Name: In vivo Macrophage ההדמיה באמצעות חומר ניגוד ממוקד MR להערכת אורך של דלקת מפרקים ספיגה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-10-20T21:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 15 s
Description: למד הדמיית מאקרופאגים באמצעות MRI עם סוכן ניגוד USPIO במודל ארנבת לדלקת מפרקים ספיגה. שיטה זו מאפשרת מעקב לא פולשני בחדירת תאי דם לבנים ויעילות טיפול אנטיביוטי לאורך זמן.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנחנו מאוד מודים לי פ Bierry לסיוע בהפקת וידאו ועריכה.

כל ההליכים כרוכים בנושאי בעלי החיים אושרו על ידי ועדת הטיפול בבעלי החיים המוסדית בית החולים האוניברסיטאי. 1. הרכבת חיסון חיידקי Intraarticular <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני הזריקה, להרדים ארנבים באמצעות הזרקה לשריר של קטמין (30 מ&quot;ג / ק&quot;ג משקל גוף) מעורבבת עם xylazine (4 מ&quot;ג / ק&quot;ג) בתוך שריר שרירי הארקטור ספינאה. ודא חיות מורדמים באופן מלא על ידי בדיקה כי הם אינם מגיבים לקמצוץ כפה. פרוטוקול זה מספק הרדמה מספיקה להזרקת intraarticular של מפרק הברך. הנח את החיות מתחת למסיכת חמצן במהלך הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הברך של בעלי החיים. הכן את הברך להזרקה מזוהם על ידי 3 מגבונים מתחלפים של לשפשף povidone-יוד ואלכוהול ואחרי יישום של פתרון povidone-יוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באופן ידני לזהות את גיד הפיקה כמבנה אלסטי בהיבט הקדמי של הברך באמצעות כובע מחט סטרילית כפי שמוצג או בדיקה סטרילית. </li><lאני&gt; עם שליטה חזותית ועל ידי שימוש בגישה קדמית, למקם את מחט 25 G percutaneously בברכו של כל אחד מ -12 הארנבות ישר דרך גיד הפיקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק כל ברך עם 1 מ&quot;ל של השעיה חיידקים של סטפילוקוקוס (זן נוימן) בריכוז של 10 UFC 6 / מ&quot;ל. הזרקה ללא התנגדות מאשרת את מיקום intraarticular של קצה המחט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הליכי הזרקה, לשמור על בעלי החיים במקור הסעה, כדי למנוע איבוד חום ולפקח על קצב נשימה על ידי התבוננות תנועה של החזה. ברגע ער, לשמור על בעלי חיים בכלובים עם גישה החופשית למזון ומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל את הכאב על ידי מתן זריקה תוך שרירית של 0.1 עצירות מ&quot;ג / ק&quot;ג כל 8 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבחינה קלינית להתבונן ארנבים בכל יום, ניטור כמויות נצרכות של מזון ומים, ירידה במשקל, טמפרטורה, והתנהגות כללית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתמונה בשלב החריף של זיהום לבצע פגישת ההדמיה MR הראשונה בהקדםכחיה מציגה ירידה במשקל משמעותית (10%); בדרך כלל זה קורה לאחר כ 2 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם תרופות תוך ורידי נדרש לפני בדיקת MRI, ניתן הייתה להתקין גישה ורידי אוזניים (ראה להלן). </li></ol> 2. בדיקת MRI כאשר הדמיה לחיות בעלי חיים, התקנת חיה זהירה היא תכונת מפתח כדי להבטיח נוחות והרדמת בעלי חיים אופטימלית. זה יאפשר לתוצאות ההדמיה הטובות ביותר ולהבטיח רכישת תמונת רבייה למחקרים ארוכי טווח. בשל גודלו של בעל החיים, השימוש ביחידת MR קליני בגודל (1.5 T או T 3) הוא מתאים ביותר. סליל הברך קליני 8 ערוצים משמש כפי שהוא מספק רזולוציה מתאימה ויחס ניגודיות לרעש לחקר הברך ארנב. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני התקנה על מערכת ההדמיה, להתקין גישה ורידים היקפי דרך וריד אוזן. גישה זו תשמש כדי להזריק חומר הניגוד. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח ולחטא את האוזן. </li><lאני&gt; ביצוע הרדמה מקומית על ידי הזרקה תת עורית של לידוקאין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס G 25 בתוך וריד אוזן רוחב קטטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעריך את החדירות על ידי הזרקה של סרום פיסיולוגי סטרילי 1 מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמור את הקטטר עם הקשה הדבקה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים בעלי חיים בדרך של זריקה תוך שרירית של קטמין (30 מ&quot;ג / ק&quot;ג משקל גוף) מעורבבת עם xylazine (4 מ&quot;ג / ק&quot;ג). חיות מורדמים באופן מלא ברגע שהם אינם מגיבים לקמצוץ כפה. מניחים מסיכת פנים על הארנב, זה נותן חמצן עם קצב זרימה של 200 מ&quot;ל / דקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פעם אחת בהרדמה מלאה, לקחת את בעלי החיים ליחידת ההדמיה MR. בעלי חיים מקום כל כך שהברכיים נמצאות במרכז סליל MR. הנח את רגליהם של בעלי החיים ברחבה מלאה, כך שציר האורך של עצם השוק הוא במקביל לשולחן יחידת ההדמיה MR. השתמש במחברי סקוטש או שקי חול כדי לשמור על מיקום רגל אופטימלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניטור לב ונשימה של בעלי החיים אינו נדרש כפרוטוקול מאפשר הרדמה הרדמה עמוקה בנשימה ספונטנית, אבל חיות חייבת להיות מכוסות, כדי למנוע אובדן חום-Induced הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> MR פרוטוקול מפורט בטבלה 1. הזמן הממוצע לרכישה כוללת כולל התקנה אופטימלית הוא כ -20 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע MR הדמיה במישורים שונים. עם זאת, במישור הרוחבי של הברכיים (מאונך לעצם השוק) הוא תכנית העזר כפי שהיא מבטיחה שחזור האנטומי של מיקום תמונה לבחינות אורך רציפים ומאפשרת התאמה אופטימלית עם פרוסות היסטולוגית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסיום של רצפי unenhanced, להזריק חומר ניגוד UPSIO דרך הגישה ורידי אוזן. לאט לנהל את חלקיקי תחמוצת הברזל במנה בודד של 150 פה μmol / ק&quot;ג. יש לשטוף את הצנתר בזריקה של 1 מ&quot;ל של סרום פיסיולוגי סטרילית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על משאבי האנוש המשופר GRE המשוקלל רצף 24 לאחר ההזרקה. עיכוב זה מאפשר לחלקיקים שphagocytized ידיאת מקרופאגים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור מחקרים ארוכי טווח להערכת השפעת תרופות (אנטיביוטיקה, סטרואידים, נוגדנים נגד macrophage, וכו &#39;.), חזור על בדיקות רציפות MR באמצעות הפרוטוקול שתואר לעיל. </li></ol> 3. ניתוח תמונה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להערכת אורך לבצע מדידות באותה הרמה האנטומית, ולהגדיר נקודת ציון לזיהוי בקלות. לדוגמה, רכישה דרך המישור הצירי בו הקוטר הגדול ביותר של הפיקה הוא ציין היא דרך אמינה כדי להשיג מדידה לשעתק (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצוע ניתוח תמונה באמצעות תוכנה לעיבוד תמונה (ImageJ) מבוססת תוכנת DICOM (כגון Osirix) או. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות תוכנת ImageJ, לבצע פילוח של האזור הסינוביאלי המדגים אובדן אות בתמונת T2 משוקללת GRE USPIO המשופרת שימוש באפשרות &quot;לא סדירה האזור&quot; הציור. ברגע שהסינוביום עם אות אפלה מתואר, לחץ על &quot;נתח&quot; כדי להשיג את האזור /מספר הפיקסלים (איור 2). </li></ol>

<ol><li>Madri, J. Inflammation and healing. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMadri%2C+J+%22Anderson%27s+Pathology%22">Anderson's Pathology</a>. Kissane, J. , 67-110 (1990).</li>
<li>Sephel, G., Woodward, S. Repair, regeneration, and fibrosis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSephel%2C+G+%22Rubin%27s+Pathology%22">Rubin's Pathology</a>. Rubin, R., Strayer, D. , 5th ed, Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia, PA. 71-98 (2008).</li>
<li>Verdrengh, M., Tarkowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+macrophages+in+Staphylococcus+aureus-induced+arthritis+and+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Role of macrophages in Staphylococcus aureus-induced arthritis and sepsis.</a> Arthritis Rheum. 43 (10), 2276-2282 (2000).</li>
<li>Heale, J., Speert, D. Macrophages in bacterial infection. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHeale%2C+J+%22The+Macrophage%22">The Macrophage</a>. Burke, B., Lewis, C. , Oxford University Press. Oxford, England. 210-252 (2008).</li>
<li>Bierry, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+activity+in+infected+areas+of+an+experimental+vertebral+osteomyelitis+model%3A+USPIO-enhanced+MR+imaging--feasibility+study%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Macrophage activity in infected areas of an experimental vertebral osteomyelitis model: USPIO-enhanced MR imaging--feasibility study.</a> Radiology. 248 (1), 114-123 (2008).</li>
<li>Bierry, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI+of+macrophages+in+infectious+knee+synovitis%5BTitle%5D)+AND+%22AJR+Am.+J.+Roentgenol%22%5BJournal%5D)">MRI of macrophages in infectious knee synovitis.</a> AJR Am. J. Roentgenol. 194 (6), W521-W526 (2010).</li>
<li>Lutz, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+synovial+macrophages+in+an+experimental+rabbit+model+of+antigen-induced+arthritis%3A+ultrasmall+superparamagnetic+iron+oxide-enhanced+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Detection of synovial macrophages in an experimental rabbit model of antigen-induced arthritis: ultrasmall superparamagnetic iron oxide-enhanced MR imaging.</a> Radiology. 233 (1), 149-1457 (2004).</li>
<li>Weissleder, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasmall+superparamagnetic+iron+oxide%3A+an+intravenous+contrast+agent+for+assessing+lymph+nodes+with+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Ultrasmall superparamagnetic iron oxide: an intravenous contrast agent for assessing lymph nodes with MR imaging.</a> Radiology. 175 (2), 494-498 (1990).</li>
<li>Lefevre, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Septic+arthritis%3A+monitoring+with+USPIO-enhanced+macrophage+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Septic arthritis: monitoring with USPIO-enhanced macrophage MR imaging.</a> Radiology. 258 (3), 722-728 (2011).</li>
<li>Sigovan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid-clearance+iron+nanoparticles+for+inflammation+imaging+of+atherosclerotic+plaque%3A+initial+experience+in+animal+model%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Rapid-clearance iron nanoparticles for inflammation imaging of atherosclerotic plaque: initial experience in animal model.</a> Radiology. 252 (2), 401-409 (2009).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

בעוד סוכנים בניגוד גדוליניום מבוסס ספציפיים לספק מידע על ההיקף והטפטוף של המרחב תאי, הדמיה על ידי מקרופאג USPIO משופר MR מאפשרת לוקליזציה האנטומי מדויקת והערכה איכותית של חדירת מקרופאג בתוך הסינוביום הנגוע ללא צורך בדגימה של רקמת 9. בשל הרגישות הגבוהה שלהם, USPIO יכול להדגים אפילו סלולרי מתוחכם לחדור נוכחי בשלבים המוקדמים של זיהום. תחת טיפול אנטיביוטי מוצלח, כמו פתוגנים יוסרו בהדרגה, חדירה זה נחשבת לירידה, מה שמוביל להפחתת ספיגת USPIO בתוך הסינוביום. מכיוון שהאזור של או...

דימות תהודה מגנטית (MRI) נחשבת לשיטת ההדמיה של בחירה עבור ההפגנה של קרום מוח מדבק עקב הרזולוציה מרחבית הגבוהה שלה ולעומת זאת רקמות רכות. שינויים באותות שנצפו ב-MRI בדלקת המפרקים T1 הנמוך ואות T2 גבוהה המשקפת את הנוכחות המוגברת של תכולת מים תאית, ושיפור ניכר לאחר מתן סוכן מבוסס ניגוד גדוליניום, התואמים את הממצאים בהיסטולוגיה בשל כלי דם מוגבר להרחבת כלי דם ואנגיוגנזה 1. עם זאת, ה-MRI הוא לעתים קרובות מסוגל להפגין רזולוציה של זיהום במהלך טיפול אנטיביוטי כפי שניתן לראות שיפור מתמשך במפרקים של חולים עם נרפאה קליני וביולוגי ספיגה דלקת בשל התמדה של מרחב תאי מוגדל (רקמת גרעון, צלקת fibrotic) 2. חוץ משינויים תאיים, תאים דלקתיים, כולל גיוס אינטנסיבי של מקרופאגים לחדור בצורה מאסיבית בfected משח. המקרופאגים לשחק תפקיד מרכזי גם בשלב האקוטי וכרוני של זיהום חיידקי 3. הם לגרום תגובה הדלקתית הנדרשת למיגור מיקרואורגניזמים פתוגניים, ולתאם רזולוציה דלקת, כמו דלקת הנגרמת מקרופאג נמשכת כל עוד רקמות נימקים לא יוסרו, ומונע תיקון להתחיל 4. לפיכך, ההפחתה של חדירת מקרופאג במשח הנגוע לאחר טיפול יעיל יכולה להיות אינדיקטור אמין של הרזולוציה של הזיהום. נייד הדמיה היא הצליחה להוכיח ספציפית סלולרית חדירה בתוך רקמה פתולוגית. ספציפית מקרופאג MR הדמיה באמצעות ממוקדת חומר ניגוד נחקר באופן נרחב והוכיחה את יכולתה להפגין דלקת מפרקים או זיהום 5-7. לאחר הזרקה לוריד, כגון סוכנים ממוקדים בניגוד כגון USPIO (תחמוצות ברזל פאראמגנטי ultrasmall) חלקיקים נתפסים על ידי תאי phagocytic כגון מקרופאגים ו,בשל התכונות המגנטיות שלהם, לגרום לשינויים באותות ברקמות המציגות מקרופאג הסתננות 8. אורך מעקב של טיפול באלה MR אות שינויים מאפשר בהערכה לא פולשנית vivo של חדירת מקרופאג, והפחתה של טעון-מקרופגים שינויים באותות הקשורים USPIO תפגין הצלחה טיפול. מטרת דו&quot;ח זה היא להציג כיצד לבצע מקרופאג MR הדמיה כדי לפקח על דלקת מפרקים ספיגה noninvasively על ידי הוכחת ההפחתה של חדירת מקרופאג במשח.

<table><tbody><tr><td>שם המגיב / חומר</td><td>מספר קטלוגי</td><td>של החברה</td><td>הערות</td></tr><tr><td>P904</td><td>גרבה</td><td></td><td>מינון: 150 &mu; מול Fe/ק"ג</td></tr><tr><td>קטמין (500 מ"ג/מ"ל קטמין)</td> מינון <td>Virbac</td><td></td><td>: 30 מ"ג/ק"ג</td></tr><tr><td>רומפון (20 מ"ג/מ"ל קסילזין)</td> <td>מינון אקסיינס</td><td></td><td>: 4 מ"ג/ק"ג</td></tr><tr><td>בופרנורפין</td><td>וטוקינול</td><td></td><td>מינון: 0.1 מ"ג/ק"ג/8 שעות</td></tr><tr><td>BD 22 גרם, 1 אינץ'</td><td>BD Biosciences</td><td>381423</td><td></td></tr><tr><td>BD 25 גרם, 5/8 אינץ'</td><td>BD Biosciences</td><td>305122</td><td></td></tr></tbody></table>

in vivo macrophage ההדמיה באמצעות חומר ניגוד ממוקד mr להערכת אורך של דלקת מפרקים ספיגה

In vivo Macrophage Imaging Using MR Targeted Contrast Agent for Longitudinal Evaluation of Septic Arthritis

המקרופאגים הם מפתח תאים בייזום, הפיתוח והרגולציה של התגובה הדלקתית לזיהום חיידקים. המקרופאגים מגויסים באופן אינטנסיבי ויותר ויותר במפרקים ספיגה מהשלבים המוקדמים של זיהום והחדירה אמורה לסגת ברגע ההסרה יעילה של פתוגנים מתקבלת. היכולת לזהות בפעילות מקרופאג vivo במפרק נגוע יכולה לכן לספק שני יישומים עיקריים: זיהוי המוקדם של קרום מוח חריף וניטור של טיפול. In vivo גילוי לא פולשנית של מקרופאגים ניתן לבצע עם תהודה מגנטית באמצעות חלקיקי ברזל כגון תחמוצת ברזל פאראמגנטי ultrasmall (USPIO). לאחר מתן intravascular או intraarticular, USPIO הם phagocytized במיוחד על ידי מקרופאגים הופעל, ו, בשל התכונות המגנטיות שלהם, לגרום לשינויים באותות ברקמות המציגות חדירת מקרופאג. Quantitativההערכה של דואר לחדור אינה ריאלי, כפי שהאזור עם אובדן אות (מספר פיקסלים כהים) שנצפה בתמונות שיפוע הד MR לאחר הזרקת חלקיקים מתואמת עם כמות הברזל בתוך הרקמה, ולכן משקפת את מספר התאים USPIO טעונים. אנו מציגים כאן פרוטוקול לבצע הדמיה באמצעות מקרופאג USPIO המשופרת MR הדמיה במודל חיה של דלקת מפרקים ספיגה, המאפשר ראשוני ואורך בהערכה לא פולשנית vivo של חדירת מקרופאגים והערכה של פעולת טיפול.

על תמונות unenhanced, הסינוביום של ברכיים נגועות מציג נפיחות מפוזרת של אות ביניים שהיא לא להבדיל בין רקמות רכות, ואילו עצם ירך והפיקה יופיעו כאות מבנים נמוכים (איור 1). על תמונות USPIO המשופרות, 24 שעות לאחר שממשל חומר הניגוד, המכיל אזור הסינוביאלי מקרופאגים USPIO טעונים תדגים אובדן אות (איורים 1 ו -2). <p class="jove_content" style=";text-align:right;directi...

אנו מדגימים כיצד לבצע מקרופאג MR הדמיה באמצעות חומר ניגוד פאראמגנטי ultrasmall (USPIO) בדלקת מפרקים ספיגה, המאפשרת ראשוני ואורכים<em&gt; In vivo</em&gt; הערכה בלתי פולשנית של חדירת מקרופאגים והערכת יעילות טיפול.

In vivo Macrophage ההדמיה באמצעות חומר ניגוד ממוקד MR להערכת אורך של דלקת מפרקים ספיגה

Macrophages are key-cells in the initiation, the development and the regulation of the inflammatory response to bacterial infection. Macrophages are ...

המטרה הכוללת של ניסוי זה היא להעריך לאורך זמן את חדירת המקרופאגים לסינוביום. במודל של ארתריטיס ספטיקה בארנב, ניתן לבצע זאת באמצעות דימוי MR תוך שימוש בחלקיקי תחמוצת ברזל המסמנים מקרופאגים וחושפים את נוכחותם. מקרופאגים הם תאים מרכזיים בתהליכי הפיתוח, ההגברה וההחלמה של דלקות מפרקים, ובמיוחד בארתריטיס ספטיקה.הדגמה in vivo של נוכחותם והפצתו בתוך מפרק מזוהם עשויה להוות כלי ניטור בעל ערך. טיפול אנטיביוטי במפרק חולה אינו אמור להיות כרוך בחדירה מאסיבית של מקרופגים. מקרופגים עשויים להיות זמינים כתוצאה מאיבוד תאים.חומרי ניגודיות כגון US PIOs, תחמוצת ברזל סופר-פרמגנטית אולטרה-קטנה. לאחר מתן תוך-כלי, הם נקלטים באופן ספציפי על ידי מקרופאגים מופעלים. U-S-P-I-O מורכבים מליבת ברזל IDE בעלת גודל גביש של כ-40 nanometers.הם פועלים כמגנטים קטנים המייצרים שינויים באות ה-MR ברקמות המכילות מקרופאגים. ניתן לראות בשתי תמונות ה-Mr.Mags אלו של ברך ארנב, 24 שעות לאחר מתן U-S-P-I-O, כי נוכחות הסינוביום גורמת לאובדן אות אינטנסיבי ודיפוזי. בשל נוכחות מקרופאגים עם SPI OED, מספר הפיקסלים הכהים הנצפים בדימות MR.R נמצא במתאם עם תכולת הברזל ברקמה, ולפיכך עם מספר המקרופאגים.מעקב אורך של שינויים באות ה-R הקשורים ל-U-S-P-I-O עשוי לפיכך לספק הערכה InVivo של נוכחות מקרופאגים בתוך ה-John במהלך הטיפול. שלום, שמי Guian Bii. אני מרצה בכיר לרדיולוגיה בבית החולים האוניברסיטאי של Strat, בצרפת.היום נציג בפניכם כיצד לבצע דימות של מקרופאגים באמצעות MRI במודל חיה של דלקת מפרקים ספטית. בחלק הראשון, יחד עם עמית המחקר שלנו, נסביר כיצד להשרות דלקת מפרקים ספטית בברך של ארנבת באמצעות מתן תוך-מפרקי ישיר של Staphylococcus. לאחר מכן, בחלק השני, נדגים כיצד לבצע את בדיקת ה-MRI, כיצד להזריק את חומר הניגוד, ולבסוף, כיצד לנתח את התוצאות.הצב את בעל החיים בכלוב הכלה ייעודי, הרדם את בעל החיים באמצעות הזרקה של tiletamine ו-ketamine, המאפשרת 30 דקות של הרדמה כירורגית. גלח את הברך ושפשף אותה עם povidone. זהה את הרצועה הפטלארית כרצועה אלסטית קדמית.לאחר מכן, העבירו דרכו מחט בכיול 35 כדי להיכנס למפרק. הזריקו 1 mL של התרחיף הבקטריאלי. ההזרקה חייבת להתבצע ללא התנגדות, דבר המאשש את המיקום התוך-מפרקי הנכון של המחט.החזירו את בעל החיים לכלובו וניתנו טיפול אנאלגזי באמצעות הזרקה תוך-שרירית של bovine מדי יום. לאחר פרק זמן של יומיים, נצפו בבעל החיים תנועות שינה ספונטניות מופחתות, המאשרות את קיומה של זיהום במפרק.לפיכך, ניתן לבצע את בדיקת ה-R. מקמו את בעל החיים בכלוב הכלה ייעודי. קרצפו את המקום עם pov.החדר קטטר במידה 24 לווריד השפך וקבע אותו עם חומר מקבע. קו ורידי זה ישמש להחדרת חומר הניגוד. הרדם את בעל החיים באמצעות הזרקה תוך-שרירית של ketamine.לאחר מכן, מקבלים את בעל החיים במצב שכיבה על הבטן בתוך סליל ה-MR של הברך. כאשר הברכיים בפריסה מלאה, יש להצמיד את הרגליים לשולחן ה-MR וניתן להדביקן כדי לשמר את הפריסה. פרוטוקול ה-MRI מורכב מרצפי gradient echo T2 weighted.רצף זה עדיף כיוון שהוא מאפשר את הגילוי הרגיש ביותר של U-S-P-I-O. להלן דוגמה למדדי ה-MR שבהם אנו משתמשים כעת. בסיום בדיקת MR ראשונה זו, מזריקו לאט את ה-U-S-P-I-O דרך הקו הוורידי ושוטפים עם מיליליטר אחד של תמיסת תאים.בדיקת ה-MR השנייה מבוצעת 24 שעות לאחר מתן חומר הניגוד, תוך שימוש באותם נהלים שתוארו קודם לכן. ניתן לראות כאן שתי תמונות gradient echo שקולות T2 בציר אקסיאלי של ברך ארנב: משמאל ללא חומר ניגוד, ומימין 24 שעות לאחר מתן USPO.כפי שניתן לראות בתמונה מימין, באזור שבו נטענו USPI, המקרופאגים יפגינו אובדן אות עם פיקסלים כהים. מספר הפיקסלים הכהים נמצא במתאם עם תכולת הברזל, ולאחר מכן עם כמות חדירת ה-MicroAge. ניתן להדגים היסטולוגית מקרופאגים שנטענו ב-USPI באמצעות צביעת ent pulse blue, אשר חושפת תאים טעונים בברזל כנקודות כחולות. ניתן לספור את מספר הפיקסלים הכהים שנצפו בתמונת ember אחת באמצעות תוכנות שונות.להלן דוגמה, תוך שימוש בתוכנת M SGA המספקת את הספירה לאחר סף (thresholding) ידני או אוטומטי של שטחי האזורים הנוכחיים. USPA OS MRI מאפשר הערכה עקיפה של התפלגות מקרופאגים, שניתן לעקוב אחריה במהלך הטיפול. הפחתה של חדירת מקרופאגים תהיה קשורה להפחתה במספר הפיקסלים הכהים בדימות MRI In vivo.שימוש בחומר ניגודיות ספציפי מאפשר להעריך באופן לא פולשני את אוכלוסיית המקרופאגים בתוך הברך. במהלך הטיפול, ניתן לעקוב אחר נוכחותם והפצתו של המקרופאגים ללא צורך בדגימת רקמות ובסביבה טבעית, דבר בעל חשיבות רבה למחקרים אורכיים.

in-vivo-macrophage-imaging-using-mr-targeted-contrast-agent-for

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אנו מתארים שיטת הדמיה לא פולשנית להבחנה שלבים דלקתיים. משלוח מערכתי של לומינול מגלה תחומים של דלקת חריפה תלויות על פעילות MPO בנויטרופילים. לעומת זאת, הזרקה של lucigenin מאפשרת הדמיה של דלקת כרונית תלויה בפעילות phox במקרופאגים.

בשיטת ההדמיה vivo להבחין דלקת אקוטית וכרונית

אנו מתארים הדמיה אופטית סיבוב זווית רב במערכת (MAROI) כדי לכמת את vivo של סמן פלואורסצנטי מועבר על ידי C saposin (SapC)-dioleoylphosphatidylserine nanovesicles (DOPS). העסקת מודלים עכבר של סרטן ודלקת פרקים, אנו מדגימים כיצד הניתוח עקום אות MAROI יכול לשמש למיפוי המדויק ואפיון ביולוגי של תהליכי מחלה.

בדימות אופטי Vivo של גידולים במוח ודלקת פרקים באמצעות פלורסנט SapC-DOPS nanovesicles

בשילוב הדמיה אופטית וμCT במודל של עכברים של זיהום שתל אורתופדים, ניצול זן מהונדס bioluminescent של Staphylococcus aureus, סיפק את היכולת noninvasively ואורכים כדי לפקח על הדינמיקה של זיהום החיידקים, כמו גם את התגובה הדלקתית המקבילה ושינויים אנטומיים ב עצם.

בשילוב<em&gt; בvivo</em&gt; אופטי וμCT הדמיה למעקב אחר זיהום, דלקת, ועצם אנטומיה בזיהום אורטופדיים שתל בעכברים

אנו מפרטים פרוטוקול לניטור התנהגותם של נויטרופילים ומונוציטים בוורידים מזנטריים במצב יציב ובתנאים דלקתיים באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית תוך-חיונית בעכברים מורדמים.

הדמיה נויטרופילים ומונוציטים בmesenteric ורידים על ידי מיקרוסקופית Intravital על עכברים מורדמים בזמן אמת

מאמר זה מסביר את היישום של הדמיה פלואורסצנטי באמצעות בדיקת הדמיה אופטית activatable לדמיין את הפעילות vivo של metalloproteinases מטריצה ​​מפתח בשני מודלים ניסיוניים שונים של דלקת.

לא פולשני<em&gt; בויבו</em&gt; פלואורסצנטי הדמיה אופטית של פעילות MMP דלקתית באמצעות Activatable פלואורסצנטי סוכן הדמיה

הגששים במטרה לייצג כלי חדשני עבור ניתוח המנגנונים המולקולריים, כגון חלבון ביטוי בסוגים שונים של המחלה (למשל, דלקת, זיהום, ו- tumorigenesis). במחקר זה, אנו מתארים הערכה כמותית טומוגרפי תלת מימדי של הסתננות מקרופאג מעיים במודל מאתר של קוליטיס באמצעות טומוגרפיה בתיווך פלורסצנטיות F4/80-ספציפיות.

בתיווך פלורסצנטיות טומוגרפיה זיהוי, כימות הקשורות מקרופאג דלקת מעיים מאתר

אנו מציגים שיטות כדי להעריך את יכולת phagocytic של ראשי מאתר הנגזרות מח עצם מקרופאגים באמצעות פסולת מיאלין fluorescently שכותרתו השומנים תאיים droplet מכתים.

במבחנה Phagocytosis של המיאלין פסולת על ידי מקרופאגים הנגזרות מח עצם

הערכת התפתחות רקמת ב קסם שבר במהלך הריפוי עצם endochondral חיוני לעקוב אחר תהליך הריפוי. כאן, אנחנו מדווחים על השימוש תהודה מגנטית הדמיה (MRI)-fixator חיצוני תואם את אתי העכבר כדי לאפשר MRI סריקות במהלך התחדשות העצם בעכברים.

אין ויוו הערכה של שבר פיתוח קסם במהלך עצם הריפוי בעכברים שימוש בהתקן התואם ל- MRI Osteosynthesis את העכבר אתי

הדמיה ב-vivo של המפרקים היא טכניקה חשובה לחשיפת התנהגות הנדידה של לויקוציטים ודינמיקה מולקולרית בתוך המפרקים הדלקתיים. כאן, אנו מציגים פרוטוקול מפורט להדמיה בתוך המפרקים באמצעות מודל עכברי לדלקת מפרקים מסוג II המושרה על ידי קולגן (CIA).

In Vivo הדמיה חושפת את ההתנהגות הנדידה של לויקוציטים בתוך המפרקים

פיתחנו מערכת טרנסוול אנושית מחוץ לחיים המסוגלת להעריך שינויים דלקתיים, זיהומיים ומבניים חריפים בסינוביום.

מודל קדם-קליני של סינוביטיס המשתמש ברקמה סינוביאלית אנושית מחוץ לחיים עם תפקוד וארכיטקטורה נשמרים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להדמיה תוך-חיונית של Mycobacterium tuberculosis המאושר על ידי BSL-2 מוחלש. מאמץ בריאה העכברית באמצעות חלון ריאה קבוע. גישה זו מאפשרת ניתוח אורך ברזולוציה תאית אחת של אינטראקציות מוקדמות בין מארח לפתוגן, כולל מיקום חיידקים, דינמיקת כלי דם וספיגת מקרופאגים באותה מיקרוסביבה ריאתית.

הדמיה תוך-חיונית של מיקובקטריום טוברקולוזיס אוקסוטרופי מוחלש בריאות עכברי במהלך זיהום תוך-כלי מוקדם

למד הדמיית מאקרופאגים באמצעות MRI עם סוכן ניגוד USPIO במודל ארנבת לדלקת מפרקים ספיגה. שיטה זו מאפשרת מעקב לא פולשני בחדירת תאי דם לבנים ויעילות טיפול אנטיביוטי לאורך זמן.

In vivo Macrophage ההדמיה באמצעות חומר ניגוד ממוקד MR להערכת אורך של דלקת מפרקים ספיגה

גלה סרטונים נוספים