RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/50574-v
Tristan M. Nicholson1,2, Kristen S. Uchtmann1, Conrad D. Valdez1, Ashleigh B. Theberge1,3, Tihomir Miralem1, William A. Ricke1
1Department of Urology,University of Wisconsin-Madison, 2Medical Scientist (MD/PhD) Training Program,University of Rochester School of Medicine & Dentistry, 3Molecular and Environmental Toxicology Center,University of Wisconsin-Madison
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
אנו מתארים את הייצור של הורמון כדורים דחוסים, כמו גם השתלה כירורגית תת עורית לעכברים. אסטרטגיה זו יכולה להיות משולבת עם הצמיחה של xenografts תא והרקמה תחת הקפסולה הכליות של עכברים בעירום athymic להעריך היווצרות סרטן ורגולציה של צמיחת ערמונית שפירה הורמונלי.
הטכניקות המוצגות בסרטון זה שימושיות בניסויים, הערכת ויסות הורמונלי של סרטן וצמיחה שפירה של הערמונית. מכבשי ערעור ראשונים המשמשים לייצור כדורי הורמונים שיאפשרו מתן רציף. לאחר מכן, מכינים פיפטות זכוכית עם קצות מעוגלים לאחר הוצאת הכליה.
קצה הפיפטה משמש לסיוע בהחדרת השתל. לאחר מכן מושתלים כדורי ההורמון הדחוסים תת עורית. בסופו של דבר, מתקבלות תוצאות המראות את ההשפעות של טיפול הורמונלי על צמיחת השתלות רקמות שפירות.
הטכניקות המוצגות בסרטון זה פשוטות לביצוע וניתנות לשחזור. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום, כגון כיצד הורמונים מעורבים בהפיכת תאים שפירים לממאירות, כמו גם כיצד גדילה שפירה של הערמונית מווסתת על ידי הורמונים. ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על טיפולים חדשים פוטנציאליים ואסטרטגיות מניעה להיפרפלזיה תותבת שפירה וסרטן הערמונית.
בדרך כלל, אנשים חדשים בטכניקה זו יתקשו עם ההיבט הטכני של קפסולת הכליה. כדורי Xenograft מוכנים במכסה בטיחות כימי תוך לבישת ציוד מגן מתאים כדי להתחיל לנקות את ציוד ייצור הגלולות ביסודיות עם 70% אתנול כדי למנוע זיהום צולב. לאחר מכן, שקלו את הכמות הרצויה של אבקת ההורמונים, כדי לאפשר כ-5% חומר נוסף כדי להתמודד עם אובדן במהלך הסחיטה.
הורמונים מסוימים דורשים חומר מקשר או חומר מילוי, אשר מעורבב לפני יצרן הגלולות. כאן אסטרדיול משולב עם מילוי כולסטרול וכתוצאה מכך כדור של 25 מיליגרם. לאחר שהכל נשקל ומשולב, העבירו את האבקה לתוך הדסט.
הנח את הצבע מתחת למכבש ודחף את הידית כלפי מטה בחוזקה כדי לדחוס את הגלולה. השתמש בלחץ עקבי כדי לשמור על יחס שטח פנים לנפח קבוע. לאחר מכן, הפוך את מחזיק הצבע ודחף שוב את הידית כלפי מטה כדי לשחרר את הגלולה.
בדוק את תקינות הגלולה וקבע אם המסה הסופית נמצאת בטווח הרצוי. ניתן להכין כדורים לפני הניתוח ולאחסן בהתאם ליציבות ההורמון או התרופה בהם נעשה שימוש תוך לבישת הגנה מתאימה. העבירו את קצה פיפטת הזכוכית דרך הלהבה, מבער בונסן ליצירת קצה מעוגל ומלוטש באש.
שמור על תנועה מתמדת וקלה של הפיפטה כדי למנוע נקודות חמות. לאחר מכן, הניחו את הפיפטה לתוך הלהבה בזווית של כ-60 מעלות ליצירת קצה מעוגל מעוקל. טיפ זה ישמש ליצירת כיס להשתלה מתחת לקפסולת הכליה.
לפני תחילת ההליך הכירורגי, יש לעקר את כל המכשירים הדרושים ולהכין את אזור העבודה. לאחר שהחיה מורדמת כראוי, יש לחטא את אתר הניתוח במריחות חוזרות ונשנות של בטדין ואלכוהול. לאחר מריחת וילונות סטריליים על האזור, מבוצע חתך בקו האמצע הגבי של שניים עד שלושה סנטימטרים.
לאחר מכן, הפרד את הדרמיס הבסיסי מדופן הגוף. הפרד את שני צידי החתך להשתלה דו-צדדית, או רק אחד להשתלה חד צדדית. לאחר ההפרדה, הנח את העכבר במצב רוחבי ואתר את הכליה על ידי צפייה בפרופיל הכליה דרך דופן השריר.
הפעלת לחץ עדין עם האגודל והאצבע המורה עשויה לסייע בהדמיית האיברים הפנימיים באמצעות מספריים עדינים לקשתית העין ולהקפיד להימנע מכלי דם גדולים ועצבי עמוד השדרה. בצע חתך של סנטימטר אחד בדופן הגוף במקביל לעמוד השדרה. הרחב את החתך הזה לסנטימטר וחצי עד שני סנטימטרים על ידי פתיחת המספריים בעדינות לרווחה.
לאחר הנחתם בחתך הראשוני, יש להוציא את הכליה על ידי הפעלת לחץ עדין מחוץ לדופן השריר משני צידי הכליה. לאחר מכן, תחוב את שולי העור מתחת לכליה החיצונית, שתנוח על דופן הגוף. אם קיימים גם מבנים אחרים, ניתן לתחוב אותם בעדינות בזמן שהכליה מוחצנת.
שמור על לחות של קפסולת הכליה על ידי מריחת מי מלח סטריליים. הרם בעדינות את קפסולת הכליה ובצע חתך של שניים עד ארבעה מילימטרים. גודל החתך נקבע על פי גודל השתל, אך יש למזער אותו על מנת לשמור על שלמות הקפסולה.
הכנס את הקצה הסגור המעוגל של הפיפטה שהוכנה קודם לכן מתחת לקפסולה המשיק לפני הכליה. לאחר ההחדרה, פתחו בעדינות כיס קטן לשתלים תוך הקפדה רבה שלא לפגוע בכליה. שתלי רקמת פרנכימה מוכנים מרקמת ערמונית טרייה המתקבלת במהלך כריתה כירורגית.
הרם את הקצה החתוך של קפסולת הכליה והכנס את השתל לכיס. באמצעות קצה הפיפטה, ניתן להניח מספר שתלים מתחת לקפסולת הכליה ולרווח אותם באופן שווה על פני הכליה. בסיום ההשתלה, הרם בעדינות את דפנות החתך בדופן השריר כדי להחזיר את הכליה לחלל הגוף.
ודא שהשתל לא יחליק מתחת לקפסולה. תפר בודד משמש לסגירת דופן השריר לפני שתמשיך בהשתלת כדורים תת עורית. לאחר השלמת ההשתלה, הפרד את הדרמיס הבסיסי מדופן הגוף בכיוון הגולגולת.
הרם בעדינות את ההיבט הגולגולתי של חתך העור כדי ליצור כיס תוך החזקת כדור ההורמונים בעדינות בעזרת מלקחיים משוננים ישרים, הכנס את הכדור לתוך הצוואר. בעזרת מלקחיים עם שיניים, יישר את קצוות העור והחל שניים עד שלושה קליפסים לפצע כירורגי כדי לסגור את החתך. בדוגמה זו, השתלות רקמה ראשוניות ממטופלים עם הגדלה שפירה של הערמונית נוספו עם טסטוסטרון אקסוגני.
במשך חודש אחד, ראשי החצים מציינים את מיקומי הקסנוגרפטים. השתלת קפסולת כליה יכולה לשמש גם להערכת סרטן הורמונלי. כאן, רקומביננטים של תאים המכילים אפיתל ערמונית שפיר ומכניקה אורוגניטלית אינדוקטיבית יוצרים גידולים שפירים בעכברים לא מטופלים.
בדוגמה זו, אותו שתל גדל במארח שקיבל טסטוסטרון תת עורי וכדורי אסטרדיול במשך ארבעה חודשים ובחר בקרצינומה של הערמונית הפולשת לקפסולת הכליה. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לייצר ולהשתיל כדורי הורמונים דחוסים, כמו גם כיצד ליצור פיפטה מזכוכית מלוטשת אש לניתוח ולבצע קסנוגרפט קפסולת כליה. כאשר מנסים הליך זה, חשוב לזכור לטפל בעדינות בקפסולה הכלייתית, לשמור על לחות ולהימנע מפגיעה בפרנכימה הכלייתית לאחר הליך זה.
ניתן לבצע שיטות אחרות כגון היסטולוגיה, אימונוהיסטוכימיה וטכניקות מולקולריות לאיתור R-N-A-D-N-A או חלבונים מעניינים. זה יאפשר הערכה טובה יותר של אופי הגידול השפיר או הממאיר שנצפה. אל תשכח שההורמונים המשמשים בניסויים אלה עלולים להיות טרטוגניים ומסרטנים.
יצרן גלולות הורמון דחוס צריך להתבצע תמיד בקולט אדים לבטיחות כימית. תמיד יש ללבוש ציוד מגן אישי מתאים לכל שלב בהליך המתואר בסרטון זה.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
05:07
Related Videos
5.6K Views
04:12
Related Videos
3.1K Views
08:44
Related Videos
14.3K Views
06:54
Related Videos
11.7K Views
06:48
Related Videos
35.8K Views
08:15
Related Videos
16.4K Views
08:03
Related Videos
14.5K Views
07:01
Related Videos
14.9K Views
07:25
Related Videos
13.7K Views
07:50
Related Videos
8.8K Views