, כגון אימונוכימיה, כדי לקבוע נתונים חשובים כגון חיות התאים, נדידת התאים ודיוק ההזרקה.

surgical-technique-for-spinal-cord-delivery-therapies-demonstration

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

השימוש חזירים מקומיים זעירים במדע גדל באופן משמעותי בשנים האחרונות. באמצעות הוכחת כיצד לבצע אינטובציה, צנתור שלפוחית ​​השתן transurethral, ​​עורק הירך ואת צנתור וריד, כמו גם זלוף transcardial, אנו שואפים להגביר עוד יותר את הערך של גטינגן minipigs במחקר ביו.

טכניקות ניתוחיות בסיסי Minipig גטינגן: אינטובציה, צנתור שלפוחית ​​השתן, צנתור כלי עצם הירך, ו זלוף Transcardial

מקור: Unger, M. D., et al., Laminotomy לגישה והזרקה של גנגליון שורש הגב המותני בחזירים. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים הליך למינטוטומיה בחזיר מורדם כדי לגשת לגנגליון שורש הגב המותני לאספקה נוירותרפיוטית ממוקדת באמצעות אספקה משופרת בהסעה.

למינוטומיה להזרקה ממוקדת לגנגליון שורש הגב המותני במודל חזיר

סרטון זה מדגים את ההשתלה של מערך אלקטרוקורטיקוגרפיה רכה ואת ההקלטות ארוכות הטווח של קליפת המוח במיני-חזיר. הוא מתאר את השלבים הכרוכים בהשתלה כירורגית של המערך מעל קליפת המוח השמיעתית של המיני-חזיר ורישום פוטנציאלי פעולה עצביים המעוררים גירוי בסיסי וצלילי.

השתלה תת-דוראלית של מערך אלקטרוקורטיקוגרפיה רכה לרישום אלקטרופיזיולוגיה קורטיקלית במיני-חזירים

טיפול בפגיעה בחוט השדרה הצווארי עם פפטידים בהרכבה עצמית (SAP) ותאי מבשר עצביים (NPC), יחד עם גורמי גדילה, היא גישה מבטיחה לקידום התחדשות והתאוששות. הוקם מודל עכברוש קליפ מפרצת חבלה/דחיסה של SCI צוואר הרחם וטיפול משולב הכולל הזרקת SAP והשתלת NPC.

שימוש סינרגטי של תאים עצביים מבשר ופפטידים עצמי הרכבה בפגיעה בחוט השדרה הניסויית צוואר הרחם

פגיעה בחוט השדרה היא מצב טראומטי שגורם לתחלואה קשה ותמותה גבוהה. בעבודה זו אנו מתארים בפירוט מודל חבלה של פגיעה בחוט השדרה בעכברים ואחרי השתלה של תאי גזע עצביים.

השתלת תאי גזע עצבית בדגם ניסיוני של Contusive פגיעה בחוט השדרה

כאן, אנו מציגים שיטה להעריך ברגים transpedicular באמצעות מודל vivo חזירי המותניים עמוד השדרה.

הרדמה, ניתוח, שיטת הקציר להערכת ברגים transpedicular באמצעות<em&gt; בויבו</em&gt; חור שדרה מותני

מיקרו-סירקולציה בחוט השדרה ממלאת תפקיד מרכזי בפגיעה בחוט השדרה. רוב השיטות אינן מאפשרות הערכה בזמן אמת של מיקרו-סירקולציה של חוט השדרה, החיונית לפיתוח טיפולים ממוקדי מיקרו-סירקולציה. כאן, אנו מציעים פרוטוקול באמצעות לייזר-דופלר-זרימה מחט בדיקות במודל בעלי חיים גדול של איסכמיה / רפרפוזיה.

הערכה בזמן אמת של מיקרופרפוזיה בחוט השדרה במודל חזירי של איסכמיה/רפרפוזיה

במאמר זה אנו מתארים טכניקה חדשה ומהירה המדמה פגיעה בחוט השדרה הפתוח בחולדות ומבטלת כריתת למינקטומיה. המיסקציה צידית מבוצעת תוך כדי צפייה דרך מיקרוסקופ. הטכניקה היא רב-תכליתית וניתן להשתמש בה גם באזורים הצוואריים, החזה והמותניים של חוט השדרה של בעלי חיים אחרים.

טכניקת המיסקציה צידית זעיר פולשנית ומהירה של חוט השדרה למידול פגיעות בעמוד השדרה הפתוח בחולדות

טכניקות זעיר פולשניות ומכשיר מעבדה פשוט משפרים את יכולת השכפול של מודל הפגיעה בחוט השדרה על ידי הפחתת הנזק האופרטיבי לחיות הניסוי ומתן אפשרות לתחזוקה של המורפולוגיה האנטומית. השיטה כדאית משום שהתוצאות האמינות וההליך הניתן לשחזור מקלים על חקירת מנגנוני תיקון המחלה.

הקמת מודל פגיעה בעמוד השדרה של חבלה בעכבר המבוסס על טכניקה זעיר פולשנית

פרוטוקול כירורגי זה הוא מדריך שלב אחר שלב להחדרת קטטר תוך-תקלי לחלל התת-דוראלי בעמוד השדרה של מכרסם כדי לספק טיפול ממוקד.

גישה לחלל התת-דוראלי של חוט השדרה המכרסם למתן טיפול

למד טכניקה כירורגית למשלוח תרופות ביולוגיות לחוט השדרה ב-Göttingen Minipigs. השיטה כוללת למינקטומיה, הרכבת מתקן ייצוב וזריקות תוך-שדרתיות לדיוק ולבטיחות.

טכניקה כירורגית למשלוח חוט שדרה של טיפולים: הפגנה של הנוהל בגטינגן Minipigs

גלה סרטונים נוספים