Name: הכנה ואיון פעולה של הפתוגן מוצרי Double מנת באפי Coat טסיות דם באמצעות מערכת הדם ליירט (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-12-07T11:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 40 s
Description: למדו הכנת מרכזי טסיות דם מנת כפולה מחלבון לבן באמצעות מערכת INTERCEPT להשבתת פתוגנים. השיטה מייצרת שתי מנות טיפוליות עם איכות תקינה לאורך שבעה ימי אחסון.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מימון לפרסום מסופק על ידי Cerus קורפ, יצרנית של מערכת הדם ליירט.

<ol><li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+to+the+preparation%2C+use+and+quality+assurance+of+blood+components%22">Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components</a>. , 16th, Council of Europe. (2010).</li>
<li>Van Rhenen, D. J., Vermeij, J., Mayaudon, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+characteristics+of+S-59+photochemically+treated+platelet+concentrates+derived+from+buffy+coats%5BTitle%5D)+AND+%22Vox+Sang%22%5BJournal%5D)">Functional characteristics of S-59 photochemically treated platelet concentrates derived from buffy coats.</a> Vox Sang. 79, 206-214 (2000).</li>
<li>Wollowitz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+DNA+and+RNA+in+pathogens%3A+mode+of+action+of+amotosalen+HCl%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus.+Med.+Rev%22%5BJournal%5D)">Targeting DNA and RNA in pathogens: mode of action of amotosalen HCl.</a> Transfus. Med. Rev. 31, 11-16 (2004).</li>
<li>Irsch, J., Lin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogen+Inactivation+of+Platelet+and+Plasma+Blood+Components+for+Transfusion+Using+the+INTERCEPT+Blood+SystemTM%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus.+Med.+Hemother%22%5BJournal%5D)">Pathogen Inactivation of Platelet and Plasma Blood Components for Transfusion Using the INTERCEPT Blood SystemTM.</a> Transfus. Med. Hemother. 38, (2011).</li>
<li>Lin, L., Dikeman, R., Molini, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photochemical+treatment+of+platelet+concentrates+with+amotosalen+and+long-wavelength+ultraviolet+light+inactivates+a+broad+spectrum+of+pathogenic+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Photochemical treatment of platelet concentrates with amotosalen and long-wavelength ultraviolet light inactivates a broad spectrum of pathogenic bacteria.</a> Transfusion. 44, 1496-1504 (2004).</li>
<li>Lin, L., Hanson, C., Alter, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inactivation+of+viruses+in+platelet+concentrates+by+photochemical+treatment+with+amotosalen+and+long-wavelength+ultraviolet+light%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Inactivation of viruses in platelet concentrates by photochemical treatment with amotosalen and long-wavelength ultraviolet light.</a> Transfusion. 45, 580-590 (2005).</li>
<li>Allain, J. P., Cianco, C., Blajchman, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protecting+the+blood+supply+from+emerging+pathogens%3A+the+role+of+pathogen+inactivation%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus.+Med.+Rev%22%5BJournal%5D)">Protecting the blood supply from emerging pathogens: the role of pathogen inactivation.</a> Transfus. Med. Rev. 19, 110-126 (2005).</li>
<li>Stramer, S., Hollinger, F., Katz, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+infectious+disease+agents+and+their+potential+threat+to+transfusion+safety%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Emerging infectious disease agents and their potential threat to transfusion safety.</a> Transfusion. 49, 1S-29S (2009).</li>
<li>Nussbaumer, W., Allesdorfer, D., Grabmer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+transfusion+of+platelet+components+contaminated+with+low+levels+of+bacteria%3A+a+comparison+of+bacteria+culture+and+pathogen+inactivation+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Prevention of transfusion of platelet components contaminated with low levels of bacteria: a comparison of bacteria culture and pathogen inactivation methods.</a> Transfusion. 47, 1125-1133 (2007).</li>
<li>Schlenke, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+against+Transfusion-Associated+Graft-versus-Host+Disease+in+Blood+transfusion%3A+Is+Gamma-Irradiation+the+Only+Answer%3F+Transfus%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Hemother%22%5BJournal%5D)">Protection against Transfusion-Associated Graft-versus-Host Disease in Blood transfusion: Is Gamma-Irradiation the Only Answer? Transfus.</a> Med. Hemother. 31, 24-31 (2004).</li>
<li>Lin, L., Corash, L., Osselear, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+Against+TA-GVHD+Due+to+Platelet+Transfusion+By+Using+Pathogen+Inactivation+with+the+INTERCEPT+Blood+SystemTM+-+Gamma+Irradiation+is+Not+the+Only+Answer%5BTitle%5D)+AND+%22Haematologica%22%5BJournal%5D)">Protection Against TA-GVHD Due to Platelet Transfusion By Using Pathogen Inactivation with the INTERCEPT Blood SystemTM - Gamma Irradiation is Not the Only Answer.</a> Haematologica. 95 (Extra 1), 230-237 (2010).</li>
<li>Corash, L., Lin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+processes+for+inactivation+of+leukocytes+to+prevent+transfusion-associated+graft-verus-host+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Marrow+Transplant%22%5BJournal%5D)">Novel processes for inactivation of leukocytes to prevent transfusion-associated graft-verus-host disease.</a> Bone Marrow Transplant. 33, 1-7 (2004).</li>
</ol>

הייצור והגישה חופשיה למאמר זה הוא בחסות Cerus.

טסיות מעייל באפים דורשות מספר שלבי עיבוד שתוצאה בעלויות לאחר איסוף, כולל זמן כוח אדם, חומרים מתכלה, ציוד ופסולת, אשר חייבת להיות בחשבון את העלות הכוללת של הפקת יחידות טסיות הדם. שיפור תפוקת טסיות דם מכל מעייל באפים (באמצעות אופטימיזציה נפח מעייל באפים והמטוקריט) מאפשר ייצור של יחידה כפולה מנת אפי מעייל טסיות מברכה של שבעה מעיילים באפים. כאשר אופטימיזציה זו מתבצעת, מספר אפי המעיילים הנדרשים כדי לייצר מספר קבוע של מנות טסיות עשוי להיות מופחת, ובכך לשפר את הניצול הכולל של אפי מעיילים ומאפשר ייצור של טסיות דם נוספות מתרכז (מחשבים). זמן כוח אדם, כמו גם עלויות מתכלות וציוד כגון מקלטים נקווים, פתרון תוסף טסיות דם, ופלי חיבור סטריליים, ערכות מסננות, ונהלי צנטריפוגה מופחת בשיעור של עד 50%. בנוסף לייעול ייצור טסיות דם והפחתת עלויות נלוות, thiשיטה של ​​האיגום יכול לייצר תרכיז טסיות (PC) שיעמוד בדרישת הקלט לשימוש עם הסט ליירט כפול אחסנת מכולות עיבוד, ומאפשרת לנו לספק הגנה משופרת למקבלי העירוי שלנו גם כן. מערכת הדם ליירט לאיון הפתוגן משתמשת amotosalen וסגול בהירות (UVA) ל-DNA קוולנטית קישור לחצות ו-RNA, מניעת שכפול חומצות גרעין ופתוגנים טיוח שאינם מסוגל לגרום למחלה. 3 זה למעשה מנטרל קשת רחבה של פתוגנים, כולל וירוסים, חיידקים , טפילים, ותאי דם לבנים מזהמים תורם. 4-6 ליירט מספק חלופה לפרדיגמה הנוכחית הבדיקות לפתוגנים מתעוררים, שמבחין הסטורי כרוכה עיכוב משמעותי בזמן בדיקה חדשה שפותחה וסופו של דבר דורשת השקעה כספית משמעותית ליישום בעת מבחן הופך להיות זמין. 7,8 זה גם יכול לספק חלופה לבטיחות measu המיותרמיל כגון גילוי חיידקים 9 וקרינת גמא. 10-12 בנוסף, ליירט מאפשר לנו לטפל ביחידות טסיות מנה כפולות אשר יתרונות יעילות הייצור שלנו ומסייע לנו לדבוק בתקציבים שלנו. ליירט ושיטת הפרווה הכפולה מנת האפים ניתן להתאים למגוון רחב של תהליכי עבודה במרכז בדם. כדוגמאות, אוספי דם מלאים ניתן להגדיל עד 500 מ&quot;ל; אוספים גם יכולים להיות מאוחסנים בלילה 22 מעלות צלזיוס לפני ההפרדה. בנוסף, שיטה חלופית אפי מעייל וריכוז היא אפשרית (למשל שיטת תמנון במקום שיטת רכבת) ו / או מכשיר אוטומטי (למשל TACSI) יכול להיות מנוצל לצנטריפוגה השנייה וההפרדה של השעית טסיות הדם מהתאים האדומים שנותרו . אם תוכן של טסיות דם מוגבר יש צורך, מספר טכניקות זמינות כוללות בחירה מראש של תורמים המבוססת על ספירת הטסיות, דגירת הלילה של הדם המלא, adjustment של הגדרות צנטריפוגה, או ניצול ברכה של 8 מעיילי אפים במקום 7. בשל ההגבלה של איגום קובע זמין כרגע והקיבולת של דליי צנטריפוגות, הנפח הכולל של ברכת המעייל באפים צריך להיות כ 600 מ&quot;ל. תהליך צנטריפוגה וההגדרות המתוארות בפרוטוקול זה המוטב להניב מוצר אשר עונו על הפרמטרים ליירט לברכה של 7 מעיילים באפים. הגדרות צנטריפוגה חייבות להיות שונות אם המספר באפי המעיילים בברכה הוא שונה. במדינות מסוימות, במינון המינימאלי הוא טסיות הדם גבוה ודרישות QC הן קפדניות יותר מאשר בשוודיה. ככזה, התוצאות שלנו לא יכולות להיות אוניברסלי ישימות. במדינות אלו, מחשב המנה הכפולה לפני הטיפול ליירט יצטרך להכיל מספר גדול יותר של טסיות דם על מנת לעמוד בדרישות מקומיות לאחר טיפול ופיצול ליירט. בגלל תוכן הטסיות המרבי וטיפול הנפח for ליירט הם 7x10 11 טסיות ו420 מיליליטר בהתאמה, אחוז היחידות ומעבר לדרישות העיבוד ליירט או תוכן הטסיות מספיק כדי להיות מחולק לשני מינונים טיפוליים, ישתנה בהתאם לגורמים כגון דרישות מקומיות למנת טסיות, קריטריוני QC, תוצאות אפי מעייל לאופטימיזציה ויציבות ייצור. אם מחשב של מנה כפולה עולה על דרישות העיבוד ליירט, זה יכול להיות מותאם באופן ידני כדי לעמוד בדרישות ובהמשך הטיפול. בפעמים המעטות שבו ברכת המעייל 7-האפים מניבה טסיות מספיקות למוצר מנה כפולה לאחר יירוט, אנו בוחרים שלא לבצע את הטיפול ליירט. לחלופין, מרכזי דם אחרים יכולים לבחור לטיפול במחשב עם סט אחד מינון ליירט עיבוד (כלומר סט הנפח הגדול) ולאחסן את המחשב כמינון טיפולי אחד גדול, ובזה עשה איון הפתוגן בכל היחידות. על מנת להבטיח שאנו פוגשיםדרישות QC ולפתוגן לנטרל כמה שיותר היחידות שלנו טסיות ככל האפשר, אנו בוחרים מעיילי אפים המבוססים על ספירת טסיות הדם התורם, שכאשר ראו נקווה, תוביל תוכן הטסיות מינימאלי של 11 5.6x10 טסיות בברכה. הדבר מבטיח תוכן הטסיות מספיק כדי לייצר שני מינונים טיפוליים לאחר טיפול ליירט. האימות שלנו מוכיחה כי 7 יחידות שלמות דם שמקורם באפי מעייל ניתן נקוותה בהצלחה וטופלו בתהליך היירוט לטסיות דם, וכתוצאה מכך 2 מוצרי טסיות מומתים פתוגן שעומדות בקריטריונים לקבלה לייצור (דרישות שבדיות והנחיות אירופיות) ולתמיכה בחולים דורש עירויי טסיות בהתאם להנחיות קליניות ושיטות עירוי טסיות סטנדרטיות בשבדיה.

<table><tbody><tr><td colspan="4">תרומת דם מלא, הפרדה ראשונית והפקת טסיות דם</td></tr><tr><td>ערכה לאיסוף דם</td><td>Fenwal</td><td>R6485</td><td>סט עליון/תחתון</td></tr><tr><td>מחלץ רכיבים אוטומטי</td><td>Fenwal</td><td>Optipress-II</td><td></td></tr><tr><td>מערכת שקילה וערבוב דם</td><td>בסתר</td><td>Easymix V3</td><td></td></tr><tr><td>ערכה לסינון טסיות ולויקוציטים</td><td>Fenwal</td><td>K4R7042</td><td></td></tr><tr><td>צנטריפוגה</td><td>Hettich</td><td>Roto Silenta 63 RS</td><td>גרסה 5.5</td></tr><tr><td>תמיסת תוספים לטסיות - SSP+</td><td>MacoPharma</td><td>SSP2030U</td><td>300 מ"ל</td></tr><tr><td>מלחמי צינוריות סטריליים</td><td>Terumo</td><td>T-SCD</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">טיפול ב-INTERCEPT &amp;amp; אחסון</td></tr><tr><td>ערכת עיבוד INTERCEPT</td><td><a href="http://www.interceptbloodsystem.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Cerus</a></td><td>INT2503</td><td>סט אחסון כפול (DS)</td></tr><tr><td>מאיר INTERCEPT</td><td><a href="http://www.interceptbloodsystem.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Cerus</a></td><td>INT100</td><td></td></tr><tr><td>מארז דגימות PC</td><td>Fenwal</td><td>FTX 1122</td><td></td></tr><tr><td>אינקובטור</td><td>Helmer</td><td>PC2200/PC3200</td><td></td></tr><tr><td>מערבל</td><td>Helmer</td><td>PF48H/PF96H</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">הערכה של &lt;em&gt;in vitro&lt;/em&gt; תפקוד טסיות דם</td></tr><tr><td>מנתח גזי דם</td><td>רדיומטר</td><td>ABL 735</td><td>משמש למדידת pH, גזי דם ולאקטט</td></tr><tr><td>מערכת כימית</td><td>Ortho Clinical Diagnostics</td><td>Vitros 5.1</td><td>משמש למדידת גלוקוז</td></tr><tr><td>מנתח המטולוגי</td><td>Boule Medical AB</td><td>Medonic CA620-Cellguard</td><td>משמש למדידת ספירת טסיות דם</td></tr><tr><td>ציטומטר זרימה</td><td>BD</td><td>FACSCanto</td><td>משמש למדידת תאי דם לבנים</td></tr></tbody></table>

הכנה ואיון פעולה של הפתוגן מוצרי double מנת באפי coat טסיות דם באמצעות מערכת הדם ליירט

Preparation and Pathogen Inactivation of Double Dose Buffy Coat Platelet Products using the INTERCEPT Blood System

מרכזי דם מתמודדים עם אתגרים רבים, כולל תשואה למקסם הפקה מתרומות הדם שהם מקבלים המוצר כמו גם להבטיח רמת הבטיחות הגבוהה עבור חולי עירוי, כולל הגנה מפני מחלות המועברות במגע עירוי. זה חייבת להתבצע באופן אחראי מבחינה כספי אשר ממזער את ההוצאות תפעוליות, כולל חומרים מתכלה, ציוד, פסולת, ועלויות כוח אדם, בין שאר. מספר שיטות זמינות כדי לייצר טסיות דם מתרכזת בעירוי. האחד הנפוץ ביותר הוא שיטת המעייל באפים שביחידת טסיות טיפולית יחידה (2.0 ≥ 11 טסיות X10 ליחידה או לתקנות מקומיות) הוא הוכן על ידי איגום שכבת המעייל באפים עד שש מתרומות דם שלמות. הליך להפקה &quot;מנה כפולות&quot; טסיות דם כל נגזרים רק לאחרונה פותח. מוצגת כאן היא שיטה חדשנית להכנהכל טסיות דם מנה כפולות נגזרות מתרכזות מברכות של 7 מעיילי באפי ולאחר מכן טיפול ביחידות המנה הכפולות עם מערכת הדם ליירט לאיון הפתוגן. ליירט פותח כדי לנטרל וירוסים, חיידקים, טפילים ותאים לבנים תורמים מזהמים שעלולה להיות נוכח בדם שנתרם. שיוך ליירט בשיטת הפרווה הכפולה מנת האפים על ידי ניצול העיבוד ליירט גדר עם מכל אחסון כפול (&quot;סט DS&quot;), מאפשר למרכזי דם לטיפול בכל אחת מיחידות המנה הכפולות שלהם בסט עיבוד בודד פתוגן איון, ובכך למקסם את בטיחות מטופל תוך מזעור עלויות. שיטת הפרווה הכפולה מנת האפים דורשת מעיילי אפים פחות ומפחיתה את השימוש בחומרים מתכלה על ידי עד 50% (סטים כגון איגום, מערכות סינון, פתרון תוסף טסיות דם, וופלי חיבור סטריליים) בהשוואה להכנה וטיפול ביחידות בודדות במינון אפי מעייל טסיות . חיסכון בעלויות אחר כולל פחות פסולת, פחות הציוד maintenance, דרישות הספק נמוכות, הקטין זמן אנשים, ועלות גבייה נמוכה בהשוואה לטכניקת אפרזיס.

מאמר זה מתאר את התהליך שבו בית החולים של אוניברסיטת Örebro לייצר טסיות כפולות מנת אפי מעייל מתרכז הוכנו מתרומות דם שלמות וטופלו במערכת הדם ליירט לאיון הפתוגן.<em&gt; במבחנה</em&gt; איכות של יחידות טסיות הסופיות מוערכת על פני 7 ימים של אחסון.

הכנה ואיון פעולה של הפתוגן מוצרי Double מנת באפי Coat טסיות דם באמצעות מערכת הדם ליירט

מרכזי דם ניצבים בפני אתגרים רבים, כולל מקסום תנובת הייצור מתרומות תוצרי הדם שהם מקבלים, כמו גם הבטחת ה...

בסרטון זה, יוכנ תרכיז טסיות במינון כפול ממאגר של שבע שכבות Buffy coat, ולאחר מכן יעובד באמצעות Intercept. לאחר צפייה בסרטון זה, תרכשו הבנה טובה של אופן הייצור של תרכיז טסיות במינון כפול שעבר נטרול פתוגנים. ראשית, נציג סקירה סכימטית ולאחריה הדגמה.שבע יחידות ראשונות של דם מלא שנתרם עוברות סבב בצנטריפוגה ומופרדות כדי להפיק שבע יחידות של שכבת Buffy coat העומדות ביעדי הנפח וההמטוקריט. שכבות ה-Buffy coat מחוברות, מאוגדות ועוברות צנטריפוגה. לאחר מכן, תרחיף הפלטלטים מופרד מתאי הדם האדומים שנותרו כדי להפיק ריכוז פלטלטים במינון כפול, לצורך נטרול פתוגנים ולבקוציטים.ריכוז טסיות במינון כפול מטופל באמצעות מערכת ה-intercept, המבצעת קשירה צולבת של חומצות גרעיניות. בסופו של דבר, הליך זה מניב שתי מנות טסיות טיפוליות בעלות איכות in vitro מקובלת לאורך שבעה ימי אחסון, כפי שנקבע על ידי הערכה של pH, גלוקוז, לקטט, PO₂ ו-PCO₂, ובדיקת צמידות. טכנאי ממרכז הדם ידגים את ההליך, ואנו נתאר את דרישות העיבוד.ראשית, ודא שריכוז הטבחית במינון כפול עומד במפרטי העיבוד של intercept של 300 עד 420 milliliters. נפח של 2.5 עד שבע פעמים 10¹¹ של מינון הטבחית, ופחות מארבע פעמים 10⁶ per milliliter של תאי דם אדומים. התחל הליך זה עם שבע יחידות של דם מלא שנאספו בערכות איסוף top bottom של 450 milliliter.הניחו את יחידות הדם בכוסות צנטריפוגה ובצעו סבב מהיר (hard spin) ב-4,880 RCF למשך 11 דקות בטמפרטורת החדר עם הגדרת בלימה B five, בהתאם להוראות היצרן. לאחר הסבב, הדם יופרד לשלוש שכבות: תאי דם אדומים, שכבת הבאפי (buffy coat) ופלזמה. העבירו את הפלזמה לשקית הלוויין העליונה ואת תאי הדם האדומים לשקית הלוויין התחתונה, והשאירו את שכבת הבאפי, בנפח של כ-48 milliliters ו-37% hematocrit, במיכל האיסוף.הניחו את שכבות ה-Buffy coats על מנער פלטלטים (platelet agitator) בטמפרטורה של החדר למשך לילה בחיבור סטרילי, שבע שכבות Buffy coats ו-300 milliliters של SSP בתוספת תמיסת תוסף לפלטלטים (platelet additive solution). בתצורת ניקוז, כאשר תמיסת התוסף נמצאת למעלה, סגרו את הצינור בין תמיסת התוסף לשכבת ה-Buffy coat הראשונה כפי שמוצג כאן. פתחו את הריתוכים בין יחידות ה-Buffy coat ואפשרו להן להתנקז אל מיכל ה-Buffy coat האחרון.בשלב הבא, פתחו את התסביב ואת הריתוך שבין תמיסת התוסף לשכבת ה-buffy coat הראשונה, ואפשרו לכמות של כשליש מתמיסת התוסף, כ-100 milliliters, להישטוף דרך כל אחד ממכלי שכבת ה-buffy coat באופן רצופי לפני סגירת התסביב; חזרו על השטיפה פעמיים נוספות, כאשר בכל פעם נעשה שימוש בכ-100 milliliters של תמיסת התוסף. נתקו את מכל ה-buffy coat המרוכז מהמכלים הריקים. נפח ה-buffy coat המרוכז, כולל תמיסת התוסף, אמור להיות כ-600 milliliters.הניחו את שכבות הבאפי (Buffy coats) המאוחדות על שייקר למשך שעה אחת בטמפרטורת החדר. לאחר מכן, חברו מכל אחסון טסיות עם מסנן להפחתת לוקוצטים (leco reduction filter) מובנה לשקית המכילה את מאגר שכבות הבאפי. הניחו את שכבות הבאפי המאוחדות ואת מכל אחסון הטסיות בצנטריפוגה וסובבו במהירות של 462 RCF למשך תשע דקות ו-20 שניות.בעקבות הסבב, העבירו את תרחיף הפלטלטים דרך מסנן Luca reduction אל תוך מיכל אחסון הפלטלטים. התוצאה היא ריכוז פלטלטים במינון כפול המכיל כ-7×10¹¹ פלטלטים ב-420 milliliters, אשר ניתן להעבירו תהליך לביטול פעילות פתוגנים באמצעות intercept לביטול פעילות פתוגנים. ריכוז הפלטלטים במינון הכפול מטופל באמצעות ערכת עיבוד intercept, המורכבת ממיכל antoin, מיכל הארה ושני מיכלי אחסון.חבר את מיכל תרחיף הטבחונים למיכל ה-Amin בערכת העיבוד של ה-intercept. לאחר מכן, תלה את הטבחונים. שבור את הקנולה התחתונה במיכל ה-amin כדי לאפשר לתמיסה לזרום לתוך מיכל ההארה.לאחר מכן, שברו את הקנולה העליונה במכל ה-Amin כדי לאפשר לטבקיות לזרום דרך מכל ה-Amin אל מכל ההארה. ערבבו בעדינות את תערובת הטבקיות וה-am tosin. לחצו קלות על מכל ההארה כדי להוציא ממנו את האוויר.אטמו את הפיתול בין מיכל ההארה למיכל האמאטו כך שלא יותר מארבעה סנטימטרים של פיתול יבלטו ממיכל ההארה. הסירו והשליכו את המכלים הריקים. הניחו את ערכת העיבוד במכשיר ההארה, כאשר מיכל ההארה נמצא בתא הגדול מצד שמאל והמארגן נמצא בתא הקטן מצד ימין.סרוק את מזהה התרומה. קוד מוצר ועיבוד. הגדר את מספר האצווה במאיר.סגרו את המכסה המתכתי ואת המגירה. לחצו על start כדי להתחיל את ההארה. המאיר מספק מנה מבוקרת של אור UVA לתערובת פלטלט-אמין במכל ההארה.אמין נקשר בין זוגות הבסיסים של חומצות הגרעין של פתוגנים, שעשויים להיות נוכחים ביחידת טבקיות הדם. עם חשיפה לאור, נוצרים קשרי צלב קבועים הנועלים את ה-DNA או ה-RNA יחד, כך שהפתוגנים אינם יכולים להתרבות עוד ולגרום למחלה אצל מקבל מוצר הדם. לאחר ההארה, הסר את ערכת העיבוד.בשלב הבא, הוציאו את המכלים מהארגז, ותלו את הלוחיות ואת ערכת העיבוד. שברו את הקנולה בפתח היציאה של מכל התאורה ואפשרו ללוחיות לזרום אל מכל ה-CAD. בתוך מכל ה-CAD נמצאה פרוסה (wafer) עם חרוזי פוליסטירן מקרו-נקבוביים אימוביליזים המפחיתים את רמות האמין השארי במוצר הדם.הקפידו שלא לכופף את פרוסת ה-CAD. העבירו את האוויר ממכל ה-CAD אל מכל ההארה. אטמו את הפיתול ליד פתח הכניסה של מכל ה-CAD.הסיר והשליך את מיכל התאורה הריק. הנח את מיכל ה-CAD יחד עם מיכלי האחסון המחוברים אליו על מערבב טסיות למשך שש עד 16 שעות. פעולה זו תביא להפחתה של ה-amlin השיורי לריכוז של פחות או שווה ל-2 µM.לאחר הטיפול ב-CAD, הוצא את יחידות הטסיות מהמערבל, תלה את הטסיות, שבור את הקנולה בפתח היציאה של מכל ה-CAD ואפשר לטסיות לזרום אל שני מכלי האחסון. לאחר מכן, הוצא את האוויר ממכלי האחסון. אטום את הצינור מעל מחבר ה-Y והסר את מכל ה-CAD.התוצאה היא שני תרכיזי טסיות שעברו אינאקטיבציה של פתוגנים לצורך הערכת תפקוד טסיות in vitro. נקבעו מינון הטסיות, pH, PO2, ייצור לקטט וצריכת גלוקוז של הדגימות. תרכיזי הטסיות נבדקו לאורך שבעה ימי אחסון.איור זה מציג את מנת הפלטלטים ההתחלתית הממוצעת של ריכוז הפלטלטים בכפל מנה לפני טיפול ה-intercept, ואת מנת הפלטלטים הממוצעת בכל אחד מהמוצרים המפוצלים שעברו טיפול לאורך שבעת ימי האחסון. כפי שניתן לראות כאן, אובדן הפלטלטים במהלך האחסון היה כ-9%. הפחתה זו אינה שונה מהאובדן הצפוי של פלטלטים במהלך אחסון של פלטלטים קונבנציונליים. על פי הדרישות האירופיות, ה-pH של הפלטלטים חייב להישאר מעל 6.4 עד לסוף חיי המדף.במהלך העיבוד, ה-pH של תרכיזי טסיות יורד מעט בהתאם לנפח ריכוז הטסיות ולחדירות הגזים של מכל אחסון הטסיות. איור זה מציג את ה-pH של מוצרי הטסיות המופרדות לאורך שבעה ימי אחסון; במהלך האחסון, ה-pH יציב ונשמר היטב במסגרת דרישות העיבוד. מטבוליזם אירובי אמור להמשיך להתרחש בטסיות המאוחסנות, והוא מהווה אינדיקטור ליכולתן של הטסיות לתפקד in vivo לאחר עירוי למטופל.צריכת ה-O2 והייצור של CO2 בטסיות מעידים על נשימה מתמשכת של הטסיות שנלכדו במיכל ה-PL 24 10 במהלך שבעה ימי אחסון. באופן דומה, מטבוליזם אנאירובי אמור להימשך בטסיות מאוחסנות. לפיכך, צריכת גלוקוז וייצור לקטט מהווים גם הם אינדיקטורים ליכולת התפקוד של הטסיות לאחר עירוי.שתי דמויות אלו מראות את רמות הלקטט והגלוקוז לאורך שבעה ימי אחסון. צריכת הגלוקוז וייצור הלקטט של הפלטלטים עקביים זה עם זה. במהלך שבעת ימי האחסון, בחמש יחידות היו רמות גלוקוז של פחות מ-1.11 millimoles per liter, המהוות את הגבול התחתון של בדיקת הגלוקוז.הכנת ה-Buffy coat ותיקוף האיחוד הניבו תרכיזי טסיות העומדים בקריטריוני הכניסה לטיפול ב-intercept, ובמיוחד מבחינת נפח, מספר טסיות, יחס פלזמה וזיהום בתאי דם אדומים. היחידות הסופיות עומדות בקריטריוני התיקוף לאורך שבעה ימי אחסון, כולל מינון טסיות ו-pH. היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטת הכנת ה-buffer code הקונבנציונלית, המייצרת תרכיז טסיות במינון בודד, הוא שהיא ממקסמת את תנובת הרכיבים מאיסופי דם, מפחיתה הוצאות תפעוליות על ידי שימוש בטכניקת מינון כפול ומשפרת את בטיחות המטופל באמצעות השבתה של פתוגנים המועברים בעירוי.

preparation-pathogen-inactivation-double-dose-buffy-coat-platelet

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

בסרטון זה, אנו מדגימים את הבידוד של תאי דם חד-גרעיניים היקפיים, PBMCs, המכילים מונוציטים ולימפוציטים ממעטפת באפי אנושית על ידי צנטריפוגה הדרגתית של צפיפות. ניתן להשתמש במרכזיות המבודדות לניתוח נוסף.

בידוד תאי דם חד-גרעיניים היקפיים ממעילי באפי אנושיים

בסרטון זה, אנו מתארים פרוטוקול לטיהור טסיות דם מדם שלם מורין והפעלתן לאחר מכן עם טרומבין אגוניסט טסיות. כאשר מנתחים אותם באמצעות ציטומטריית זרימה, טסיות המנוחה המטוהרות מאופיינות על סמך הביטוי של סמן פני השטח של התא CD41, בעוד שטסיות מופעלות מטוהרות מבטאות יחד את סמני פני השטח CD41 ו- CD62P.

טיהור והפעלה של טסיות דם מדם שלם

סרטון זה מדגים את תהליך הפחתת הפתוגנים מבוססי ריבופלבין ואור UV כנגד זיהום חיידקי בעל טיטר גבוה במוצרי טסיות דם אנושיים. תהליך זה יכול לסייע בהפחתת הסיכון לאירועי עירוי שליליים חמורים הקשורים לזיהום חיידקי.

טיפול בריבופלבין ובאור UV במוצרי טסיות דם לחיסול חיידקים

תנאי האחסון של מוצרי טסיות יוצרים סביבה אידיאלית למזהמים חיידקיים להתרבות לרמות מסוכנות.  מטרת מחקר זה הייתה להשתמש בבדיקה ליצירת מושבה כדי להעריך תהליך הפחתת פתוגנים מבוסס ריבופלבין כנגד זיהום חיידקי טיטר גבוה במוצרי טסיות דם אנושיים.

טיפול במוצרי טסיות דם עם ריבופלבין ואור UV: יעילות גבוהה נגד כייל קטריאלי זיהום

עירוי טסיות דם והמוסטזיס עוצבו באמצעות בנייה מחדש של דם ותאי זרימה מיקרופלואידיים כדי לחקור את תפקוד טסיות הדם. הנתונים מדגימים את ההשלכות של נגע אגירת טסיות דם על המוסטזיס, במבחנה.

Microfluidic זרימה צ&#39;יימברס שימוש מחדש דם למודל המוסטאסיס ואת טסיות עירוי<em&gt; במבחנה</em

בנייר זה, אנו מתארים שיטה להערכת Willebrand פון אנדותל מקדם שחרור, טסית דם עוקבות של לכידת תחת גזירה נוזלים בתגובה לגירויים דלקתיות באמצעות מערכת קאמרית זרימה במבחנה .

חוקרים פון Willebrand גורם פתופסיולוגיה באמצעות מודל קאמרית זרימה של פון Willebrand פקטור-טסיות מחרוזת היווצרות

ניהול מלאי טסיות בהתבסס על הקרנת microparticle בתוכן תרכיזים טסיות הוא יוזמה חדשה של שיפור איכות ב בנקי דם בבית החולים. המטרה היא להבדיל מופעל מ שלא הופעל טסיות כדי למטב את השימוש של טסיות דם. מתן טסיות שלא הופעל לחולים המטולוגיה-אונקולוגיה עשוי להפחית את הסיכון גבוהה שלהם להיות עקשן.

השגרה הקרנת שיטה עבור Microparticles ב עירויי טסיות

פרוטוקול זה מציג מדריך נגיש לאיסוף, אחסון והפשרה של תאי דם חד-גרעיניים היקפיים המתאימים לניתוחים ותהליכי עבודה במורד הזרם כמו ציטומטריית זרימה וריצוף RNA. קולקציות פלזמה ומעילים באפי מודגמות גם כן.

בידוד ושימור בהקפאה של תאים חד-גרעיניים אנושיים היקפיים בעלי יכולת קיימא גבוהה מדם שלם: מדריך למתחילים

פרוטוקול זה מפרט שיטה תואמת אוטומציה בתפוקה גבוהה לבידוד תאי דם חד-גרעיניים היקפיים אנושיים למטרות ביו-בנקאות ולמטרות אחרות.

בידוד תאי דם חד-גרעיניים היקפיים אנושיים ממעילי באפי באמצעות הפרדת חרוזים אימונומגנטית בתפוקה גבוהה

ניתן להעריך את תפקוד טסיות הדם תחת זרימה ולדמות החייאה המוסטטית באמצעות מכשיר מיקרופלואידי, שיש לו יישומים ברפואת טראומה ועירוי.

מיקרופלואידיקה בהערכת תפקוד טסיות הדם

חילוף החומרים של טסיות הדם מעניין, במיוחד בכל הנוגע לתפקיד של היפראקטיביות והיפראקטיביות של טסיות דם בדימום והפרעות פקקת. בידוד טסיות הדם מפלזמה הכרחי לכמה בדיקות מטבוליות; מוצגת כאן שיטה לבידוד מטבוליטים תוך-תאיים מטסיות דם שטופות.

הכנת טסיות דם אנושיות שטופות למחקרי שטף מטבולי כמותי

למדו הכנת מרכזי טסיות דם מנת כפולה מחלבון לבן באמצעות מערכת INTERCEPT להשבתת פתוגנים. השיטה מייצרת שתי מנות טיפוליות עם איכות תקינה לאורך שבעה ימי אחסון.

הכנה ואיון פעולה של הפתוגן מוצרי Double מנת באפי Coat טסיות דם באמצעות מערכת הדם ליירט

גלה סרטונים נוספים