Name: בונה הנדסת רקמות מבוססת הפיברין מmyofibroblasts ויישום של אילוצים ומתח כדי לגרום לתא וקולגן ארגון (בעניין) (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-10-28T21:45:00.000+00:00
Duration: 12 min 13 s
Description: חקור הנדסת רקמות מבוססת פיברין עם myofibroblasts ויישום אילוצים ומתח לגרימת ארגון תאים וקולגן בזמן אמת. שיטה זו מאפשרת מעקב אחר שינויים דינמיים בתיקון רקמות ופיברוזיס.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה בוצע בתכנית המחקר של החומרים ביו (BMM) המכון. BMM הוא cofunded על ידי המשרד ההולנדי לעניינים כלכליים, חקלאות וחדשנות. התרומה הכספית של Hartstichting Nederlandse הוא הודה בהכרת תודה.

1. תרבות של תאי Saphena הנבוב אדם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בודד תאים מוריד saphena Magna, שנרכש מתורם בהתאם להנחיות לשימוש בחומרים משני, על פי הפרוטוקול על ידי שנל ואח&#39;. 9 ולאחסן אותם בחנקן נוזלי. מהחלק מוריד saphena Magna מאחת חתיכות לחתוך תורמות של 2 מ&quot;מ x 2 לתרבות בצלחת שש היטב. השתמש 2 חתיכות בכל טוב. ניתן להשיג באופן כללי מספיק תאים כדי למלא כ 3 צלוחיות עם 0.25 x 10 6 תאים בחנקן נוזלי. HVSCs מאופיין כmyofibroblasts, על ידי הצגת ביטוי של vimentin, לא ביטוי של desmin וsubpopulation להביע שריר חלק α אקטין 10. הבא יתחילו הפרוטוקול להפשיר את התאים מהחנקן הנוזלי כדי להגדיל את מספר התאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את התאים מבקבוקון אחד לתוך בקבוק תרבית רקמה T75 ולהוסיף מדיום גידול (GM), בהיקף של מתקדם DMEM, 50 מיליליטר סרום שור העובר (FBS), 5 מ&quot;ל פניצילין /סטרפטומיצין ו5 מיליליטר L-Glutamax. מדיום לשנות כל 2-3 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תאים גדלים כ מחוברות לאחר 14 ימים. חנות 0.5 x 10 6 תאים בבקבוקון אחד בחנקן נוזלי, המכונה קטע 1. </li></ol> הערה: הקפאה של התאים אינה הכרחית כאשר קצירת HVSCs, אבל משמשת אך ורק לאחסון. <ol start="4" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את HVSCs מבקבוקון אחד לתוך בקבוק תרבית רקמה T175 ולהוסיף GM. מדיום לשנות כל 2-3 ימים. תאים גדלים מחוברות לאחר כ 7 ימים. חנות 3 x 10 6 תאים בבקבוקון אחד בחנקן נוזלי, המכונה מעבר 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את התאים מבקבוקון אחד לrollerbottle ולהוסיף GM. מדיום לשנות כל 2-3 ימים. תאים גדלים כ מחוברות לאחר 8 ימים. rollerbottle אחת מכיל כ 20-30 x 10 6 תאים. תרבות תאים עד חלוף 6. אל תשתמשו בתאים של מעבר גבוהים יותר מאשר מעבר 9, מאז פנוטיפ התא עשוי להשתנות. </li></ol&gt; 2. הנדסת רקמות של מבנים מבוססי הפיברין <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את דבק סיליקון על ידי ערבוב עם אלסטומר סוכן הריפוי (10:1). לחתוך 7 x 3 מ&quot;מ מגזרים מלבניים של סקוטש. דבק סקוטש ל6 צלחת תרבות היטב, עם קרום גמיש כדי ליצור צלב, ולהשאיר מקום בריבוע של 3 מ&quot;מ בין רצועות סקוטש. </li></ol> הערות: יש להשתמש בצד הרך של סקוטש ולהתמודד עם הצד הזה כלפי מעלה. כאשר הדבקת סקוטש, רק לכסות סקוטש עם סיליקון דבק, אינו מתפשט בכל דבק היטב. מאז יש לי את צלחות תרבות תחתית קרום סיליקון, להשתמש במשהו מתחת לצלחת גם לחיזוק הקרומים הגמישים, על מנת להבטיח הדבקה קלה לצלחת. <ol start="2" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ייבש את דבק סיליקון הלילה בתנור בחום של 60 מעלות צלזיוס, כדי להבטיח התקשות של הדבק. לעקר על ידי הוספת 70% EtOH לבארות והדגירה למשך 30 דקות. לשטוף 3x עם PBS ולהסיר את כל PBS מwelLS וסקוטש. לשים תחת UV למשך 30 דקות ולשמור סטרילי עד לשימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להכין מדיום הנדסת רקמות (TM), בהיקף של GM ו130 מ&quot;ג של חומצה אסקורבית L-2-פוספט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 1 מ&quot;ג / חומצה קפרואית ε-אמין מ&quot;ל (ACA) למדיטציה הטרנסנדנטלית. ACA משמש במשך 7 הימים הראשונים של התרבות כדי למנוע הפיברין מ -11 משפילים. לחלופין, ניתן להשתמש aprotinin. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למנוע היווצרות גוש, פיברינוגן לאפשר להגיע לטמפרטורת חדר לפני הפתיחה. ללא פיברינוגן גושים יתמוססו בקלות רבה יותר. ממיסים פיברינוגן לריכוז של 10 מ&quot;ג בפועל חלבון / מיליליטר TM 7 בתוספת ACA. סינון סטרילי פתרון פיברינוגן, מסננים מרובים עשויים להיות נחוצים. אחסן על קרח עד לשימוש. </li></ol> הערה: כדי לפזר את התערובת בעדינות פיברינוגן כדי למנוע היווצרות קצף רבה מדי. <ol start="6" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים תרומבין לריכוז של 10 IU / מיליליטר TM 7 בתוספת ACA. אחסן על קרח עד לשימוש. </li> &lt;/ Ol&gt; הערה: יש צורך בשמירה על קרח כדי למנוע gelation המוקדם של תרומבין ופיברינוגן. <ol start="7" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Trypsinize התאים, resuspend בGM ולספור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש 15 x 10 6 תאים / מ&quot;ל לזריעת מבני הרקמות מבוססי הפיברין (ריכוז המבוסס על שיטות לרקמות מסתמי לב הנדסי 7). הג&#39;ל יחיד מורכב מ100 μl GOF אל, ובכך של 1.5 x 10 6 תאים. שים 1.5 x 10 6 תאים בצינור צנטריפוגות אחד, וכתוצאה מצינורות צנטריפוגה רבות כמו מספר ג&#39;לי שיבוצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנטריפוגה התאים ב XG 350 במשך 7 דקות וזורקים supernatant. Resuspend התאים 50 תרומבין μl. הוסף 4 μl של כחול ניאון הקלקר microspheres להשעיה זו. לשים 50 μl של פיברינוגן בבקבוקון. השתמש פיפטה לקחת את תרומבין μl 50 עם תאים. הגבר את עוצמת הקול של פיפטה μl עד 100. פיפטה פתרון μl 50 של תרומבין עםתאים לתוך הבקבוקון עם פיברינוגן לערבב תרומבין ופיברינוגן, ולקחת את תערובת μl 100. </li></ol> הערה: קלקר microspheres הניאון משמשות כסמני התייחסות פנימיות לניתוח תמונה. כאשר תרומבין ופיברינוגן ערבוב, למנוע היווצרות של בועות אוויר על ידי pipetting את התערובת בזהירות. בועות אוויר תגרום לחורים בג&#39;ל הפיברין. <ol start="10" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פיפטה את התערובת לתוך הג&#39;ל ובין רצועות סקוטש. זמן gelation האופייני לג&#39;לי הפיברין, ברגע שהרכיבים הם מעורבים, הוא בסדר גודל של 20 שניות. </li></ol> הערות: עשה זאת במהירות אפשרית כדי למנוע gelation לפני תערובת pipetted בצלחת היטב. להתאמן לפני שימוש בתאים וחרוזים. <ol start="11" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה השעיות למשך 30 דקות ב 37 מעלות צלזיוס באוויר 95% / 5% CO 2 באינקובטור humidified לאפשר gelation לפני הוספת התרבות TM עם ACA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החלף TM עם ACA כל 2-3 ימים במשך 7 הימים הראשונים. ג&#39;לי הוא יציב מספיק אחרי שבוע אחד כדי להיות מתורבת ללא ACA. אחרי השבוע הראשון להחליף TM כל 2-3 ימים. הוסף 6 מ&quot;ל של TM בכל טוב. ביום 12 תאים יצרו מספיק קולגן להדמיה. </li></ol> 3. שינויי זן והתרמה החלו בזנים ואילוצים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתח סטטי מיושם על ידי התאים באופן ישיר, עקב מתיחה ודחיסת תא 12. כדי לגרום לארגון מחדש קולגן, לחתוך את הרקמה לבנות רופפת משתי רצועות סקוטש בכיוון אחד. התוצאה הוא חד כיווני אילוצים (איור 1 א). לבצע את זה ביום 12, שכן המבנה הוא אז מספיק יציב וקולגן הופקד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל לחץ מחזורי על ידי הפעלת ואקום לתחתית של צלחות התרבות עם קרומים גמישים, עם השימוש במערכת FX4000T Flexcell. מניחים את הצלחות על baseplate, על גבי הודעות טעינה (שהנן חלק של המכשיר העמסה מחזורי ה). משאבת ואקום חלה על הממברנה ובכך מושכת את הקרום מעל ההודעה המלבנית השוכבת מתחתיו. בשל את הקבצים המצורפים בצורת הצלב של הרקמה בונה על הקרום (דרך סקוטש) וההודעה המלבנית עומס המחזורי מיושם היא uniaxial (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתחילה, השתמש בתרבות סטטית במשך 5 ימים כדי להשיג את השלמות מכאנית ראשונית, לפני היישום של מתח מחזורי מתחיל ביום 6. תכנית פרוטוקול כתם מחזורי לתוך הבקר למשאבת הוואקום. לדוגמא שימוש בפרוטוקול מתח מחזורי לסירוגין הוקם בעבר, עם כיוון uniaxial 13. זה מורכב מזן לסירוגין של גל סינוס עם 1 הרץ, מאמץ של 0 עד 5% מאמץ, לתקופות של 3 שעות, לסירוגין עם 3 תקופות מנוחה משאבי אנוש. לבצע פרוטוקול מתח מחזורי זה למשך 7 ימים, גרימת ארגון קולגן מיושר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדרך כלל לאחר 12 ימים HVSCs יצרו organizatio קולגן מיושרn. לאחר שיושג ארגון קולגן מיושר, לשנות את כיוון העומס המחזורי uniaxial, כדי להיות בניצב לכיוון הזן המקורי. עושה זאת על ידי הפיכת את ההודעות המלבניות ב -90 מעלות. </li></ol> 4. תאי קולגן ולדמיין <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להמחיש את שיפוץ פעיל, בזמן אמת, קולגן, דגימות תווית עם בדיקות שאינם מפריעות לכדאיויות תא או היווצרות קולגן. השתמש בבדיקות להכתים את הציטופלסמה התא וקולגן fluorescently. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דור השני הרמוני לחלופין באמצעות מיקרוסקופ סריקת לייזר confocal יכול לשמש כדי לחזות מבני קולגן באמצעות 14 autofluorescence, עם עירור ב 780 ננומטר וזיהוי בין 500-550 ננומטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את צלחות התרבות מההגדרה והחממה, לדגימות מחזורית המתוחות במהלך תקופת מנוחת שעות 3, ולהעביר אותם למיקרוסקופ סריקת לייזר confocal לדמיין תאים וקולגן. </li></ol>

<ol><li>Beamish, J. A., He, P., Kottke-Marchant, K., Marchant, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+regulation+of+contractile+smooth+muscle+cell+phenotype%3A+implications+for+vascular+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng.+Part+B+Rev%22%5BJournal%5D)">Molecular regulation of contractile smooth muscle cell phenotype: implications for vascular tissue engineering.</a> Tissue Eng. Part B Rev. 16, 467-491 (2010).</li>
<li>Isenberg, B. C., Tranquillo, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+cyclic+distention+enhances+the+mechanical+properties+of+collagen-based+media-equivalents%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Long-term cyclic distention enhances the mechanical properties of collagen-based media-equivalents.</a> Ann. Biomed. Eng. 31, 937-949 (2003).</li>
<li>Nichol, J. W., Khan, A. R., Birbach, M., Gaynor, J. W., Gooch, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamics+and+axial+strain+additively+increase+matrix+remodeling+and+MMP-9%2C+but+not+MMP-2%2C+expression+in+arteries+engineered+by+directed+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Hemodynamics and axial strain additively increase matrix remodeling and MMP-9, but not MMP-2, expression in arteries engineered by directed remodeling.</a> Tissue Eng. Part A. 15, 1281-1290 (2009).</li>
<li>Sander, E. A., Stylianopoulos, T., Tranquillo, R. T., Barocas, V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image-based+multiscale+modeling+predicts+tissue-level+and+network-level+fiber+reorganization+in+stretched+cell-compacted+collagen+gels%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Image-based multiscale modeling predicts tissue-level and network-level fiber reorganization in stretched cell-compacted collagen gels.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 106, 17675-17680 (2009).</li>
<li>Hu, J. J., Humphrey, J. D., Yeh, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+engineered+tissue+development+under+biaxial+stretch+using+nonlinear+optical+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Characterization of engineered tissue development under biaxial stretch using nonlinear optical microscopy.</a> Tissue Eng. Part A. 15, 1553-1564 (2009).</li>
<li>Lee, E. J., Holmes, J. W., Costa, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remodeling+of+engineered+tissue+anisotropy+in+response+to+altered+loading+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Remodeling of engineered tissue anisotropy in response to altered loading conditions.</a> Ann. Biomed. Eng. 36, 1322-1334 (2008).</li>
<li>Mol, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrin+as+a+cell+carrier+in+cardiovascular+tissue+engineering+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Fibrin as a cell carrier in cardiovascular tissue engineering applications.</a> Biomaterials. 26, 3113-3121 (2005).</li>
<li>de Jonge, N., Kanters, F. M., Baaijens, F. P., Bouten, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain-induced+Collagen+Organization+at+the+Micro-level+in+Fibrin-based+Engineered+Tissue+Constructs%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Strain-induced Collagen Organization at the Micro-level in Fibrin-based Engineered Tissue Constructs.</a> Ann. Biomed. Eng. 41 (4), 763-774 (2012).</li>
<li>Schnell, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+cell+source+for+cardiovascular+tissue+engineering%3A+venous+vs.+aortic+human+myofibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Thorac.+Cardiovasc.+Surg%22%5BJournal%5D)">Optimal cell source for cardiovascular tissue engineering: venous vs. aortic human myofibroblasts.</a> Thorac. Cardiovasc. Surg. 49, 221-225 (2001).</li>
<li>Mol, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+human+tissue-engineered+heart+valves%3A+prospects+for+systemic+application%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Autologous human tissue-engineered heart valves: prospects for systemic application.</a> Circulation. , I152-I158 (2006).</li>
<li>Ahmann, K. A., Weinbaum, J. S., Johnson, S. L., Tranquillo, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrin+degradation+enhances+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation+and+matrix+deposition+in+fibrin-based+tissue+constructs+fabricated+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Fibrin degradation enhances vascular smooth muscle cell proliferation and matrix deposition in fibrin-based tissue constructs fabricated in vitro.</a> Tissue Eng. Part A. 16, 3261-3270 (2010).</li>
<li>John, J., Quinlan, A. T., Silvestri, C., Billiar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Boundary+stiffness+regulates+fibroblast+behavior+in+collagen+gels%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Boundary stiffness regulates fibroblast behavior in collagen gels.</a> Ann. Biomed. Eng. 38, 658-673 (2010).</li>
<li>Rubbens, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+straining+accelerates+the+development+of+tissue+properties+in+engineered+heart+valve+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Intermittent straining accelerates the development of tissue properties in engineered heart valve tissue.</a> Tissue Eng. Part A. 15, 999-1008 (2009).</li>
<li>Chen, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiphoton+imaging+and+quantitative+analysis+of+collagen+production+by+chondrogenic+human+mesenchymal+stem+cells+cultured+in+chitosan+scaffold%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng.+Part+C+Methods%22%5BJournal%5D)">Multiphoton imaging and quantitative analysis of collagen production by chondrogenic human mesenchymal stem cells cultured in chitosan scaffold.</a> Tissue Eng. Part C Methods. 16, 913-920 (2010).</li>
<li>de Jonge, N., Kanters, F. M., Baaijens, F. P., Bouten, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain-induced+Collagen+Organization+at+the+Micro-level+in+Fibrin-based+Engineered+Tissue+Constructs%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Strain-induced Collagen Organization at the Micro-level in Fibrin-based Engineered Tissue Constructs.</a> Ann. Biomed. Eng. 41, 763-774 (2013).</li>
<li>Merryman, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+between+heart+valve+interstitial+cell+stiffness+and+transvalvular+pressure%3A+implications+for+collagen+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Correlation between heart valve interstitial cell stiffness and transvalvular pressure: implications for collagen synthesis.</a> Am. J. Physiol. 290, (2006).</li>
<li>Ingber, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+cellular+mechanotransduction+to+biologically+inspired+engineering%3A+2009+Pritzker+Award+Lecture%2C+BMES+Annual+Meeting+October+10%2C+2009%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">From cellular mechanotransduction to biologically inspired engineering: 2009 Pritzker Award Lecture, BMES Annual Meeting October 10, 2009.</a> Ann. Biomed. Eng. 38, 1148-1161 (2009).</li>
<li>Sander, E. A., Barocas, V. H., Tranquillo, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Initial+fiber+alignment+pattern+alters+extracellular+matrix+synthesis+in+fibroblast-populated+fibrin+gel+cruciforms+and+correlates+with+predicted+tension%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Initial fiber alignment pattern alters extracellular matrix synthesis in fibroblast-populated fibrin gel cruciforms and correlates with predicted tension.</a> Ann. Biomed. Eng. 39, 714-729 (2010).</li>
<li>van der Schaft, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+Skeletal+Muscle+Tissues+from+Murine+Myoblast+Progenitor+Cells+and+Application+of+Electrical+Stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Engineering Skeletal Muscle Tissues from Murine Myoblast Progenitor Cells and Application of Electrical Stimulation.</a> J. Vis. Exp. (73), e4267(2013).</li>
</ol>

החוקרים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

מערכת המודל המתוארת של מבני הפיברין תא מאוכלסים יש פוטנציאל גדול למחקר של תאים וקולגן (מחדש) ארגון (דה יונגה et al. 15), למשל, כדי לשמש למטרות הנדסת רקמות. באמצעות הפיברין כנשא התא הראשוני, אחרי השפלת הפיברין, רקמה נוצרה עם תאים ומטריקס אנדוגני בלבד. בדרך זו, תאי מגורה להגיב להתאמץ, או סטטי או מחזורי בטבע, על ידי החלת כוחות התכווצות 16,17, חישת גבול נוקשות 12, או הצגת הימנעות מתח. <p class="jove_content" style=";text-align:rig...

יש לי רקמות לב וכלי דם פונקציה בולטת נושאת עומס. בתוכן מסוים וארגון של סיבי קולגן במטריקס לתרום למאפייני עומס הנושאות ולשלוט בכוח רקמות כללי 1. בהנדסת רקמות משמש מיזוג מכאני של המבנה - בדרך כלל בהיקף של (מחזורי) משטרים מתאמצים - על מנת לשפר את הארגון ורקמות תכונות מכאניות 2,3. הבנה מלאה של ארגון קולגן מושרה מתח ברקמות גיאומטריות מורכבות כדי ליצור רקמות עם ארכיטקטורת קולגן מוגדרת מראש עדיין לא הושגה. זה נובע בעיקר מהידע המוגבל שלנו של שיפוץ קולגן ברקמות מתפתחות. מודלים קיימים בעיקר לתת מידע על התוצאה הסופית של שיפוץ הנקי קולגן עם שימוש בלחץ סטטי 4-6. כאן אנו מספקים מערכת מודל מתכונן מאוד שמאפשרת הלימוד של ארגון קולגן (מחדש) באופנה בזמן אמת, ב-3D, תחת השפעהעומס סטטי או מחזורי. מבני הרקמות הם מבוססי הפיברין, על מנת להבטיח שכל קולגן במבנה הוא אנדוגני. תא וקולגן ארגון במבנים הוא דמיינו, ומערכת ייחוס פנימית מאפשרת לנו להעביר את התאים ומבני קולגן לניתוח זמן לשגות. בפרוטוקול זה אנו מתארים את השימוש של מערכת המודל לתאי Saphena הנבוב אנוש (HVSCs), שכן תאים אלה ידועים לייצור שלהם המשופר הנוסף הסלולרי מטריצה ​​והיכולת לשפץ את המטריצה ​​והשימוש שלנו הוקם ברקמות מהונדסות 7 לב וכלי דם, המבוסס על עבודתו של דה יונגה et al. 8

<table><tbody><tr><td>תרבית פלסטיק</td><td>גריינר</td><td></td><td>כולל צלוחיות תרבית ופיפטות</td></tr><tr><td>מתקדם DMEM</td><td>Gibco</td><td>12491</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי</td><td>גריינר</td><td>758075</td><td></td></tr><tr><td>פניצילין/סטרפטומיצין</td><td>Gibco</td><td>10378016</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMax</td><td>Gibco</td><td>35050-079</td><td></td></tr><tr><td>אלסטומר וחומר ריפוי</td><td>Dow Corning Corporation</td><td>3097358-1004</td><td>Silastic MDX 4-4210#</td></tr><tr><td>Velcro</td><td>חנות</td><td></td> רגילה <td>אתה יכול לקנות את זה בחנות רגילה, השתמש רק בלוחות תרבית Bioflex בצד הרך</td></tr><tr><td></td><td>Flexcell Int</td><td>BF-3001U</td><td></td></tr><tr><td>חומצה L-אסקורבית לא מטופלת 2-פוספטאז</td><td>סיגמא</td><td>A8960</td><td></td></tr><tr><td>&epsilon;-חומצה אמינו קפרואית</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>D7754</td><td></td></tr><tr><td>טרומבין בקר</td><td>Sigma</td><td>T4648</td><td></td></tr><tr><td>פיברינוגן בקר</td><td>Sigma</td><td>F8630</td><td></td></tr><tr><td>מסנן מזרק 0.45</td><td>Whatmann (Schleicher and Scheul)10462100</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>מיקרוספירות פוליסטירן</td><td>Invitrogen</td><td>F-8829</td><td>פלואורסצנט כחול, 10 &mu; קוטר m</td></tr><tr><td>Flexcell FX-4000T</td><td>Flexcell Int</td><td></td><td>כולל עמודי טעינה מלבניים</td></tr><tr><td>גשש תאים</td><td>כתום Invitrogen בדיקות מולקולריות</td><td>C2927</td><td></td></tr><tr><td>CNA35-OG488</td><td></td><td></td><td>מסופק בלבביות על ידי המעבדה לכימיה מקרומולקולרית ואורגנית, המחלקה להנדסה ביו-רפואית, האוניברסיטה הטכנולוגית של איינדהובן</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ סריקת לייזר קונפוקלי</td><td>Carl Zeiss</td><td></td><td>LSM 510 מיקרוסקופ סריקת לייזר Meta ומצב Two-Photon-LSM</td></tr><tr><td>Amphotericin</td><td>Gibco</td><td>15290-018</td><td>נחוץ לבידוד תאים</td></tr></tbody></table>

בונה הנדסת רקמות מבוססת הפיברין מmyofibroblasts ויישום של אילוצים ומתח כדי לגרום לתא וקולגן ארגון (בעניין)

Engineering Fibrin-based Tissue Constructs from Myofibroblasts and Application of Constraints and Strain to Induce Cell and Collagen Reorganization

תוכן קולגן והארגון בפיתוח רקמות collagenous יכולים להיות מושפע על ידי זני רקמות מקומיים ואילוץ רקמות. מהנדסי רקמות שואפים להשתמש בעקרונות אלה כדי ליצור רקמות עם ארכיטקטורות קולגן מוגדרות מראש. הבנה מלאה של התהליכים שבבסיס המדויקים של שיפוץ קולגן לשלוט ארכיטקטורת הרקמה הסופית, לעומת זאת, היא חסרה. בפרט, מעט מאוד ידוע על הנטייה (מחדש) של סיבי קולגן בתגובה לשינויים בתנאי העמסה מכאניים של רקמות. אנחנו פיתחה במערכת מודל חוץ גופית, בהיקף של-myofibroblast זרע מבני Biaxially-מוגבלים הפיברין, על מנת להבהיר עוד יותר קולגן (מחדש) בתגובה לנטייתי) חוזר biaxial לתנאי העמסה סטטיים uniaxial ו-II) טוען uniaxial המחזורי של Biaxially-מוגבל מבנים לפני ואחרי שינוי בכיוון טעינה, עם שימוש במכשיר טעינת FX4000T Flexcell. זמן לשגות הדמיה confocal משמשת לVIsualize קולגן נטייה (מחדש) באופן הרסני. תא וקולגן הארגון במבנים ניתן דמיינו בזמן אמת, ומערכת ייחוס פנימית מאפשרת לנו להעביר את התאים ומבני קולגן לניתוח זמן לשגות. היבטים שונים של מערכת המודל יכולים להיות מותאמים, כמו מקור תא או שימוש בתאים בריאים וחולים. תוספים יכולים לשמש כדי להבהיר מנגנוני שיפוץ קולגן בסיסי עוד יותר, על ידי למשל הוספת MMPs או חסימת integrins. צורה וגודל של המבנה ניתן להתאים בקלות לצרכי ספציפיים, וכתוצאה מכך מערכת מודל מתכונן מאוד ללמוד תא וקולגן ארגון (מחדש).

מערכת מודל זה מאפשר לג&#39;לי הפיברין myofibroblast-זרע culturing. איור 1 א מציגה רקמת תרבית הראשונה תחת אילוצי biaxial סטטיים. אילוצי רקמות משתחררים על ידי חיתוך בג&#39;ל הפיברין משני אילוצים, כדי ליצור אילוצים סטטיים uniaxial, ומחזק רקמות וremodels לאחר מכן (איור 1 א). למתח מחזורי, הרקמה בתרבית תחת אילוצי biaxial סטטיים גם כן. לאחר 5 ימים ניתן ליישם זן uniaxial מחזורי (איור 1). כדי לגרום לארגון מחדש קולגן, כיוון זן uniaxial ניתן...

מערכת מודל זה מתחילה מג&#39;ל הפיברין myofibroblast-מאוכלס שיכול לשמש כדי לחקור קולגן אנדוגני (מחדש) ארגון בזמן האמת באופן הרסני. מערכת המודל היא מאוד מתכונן, כפי שהוא יכול להיות בשימוש עם מקורות תאים שונים, תוספים בינוניים, וניתן להתאים בקלות לצרכי ספציפיים.

Collagen content and organization in developing collagenous tissues can be influenced by local tissue strains and tissue constraint. Tissue engineers aim ...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא ליצור מבנים המבוססים על פיברין, שניתן להשתמש בהם כדי לחקור ארגון מחדש של תאים וקולגן. דבר זה מושג תחילה על ידי בידוד תאי וריד ספנוס (saphenous) אנושיים מרקמת תורם והרחבתם בתרבית. השלב השני הוא הדבקת רצועות ולקרו (Velcro) על ממברנות גמישות.בתחתית פלטות עם שישה בארות, כדי ליצור מרחב מרובע במרכז, אשר יחזיק את המבנה. לאחר מכן, תערובת של פיברינוגן, תרומבין, תאים וחרוזי פלואורסצנציה מתווספת למרחב שבין רצועות הוולקרו ומושארת לפולימריזציה ליצירת ג'ל. השלב הסופי הוא התניית התאים והשראה של יצירת מטריצה מכוונת על ידי הפעלת מאמץ מחזורי חד-צירי על המבנה או על ידי שחרור מאמץ סטטי.על ידי קיצוץ ג'ל הפיברין מעמודי הוולקרו (Velcro) בכיוון אחד. בסופו של דבר, ניתן להשיג תוצאות המתארות שינויים בארגון מחדש של תאים וקולגן באמצעות ניטור המבנים לאורך זמן בעזרת מיקרוסקופיה קונפוקלית. שיטה זו יכולה לסייע במתן תשובות לשאלות מפתח בתחום עיצוב הקולגן מחדש (collagen remodeling), הנוגעות למהירות היווצרותו של קולגן והכיוון מחדש שלו על ידי סוגי תאים שונים.ראשית, השג רקמה מתורם אנושי מה-venous saana magna בהתאם להנחיות לשימוש משני בחומרים. לאחר מכן, בודד תאי וריד ספנוס אנושיים או H VSCs מהרקמה על פי הפרוטוקול של Schnell et al, ואחסן אותם בחנקן נוזלי. בעת הצורך, הרחב את התאים על ידי העברת מבחנה אחת המכילה 250,000 תאי H VSCs בהפשרה מהירה לבקבוק T 75 עם 15 milliliters של מצע גידול מחומם מראש.מדיום המורכב מ-440 milliliters של advanced DMEM, 50 milliliters של fetal bovine serum, חמישה milliliters של 100 X pen strep וחמישה milliliters של 200 millimolar L glut max. יש להחליף את מדיום הגידול כל יומיים עד שלושה ימים למשך כשבועיים, עד להגעה של התאים למצב של confluent.לאחר הגעה למצב של התמסגות (confluent), קצרו ופצלו את התאים עד למעבר תשעה. השתמשו בטריפסין עד שיהיה מספר תאים מספיק עבור הניסוי המתוכנן. נדרשים כ-1.5 מיליון תאים עבור כל מבנה.כאשר גודל מספר מספיק של תאים, קצרו אותם ב-90% confluence ולאחר מכן השעו את התאים במצע גידול בריכוז של 15 מיליון תאים למיליליטר. הניחו אותם על קרח עד למועד השימוש. הכינו דבק סיליקון על ידי ערבוב האלסטומר וחומר המקשה ביחס של 10 ל-1.השתמשו בדבק זה כדי להצמיד רצועות של 7 מילימטר על 3 מילימטר, שנגזרו מהצד הרך של סרטון ולקרו (Velcro), לממברנה הגמישה של פלטות flex cell. כדי ליצור צורה של צלב עם מרכז פתוח, ייבשו את דבק הסיליקון למשך לילה בתנור בטמפרטורה של 60 °C כדי להבטיח את הקשחת הדבק. לאחר מכן, סטריליזציה של הפלטה על ידי הוספת 5 mL של 70% ethanol לכל באר ודגירה למשך 30 דקות בטמפרטורת החדר.שטפו את הבארים שלוש פעמים ב-PBS סטרילי. לאחר מכן, הסירו את ה-PBS מהבארים ומסרטי הוולקרו (Velcro). הניחו את הפלטה ללא כיסוי תחת מנורת ה-UV של מapay תרביות רקמה למשך 30 דקות כדי לעקר את השטחים.עם סיום הפעולה, כסו את הצלחת ושמרו אותה סטרילית עד לשימוש. לאחר מכן, הכינו מצע להנדסת רקמות על ידי הוספה של 130 מיליגרם של allic acid, שני פוספט ל-500 מיליליטר של מצע גידול במהלך שבעת ימי התרבית הראשונים. כמו כן, הוסיפו epsilon aminocaproic acid בריכוז של מיליגרם אחד למיליליטר כדי למנוע את פירוק הפיברין, והמיסו fibrinogen עד לריכוז של 10 מיליגרם חלבון בפועל למיליליטר של מצע להנדסת רקמות המועשר ב-aminocaproic acid על ידי ערבוב עדין.לאחר מכן, סננו את תמיסת הפיברינוגן באמצעות מסנן מזרק של 0.22 מיקרון ואחסנו אותה על קרח עד לשימוש. לאחר מכן, הכינו את תמיסת התרומבין על ידי דילול של תרומבין מהמלאי לריכוז סופי של 10 יחידות בינלאומיות למיליליטר בתוך מדיום להנדסת רקמות המועשר בחומצה אמינוקפרואית, ואחסנו אותה על קרח עד לשימוש.בשלב הבא, העבירו 100 µL של תרחיף התאים שהוכן קודם לכן לתוך מבחנה למיקרו-צנטריפוגה עבור כל מבנה רקמה שייווצר. צנטריפוגו את התאים ב-350 ×g למשך שבע דקות, לאחר מכן השליכו את הנוזל העליון (supernatant), השעיקו מחדש את התאים ב-50 µL של תמיסות thrombin והוסיפו 4 µL של מיקרו-ספירות פוליסטירן עם פלואורסצנציה כחולה שישמשו כסמני ייחוס פנימיים. לאחר מכן, שאבו 50 µL של תמיסת fibrinogen לתוך טיפ של פיפטה.העלו את נפח הפ pipette ל-100 microliters ולאחר מכן העבירו 50 microliters מהתמיס של הפיברינוגן למבחנת הצנטריפוגה. באמצעות תערובת התרומבין והתאים, ערבבו בעדינות את התרומבין והפיברינוגן יחד על ידי שאיבה של תערובת ה-100 microliter כדי למנוע היווצרות בועות. ברגע שהתמיס מעורבב היטב, העבירו את תערובת הג'ל לתוך ובתוך פסי הסקוטץ' במהירות, שכן זמן הג'לטיזציה הטיפוסי עבור ג'לי פיברין לאחר הערבוב הוא בסדר גודל של 20 שניות. דגרו את המבנים למשך 30 דקות בטמפרטורה של 37 degrees Celsius באינקובטור לח עם 5% carbon dioxide כדי לאפשר להם להתגבש.לאחר מכן, הוסיפו שש milliliters של מצע להנדסת רקמות עם aminocaproic acid לכל באר, והחזירו את הפלטה לאינקובטור. החליפו את המצע כל יומיים עד שלושה ימים במהלך שבעת הימים הראשונים. לאחר שבוע, הסירו את תוסף ה-aminocaproic acid מהמצע והמשיכו לגדל את הג'לים עם מצע להנדסת רקמות.תוך המשך החלפה של המצע כל יומיים עד שלושה במהלך חמשת הימים הראשונים בתרבית, אפשרו למבנים להתדחס ולהתארגן מחדש תחת מאמץ סטטי ליצירת סיבי קולגן, באופן דו-צירים בשל מגבלות הסיבים, כדי להשרות ארגון מחדש של הקולגן בכיוון אחד תחת תנאים סטטיים. ראשית, תרבתו את התאים למשך שבוע נוסף; ביום 12, חתכו את מבנה הרקמה משתי רצועות סקוץ' (Velcro) בכיוון אחד. פעולה זו תגרום למאמץ בכיוון ההפוך בעוד שהפיברין מתדחס.לחלופין, עבור העמסה מחזורית, הניחו את הפלטות על גבי סט של עמודי העמסה בתוך פלטת בסיס של תא גמיש (flex cell), המצוידת באטם, ביום השישי; עמודי ההעמסה יתמכו בממברנה הגמישה של הבארים ויאפשרו למשוך את בסיס העמודים כלפי מטה כדי ליצור מאמץ בכיוון אחד. לאחר מכן, הגדירו את הפרוטוקול בתוכנה כדי להפעיל מאמץ מחזורי על המבנה. התוכנית המוצגת כאן היא עבור מאמץ לסירוגין הדמה גל סינוס, המפעילה מאמץ על המבנה מאפס ועד 5% strain בתדר של 1 Hz למשך תקופות של שלוש שעות, לסירוגין עם שלוש שעות של מנוחה.לאחר הכנת התוכנית, הפעילו את משאבת הוואקום והתחילו בביצוע התוכנית. הבקר יסדיר את עוצמת הוואקום במערכת, אשר תמשוך את הממברנות סביב עמודי התמיכה כדי להפעיל מאמץ מחזורי על המבנים בהתאם לתוכנית. הפעילו את התוכנית למשך שבוע אחד, תוך הקפדה על החלפת המצע מדי יומיים עד שלושה ימים; לאחר שבוע של התניה, גרמו לארגון מחדש של הקולגן על ידי סיבוב העמוד המלבני ב-90 מעלות כדי לשנות את כיוון המאמץ למשך שלושה ימים.כדי להמחיש עיצוב מחדש (remodeling) של קולגן בזמן אמת, הוסיפו cell tracker orange. הוסיפו ריכוז של 4 µM כדי לצבוע את הציטופלזמה, ו-CNA 35 OG 4 88. הוסיפו ריכוז של 1 µM כדי להמחיש את סיבי הקולגן.גששים אלו לא יפריעו לחיוניות התאים או להיווצרות קולגן. לאחר מכן, דגרו את התאים למשך שעה אחת באינקובטור בטמפרטורה של 37 °C. לאחר הדגירה, הוציאו את פלטת התרבית מהאינקובטור והעבירו אותה למיקרוסקופ סריקה קונפוקאלי בלייזר כדי להדמות את התאים ואת הקולגן.צלם את הג'לים מהפנימיות ועד לעומק של כ-60 מיקרון בתוך הפיגום, כדי לבחון את השינויים בארגון ברמות אלו לאורך זמן. לאחר מכן, החזר את הפלטה למערכת העיבוד המכני בתוך האינקובטור. חזור על הליך זה מדי כמה ימים כדי לעקוב אחר התקדמות הארגון המחדש של התאים בתגובה לגירויים.המיקרוספירות הפלואורסצנטיות שהתוספו לתערובת הפיברינוגן לפני הפולימריזציה נלכדות ברשת הפיברין ומשמשות כסימני ייחוס יעילים להבטחת ויזואליזציה של אותו אזור בנקודות זמן שונות כאשר הן מתגדלות בתנאים סטטיים ומחוברות לכל ארבעת העמודים. לא ניתן לראות אוריינטציה סיבית או תאית ממשית שלושה ימים לאחר קיצוץ של שניים מהחיבורים של עמודי הסיבים. המאמץ החד-צירים שנגרם מהתכווצות גרם ליישור של סיבי הקולגן המוצגים בירוק.תאי וריד ספנוס אנושיים שהוכפפו למתיחה מחזורית בכיוון אחד למשך שבוע מוצגים כאן על פני השטח של המבנה ובעומק של 60 microns בתוך הג'ל. כאשר כיוון המתיחה סובב ב-90 מעלות, נמצא כי התגובה התאית לאחר שלושה ימים הייתה מהירה יותר על פני השטח מאשר בליב הרקמה. לאחר רכישת המיומנות ההנדסית, ניתן להכין מבני רקמה מבוססי FI אלו בתוך כשעתיים.

engineering-fibrin-based-tissue-constructs-from-myofibroblasts

Research

JoVE Journal

Bioengineering

הנדסה ביולוגית

הנה, אנחנו מדגימים ייצור של קולגן מבוסס, רקמה בונה המכיל myoblasts השלד. 3-D אלה בונה מהונדסים עשויים לשמש כדי להחליף או לתקן...

המצאה של Myogenic בונה רקמות מהונדסות

אנו מתארים את הבידוד של cardiomyocytes בילוד והכנת התאים אנקפסולציה ב בונה הפיברין הידרוג'ל של הנדסת רקמות. אנו מתארים שיטות לניתוח רקמות מהונדסות שריר הלב לאחר תקופת התרבות כולל כוח פעיל שנוצר על גירוי חשמלי ואת הכדאיות התא מכתים immunohistological.

Encapsulation של cardiomyocytes ב Hydrogel הפיברין עבור הנדסת רקמות לב

פרוטוקול זה מתמקד ניצול היכולת הטמונה בתאי גזע כדי לקחת את המקל מ מטריקס הסובבת אותם תאי ו להיגרם להתמיין פנוטיפים רבים. זה כתב היד שיטות משתרע תיאור שלנו ואפיון של המודל ניצול הידרוג bilayered, המורכבת PEG-הפיברין וכן קולגן, בו זמנית לשתף להבדיל השומן שמקורם בתאי...

הנדסת Hydrogel Bilayered לשלוט בידול ASC

מיקרוסקופיה וטכניקות לעיבוד תמונה שימשו להתבוננות וניתוח של דחיסת ג'ל בתיווך פיברובלסט וארגון מחדש של סיבי פיברין בביוריאקטור מבוקר לסביבה על פני תקופה של 48 שעות.

התבוננות וכימות דחיסה של ג'ל פיברובלסט בתיווך פיברין

בעבודה זו אנו מציגים טכניקה לייצור מהיר של רקמות כלי דם חיות על ידי תרבית ישירה של קולגן, תאי שריר חלק ותאי אנדותל. בנוסף, מתואר פרוטוקול חדש לאפיון מכני של רקמות כלי דם מהונדסות.

הנדסת ג&#39;ל קולגן Cellularized 3D לשחזור רקמות וכלי דם

אנו מציגים מודל של רקמת ליגמנט שבה מבנים תלת-מימדיים מטופלים בסרום המותאם על-ידי התרגיל האנושי ונותחו עבור תוכן קולגן, פונקציה וביוכימיה סלולרית.

טיפול של רצועות ליגמנט עם תרגיל ממוזג בסרום: רקמות תרגום הנדסה דגם

מטרת הפרוטוקול הזה היא לבצע תרבות משותפת דינמית של מקרופאגים אנושיים ומיופיברובלסטים בפיגומי אלקטרו-ספון צינוריים כדי לחקור התחדשות רקמות מונחית חומרים, באמצעות ביו-ריאה המאפשרת ניתוק של לחץ גיסת ומתיחות מחזוריות.

ביו-ריאקטור רב-שלבי להערכת היכולת הדלקתית וההתחדשותית של ביו-חומרים תחת זרימה ומתיחות

מאמר זה מציג אסטרטגיה לבניית מודלים אלמנט סופי של חומרים מוליכים סיביים החשופים לשדה חשמלי (EF). ניתן להשתמש במודלים כדי להעריך את הקלט החשמלי שהתאים שזורעים בחומרים כאלה מקבלים ולהעריך את ההשפעה של שינוי תכונות החומר המרכיבות את הפיגומים, המבנה או הכיוון שלו.

מידול אלמנט סופי של מיקרו-סביבה חשמלית תאית

מוצג כאן פרוטוקול ליצירת רקמות חיבור מהונדסות לתרבות מקבילה של 48 רקמות בלוח רב-בארות עם מוטות כפולים, המתאימים למחקרים מכאניסטיים, מידול מחלות ויישומי סינון. הפרוטוקול תואם פיברובלסטים מאיברים ומינים שונים ומודגם כאן עם פיברובלסטים לב ראשוניים אנושיים.

פיברובלסט נגזר רקמת חיבור מהונדסת אנושית עבור יישומי הקרנה

הפרוטוקול הבא מציג שיטת שחול מבוססת גזירה לייצור הידרוג'לים של קולגן עם סיבים בדוגמת ננומטר, הניתנת ליישום במגוון רחב של יישומי הנדסת רקמות.

ייצור קולגן בדוגמת ננו-פיברילר להנדסת רקמות

מוצגת שיטה הניתנת לשחזור ליצירת רקמות שריר הלב תלת מימדיות המשלבות כתיבה אלקטרו-ספינינג נמס (MEW), פיגומי פוליקפרולקטון (PCL) והידרוג'לים פיברין עם קרדיומיוציטים ופיברובלסטים שמקורם ב-hiPSC. טכניקה זו מציעה שליטה מדויקת על ארכיטקטורת הפיגומים וניתן ליישם אותה בבדיקות תרופות פרה-קליניות ובמודלים של מחלות לב.

יצירת רקמת שריר הלב האנושית בתלת מימד באמצעות כתיבה אלקטרו-ספינינג נמס של פיגומי פוליקפרולקטון ותאי לב שמקורם ב-hiPSC

חקור הנדסת רקמות מבוססת פיברין עם myofibroblasts ויישום אילוצים ומתח לגרימת ארגון תאים וקולגן בזמן אמת. שיטה זו מאפשרת מעקב אחר שינויים דינמיים בתיקון רקמות ופיברוזיס.

בונה הנדסת רקמות מבוססת הפיברין מmyofibroblasts ויישום של אילוצים ומתח כדי לגרום לתא וקולגן ארגון (בעניין)

גלה סרטונים נוספים