Name: חסימת כלי דם מוחי בלתי הפיך דרך Ligature וחיתוך רוחב זוגי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-07-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: למד שיטה לחסימת כלי דם מוחי קבועה בעכברים באמצעות קרניוטומיה וקשירה זוגית. הטכניקה מבטיחה אזורי אינפארקט עקביים, שרידות גבוהה וירידה של 75% בזרימת הדם לצורך מחקר שבץ.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי איגוד לב predoctoral 788,808-41,910 אחוות האמריקנית, NIH-NINDS NS-NS-ו066,001 055,832, והמרכז לחקר שמיעת NIH הדרכה גרנט 1T32DC010775-01.

1. התחלת עבודה: מכשירי ניתוח דרוש ראה איור 4 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקדח שיניים (Kavo ציוד דנטלי, דגם: UMXL-TM), תרגיל 2 סיביות, ותרגיל 3 סיביות </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחטים תת עורי שתיים ~ 30 מד </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משונן פינצטה, מעוגל טיפ אופציונלי (יכולה להיות מועילה אך לא הכרחית) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שתי פינצטה קצה קנס </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מספרי תיל </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חוט תפירה </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מספריים מיקרו </li></ol> 2. יצירת החלון כירורגי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדמה: נהלים עומדים בהנחיות NIH ואושרו על ידי טיפול בבעלי חי אירווין קליפורניה וועדת שימוש. נושאים ניסיוניים הם 295-400 גרם גברי ספראג Dawley חולדות (צ&#39;ארלס ריבר מעבדות, ווילמינגטון, מסצ&#39;וסטס, ארה&quot;ב) ואמור לשמש את הליך ההרדמה הבא: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק intraperitoneally עכברוש עם בולוס pentobarbital נתרן (55 מ&quot;ג / ק&quot;ג BW) ואחרי זריקה תוך שרירית של אטרופין (0.05 מ&quot;ג / ק&quot;ג, BW) בשעותרגל IND, ומנוהלים על 3.0 סמ&quot;ק של דקסטרוז 5% במים מתחת לעור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תוספת נתרן pentobarbital (27.5 מ&quot;ג / ק&quot;ג, BW) זריקות לפי צורך. לנהל משחה אנטיביוטית עיניים לעיניים כדי להגן על הקרניות במהלך ההליכים הבאים. לנהל 5% דקסטרוז (3 מ&quot;ל) ואטרופין (0.05 מ&quot;ג / ק&quot;ג, BW) כל שש שעות להקטין הפרשות בדרכי הנשימה במהלך הרדמה. טמפרטורת גוף דרך אמצעי בדיקה רקטלית, ולשמור על טמפרטורת גוף על 37 מעלות צלזיוס בשמיכת תרמית ויסות עצמית. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אתר את MCA על ידי אחד מאלה: <ol class="lalpha" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דילול 2 x 2 מ&quot;מ הדמיה / המחשת חלון מעל הקליפה החושית באמצעות גודל מקדח HP 3 עד הגולגולת היא כמעט שקופה ולאחר מכן דלילה לשקיפות מלאה באמצעות גודל של HP המקדח 2. המיקום של MCA ואז ניתן לראות דרך חלון זה ואת מסלולו הפרוקסימלי משמש למיקום המשוער של המגזר הראשוני. MCA בדרך כלל יפעל באלכסון זהבחלון מקורי לזנב / הגחון לכיוון גב (לדוגמה, משמאל לימין למטה / למעלה בעת צפייה באונה שמאלית מנקודת מבטו של המנתח). החלון כירורגית אז יכול להיות שנוצר מעל בי המשקיף מעריך מגזר M1 (פרוקסימלי להסתעפות קליפת המוח) כדי להיות ממוקם על בסיס ענפי דיסטלי הגלויים מבעד לחלון הראשון. על מנת לצמצם את כמות הגולגולת שהוסרה על מנת לקבל גישה לMCA, / חלון ההדמיה חזותי צריך להיות ממוקם קרוב, אך בנפרד מהחלון כירורגית. או </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חלון כירורגי קטן צריך להיות ממוקם כ 3 מ&quot;מ קדמי ו1 מ&quot;מ לרוחב לovale הנקב או עצב הלסת, קרוב לבמת קשת 30,33,34. על מנת לגשת לגזע של MCA (הידוע גם במגזר M1) ביעילות, שריר temporalis משתקף באופן זמני ממשטח הגולגולת. (הערה: במקרה של ניתוחי הישרדות לטווח ארוך, הניסיון של המעבדה שלנו כבר thaלא על ידי המאפשר לשרירי temporalis להישאר מחובר בעוגן שלו, את השרירים מחדש לחשל פני הגולגולת, מה שמאפשרים להתנהגות אכילה בריאה ותחזוקה יעילה של משקל גוף. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עקוב MCA לפינה מקורי, הגחון של חלון ההדמיה (אם משתמש בזה כהפניה) על מנת להעריך את מיקום סניף קליפת המוח הראשוני שלה שקרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יצירת אזור דק גולגולת חדשה (אנחנו קוראים לזה חלון כירורגית) מעט מקורי וגחון לחלון ההדמיה (אם משתמש בזה כהפניה) שבו מגזר M1 (מסעף מראש קליפת המוח) של MCA צריך להיות. הערה חשובה: להשאיר כ -2 מ&quot;מ פער בין חלון ההדמיה (אם משתמש בזה כהפניה) והחלון כירורגית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אתר את הגזע של MCA (הידוע גם במגזר M1) רק לפני הסתעפות קליפת המוח של העורק כפי שמוצג ב1A ו-1B דמויות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בגודל של HP-3 מקדח, רזה הגולגולת מעל למיקום קטע M1 המשוער. כשגולגולת הופכת שקופה מעט, לעבור בגודל קצת יותר העדין HP-2 תרגיל ודק הגולגולת עד שהוא שקוף לחלוטין. לאשר ויזואלית כאזור חלון כירורגית הופך דק מספיק כדי להציג את כלי הדם, ולהעריך את מיקומו של M1 בנקודה זו ולהשלים את החלון כזה שיש 2-3 מ&quot;מ משני צדי האורך של מגזר M1 (זה מאפשר מקום להחדרה ויציאה של מחט התפר בכל צד של MCA). </li></ol> הערה חשובה: להפסיק דליל כאשר העובי של הגולגולת הוא דומה לזו של ניילון נצמד. הכלי יהיה קרע אם התרגיל שובר דרך הגולגולת והדורה. אם הגולגולת היא לא רזה מספיק ומצד שני, להסיר אותו לחסימה יהיה קשה ועלול לגרום לניזק לקליפת המוח או העורק. <ol start="7" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח מחט מזרק 30 מד (30-G) ולכופף את קצה המחט, באמצעות משונן פינצטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במחט 30 גרם לנקב את טיפול הגולגולתבאופן מלא באזור שלא ישירות מעל עורק. השתמש חור לנקב זו כדי לאפשר פינצטה לתפוס גולגולת ולהסיר את האזור דליל של החלון כירורגית בזהירות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח G צורך חדש 30, לכופף את קצהו כמו בשלב 6, ולהסיר בזהירות את הדורה. </li></ol> הערה: חיתוך הדורה יגרום לו לקלף וMCA יהפוך בולט יותר, כתוצאה מלחץ מופחת. 3. Occluding MCA <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במספרי תיל לקצץ הפוך חצי עקום חיתוך מחט תפר (3/8 סיבוב, מחט תפר 16 מ&quot;מ) ועד כ 3-5 מ&quot;מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשחיל חוט במחט התפר הגזוז כפי שמוצג בתמונה ב4E איור. הערה חשובה: חשוב שהמחט מושחלת כך את שני הקצוות של חוט התפירה באורך שווה. זה מאפשר מסתיימת משיכת החוט של שניהם תחת M1 באותו הזמן, את המחט לאחר מכן ניתן לחתוך חופשי השאירה את שני אורכים של חוט כדי לקשור את שני קשרים ברחבי MCA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש המשונן פינצטה להחליק את מחט התפר מתחת M1. הכנס עם כ 0.5-1 מ&quot;מ ממרחק MCA, להישאר כרדוד ככל האפשר, כדי למזער את נזק לקליפת המוח, אך הימנעות יותר מדי עומס על MCA גם כן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר מחט התפר יוצאת בצד השני באופן שהוא נמצא תחת MCA, השתמש בפינצטה קצה קנס (כמוצג להלן) כדי למשוך את קצה מחט התפר מהצד הנגדי תוך המשך כדי להאכיל או דוחף את הקצה השני של התפר מחט עם הקצה המשונן פינצטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שמחט התפר הוא עבר לחלוטין תחת MCA וכבר הוציאה, ממשיך למשוך את מחט התפירה או חוט עד שאורכו של החוט הוא שווה בכל צד של MCA. לחיצה על החוט כפי שהוא מוזן דרך למזער את העומס על MCA יכולה להיות מועילה כדי למנוע קרע כחוט עובר מתחת לעורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחתוך את החוט הקרוב למחט התפר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בשני פינצטה נקודת הקנס להתיר את חוט התפירה וכתוצאה מכך שתייםכל כך שיש שני אשכולות עצמאיים מתוחים תחת MCA שאינם נוגעים ללב. באופן אידיאלי את החוטים יהיו כ 1 מ&quot;מ זה מזה שבו הם עוברים תחת MCA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בשתי פינצטה נקודת הקנס לקשור שני קשרים נפרדים (שני חיבורי אותיות) עם האשכולות ברחבי MCA מנסים לשמור על ש~ 1 מ&quot;מ של רווח בין קשרים כדי לאפשר מקום לחיתוך רוחב. </li></ol> הערה: אם בקרה פנימית דמה היא רצויה, להכין את החסימה עוזב את קשרים רופפים החסימה, כך שהם לא להצר MCA בכלל ולאסוף נתונים שקדמו להידוק קשרים וחיתוך הכלי. חתוך את החוט כדי למנוע אותו תופס כל דבר לפני החסימה אבל להשאיר מספיק חוט כדי לאפשר הידוק הקשרים מאוחר יותר. בדרך זו, ניתן לבצע הדמיה כל בסיס או איסוף נתונים עם כל אותה הפלישה כירורגית כמו החסימה ולהדק את קשרים בנקודת הזמן המתאים עם עיכוב קטן. <ol start="9" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שיש את קשרים להיותen מתוח, השתמש במספרי מיקרו לtransect M1 שבבין שני קשרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במקרה של מחקרים ארוכי טווח, הישרדות: <ol class="lalpha" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפר חרות דש קרקפת אחורי במקום עם חוט כירורגית סטרילי או לאבטח את הרקמות באמצעות קליפים פצע סטריליים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל אנטיביוטיקה מקומית לאזור הפצע (כגון משחת הבסיטרצין) ומערכתי בזריקת מניעתי של אמפיצילין (150 מ&quot;ג / ק&quot;ג IM). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אמנם הנושא הוא עדיין מורדם לנהל משחה אנטיביוטית עיניים לעיניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל משלימה אטרופין (0.05 מ&quot;ג / ק&quot;ג IM) כדי להקטין את ההפרשות בדרכי הנשימה במהלך הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק flunixin meglumine (1.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג) תת עורי בסיומו של ניתוח ושוב בבוקר שלמחרת (~ 12 שעות מאוחר יותר) לשליטה בכאב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החיה על משטח יבש, חם, משופע כך שהאף של בעלי החיים הוא מעל זנבו בשיפוע (זה מקל על נשימה עד שהחיה היא ערה). &lt;/ P&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח על בעלי החיים עד שהוא ער ולנוע בבטחה בכוחות עצמו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שבעלי החיים הוא חזרה בביבר, הפעילות של החיה, מראה, ניקוד, והאכלה ושתיית התנהגות צריכה להיות במעקב יומיומי. </li></ol></li></ol> 4. המתה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסיומו של כל ניסוי, צריכים להיות מורדמים חולדות עם נתרן pentobarbital (2-3 מ&quot;ל, intraperitoneally). </li></ol>

<ol><li>Caplan, L. R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCaplan%2C+LR+%22Caplan%27s+Stroke%2C+A+Clinical+Approach%22">Caplan's Stroke, A Clinical Approach</a>. , 4th edn, Saunder's & Elsevier. (2009).</li>
<li>Blumenfeld, H. Neuroanatomy Through Clinical Cases. , Sinauer Associates. (2002).</li>
<li>Roger, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+Disease+and+Stroke+Statistics--2011+Update%3A+A+Report+From+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart Disease and Stroke Statistics--2011 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. , (2011).</li>
<li>Dirnagl, U., Iadecola, C., Moskowitz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathobiology+of+ischaemic+stroke%3A+an+integrated+view%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Pathobiology of ischaemic stroke: an integrated view.</a> Trends Neurosci. 22, 391-397 (1999).</li>
<li>Durukan, A., Tatlisumak, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+ischemic+stroke%3A+overview+of+major+experimental+rodent+models%2C+pathophysiology%2C+and+therapy+of+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Biochem.+Behav%22%5BJournal%5D)">Acute ischemic stroke: overview of major experimental rodent models, pathophysiology, and therapy of focal cerebral ischemia.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 87, 179-197 (2007).</li>
<li>Dietrich, W. D., Ginsberg, M. D., Busto, R., Watson, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photochemically+induced+cortical+infarction+in+the+rat.+2.+Acute+and+subacute+alterations+in+local+glucose+utilization%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Photochemically induced cortical infarction in the rat. 2. Acute and subacute alterations in local glucose utilization.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 6, 195-202 (1986).</li>
<li>Watson, B. D., Dietrich, W. D., Busto, R., Wachtel, M. S., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+reproducible+brain+infarction+by+photochemically+initiated+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Induction of reproducible brain infarction by photochemically initiated thrombosis.</a> Ann. Neurol. 17, 497-504 (1985).</li>
<li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema%2C+I%3A+a+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area%5BTitle%5D)+AND+%22Japanese+Journal+of+Stroke%22%5BJournal%5D)">Experimental studies of ischemic brain edema, I: a new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Japanese Journal of Stroke. 8, 1-8 (1986).</li>
<li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+focal+stroke%3A+size%2C+mechanism%2C+and+purpose%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroRx%22%5BJournal%5D)">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx. 2, 396-409 (2005).</li>
<li>Howells, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+strokes+for+different+folks%3A+the+rich+diversity+of+animal+models+of+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Different strokes for different folks: the rich diversity of animal models of focal cerebral ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 30, 1412-1431 (2010).</li>
<li>Trueman, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Critical+Re-Examination+of+the+Intraluminal+Filament+MCAO+Model%3A+Impact+of+External+Carotid+Artery+Transection%5BTitle%5D)+AND+%22Transl.+Stroke+Res%22%5BJournal%5D)">A Critical Re-Examination of the Intraluminal Filament MCAO Model: Impact of External Carotid Artery Transection.</a> Transl. Stroke Res. 2, (2011).</li>
<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDirnagl%2C+U+%22Neuromethods%22">Neuromethods</a>. Waiz, W. olfgang , Spring Science & Business Media. New York. (2010).</li>
<li>Cirstea, M. C., Levin, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compensatory+strategies+for+reaching+in+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Compensatory strategies for reaching in stroke.</a> Brain. 123 (Pt. 5), 940-953 (2000).</li>
<li>Nakayama, H., Jorgensen, H. S., Raaschou, H. O., Olsen, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+age+on+stroke+outcome.+The+Copenhagen+Stroke+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The influence of age on stroke outcome. The Copenhagen Stroke Study.</a> Stroke. 25, 808-813 (1994).</li>
<li>Nudo, R. J., Plautz, E. J., Frost, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+adaptive+plasticity+in+recovery+of+function+after+damage+to+motor+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Role of adaptive plasticity in recovery of function after damage to motor cortex.</a> Muscle Nerve. 24, 1000-1019 (2001).</li>
<li>Chiganos, T. C., Jensen, W., Rousche, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+response+dynamics+during+focal+cortical+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neural+Eng%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological response dynamics during focal cortical infarction.</a> J. Neural Eng. 3, 15-22 (2006).</li>
<li>Traversa, R., Cicinelli, P., Bassi, A., Rossini, P. M., Bernardi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+of+motor+cortical+reorganization+after+stroke.+A+brain+stimulation+study+with+focal+magnetic+pulses%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Mapping of motor cortical reorganization after stroke. A brain stimulation study with focal magnetic pulses.</a> Stroke. 28, 110-117 (1997).</li>
<li>Weber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+prediction+of+functional+recovery+after+experimental+stroke%3A+functional+magnetic+resonance+imaging%2C+electrophysiology%2C+and+behavioral+testing+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Early prediction of functional recovery after experimental stroke: functional magnetic resonance imaging, electrophysiology, and behavioral testing in rats.</a> J. Neurosci. 28, 1022-1029 (2008).</li>
<li>Dirnagl, U., Kaplan, B., Jacewicz, M., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+measurement+of+cerebral+cortical+blood+flow+by+laser-Doppler+flowmetry+in+a+rat+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Continuous measurement of cerebral cortical blood flow by laser-Doppler flowmetry in a rat stroke model.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 9, 589-596 (1989).</li>
<li>Wintermark, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+admission+perfusion+computed+tomography+and+qualitative+diffusion-+and+perfusion-weighted+magnetic+resonance+imaging+in+acute+stroke+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Comparison of admission perfusion computed tomography and qualitative diffusion- and perfusion-weighted magnetic resonance imaging in acute stroke patients.</a> Stroke. 33, 2025-2031 (2002).</li>
<li>Crafton, K. R., Mark, A. N., Cramer, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+understanding+of+cortical+injury+by+incorporating+measures+of+functional+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Improved understanding of cortical injury by incorporating measures of functional anatomy.</a> Brain. 126, 1650-1659 (2003).</li>
<li>Nudo, R. J., Eisner-Janowicz, I. Ch. 12. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aNudo%2C+RJ+%22Reprogramming+the+Cerebral+Cortex%22">Reprogramming the Cerebral Cortex</a>. Lomber, S. tephen, Eggermont, J. os , Oxford Scholarship Online. (2006).</li>
<li>Davis, M. F., Lay, C. C., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amount+but+not+pattern+of+protective+sensory+stimulation+alters+recovery+after+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Amount but not pattern of protective sensory stimulation alters recovery after permanent middle cerebral artery occlusion.</a> Stroke. 42, 792-798 (2011).</li>
<li>Lay, C. C., Davis, M. F., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+sensory+stimulation+completely+protects+the+adult+rodent+cortex+from+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Mild sensory stimulation completely protects the adult rodent cortex from ischemic stroke.</a> PLoS One. 5, e11270(2010).</li>
<li>Lay, C. C., Davis, M. F., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+sensory+stimulation+reestablishes+cortical+function+during+the+acute+phase+of+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mild sensory stimulation reestablishes cortical function during the acute phase of ischemia.</a> J. Neurosci. 31, 11495-11504 (2011).</li>
<li>Coyle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+young+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Middle cerebral artery occlusion in the young rat.</a> Stroke. 13, 855-859 (1982).</li>
<li>Risedal, A., Zeng, J., Johansson, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+training+may+exacerbate+brain+damage+after+focal+brain+ischemia+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Early training may exacerbate brain damage after focal brain ischemia in the rat.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 19, 997-1003 (1999).</li>
<li>Lay, C. C., Davis, M. F., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+sensory+stimulation+protects+the+aged+rodent+from+cortical+ischemic+stroke+following+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association+Cardiovascular+and+Cerebrovascular+Disease%22%5BJournal%5D)">Mild sensory stimulation protects the aged rodent from cortical ischemic stroke following permanent middle cerebral artery occlusion.</a> Journal of the American Heart Association Cardiovascular and Cerebrovascular Disease. , (2012).</li>
<li>Niiro, M., Simon, R. P., Kadota, K., Asakura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximal+branching+patterns+of+middle+cerebral+artery+%28MCA%29+in+rats+and+their+influence+on+the+infarct+size+produced+by+MCA+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Proximal branching patterns of middle cerebral artery (MCA) in rats and their influence on the infarct size produced by MCA occlusion.</a> J. Neurosci Methods. 64, 19-23 (1996).</li>
<li>Wang-Fischer, Y. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWang-Fischer%2C+Y+%22Manual+of+Stroke+Models+in+Rats%22">Manual of Stroke Models in Rats</a>. , CRC Press. 17-30 (2009).</li>
<li>Quinn, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparing+rat%27s+to+human%27s+age%3A+how+old+is+my+rat+in+people+years%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrition%22%5BJournal%5D)">Comparing rat's to human's age: how old is my rat in people years?</a> Nutrition. 21, 775-777 (2005).</li>
<li>Wei, L., Rovainen, C. M., Woolsey, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ministrokes+in+rat+barrel+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Ministrokes in rat barrel cortex.</a> Stroke. 26, 1459-1462 (1995).</li>
<li>Brint, S., Jacewicz, M., Kiessling, M., Tanabe, J., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+brain+ischemia+in+the+rat%3A+methods+for+reproducible+neocortical+infarction+using+tandem+occlusion+of+the+distal+middle+cerebral+and+ipsilateral+common+carotid+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Focal brain ischemia in the rat: methods for reproducible neocortical infarction using tandem occlusion of the distal middle cerebral and ipsilateral common carotid arteries.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 8, 474-485 (1988).</li>
<li>Tamura, A., Graham, D. I., McCulloch, J., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat%3A+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Focal cerebral ischaemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 1, 53-60 (1981).</li>
<li>Dittmar, M., Spruss, T., Schuierer, G., Horn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((External+carotid+artery+territory+ischemia+impairs+outcome+in+the+endovascular+filament+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">External carotid artery territory ischemia impairs outcome in the endovascular filament model of middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Stroke. 34, 2252-2257 (2003).</li>
<li>Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+blood+flow+and+cerebral+perfusion+pressure+in+a+new+noncraniotomy+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> Stroke. 26, 1086-1091 (1995).</li>
<li>Kuge, Y., Minematsu, K., Yamaguchi, T., Miyake, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nylon+monofilament+for+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Nylon monofilament for intraluminal middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Stroke. 26, 1655-1657 (1995).</li>
<li>Laing, R. J., Jakubowski, J., Laing, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.+Which+method+works+best%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Which method works best?</a> Stroke. 24, 294-297 (1993).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li>
<li>Schmid-Elsaesser, R., Zausinger, S., Hungerhuber, E., Baethmann, A., Reulen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+reevaluation+of+the+intraluminal+thread+model+of+focal+cerebral+ischemia%3A+evidence+of+inadvertent+premature+reperfusion+and+subarachnoid+hemorrhage+in+rats+by+laser-Doppler+flowmetry%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">A critical reevaluation of the intraluminal thread model of focal cerebral ischemia: evidence of inadvertent premature reperfusion and subarachnoid hemorrhage in rats by laser-Doppler flowmetry.</a> Stroke. 29, 2162-2170 (1998).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף בשלב זה.

פרוטוקול זה פותח על מנת לגרום לאיסכמיה בתוך קליפת המכרסם, ולעשות זאת עם השפעה מינימאלית היקפית לנושאים ניסיוני. החסימה הכפולה ושיטת חיתוך רוחב מאפשרת אישור ויזואלי כי הכלי כבר האפיל באופן קבוע, ועשויות להתבצע ללא פלישה מוגזמת או נזק לרקמות, ועם שיעור הישרדות גבוה. פרוטוקול חסימה זו עשוי להיות מיושם על כל כלי קליפת המוח שניתן לגשת דרך craniotomy כדי לגרום לאיסכמיה בתחום ספציפי בקליפת המוח. יתר על כן, ניתן לבצע חסימות כאלה בזמן חיה היא במנגנון stereotaxic המאפשר שימוש בו זמני של טכנ...

כדי לגרום לתנאי איסכמי שמחקים בצורה יעילה שבץ איסכמי אנושי, מספר דגמי שבץ בבעלי חיים מועסקים באופן נרחב, עם משתנה כרכים של אוטם כתוצאה מכך. במודל photothrombotic, המוח הוא מוקרן דרך הגולגולת השלמה באמצעות תאורת לייזר לאחר הזרקה תוך ורידית של חומר רגיש לאור (כמו ורד בנגל), וכתוצאה מקרישת פוטו, חסימה של כלי המוקרנים, ואיסכמיה ברקמה הסובבת 6, 7. Photothrombosis יכול לגרום באזורים קטנים מאוד ומבודדים של אוטם ומשמש בדרך כלל כאמצעי לדוגמנות &quot;מיני שבץ&quot;, או &quot;מיקרו שבץ&quot;. הטכניקה באופן נרחב יותר אימצה לגרימת שבץ מוחי איסכמי, בעיקר בעורק המוח אמצעי (MCA), היא מודל intraluminal חוט חד 8, שבו חוט להט הוא הציג ניתוח לתוך עורק הצוואר החיצוני והתקדם עד לקצה חוסם את הבסיס של MCA. פריאתגר מרי של חסימת נימה intraluminal הוא שיעור התמותה הגבוה (70%, כאשר MCA הוא האפיל על 3 שעות, נקודת זמן רלוונטית למחקר שבץ) 9. בעיות אחרות עם השיטה כללו דימום תת עכבישי אפשרי, חסימה לא שלמה, ונפח אוטם משתנה 10,11. תוצאות מודל זה במידה רבה של אוטם הן בקליפת המוח ו12 subcortically ומודלים אנושי שבץ מסיבי. למרות שדגמי שבץ גם מיקרו והסיביים הם חשובים, משיכות אדם הן בדרך כלל איפשהו באמצע. במחקרים קליניים גדולים, טווחי אוטם שבץ בגודל 28-80 ס&quot;מ 3, המתרגם ל4.5-14% בחצי כדור ipsi-ishemic 9. לשם השוואה, הטווחים שלנו עכברוש pMCAO אוטם גודל מ כ 9-35 3 מ&quot;מ, שמהווה 3 עד 12% בחצי כדור ipsi-ishemic. מודל pMCAO שלנו, אם כן, דומה כרכי אוטם שבץ איסכמי אדם באופן הדוק על ידי אחוז מהמוחנפח. בנוסף לדוגמנות נזק מבנים של תוצאות שבץ, pMCAO בליקויים תפקודיים והתנהגותי דומים למצבו של האדם. לכל הפחות, מודל אפקטיבי של תוצאות שבץ בגירעונות תנועה נגדיות לנזקים שבץ 13-15, אובדן או שיבוש של מנוע ותפקוד חושי 16,17, אובדן או שיבוש של פעילות עצבית עוררה 16,18, ירידה בזרימת דם במוח 19, 20, והאוטם 21,22. בהתאם לכך, המודלים שלנו pMCAO חסימה רצינית של MCA וכתוצאה מכך נכות פיזית, אובדן התפקוד בתוך הקליפה המוטורית (קליפת מוח ושכנות), הפרעה בפעילות עצבית, ירידה חמורה בזרימת דם MCA, ותכונות אוטם-היכר של שבץ איסכמי 23 -25, ולכן משמשים כמודל יעיל של שבץ מוחי אנושי. פרוצדוראלית, pMCAO כרוך craniotomy קטן שבו אנחנו מסירים את הגולגולת והדורה בזהירות ממ&quot;מ &quot;חלון כירורגית&quot; 2 X 2 על המגזר (M1) הראשוני של MCA, רק לפני הסתעפות העיקרית של MCA לענפי קליפת המוח הקדמיים ואת אחורי (האיורים 1A ו-1B). אנחנו עוברים מחט חצי עקומה הפוך חיתוך תפר וחוט (6-0 משי) דרך שכבת pial של קרומי המוח, מתחת MCA ומעל פני השטח של קליפת המוח (ראה טבלה של חומרים כימיים וציוד ספציפיים עבור הציוד הדרוש כדי לבצע את ניתוח pMCAO ). לאחר מכן, אנו קושרים קשירה כפולה, להדק את קשרים שני ברחבי MCA, וtransect הכלי בין שני קשרים. הקשירה הכפולה וחיתוך הרוחב דרך M1 מתרחש דיסטלי רק להסתעפות lenticulostriate, כזה שרק את ענפי קליפת המוח של MCA-מושפעים ובכך רק אוטם קליפת המוח (לא נגרם נזק subcortical) מתרחש 26,27 (איור 2). למרות ששבץ מוחי אנושי כרוך לעתים קרובות אוטם subcortical, דוגמנות זה במכרסמים דורשת הפולשנות גדלה (occluding כלי מוחיים לפני branchi קליפת המוחng דורש גישה לעורקים דרך העורק הראשי בצוואר ומחייב occlusions נוסף) בטכניקה והשתנות מוגברת בגודל אוטם. המודל שתואר כאן לא ניתן לבצע יותר proximally כגישה לסניפים קודמים של MCA אינה אפשרית באמצעות craniotomy פשוט. למרות שזה עשוי להיות אפשרי בניתוח כדי לגרום לאוטם subcortical דרך pMCAO, חסימה תהיה כרוכה הליך מאוד פולשני ולכן אינו אידיאלית. יעילות של חסימה ניתן לאשר באמצעות לייזר דופלר, או לייזר רבב הדמיה 12,24,25 (איור 3), או בהיסטולוגיה נתיחה שלאחר מוות (איור 2). יש לציין שמחקרים קודמים הראו שגירוי חושי יכול לשחק תפקיד מרכזי בהתפתחות והתוצאה של אוטם; הענקת הגנה מפני נזקים כאשר מנוהלים בתוך 2 שעות של pMCAO וגורם לעלייה בנזק שבץ כאשר מנוהלים ב3 שעות ההודעה pMCAO 24,25,28. יש לנו אישר כי בשעה 5 הודעה pMCAO-, גירוי כבר אין לו השפעה על תוצאה (נתונים שלא פורסמו). לכן, גירוי חושי של נושאים צריך להיות ממוזער של 5 שעות לאחר pMCAO להשיג כרכי אוטם עם שונות מינימאלית. בהתאם לכך, הקבוצה שלנו פועלת &quot;ביקורת שלא טופל&quot; מסוג זה על ידי שמירה על חולדות מורדמת במשך 5 שעות הודעה pMCAO-, בחושך, עם גירוי חושי מינימאלי, ובמפורש לא גירוי זיף. יש לציין עוד, כי מדי פעם בוריאצית מבנה MCA, כולל הסתעפות מוגזמת, מגזרים עיקריים מרובים, או עדר עורקי תקשורת יכולה להתרחש בתדירות של 10 עד 30% בזכר בוגר ספראג Dawley חולדות 29,30. אם ליקויים בMCA הם נצפו, רצוי לא להשתמש בנושא מסוים כמו הוספת חיות עם מומים בכלי הדם כאלה תגביר את שונות אוטם. בנוסף, יש כמה היבטים מעשיים של oהליך ur שהופך שיטה זו יתרון חסימה לחקירת אירוע מוחי. ראשית, ניתן למקם את התפרים סביב העורק אך לא להדק על מנת לגבות הערכה בסיסית, ואחרי הערכה שלאחר איסכמי לאחר קשירה וחיתוך רוחב. באופן זה, הכנה כירורגית הכרחית לחסימה נשלטת בצורה יעילה ל, בתוך נושאים. כי נושאים עשויים להישאר נייחים או בתוך מסגרת stereotaxic לאורך חסימה, ניתן לנהל הערכה ניסיונית של כל נושא לפני, במהלך, ואחרי החסימה מבלי להזיז את הנושא או מטריד את כל ציוד בשימוש ניסיוני 25,28. יתר על כן, תוצאות הליך זה בשיעור תמותה נמוך מאוד, אפילו בתוך נבדקים בגילי 21-24 מכרסמים חודשים של גיל (שווה ערך לאדם מבוגר) 31, ולכן עשוי להיות המשמש להערכת טיפולי שבץ בחולדות כי מודל הדוק יותר נפוצה ביותר קבוצת גיל של חולי שבץ 25,28. כלי transection גם משרת מספר מטרות מעשיות. היעדר דימום לאחר חיתוך רוחב מאשר כי הספינה האפילה לחלוטין בשני אתרי קשירה. בנוסף, מבטיח חיתוך רוחב שיבוש קבוע של זרימת דם. לבסוף, חיתוך רוחב מבטיח שכל זרימת דם זוהתה בחלקים הדיסטלי של כלי occluded חייבת לבוא ממקור חלופי. לבסוף, למרות שאנחנו באופן ספציפי לתאר טכניקת חסימה זו לMCA בכתב היד והסרטון הזה, באותה טכניקת חיתוך רוחב קשירה כפולה יכולה להיות מיושמת על כל כלי מוחין שניתן לגשת דרך craniotomy. המעבדה שלנו, למשל, מנוצל pMCAO בשיתוף עם כמה חסימות קבועות נוספות של ענפי MCA דיסטלי כדי לחסום גם ראשוני, וזרימת דם בטחונות 24 באופן שדומה לטכניקות שנועדו לגרום לאיסכמיה סלקטיבי בתוך הקליפה 32 העיקרית החושית. לסיכום, לאהשיטה שלו לחסימה קבועה כפי שהוחל על MCA משמשת דוגמה מקרוב שלושה היבטים עיקריים של שבץ איסכמי אנושי: מיקום השכיח ביותר (MCA), סוג (איסכמיה), ומידת נזק (אוטם) הקשורים בספרות הקלינית בבני האדם של שבץ מוחי. יתר על כן, בשיטה זו של חסימה עשויה להיות מיושמת לאתרי חסימה בודדים או מרובים בכל רחבי המוח, ועשויה להתנהל בנושאי גיל עמידה עם שיעור גבוה של הישרדות. בהתחשב באופי הדינמי, קבוע, ולא פולשנית יחסית של חסימה זו, טכניקה זו מהווה כלי נוסף להערכת חוקרים פרה גישות חדשות להגנה מפני וטיפול בשבץ מוחי.

<table><tbody><tr><td>מלקחיים דקים במיוחד - 0.5 מ"מ טיפים עקומה קלה (1)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11151-10</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים מצופים קרמיקה Dumont #5 (2)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-50</td><td></td></tr><tr><td>מספריים בון משובחים במיוחד, ישר (1)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14084-08</td><td></td></tr><tr><td>עגול 3/8 (16 מ"מ) מחטי תפרים</td><td>Fine Science Tools</td><td>12050-02</td><td></td></tr><tr><td>6-0 משי קלוע תפר</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>NC9071061 מכשיר הרווארד מס': 510461</td><td></td></tr><tr><td>מחט מד 30, &frac12; " אורך</td><td>כלי מדע עדין</td><td>NC9867376 מס': ZT-5-030-5-L/COL</td><td></td></tr></tbody></table>

חסימת כלי דם מוחי בלתי הפיך<em&gt; דרך</em&gt; ligature וחיתוך רוחב זוגי

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

שבץ הוא גורם מוביל למוות, נכות, אובדן סוציו אקונומי ובעולם. הרוב מכל מקרי השבץ כתוצאה מהפרעה בזרימת דם (איסכמיה) 1. עורק מוח אמצעי (MCA) מספק הרוב גדול של דם אל פני השטח לרוחב של הקליפה 2, הוא האתר הנפוץ ביותר של שבץ 3 אנושיים, ואיסכמיה בשטחה יכולה לגרום לבעיות בתפקוד נרחבים או מוות 1,4,5. ניצולים מהשבץ מוחי איסכמי סובלים לעתים קרובות אובדן או שיבוש של יכולות מוטוריות, חושיים גירעונות, ואוטם. במאמץ ללכוד את המאפיינים מרכזיים אלה של שבץ, ובכך לפתח טיפול יעיל, הרבה דגש על מודלים של בעלי חיים של איסכמיה בMCA. כאן אנו מציגים שיטה באופן קבוע occluding כלי דם משטח קליפת המוח. אנו נציג בשיטה זו משתמשת בדוגמה של חסימת כלי דם רלוונטי כי מודלי הסוג הנפוץ ביותר, המיקום וoutcomדואר של שבץ מוחי אנושי, חסימת עורק קבע אמצע מוחין (pMCAO). במודל זה, אנו חושפים בניתוח MCA בעכברים הבוגרים, ולאחר מכן לחסום באמצעות קשירה כפולה וחיתוך רוחב של כלי השיט. זה pMCAO חוסם את קליפת המוח הסניף הפרוקסימלי של MCA, גורם איסכמיה בכל שטח קליפת המוח MCA, חלק גדול של קליפת המוח. שיטה זו של חסימה יכולה לשמש גם כדי לחסום חלקי דיסטלי יותר של כלי קליפת המוח על מנת להשיג איסכמיה מוקד יותר מיקוד אזור קטן יותר של קליפת המוח. החסרונות העיקריים של pMCAO הם שההליך כירורגי פולשני הוא במידה מסוימת כפי שנדרש craniotomy קטן לגשת MCA, אם כי זה גורם נזק לרקמות מינימאלית. היתרונות העיקריים של מודל זה, עם זאת, הם: האתר של חסימה מוגדר היטב, מידת הפחתת זרימת דם עולה בקנה אחד, פונקציונלית ונוירולוגיות ליקוי מתרחש במהירות, גודל האוטם עולה בקנה אחד, והשיעור הגבוה של הישרדות מאפשר ארוך הערכה כרונית טווח.

<html> חסימה מוצלחת של כלי שניתן לאשר שימוש בליזר רבב הדמיה (LSI) בין שיטות הדמיה זרימת דם אחרות. זרימת דם בענפי קליפת המוח הגדולים של MCA צריכה לרדת ל ~ 25% מנקודת ההתחלה פחות או החסימה הבאה בהתאם לרמתו של רעש במערכת ההקלטה ורגישות של הטכניקה. ראה איור 3 לתמונת נציג LSI של קטע של סניף קליפת המוח של MCA לפני ואחרי MCA חסימה. כאשר טכניקת החסימה תאר מוחלת MCA במגזר M1, חוסמת את כל ענפי MCA קליפת המוח, וגירוי חושי מנע ל~ החסימה הבאה 5 שעות, התוצאה היא...

אנו מתארים שיטת שחזור מאוד לחסימה הקבועה של כלי דם במוח גדולים מכרסם. טכניקה זו יכולה להיות מושלמת עם מעט מאוד נזק היקפי, איבוד דם מינימאלי, שיעור גבוה של הישרדות לטווח ארוך, ונפח אוטם עקבי בקנה אחד עם האוכלוסייה הקלינית בבני האדם.

חסימת כלי דם מוחי בלתי הפיך<em&gt; דרך</em&gt; Ligature וחיתוך רוחב זוגי

Stroke is a leading cause of death, disability, and socioeconomic loss worldwide. The majority of all strokes result from an interruption in blood flow ...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא לחסום באופן קבוע כלי דם מוחי מרכזי במכרסם. פעולה זו מבוצעת תחילה באמצעות ביצוע קרניאוטומיה של שני על שני מילימטרים מעל כלי הדם. לאחר מכן, מעבירים תפר מתחת ומסביב לכלי הדם המיועד.לאחר מכן מקבעים שתי ליגטורות מסביב לכלי הדם, ולבסוף חותכים את כלי הדם בין קשרי התפירה. בסופו של דבר, ניתן לקבל תוצאות המראות הפחתה בזרימת הדם של 75% או יותר, כפי שניתן להעריך באמצעות דימות ספייקל לייזר (laser speckle imaging) או טומוגרפיה בקוהרנטיות אופטית (optical coherence tomography). היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות, כגון שיטת החסימה באמצעות מונופילימנט, הוא האפשרות להשיג אזורי אינפארקט עקביים בקליפת המוח של מכרסמים, שונות מוגבלת בגודל האינפארקט ותמותה מוגבלת של נסייני המחקר.ההשלכות של טכניקה זו חולות על האבחון והטיפול בשבץ מוחי, מכיוון שניתן להעריך טיפולים חדשים במהלך ההתפרצות החריפה ולאורך תהליך ההחלמה באותם נבדקים. כדי להיערך לניתוח, השתמשו במכשיר עיקור באמצעות פניני זכוכית לעיקור המכשירים הבאים: מקדח דנטלי עם מקדחים בגודל two bit ו-three bit, שתי מחטים היפודרמיות בכי মাপ 30, פינצטה משוררת, שתי פינצטות בעלות קצה דק, קוצץ הפוך בעל קימור חציתי, קוצץ חוטים למחטי תפירה, חוט תפירה ומספריים מיקרוסקופיים.לאחר הרדמתו של חולדה מסוג Sprague Dawley, בהתאם לשיטה המאושרת על ידי ועדת רعاية והשימוש בבעלי חיים במוסדכם, הכניסו גשושית רקטלית למדידת טמפרטורת הגוף והניחו את החולדה על שמיכה תרמית בעלת ויסות עצמי. לאחר מכן, הכניסו מחט במידה 26 לתוך מכשיר קידוח דנטלי. כדי לגשת לעורק המוחי האמצעי (MCA), השתמשו בצבטי המסטטיס כדי להסיט זמנית את שריר הרקה (temporalis muscle) מהרכיב העליון של הגולגולת.לאחר איתור ה-MCA, השתמש במקדח כדי ליצור חלון כירורגי קטן, כ-3 מילימטרים קדמית (anterior) ואחמול של מילימטר אחד לצד ה-foramen ovale או העצב המנדיבולרי. כדי להעריך את מיקומה של הענפה הקורטיקלית של ה-MCA, התקרב ל-arch rostrum ועקוב אחריה עד לפינה הבנטרלית-רוסטרלית של חלון ההדמיה. לאחר מכן, צור אזור גולגולת דק, מעט רוסטרלית ובנטרלית לחלון ההדמיה, במקום שבו סגמנט M1 של ה-MCA אמור לצאת, תוך השארת מרווח של כמעט 2 מילימטרים בין חלון ההדמיה לחלון הכירורגי.באמצעות מקדח בגודל 3, דללו את הגולגולת מעל המיקום המשוער של מקטע M1. כאשר הגולגולת הופכת לשקופה למדי, עברו למקדח עדין יותר בגודל 2, ודללו את הגולגולת. עד שהיא תהיה שקופה לחלוטין, עובי הגולגולת צריך להיות דומה לעובי של ניילון נצמד.בשלב הבא, בעזרת פינצטה משוננת, כופפו את קצהו של מחט בכיול 30 והשתמשו במחט כדי לנקב בזהירות את הגולגולת באזור שאינו נמצא ישירות מעל עורק. לאחר מכן, השתמשו בחור כנקודת כניסה עבור פינצטה. כדי להסיר בזהירות את החלון הכירורגי שדוקק, השתמשו במחט חדשה בכיול 30 כדי להסיר בזהירות את הקרומים העוטפים את המוח (dura), מה שיגרום ל-MCA להפוך לבולט יותר כתוצאה מהפחתת הלחץ.לאחר מכן, אתרו את גזע ה-MCA או את סגמנט M1. ה-MCA יבלוט לעומת הוורידים המלווים אותו לרוב בכך שיהיה כלי דם בצבע אדום בהיר יותר. ודאו שחשפתם את ה-MCA רגע לפני ההסתעפות הקורטיקלית של העורק, כפי שמוצג כאן.העריכו את מיקומו של M1 ואשרו שחלון הגישה משאיר שני עד שלושה מילימטרים משני צדדיו של אורך מקטע ה-M1. כדי לחסום את העורק המוחי האמצעי, השתמשו קוצץ חוטים כדי לקצץ מחט תפר בעלת קימור חצי-הפוך לאורך של כ-3 עד 5 מילימטרים. השחילו את מחט התפר הקצוצה תחת מיקרוסקופ כירורגי, תוך וידוא ששני קצות התפר שווים באורכם.ובעזרת פינצטה משוננת, החליקו את מחט התפירה מתחת ל-M1 במרחק של כ-0.5 עד מילימטר אחד מה-MCA, ובצורה רדודה ככל האפשר כדי למזער את הנזק לקורטקס מבלי להפעיל מתיחה על ה-MCA, תוך המשך הנחיה והזנת המחט מתחת ל-MCA באמצעות הפינצטה המשוננת. השתמשו בפינצטה בעלת קצה דק כדי למשוך את המחט מהצד הנגדי. לאחר שהמחט עברה לחלוטין מתחת ל-MCA, המשיכו למשוך את התפר עד למחציתו תוך כדי לחיצה עליו כלפי מטה.כדי למזער את המאמץ המופעל על העורק, גזרו את החוט קרוב למחט התפירה, כך שיווצרו שני חוטים נפרדים במרחק של כ-מילימטר אחד זה מזה, באמצעות שתי פינצטות בעלות קצה דק. קשרו שני קשרים נפרדים סביב ה-MCA, תוך שמירה על מרחק של כ-מילימטר אחד ביניהם לאחר הידוק הקשרים. השתמשו במספרי מיקרו כדי לחתוך את M1 בין שני הקשרים.לאחר שביצעו חיתוך מוצלח של ה-MCA, יש להשאיר את בעלי החיים תחת הרגעה, להקפיד על חימום ולשמור על סביבה שקטה למשך חמש שעות, כדי להבטיח שלא תתרחש הגנה משבץ המושרית על ידי גרייה. לאחר אישור הסתימה המוצלחת באמצעות דימוי laser speckle או טכניקת דימוי אחרת, מאפשרים לבעל החיים להתאושש מההרדמה ומעניקים לו אנטיביוטיקה ומשככי כאבים. הנזק מהשבץ יתפתח במהלך 24 עד 48 שעות.ניתן לאשר חסימה מוצלחת של כלי דם באמצעות טכניקות של דימוי זרימת דם, כגון דימוי ספקל לייזר (laser speckle imaging) או LSI; המוצגים כאן הם תמונות LSI מייצגות של מקטע של ענף קורטיקלי של ה-MCA לפני ואחרי חסימת ה-MCA. זרימת הדם בענפים הקורטיקליים העיקריים של ה-MCA צריכה לרדת לכ-25% מערך הבסיס או פחות לאחר החסימה, תלוי ברמת הרעש במערכת ההקלטה וברגישות הטכניקה. כאשר טכניקת החסימה המתוארת מיושמת על ה-MCA במקטע M1, ובכך נחסמים כל הענפים הקורטיקליים של ה-MCA ונמנעת גרייה תחושתית, התוצאה לאחר חסימה קבועה וחמישה שעות ללא גרייה היא אוטם קורטיקלי של 28.4 פלוס או מינוס 2.4 מילימטרים מעוקבים.ברגע שהטכניקה תשלט, ניתן לבצעה ב-20 דקות או פחות. בעקבות הליך זה, ניתן להשתמש במספר טכניקות אחרות, כגון דימות תפקודי, דימות נצנצי לייזר (laser speckle imaging) והקלטה נוירונלית, כדי לבחון שאלות כגון מהו המצב התפקודי והמבני של קליפת המוח לאחר חסימה.

permanent-cerebral-vessel-occlusion-via-double-ligature

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

סרטון זה מדגים את ההליך של ביצוע חסימה קבועה של עורק המוח האמצעי הדיסטלי, או MCAO, עם עורק הצוואר המשותף, או קשירת CCA, בחולדות מבוגרות כדי להדגים שבץ איסכמי. זה חוסם את זרימת הדם למוח, מה שמוביל למוות עצבי ויוצר מודל לחקר מנגנוני שבץ וטיפולים פוטנציאליים.

גרימת איסכמיה באמצעות חסימת עורק המוח האמצעי והצוואר המשותף במודל חולדה

מקור: Larpthaveesarp, A., et. al. מודל חסימת עורק מוח אמצעי חולף של שבץ מוחי בילודים בחולדות P10. J. Vis. exp. (2017)סרטון זה מדגים את הקמת מודל חסימת עורק המוח התיכון בגור חולדות. עורק הצוואר הפנימי (ICA) חשוף, וקשירה מאובטחת כדי להגביל את הצפת הדם. חסימה מוחדרת דרך ה-ICA כדי להגיע לעורק המוח האמצעי. לאחר מכן נותנים לגור להתאושש לפני ניתוח נוסף.

יצירת חסימה של עורק המוח האמצעי בגור חולדות כדי לגרום לאיסכמיה מוחית מקומית

פרוטוקול זה מתאר התניה מוקדמת היפוקסית חוזרת ונשנית, או חשיפות קצרות להיפוקסיה מערכתית המפחיתות את נפחי האוטם והפרעה במחסום הדם-מוח בעקבות חסימה חולפת של עורק המוח האמצעי בעכברים. הוא גם מפרט כימות כפול של נפח האוטם והפרעה במחסום הדם-מוח לאחר שבץ מוחי כדי להעריך את היעילות של הגנה נוירו-וסקולרית.

כימות של הגנת עצבים וכלי דם בעקבות חסימת עורק חוזר חוסר חמצן אכשור קד וחלוף התיכון מוחין של עכברים

כאן אנו מציגים פרוטוקול לייצר חסימת עורק המוח אמצעית דיסטלי קבעה חולדות נקבות קשישים עם חסימה זמנית של עורקי הראש כדי ליצור אוטמי קורטיקליים גדולים וגירעונות מתמשכים. אנו מציגים אישור של הגודל הנגע באמצעות MRI מבני ב 24 שעות ו -8 שבועות לאחר אירוע מוחי.

Performing מוחות תיכונים דיסטלי קבוע עם ספיגה עורקת Common הראש אצל חולדות בנים לחקר קורטיקלי איסכמיה עם נכות קבועה זה

שבץ יילודים הוא גורם משמעותי לפגיעה מוחית מוקדמת הדורש מודל תרגומי עם דפוסי פגיעה מוקדית עקביים ויכולת שחזור גבוהה על מנת לאפשר מחקר. מחקר זה מתאר את ההליך הכירורגי המפורט ליצירת פגיעת איסכמיה-רפרפרפוזיה מוקדית חד-צדדית שאינה דימומית במכרסמים בעלי ערך לטווח מלא.

עורקי חלוף דגם ספיג תיכון שיתוק של שבץ ילודים אצל חולדות P10

המטרה הכוללת של נוהל זה היא לספק טכניקה מאוד לשחזור להערכת ויוו של ערעור מחסום הדם - מוח במודלים עכברוש של שבץ איסכמי.

הערכה In Vivo של מחסום הדם - מוח שיבוש במודל של עכברים של שבץ איסכמי

דגם העכבר של איסכמיה מוחית-פגיעה reperfusion הוקמה כדי לחקור הפתופיזיולוגיה של שבץ. אנו יש מאתרים ומפסיקים את עורק המוח התיכון נכון ולא נכון עורק תרדמני, להחזיר את זרימת הדם לאחר 10 או 40 דקות של איסכמיה.

שתיים, כלי סגר דגם העכבר של איסכמיה מוחית-פגיעה reperfusion

פרוטוקול זה מתאר את המודל של איסכמיה מוחית מוקדית חולפת בעכברים באמצעות חסימה תוך לומינלית של עורק המוח האמצעי. בנוסף, דוגמאות להערכת תוצאות מוצגות באמצעות הדמיית תהודה מגנטית ומבחני התנהגות.

מודל חולף של חסימת עורק מוחי אמצעי חולף

פרוטוקול זה מתאר את תהליך ההכנה לרפרפוזיה של חסימת עורק המוח התיכון דרך עורק התרדמה המשותף.

הכנת מודל שונה עבור זילוח חסימת עורק מוחי אמצעי

פרוטוקול זה מתאר את התהליך לגרימת מודל תרדמת איסכמית מוחית באמצעות שיטת חסימה שונה של ארבעה כלי דם.

מודל תרדמת איסכמית מוחית המושרה על ידי חסימת ארבעה כלי דם שונה

למד שיטה לחסימת כלי דם מוחי קבועה בעכברים באמצעות קרניוטומיה וקשירה זוגית. הטכניקה מבטיחה אזורי אינפארקט עקביים, שרידות גבוהה וירידה של 75% בזרימת הדם לצורך מחקר שבץ.

חסימת כלי דם מוחי בלתי הפיך

גלה סרטונים נוספים