Name: מנהל אפי של Therapeutics CNS לעכברי Awake (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-04-08T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 15 s
Description: למדו שיטה לניהול תרופות אינטרנזליות בעכברים ערים ללא הרדמה, המכוונת למערכת העצבים המרכזית ומאפשרת טיפול כרוני עם חשיפה מערכתית מינימלית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

המחברים מבקשים להודות לטיפול בבעלי חי HealthPartners המוסדי והשתמש ועדה בבית חולי אזורים.

1. הסתגלות לטיפול למינון אפי לעכברי Awake מבוא עכברים יש התאקלמו לטיפול לתקופה של 2-4 שבועות לפני תחילת המינון אפי. הסתגלות לטיפול היא חשובה, שכן היא מסייעת להבטיח תנוחת גוף נכונה ליעילות מקסימלית של אספקת סמים אפי ערה. בנוסף, עכברים שלא היה מורגלים היטב לתהליך זה יכול להיות תגובת חרדה קשה לאחר מינון. עכברים צריכים להשקיע כ 2-3 ימים על כל אחד מתשעה שלבים לפני שממשיך לשלב הבא, בהתאם לנוחותו של בעל החיים לטיפול. רמת הלחץ של העכבר צריכה לשמש כמדד להתקדמות. משמעות הדבר הוא ניטור התנועות של העכבר, את הכמות / תדירות מתן שתן, צואה, רועד, ולנשוך. אם יש עכבר בתגובה ללחץ גבוהה, להישאר באותו שלב לפני שממשיך הבא עד לתגובה מופחתת. מדגם SCH ההסתגלותedule ניתן לראות בטבלה 1. התאקלמות של העכברים צריכה להתקדם דרך השלבים הבאים של פעם ביום. ביצוע פעולות אלה יותר מפעם אחת ביום, בניסיון להאיץ את ההסתגלות, אינו מומלץ. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר בכף היד, לתקופה של שתיים עד שלוש דקות, לא יותר מרגל אחת מעל לראש הכלוב, כחיות לעתים קרובות לקפוץ במהלך שלב מקדים זה. אם העכבר מנסה לזחול החוצה של היד ואת זרועו של אחד, פשוט להרים את העכבר בבסיס הזנב ולמקם אותו בחזרה ביד אחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר בכף היד לשלוש דקות וללטף את החיה בעדינות. חיות מחמד עכבר directionally מהראש ועד הזנב, תוך מתן אפשרות לבעלי החיים לנוע בחופשיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר בכף היד לשלוש דקות בזמן שמעסה מאחורי האוזניים (קל צובט יחד את העור בחלק האחורי של הצוואר באמצעות האגודל ואצבע מצביע). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק / liFT העכבר בעורף שלה למשך 30 שניות, ומאפשר מנוחת העכבר על גבי הכלוב למשך 30 שניות לפני חזרה את האחיזה שוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק את העכבר באמצעות אחיזה אפי, אשר מתוארת בסעיף 2, אבל לא להפוך את החיה (להשלים עד השלב 2.4). להחזיק בעלי החיים כמו זה לתקופה של 30 שניות ולשחרר חזרה לראש הכלוב. חזור פעם שנייה לאחר תקופת מנוחה של דקה אחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק את העכבר עם האחיזה אפי כאמור בסעיף 2, כולל היפוך חיה כל כך צד הגחון שלה פונה כלפי מעלה לכיוון התקרה. ודא שצווארו של בעל החיים הוא מקביל לרצפה. תחזיק עמדה זו במשך 30 שניות. חזור על פעולה זו פעם שנייה, לאחר תקופת מנוחה של דקה אחת. עכברים מסוימים יתנגדו האחיזה אפי יותר מאחרים, במיוחד כאשר משתמשים בו בפעם הראשונה עם היפוך בשלב זה בהסתגלות. אם העכבר משחרר את עצמו מהלפיתה, שם את העכבר לאחור בחלק העליון כלוב ומחדש את האחיזה. חזור מחדש את האחיזה במידת צורך, אבל לפקח על רמת הלחץ של העכבר ולהחזיר אותו לכלוב במידת צורך. גורם נוסף שיכול לשחק תפקיד באובדן האחיזה בנקודה זו בתהליך ההתאקלמות הוא חוסר הניסיון של המטפלים בבעלי החיים עם טכניקת המסירה אפי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק את העכבר עם האחיזה אפי, להפוך, לזמן קצר למקם pipettor עם טיפ ריק מעל כל נחיר, ותחזיק בעמדת בעלי החיים למשך 30 שניות. חזור על פעולה זו אחרי תקופת מנוחה של דקה אחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק את העכבר עם האחיזה אפי, להפוך אותו, ולנהל intranasally 6 μl של מי מלח לתוך n האם השמאל וימין כאמור בסעיף 3 (עד שלב 3.7). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק את העכבר עם האחיזה אפי, היפוכו, ולנהל intranasally 6 μl של מי מלח לתוך n האם השמאל וימין הצבת פעמי החיה לאחור בחלק העליון הכלוב באמצע, כפי שתואר בסעיף 3. </li></ol> 2. גריפ אפי לשתק עכברי Awake <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את עכבר on ראש הכלוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עם האגודל ואצבע המורה של היד הדומיננטית שלך, להחזיק את העכבר בזנבו. שימוש באמצע שלך, הטבעת, ואצבעות זרת, קל להצמיד את החלק התחתון של הגוף לחלק העליון הכלוב (איור 1 א). בואו לתפוס את העכבר על גבי המוטות כמו שאתה קל למתוח את העכבר החוצה וכדאי לתפוס את עורפו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש באגודל והאצבע אמצעית ביד הלא הדומיננטית, לצבוט את העכבר בחוזקה בעורפו (עודף עור) מאחורי הצוואר והכתפיים. מושך את העור הרפוי כדי להפוך את אוהל של עור לרוחב הכתפיים (1B איור). קח כמה שיותר עור שאפשר, אבל להיזהר לא למשוך את שריר שזה יגרום אי נוחות לעכבר. נהגתי בזהירות על מנת שלא תחול יותר מדי לחץ לבית החזה או בעמוד השדרה של בעל החיים. לחץ מוגזם או משייכת העור עשוי להוביל לעיכוב של נשימה במקרים מסוימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עד מהרה את מקום האצבע ביד הלא הדומיננטית שלך על ראשו של העכבר כקרוב לאף ככל האפשר ולמשוך בחזרה על העור (האיור 1C, 1D). במקביל, חלק את האגודל והאצבע אמצעית לכיוון הראש למצב אופטימלי. באופן אידיאלי, העכבר לא צריך להיות מסוגל להזיז את ראשו אנכי או אופקי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תוך שמירה על האחיזה בעורף, הפך את העכבר על גבה. הגב של העכבר צריך להיות בכף היד שלך. בתקיפות לשמור על הזנב של העכבר (בסמוך לבסיס) על כף היד שלך עם שתי האצבעות האחרונות שלך (טבעת וזרת) על מנת לייצב את העכבר, או שאתה יכול לעטוף את האצבעות על פני הגוף התחתון (האיור 1E, 1F). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב זה לוודא שהצוואר וסנטרו של העכבר הם שטוחים ומקבילים לרצפה. הסנטר אמור להיות קרוב לזווית 180 מעלות עם הצוואר ככל האפשר כדי לסייע באספקה ​​אפי. שינויים קלים בזווית עלולים לגרום תרופה לסופו באתר הלא הנכון. ודא את העכבר הוא מסוגל לנשום על ידי צפייה בבטן. העכבר should לא תוכל לזוז, אבל צריך להיות נוח ולא בשום כאב. אם אתה רואה את הצוואר וסנטרו של העכבר עושה &quot;וי&quot;, אז אתה צריך מחדש את האחיזה. </li></ol> 3. משלוח אפי של תרופות לעכברי Awake מבוא באמצעות אחיזה אפי, כל עכבר רסן פעמים והחזיק בצוואר במקביל לרצפה שלהם בזמן נפח של 20-30 μl של נוזל מנוהל. כרך זה הוא בטוח ויעיל לעכברים קטנים גדולים, אנחנו משתמשים בדרך כלל 24 μl, ומתוארים בפרוטוקול זה. השיטה אפי הערה ניתן להשתמש בעכברים בכל גיל, למשל בעכברים ילודים למחקר מדעי המוח התפתחותית. בעכברים ילודים, הכולל נפח קטן (8 μl) וגודל טיפה (μl 1) יש להשתמש כדי להכיל את הנפח הקטן יותר של חלל האף. תרופות מועברות בדרך כלל לשני עכברים בכל פעם, לסירוגין תקופות מנוחה על מנת להפוך את השימוש היעיל ביותר של זמן ולשמור על oלוח זמנים של n. ההגדרה תהיה בהתאם אם אתה מינון עכברי קבוצה שוכנו או עכברים שוכנו בנפרד קצת שונה. עם העכברים שוכנו בנפרד, כדאי למקם את כל החומרים שלך שבבין הכלובים כדי למנוע מעכברים מעבר מעל לראש הכלוב האחר. עם הקבוצה שוכן עכברים, מינון שמכלוב בלבד. זה חשוב שכל עכבר בכלוב קבוצה שוכנה מקבל את אותו טיפול אפי, כפוטנציאל לזיהום צולב של שני טיפולים שונים קיים בשל גירוש סמים באוויר או במגע עם עור. מומלץ מאוד שגיליון מינון יודפס מראש, כדי להזכיר לטכנאים של מטלות טיפול, להקליט הערות של טיפין שלא נענו, לציין בריאות כללית של כל בעלי חיים, וכו &#39; צעדים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את הכלובים שבם הם צריכים להיות למינון, והקימו תחנת מינון (איור 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר עכבר מכלוב ולשמור על כלוב במינון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרים את העכבר באמצעות אחיזה אפי תוארה בסעיף 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש ביד הדומיננטית שלך, טען את pipettor עם 6 μl של סמים או כלי רכב. הנח את קצה pipettor מלא ליד הנחיר השמאלי של העכבר, בדרך כלל בזווית של 45 מעלות (האיור 1G, 1H). אם יש לך פתרון צמיג ייתכן שתצטרך להגדיל את הזווית שלך ל -90 מעלות כי התרופה עשויה להפעיל את הצד של קצה פיפטה במקום לגרום לירידה. אם צמיג מאוד, מנגב את קצה פיפטה עם רקמה לפני גירוש נוזלי עשויים לעזור. לאט להוציא את התרופה בצורת טיפה קטנה כבמחצית מההיקף (3 μl). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הטיפה צריכה להיות ממוקמת קרוב מספיק לנחיר של העכבר כך שהעכבר יכול לשאוף טיפה. מייד אחרי העכבר שואף הטיפה הקטנה הזה, להוציא את השארית של התרופה בקצה פיפטה כדי ליצור עוד טיפה קטנה לעכבר לשאוף דרך נחירו על 2-3 שניות מאוחר יותר. הקפד להתבונן בפה. אם יש לישל כל נוזל בפה, הירידה לא להפוך אותו במלואו לתוך האף וזה יש לציין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק את העכבר בתפקיד זה במשך 15 שניות. מומלץ מאוד שטיימר לשמש כדי לתקן את אחיזת סעיף 15 זה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 3.3-3.6 לנחיר הימני. אם כל טיפין בבוז, שהירידה צריכה להיות מוחלפת וציינה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר על גב העליון של הכלוב שלו למשך 2 דקות. חזור על התהליך כולו מתחיל 2 דקות. אחרי הלידה בטיפה הראשונה. זה נותן את העכבר 4 טיפין של 6 μl כל בהיקף של 24 μl של פתרון. לוח זמנים לדוגמה עבור מינון עכברים אחד או שניים בו זמנית ניתן לראות בטבלה 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי העכבר קבל את כל הטיפין, תחזיר את העכבר לכלוב שלו. </li></ol> 4. טכניקות כלליות בעלי חי טיפול לאקלום ומשלוח של תרופות אפי לעכברי Awake לאחר כל פגישה או הסתגלות מינון אפי, עכברים צריכים להיות לינה טיפול, כגון דגני בוקר או זרעי חמניות קלופות כחיזוק חיובי. פינוקים ניתנים כפרס וכדי להסיח את הדעה מלגרד את אפם, שעלול לגרום ניזק לעצמם. כאשר עובד עם קבוצות עכברים שוכנו, מספיק פינוקים צריכים להיות ירד לכל עכבר. לפני החזרת חיות לכלוביהן להיות בטוח כדי לשחזר קינים למדינות המקוריות שלהם כדי להפחית את הלחץ. כאשר מינון חי קבוצה שוכנו, כפפות חייבות להיות שונות בין המינון של כלובים כדי לא להעביר ריח ממושבה למושבת כלוב כלוב, כפי שהם יהפכו לאגרסיביים אחד כלפי שניים.

<ol><li>Dhuria, S. V., Hanson, L. R., Frey, W. H. 2nd <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+delivery+to+the+central+nervous+system%3A+mechanisms+and+experimental+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">Intranasal delivery to the central nervous system: mechanisms and experimental considerations.</a> J. Pharm Sci. 99, 1654-1673 (2010).</li>
<li>Thorne, R. G., Pronk, G. J., Padmanabhan, V., Frey, W. H. 2nd <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+insulin-like+growth+factor-I+to+the+rat+brain+and+spinal+cord+along+olfactory+and+trigeminal+pathways+following+intranasal+administration%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Delivery of insulin-like growth factor-I to the rat brain and spinal cord along olfactory and trigeminal pathways following intranasal administration.</a> Neuroscience. , 127-481 (2004).</li>
<li>Benedict, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+insulin+as+a+therapeutic+option+in+the+treatment+of+cognitive+impairments%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Intranasal insulin as a therapeutic option in the treatment of cognitive impairments.</a> Exp. Gerontol. 46, 112-115 (2011).</li>
<li>Francis, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+insulin+prevents+cognitive+decline%2C+cerebral+atrophy+and+white+matter+changes+in+murine+type+I+diabetic+encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Intranasal insulin prevents cognitive decline, cerebral atrophy and white matter changes in murine type I diabetic encephalopathy.</a> Brain. 131, 3311-3334 (2008).</li>
<li>Francis, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+insulin+ameliorates+experimental+diabetic+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Intranasal insulin ameliorates experimental diabetic neuropathy.</a> Diabetes. 58, 934-945 (2009).</li>
<li>Marks, D. R., Tucker, K., Cavallin, M. A., Mast, T. G., Fadool, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Awake+intranasal+insulin+delivery+modifies+protein+complexes+and+alters+memory%2C+anxiety%2C+and+olfactory+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Awake intranasal insulin delivery modifies protein complexes and alters memory, anxiety, and olfactory behaviors.</a> J. Neurosci. 29, 6734-6751 (2009).</li>
<li>Hanson, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+delivery+of+deferoxamine+reduces+spatial+memory+loss+in+APP%2FPS1+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Delivery+and+Translational+Research%22%5BJournal%5D)">Intranasal delivery of deferoxamine reduces spatial memory loss in APP/PS1 mice.</a> Drug Delivery and Translational Research. 2, 160-168 (2012).</li>
<li>Danielyan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+intranasal+losartan+in+the+APP%2FPS1+transgenic+mouse+model+of+Alzheimer+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Rejuvenation+Research%22%5BJournal%5D)">Protective effects of intranasal losartan in the APP/PS1 transgenic mouse model of Alzheimer disease.</a> Rejuvenation Research. 13, 195-201 (2010).</li>
<li>Fine, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+deferoxamine+improves+performance+in+radial+arm+water+maze%2C+stabilizes+HIF-1alpha%2C+and+phosphorylates+GSK3beta+in+P301L+tau+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Intranasal deferoxamine improves performance in radial arm water maze, stabilizes HIF-1alpha, and phosphorylates GSK3beta in P301L tau transgenic mice.</a> Exp. Brain Res. 219, 381-390 (2012).</li>
<li>Lochhead, J. J., Thorne, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+delivery+of+biologics+to+the+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Drug+Deliv.+Rev%22%5BJournal%5D)">Intranasal delivery of biologics to the central nervous system.</a> Adv. Drug Deliv. Rev. 64 (11), 614-628 (2012).</li>
<li>Hanson, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+deferoxamine+provides+increased+brain+exposure+and+significant+protection+in+rat+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">Intranasal deferoxamine provides increased brain exposure and significant protection in rat ischemic stroke.</a> J. Pharmacol. Exp Ther. 330, 679-686 (2009).</li>
<li>Reger, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+intranasal+insulin+on+cognition+in+memory-impaired+older+adults%3A+modulation+by+APOE+genotype%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Aging%22%5BJournal%5D)">Effects of intranasal insulin on cognition in memory-impaired older adults: modulation by APOE genotype.</a> Neurobiol. Aging. 27, 451-458 (2006).</li>
<li>Kim, C. H., Song, H. yun, M, E. unA. hn, Lee, Y., G, J., Yoon, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+hypo-%2C+iso-+and+hypertonic+saline+irrigation+on+secretory+mucins+and+morphology+of+cultured+human+nasal+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Effect of hypo-, iso- and hypertonic saline irrigation on secretory mucins and morphology of cultured human nasal epithelial cells.</a> Acta Otolaryngol. 125, 1296-1300 (2005).</li>
<li>Greiff, L., Andersson, M., Wollmer, P., Persson, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertonic+saline+increases+secretory+and+exudative+responsiveness+of+human+nasal+airway+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Respir.+J%22%5BJournal%5D)">Hypertonic saline increases secretory and exudative responsiveness of human nasal airway in vivo.</a> Eur. Respir. J. 21, 308-312 (2003).</li>
</ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

שיטה זו מראה כיצד עכברים ניתן לתת מינונים רגילים של תרופה אפי כדי למקד את המוח ללא שימוש בהרדמה. תרופה אפי יכולה להיות מועברת לקבוצות גדולות של עכברים לפרקי זמן ממושכים עם מינימום מאמץ. קבוצה אחת של עד 20 עכברים ניתן לטפל intranasally על ידי אדם יחיד בפחות משעה אחת. מגוון רחב של מולקולות, הנע בין chelators ברזל הקטן לגורמי גדילה לתאי גזע mesenchymal, הוכח במהירות כדי למקד את מערכת העצבים המרכזיים והראה יעילות במודלים של מכרסמים. מנגנונים מוצעים של מסירה ישירה מהאף למוח כוללים הובל...

<table><tbody><tr><td>פיפטור P20 המכוון ל-6 &amp;mu;l</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>טיפים לפיפט להטענת ג'ל</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>טיימר</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מיכל פסולת לטיפים</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>גיליון מינונים לרשימות</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>עט</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>תרופה וחומר נשא</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מכל להחזקת מבחנות תרופה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>בעלי חיים להמסור להם מנה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>כפפות רזרביות</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>נייר סופג לניגוב שתן</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;טבלה 3. &lt;/strong&gt; חומרים נדרשים</td></tr></tbody></table>

מנהל אפי של therapeutics cns לעכברי awake

Intranasal Administration of CNS Therapeutics to Awake Mice

אפי ממשל הוא שיטה של ​​מתן סוכנים טיפוליים למערכת העצבים המרכזית (CNS). זה אינו פולשני ומאפשר מולקולות גדולות שאינו חוצות את גישת מחסום דם המוח למערכת העצבים המרכזיים. תרופות ממוקדות ישירות למערכת העצבים המרכזיים עם משלוח אפי, הפחתת חשיפה מערכתית ותופעות לוואי מערכתיות ובכך לא רצויות 1. משלוח מהאף למערכת העצבים המרכזיים מתרחש בתוך דקות לאורך שני המסלולים העצביים הריח וtrigeminal באמצעות מסלול תאי ואינו דורש תרופה להיקשר לכל קולט או תחבורת אקסונלית 2. משלוח אפי הוא שיטה זכתה לפרסום נרחב, וכיום הוא משמש בניסויים קליניים בבני אדם 3. משלוח אפי של תרופות במודלים של בעלי חיים מאפשר הערכה ראשונית של הפצה ויעילות פרמוקוקינטיים. בעכברים, ניתן להחדיר תרופות לבעלי חיים ערים (לא מורדם) על בסיס קבוע באמצעות specialized אחיזה אפי. משלוח ער מועיל משום שהוא מאפשר למינון כרוני לטווח ארוך ללא הרדמה, זה לוקח פחות זמן מאשר עם הרדמה, וניתן ללמוד ונעשה על ידי אנשים רבים, כך שצוותות של טכנאים מספרים גדולים יכולים מינון של עכברים בפרקי זמן קצרים. יעילות של תרופות מנוהלות intranasally בדרך זו לעכברים הודגמה במספר המחקרים כוללים אינסולין במודלים של עכברים סוכרתיים 4-6 וdeferoxamine מודלי עכבר אלצהיימר. 7,8 האחיזה אפי לעכברים ניתן ללמוד, אבל זה לא קל ודורשת תרגול, מיומנות, ואחיזה מדויקת בצורה יעילה כדי לספק תרופות למוח ולהימנע מניקוז לריאות וקיבה. עכברים הם מרוסנים בעבודת יד בעורף שונה ביד הלא הדומיננטית בצוואר שהתקיים במקביל לרצפה, ואילו סמים מועברים עם pipettor שימוש ביד הדומיננטית. בדרך כלל לוקח 3-4 שבועות של הסתגלות לטיפול לפני העכבריםניתן לערוך את אחיזה זה ללא תגובת לחץ. הכנו וידאו יופיטר זה לעשות טכניקת מסירה אפי זה לנגיש יותר.

ישנן מספר דרכים כדי לקבוע את היעילות של מתן תרופה. הראשון הוא intranasally לנהל צבע, כגון הודו או דיו כחול תילן ולדמיין את הצבע לאחר המתת חסד של החיה בתוך אפיתל ההרחה ואחרי המוח מוסר, נכנס מערכת העצבים המרכזיים דרך צלחת cribriform. השני הוא למדוד את התרופה נמסרה גם על ידי שימוש בתג כותרת רדיו או באמצעות זיהוי ELISA של המולקולה ללא תווית. דוגמה טובה להפצת סמים במערכת עצבים מרכזיים לאחר מתן לעכברים ערים ניתן למצוא בנסון et al. 2012 7. אנו מצפים נורת חוש הריח ועצב...

שיטת intranasally מנת להחדיר תרופות לעכברים ערים לצורך מיקוד המוח מתוארת. שיטה זו מאפשרת למינון חוזר לאורך תקופות ארוכות באמצעות ממשל אפי של תרופה ללא הרדמה, ומשלוח אף למוח עם חשיפה מינימאלית מערכתית.

מנהל אפי של Therapeutics CNS לעכברי Awake

מתן אינטראנזאלי (דרך האף) הוא שיטה להחדרת חומרים טיפוליים למערכת העצבים המרכזית (CNS). זוהי שיטה לא פולשנית המאפשרת מעבר של כמויות גדולות...

המטרה הכללית של הליך זה היא להוביל תרופות למערכת העצבים המרכזית באמצעות מתן תוך-אפי באמצעות עיסוק בעכברים ללא הרדמה. דבר זה מושג תחילה על ידי הרגלת העכבר לטיפול. השלב השני הוא שימוש באחיזת עורף משופרת כדי לקבע את ראשו של בעל החיים.טיפות התרופה הבאות מוזנקות לנחירים באמצעות פיפטור. בשלב הסופי, העכבר מוחזר לכלובו יחד עם פרס. היתרונות המרכזיים של טכניקה זו הם שהגשה תוך-אפית מכוונת את התרופות למערכת העצבים המרכזית ללא חשיפה סיסטמית, וכן שמתן תרופות תוך-אפי לעכברים ערים מאפשר טיפול כרוני ללא הרדמה.ניתן להשתמש בשיטה זו כדי לסייע במתן תשובות לשאלות מפתח בפיתוח תרופות לטיפול במחלות נוירולוגיות. באופן כללי, אנשים שאינם מיומנים בשיטה זו יתקלו בקושי, כיוון שקשה להחזיק את הפה בצורה מאובטכת כדי למנוע תזוזה של הראש. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית, מאחר שמיקום האצבעות לאחיזה נכונה הוא מרכזי וקשה להסבר באמצעות טקסט ותמונות. שבועיים עד ארבעה שבועות לפני מתן המינון תוך-אפי, יש להרגיל את העכברים לטיפול על ידי ביצוע השלבים הבאים במשך יומיים עד שלושה לכל שלב, תוך וידוי שהעכבר אינו מראה סימני סטרס לפני המעבר לשלב הבא.בשלב ההסגרה הראשון, הניחו את העכבר על כף היד למשך שתיים עד שלוש דקות, בגובה של לא יותר מרגל אחת מעל הכלוב. לאחר מכן, הניחו את העכבר על כף היד למשך שלוש דקות ולטפו את בעל החיים בעדינות מ

intranasal-administration-of-cns-therapeutics-to-awake-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

בדיקות פרה יסודית של תרופות הפועלות על מערכת העצבים המרכזית כרוך לעתים קרובות בהערכת השוואת biodistribution התרופה בשיתוף עם מסלולים ספציפיים של הממשל. הנה שלוש שיטות נפוצות של משלוח מערכתית (תוך ורידי, intraperitoneal, ובעל פה), כמו גם שיטה למסירה מקומית (הסעה משופרת משלוח) הם הוכיחו בעכברים.

תרופות משלוח מערכתית מקומי לטיפול במחלות של מערכת העצבים המרכזית מודלים מכרסמים

מאמר זה מדגים שתי שיטות שונות של הזרקת מאוד: 1) לתוך המוח (intracerebroventricular) ו 2) מערכתית (תוך ורידי) כדי להציג את סוכני טיפולית לתוך מערכת העצבים המרכזית של עכברים הילוד.

מסירה של סוכני טיפולית באמצעות Intracerebroventricular (ICV) ו תוך ורידי (IV) הזרקה של עכברים

אפיון אלקטרו של תגובות עצביות חשובה להבנת תפקוד המוח ועל המנחה את המיקום של צבעים עבור מסלול העתקה. עם זאת, מחקרים רבים נעשים בבעלי חיים הרדומות. על מנת להבין את תפקוד המוח, ללא הרדמה, פיתחנו שיטה להקליט מאפייני התגובה העצבית ולהזריק צבעים של העכבר ער.

הכנת עכבר ער להקלטת תגובות עצביות והזרקת קליעים נותבים

סרטון זה מדגים את ההעברה התוך-אפית של תאי גזע עצביים טיפוליים טעונים בנגיף אונקוליטי למודל עכבר הנושא גידול במוח. הניהול התוך-אפי הלא פולשני של תאי גזע עוקף את מחסום הדם במוח, ומקל על העברתם לאתר הגידול במוח ליישומים טיפוליים.

העברה תוך אפית של תאי גזע עצביים טיפוליים (NSCs) במודל מורין: הליך למסירה ממוקדת גידול של NSCs טעונים בנגיף אונקוליטי למודל עכבר נושא גידול במוח

מקור: Shahror, R. A. et al., מעקב אחר תאי גזע מזנכימליים עם תווית תחמוצת ברזל סופר-פרמגנטית באמצעות MRI לאחר אספקה תוך-אפית במודל עכברי פגיעה מוחית טראומטית. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים העברת תאי גזע מזנכימליים תוך-אף (MSC) במודל עכבר. MSCs נספגים לתוך רקמת האף, נודדים למוח באמצעות אותות ציטוקינים ומפרישים גורמים נוירוטרופיים באתר הפגיעה, ומציעים פוטנציאל נוירותרפי לתיקון עצבי.

העברת תאי גזע מזנכימליים תוך-אף במודל עכבר של פגיעה מוחית טראומטית

מקור: Ullah, I., et.al. מכשיר מיקום למיקום עכברים במהלך העברת siRNA תוך-אף למערכת העצבים המרכזית. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים טכניקת מתן תוך-אף מדויקת להעברת קומפלקסים של פפטיד-siRNA המכוונים לתאי עצב למוח העכבר באמצעות מכשיר מיקום מיוחד. עכברים מורדמים מאובטחים במצב ראש למטה וקדימה כדי לייעל את שאיפת ה-siRNA תוך מניעת ניקוז ריאות. פפטיד המטרה מקל על ספיגה מתווכת קולטנים בנוירונים, ומאפשר העברת siRNA ממוקדת והשתקת גנים במוח.

אספקה תוך-אפית של siRNA למוח העכבר באמצעות מכשיר מיקום

מקור: Kanazawa, T., et al. שיטות חדשניות למתן תוך-אף בהרדמה באינהלציה להערכת מתן תרופות מהאף למוח. J. Vis. Exp. (2018)סרטון זה מדגים מתן תוך-אף של תרופות עם תווית רדיו בעכבר מורדם כדי להשיג העברת תרופות מהאף למוח. הוא מסביר כיצד תרופות חוצות את אפיתל האף ונעות דרך מסלולים עצביים כדי להגיע למוח, כמו גם כיצד תנועת הריסים משפיעה על שימור ופינוי תרופות. בנוסף, הסרטון מתאר שיטת קנולציה הפוכה חלופית, הכוללת החדרת צינורית דרך הוושט כדי להעביר תרופות כנגד תנועת הריסים, שיפור השמירה ושיפור יעילות ההובלה.

מתן תרופות תוך-אף בעכברים באמצעות פיפטה וקנולציה הפוכה להעברת תרופות מאף למוח

תאי גזע הם מבטיחים לספקים טיפוליים לטיפול בגידולים במוח בשל הטרופיזם של הגידול הפנימי שלהם. לא פולשני אינטראנסלי תא גזע המסירה עוקף את מחסום דם מוח ומראה פוטנציאל חזק לתרגום קליני. מאמר זה מסכם את העקרונות הבסיסיים של אספקת תאי גזע אינראנסאלי במודל עכבר של גליומה.

אספקה ​​אינטראנסלית של תאים בתאי גזע כדי גליובלסטומה במודל עכבר

כאן, אנו מתארים שתי שיטות רומן מינהל תוך-אפי יציב בהרדמה אינהלציה עם לחץ פיזי חיות ניסוי. גם נתאר שיטת הערכה כמותית של סמים רמות הפצה במוח באמצעות מסלול האף-אל-מוח באמצעות radiolabeled14ג]-אינולין כמו מצע מודל של מקרומולקולות מסיסים במים.

הרומן שיטות לניהול תוך-אפי בהרדמה אינהלציה כדי להעריך את האף-אל-מוח תרופות

כאן, אנו מציגים פרוטוקול באמצעות התקן מיקום העכבר המאפשר את המיקום המתאים של עכברים עבור המינהל intranasal של המוח מיקוד פפטיד-siRNA המאפשר גנים יעילים השתקה במערכת העצבים המרכזית.

מתקן מיקום להצבת עכברים במהלך המסירה Intranasal siRNA למערכת העצבים המרכזית

למדו שיטה לניהול תרופות אינטרנזליות בעכברים ערים ללא הרדמה, המכוונת למערכת העצבים המרכזית ומאפשרת טיפול כרוני עם חשיפה מערכתית מינימלית.

מנהל אפי של Therapeutics CNS לעכברי Awake

גלה סרטונים נוספים