Name: משך הארוחה כמדד לתגובות הנוצית האורופציאליות במכרסמים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 5 s
Description: למדו שיטה לא פולשנית להערכת כאב אורופציאלי במכרסמים באמצעות מדידת משך הארוחה. השיטה מאפשרת מעקב רציף בהתנהגות האכילה ללא כבלים או אימון, ומספקת מדד כמותי אמין לכאב לסת ושיניים בחולדות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

במודל זה החולדות או העכברים קיבלו מזון ומים מודעה libitum. טקסס A&M אוניברסיטת ביילור המכללה לרפואת שיניים מוסדית טיפול בבעלי חיים ושימוש הוועדה אישרה את כל הפרוטוקולים הניסיוניים. מתחת להגדרות ספציפיות מוצגים בכתב נטוי מנוצלים במיוחד עבור מודל דלקת פרקים TMJ חולדה. עכברים יכולים לשמש גם במודל זה וכאבי שיניים אלטרנטיביים ומודלים של בעלי חיים של כאב אורופגניים יכולים לשמש גם42,43.
1. הגדרות תוכנה
<ol><li>טען את תוכנת Animal Monitor עבור יחידות ההזנה למחשב.</li>
	<li>התוכנה Animal Monitor נפתחת כעת על ידי לחיצה על הסמל ותחת בחירת תפריט הקבצים בחר באפשרות "תצורה" למשוך למטה.</li>
	<li>בחלון "תצורת צג בעלי חיים" בטל את סימון התיבה שכותרתה "קלט המועבר של גלולה"(איור 1A). הערה: תיבה זו מסומנת בדרך כלל במפעל כברירת מחדל. בטלו את הבחירה באפשרות זו. לאחר החוקר מבטל את הבחירה באפשרות זו התוצאות נרשמות על ידי הסרת גלולה מן השוקת ולא כאשר גלולה הוא להיות מחלק. הערה: כאשר התיבה "מתן שמות אוטומטיים לקבצים" מסומנת התוכנה תנקוב באופן אוטומטי בשמות הקבצים (איור 1A). תיבה זו מסומנת בדרך כלל במפעל כברירת מחדל.</li>
	<li>הגדר את נוריות שעון העצר כך שידלקו בשעה 06:00 (6:00 בבוקר) ויכבו בשעה 20:00 (20:00). הערה: החומרה עבור יחידות ההזנה שונתה כך שהנוריות בתוך התיבות אינן נשלטות על-ידי התוכנה אלא מחווטות במקום זאת לשעון העצר המבודד של 24 שעות. לפיכך, "אור הבית" המצוין בתוכנת התצורה לא היה פונקציונלי בדוגמאות אלה.</li>
	<li>בחרו בתפריט 'עריכה נפתחת' ובחרו 'התנסה'. מופיע חלון עם הכותרת "תיבה 01 -" (איור 1B).</li>
	<li>הזן את שם הקובץ שתחתיו יישמרו הנתונים בחלון זה. הערה: אם לא הוזן שם קובץ, קבצי הנתונים ייקראו באופן אוטומטי על-ידי התוכנה. ניתן להוסיף את פרטי הניסוי בחלון זה ושמור אותם עם קבצי הנתונים. המידע על החלון יכול גם להישמר ולהשתמש בו לניסויים הבאים.</li>
	<li>הזן מספר גדול מהזמן הכולל של הניסוי בתיבת הכניסה שכותרתה "אורך ניסוי (ימים):". הערה: פעולה זו תבטיח כי התוכנה שומרת את הנתונים עד להשלמת הניסוי, טעות יכולה להיות בהגדרת ערך זה קצר מדי, אשר יעצור את התוכנה מלהקליט את הנתונים למרות בעלי חיים עדיין במודולים האכלה.</li>
	<li>הזן 24 בתיבת הכניסה שכותרתה "מספר שעות ביום". הערה: ניתן לשנות את האורך למפרטי הנסיין.</li>
	<li>הזן 10 בתיבה שכותרתה "קריטריוני סיום תקופת ארוחה (מינימום):" הערה: עבור חולדות ארוחה הוגדרה באמצעות 10 דקות סוף קריטריון הארוחה מבוסס על מחקריםקודמים 48 (כלומר ארוחה היה סוגר לפני ואחרי על ידי תקופה של 10 דקות של כדורי לא נלקח) ואת גודל הארוחה המינימלי נקבע על שלושה כדורי לארוחה בחבילת תוכנה זו.</li>
	<li>הזן 45 בתיבה שכותרתה "גודל גלולה (מ"ג)". אם אדם רוצה להשתמש עכברים קלט 20 בתוך חלון זה.</li>
	<li>לחולדות להוסיף 45 כדורי צ'או מכרסמים מ"ג הופר מתקן מאכיל. הערה: עבור עכברים להוסיף 20 כדורי צ'או מכרסמים מ"ג לצ'או הופר.</li>
	<li>במקטע "שלב" בחלון הניסוי הזן את המונח יום בשדה "שם" ובסוג השדה "# שעות" 24 (איור 1B). הערה: מתחת לסעיף "שלב" ישנם שני שדות פתוחים גדולים. השדה הפתוח הגדול הראשון יאוכלס על-ידי הטקסט שהוזן בשדות הקודמים "שלב" ו"שם".</li>
	<li>השדה הפתוח הגדול הבא יהיה הכותרת "שלב יום" הזן בשדה שכותרתו "שם" המילה אור והזן בשדה שכותרתו "אחוז" המספר 60. הערה: טקסט שהוזן יאכלס את השדה הגדול שלהלן.</li>
	<li>לאחר מכן הזן בשדה שכותרתו "שם" המילה כהה והזן בשדה שכותרתו "אחוז" המספר 40. הערה: עם ערכים אלה 60% מהיום ייוחסו לשלב האור ו 40% ייוחסו לשלב החשוך. כאשר התוכנה מחשבת את דפוסי הארוחות, ייעשה שימוש במידע זה. הגדרות אלה אופייניות לרכיבה על אופניים של בעלי חיים נקביים המוחזקים במחזור אור /כהה 14:10.</li>
	<li>בחר בלחצן "הגדר את כל התיבות כך". שמור מידע זה ולאחר מכן לחץ על אישור.</li>
	<li>המסך "תיבות התחלה" מופיע, בחר את המאכילים כדי להפעיל ולפגוע ב-OK (איור 1C).</li>
	<li>לאחר מכן יופיעו חלונות זמן ריצה של צג בעלי החיים עם נתוני תבנית הארוחה (איור 1D). הערה: לפקח ולהקליט את "# של כדורי מחלק" מחלון זה כדי לקבוע את הבריאות הנוכחית של החולדה. חולדה זכר בריא במשקל סביב 300 גרם בדרך כלל לאכול בין 300-800 45 כדורי מ ג ביום.</li>
	<li>קבצים נוצרים מדי יום ונשמרים באופן אוטומטי הכוללים . הרחבת CSV. פתח קבצים אלה כדי לאחזר נתוני תבנית ארוחה כגון צריכת מזון, מספר ארוחה, משך הארוחה, גודל הארוחה או מרווח ביניים. ניתן לחשב את המרווחים עבור דפוסי ארוחות אלה במשך כל היום או עבור שלב של היום כגון שלב החושך והאור. כפי שצוין לעיל, ההגדרות הן עבור מחזור אור / כהה 14:10. הנתונים הגולמיים של מתי כל גלולה הוסרה מהשוקת נרשמים גם כגולמי . קובץ CSV. הערה: בגירסאות ישנות יותר של התוכנה גודל ארוחה מינימלי של 3 כדורי אינו משמש בחישובים ליצירת . קובץ CSV.  יתר על כן, כדי לקבל את משך הארוחה הממוצע באמצעות התוכנה הישנה עליך לחסר 10 דקות מהערכים בעמודה משך הארוחה הממוצע של . קובץ CSV. כאשר התוכנה פועלת המפעיל יכול לבחור באופן ידני את אפשרות התפריט הנפתח של הקובץ ולבחור מדי יום "שמור נתונים גולמיים". פעולה זו תשמור את הנתונים הגולמיים לפרק זמן של 24 שעות ולא לכל הניסוי. נתונים גולמיים אלה יכולים להיות מעובדים על ידי תוכנה חלופית על פי שיקול דעתו של המשתמש. הערה: בתוצאות הראו שהשתמשנו בתוכנה חלופית כדי לכלול גודל ארוחה מינימלי של 3 כדורי.</li>
</ol>2. מבחני משך הארוחה
<ol><li>הנח חולדות בודדות בתאים מוחלשים קול מצוידים מאכילי גלולה המופעלים על ידי מחשב photobeam. הערה: ביחידות האכלה אלה ישנם בקבוקי מים מדורגים ומחבתות פסולת שבהם מונח דף נייר סופג עבה. במתקן ההזנה הופר 45 כדורי צ'או מכרסמים מ"ג ניתן להוסיף לחולדות או 20 כדורי צ'או מכרסמים מ"ג ניתן להוסיף לעכברים. כדורי צ'או מחולקים לתוך שוקת האכלה בצורת V ובתחתית שוקת זו הוא photobeam. גלולה מחולקת לתוך השוקת תזוהה על ידי שבירת photobeam זה. ברגע חולדה מסיר גלולה זו מן השוקת מאכיל את photobeam משוחזר וזה מאותת למחשב לרדת גלולה אחרת. שחזור של photobeam גם מפעיל את המחשב כדי להקליט את התאריך והשעה ושומר על ספירה ריצה של כדורי מחלק. ספירה זו של כדורי מנותח לאחר מכן כדי לקבוע את צריכת המזון, מספר הארוחה, משך הארוחה, גודל הארוחה, או מרווח intermeal במהלך כל חלק של היום באמצעות Med Assoc. Inc. תוכנה. שוב גלם. קובץ נתונים CSV ניתן לנתח על ידי תוכנה חיצונית39,40,49-51.</li>
	<li>רשום את המספר הכולל של כדורי אכלו, את כמות המים הנצרכת ואת המשקל של בעלי החיים כדי להבחין בבריאות הכללית של החולדות במהלך הניסוי.</li>
	<li>שוטפים בקבוקי מים וממלאים במים מתוקים מדי יום ומוסיפים אוכל להופר המאכיל בעת הצורך.</li>
	<li>זרקו מחבת פסולת ואת נייר הספיגה העבה מתחת לכלוב מדי יום ופוצצו את האבק מהזזת חלק מהמאכיל מדי יום באמצעות אוויר בלחץ גבוה. הערה: ציוד הגנה אישי(למשל שמלות, כפפות, מסכות ומסכות) נדרש.</li>
	<li>יש להסיר רצפות, מחבתות פסולת ובקבוקי מים לאחר השלמת הניסוי ולשטוף רכיבים אלה. כמו כן, להסיר את האלקטרוניקה האכלה מן שטיפת caging ביד או במדיח כלים.</li>
</ol>3. אינדוקציה של דלקת פרקים TMJ
<ol><li>מניחים בעלי חיים במאכילים לפחות 4 ימים לפני הניסוי. הערה: נתונים אלה ידווחו כיומיים קדם-יומיים כדי להשיג התנהגות הזנה בסיסית. לאחר מכן בעלי החיים מוסרים מהמאכיל לטיפול. סוג אחד של טיפול היה לגרום TMJ דלקת פרקים. עבור מודל זה חולדות מוזרקים עם אדג'ובנט של פרוינד (CFA) בשעה 08:00(כלומר תחילת שלב האור) לאחר החולדות מורדמים עם isoflurane (5% זרימה).</li>
	<li>להזריק 250 מ ג של CFA ב 50 L דו צדדי לתוך המרחב periarticular של כל TMJ. הערה: בדוגמה (איור 2) 250 מ"ג של CFA ב 50 L הוזרק לתוך כל TMJ, אבל מינונים נמוכים כמו 10 מ"ג בכמויות קטנות כמו 15 μl יעילים על פני תקופות קצרות יותר של זמן52.</li>
	<li>להזריק חולדות שליטה TMJ עם 50 L של 0.9% מלוחים. הערה: כל בעלי החיים היו ניידים בתוך 5 דקות או פחות לאחר אינדוקציה של הרדמה. במקרה כי מנה קטנה יותר של CFA ניתנת בנפח פחות חולדות שליטה יקבלו את אותו נפח של מלוחים.</li>
</ol>

אין מה לחשוף.

חולי TMJ עם כאב orofacial דו"ח כאב מוגבר עם זמן לעיסה מוגבר, כך, מחזור הלעיסה מאריך ככל שהאדם כבר לועס45,53-56. הבדיקה ההתנהגותית שלנו מאפשרת בדיקות דומות בחולדות ועכברים בעת מדידת משך הארוחה39. מחקר שפורסם לאחרונה הציע כי בדיקות חוטים פון פריי היה רגישות רבה יותר מאשר מדידות משך הארוחה, מראה שינוי משמעותי לתקופה ארוכה יותר, אבל פון פריי בדיקות חוטים יכול להיות מרכיב תגובת רפלקס ואילו מדידות משך הארוחה דורשים עיבוד לפי אזורים של מערכת העצבים המרכזית. לכן, רגישות עשויה להיות גדולה יותר עם בדיקות חוט ...

מודלים של בעלי חיים שימשו לחקר כאב ו nociception הקשורים נזק orofacial ודלקת1,2, אבל חוסר מודלים בעלי חיים מתאימים תוצאות הבנה חלקית של המנגנונים. למרות המודלים הנוכחיים לעזור לנו להבין מנגנונים שונים המעורבים בכאב אורופגאלי חריף וכרוני, יש חוזקות וחולשות אלה מודלים בעלי חיים.
מודלים רבים מודדים תגובות התנהגותיות nociceptive עבור משכי זמן קצרים. טיפוח פנים היא תגובה התנהגותית ידועה בעקבות התכווצות של עצביהפנים 3. מחקרים אחרים מדדו שפשוף פנים עם חזית ipsilateral או hindpaw, כמו גם, נרתע של הראש לאחר מתן זריקות פורמלין לתוך מפרק temporomandibular (TMJ) או שפה4-7. איחורים נסיגת ראש הוא מודל נוסף למדידת התנהגות nociceptive שבו מד משכך כאבים תנועה זנב שונה משמש כדי לכמת את התגובה nociceptive(כלומר נסיגת ראש) לאחר החלת חום על כרית vibrissae מגולח של חולדה8. פעילות שרירים דיגסטרית ומסה נרשמה גם כמתאם של כאב לאחר זריקות גלוטמט לתוך TMJ9. מחקר אחר מדד שינויים בפרמטרים שינה כדי להעריך תגובות nociceptive בחולדות זכר ונקבה עם TMJ מודלק, פרמטרים אלה כללו השהיה בשינה, תנועה מהירה העין (REM), אחוז השינה שאינם REM, ואחוז השינה REM10. רוב המודלים החייתיים המודדים תגובות התנהגותיות nociceptive לנצל מסגרת זמן קצרה, כלומר דקות עד שעות ביום11-14. בנוסף, רוב המודלים של בעלי חיים בדיקות מתרחשת במהלך שלב האור בחיה לילית, כמו חולדה, זה יכול לגרום ללחץ אשר יכול לבלבל את התוצאות nociceptive15-18. מבחנים לעיל למדוד תגובה nociceptive בתנאים שונים orofacial אבל למשך זמן קצר ולכן ניתן להשתמש רק כדי ללמוד הפרעות חריפות. מבחנים חלופיים השתמשו בהבעת פנים כמדד של nociception של משך מתון, אבל מתודולוגיה זו יכולה להיות סובייקטיבית19.
כדי להעריך nociception orofacial מתמשך או כרוני חלקם השתמשו ביישום של חוט פון פריי על פני השטח של העור כדי להעריך רגישות מכנית של בעלי חיים נתון התכווצות עצבים או דלקת TMJ3,20. Liverman et al. 2009 נמדדו תגובות נסיגה באמצעות monofilaments מדורגים בעקבות זריקות CFA לתוך שריר המעסה של חולדות 21,22. Yamazaki et al. 2008 הזריק TMJ עם CFA ולאחר מכן מעל 14 ימים כימת התנהגויות nociceptive מכני או חום או גירוי קר להחיל על אזור TMJ. למרבה הצער, מבחנים התנהגותיים nociceptive אלה כרוכים איפוק בעלי חיים, אשר מייצרים הורמוני לחץ, למידה או התנהגויות חלופיות שעלולות להפריע לתוצאות הנמדדות.
מודלים למדידת nociception בשיניים לנצל את רפלקס פתיחת הלסת אבל שיטה זו יכולה להיות לאאמינה 23 או imprecise24. פעילות אלקטרומיוגרפית שימשה למדידת nociception השן25, אבל שיטה זו בדרך כלל דורשת כי החיה להיות מחוסר הכרה, אם כי במחקר אחד nociception השן נחקרה בחולדות נע בחופשיות26. בשנת 2008, חאן חקר את הקשר בין nociception שיניים ותפקוד מעסה באמצעות מד זן רגיש27 אבל מודל זה משך לנשוך דורש ריסון החיה מפעילות נורמלית 28. כוח נשיכה הוא מדד אמין של כאבי שיניים בבני אדם, אך מכיוון שחולדות דורשות אימון ו/או איפוק כדי למדוד כוח נשיכה, מוצג מקור ללחץ שיכול לייצר ממצאים בעלי משמעות פיזיולוגית מפוקפקת29-31
כמה מגבלות של איפוק ומתח ניתן להתגבר על ידי שימוש בעיצוב אופרנטי כדי להעריך התנהגויות nociceptive. מודל אופרנטי אחד משתמש בהימנעות של טמפרטורה לא נוחה כדי להעריך ולאפיין nociception orofacial32-35. מודל זה של סתירת תגמול מבוסס על פרס של חלב ממותק כדי לגרום למכרסם למקם את פניו בהתנדבות מול בדיקה תרמית מחוממת או מקוררת34,36. עם זאת, הבדיקה דורשת אימון בעלי חיים, אבל כוח של הבדיקה הוא הנתונים נאספים באופן אוטומטי.
עדיין מודל אחר של בעלי חיים השתמש בתפקוד לכרסום הנגרמת על ידי nociception כמדד של nociception orofacial37. עם זאת, המכרסם מוגבל לצינור והבריחה היחידה שלו היא לכרסם דרך דאון כדי לצאת. היתרון של מודל זה הוא שהוא מודד את תפקוד הלסת לאחר פגיעה חריפה או כרונית בלסת בעכברים. עם זאת, המכרסם מוגבל, אשר מוסיף התנהגות מתחרה חלופית מבלבלת, כלומר בריחה, אשר יהיה מלחיץ ובכך יכול להשפיע על תוצאות הבדיקה nociception.
משך הארוחה שימש למדידת nociception בבעלי חיים עם דלקת פרקים TMJ38-41, חשיפה עיסת השן42, ונזק לשרירים43. מכרסם שחווה nociception orofacial אכל לאט יותר לאחר החיה יזמה ארוחה. חולים חווים כאב TMJ גם לקחת יותר זמן ללעוס את האוכל שלהם ואת אורך המחזור מתקצר כאשר כאב TMJ הוא פחתה44-46. הארכת משך הארוחה כאשר כאבים TMJ קיים צפוי להיות "התנהגות שמירה", מוגדר מבצעית כהתנהגות nociceptive47.
משך הארוחה מודד nociception TMJ באמצעות שיטה פולשנית עד 19 ימים בחולדות זכר ונקבה ו 6 ימים (התקופה הארוכה ביותר נבדק) בעכברים זכרים וניתן לתאר כסמן ביולוגי של nociception38-41. בתמיכה כי משך הארוחה מודד תגובות nociceptive, nociception יכול להיות מופחת על ידי התערבות תרופתית גורם משך הארוחה של החיה לחזור נורמלי38,40,41. זה אושר גם כאשר נוירונים nociceptive נהרסו באמצעות קפסאיצין; לאחר הרס העצבים משך הארוחה של בעלי החיים לא הוגדל לאחר הזרקת CFA לתוך TMJ 40.
להלן הפרוטוקול כיצד להשיג ולנתח סטטיסטית נתוני משך הארוחה.

<table><tbody><tr><td>תוכנת מוניטור בעלי חיים</td><td>Med Assoc. Inc</td><td>SOF-710</td><td>East Fairfield, VT</td></tr><tr><td>כדורי דיוק ללא אבק, מכרסמים, מבוססי דגנים&nbsp;</td><td>Bio-Serv</td><td>F0165</td><td>45 מ"ג כדורים, 50,000 / קופסה</td></tr><tr><td>כדורי דיוק ללא אבק, מכרסמים, על בסיס דגנים&nbsp;</td><td>Bio-Serv</td><td>FO163</td><td>כדורי 20 מ"ג השלם</td></tr><tr><td>את האדג'ובנט של פרוינד</td><td>Chondrex, Inc.</td><td>7001</td><td>אף לוגר לא מספק את הריכוז של 5 מ"ג/מ"ל.&nbsp; יכול להשתמש ב-CFA ממקורות אחרים כל עוד החוקר משתמש במקור זה באופן עקבי</td></tr></tbody></table>

משך הארוחה כמדד לתגובות הנוצ'ית האורופציאליות במכרסמים

Meal Duration as a Measure of Orofacial Nociceptive Responses in Rodents

הארכה משך הארוחה ניתן להשתמש כדי למדוד עלייה hyperalgesia מכני orofacial שיש דמיון להתנהגות השמירה של בני אדם עם כאב orofacial. כדי למדוד את משך הארוחה חולדות ללא מעצורים נשמרים ברציפות בצליל מוחלש, מודולי האכלה ממוחשבת במשך ימים עד שבועות כדי להקליט התנהגות האכלה. תאים מוחלשים אלה מצוידים במתקן גלולות צ'או. המתקן יש שוקת גלולה עם photobeam ממוקם בתחתית השוקת וכאשר מכרסם מסיר גלולה מן השוקת מאכיל קרן זו כבר לא חסומה, איתות המחשב להפיל גלולה אחרת. המחשב מתעד את התאריך והשעה שבהם הכדורים נלקחו מהשוקת ומנתונים אלה הנסיין יכול לחשב את הפרמטרים ארוחה. בעת חישוב הפרמטרים ארוחה ארוחה הוגדרה על סמך עבודה קודמת נקבע על 10 דקות (במילים אחרות, כאשר החיה לא אוכלת במשך 10 דקות זה יהיה סוף הארוחה של החיה) גם גודל הארוחה המינימלי נקבע על 3 כדורי. משך הארוחה, מספר הארוחה, צריכת המזון, גודל הארוחה ומרווח הארוחות הבין-ארוחה ניתנים לאחר מכן להיות מחושבים על ידי התוכנה לכל תקופת זמן שהמפעיל רוצה. של הפרמטרים האכלה שניתן לחשב משך הארוחה הוכח להיות סמן ביולוגי פולשני מתמשך של nociception orofacial בחולדות זכר עכברים וחולדות נקבה. מדידות משך הארוחה הן כמותיות, אינן דורשות הכשרה או מניפולציה בבעלי חיים, דורשות השתתפות קליפת המוח ואינן מתחרות בהתנהגויות אחרות הנגרמות על ידי ניסויים. גורמים אלה מבדילים בדיקה זו משיטות אופרנטיות או רפלקס אחרות להקלטת nociception orofacial.

משך הארוחה הוא קורלציה התנהגותית של כאב אורופדי ומדידות משך הארוחה הוחלו על בעלי חיים עם דלקת פרקים TMJ (איור 2) ועששת (איור 3). בניסוי אחד, חולדות סבלו מדלקת פרקים TMJ לאחר מתן מינון גבוה של 250 מ"ג של CFA וטיפול זה גרם לעלייה משמעותית במשך הארוחה במשך 19 ימים (איור 2). מינון נמוך יותר של CFA (10 מ"ג) מוזרק לתוך כל מפרק TMJ הפיק עלייה קטנה יותר משך הארוחה רק 2-3 ימים52 המציין תגובת מנה עבור הנהלת CFA באמצעות ארוחה זו משך assay. משך הארוחה נמדדו תגובות nocicep...

הארכה במשך הארוחה מייצגת התנהגות nociceptive orofacial מכרסמים דומים להתנהגות השמירה של בני אדם עם כאב orofacial. אכילה היא התנהגות שאינה דורשת הכשרה או מניפולציה בבעלי חיים, דורשת השתתפות קליפת המוח, ואינה מתחרה בהתנהגויות אחרות המושרות באופן ניסיוני, ומבדילה את ההסתעפות הזו מרפלקס חלופי או ממדידות אופרנטיות.

A lengthening in meal duration can be used to measure an increase in orofacial mechanical hyperalgesia having similarities to the guarding behavior of ...

המטרה הכללית של הליך זה היא לקבוע כי מדידות של משך הארוחה מהוות מדד כמותי לכאבים בלסת ובשיניים. דבר זה מושג תחילה על ידי הנחת החולדות בכלובי האכלה כדי לקבל מדידת בסיס של משך הארוחה. לאחר קבלת מדידות הבסיס, מוזרק חומר מעורר כאב למפרק הלסת (temporal mandibular joint) או למפרק הברך כביקורת.לאחר ההזרקה, החיה מוחזרת לכלוב ההאכלה, והתנהגות ההאכלה נצפית עד שהיא חוזרת לרמות הבסיס. לבסוף, נאספים נתונים ומנותחים כדי להראות שלחיות עם כאבי לסת יש משכי ארוחה ארוכים יותר. ישנם יתרונות רבים לשימוש במשך הארוחה ובדפוסי הארוחות לצורך ניתוח כאב במודלים של מכרסמים, אך אנו סבורים ששני היתרונות העיקריים של מודל זה על פני סוגים אחרים של מודלים הם שאין צורך בריסון של החיות, ואין צורך באימון של החיה.לפני מספר שנים, שמנו לב שאין שיטה טובה למדידת כאב פנים ופה במודל של בעלי חיים. הדבר הוביל אותנו לבחון את האפשרות שניתן להשתמש בניתוח דפוסי אכילה כדי למדוד כאב פנים ופה. כך פותח המודל שבו אנו משתמשים כיום למדידת כאב פנים ופה.מחקרים על משך הארוחה מבוצעים בתאי בידוד אקוסטי המצוידים במזיני כופת המופעלים על ידי מחשב, המוסיפים מזון למכרסמים למכל האוכל המורכב מכופת של 45 milligram. כופת זו מוגשת לתבנית למטה, המצוידת בקרן פוטו (photo beam). מעל פתח קרן הפוטו מונח כיסוי זכוכית כדי למנוע מחלקיקים לחסום את נתיבה.ברגע שהחולדה מוציאה את הכדור מהתעלה, קרן האור משתחזרת והמחשב מקבל אות להפיל כדור נוסף. באופן זה, כדור תמיד זמין ללא כל מאמץ נוסף מצד בעל החיים. לאחר מילוי בקבוק המים, הנח נייר סופג במגש הפסולת שמתחתיו.כדי להתחיל, יש להפעיל את תוכנת ניטור בעלי החיים ולבחור "Configuration" (תצורה) מהתפריט הנפתח כדי להגדיר את יחידות ההזנה. בטלו את הסימון בתיבת הבחירה "pellet delivered" כדי לתעד את הזמן שבו הגלגול מוסר מהאסלה במקום את זמן הפילתו. לאחר מכן, סמנו את תיבת הבחירה "automatic file naming" כדי להגדיר שם לקבצים באופן אוטומטי.לאחר בחירת אפשרות הניסוי (experiment) מתפריט הנשירה של העריכה (edit), הזן את שם הקובץ בחלון החדש כדי להבטיח שהנתונים ייאספו כראוי. בתיבת משך הניסוי בימים (experiment length days), הזן ערך שעולה על משך הזמן הכולל של הניסוי. לאחר מכן, הגדר את ערך מספר השעות ביום ל-24 עבור תקופת ההאכלה והקריטריונים.הזינו ערך של 10 minutes. הזינו 45 בתיבה שכותרתה pellet size milligrams. בחלק הפאזה (phase) של חלון הניסוי, הזינו את המונח day בשדה השם ובשדה מספר השעות.הקלידו 24 כדוגמה אחת. תחת הכותרת day phase, הזינו את המילה light בשדה השם והזינו 60 בשדה האחוזים. חזרו על פעולה זו על ידי הזנת המילה dark בשדה השם עם ערך אחוזים של 40.בשלב הבא, בחרו בכפתור "בחר את כל התיבות" (set all boxes) כפי שמוצג. שמרו את המידע ואז לחצו על "אישור" (okay). כאשר יופיע מסך בחירת התיבות להפעלה (start boxes), בחרו את המזינים שברצונכם להפעיל ולחצו על "אישור" (okay).חלונות זמן ההרצה של ניטור בעלי החיים יופיעו לאחר מכן עם נתוני דפוסי ההאכלה. לאחר תצפית על התנהגות ההאכלה הבסיסית, הוצא את בעל החיים מהמאכיל לצורך השראת כאב של דלקת מפרקים במפרק הלסת (temporomandibular joint arthritis). לאחר ההרדמה, אתר את מפרק הלסת והזרק complete freund's adjuvant לתוך החלל הרלוונטי.חזור על פרוצדורה זו בצד השני. חולקי בקרה מזריקים 50 µL של saline בריכוז 0.9%. קבוצה נוספת של בעלי חיים מקבלים זריקה של CFA למפרק הברך.לאחר ההזרקה, החזירו את בעלי החיים ליחידת ההאכלה ברגע שהם מתעוררים מההרדמה. במהלך בדיקת משך הארוחה, עקבו אחר התנהגות ההאכלה של החולדות עם הדלקת המפרקים עד שמשך הארוחה שלהן יחזור לרמות הבסיס. פרק זמן זה יכול להימשך מיום אחד עד 19 ימים, תלוי במינון ה-CFA.הגדרות התוכנה שהוגדרו קודם לכן יעקבו אחר מספר הכריות שחולקו במהלך פרקי זמן ספציפיים בזמן הבדיקה. יש לשטוף ולחדש את בקבוקי המים מדי יום ולהוסיף מזון למכל המזין. במידת הצורך, יש להחליף את הנייר הסופג מדי יום כדי להשיג את התוצאות המיטביות.נשפו את האבק מהאסבקי (trough) ומחלקיה הנעים של המזין באמצעות אוויר בלחץ גבוה, ונגבו את זכוכית הכיסוי מדי יום. נקו את נתיב קרן הפוטו-ביים (photo beam) אם נצפתה חסימה. עם סיום המחקר, הסירו ושטפו את כל רכיבי הכלוב.הקבצים נוצרים מדי יום ונפתחים באופן אוטומטי כדי לשלוף נתונים על דפוסי האכילה, כגון צריכת מזון, מספר הארוחות או משך הארוחה. לחלופין, ניתן לחשב דפוסי אכילה באמצעות תוכנה קניינית, בהתאם לצורכי החוקר בניסוי זה. חולדות עם כאב דלקת מפרקים של המפרק הלסת-רחבי (temporomandibular joint) שהושרה באמצעות CFA הראו עלייה משמעותית במשך הארוחה למשך 19 ימים בהשוואה לבעלי חיים שהוזרק להם סלין או לאלה שקיבלו זריקות CFA בברך.ניתן להחיל שיטה זו על סוגים אחרים של כאבים בחלל הפה, כפי שמוצג כאן. משך הארוחה עלה אף הוא בחולדות שחוו כאבים בעקבות חשיפת מוך השן. בעת שימוש בפרוצדורה זו, ישנם שני דברים שייתכן שתצטרכו לפתור בעיות (troubleshoot) באופן יומי.בעת שימוש במערכת spray dolly עם חולדות במשקל של כ-300 גרם, עליהן לאכול בין כ-300 ל-600 כפתורי מזון ביום. אם הן אוכלות פחות כפתורי מזון, נניח פחות מ-300, סביר להניח שישנה בעיה בחיישן בחלקו העליון של יחידת ההאכלה שדורשת ניקוי. אם הן אוכלות יותר מ-600 כפתורי מזון, סביר להניח שהבעיה היא בחיישן הנמצא בתבנית ההאכלה, ויש לנקות אותו.אלו הם שני הדברים שעליכם לזכור בעת ביצוע בדיקה זו. למודל ניתוח דפוסי האכילה יש מספר יתרונות על פני מודלים אחרים בחקר כאבים פהיים-פרוסופליים. המודל מערב מסלולים קורטיקליים ולכן הוא אינו מודד פשוט מנגנוני רפלקס.ניתן להשתמש במודל 24 שעות ביממה והוא אינו מעורר התנהגויות חלופיות. בכך הופך מודל זה לכלי רב עוצמה בחקר כאבים פה-פנים.

meal-duration-as-measure-orofacial-nociceptive-responses

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

סרטון זה מדגים את השראת כאב נוירופתי פה ופנים במודל חולדה על ידי קשירת העצב האינפרא-אורביטלי. התוצאה היא נזק עצבי ודלקת, הגורמים לאיתות כאב חריג ומחקים מצבי כאב כרוניים, שניתן להשתמש בהם כדי לחקור את מבחן הכאב הפה והפנים.

גרימת כאב נוירופתי אורו-פנים במודל חולדה באמצעות קשירת עצבים אינפרא-אורביטלית

אנו מציגים מערכת אופרנטית ידידותית למשתמש, תפוקה גבוהה לצורך ההערכה של התנהגויות כאב במכרסמים ערות ומודעים. מכשיר הערכת כאב orofacial (OPAD) יכול להעריך את כאב באמצעות הפרדיגמה גמול / סכסוך ובכך לספק דרך הומנית יותר של בדיקות. פרוטוקול זה יניבו נתונים יותר רלוונטיים קליני וtranslational ממכרסמים.

שימוש במכשיר ההערכה אופרנטית orofacial כאב (OPAD) כדי למדוד שינויים בהתנהגות nociceptive

אנו מתארים פרוטוקול לבחון את התפתחותם של hyperalgesia מושרה אופיואידים וסובלנות בעכברים. המבוסס על המדידה של תגובות nociceptive תרמיים ומכאניות של בעלי חיים תמימים וטופל במורפיום, היא מאפשרת לכמת את העלייה ברגישות לכאב (hyperalgesia) ולהפחית בכאבים (סובלנות) הקשורים לממשל אופיום כרוני.

הערכה של סובלנות hyperalgesia ומשככי כאבים הנגרם מורפיום בעכברים באמצעות שיטות nociceptive תרמיים ומכאניות

במאמר זה אנו מספקים פרטים עבור שיטות ייצור, בקרת איכות של חלבון רקומביננטי פיוז'ן IL4-10. אנו גם מראים כיצד לבחון את היעילות של חלבון זה כדי לפתור כאבים במודל של עכברים של כאבים דלקתיים.

פיתוח חומרים לטיפול בכאב כרוני

בתנאי כאן הוא פרוטוקול המפרט צעדים כדי ליצור מודל חיה של כאב כרונית שלאחר איסכמיה (CPIP). זהו מודל מוכר היטב מחקה את האדם מורכבים האזור תסמונת הכאב סוג-I. היפרארגישויות מכני ותרמי הם הערכה נוספת, כמו גם קפסאיצין המושרה nocifensive תנהגויות נצפתה במודל עכברוש CPIP.

כרונית לאחר איסכמיה כאב מודל עבור מורכבות אזור תסמונת כאב הסוג-אני בחולדות

התסמין הבולט ביותר של מיגרנה הוא כאבי ראש חמורים, וההשערה היא כי הדבר מתווך על ידי נוירונים חושיים המחדירים את קרום המוח. כאן אנו מציגים שיטה ליישום מקומי של חומרים על הדורה באופן זעיר פולשני תוך שימוש ברגישות יתר לפנים כפלט.

גירוי דוראלי ובדיקות פריאורביטל פון פריי בעכברים כמודל פרה-קליני של כאב ראש

הבדיקה המכנית למניעת קונפליקטים משמשת כקריאה לא רפלקסיבית של רגישות לכאב בעכברים, שבה ניתן להשתמש כדי להבין טוב יותר תגובות רגשיות-מוטיבציוניות במגוון מודלים של כאב עכברים.

בדיקת הימנעות מקונפליקט מכני למדידת התנהגות כאב בעכברים

פרוטוקול זה מתאר את ההערכה של רגישות יתר מכנית במודל חולדה של כאב אורופציאלי נוירופתי באמצעות מכשיר הערכת כאב אורופציאלי מבוסס אופרנט.

הערכה של רגישות יתר מכנית הנגרמת על ידי פגיעה עצבית בחולדות באמצעות בדיקת כאב אופרנטית אורופציאלית

פגיעה כרונית בהיצרות של העצב האינפרא-אורביטלי הדיסטלי בעכברים גורמת לשינויים בהתנהגות ספונטנית (פעילות טיפוח פנים מוגברת) ובהתנהגות נוציפנסיבית בתגובה לגירוי מישושי (תגובתיות יתר לגירוי שיער פון פריי) המהווים סימנים לכאב מתמשך ולאלודיניה ומשמשים מודל לכאב נוירופתי טריגמינלי.

פגיעה כרונית בהיצרות של העצב האינפרא-אורביטלי הדיסטלי (DIoN-CCI) בעכברים לחקר כאב נוירופתי טריגמינלי

פרוטוקול זה מתאר כיצד מדידת כוח הנשיכה וסף נסיגת הראש יכולה ללכוד התנהגות כאב בכאב דלקתי של מפרק טמפורומנדיבולרי (TMJ) המושרה על ידי אדג'ובנט (CFA).

מדידת כאבי מפרק טמפורומנדיבולרי על ידי כוח נשיכה ומבחני נימה פון פריי בעכברים

ההתפתחויות האחרונות בחקר הכאב מדגישות את הפוטנציאל של פוטונוירומודולציה באמצעות דיודות פולטות אור ירוק (GLED) כטיפול לא תרופתי. GLED מווסת את מסלולי הכאב, ומציע הקלה יעילה בכאב. מאמר זה נועד לתקנן ולחדד את פרוטוקולי החשיפה ל-GLED, לשפר את העקביות במחקרים ולקדם את היישום הקליני של טיפול זה.

אופטימיזציה של טכניקות פוטו-נוירומודולציה כדי להעריך את תפקידן של דיודות פולטות אור ירוק בניהול כאב

למדו שיטה לא פולשנית להערכת כאב אורופציאלי במכרסמים באמצעות מדידת משך הארוחה. השיטה מאפשרת מעקב רציף בהתנהגות האכילה ללא כבלים או אימון, ומספקת מדד כמותי אמין לכאב לסת ושיניים בחולדות.

משך הארוחה כמדד לתגובות הנוצ'ית האורופציאליות במכרסמים

גלה סרטונים נוספים