Name: בהדמית vivo של אנגיוגנזה גידול באמצעות הקרינה Confocal Videomicroscopy (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-09-11T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 8 s
Description: למדו לכמת מיקרו-זרימה בגידולי מעי בעכברים באמצעות מיקרוסקופיית פלואורסצנציה קונפוקלית. שיטה זו מאפשרת הערכת צפיפות נימים פונקציונלית וחדירות קירות אנדותליים בגידולים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. הכנת חומר הניגוד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לFITC-dextran 70 kDa, חומר המוזרק הוא 500 מ&quot;ג / קילוגרם (10 מ&quot;ג FITC-dextran בדילול מלא ב0.1 מיליליטר של תמיסת מלח לעכבר במשקל 20 ז). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסוכן לא צריך להיות חשוף יותר מדי זמן לאור. כדי להימנע מהלבנה, מומלץ לכסות את הצינור עם רדיד אלומיניום. </li></ol> 2. הרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים מורדמים בזריקת intraperitoneal של תערובת של 1:4 של xylazine (Rompun 2%, באייר, Puteaux, צרפת) וקטמין (קטמין 500, Virbac, Carros, צרפת), בהתאמה 66 מ&quot;ג / קילוגרם ו264 מ&quot;ג / קילוגרם לעכבר 20 גרם. </li></ol> 3. הכנת האיבר של עניין <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גלחנו את העכברים במיקום של עניין (למשל, מעל גידול תת עורי). שיער בעלי החיים הוא לעתים קרובות אוטומטי ניאון כאשר לבן. כאשר שחור, היא סופגת את אור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העור מול האיבר להיות צילם היה חרות. חשוב לחכות עד המחורבןגרם הפסיק לפני הזרקת חומר הניגוד, אחר זה ידלוף בדם ולזהם את התמונה. </li></ol> 4. רכישה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חומר הניגוד שהוזרק או דרך וריד הצוואר או וריד הזנב. אין או אות קצת רקע יש באיבר שנצפה בהיעדר חומר ניגוד ניאון של. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החללית הייתה להציב מול האיבר להיות צילם. במחקר שלנו, זה היה הגידול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הלייזר היה מופעל כדי להאיר את הגידול ולראות את הקרינה בנימי הדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגידול שנחקר באופן ידני על ידי הזזת החללית בתנועה איטית מאוד בעת ההקלטה כדי להמחיש את רשת הנימים. זה חשוב לשמור על יד יציבה, וטכניקה זו דורשת ניסיון מועט. במחקר שלנו, צעד ראשון זה אפשר כימות של צפיפות נימים פונקציונלית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הצעד השני היה הרכישה הדינמית לאורך זמן. במחקר זה, אנו משמשים 70 kDa FITC-dextran. אין זליגת ביניים ברוב האיברים נורמלים אבל יש בגידולים. לרכוש תמונות מאותו המיקום לאורך זמן (כמו במקרה שלנו), חשוב להגדיר את מערכת כדי לשמור את החללית על השטח של עניין. הדבר נעשה על ידי שימוש בתמיכה בעבודת יד כדי להחזיק את החללית, ועל ידי הצבת קצת ג&#39;ל אולטרסאונד על הקצה של החללית. לפני ההקלטה, זמן הוקדש כדי לייצב את החללית הציבה במגע עם הגידול. ברגע שהמצב היה מאובטח, הייתה תנועה מינימאלית רק בשל נשימותיו של העכבר. הלייזר היה מופעל כדי להקליט 3 תמונות בכל 30 שניות ל20 דקות כדי לזהות הנוכחות של דליפת נימים. זה היה כבוי בין כל הקלטה כדי להפחית הלבנת חומר ניגוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בניסוי שלנו, עכברים הוקרבו בסוף ההליך לניתוח היסטולוגית של גידולים. </li></ol>

<ol><li>Folkman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fundamental+concepts+of+the+angiogenic+process%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Fundamental concepts of the angiogenic process.</a> Curr Mol Med. 3 (7), 643-651 (2003).</li>
<li>Laemmel, E., Genet, M., Le Goualher, G., Perchant, A., Le Gargasson, J. F., Vicaut, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibered+confocal+fluorescence+microscopy+%28Cell-viZio%29+facilitates+extended+imaging+in+the+field+of+microcirculation.+A+comparison+with+intravital+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Res%22%5BJournal%5D)">Fibered confocal fluorescence microscopy (Cell-viZio) facilitates extended imaging in the field of microcirculation. A comparison with intravital microscopy.</a> J Vasc Res. 41 (5), 400-411 (2004).</li>
<li>Charnley, N., Donaldson, S., Price, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Imaging angiogenesis.</a> Methods Mol Biol. 467, 25-51 (2009).</li>
<li>Faye, N., Fournier, L., Balvay, D., Taillieu, F., Cuenod, C., Siauve, N., Clement, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+contrast+enhanced+optical+imaging+of+capillary+leakage%5BTitle%5D)+AND+%22Technol+Cancer+Res+Treat%22%5BJournal%5D)">Dynamic contrast enhanced optical imaging of capillary leakage.</a> Technol Cancer Res Treat. 10 (1), 49-57 (2011).</li>
<li>Kurose, I., Kubes, P., Wolf, R., Anderson, D. C., Paulson, J., Miyasaka, M., Granger, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+nitric+oxide+production.+Mechanisms+of+vascular+albumin+leakage%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Inhibition of nitric oxide production. Mechanisms of vascular albumin leakage.</a> Circ Res. 73 (1), 164-171 (1993).</li>
<li>Faye, N. F. L., Balvay, D., Thiam, R., Orliaguet, G., Clement, O., Dewachter, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macromolecular+capillary+leakage+is+involved+in+the+onset+of+anaphylactic+hypotension%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Macromolecular capillary leakage is involved in the onset of anaphylactic hypotension.</a> Anesthesiology. , (2012).</li>
<li>Faye, N., Fournier, L., Balvay, D., Thiam, R., Orliaguet, G., Clement, O., Dewachter, P. Macromolecular Capillary Leakage Is Involved in the Onset of Anaphylactic Hypotension. Anesthesiology. 117 (5), 1072-1079 (2012).</li>
<li>Tozer, G. M., Kanthou, C., Baguley, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disrupting+tumour+blood+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Disrupting tumour blood vessels.</a> Nat Rev Cancer. 5 (6), 423-435 (2005).</li>
<li>Ntziachristos, V., Schellenberger, E. A., Ripoll, J., Yessayan, D., Graves, E., Bogdanov, A., Josephson, L., Weissleder, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+of+antitumor+treatment+by+means+of+fluorescence+molecular+tomography+with+an+annexin+V-Cy5.5+conjugate%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Visualization of antitumor treatment by means of fluorescence molecular tomography with an annexin V-Cy5.5 conjugate.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101 (33), 12294-12299 (2004).</li>
<li>Cuccia, D. J., Bevilacqua, F., Durkin, A. J., Merritt, S., Tromberg, B. J., Gulsen, G., Yu, H., Wang, J., Nalcioglu, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+quantification+of+optical+contrast+agent+dynamics+in+rat+tumors+by+use+of+diffuse+optical+spectroscopy+with+magnetic+resonance+imaging+coregistration%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Opt%22%5BJournal%5D)">In vivo quantification of optical contrast agent dynamics in rat tumors by use of diffuse optical spectroscopy with magnetic resonance imaging coregistration.</a> Appl Opt. 42 (16), 2940-2950 (2003).</li>
</ol>

יש לנו מה למסור.

מחקר מייקרו מחזורי גידול הפך להיות חיוני בהבנת הפתופיזיולוגיה של צמיחת גידול, הפצה ותגובה לטיפול 1. הדמיה אופטית היא אחת הטכניקות שיכולים לשמש כדי לבחון את נימי הדם באמצעות חומר ניגוד ניאון ולכמת (צפיפות פונקציונלית נימי) מורפולוגיים ופרמטרים תפקודיים (זליגת מדד). יש ההדמיה מיקרוסקופ פלואורסצנטי ששמשנו במחקר זה גם יתרונות ומגבלות. אחד יתרונות הוא יכולת לבחור את גודל חומר הניגוד בשימוש של. כאן, עם 70-kD...

אנגיוגנזה היא תהליך מורכב 1 המערב את היווצרותם של כלי דם חדשים מכלי קיימים מראש. שינויים פתולוגיים בזרימת דם לרקמות, מורכבים מarterioles, נימים, וvenules, הם מעורבים במגוון רחב של מחלות כגון סרטן, דלקת, או סוכרת. לכן זה חיוני כדי לפתח שיטות להערכת מבנה דם קטן ותפקוד כמותית. הדמיה מאפשרת המחקר של microvessels באופן שאינו או מייקר פולשנית, בזמן אמת וin vivo, וצעדים חוזרים ונשנים לאורך זמן באותה החיה 2. נכון לעכשיו, הדמיה דינמית משופר לעומת זאת, (DCE) 3 משמשת בדרך כלל כדי להעריך את זרימת דם לרקמות. הדמיה משופרת ניגודיות דינמי היא טכניקה העוקבת לאורך זמן biodistribution של נותב מוזרק לווריד. מרכישה זו, ניתן לחלץ פרמטרים כמותיים המשקפים כלי דם לרקמות. הדמיה DCEכבר משמש לרוב עם CT, MRI או אולטראסאונד. עם זאת, שיטות ההדמיה הללו אינן מאפשרות צפייה ישירה של microvessels, שכן ברזולוציה שלהם, אלא בשימוש במכשירי ניסוי ספציפיים, לרוב נשארת מקרוסקופית. במאמר זה, אנו מציעים ללמוד את כלי הדם של גידול בקנה המידה המיקרוסקופית וin vivo באמצעות דימות אופטי משופר ניגודיות דינמי, עם videomicroscopy confocal fibered. אנו משמשים חומר ניגוד macromolecular (FITC-dextran) אשר נשאר אך ורק בתוך כלי או דליפות דרך מחסום האנדותל לתוך interstitium, על פי המשקל המולקולרי שלו ואת המאפיינים של האנדותל של הרקמה למדו 4. זו אפשרה המחקר של שני מבנה הדם הקטן, על ידי כראוי מגדיר כלי, וחדירות נימים, על ידי הדלפה והצבירה בinterstitium.

<table><tbody><tr><td>אינסולין serynge Myjector 1 מ"ל 29G</td><td>Terumo Europe</td><td>BS-05M2913</td><td></td></tr><tr><td>פלואורסצאין איזותיוציאנט-דקסטרן 70 kDa </td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>01619HH</td><td>100 מ"ג/מ"ל מדולל במי מלח</td></tr><tr><td>מיקרוסקופיה קונפוקלית סיבים</td><td>Cellvizio - MaunaKea Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ערכת כיול וניקוי עבור LEICAFCM1000</td><td>Leica Microsystems</td><td>חנות LSU-488</td><td>ב-4 מעלות; C</td></tr><tr><td>Probe ProFlexTM Z</td><td>MaunaKea Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>תוכנת פסיפס</td><td>MaunaKea Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>תוכנה לזיהוי כלי שיט</td><td>MaunaKea Technologies</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

בהדמית vivo של אנגיוגנזה גידול באמצעות הקרינה confocal videomicroscopy

In vivo Imaging of Tumor Angiogenesis using Fluorescence Confocal Videomicroscopy

confocal הקרינה בתחום ההדמיה vivo fibered עם צרור סיבים אופטי משתמשת באותו העיקרון כמו מיקרוסקופיה confocal פלואורסצנטי. זה יכול לרגש את הניאון באלמנטים באתרו דרך הסיבים אופטיים, ולאחר מכן להקליט חלק מהפוטונים הנפלטים, דרך אותו הסיבים אופטיים. מקור האור הוא לייזר ששולח אור המרגש באמצעות אלמנט בתוך צרור הסיבים וכמו סריקות על המדגם, משחזר פיקסל תמונה בפיקסל. כסריקה זו מהירה מאוד, על ידי שילוב עם תוכנת עיבוד תמונה ייעודית, ניתן לקבל תמונות בזמן אמת עם תדר של 12 מסגרות / sec. פיתחנו טכניקה לאפיון מורפולוגיה נימים ותפקוד כמותית, באמצעות מכשיר videomicroscopy הקרינה confocal. השלב הראשון בניסוי שלנו היה לרשום 5 סרטי שניות בארבעה הרביעים של הגידול כדי להמחיש את רשת הנימים. כל הסרטים עובדו באמצעות תוכנה (אניmageCell, מאונה קיאה טכנולוגיה, פריז צרפת) שמבצעת פילוח אוטומטי של כלי סביב קוטר בחר (10 מיקרומטר במקרה שלנו). לפיכך, אנו יכולים לכמת את &quot;הצפיפות תפקודית נימים&quot;, שהוא היחס בין שטח הכלי המוחלט והשטח הכולל של התמונה. פרמטר זה היה סמן הפונדקאי לצפיפות כלי הדם, נמדד בדרך כלל תוך שימוש בכלים לפתולוגיה. הצעד השני היה להקליט סרטים של הגידול מעל 20 דקות לכמת דליפת חומר ניגוד macromolecular של דרך קיר הנימים לתוך interstitium. על ידי מדידת היחס בין עוצמת אות בinterstitium על זה בכלי, &quot;זליגת מדד &#39;הושגה, הפועלת כסמן הפונדקאי לחדירות נימים.

שימוש בנתונים שנאספו, אנחנו יכולים לנתח כמותית פרמטרים שונים המשקפים את זרימת דם. למדנו בvivo רשת כלי הדם ההיקפי של גידול במעי הגס שהושתל בעכברי BALB-c באמצעות מערכת fibered confocal videomicroscopy הקרינה (Cellvizio, Maunakea טכנולוגיה, פריז, צרפת 2), לאחר הזרקת חומר ניגוד ניאון macromolecular של ההעמסה isothiocyanate-dextran ( FITC-dextran) עם משקל מולקולרי של 70 kDa (סיגמא אולדריץ, סנט קוונ...

במאמר זה, אנו מציגים שיטה לניתוח microvessels גידול in vivo באמצעות videomicroscopy הקרינה משופרת ניגודיות דינמי. שני פרמטרים כמותיים נרכשו: צפיפות תפקודית נימים המשקפת את כלי הדם של הגידול, וזליגת מדד המשקפת את הדליפות של קיר אנדותל.

בהדמית vivo של אנגיוגנזה גידול באמצעות הקרינה Confocal Videomicroscopy

Fibered confocal fluorescence in vivo imaging with a fiber optic bundle uses the same principle as fluorescent confocal microscopy. It can excite ...

המטרה הכוללת של הניסוי הבא היא לכמת את המיקרוסירקולציה במודל של גידול במעי הגס של עכבר באמצעות מערכת מיקרוסקופיית וידאו פלואורסצנטית קונפוקלית. דבר זה מושג תחילה על ידי הזרקה תוורידית של חומר ניגודיות והקלטת סרטונים של כלי הדם המיקרוסקופיים בגידול. לאחר מכן, מצולמים ארבעה רבעים של הגידול, מה שמאפשר כימות של צפיפות הנימים התפקודית.בשלב הבא, נצפה במעבר של חומר הניגוד מהכלי הדם אל האינטרסטיציום לצורך כימות מדד הדליפה של הנימים, המשקף את חדירות הדופן האנדותליאלית. בסופו של דבר, ניתן לכמת מאפיינים מורפולוגיים ופונקציונליים של כלי הדם בגידול כדי לזהות הבדלים בין מודלים של גידולים או לאחר טיפול ממוקד. טכניקה זו של דימות אופטי דינמי של חומר ניגוד מאפשרת את ניתוח המיקרו-סירקולציה של הגידול.שיטה זו משקפת את הארכיטקטורה והתפקוד של כלי הדם בגידול על ידי כימות הצפיפות והחדירות של הנימים. למרות ששיטה זו יכולה לספק תובנות לגבי פיזיולוגיית הגידול, ניתן ליישמה גם במערכות אחרות כגון הלם אנפילקטי, דלקת, מחלות קרדיווסקולריות וסוכרת. התחילו בגילוח של העכבר המורדם באזור הרלוונטי.לאחר שהדימום פסק, בצעו חתך בעור כשפניו מופנות אל האיבר שיידגם. מזריקו את חומר הניגוד כדי לכמת את צפיפות הנימיים התפקודית. ראשית, מקמו את הגשש לפני האיבר שיידגם.כעת הדליקו את הלייזר המאיר את האיבר. לאחר מכן, תוך שמירה על יד יציבה, הניעו את הגשש באיטיות תוך כדי הקלטה, כאשר רשת הנימים הפלואורסצנטית נראית לעין.כדי לייצב את הרכישה הדינמית לאורך זמן, יש להניח מעט ג'ל אולטרסאונד על קצה המתמר, ולאחר מכן להניח את המתמר בתומך ידני. לאחר הצמדת המתמר לאיבר הרלוונטי, יש לייצב אותו. ברגע שהמיקום מאובטח, הגדירו את הלייזר להקלטת שלוש תמונות בכל 30 שניות למשך 20 דקות, כדי לזהות נוכחות של דליפה נימיות.כיבוי הלייזר בין הקלטה להקלטה כדי להפחית את הפיגמנטציה (bleaching) של חומר הניגוד לאחר הקלטת סרטונים בני חמש שניות בכל אחד מארבעת הרביעים של האיבר הנבדק. לצורך ויזואליזציה של תהליך רשת הנימיים, יש לנתח את הסרטונים באמצעות התוכנה המתאימה, ולבצע סגמנטציה אוטומטית של כלי הדם בתמונות סביב קוטר נבחר כדי לכמת את צפיפות הנימיים התפקודית, שהיא היחס בין השטח הכולל של כלי הדם לשטח הכולל של התמונה. לאחר מכן, מתוך הרכישה הדינמית שבוצעה לזיהוי נוכחות של דליפה נימית, יש לסמן שלושה אזורי עניין (ROI) בנימיים ושלושה אזורי עניין ברקמה הבין-תאית (interstitium) בנקודות הזמן 0, 5, 10 ו-20 דקות. לבסוף, יש לחשב את ממוצע עוצמות האות בתוך שלושת הנימיים השונים ובאזורים הבין-תאיים הסמוכים להם, ולחשב את אחוז מדד הדליפה.על פי נוסחה זו, כאשר IP היא העוצמה הפרי-וסקולרית או האינטרסטיציאלית, ו-II היא העוצמה האינטרה-וסקולרית, פרמטר צפיפות הנימים התפקודית מהווה סמן חלופי לצפיפות המיקרווסקולרית, הנמדדת בדרך כלל באמצעות כלים פתולוגיים. כאן מוצגת דוגמה לסוגי התמונות שהתקבלו ולתוצאת סגמנטציית כלי הדם. בדוגמה זו, צפיפות הנימים התפקודית נמדדה ב-36%. בתמונות אלו, מוצגת דוגמה לדליפת חומר ניגוד לאינטרסטיציום עם מדד דליפה של 1.47 ב-0, 5, 10 ו-20 דקות לאחר ההזרקה.בכל אחת מהתמונות, כלי הדם מופיעים כמבנים קוויים בעלי אות גבוה מיד לאחר ההזרקה. לא נצפית אות ברקמה הבין-תאית. עם הזמן, עם זאת, ניתן להבחין בדליפה של חומר הניגוד אל הרקמה הבין-תאית דרך הגידול החריג.ניסיון במחסום אנדותליאלי נחוץ כדי לשלוט בפרוצדורה זו. עם זאת, ברגע שהטכניקה נלמדת, ניתן להשלימה תוך 30 דקות אם היא מבוצעת כראוי.

in-vivo-imaging-tumor-angiogenesis-using-fluorescence-confocal

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אנו מציגים גישה חדשנית לכמת לוקליזציה nanoparticle ב vasculature של גידולים xenografted אנושי באמצעות דינמי, בזמן אמת הדמיה intravital במודל העובר העופות.

הערכה של ספיגת nanoparticle ב גידולים בזמן אמת באמצעות הדמיה Intravital

הסרטון מדגים שיטת הדמיה פלואורסצנטית ללוקליזציה של נוגדנים in vivo במודל xenograft של גידול עכבר. זה כרוך הזרקה של תאים סרטניים בעכבר כדי ליצור xenografts מוצק מתחת לעור. הזרקה עוקבת של נוגדנים פלואורסצנטיים מאשרת לוקליזציה ספציפית באמצעות אותות פלואורסצנטיים משופרים בתוך קסנוגרפט הגידול.

In vivo fluorescence imaging כדי למקם נוגדנים במודל xenograft גידול עכבר

אנו מתארים שיטה לתגובת הדמיה לטיפול נגד...

חי הדמיה של תגובות סמים בmicroenvironment הגידול במודלים עכבריים של סרטן השד

רומן ברזולוציה גבוהה<em&gt; בvivo</em&gt; טכניקת הדמיה כדי לחקור את התגובה דינמית של מבנים תוך גולגולתי לצמיחה גידול וTherapeutics

אנו מתארים הדמיה אופטית סיבוב זווית רב במערכת (MAROI) כדי לכמת את vivo של סמן פלואורסצנטי מועבר על ידי C saposin (SapC)-dioleoylphosphatidylserine nanovesicles (DOPS). העסקת מודלים עכבר של סרטן ודלקת פרקים, אנו מדגימים כיצד הניתוח עקום אות MAROI יכול לשמש למיפוי המדויק ואפיון ביולוגי של תהליכי מחלה.

בדימות אופטי Vivo של גידולים במוח ודלקת פרקים באמצעות פלורסנט SapC-DOPS nanovesicles

המטריצה ​​תאית עוברת שיפוץ משמעותי בריפוי פצעים, דלקות והיווצרות גידול. אנו מציגים גישה מיקרוסקופית immunofluorescence intravital רומן כדי להמחיש את הדינמיקה של סיבי, כמו גם רכיבי מטריצת רשת כמו עם רזולוציה מרחבית וזמנית גבוהה באמצעות epifluorescence או שני פוטונים במיקרוסקופ.

לטווח ארוך Intravital Immunofluorescence הדמיה של רקמות מטריקס רכיבים עם Epifluorescence ומיקרוסקופי שני פוטונים

אנו מתארים כאן את השיטה של הדמיה מבוססת מיקרוסקופיה פלואורסצנטית קונפוקלית סיבית (FCFM), המספקת מצב חדשני להבנת תופעות פיזיולוגיות ברמה התאית והתת-תאית בנבדקים בבעלי חיים.

בעקבות כימותרפיה כלי דם רעילות - בזמן אמת<em&gt; In vivo</em&gt; הדמיה של ירידת ערך כלי

פרוטוקול זה מתאר את השימוש במיקרוסקופ multiphoton לבצע הדמית הזמן לשגות מורחבת של אינטראקציות רבות-תאי בזמן אמת, in vivo ברזולוצית תא בודד.

זמן לשגות Extended הדמיה Intravital של Dynamics תאיים בזמן אמת ב microenvironment הגידול

פרוטוקול זה מתאר את הדמיה intravital של העכברים הטרנסגניים לבטא סמני פלואורסצנט תאים ספציפיים. הדמיה intravital מספק שיטה לא פולשנית ברזולוציה גבוהה תצפיות בבעלי חיים באמצעות windows מושתלת שדרכו החזיית תהליכים מיקרוסקופיים אפשרית. שיטה זו שימושית במיוחד ללמוד תהליכים האורך.

מיקרוסקופ intravital להערכת סרטניים הקשורים לשימוש מתקדם הגבי צ'יימברס Skinfold חלון על העכברים הטרנסגניים פלורסנט

מטרת שיטה זו היא ליצור מודל vivo של אנגיוגנזה הגידול על ידי תאי גידול של השתלת מיונקים לתוך העובר הזרע כי יש מתויג כלים של כלי דם. על ידי הדמיה של השתל מבע כלים משויכים, מדידה כמותית של תגובת האנגיוגנטית ניתן להשיג.

בVivo הדמיה וככמת של התגובה המארחת אנגיוגנטית ב-Zebrafish גידול Xenografts

תרגום ממצאי המיקרוסקופ התוך-חיוני מאותגר על ידי חדירת העומק הרדוד שלו לרקמה. כאן אנו מתארים מודל עכבר תא חלון גבי המאפשר רישום משותף של מיקרוסקופיה תוך חיונית ושיטות הדמיה ישימות קלינית (למשל, CT, MRI) למתאם מרחבי ישיר, מה שעשוי לייעל את התרגום הקליני של ממצאי מיקרוסקופ תוך חיוני.

מודל עכבר גידול בתא החלון הגבי למיקרוסקופיה תוך-חיונית משולבת והדמיית תהודה מגנטית בחקר סרטן תרגומי

למדו לכמת מיקרו-זרימה בגידולי מעי בעכברים באמצעות מיקרוסקופיית פלואורסצנציה קונפוקלית. שיטה זו מאפשרת הערכת צפיפות נימים פונקציונלית וחדירות קירות אנדותליים בגידולים.

בהדמית vivo של אנגיוגנזה גידול באמצעות הקרינה Confocal Videomicroscopy

גלה סרטונים נוספים