אינדוקציה תרופתי של עוריות מלנין והגנה מפני כוויות שמש בדגם מואנש מאוס

המטרה הכוללת של הניסוי הבא היא למדוד רגישות ל-UV על ידי קביעת מינון האריתמה המינימלי בעכברי עור בהירים שטופלו מראש בארבעה עורות. זה מושג על ידי הכנת העור הגבי של העכברים להקרנה על ידי גזירה ואבלציה. לאחר מכן, טיפולים מקומיים של פורסקולין מוחלים על עור הגב.

לאחר מכן העכברים נחשפים למינונים שונים של קרינת UV כדי לקבוע את ההשפעות של ארבעה מלון מתווך על דלקת הנגרמת על ידי UV. מתקבלות תוצאות המראות כי שימוש מקומי בפורליין מגביר את פיגמנטציית העור וכי בעלי חיים עם עלי משופר תרופתית עמידים לקרינת UV כפי שנקבע על ידי MED. אלו הם הוכחות למחקרי קונספט המראים כי ניתן לגרום לשיזוף פרמקולוגי אצל אדם שאינו מסוגל להשתזף בגלל פגם בגן מלנוציט חשוב מאוד הנקרא מלנוקורטין קולטן אחד או MC אחד R באוכלוסיות אנושיות יש אובדן תפקוד של mc one R בקורלציה עם רגישות UV, נטייה לכוויות שמש, וחוסר יכולת להשתזף ובהמשך החיים עד לסיכון של פי ארבעה למלנומה.

בחרנו בארבעה סקאלינים כתרופה למחקרים אלה מכיוון שהיא מסוגלת לעקוף מסלול איתות פגום של קולטן מלנוקורטין ולהערים על המלנוציטים לחשוב שיש להם מסלול איתות mc one R טוב, ולכן הם מייצרים הרבה מלנין, שמצטבר בעור ומגן על בעלי החיים מפני קרינת UV. למרות שאנו יודעים ששיטה זו מספקת תובנה על העור שיכול וקודר. זה עשוי להיות חשוב גם למניעת סרטן.

מכיוון שאנו יודעים שקרינת UV היא המסרטן העיקרי לרוב הגדול של סרטן העור ושיפור היישום של העור מגן מפני פגיעות UV אחת ארבע מבצעת זריקות תוך צפקיות. הקפידו לשאוב לאחר הנחת המחט ולפני הזרקת התכולה כדי לוודא שהמחט לא חדרה לכלי דם או למעיים של שלפוחית השתן יש לתת זריקות IP בצד ימין כדי למנוע את העונה. לאחר הכנת תמצית הפורלין והרדמה קצרה של העכבר על ידי איזוף פלואור.

שאיפה, על פי פרוטוקול הטקסט, נותנת הרדמה נוספת לבעל החיים עם הזרקת IP של קטמין וקסילזין. בצעו צביטה בבוהן כדי לאמת טשטוש. השתמש במספריים חשמליים המצוידים בראש הכנה כירורגי של 0.25 מילימטר כדי לגזור את פרוות הגב.

השתמש בקרם אפילציה כדי להסיר את הזיפים. לאחר מכן, כדי למנוע צריבה או נזק אחר לעור, השתמש מיד ברפידות גזה ספוגות במים כדי לנגב בעדינות את עור הגב עד להסרת כל הקרם. השתמש במגבות נייר רכות כדי לייבש את החיה לפני שמכניסים אותה לכלוב נקי על כרית חימום כדי להתאושש.

באופן כללי, יש להרדים עכברים לזמן קצר כדי להקל על מתן מקומי של פורסקולין או תמיסות בקרה באמצעות אינהלציה של פלואור מתחת למכסה אדים. התחל עם מגבת נייר רוויה איזוף פלואור בצנצנת זכוכית שקופה מוארת מוארת איזו. לאחר הצמדת מסנן חדיר אוויר מניילון מותאם לצורה, העכבר הרדים את העכבר על ידי הנחתו על גבי המסנן מספיק זמן כדי לדכא תנועות שרירים רצוניות עם החיה המרדימה על משטח ספסל סופג נקי.

לאחר ביצוע צביטה בבוהן העבירו 400 מיקרוליטר של תמצית פורלין גולמית על גב החיה על ידי טפטוף על העור. לאחר מכן השתמש בצד הקצה כדי למרוח את התמצית על כל פני העור הגבי החשוף. החזירו את העכבר לכלוב שלו והתבוננו בו בזהירות עד שהוא מתאושש מההרדמה כדי למנוע חוסר פיגמנט.

השפעות מחזוריות של A MP מניסויי רגישות UV מבלבלים. יש להפסיק את כל הטיפולים המקומיים יומיים לפני החשיפה לקרינת UV כדי לבצע צבעוניות רפלקטיבית. לאחר הרדמה קצרה של העכבר בשאיפת פלואור איזו.

כייל מד צבע על ידי הנחת הראש הנייד על המשטח הלבן הסטנדרטי המצורף למכשיר. הנח את ראש המדידה הנייד בסמוך לעור הגב של החיה, וודא שהצמצם העגול של סנטימטר מרובע אחד נלחץ לחלוטין על העור. בצע לפחות שלוש מדידות נפרדות באזורים שונים של עור הגב.

לחשב את ציון ה-L הממוצע, פלוס או מינוס סטיית תקן לבעל חיים ולקבוצת טיפול. כדי לקבוע מינון אריתמטי מינימלי או MED, כל בעל חיים ייחשף למגוון מינוני UV. התחל בהכנת חתיכת סרט חוסם UV באמצעות אגרוף חורים כבד עם חיתוך עגול של סנטימטר מרובע אחד כדי לנקב חורים בסרט מעל כל חור.

בקלטת. מרחו פיסת סרט קטנה אך ניתנת להסרה בקלות הניתנת להסרה. לחשיפה ל-UV, הנח את הסרט על המשטח הגבי של העכבר המורדם

אם עיני החיה פקוחות, יש למרוח דמעות מלאכותיות כדי למנוע ייבוש פציעה וחשיפה לקרינת UV. הפעל את מקור ה-UV המורכב משתי מנורות UVB עם הספק שיא של 313 ננומטר וטווח של 280 עד 370 ננומטר. אפשר לכבש להתאזן לתפוקת UV קבועה לפני השימוש בפוטומטר UV עם חיישן UVB כדי לאמת את הפלט על סמך קצב העברת ה-UV כפי שנמדד על ידי פוטומטר ה-UV, לחשב את זמן החשיפה ל-UV עבור כל מינון רצוי.

לדוגמה, תפוקת ה-UVB של המנורות שלך נמדדת ב-2.4 מילי-וואט לסנטימטר מרובע. לכן, כדי לתת חמישה קילו-ג'אול למטר מרובע, העור יצטרך להיחשף ל-208 שניות של קרינת UVB כפי שחושב כאן. לאחר מכן, הניחו את פני הגחון של בעל חיים מורדם כלפי מטה כדי להבטיח חשיפה אחידה ל-UV כדי לתת את מינון הקרינה הנבחר ברצף.

הסר את פיסות הסרט הקטנות המכסות את החורים בזמן המתאים. לדוגמה, אם 40 קילו-ג'אול למ"ר הוא המינון הגדול ביותר, העכבר יהיה מתחת למנורה במשך 27 דקות ו-47 שניות, והחור למינון זה ייחשף מההתחלה. עם זאת, במצב של חמישה קילו-ג'אול למטר מרובע, הסרט יוסר לאחר 208 שניות של חשיפה.

הזמן שנותר לאחר החשיפה ל-UV, הסר בזהירות את הסרט והנח את בעלי החיים במקום חם ושקט כדי להתאושש מההרדמה לפני החזרתם לכלובים שלהם. המינון האריתמטי המינימלי או ערך ה-MED מתאים למינון המינימלי של UV הגורם לדלקת כפי שהוגדר על ידי אריתמה ו/או בצקת של כל מעגל העור החשוף. עקוב אחר העכבר במשך 24 עד 48 שעות כדי לחפש אזורים דיסקרטיים של אריתמה או בצקת באזורים החשופים ל-UV.

לפעמים שאריות זיפים ראשונים מבלבלות את הפרשנות של בדיקת ה-MED על ידי מיסוך אדמומיות או בצקת בעור, הרטבת העור עם 70% אתנול הופכת את העור להרבה יותר ניתן לפרשנות. תעד כל ממצא עור בצילום ולאחר מכן החזיר את העכברים למתקן החיות. בניסויים אלה, שישה עכברים שחורים C 56 נוצרו על רקע אנודי או אנודי המשלב את הטרנסגן של גורם תאי הגזע K 14, המאפשר לעכברים לשמור על מלנוציטים באפידרמיס וכתוצאה מכך, להפקיד מלנין.

באפידרמיס המוצג כאן, קבוצות של עכברים להארכת עור בהיר טופלו במשך חמישה ימים באופן מקומי עם מינון פעמיים ביום של כל אחד מכלי הרכב או 40% תמצית שורש קולוס קולי גולמי. ההשפעות של טיפולים מקומיים על פיגמנטציה אפידרמיסית נקבעו הן על ידי בדיקה ויזואלית והן על ידי צבע רפלקטיבי. דימויים. יישום תמצית השורש היה קשור להתכהות אפידרמיס חזקה ברקע הטרנסגני K 14 SCF, אך לא בבעלי חיים שאינם טרנסגניים בהתאמה גנטית, מה שמרמז על כך שמלנוציטים אפידרמיסיים בין-זקיקים חייבים להיות נוכחים על מנת שהמלנין המושרה פרמקולוגית יושקע.

באפידרמיס, למרות שתמצית השורש צבועה עמוק בגלל נוכחותם של צמחים פיטוכימיקלים מלבד ארבעה גלין, התכהות העור לא יכולה לנבוע אך ורק מהשפעת גסיסה מהתרופה. מכיוון שבעלי חיים שאינם מהונדסים לא מצליחים להפגין התכהות עור עם תמצית השורש כפי שהודגם כאן במריחה מקומית פעמיים ביום, השפעות המלנין של פורסקולין נצפו תוך יומיים בלבד. למרות שהכהות מקסימלית ניכרה לאחר מספר ימים נוספים המוצגת באיור זה על ידי צביעת גופן ומלנין של חלקי עור הגב.

דרגת המלן היא בעלי חיים תלויי מינון שטופלו בארבעה עור פעם ביום במשך 15 יום או פעמיים ביום במשך חמישה ימים חווים כמויות דומות של התכהות העור. בנוסף, לא היו השפעות רעילות ברורות מארבע חשיפות לעור באף אחת מקבוצות הטיפול. לפיכך, הגענו למסקנה כי הטיפול המואץ בן חמישה ימים קידם טיפול בטוח של עור הגב ביעילות כמו הטיפול הסטנדרטי פעם ביום.

נתון זה מדגים כי כפי שנמדד על ידי בדיקות MED, מיין אפידרמיס המושרה על ידי פורלין הביא להגנת UV עמוקה, בעוד שה-MED הממוצע עבור עכברי הרחבת K 14 SCF שטופלו פעמיים ביום במשך חמישה ימים עם רכב היה 5.0 פלוס או מינוס 0.0 קילו-ג'אול למטר רבוע ממוצע MED עבור קבוצות שטופלו ב-4 גלין מקומי היה גדול מ-30.0 פלוס או מינוס 0.0 קילו-ג'אול למטר מרובע. למעשה, מינון של 30.0 קילו-ג'אול למטר רבוע לא הספיק ליצירת אריתמה. בניסוי זה תוך שימוש במינון גלן כוח סטנדרטי, ה-MED הממוצע עבור עכברי הרחבה K 14 SCF שטופלו היה 50.0 פלוס או מינוס 7.1 קילו-ג'אול למטר מרובע.

חשוב לציין, הטיפול המקדים ב-4 Kline לא השפיע על ה-MED של בעלי חיים שאינם מסוגלים למלון, בין אם בגלל היעדר מלנוציטים אפידרמיסיים בתיווך K 14 SCF, או בגלל מחסור בטירוזינאז. מכיוון שהשימוש ב-4 Kline הופסק יומיים לפני החשיפה ל-UV ולא המשיך לאחר החשיפה ל-UV, אנו מסיקים כי השפעות CAMP לא פיגמנטריות לא שיחקו תפקיד בתוצאות MED. במקום זאת, הנתונים מצביעים על כך שמיין האפידרמיס היה המנגנון שבאמצעותו פורליין גרם להגנת UV במודל זה.

לאחר שליטה, טכניקה זו מאפשרת הערכה קלה וניתנת לשחזור של תגובת פיגמנטציה של העור ורגישות אולטרה סגולה. במודל של בעלי חיים יישום הפורלנד לוקח רק דקות ביום ועיקר זמן הניסוי הוא באמת עם קרינת UV ובדיקות MED. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור שהעור חוזר בהדרגה לעור הבהיר הבסיסי שלו פרמקולוגי.

השראת מלנין דומה מאוד לתגובת נין בכך שהעור יישאר כהה כל עוד הוא מגורה, אבל אז השיזוף עושה את דרכו החוצה מהעור במהלך השבועות הבאים כאשר הגירוי מוסר.