פרוצדורה כדי לחקור את ההשפעה של הגבלת מזון ממושכת בהרואין מחפש אצל חולדות מתנזרות

הליך המאפשר הדגמה של הגדלת החזקה של סמים המבקשים בחולדות מוגבלות מזון מתואר. לאחר אימון הרואין מנהל עצמי, חולדות לעבור תקופת התנזרות, בסביבה נקיה מסמים, שבמהלכו הם אסירי מזון מוגבל. מבקשי תרופה נבדקו ולאחר מכן בסביבה הקשורים בסמים.

המטרה הכוללת של הליך זה היא לחקור את ההשפעות של מניפולציות סביבתיות, כגון הגבלת מזון כרונית על הישנות לחיפוש הרואין בעטיפות מעבדה בתנאי גמילה. זה מושג על ידי החדרה כירורגית ראשונה של קטטר תוך ורידי לווריד הצוואר של החולדה כדי לאפשר מתן עצמי של הרואין לאחר תקופת החלמה. חולדות מאומנות לתת הרואין בעצמן בתאי התניה אופרנטיים לתקופה של 10 ימים.

השלב הבא בהליך הוא שלב ההתנזרות שבו חולדות מועברות למתקן בעלי החיים ונתונות לתקופה של גישה מוגבלת או בלתי מוגבלת למזון. לבסוף, החולדות מוחזרות לתאי ההתניה האופרנטיים כדי לעבור בדיקת חיפוש הרואין שבה התגובות על הידית הלקויה בהרואין גורמות להפעלת רמז, אור וטון בהיעדר אספקת הרואין. בסופו של דבר, חולדות מוגבלות במזון כרוני עם היסטוריה של הרואין, ניהול עצמי יציג עלייה משמעותית בחיפוש אחר הרואין בתנאי גמילה, כתוצאה מחשיפה חוזרת לסביבת נטילת הסמים ולרמזים הקשורים לסמים.

היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות, כגון הליך החזרה, הוא היעדר הכחדה אופרנטית מפורשת, שאינה נצפית במצב האנושי. יתר על כן, השימוש במניפולציות כרוניות לעומת אקוטיות מאפשר תוקף קונסטרוקטיבי גדול יותר ביחס למצב האנושי. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום ההתמכרות לסמים, כגון המנגנונים הנוירולוגיים הנפוצים העומדים בבסיס התנהגויות חיפוש סמים ומזון.

הצנתרים מוכנים בתפזורת ועוברים חיטוי מעוקר לשימוש לאורך תקופה ארוכה. כדי לבנות קטטר, תחילה חותכים צינורות אלסטיים לחתיכות באורך 12 סנטימטר. השתמש בקיסם או במחט בגודל 18 כדי להניח טיפה קטנה של סיליקון סביב הקטטר שלושה סנטימטרים מהקצה.

הניחו לסיליקון להתייבש במשך 24 שעות לפני החיטוי, כופפו את הצינור הארוך של צינורית החמש למעלה, שתשמש כמחבר בזווית ישרה לכן הפלסטיק לפני החיטוי. כדי להרכיב את הצנתרים ביום הניתוח, דחוף את הצד הארוך של הצינור הלימודי מעל צינור המתכת הכפוף של צינורית חמש למעלה בערך באמצע הדרך אל כן הפלסטיק. חבר את צינור החמש למעלה באמצעות צינורות טיגון ומחט מעורבת בגודל 22 למזרק של מיליליטר אחד מלא במי מלח סטריליים.

שטפו מי מלח דרך הצנתר כדי להבטיח זרימה ללא הפרעה. כדי להתחיל להרדים את בעל החיים לפני הגילוח ולנקות את האזור בכתף ימין ובראש עם אלכוהול וקרצוף כירורגי. לאחר מריחת ג'ל על העיניים למניעת התייבשות, מוזרקים פניצילין ותמיסת מלח כדי להגן מפני זיהום והתייבשות.

השתמש בטכניקות סטנדרטיות כדי לחשוף את וריד הצוואר החיצוני לאחר שבודד מהרקמה שמסביב. הכנס מלקחיים מעוקלים מתחת לווריד כדי לשמור עליו מורם ומתוח מעט. בצע חתך קטן בצורת V על הווריד והחזק את החתך פתוח.

בעזרת מרחיב כלי דם קדם את קצה הקטטר הקצר של שלושה סנטימטרים לתוך הווריד לכיוון הלב עד שטיפת הסיליקון נמצאת בנקודת החתך. קשרו את הקטטר לווריד עם שלושה תפרים, אחד הכי רחוק שאפשר. אחד רק רוסטרל לטיפת הסיליקון, והשלישי הכי רחוק שאפשר.

העבירו מי מלח דרך הקטטר כדי לוודא שהוא נשאר חסום ושהתפרים אינם הדוקים מדי. לאחר מכן, הניחו את הצד הגחוני של החולדה כלפי מטה. חתכו את הראש והכניסו המוסטט כדי להפריד את העור מהרקמה הבסיסית וליצור כיס תת עורי.

הנח את ההמוסטט מתחת לעור לעבר הפתח בכתפיים שבו הוכנס הקטטר. לפרוץ את רקמת החיבור ולהדק בחוזקה את הקטטר בנקודה הרוסטרלית ביותר מתחת לבסיס החמש למעלה. נתק את החמש כלפי מעלה והשחיל את הקצה הארוך של הקטטר מתחת לעור והחוצה את החתך הממוקם בחלק העליון של הראש.

השתמש במספריים כדי לחתוך את הקטטר מתחת למקום שבו ההמוסטט היה מהודק ולחבר מחדש את הקצה הארוך של החמישה כלפי מעלה. משוך את הקטטר לאורך פיר המתכת של החמישה כלפי מעלה כל הדרך אל הדום הפלסטיק, העביר מי מלח כדי להבטיח זרימה חופשית. לאחר סגירת הפצעים בתפרים, הניחו את החולדה במנגנון סטריאוטקסי.

לאחר שהגולגולת החשופה נקייה ויבשה, השתמש במקדחה ידנית כדי לקדוח ארבעה עד חמישה חורים על פני השטח. לאחר מכן, הכנס ברגי מכונה לתוך החורים כדי לשמש כפיגומים למכסה הראש. הנח את מחבר החמש למעלה בין הברגים ותחב את האורך העודף של הצנתר לכיס התת עורי שנעשה קודם לכן.

לבסוף, השתמש במלט דנטלי כדי להצמיד את החמש לחלק העליון של הגולגולת. הסר את החולדה מהמנגנון הסטריאוטקסי לאחר ייבוש מלא של המלט ופקח עד להתאוששות מלאה. חולדות שוכנות בנפרד בתאי מיזוג אופרנטיים.

סגור בתאים מחלישי רעש המצוידים במאוורר. שני מנופים נשלפים מותקנים תשעה סנטימטרים מעל רצפת הדופן הימנית עם אור רמז מעל כל מנוף. מודול טון ממוקם מעל הידית הפעילה ונורת בית אדומה ממוקמת במרכז העליון של הדופן השמאלית.

מזון ומים זמינים ב-libitum. משאבת התרופות מחוברת לצנתר באמצעות מסתובב נוזלי וצינורות טיגון המוגנים בקפיץ מתכת. מתן עצמי של הרואין מתחיל לאחר התאוששות מניתוח ותקופת התרגלות של 24 שעות.

כדי להתחיל, יש לשטוף את הקטטר בתמיסת גנטמיצין הפרין. לאחר מכן, חבר את מחבר החמש למעלה לצינור טיגון וחבר את קפיץ המתכת. התחל כל מפגש בתחילת השלב החשוך עם הארכת המנופים הפעילים והלא פעילים, כמו גם הארת אור הבית והפעלת קומפלקס גוון האור Q.

במשך 30 שניות, החולדות מורשות לתת הרואין בעצמן במשך 10 ימים במשך שלושה מפגשים של שלוש שעות המופרדים במרווחים של שלוש שעות. תגובות על הידית האקטיבית מביאות להפעלת משאבת התרופה ולהתחלת תקופת פסק זמן 22 שבמהלכה אור הבית כבוי, וקומפלקס גוון האור Q מעל הידית הפעילה מופעל. תגובות מנוף לא פעילות נרשמות, אך אין להן השלכות הניתנות לתכנות.

לאחר אימון בניהול עצמי, הוציאו את החולדות מתאי ההתניה האופרנטית ושיכנו אותן בנפרד במתקן בעלי החיים עם גישה בלתי מוגבלת למזון ומים. ליום אחד של שטיפת סמים למחרת, הפחיתו את כמות המזון לקבוצה המוגבלת במזון כדי להתחיל את תקופת ההתנזרות תוך שמירה על גישה בלתי מוגבלת למזון בקבוצה השבעה. בצע את בדיקת חיפוש הסמים בבוקר ההתנזרות.

יום 14, החזירו את החולדות לתאי ההתניה האופרנטיים והצמידו אותן לקפיץ המתכת. אפשר מפגש של שעה או שלוש שבמהלכו לתגובות מנוף אקטיביות ולא פעילות יש את אותן השלכות כמו באימון בניהול עצמי, למעט זמינות התרופה. תוצאות אלה מוכיחות שמשקל הגוף נשאר יציב לאורך כל ההרואין.

אימון בניהול עצמי במהלך התנזרות, חולדות עם גישה בלתי מוגבלת לצ'או מעלות את משקל גופן בעוד אלו המוגבלות במזון מורידות את משקל גופן בכ-10 עד 15%. כפי שניתן לראות כאן, עירויים ותגובות מנוף אקטיביות עלו במהלך ימי האימון, בעוד שתגובות מנוף לא פעילות לא. לאחר תקופת ההתנזרות, המנוף הפעיל שהגיב לחולדות המוגבלות במזון גדל באופן משמעותי בהשוואה לחולדות השבעות. ואילו תגובת מנוף לא פעילה היא מינימלית וניתנת להשוואה בין קבוצות בעקבות הליך זה.

ניתן להשתמש בשיטות אחרות כגון זריקות תוך גולגולתיות, מיקרודיאליזה, כתמים מערביים וטכניקות אימונוהיסטוכימיות כדי להתמקד במערכות נוירוכימיות ופרמקולוגיות ספציפיות. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להיות בעל הבנה ברורה כיצד להשתיל בניתוח קטטר תוך ורידי לווריד הצוואר של החולדה, כמו גם כיצד לבצע הליך ניהול עצמי של הרואין בתאי מיזוג אופרנטיים סטנדרטיים.