3 בנובמבר 2013
מודל חיתוך רוחב העצב הטיביאלי הוא מודל נסבל היטב, אימות, ושחזור של ניוון שרירים שלד. הפרוטוקול כירורגית המודל מתואר והפגין בC57Black6 עכברים.
המטרה הכוללת של סרטון זה היא להדגים את מודל חתך עצב השוקה של ניוון שרירי השלד בעכברים. זה מושג על ידי בידוד העצב הסיאטי ושלושת הענפים שלו, העצב הטיביאלי, הסיל והעצב הפרונאלי. לאחר הבידוד, עצב השוקה עובר.
לאחר ניתוק עצבים, הפצע נאטם ומצבו של בעל החיים נמצא במעקב צמוד. בסופו של דבר, מתקבלות דגימות המראות ירידה הדרגתית במסת השריר לאחר ניתוק עצבים. מודל חתך עצב השוקה של ניוון שרירי השלד המושרה על ידי ניתוק עצבים הוא נפוץ במודל מתוקף היטב בחולדות, ויש לו הרבה פחות תחלואה מזו הקשורה לחתך עצב סיאטי.
התאמנו את המודל הזה לשימוש בעכברים, אותו נדגים כאן. הדבר מאפשר לחוקר לנצל את קיומם של עכברים מהונדסים גנטית ולחקור את תהליך ניוון השרירים בהיעדר חלבונים החיוניים לוויסות מסת שריר השלד תוך גרימת תחלואה מינימלית בבעל החיים. ראשית, רשום את משקל העכבר לאחר אישור הרדמה נאותה על ידי צביטת הבוהן, זהה את החריץ הסיאטי במישוש וגלח את הירך והישבן לרוחב משם ועד הברך.
לאחר מכן, נקו את האזור עם מריחות חוזרות ונשנות של אלכוהול ופרו יוד. הנח את העכבר על צדו מתחת למיקרוסקופ הפעלה או ניתוח תוך לבישת כפפות סטריליות. זהה את החריץ הסיאטי על ידי מישוש.
חותכים את עור הירך הצדדית מהחריץ הסיאטי ועד הברך. יש לפזר בעדינות את העור. זהה את שריר הזרוע הדו-ראשי, שהוא השריר השטחי השטוח של הירך הצדדית מיד מתחת לעור באמצעות מספריים עדינים.
פצל את שריר הזרוע הדו-ראשי לאורך סיבי השריר והכנס מפסק קפיץ. כדי לחשוף את העצב הסיאטי וענפיו, זהה את העצב הסיאטי מיד מתחת לשריר שריר הזרוע. ניתן לזהות אותו לפי צבעו הלבן המבריק האופייני וקוטרו כ-0.8 מילימטרים.
הוא עובר מהחריץ הסיאטי לברך, מסתעף לתוך העצבים הפרונאליים והסאליים ברמת הפוסה הפופליטאלית. הפרד בעדינות את השוקה מענפי העצב הפרונאלי והסאל בעזרת מלקחיים עדינים במיוחד ומספריים לניתוח. עצב השוקה הוא הענף הגדול ביותר והוא בדרך כלל מרכזי.
טיפול עדין בעצב הסיאטי ובענפיו חיוני להצלחת הליך זה. הקפד שענפי העצב של הסאל והפרינאום לא ייפגעו או יימתחו. אם ענפים אלה ייפגעו או יימתחו, הדבר יפגע גם במטרותיהם.
החזקת העצב רק על השכבה האדוונטיאלית החיצונית עם המלקחיים העדינים במיוחד ושמירה על רפיון העצבים תמנע ריסוק עצבים ופגיעה במתיחה לניתוק עצבים זמני עם חידוש מלא צפוי תוך שבועיים עד ארבעה שבועות, מועך את עצב השוק עם מלקחיים עדינים במיוחד למשך 15 שניות לניתוק עצבים מלא ומתמשך. חותכים את עצב השוקה בעזרת המספריים המנתחים את המיקרוס בצורה דיסטלית ככל האפשר. הימנע בזהירות מכלי הדם הפופליטאליים אם נדרש ניתוק עצבים מלא.
לתפור את קצה העצב הטיביאלי המועבר אל פני השטח הקדמיים של שריר הזרוע הדו-ראשי עם ניילון 10 T ולהעריך מחדש את שריר הזרוע עם חמישה T Vicryl כדי למנוע שחזור חריג של שרירי הגסטרו והסוליה. לאחר השלמת ניתוק העצבים, סגור את העור עם תפר ויקריל. כשהוא מוכן, כבה את חומר ההרדמה בשאיפה, אך שמור על זרימת החמצן.
לאחר מתן משכך כאבים בנפרד, הכניסו את העכבר לכלוב חם ונקי ללא מצעים. שמור את העכבר תחת השגחה ישירה עד לתנועה. לאחר התאוששות מלאה, העבר את העכבר לכלוב תחתון נקי ומוצק עם מצעים רכים בשפע.
בדוק את הגפה הניתוחית ואת כף הרגל מדי יום לאיתור התפתחות כיבים בעקב דקוביטוס או עדות לבעיות קלות בלעיסה ניתן לטפל באמצעות אנטיביוטיקה מקומית או חומרי חיטוי, כגון אודין. מדדי קצה הדורשים המתת חסד של בעל החיים הם ירידה במשקל, עדות לטיפול עצמי לקוי ויציבה כפופה. בנוסף, יש להקריב גם בעלי חיים עם הפרעה בפצעים או כיבים שהם לא מרפאים עם שבוע עד שבועיים של טיפול בפצעים.
בנוסף, כל בעלי החיים הסובלים מכאבים מיותרים בנקודת הזמן שלאחר הניתוח, הרקמות הרצויות נאספות לניתוח. לאחר המתת חסד, יש לגלח את ההיבט המדיאלי של רגלי הבקרה הניתוחיות והנגדיות ולנקות עם אלכוהול בעבודה תחת מיקרוסקופ מנתח, לחתוך את עור השוק המדיאלי עם אזמל מהקרסול לברך והיקפי סביב הקרסול בגפה הניתוחית. לאחר מכן, משוך בעדינות את העור מהשריר וקרוב לכיוון הירך.
כדי לחשוף את כל שרירי הרגל, זהו את שריר הגסטרו, שהוא שריר השוק העובר מהברך לקרסול בהיבט האחורי של הרגל. לאחר מכן, אתר את ההחדרה הדיסטלית של שריר הזרוע הדו-ראשי הפרוקסימלי לשריר הגסטרו בהיבט המדיאלי של הברך. בהחדרתו הדיסטלית, שריר הירך הדו-ראשי נראה דק וסרטי ומכסה את החלק הפרוקסימלי ביותר של הגסטרו באמצעות מספריים ודיסקציה קהה.
הפרד בעדינות את ההחדרה הדיסטלית של שריר הירך הדו-ראשי משריר הגסטרו. הוסף את החדרתו הדיסטלית לתוך הקלקנאוס, שריר הגסטרוס מתחדד לגיד אכילס. זהה את גיד אכילס שנראה לבן וסיני.
החזק את גיד אכילס בעזרת מלקחיים. יש להקפיד לא להחזיק או לרסק את שריר הקיבה ולהפריד את גיד אכילס מהחדרת הקלקנאוס. בעזרת מספריים שעדיין מחזיקים את הגיד הרם בעדינות את שריר הגסטרו האדום החיוור מהסוליה האדומה העמוקה יותר מההחדרה הדיסטלית לכיוון מקורו בברך, תוך שימוש במתיחה עדינה מאוד.
כדי להקל על התהליך, נתח את הגסטרו מהרגל על ידי חלוקת מקור הגסטרו מקונדיל הירך המדיאלי והרוחבי. בעזרת מספריים. היזהר לא לרסק את השריר.
הסוליה תיראה כעת בבירור מיד לעיני הגסטרוס. הרם את הסו מהחדרתו על גיד אכילס למקורו בשוק האחורי. לאחר ההסרה, שקלו את השרירים בנפרד במשקל מדויק.
לאחר מכן, פצל את השרירים אנכית חצי להקפאת הצמד וחנקן נוזלי וחצי להיסטולוגיה. לבסוף, חזור על הליכים אלה בצד הלא מדורג של הבקרה כדי לקצור את שרירי הגסטרו והסוליה. שרירי גסטרו נאספו מגפיים אחוריות בקרה מנותקת עצבים וקונטרלטרלית לאחר שבוע, שבועיים או ארבעה שבועות ובאו לידי ביטוי כיחס.
ניתוק עצבים גרם לאובדן מתקדם של מסת שריר לאורך זמן. שטח החתך של סיבי מיו נמדד לאחר צביעה חיסונית כפי שניתן לראות כאן. סיבים מסוג שני סיבים מסוג עווית מהירה מכתימים סיבים חומים ועוויתות איטיות מסוג אחד, כתם לבן סוג שני במהירות.
סיבי Twitch הדגימו ירידה מתקדמת בשטח החתך בשריר העצבים. מעל ארבעה שבועות לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להיות מסוגל לבצע את חתך עצב השוק בעכברים. זה מספק מודל ניתן לשחזור, חזק ומאומת היטב של ניוון שרירי השלד הנגרמת על ידי ניתוק עצבים.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מודל של חיתוך עצב השוקה (tibial nerve transection) הוא שיטה מתוקפת וניתנת לשחזור לחקר ניוון של שריר השלד בעכברים. מודל זה כולל בידוד כירורגי וחיתוך של עצב השוקה, דבר המאפשר מעקב אחר שינויים במסת השריר לאחר דנרבציה (denervation).
מודל חיתוך עצב השוקה (tibial nerve) מספק מערכת הניתנת לשחזור עם תחלואה נמוכה לחקר אטרופיה של שריר השלד המושרית על ידי דנרובציה בעכברים, ובכך מאפשר חקירה מכניסטית של מסלולי הבזבזות השרירית. מודל זה תומך בתיקוף מטרות ובצמצום סיכונים פרה-קליני על ידי מתן אפשרות להערכת האטרופיה במודלים מהונדסים גנטית, ובכך מקל על הערכת התערבויות טיפוליות המשפיעות על ויסות מסת השריר. התאימות שלו למדדים היסטומורפומטריים ומולקולריים מגבירה את הביטחון החזוי בתוכניות לגילוי בתחום הנוירו-מוסקולרי.
המודל משתלב ברצף הגילוי החל מאימות המטרה ועד להערכה פרה-קלינית, ותומך בבדיקת השערות ובצמצום סיכונים מכניסטיים במחקר של ניוון שרירים.